O uso de biotecnolgias j vem de milhares de anos.As primeiras tcnicas usadas
em casos fermentativos remontam civilizaes muito antigas e era usada na fermentao de cereais.Os primeiros relatos de processos fermentativos pelas civilizaes antigas referemse ! fermentao de cereais em gros para fabricao de bebidas alcolicas pelos povos sumrios e babil"nios h cerca de #$$$ a. %.Outras informaes e&istentes podem ser encontradas na 'liblia (agrada no livro de )enesis onde o vinho era produzido *alm do fermento para a fabricao de po +ue os ,g-pcios usavam a ./$$$ a. %.0. (Lopes,2002) As modificaes microbianas esta coligado com a produo de vinagre h cerca de /$$$ a. %.* mas foi no ano de 123#* depois de ter sido inventado microscpio* +ue 4ouis 5asteur pode provar +ue a fermentao era feita por microrganismos* e +ue era um tipo caracter-stico de microrganismos +ue realizava esse processo. (KARP, 2005) 6oi no ano de 1278 +ue ,duard '9chner e&p"s +ue os e&tratos celulares isolados de clulas de leveduras +ue promoviam a fermentao alcolica*definindo +ue o agente responsvel pelas reao no era o* processo celular comple&o do microrganismo* mas algo sol:vel* ento chamada de ;zimase<* iniciando nesse momento as biotransformaes com e&tratos celulares. (KARP, 2005) =a > )uerra ?undial houve uma fabricao de produtos resultantes de processo fermentativo como* o caso da a+uisio de um numero grande de glicerol para a produo de e&plosivos e ainda o processo A', .acetona* butanol e etanol0 +ue foi desenvolvido pelo +u-mico %haims @eizmann. A tecnologia permitia a fabricao de um volume grande de acetona* para produo de munio* gerada pela bactria Clostridium acetobutylicum* e produzia butanol e etanol como subprodutos. A a+uisio de butanol por fermentao foi usada por muitos pa-ses at os anos 3$* data em +ue a tecnologia baseadas no petrleo sobrepujaram !+ueles de fermentao por microrganismos. A nos anos B$*comearam a produo de antibiticos* neste caso a penicilina comearo a ser fabricados por meios fermentativos.,sse antibitico a penicilina produzida a partir de um fungo Penicillium notatum um cone da histria e um dos acontecimentos mais importantes do sculo /$ e isso foi realizado por um bilogo e farmaclogo (ir Ale&ander 6leming.Aps esse evento* outros antibiticos puderam ser fabricados atravs da tecnologia fermentativa usando diferentes linhagens de bactrias e fungos* e at os dias atuais* as principais ferramentas industriais para produo de antibiticos envolvem processos fermentativos* sendo +ue as etapas sintticas so realizadas somente para pe+uenas modificaes estruturais do produto de origem natural (!"#$A200%) A nos anos 3$ um grande marco revolucionrio* a descoberta da estrutura tridimensional do C=A por @atson e %ricD em 173E* houve o desenvolvimento de in:meras ferramentas para manipulao gentica +ue estabeleceram a base para a tecnologia do C=A recombinante. A partir da dcada de 8$* as tcnicas de engenharia gentica tornaram poss-vel a obteno de organismos e prote-nas recombinantes* de modo a produzir substFncias ou catalisar reaes para as +uais a+ueles no se encontravam naturalmente programados. ,stas tcnicas ganharam aplicao em vrios processos industriais* sendo um dos pioneiros a fabricao da insulina recombinante(RAPAP"RT,&''0) Atributos de C=A* transmitidas geneticamente e +ue servem como base para diferenciar um ou mais indiv-duos* so chamados de marcadores moleculares. Os marcadores moleculares*estimularam o desenvolvimento de tecnologias +ue podem mostrar variabilidades em n-vel gen"mico de uma forma rpida* simples e eficaz. O aperfeioamento das tcnicas de deteco de polimorfismos no C=A comeou a ser e&plorado aps o aparecimento de outras duas outras grandes tecnologias* +ue se pode citar o C=A recombinante e a amplificao da molcula de C=A por 5%G .5olimerase %hain Geaction0* e as duas ajudaram a tornar o uso de marcadores moleculares potencialmente ilimitado. ((R)**)T+!,200,) Cas modificaes das tcnicas de anlise de polimorfismos no C=A* as mais usadas* seja pela confiaa como pelo custo e menor tempo* estoH (ingle =ucleotide 5olImorphism .(=50* (ingle (trand %onformation 5olImorphism .((%50* Amplified 6ragment 4ength 5olImorphism .A6450* Gandom Amplified 5olImorphic C=A .GA5C0* (e+uence%haracterized Amplified Gegions .(%AG0* Gestriction 6ragment 4ength 5olImorphism C=A .G6450* C=A (atlite* ?inissatlites ou Jariable =umber of Kandem Gepeats .J=KG0* ?icrossatlites ou short tandem repeats .(KGs0* %ombinao entre (=5s e (KGsLmicrossatlites .(=5(KG0* (hort >nsterspersed ,lements .(>=,s0 e Maplides nos ?icrossatlites .MA5(G0. A importFncia de varios estudos desenvolvidos com relao a esses marcadores* +ue e&iste varios bancos de dados espec-ficos para distintos marcadores. ,stando dispon-vel essas ferramentas aumenta e facilita grandemente o processo de pes+uisas em muitos pa-ses. ((R)**)T+!,200,) Narl 4andsteiner* >munologista e patologista austr-aco no ano de 17$$ descobriu o sistema A'O e +ue pode ser considerado o grupo sangu-neo mais importante. A importFncia esta em +ue os ant-genos A'O no est somente no grupo das hemcias* mas encontrado em todas as clulas do corpo. (egundo a literatura esse pode ter sido o primeiro marcador sorolgico +ue foi usado em pericias criminal (RAPAP"RT,&''0) ?as percebeuse +ue esse sistema .A'O0 necessitava de uma associao com outros grupos comoH?= e ?4A isso era necessrio pelo fato de e&istir uma pe+uena variabilidade resultado de apenas trOs alelos (Lopes,2002).O e&ame de amostras biolgicas como provas forenses do inicio do sec. PP* +ue utilizouse os grupos sangu-neos A'O*s +ue como citado apresentava uma variabilidade muito limitada*ou seja apenas +uatro grupo de indiv-duos*sendo os grupos sangu-neos A*'*A' e O +ue era acompanhado pelo uso do comple&o M4A .Muman 4eucocvte AntigenAntigenos 4eucocitarios Mumanos0 +ue consistia em um grupo de genes +ue codifica as molculas de histocompatilidade do sistema ?M% .Major Histocompatibility Complex Q %omple&o de Mistocompatibilidade Mumana0 (KARP, 2005) Os genes citados so encontrados na+uilo +ue chamado de brao curto do cromossomo # e esta agrupado em E subregies +ue soHM4A classe > .A*' e %0*M4A classe >> .CG*CR e C5 0 e M4A classe >>>.,sse genes do M4A gene mais polimrfico dos mam-feros.Os M4A com seu comple&o de prote-nas variveis esto no centro do sistema imunolgico.,les podem ser bastante discriminatrios*mas tem um custo operacional muito elevado(AL-.!,2005) O surgimento da gentica forense se deu por causa da diferena gentica normal nos seres vivos e poderia ser usada como prova nos mais diversos casos criminais. %om a evoluo continua juntamente com o surgimento da gentica bio+u-mica pelos anos de 17#$ *p"deQse estudar a variao molecular humana atravs das mais variadas prote-nas do sangue*ou seja*muitos polimorfismos permitem +ue estes marcadores sorolgicos e prote-nas seja usados para decifrar casos de parentescos ((R)**)T+!,200,) O auge da gentica forense data o ano de 172$*no caso de paternidade*tendo em vista como sendo o melhor mtodo de identificao biolgica*estudos +ue cresceram aps 12#7 +uando Aohann.6.?iescher fez o primeiro isolamento do C=A(K"/+,200%0. Ruando no ano de mil novecentos e cin+9enta e trOs* Aames CeSeI @atson e 6rancis %ricD mostraram a constituio estrutural da molecula de C=A formada por dupla helice *a histria na +uesto genetica deu um grande salto em direo a varias soluoes relacionadas ao funcionamento da comple&a ma+uina animal e uma enorme perspectiva com relao a saude. Aa em mil novecentos e setenta e trOs*houve um outro avanco com uma nova tecnologia *+ue foi a do C=A reconbinante ja mencionado anteriormente*onde p"de se fazer um detalhado estudo dos genes atraves da distribuio do comple&o gen"mico. (!"#$A200%) Ainda com um continuo avano da tecnologia no ano de 1788 houve o isolamento do primeiro gene humano*+ue foi o gene da insulina tambm ja mencionado* +ue com isso houve outras descobertas de genes +ue estavam relacionados com outros tipos de doOnas +ue tem relao com a identidade humana (AL-.!,2005) Os meios usados para se descobrir a variabilidade do C=A so as chamadas enzimas de restrio e tambm as sondas de C=A. Os chamados polimorfismos de restrio .G645Ts0 consentiram avaliar uma alterao do C=A de diferentes individuos.?as esse processo*ou seja o polimorfismo de um unico nucleotideo .(=50 s admite aprear a variao do C=A individualmente o +ue se torna muito dificil e muito caro.5or essa razo no ano de 172$*teve inicio o processo de estudos de locais do C=A chamados de regies hipervariaveis*sendo a razo o fato de serem marcadores gentico com maiores informaes ((R)**)T+!,200,) . Cescobriramse regies constitu-das por vrios pares de bases* repetidas in:meras vezes* com alelos variando +uanto ao n:mero de se+uOncias* denominados minissatlites .J=KG0. >nicialmente* os J=KGUs foram utilizados como marcadores genticos informativos* pois estes so compostos por 1$$ ou mais alelos com diferentes comprimentos na populao humana. ((R)**)T+!,200,) Outros marcadores altamente polimrficos foram encontrados no genoma humano* os ?icrossatlites .(KG0. Os (KGUs so repeties curtas de 1 a 3 pares de bases encontrados em eucariotos. Kais repeties so encontradas tanto em regies codificantes +uanto no codificantes ((R)**)T+!,200,) ,m 172E* NarI ?ullis e colaboradores desenvolveram a tcnica de 5%G .Polymerase Chain Reaction Q Geao em %adeia de 5olimerase0 permitindo +ue pe+uenas +uantidades de C=A fossem amplificadas* de maneira +ue fragmentos muito curtos de C=A* como no caso dos microssatlites* pudessem ser utilizados. ("L)-.)RA,200') =o ano de 172B* nasceu a impresso digital do C=A depois de um e&perimento chave entre amostras de uma fam-lia*pai*me e filho e ainda alguns animais e plantas sendoHum babu-no* uma foca* uma vaca* um rato e uma planta de tabaco. =o e&perimento foi feito comparaes entre as amostras e encontrouse fragmentos altamente variveis de C=A. Analisaram +ue pai e me eram diferentes*mas* o filho parecia ser a unio de padres de C=A dos pais.,ssa forma funcionou em outras espcies tambm(RAPAP"RT,&''0) Co e&perimento obtevese mtodo de C=A .uso de minissatlites0 +ue capaz de particularizar e constituir relaes familiares. =o ano seguinte .17230* obtevese o relato do primeiro caso de uso do perfil de C=A para resolver um problema de imigrao com o uso da tcnica de (outhern blot para produzir o perfil de hibridao em minissatlites* em uma fam-lia inglesa originada do pais de )ana.O filho ao visitar )ana e retornar para 4ondres com passaporte adulterado foi interrogado sobre a relao familiar.Aps varios e&ames de tipagem sanguinea feita na fam-lia com marcadores sorolgicos emprego do sistema M4A*os resultados foram duvidosos. 6oi ento feito teste da impresso digital do C=A e desvendado +ue o menino era da fam-lia e +ue tinha o mesmo pai das outras crianas.O ministrio publico ar+uivou o processo cedeu residOncia ao menino no pa-s* ficando o menino com a fam-lia. (KARP, 2005) =o decorrer dos anos* se discutiu muito sobre cada aspecto do perfil de C=A* estabelecendose a necessidade de processos +ue visem ! manuteno da +ualidade e a garantia do processo para a confiabilidade da evidOncia forense nos tribunais em todo o mundo ("L)-.)RA,200') Os testes de paternidade usando o C=A* ou testes de J-nculo )entico* viraram rotina nos laboratrios isso pela certeza dada pelo resultado onde o e&ame e&clui a suposta paternidade e resultado acima de 77*777V* nos casos de incluso de paternidade. O campo da gentica no caso da biologia vem sofrendo transformaes tecnolgicas e conceituais e os assuntos relacionados ! )entica ?olecular esta muito presente na vida das pessoas. ,m nossa sociedade* os testes de paternidade so muito anunciados pelos meios de comunicaoW porm* embora presente no cotidiano das pessoas* a +uesto do ensino da )entica ainda encontra algumas barreiras*como o ensino limitado por inade+uao nos materiais didtico usados ou a falta deles* a desatualizao de educadores para a instruo e ainda com a necessidade da criao de cursos onde se possa haver aprimoramento profissional dos envolvidos com a +uesto.(/AMP"!,20&0) Referencias: AX,J,CO* >lmara 4ima de. A aplicao da bioloia !orense na percia criminal. Cispon-vel YhttpHLLSSS.segurancacidada.org.brLinde&.phpZ option[com\docman]tasD[cat\vieS]gid[#3]limit[1$]order[name]dir[A(%]>temi d[/7E^ Acesso em /2 de abr. de /$1/. A4J,(* %.W (O_XA* et al" >mportFncia do sistema de histocompatibilidade humano .M4A0 em 5ediatria. Pediatria* v./8* n.B* p./8B2#* /$$3 %A?5O(*5.N.%Wet al W ,&ames de paternidade pelo dnaH uma metodologia para ensino da gentica molecular*/$1$ )G>66>KM(* A. A. 6. et al" >ntroduo ! gentica. 2 ed. Gio de AaneiroH )uanabara Noogan* /$$# NO%M* A.W A=CGAC,* 6.?. A utilizao de tcnicas de biologia molecular na gentica forenseH uma reviso. Khe use of molecular biologI techni+ues in forensic geneticsH a revieS. R#AC* v.B$* n.1* p.18/E* /$$2. 4O5,(* Gicardo. ?arcadores ?oleculares Cominantes .GA5C e A645)* /$$/ O4>J,>GAW)*4W?A=KOJA=>*?.( HKransformaes biolgicasH contribuies e perspectivas*/$$7 GA5A5OGK* (.>. $ntroduo % Hematoloia" / ed.* GO%A* (o 5aulo* 177$. KMO?5(O=* ?.@.W ?%>==,(*G.G.W @>44AGC*M.6. )entica mdica. 3 ed. Gio de AaneiroH )uanabara Noogan (.A. * 177E. NAG5* ). 'iologia %elular e ?olecularH conceitos e e&perimentos E` ed. ,d. ?anole. 'arueri (5. /$$3. (O_XA*A.W%WR_,>GOX*GW5* aplicaes dos marcadores moleculares baseados em C=A =as +uestes de identificao humana =o Fmbito c-vel e forense /$$2. httpHLLSSS.ib.usp.brLevolucaoLRK4Lmarcadores.html httpHLLSSS.drashirleIdecampos.com.brLnoticiasL1/37