Guia Nacional de Coleta e Preservacao de Amostras

GUIA NACIONAL DE COLETA
E PRESERVAO DE AMOSTRAS
GUA, SEDIMENTO, COMUNIDADES AQUTICAS
E EFLUENTES LQUIDOS
INTRODUO
Repblica Federativa do Brasil

Dilma Vana Rousseff
Presidenta
Ministrio do Meio Ambiente
Izabella Mnica Vieira Teixeira
Ministra
Agncia Nacional de guas
Diretoria Colegiada
Vicente Andreu Guillo (Diretor-Presidente)
Dalvino Troccoli Frana
Paulo Lopes Varella Neto
Joo Gilberto Lotufo Conejo
Paulo Rodrigues Vieira
Secretaria-Geral (SGE)
Mayui Vieira Guimares Scafuto
Superintendncia de Gesto da Rede

Hidrometeorolgica (SGH)
Valdemar Santos Guimares
Superintendncia de Gesto da
Informao (SGI)
Srgio Augusto Barbosa
Superintendncia de Apoio Gesto de
Recursos Hdricos (SAG )
Rodrigo Flecha Ferreira Alves
Procuradoria-Geral (PGE)
Emiliano Ribeiro de Souza
Corregedoria (COR)
Elmar Luis Kichel
Superintendncia de Implementao de
Programas e Projetos (SIP)
Ricardo Medeiros de Andrade
Auditoria Interna (AUD )

Edmar da Costa Barros
Superintendncia de Regulao (SRE)

Francisco Lopes Viana

Horcio da Silva Figueiredo Junior
Superintendncia de Usos Mltiplos e Eventos

Crticos (SUM)
Joaquim Guedes Correa Gondim Filho
Coordenao de Articulao e
Comunicao (CAC )
Antnio Flix Domingues
Superintendncia de Fiscalizao (SFI)

Flavia Gomes de Barros
Coordenao de Gesto Estratgica (CGE)

Bruno Pagnoccheschi
Superintendncia de Administrao, Finanas

e Gesto de Pessoas (SAF)
Lus Andr Muniz
Superintendncia de Planejamento de Recursos

Hdricos (SPR)
Ney Maranho
Governo do Estado de So Paulo
Geraldo Alckmin
Governador
Secretaria do Meio Ambiente
Bruno Covas
Secretrio
Companhia Ambiental do Estado de So Paulo
Diretor-Presidente
Otavio Okano
Diretor Vice-Presidente
Nelson Roberto Bugalho
Diretor de Gesto Corporativa
Srgio Meirelles Carvalho
Diretor de Controle e
Licenciamento Ambiental
Geraldo do Amaral Filho
Diretor de Engenharia e
Qualidade Ambiental
Carlos Roberto dos Santos
Diretora de Avaliao e Impacto Ambiental
Ana Cristina Pasini da Costa
GUIA NACIONAL DE COLETA E PRESERVAO DE AMOSTRAS
Companhia Ambiental do
Estado de So Paulo
Secretaria de Meio Ambiente
Governo do Estado de So Paulo
Agncia Nacional de guas

Ministrio do Meio Ambiente
GUIA NACIONAL DE COLETA

E PRESERVAO DE AMOSTRAS
GUA, SEDIMENTO, COMUNIDADES AQUTICAS
E EFLUENTES LQUIDOS
Braslia-DF
2011
INTRODUO
Agncia Nacional de guas ANA, 2011

Setor Policial Sul, Area 5, Quadra 3,
Blocos B, L, M e T.
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www.ana.gov.br
Companhia Ambiental do Estado de So

Paulo CETESB, 2011
Av. Professor Frederico Hermann Jnior,
345, trreo, Alto de Pinheiros
!8[][~3~88!{!
www.cetesb.sp.gov.br
Equipe editorial
Superviso de edio:
Programas e Projetos - SIP/ANA.
Banco Interamericano de
Desenvolvimento - BID.
Paulo - CETESB.
Elaborao dos originais:
Paulo - CETESB.
Reviso dos originais:
Paulo - CETESB.
Programas e Projetos - SIP/ANA.
Produo:

Eduardo Meneses
! "
Banco de imagens da CETESB.
Tiragem:
2.000 exemplares
Todos os direitos reservados.
E permitida a reproduo de dados e de
informaes contidos nesta
publicao, desde que citada a fonte.
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C737g
Companhia Ambiental do Estado de So Paulo.
Guia nacional de coleta e preservao de amostras: gua, sedimento, comunidades aquticas

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&567899
326 p.: il.
ISBN
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7 =$6
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@Q

I. Brando, Carlos Jesus, org. II. Botelho, Marcia Janete Coelho, org. III. Sato, Maria Ins Zanoli, org.
IV. Lamparelli, Marta Cond, org. V. Ttulo
UWX7Y[[\8]?X^9YX8[^Y
COMPANHIA AMBIENTAL DO ESTADO DE SO PAULO CETESB
Organizadores
Carlos Jesus Brando
Mrcia Janete Coelho Botelho*
Maria Ins Zanoli Sato
Marta Cond Lamparelli
Autores
Adriana Castilho R. de Deus
Setor de Comunidades Aquticas
Cacilda J. Aiba*,
Diviso de Anlises Fsico-Qumicas
Carlos Jesus Brando
Setor de Amostragem
Carlos Ferreira Lopes
Setor de Atendimento a Emergncia
Carlos Roberto Fanchini
Agncia Ambiental de Jundiai
Dborah Arnsdorff Roubicek
Setor de Toxicologia Humana
e Sade Ambiental
Elayse Maria Hachich
Setor de Microbiologia e Parasitologia
Francisco J. Ferreira
Setor de Qumica Inorgnica
Gilson Alves Quinglia
Setor de Anlises Toxicolgicas
Helena Mitiko Watanabe
Joo Carlos Carvalho Milanelli
Agncia Ambiental de Ubatuba
Jos Eduardo Bevilacqua
Diretoria de Avaliao de
Impacto Ambiental
Jlio Csar Swartel Rodrigues
Setor de Avaliao de Sistema
de Saneamento
Luis Altivo Carvalho Alvim
Setor de Hidrologia e
Interpretao de Dados
Mara Elisa Pereira Salvador*

Mrcia Janete Coelho Botelho *
Maria do Carmo Carvalho
Maria Ins Zanoli Sato
Departamento de Anlises Ambientais
Marta Cond Lamparelli
Diviso de Anlises Hidrobiolgica
Mnica Luisa Kuhlmann
Neusa Akemi N. Beserra
Setor de Qumica Orgnica
Paulo Fernando Rodrigues
Setor de guas Subterrneas e Solo
Paulo Srgio Gonalves Rocha
Setor de Amostragem
Regis Nieto
Setor de Avaliao de Sistema
de Saneamento
Ricardo Minon Filho*
Setor de Amostragem
Rita Cerqueira Ribeiro de Souza*
Rogrio Visquetti de Santana
Setor de Amostragem
Rosalina Pereira de A. Arajo
Setor de Ecotoxicologia Aqutica
Valria Aparecida Prsperi
Setor de Ecotoxicologia Aqutica
Venicio Pedro Ribeiro
Setor de Amostragem
Vivian Baltazar
Setor de Amostragem
Colaboradores
Cesar Augusto Martins Roda*
Setor de Amostragem
Fernando de Caires
Setor de Amostragem
Geraldo G. J. Eysink*
Guiomar Johnscher Fornasaro
Marcelo Adriano de Oliveira
Setor de Amostragem
Meron Petro Zajac
Diretoria de Avaliao de
Impacto Ambiental
Nancy de Castro Stoppe*

Setor de Microbiologia e Parasitologia
Osvaldo Atanagildo da Silva
Setor de Amostragem
Renato Pizzi Rossetti
Setor de Hidrologia e
Interpretao de Dados
*ex-funcionrios da CETESB e
suas reas de origem
AGNCIA NACIONAL DE GUAS - ANA

Colaborao Tcnica
Adriana de Araujo Maximiano
Ana Paula Montenegro Generino
Doralice Meloni Assirati
Maria Cristina de S Oliveira Matos Brito
Paulo Augusto Cunha Libnio
BANCO INTERAMERICANO DE DESENVOLVIMENTO - BID

Apoio
Fernanda Campello (consultora)

Janaina Borges de Pdua Goulart
Rafael Porfrio Tavares (consultor)
AGRADECIMENTOS
$ 5 =$$

este documento, em especial:
- Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB), que com
conhecimento, experincia e dedicao elaborou e revisou essa obra,
e permitiu a ANA public-la para se tornar um documento tcnico de
referncia nacional em apoio s aes do Programa Nacional de AvaliaQ=$X!5Y"
- ao Banco Interamericano de Desenvolvimento (BID) pelo apoio
implementao do PNQA, por meio da Cooperao Tcnica ATN/OC
99^^^3*"
- aos rgos de meio ambiente e de recursos hdricos e s companhias
de saneamento estaduais e do Distrito Federal que se dedicaram a revisar esta obra e a contribuir com sugestes para seu aperfeioamento
durante a consulta tcnica dirigida realizada pela ANA, em especial a:
4 $&>$X>Y"
4 Amap: Instituto de Meio Ambiente e Ordenamento Territorial do
X>!Y"
4 *&
*=${XY"
4
&=$$
X Y"
4 U
|
&$ $
=$
Distrito Federal (ADASA) e Companhia de Saneamento Ambiental
U
|
X*Y"
4 Esprito Santo: Companhia Esprito Santense de Saneamento (CE5Y"
4 Mato Grosso do Sul: Instituto do Meio Ambiente do Mato Grosso
X>WY"
4 >
&>
=$
Minas Gerais (IGAM) e Companhia de Saneamento de Minas Ge
X#!Y"
4 Paraba: Secretaria de Estado dos Recursos Hdricos, do Meio Am 4 $!
X>4Y"
4 Paran: Instituto Ambiental do Paran (IAP) e Secretaria de Estado de
>

!
X>Y"
4 !&=$$!X !Y"
4 Rio Grande do Norte: Instituto de Desenvolvimento Econmi > XU>Y =$
X 5Y"
4
&
=$
X5Y"
4 Sergipe: Companhia de Saneamento de Sergipe (DESO).
Aos rgos federais envolvidos, direta ou indiretamente, com aes
relacionadas qualidade das guas que contriburam para o aperfeioamento dessa obra:
4 |Q5 X|W5Y"
4 Secretaria Nacional de Saneamento Ambiental (SNSA) do Minist
"
4 Secretaria de Vigilncia em Sade (SVS) do Ministrio da Sade.
A Companhia Ambiental do Estado de So Paulo registra um especial
agradecimento:
4 aos autores da publicao original do Guia de Coleta e PreservaQ
9~^^Q

fundamental para construir o novo texto desse Guia de Coleta: Azor
Camargo Penteado Filho, Ben Hur Luttembarck Batalha, Denise
Navas Pereira, Edmundo Garcia Agudo, Eduardo Bertoletti, Ernesto
Werner Fredricksson, Guiomar Johnscher Fornasaro, Helcias Bernardo de Padua, Helga Bernhard de Souza, Ivan Ronaldo Horcel, Joo
Ruocco Junior, Jos Guilherme Barreto Pires, Jos Leomax dos Santos, Jos Luiz de Guide, Maria Helena Roquetti Humayta, Maria Neuza Alves, Maria Therezinha Martins, Nilson Ney Scatigno, Paulo Tetuia
Hasegawa, Petra Sanchez Sanchez, Renato Amaral, Rosa Helena de
Oliveira Martins Freitas, Sebastio Gaglianone, Sergio Roberto e

>
!
"
4 ANA que, com o apoio do BID, viabilizou a publicao deste Guia.
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Planejamento para a seleo de locais e posies de monitoramento
32
Figura 2. Etapas principais para o planejamento de programas de amostragem
34
Figura 3. Efeito da variabilidade temporal na estimativa quantitativa da concentrao

@
@&XY
Q
"X*Y
Q

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Figura 4
Q

&

{

"

{

@

]9
Figura 5. Variao da qualidade de um corpo dgua considerando a distncia do ponto

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$&XY
$

$"X*Y!Q

$"XY
$
$ ]?
Figura 6. Dimenses do tecido de gaze para a confeco da mecha para coleta
de amostras para anlise de patgenos
64
Figura 7. Mecha empregada na tcnica de Moore: (AY"XB) foto da mecha

de gase com meio de transporte (Carry Blair)
64
Figura 8.

%
$
w~
Figura 9. Balde de ao inox
84
Figura 10.

Q

&XY
"
X*Y
Q

"XY

^]
Figura 11.* &XY* "X*Y
@

"XY*

^[
Figura 12. Esquema de uma Garrafa de van Dorn
86
Figura 13. Garrafa de Niskin
86
Figura 14.>$
&XY
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Figura 15.
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@
&XY
"
(B) Garrafa montada
87
Figura 16.
@U

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"
(B) Garrafa montada 87
Figura 17. Armadilha de Schindler-Patalas
88
Figura 18. &XY

"
X*Y

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Figura 19.

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Figura 20.|

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Figura 21. !$

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$&XY"X*Y

~7
Figura 22. !$

3*
$6
%&XY

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Figura 23. !$

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Figura 24. !$

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Figura 25. !$

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Figura 26.!$
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~^
Figura 27.4
3*

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Figura 28.!$
>
988
Figura 29. U
$$

989
Figura 30.U

987
Figura 31.U
3
987
Figura. 32. Detalhe do delimitador para estimativa da porcentagem de cobertura

98?
Figura 33.U

98?
Figura 34.>$

36

98]
Figura 35. Detalhe do delimitador para estimativa da estrutura espacial de

6
@
98[
Figura 36.>
@

98[
Figura 37. >
98\
Figura 38.

98^
Figura 39.

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XY

"X*Y

$
98~
Figura 40.

6 @
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Q

998
Figura 41.!

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999
Figura 42.

979
Figura 43.

977
Figura 44.

977
Figura 45.

97?
Figura 46.
97]
Figura 47.Q@

97[
Figura 48.

97\
Figura 49.

97\
Figura 50.

97w
Figura 51.U

4@&XY

"
X*Y

$"XY

97w
Figura 52. Rede de arrasto manual: (A) Foto da rede de arrasto manual

Q"X*Y

97^
Figura 53.

Q
97~
Figura 54. Rede de arrasto manual do tipo saco: A) Foto da rede de arrasto

Q"X*Y
97~
Figura 55.4
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"X*Y

9?8
Figura 56!Q&XY

X|&
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X*Y
9?8
Figura 57.!

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9?9
Figura 58 %Q$

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$

$
9?]
Figura 59.
$
&XYUQ

Q"X*YU
Q

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9?w
Figura 60.

$

#U&
XY* "X*Y|

9?w
Figura 61. Procedimento de preservao de amostra: (A) Adio de cido

99

@Q"X*YQ %

@Q
9?w
Figura 62. Coleta de amostra em profundidade com garrafa de van Dorn

|

9?^
Figura 63. |

Q

@
9]8
Figura 64.
Q
4
9]7
Figura 65
$

$ &
XY Q"X*Y

$
9][
Figura 66. Acondicionamento e transporte de amostras para anlises

$

$
Q
9]\
Figura 67.
$

X
Y

$ 9]~
Figura 68. Sistema Porta Filtro para Filtrao de Amostras para Ensaio

a|a

9[[
Figura 69. Sistema Porta Filtro para Filtrao de Amostras para Ensaio

a|a
9[[
Figura 70.* >

9[\
Figura 71.*

9[\
Figura 72. Florao ou Bloom de Cianobactrias no Reservatrio

*${!3!&XY!

Q @$
"
X*YU

$

9[w
Figura 73.Q

9\]
Figura 74.UQ

9\[
Figura 75.

9\[
Figura 76. Seleo de ramos e folhas - Material coletado na bandeja

9\[
Figura 77. $

9\\
Figura 78U

9\\
Figura 79. Paqumetro utilizado para medida do comprimento e dimetro

9\w
Figura 80. >

9\w
Figura 81.

!

@6

&XY
Q

6X*Y

@"XY*$

9\^
Figura 82.

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XY|
@
"
X*Y
|
@

9w8
Figura 83: Coleta de amostras de zooplncton com armadilha

3!XY
"
X*YQ 6XY

6XUYU
do copo coletor, (E) Transferncia da amostra retida no copo coletor para o frasco,
X|Y@$

9w\
Figura 84. Esquema de um sistema de produo e distribuio de gua. Fluxo

&X9Y> "X7Y Q
"
X?Y| Q"X]Y Q"X[Y
Q"
X\Y Q
6
"XwY
@
4"X^Y
@
@"
X~Y
Q
78~
Figura 85. Torneiras localizadas no laboratrio da ETA para controle das etapas

797
Figura 86.

6

79]
Figura 87

6

79]
Figura 88. Coleta de amostras em reservatrio com balde e corda estreis:

XY*
6X*Y*

79\
Figura 89. Vista interna do container de uma Estao Automtica

de Monitoramento: (A) Em primeiro plano o amostrador automtico refrigerado
e, ao fundo, o gabinete onde esto instalados o CLP e os medidores de pH, OD,

@
"X*Y4

7[]
Figura 90. Vista da Estao Automtica de Monitoramento Rasgo, localizada

no rio Tiet em Pirapora do Bom Jesus SP: (A) Vista da estrutura metlica

"X*Y

7[]
Figura 91. $

7[~
Figura 92. Molinete Hidromtrico
262
Figura 93. Minimolinete Hidromtrico
262
Figura 94. Micromolinete Hidromtrico
263
Figura 95. Guincho Hidromtrico
264
Figura 96!

U
U!
7\[
Figura 97!
&XY

!
"
X*Y

$ !

7\~
Figura 98.

$&XY
$"X*Y

7w8
Figura 99. Vertedores de parede delgada: (A) Vertedouro retangular

@%"X*Y

% @%"XY

triangular ou em V e clculo da vazo
270
Figura 100.
%Q @

7w9
Figura 101. Caixa de tranquilizao corte longitudinal
272
Figura 102. Medidor Venturi
272
Figura 103. Bocais e orifcios para medio de vazo
273
Figura 104. Tubo de Pitot
274
Figura 105. Medidor Magntico
275
Figura 106. Rotmetro
276
Figura 107. Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato: (A) Vista em corte
$"X*YU

7ww
Figura 108. Aplicao do Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato
a canalizaes inclinadas
278
Figura 109.>
&XYU

"
X*Y
$
7w~
Figura 110>

7w~
Figura 111.>
> &XY4
%"X*Y4
7^8
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Comparao entre recipientes de vidro (borossilicato) e polietileno,
polipropileno ou outro polmero inerte.
56
Tabela 2.

$
^9
Tabela 3. Principais caractersticas de alguns amostradores de sedimento,

99?
Tabela 4. Q% Q

$
9w7
Tabela 5. Recomendaes para a seleo do equipamento de coleta de

%

9w?
Tabela 6. Caractersticas principais dos estudos passivos e ativos e determinao

9^?
Tabela 7. >$
$ @

9~\
Tabela 8.

%Q4

7?7
Tabela 9. U

@

7\9
ANEXOS
Tabela A1. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios fsico-qumicos

$ 3=$
7~9
Tabela A2. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de compostos

$ {=$
7~[
Tabela A3. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de

cianobactrias e cianotoxina
300
Tabela A4. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios

$
$ {=$
?89
Tabela A5. Armazenamento e preservao de amostras para testes de toxicidade

aguda com bactrias luminescentes
X>
Y{=$ ?8?
mutagenicidade (Salmonella/
Y{=$
?8]

$ 3=$
?8[

aa{=$

?8w

{=$
?8^
Tabela A10.
%

@Q

?8~
Tabela A11.
%

@Q

%
?8~
Tabela A12.
%

@Q

?98
Tabela A13.
%

@Q

?99

XY
?9?
PREFCIO

!6

a qualidade das guas est entre os mais relevantes e emblemticos.
Informaes esparsas ou inexistentes, ausncia de redes de monitoramento adequadas em termos de frequncia, parmetros e repre@

$
diagnstico mais preciso sobre a realidade da condio da qualidade
dos corpos hdricos brasileiros.
# !
$
5 @Q =$ X!5Y
surge da percepo de que a gesto integrada dos recursos hdricos requer sistemtico monitoramento tanto da quantidade quanto da qualidade das guas, para contribuir com os objetivos de uma economia em
base ambientalmente sustentvel e socialmente justa.
O PNQA um Programa de parcerias, que envolve, alm da ANA,
outras instituies relacionadas ao monitoramento de qualidade das
guas, especialmente os rgos estaduais de recursos hdricos e de
meio ambiente, as companhias de saneamento e as concessionrias de
empreendimentos hidreltricos.
O objetivo central do PNQA prover sociedade um conhecimento

$

6

a subsidiar os tomadores de deciso, contribuindo, assim, com a gesto
@

6!5

Q5@ &

$$

=$*
"

Q$

$"

Q$

@ "@
6@$
%
ciedade as informaes de qualidade de gua.
O PNQA est estruturado em quatro componentes: a) Elaborao e
Implementao de uma Rede Nacional de Monitoramento de Qua =$" Y !
%Q !

!
-

6

@Q $"
Y
Q

Q
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=$"Y
@QU@$Q
Q
=$
mbito nacional, disponvel a toda a sociedade em portal na internet.
A proposta desse Guia Nacional de Coleta e Preservao de Amostras
=$66
insere no escopo da componente de Padronizao do PNQA, iniciativa essa concretizada por meio do Acordo de Cooperao Tcnica n
88\7898

5!6

mdio da Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB),
e do apoio do Banco Interamericano de Desenvolvimento (BID) por

Q45#399^^^3*
Com a concluso desse Guia, e a Resoluo ANA n 724, de 3 de ou
78996 U
# W78969~

78996$

Q
a harmonizao dos procedimentos de coleta e preservao de amostras de guas entre os diversos atores que operam no monitoramento
da qualidade dos recursos hdricos brasileiros, facilitando a comparao e anlise conjunta dos dados de monitoramento e o aprimoramen$ $
*

subsdio gesto integrada de recursos hdricos.
VICENTE ANDREU GUILLO
Diretor Presidente
$ 5 =$
PREFCIO
Nos seus 50 anos de atividade, o Banco Interamericano de Desenvolvimento (BID) acumulou experincia valiosa em diversas reas de atuao, tanto no Brasil como nos demais pases da Regio.
O mandato do BID em apoio aos esforos de desenvolvimento dos pases da Amrica Latina e Caribe bastante amplo e sua estratgia se
baseia em dois pilares sobre os quais se constroi o desenvolvimento da
Regio nas prximas dcadas: a reduo da pobreza e da desigualda"

sustentvel. A gesto adequada dos recursos hdricos e a garantia do
acesso gua toda populao so requisitos essenciais para que se
promova o desenvolvimento calcado nesses dois pilares.
5=$6*U

Brasil, no s pelo seu carter pioneiro na implantao de programas
de saneamento ambiental e de programas sociambientais integrados,
como tambm no apoio implantao da legislao vigente na rea do
abastecimento de gua, esgotamento sanitrio, drenagem urbana e
gesto de resduos slidos.
Com respeito gesto dos recursos hdricos, o BID junta-se Agn 5 =$X5Y
Q@
Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas PNQA, que ir
prover a sociedade brasileira do conhecimento sobre a qualidade das
$

$$@
6@

esferas, na elaborao de polticas pblicas.
A publicao do Guia Nacional de Coleta e Preservao de Amostras de

, elaborado
pela CETESB em conjunto com a ANA faz parte desta parceria, que inclui, tambm, a produo de um vdeo que demonstra os procedimentos constantes no Manual e a elaborao do Panorama da Qualidade das

! "#$%&%.
O BID se orgulha em participar de uma iniciativa to relevante para o
Pas no tema de recursos hdricos.
Fernando Carrillo-Flrez
Representante do BID no Brasil
APRESENTAO
O monitoramento e o diagnstico da qualidade ambiental, bem como
Q %Q6@@@
@6
cujos resultados sero utilizados para avaliar as condies de um ambiente e dar subsdios para a tomada de medidas preventivas e corretivas, com base na legislao existente. Nesse sentido, os objetivos do
trabalho, as estratgias de amostragem e os mtodos de anlises a se

$6@

resultados robustos.
A etapa de amostragem crucial nesse processo, pois o material cole@

$
Q
criteriosa dos pontos de amostragem e a escolha de tcnicas adequa

@Q

bilidade e representatividade dos dados gerados.
A CETESB sempre esteve na vanguarda desse tema, atenta importncia dos programas e processos de amostragem dentro de suas ativi6
9~^^ !

@Q
=$6@%6
no s no Estado de So Paulo, mas em todo o pas, sendo ainda hoje
referncia em nvel nacional.
Considerando a necessidade de acompanhar a evoluo analtica, com
Q @%

querem a inovao tambm das tcnicas de coleta e o avano da utilizao de novas variveis biolgicas e toxicolgicas na rea ambiental,
os tcnicos da CETESB sentiram a necessidade de trabalhar em um
@
%

as de meio ambiente, saneamento, sade, recursos hdricos e pblico
interessado a sua experincia e conhecimento adquiridos nesses nos
ltimos 23 anos de atividades.
Nesse processo a CETESB encontrou a parceria da Agncia Nacional

=$
Q Guia Nacional de Coleta de Amostras

' , o
$%

$
66

6
@

variveis, baseados em metodologias padronizadas e de referncia nacional e internacional, mas tambm traduz a gesto do conhecimento
do corpo tcnico da CETESB, adquirido na prtica diria e no processo
de implantao de um Sistema de Qualidade dessas atividades. A edio deste Guia em conjunto com a ANA, torna acessvel a experincia
da CETESB aos rgos pblicos e empresas privadas de todo o pas ,
provendo protocolos consistentes de amostragem de campo.
#

6 9~^^6
trazem os conceitos bsicos necessrios ao planejameno de um programa de amostragem e organizao do trabalho de campo. O captulo
quatro traz os requisitos do controle de qualidade analtica no processo
de amostragem, essencial para a rastreabilidades dos resultados ana #
%
Q
equipamentos requeridos para amostragem. Os captulos seis, sete e

%

$
6$
6
#
nove destaca os procedimentos para os ensaios de campo, bem como
medidores e amostradores automticos, cada vez mais importante nos
programas de monitoramento. O captulo dez aborda os mtodos de
medio de vazo, considerando a importncia da interpretao conjunta dos dados de quantidade (vazo) e qualidade ambiental. O ltimo

%$

Q
O Guia apresenta tambm trs Anexos, o primeiro (Anexo I) traz informaes relativas s frascarias empregadas na coleta e os procedimentos para armazenamento e preservao de amostras, detalhados por
ensaio, o segundo (Anexo II) apresenta um glossrio com as terminologias
mais frequentemente empregadas na rea e o terceiro (Anexo III) traz a
Q5w7]7899
@
referncia nacional para o monitoramento da qualidade das guas.
Apensado a esta obra encontra-se um DVD com vdeos que demonstram os procedimentos de coleta e preservao de amostras de gua
destinadas anlise dos parmetros que compem a Rede Nacional de
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5
@Q=${!5
Q $ 5 =$

para os procedimentos de coleta dentro de seu campo de atuao demonstra a responsabilidade da CETESB na sua misso institucional de
transferncia de tecnologia ambiental, colaborando para o desenvolvi $
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Diretor Presidente da CETESB
SUMRIO
1 INTRODUO
31
2 PLANEJAMENTO DE AMOSTRAGEM
35

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3 ORGANIZAO DOS TRABALHOS DE CAMPO

3.1 Planejamento das Atividades

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3.2.2 Preservao de amostra

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3.3.2 Transporte e Armazenamento
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3.4.2 Acesso aos Pontos de Amostragem
3.4.3 Embarcaes
3.4.4 Manipulao de Reagentes e Solues
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e Resduos Slidos

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3.5.4 Soluo de Acetato de Zinco (Zn (C2H3O2)2) 2M
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3.5.26 Soluo de Amido
3.5.27 Soluo de Lugol (iodo ressublimado e iodeto de potssio - KI)
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3.5.30 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3Y86897[5
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3.5.32 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3Y98
3.5.33 Soluo Transeau
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74
4 CONTROLE DE QUALIDADE NA AMOSTRAGEM
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4.2 Duplicata de Campo
4.3 Temperatura de Transporte e Armazenamento
4.4 Incerteza da Amostragem
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78
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5 EQUIPAMENTOS DE AMOSTRAGEM
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5.2.2 Armadilha de Schindler-Patalas (Trampa)
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5.2.4 Redes de Plncton
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6 AMOSTRAGEM DE GUA BRUTA E SEDIMENTOS

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7 AMOSTRAGEM DE GUAS PARA ABASTECIMENTO PBLICO 209

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8 AMOSTRAGEM DE EFLUENTES LQUIDOS

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8.2.2 Tipos de Amostragem
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8.2.4 Avaliao do Desempenho do STAR
8.2.5 Elaborao de Projeto de STAR
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9 ENSAIOS EM CAMPO
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9.2 Oxignio Dissolvido - Mtodo Eletromtrico
242
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9.7 Temperatura da gua e Ar
248
9.8 Transparncia
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10 MEDIO DE VAZO
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11 BIBLIOGRAFIA
257
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281
ANEXOS

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K)K$K)X`K_`$)$`)KH$}`
HK~`\`$$W)}`
HK~`)K$`\`HH/#@
:*

CAPTULO
1 INTRODUO
A presente publicao rene o conhecimento tcnico para realizao
de coleta e preservao de amostras de guas brutas, tratadas,

6 6 @ %Q6
controle e a caracterizao da qualidade ambiental.
A coleta e preservao de amostras infelizmente ainda so consideradas como atividades simples, que no exigem qualquer critrio ou co
Q 6

6
Q6

66 $
6
$

pacitados para desenvolverem as atividades em campo.
Q
@

$6
dos riscos sade da populao, os danos aos ecossistemas, a toxicidade das substncias qumicas, os processos industriais e as medidas de vazo, somam algumas das informaes bsicas necessrias
para se definirem as tcnicas e as metodologias de coleta que sero
utilizadas, a definio dos locais de amostragem e a seleo de parmetros que sero analisados. Sem isso, qualquer programa para avaliar
a qualidade ambiental pode gerar dados no representativos sobre a
rea de estudo.
Na escolha do local adequado para o programa de amostragem im

$@

me o local (espacial) e o decorrer do tempo (temporal). Para garantir a
homogeneidade e representatividade do local de amostragem proposto, as aes a serem tomadas devem ser cuidadosamente planejadas,
como detalhado na Figura 1.
INTRODUO
31
CONHECER OS OBJETIVOS DO PROGRAMA
LEVANTAR OS DADOS EXISTENTES NA REA DE

INFLUNCIA A SER ESTUDADA E PROCEDER A UM
RECONHECIMENTO DA MESMA
SELECIONAR POSSVEIS LOCAIS DE AMOSTRAGEM,

EXAMINANDO A HOMOGENEIDADE ESPACIAL E TEMPORAL
LOCAL HOMOGNEO
LOCAL NO HOMOGNEO
SELECIONAR LOCAIS
ALTERNATIVOS
NO SE OBTENDO LOCAIS
ALTERNATIVOS, DEFINIR
DIFERENTES PONTOS DE
COLETA NO MESMO LOCAL
VERIFICAR SE O PROGRAMA
ECONOMICAMENTE VIVEL
ELABORAR PLANO DE AMOSTRAGEM
INICIAR O PROGRAMA DE
AMOSTRAGEM E ANLISES
Figura 1. Planejamento para a seleo de locais e posies de monitoramento
32
Portanto, o objetivo da amostragem e dos ensaios no a obteno de

informaes sobre alquotas em si, geralmente constitudas de peque
Q6

%Q

$
amostrado.
Deve-se ter sempre presente que o tempo e os custos envolvidos se
elevam sensivelmente, medida que se exijam informaes mais detalhadas que possam implicar no aumento do nmero de parmetros de
avaliao, nmero de amostras, frequncia de amostragem, ou utilizao de tecnologia mais avanada.
Para evitar que os custos da caracterizao da gua ultrapassem os
benefcios que dela advm, deve-se planejar cuidadosamente todas
as etapas do programa de amostragem conforme mostra a Figura 2.
INTRODUO
33
DEFINIO CLARA
DOS OBJETIVOS
SELEO DOS PARMETROS E LOCAIS

DE AMOSTRAGEM
SELEO DO NMERO DE AMOSTRAS

E TEMPO DE AMOSTRAGEM
SELEO DOS MTODOS ANALTICOS
SELEO DOS EQUIPAMENTOS E MTODOS DE

COLETA E PRESERVAO DE AMOSTRAS
PLANO DE AMOSTRAGEM
REAVALIAO DA METODOLOGIA
E INTERPRETAO DE DADOS
Figura 2. Etapas principais para o planejamento de programas de amostragem.
$
%
4*

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amostras, apresentando critrios e metodologias internacionalmente

3 6
$ 6$
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includas, pois permitem a determinao das cargas poluidoras e, por
isso, representam uma importante contribuio para o planejamento e
execuo da amostragem ambiental.
34
CAPTULO
2 PLANEJAMENTO DE AMOSTRAGEM
A caracterizao de um ecossistema aqutico uma tarefa complexa e
envolve grande nmero de variveis, o que pode conduzir elaborao
de programas de amostragem com extenso e recursos super dimensionados e uma relao custo/beneficio inadequada.
Estabelecer um plano de amostragem apenas uma das etapas necessrias caracterizao do meio a ser estudado, mas dele dependem
todas as etapas subsequentes: ensaios laboratoriais, interpretao de
dados, elaborao de relatrios e tomada de decises quanto qualidade desses ambientes.
Os responsveis pela programao, bem como os tcnicos envolvidos
na execuo dos trabalhos de coleta, devem estar totalmente familiarizados com os objetivos, metodologias e limitaes dos programas de
amostragem, pois as observaes e dados gerados em campo ajudam
a interpretar os resultados analticos, esclarecendo eventualmente dados no-conformes.
2.1 "

A definio do programa de coleta de amostras exige a considerao de
algumas variveis, tais como: usos, natureza, rea de influncia e caractersticas da rea de estudo, pois a definio da metodologia de coleta, preservao de amostras e dos mtodos analticos depende desses fatores.
2.1.1 <""=>?
A caracterizao deve considerar o(s) uso(s) preponderante(s) do corpo dgua, como: (a) consumo humano, (b) preservao da vida aqutica; (c) irrigao e dessedentao de animais; (d) abastecimento industrial; (e) recreao entre outros.
PLANEJAMENTO DE AMOSTRAGEM
35
2.1.2 * ?@"
As amostras podem ser coletadas em guas classificadas como bruta,
tratada ou residuria; superficial ou subterrnea; interior ou costeira;
doce, salobra ou salina. A natureza do corpo dgua determinante para o
planejamento e coleta da biota aqutica e do sedimento de fundo.
2.1.3 K " @>+" ?

Atualmente dispe-se de centenas de variveis ou determinantes que
podem ser empregados para caracterizar um corpo de gua, envolvendo
parmetros fsicos, qumicos, microbiolgicos, biolgicos, toxicolgicos e
radiolgicos. Esses parmetros devem ser definidos com o conhecimento adequado do seu significado, abrangncia, limitaes, confiabilidade,
referncias para comparaes e custos para sua obteno.
As combinaes entre essas variveis no permitem formular planos
padres. Cada caso deve ser estudado individualmente, sendo que os
parmetros e critrios mais empregados incluem os estabelecidos na
legislao vigente.
A formulao dos programas requer ainda definies relativas aos seguintes fatores:
4 Variabilidade espacial: de maneira geral, os corpos de gua super
@
Q
Q
constituintes nos diferentes pontos de uma seo transversal, bem
como ao longo do eixo longitudinal de deslocamento. H ainda
uma variao no eixo vertical, a qual mais pronunciada em corpos
dgua mais profundos.
4 Variao temporal: A concentrao dos constituintes de um corpo
dgua pode ainda variar ao longo do tempo, num mesmo ponto, de
forma aleatria ou cclica em funo das caractersticas das contribuies recebidas ou das variveis meteorolgicas. Em zonas estu
6
6

@

profundas alteraes nas caractersticas dessas guas.
Para o estabelecimento do local, momento e frequncia de coleta das
amostras, deve-se definir previamente se o estudo visa a obter uma caracterstica mdia, valores mximos ou mnimos, ou a caracterizao
instantnea de um ponto do corpo receptor. A melhor soluo tcnica
36
seria o uso de monitores automticos que registram continuamente as

alteraes da qualidade do corpo de gua (ver Captulo 9). Na impossibilidade de utilizao dessa metodologia devido ao custo elevado e
no-aplicabilidade para todas as variveis, deve-se definir a frequncia
e o momento da coleta, com base em informaes e dados disponveis
ou, sempre que possvel, com a realizao de levantamento preliminar.
Os planos de amostragem baseados em consideraes subjetivas, ou
simplesmente na capacidade de amostragem e analtica do laboratrio,
podero gerar resultados no representativos, por no considerarem
a variabilidade espacial e temporal.
Para ilustrar estas consideraes, so apresentados dois grficos hipotticos, representando a variao temporal da concentrao de um
dado parmetro (Figura 3). O primeiro grfico (A) representa uma variao aleatria resultante, por exemplo, de lanamentos descontnuos
ou do efeito de lixiviao de escoamento superficial provocado por
chuvas. O segundo grfico (B) simula uma variao cclica resultante,
por exemplo, de lanamentos de esgotos domsticos, variaes sazonais de temperatura ou chuvas, variao diria de insolao ou temperatura, ou de lanamentos descontnuos, porm cclicos.
!?WY Efeito da variabilidade temporal na estimativa quantitativa da concentrao de uma

dada varivel: (A) Variaes aleatrias; (B) Variaes aleatrias e cclicas.
Legenda: () resultados obtidos por monitoramento automtico continuo; () mdia dos resultados obtidos
com o monitoramento automtico; (.) concentraes obtidas por coletas instantneas.
A intensidade dessas variaes pode ser reduzida, por exemplo, medida que o ponto de amostragem se afasta do ponto de lanamento.
Portanto, para o estabelecimento do instante e da frequncia de coleta de amostras, deve-se conhecer a variabilidade temporal de cada
parmetro, por local de amostragem. A partir do perfil dessa variabili-
37
dade possvel estabelecer o programa de amostragem e o nmero de

amostras que devem ser tomadas. Quanto maior o nmero de amostras investigadas, melhor ser o conhecimento da variabilidade e, consequentemente, da estimativa do impacto ambiental.
O tamanho da amostra pode ser determinado com base em clculos
estatsticos, supondo-se uma distribuio normal da varivel de qualidade e amostras aleatrias e independentes. Nessas condies, pode-se aplicar a seguinte frmula:
Equao 1
n = nmero de amostras a serem coletadas;
t = fator da distribuio t de Student para (n 1) graus de liberdade e determinado limite de confiana, geralmente entre
90 e 99%. Para a primeira estimativa, usar o valor de t para
s = estimativa do desvio padro da caracterstica medida;
I = incerteza desejada.
= nvel de significncia
Exemplo de aplicao:
Para se estimar a mdia anual de cloreto com uma incerteza de 5 mg/L Cl, com
95% de confiana, supondo-se s = 10 mg/L, j conhecido por meio de estudos
preliminares:
Para a primeira estimativa
Da tabela de distribuio t de Student temos:

t= 1,960
Portanto: n = (1,960 x 10/5)2 = 15,4 ou n = 16 amostras.
Recalculando para (n 1) graus de liberdade
(n 1) = 15
Da tabela temos: t = 2,131

Finalmente: n = (2,131 x 10/5)2 = 18,2 ou [\]" ".
38
Quando o objetivo de um programa avaliar concentraes mdias de

uma dada varivel dentro de um dado perodo (geralmente 24 horas),
pode-se, em alguns casos, reduzir o nmero das amostras necessrias
ao ensaio, pela obteno de amostras compostas, formadas pela mistura de alquotas individuais apropriadas. Para a retirada dessas alquotas
pode-se empregar amostradores automticos programveis. As amostras compostas so teis quando se deseja obter a qualidade mdia de
um corpo de gua no homogneo. Nesse caso, so retiradas alquotas
em vrios pontos e profundidades do corpo de gua, reunindo-se todas
em uma nica amostra. A desvantagem de se compor uma amostra
que pode se perder a associao com as demais variveis de caracterizao do corpo dgua ou efluente, que foram coletadas pontualmente.
Para a tomada de amostras compostas, os seguintes cuidados devem
ser observados:
4 No podem ser empregadas para a determinao de variveis que
se alterem durante a manipulao das alquotas; o caso do oxignio dissolvido, pH, dixido de carbono livre, microrganismos, metais dissolvidos, compostos volteis e leos e graxas.
4 Deve-se obedecer s recomendaes relativas ao prazo mximo
entre a retirada da alquota e o incio da anlise no laboratrio. No
caso da DBO, por exemplo, quando se quer formar uma amostra
composta de 24 horas, ao ser retirada a ltima alquota o prazo j
expirou para as primeiras.
4 importante considerar a possibilidade de se tomarem alquotas individuais proporcionais s vazes do corpo de gua
no instante da coleta, quando se deseja estimar cargas poluidoras, especialmente em escoamentos que apresentem variaes sensveis de vazo ao longo do perodo de amostra$6

2.1.4 /^_""
>/`?k
O planejamento adequado envolve a obteno de informaes preliminares sobre a rea de influncia do corpo dgua a ser amostrado, como:
4 Levantamento de estudos j realizados no local que contribuam
com informaes sobre as caractersticas da rea de estudo e as

@
6
-
39
lidade das guas, tais como: indstria, agricultura, minerao, zonas

6 6

$"
4 Elaborao de croqui com a localizao dos possveis pontos de
coleta;
4 Visita rea de estudo para georreferenciamento dos locais de
coleta por meio de GPS (Global Position System), levantamento
$

claream os dados preliminares levantados (lanamentos de lixo,
resduos industriais ou domsticos no corpo de gua ou nas suas
margens, e outras informaes);
4
Q @ 6 Q mas, tempo necessrio para a realizao dos trabalhos, disponibilidade de apoio local para armazenamento e transporte de
material de coleta e amostras, colocao da embarcao (como marinas, clubes etc.), avaliando possveis limitaes ou interferncias.
2.1.5 $w "w

Muitas vezes os objetivos determinam os locais e pontos de coleta. Por
exemplo, quando se quer avaliar a eficincia de uma unidade de tratamento (industrial ou de esgoto), necessariamente preciso amostrar
o afluente e o efluente dessa estao. Entretanto, quando os objetivos
estabelecidos apontam apenas para uma indicao geral, como o efeito de um efluente na qualidade de gua de um rio ou a avaliao da
qualidade da gua potvel distribuda para a populao, necessrio
selecionar cuidadosamente os locais de amostragem.
2.1.5.1 >??
preciso considerar que todo corpo dgua heterogneo e que, seja
qual for o local de amostragem, este no representativo de todo o
sistema1 em estudo.
Por esse motivo, devem ser selecionados locais adequados s necessidades de informao de cada programa. Entre os fatores responsveis
pela heterogeneidade de um corpo dagua podemos citar:
9 @

$
6
$6
6 $6
reservatrios, estaes de tratamento e sistemas de distribuio, entre outros.
40

Q
@
6
@
Q
tura ao longo da coluna dgua e do encontro de massa de gua;
Zona de mistura, formada por dois ou mais tipos de guas que esto em processo de mistura (rio logo a jusante da descarga de um

YX|$
]Y6 @

zada aps a completa mistura (Fig. 4, trecho A-A);
Distribuio heterognea de determinadas substncias ou organismos em um sistema hdrico homogneo. Isso ocorre quando os materiais no dissolvidos, com densidade diferente da gua, tendem

$
X
6

$6
tendem a se depositar) ou quando ocorrem reaes qumicas ou
biolgicas na coluna dgua, como o crescimento de algas nas camadas superiores em funo da penetrao de luz, com as consequentes mudanas no pH e concentrao de oxignio dissolvido.
!?x) Z%=

%%[%
X
$%

[% \

[%
41
Quando no se conhece detalhadamente um determinado sistema,

recomendvel realizar uma investigao preliminar, de preferncia
com base em um planejamento estatstico, a fim de avaliar o seu grau
de heterogeneidade. Testes rpidos de campo, como condutividade
eltrica, temperatura e oxignio dissolvido, podem ser teis para
essa finalidade, bem como o uso de equipamentos que permitem
medio contnua. O uso de tcnicas de traadores, como corantes ou
materiais radioativos, tem se mostrado til no estudo dos processos de
mistura nos corpos de gua. Contudo, no planejamento desses testes
preliminares necessrio lembrar que o grau de heterogeneidade
pode depender do tipo de ensaio em questo; por isso, essa avaliao
deve ser feita com base em mais de um ensaio.
O grau de heterogeneidade dever ser avaliado para se verificar como
as caractersticas de qualidade oscilam no espao e no tempo.
Em geral no se deve retirar amostras prximas s margens de rios,
canais e no ponto de lanamento de despejos, exceto quando essas
regies so de interesse especfico, pois a qualidade, em tais pontos,
geralmente no representativa de todo o corpo dgua. No caso da
contribuio dos tributrios (afluentes), importante acompanhar a
qualidade de suas guas, e como ela afeta o corpo principal, por meio
da coleta de amostras em ponto prximo da sua desembocadura (foz)
ou de acordo com o objetivo do trabalho.
Quando se deseja acompanhar a qualidade da gua de um corpo hdrico, a longo prazo, o posicionamento do local de amostragem, deve
levar em considerao a existncia de lanamentos de efluentes lquidos industriais e/ou domsticos, bem como a presena de afluentes na
rea de influncia do ponto de amostragem, pois estes podem alterar a
qualidade da gua do corpo.
Caso haja este tipo de situao, o local de monitoramento deve estar
situado aps a mistura completa do referido lanamento, seja ele contnuo ou intermitente (Fig. 5). Para isto deve-se conhecer as vazes do
lanamento e as do rio, e o regime de escoamento para determinar o
local onde a mistura completa. Desse modo obtm-se uma amostra
de gua representativa daquele ponto do rio.
42
!? yY Variao da qualidade de um corpo dgua considerando a distncia do ponto

;> \ yf
;+>

=
;>\

s vezes, os locais de amostragem podem ser escolhidos erroneamente, mais pela convenincia do que por sua adaptao a uma amostragem representativa. As pontes, por exemplo, so usadas para amostragem em rios devido sua acessibilidade, mas nem sempre so os locais
mais apropriados, pois sua presena pode interferir ou alterar fatores
bsicos do corpo dgua. Entretanto, esta pode ser uma opo quando
o local adequado de amostragem for totalmente invivel.
2.1.5.2 >?#

O princpio que orienta a amostragem o de que as caractersticas da
gua so modificadas em seu percurso nos sistemas e nas solues alternativas de abastecimento de gua. Essas variaes necessitam ser
conhecidas, pois fornecem importantes elementos para: (1) subsidiar a
avaliao do risco ao consumidor; (2) permitir a correo do problema
especfico de contaminao, bem como os problemas operacionais geradores da anomalia.
Para o controle de qualidade da gua para consumo humano devem ser
considerados na definio dos pontos e locais de coleta: (i) o monitoramento operacional para avaliar o desempenho das medidas de controle
nas diversas etapas de tratamento, desde a captao no manancial at o
consumidor, e (ii) o monitoramento para garantir que o processo de tratamento como um todo esteja operando de forma segura (verificao).
No estabelecimento da frequncia de amostragem para um monitoramento mais global da gua de consumo humano existe a necessidade
de se realizar um balano dos benefcios e custos de se obter um nmero maior de informaes. O nmero de amostras e a frequncia de
amostragem so geralmente baseados na populao abastecida ou no
volume de gua distribudo, para refletir o risco populao. A frequncia de anlises para os parmetros individuais ir tambm depender da
43
variabilidade da qualidade. Requer-se uma maior frequncia de anlise dos parmetros microbiolgicos do que dos fsico-qumicos, isso
porque episdios curtos de contaminao microbiolgica podem levar
facilmente a surtos de doenas gastrointestinais nos consumidores,
enquanto episdios de contaminao qumica, que poderiam constituir
um risco agudo sade, so raros (WHO, 2011).
No Captulo 7 encontram-se detalhes sobre os procedimentos para o planejamento e execuo de amostragem de guas de consumo humano.
2.1.5.3 {
A seleo dos pontos de coleta de sedimento deve considerar, alm
do objetivo do estudo, os tipos de ambiente, os locais de lanamento
da carga de poluentes e os padres de vazo, velocidade e sentido da
corrente. Muitos estudos de sedimento aplicam a abordagem que utiliza um ponto ou condies de referncia dentro de uma determinada
regio ou bacia hidrogrfica. O ponto de referncia corresponde a um
ambiente livre da ao antrpica ou o menos impactado dentro da rea
de estudo. fundamental que as caractersticas fsicas, geolgicas e
hidrolgicas, entre os pontos a serem comparados sejam compatveis.
Assim, dados como granulometria, teor de matria orgnica e umidade do sedimento, tipo e grau de preservao da cobertura vegetal da
margem, tipo de hbitat amostrado e ordem do rio devem ser similares
entre o ponto de referncia e os pontos a serem diagnosticados. So
definidas as condies consideradas ideais, estabelecendo-se valor ou
faixa de valor, para cada parmetro, que seria esperado em um ambiente preservado.
Qualquer que seja o tipo de ambiente amostrado (rios, lagos, reservatrios, esturios e oceanos), a coleta para avaliao da qualidade de sedimentos (biolgica, fsica e qumica) geralmente ocorre nas reas de
deposio de sedimentos finos (argila), j que normalmente so nesses
locais que os contaminantes so retidos e a comunidade bentnica
mais desenvolvida. Em lagos, reservatrios e esturios o acmulo de
partculas finas ocorre na regio mais profunda; em rios, nas margens
deposicionais e nas reas de remansos. A margem deposicional localiza-se no lado oposto ao da erosional, apresentando declive mais suave
e, muitas vezes, bancos de macrfitas enraizadas. Remansos ocorrem
em trechos mendricos e pantanosos.
44
Em estudos de sedimentos so considerados essenciais a avaliao dos

seguintes parmetros: pH (potencial hidrogeninico), Eh (potencial
redox), contedo orgnico (carbono orgnico total - COT ou resduos
volteis), sulfetos volatilizveis em cido (SVA), granulometria, umidade
e teor de matria orgnica. Em gua de fundo, nitrognio amoniacal
e oxignio dissolvido so parmetros importantes para acompanhar
ensaios ecotoxicolgicos e de bentos (ver detalhes no Captulo 6).
A variabilidade do sedimento em um ponto precisa ser considerada
na amostragem e decorre da heterogeneidade espacial, tanto vertical
quanto horizontal. A heterogeneidade vertical , principalmente, consequncia da oscilao histrica da contaminao; a horizontal formada pela dinmica de deposio das partculas (apresentando-se quimicamente em mosaicos) e pela distribuio agrupada das populaes
bentnicas. O ideal ter conhecimento desta variabilidade por meio da
tomada de rplicas.
O nmero de rplicas pode ser definido a partir de dados obtidos em
amostragem prvia, utilizando-se frmulas que se baseiam em valores
de varincia, desvio ou erro padro, como exemplificado no item 2.1.3.
No entanto, o nmero resultante de rplicas algumas vezes invivel e
opta-se por um nmero mnimo, considerando-se a capacidade analtica do laboratrio. Em geral faz-se de 3 a 5 rplicas.
Se o custo do projeto e a capacidade analtica de um laboratrio no
permitem a execuo de rplicas, opta-se pela obteno de amostras
compostas (desde que a varivel em questo permita a sua composio), que teoricamente representam o valor mdio dessa composio
sendo, portanto, uma opo mais adequada do que a tomada de uma s
amostra por ponto (maiores detalhes no Captulo 6).
Em estudos de sedimento h de se considerar tambm a variabilidade
temporal, j que as variaes sazonais podem influenciar a disponibilidade de contaminantes. Em reservatrios, a dinmica de circulao/
estratificao altera a relao de oxirreduo das camadas profundas
de gua e, em perodos de seca, a exposio do sedimento marginal.
Em rios, ocorre deposio de sedimentos finos no perodo da seca e
lavagem desse material nas chuvas. Para estudos de caracterizao e
diagnstico e programas de monitoramento da qualidade de sedimentos, uma nica coleta anual no perodo de seca pode ser adequada.
45
2.1.5.4 +`? "$|}?""~|" "

Para definio dos locais de amostragem de efluentes lquidos (industriais e domsticos) e dos corpos hdricos receptores, devem ser considerados os objetivos envolvidos na amostragem, tais como: avaliao
do desempenho do sistema de tratamento, atendimento aos padres
da legislao, obteno de informaes para elaborao de projeto de
sistemas de tratamento de guas residurias (STAR), implantao de
medidas de preveno poluio, entre outros.
No captulo 8 encontram-se detalhes sobre os procedimentos para o
planejamento e execuo deste tipo de amostragem.
2.1.6 %w

Os veculos, embarcaes, equipamentos, frascaria, material de
preservao e acondicionamento de amostras devem estar disponveis em quantidade e qualidade adequadas, evitando-se adaptaes
de ltima hora.
2.1.7 w| $

w
No planejamento da amostragem deve ser considerada a capacidade
analtica do(s) laboratrio(s) quanto quantidade de amostras que podem ser processadas e os tipos de parmetros a serem investigados,
limites de deteco, mtodos de ensaio, disponibilidade de padres
e cronograma de atendimento. importante considerar os seguintes
conceitos nessa etapa:
4 Concentrao mnima de interesse do analito: um dado fundamental para a seleo de mtodos analticos que devem ser empre$ 5

$o ou publicada como padro internacional, e serve de orientao

Q o aceitveis para os mtodos analticos que sero utilizados para
a tomada de deciso ambiental.
4 Limite de deteco do Mtodo (LDM): menor concentrao de
uma substncia que pode ser detectada, mas no necessariamente
6%
4 Q&

Q
pode ser determinada com um nvel de aceitabilidade que garanta
46
sua representatividade. Aps ter sido determinado, esse limite serve para orientar e avaliar se a preciso e a exatido do mtodo analtico escolhido atende aos objetivos do plano. Normalmente, para
embasar substancialmente as decises ambientais, recomend@ Q
50% menor do que a concentrao mnima de interesse. Quando

XW!6
>6 #6
etc) que atendam concentrao mnima de interesse do analito
recomenda-se adotar o mtodo dentre estes que melhor atenda a
esse limite.
4 Incerteza de medio: caracteriza a disperso de valores associada ao resultado, que podem ser razoavelmente atribudos ao
mensurando (amostras). usada para avaliar a exatido, preciso

Q@

mximos de incerteza dos resultados deve ser estabelecida juntamente com a concentrao mnima de interesse e deve ser usada para auxiliar na escolha das metodologias analticas adotadas.
2.1.8 ?""!"~?"

So os recursos necessrios para realizar os trabalhos de campo, as
tarefas analticas e as de interpretao de dados. Sob este aspecto,
convm planejar criteriosamente os parmetros a serem avaliados, o
nmero de amostras a serem examinadas e a frequncia de sua coleta,
adequando-os aos recursos disponveis.
Tanto em programas de monitoramento, onde so avaliadas as tendncias e a eficcia das medidas de controle da poluio, como em levantamentos especficos, devem ser elaborados cronogramas de desenvolvimento dos trabalhos, considerando todas as atividades envolvidas, a
sazonalidade e a disponibilidade para alocao dos recursos humanos
e materiais.
47
Refrigerao de Amostras Foto

Carlos Jesus Brando/CETESB
CAPTULO
3 ORGANIZAO DOS TRABALHOS DE CAMPO

Estabelecido o planejamento de amostragem, que inclui a definio
dos objetivos, dos locais e frequncia de amostragem, dos parmetros
selecionados, dos mtodos analticos e de amostragem adequados e o
cronograma de atividades, passa-se para as etapas de organizao e
execuo dos trabalhos de campo.
A sntese contendo as recomendaes e orientaes de como realizar o
armazenamento e a preservao de amostras, conforme o tipo de ensaio
(classe da amostra, tipo de recipiente para armazenamento, volume/quantidade necessrio de amostra, tipo de preservao e prazo mximo recomendado entre coleta e incio do ensaio), encontra-se no Anexo 1.
3.1 Planejamento das Atividades

O planejamento correto das atividades de campo de importncia fundamental para o sucesso dos trabalhos e deve envolver os seguintes
aspectos:
Seleo de itinerrios racionais, observando-se os acessos, o tempo para coleta e preservao das amostras e o prazo para seu envio aos laboratrios, obedecendo-se o prazo de validade para o
ensaio de cada parmetro, a capacidade analtica e o horrio de
atendimento e funcionamento dos laboratrios envolvidos. Muitos programas de amostragem necessitam de vrios dias para serem
desenvolvidos, o que exige remeter amostras coletadas diariamente
aos laboratrios por despachos rodovirios ou areos. Nesses casos,
devem-se planejar coletas calculando-se a localizao e os horrios
das empresas transportadoras;
4
Q
$
Q @ratrios envolvidos e de que os mesmos tenham condies de atender ao programa;
4
ORGANIZAO DOS TRABALHOS DE CAMPO
49

Q @

pontos de coleta que exigem equipamentos ou cuidados especiais,
o que permitir a sua adequada seleo e preparo. Isto vale especialmente para o caso de coletas com embarcaes, coletas de sedimentos, peixes e organismos bentnicos, coletas em locais de difcil
acesso, ou com alto risco de acidentes (rios caudalosos, mar, pontes
de trfego intenso, amostragem em indstrias etc.);
4 Preparao de tabelas contendo os equipamentos e materiais ne

X 6

6
preservantes qumicos, caixas trmicas, equipamentos de coleta e
de medio, cordas, embarcaes, motores de popa, equipamento
de segurana etc.). conveniente levar frascos reserva para o caso
de amostragem adicional, perda ou quebra de frascos; e
4
Q
equipamentos utilizados para amostragem e de apoio.
4
Convm assegurar-se de que os tcnicos envolvidos nas atividades de

coleta estejam devidamente treinados e capacitados para utilizar as
tcnicas especficas de coleta, preservao de amostras e as medidas
de segurana, manusear os equipamentos de campo e de medio, e
localizar precisamente os pontos de coleta. fundamental que observem e anotem quaisquer fatos ou anormalidades que possam interferir
nas caractersticas das amostras (cor, odor ou aspecto estranho, presena de algas, leos, corantes, material sobrenadante, peixes ou outros animais aquticos mortos), nas determinaes laboratoriais e na
interpretao dos dados. Devem ainda ter condies para estabelecer,
se necessrio, pontos de amostragem alternativos e outros parmetros complementares para uma melhor caracterizao do ambiente em
estudo. Um tcnico bem treinado, consciente e observador de importncia fundamental para a consecuo dos objetivos dos programas de
avaliao dos ecossistemas aquticos.
importante destacar que as coletas de amostras biolgicas dependem de autorizao prvia dos rgos competentes, como o Instituto Chico Mendes de Conservao da Biodiversidade (ICMBio). Essa
autorizao, todavia, no necessria para fins de monitoramento da
qualidade da gua. Maiores informaes podem ser obtidas no site do
Sistema de Autorizao e Informao em Biodiversidade (SISBIO) do
Ministrio do Meio Ambiente (http://www4.icmbio.gov.br/sisbio//)
50
3.2 Coleta e Preservao de Amostras

Neste tpico encontram-se orientaes quanto limpeza e ao preparo dos recipientes utilizados para o armazenamento de amostras. Informaes sobre as tcnicas de preservao para cada varivel, o tipo
de recipiente, o volume de amostra necessrio, o tipo de preservao
recomendada e o prazo para ensaios fsico-qumicos, microbiolgicos,
biolgicos e toxicolgicos encontram-se no Anexo 1.
3.2.1 Coleta e Tipos de Amostras

A coleta de amostras , provavelmente, o passo mais importante para
a avaliao da rea de estudo; portanto, essencial que a amostragem
seja realizada com precauo e tcnica, para evitar todas as fontes possveis de contaminao e perdas e representar o corpo dgua amostrado e/ou a rede de distribuio de gua tratada.
Para definir a natureza da amostra coletada, nesse Guia so adotados cdigos que se referem classe da amostra: A - Amostras de gua
tratada; B - Amostras de gua bruta; C - Amostras de gua residuria;
D - Amostras de solo, sedimento, lodo, material slido de dragagem, resduo slido e semi-slido em geral; E - Amostras de materiais biolgicos. As
definies de cada uma delas encontram-se no Glossrio (Anexo 2).
A tcnica a ser adotada para a coleta de amostras depende da matriz
a ser amostrada (gua superficial, em profundidade, subterrnea, tratada, residuria, sedimento, biota aqutica, entre outras), do tipo de
amostragem (amostra simples, composta ou integrada) e, tambm, dos
ensaios a serem solicitados (ensaios fsico-qumicos, microbiolgicos,
biolgicos e toxicolgicos) e devem ser tomados os seguintes cuidados:

%

que sero utilizados para coleta (baldes, garrafas, pipetas etc.);
4 Empregar somente os frascos e as preservaes recomendadas

Q6@

$tes para preservao esto adequados e dentro do prazo de validade para uso (Anexo 1). Em caso de dvida, substitu-los;
4

3

6
6 6
fumaa e outras impurezas (gasolina, leo e fumaa de exausto de
veculos podem ser grandes fontes de contaminao de amostras).
4
51
4
4
4
4
4
4
4
52
Cinzas e fumaa de cigarro podem contaminar as amostras com

metais pesados e fosfatos, entre outras substncias. importante,
portanto, que os tcnicos responsveis pela coleta de amostras no
fumem durante a coleta e utilizem uniformes e EPI adequados para
cada tipo de amostragem (avental, luva cirrgica ou de borracha
de ltex, culos de proteo, entre outros), sempre observando e
obedecendo s orientaes de cada local ou ambiente onde ser
realizada a amostragem;
Fazer a ambientao dos equipamentos de coleta com gua do prprio local, se necessrio;
Garantir que as amostras lquidas no contenham partculas grandes,
detritos, folhas ou outro tipo de material acidental durante a coleta;

@

@ de de se repetir algum ensaio no laboratrio;
Fazer todas as determinaes de campo em alquotas de amostra separadas das que sero enviadas ao laboratrio, evitando-se
assim o risco de contaminao;
Colocar as amostras ao abrigo da luz solar, imediatamente aps a
coleta e preservao;
Acondicionar em caixas trmicas com gelo as amostras que exigem
refrigerao para sua preservao (observar que as amostras para
ensaio de Oxignio Dissolvido no devem ser mantidas sob refrigerao);
Manter registro de todas as informaes de campo, preenchendo

6
ma caracterstica, contendo os seguintes dados:
a) Nome do programa de amostragem e do coordenador, com telefone para contato;
b) Nome dos tcnicos responsveis pela coleta;
c) Nmero de identificao da amostra;
d) Identificao do ponto de amostragem: cdigo do ponto, endereo, georreferenciamento, etc.
e) Data e hora da coleta;
f) Natureza da amostra (gua tratada, nascente, poo fretico,
poo profundo, represa, rio, lago, efluente industrial, gua salobra, gua salina etc.);
g) Tipo de amostra (simples, composta ou integrada)
h) Medidas de campo (temperatura do ar e da gua, pH, condutividade, oxignio dissolvido, transparncia, colorao visual,
vazo, leitura de rgua, etc.);
i)
j)
Eventuais observaes de campo;

Condies meteorolgicas nas ltimas 24 horas que possam
interferir com a qualidade da gua (chuvas);
k) Indicao dos parmetros a serem analisados nos laboratrios
envolvidos;
l) Equipamento utilizado (nome, tamanho, malha, capacidade,
volume filtrado, e outras informaes relevantes).
As amostras podem ser simples, compostas ou integradas. A amostra
simples (pontual ou instantnea) aquela coletada em uma nica tomada de amostra, num determinado instante, para a realizao das determinaes e ensaios. O volume total da amostra ir depender dos parmetros escolhidos. indicada para os casos onde a vazo e a composio
do lquido (gua ou efluente) no apresentam variaes significativas.
obrigatria para os parmetros cujas caractersticas alteram-se rapidamente ou no admitem transferncia de frasco (sulfetos, oxignio dissolvido, solventes halogenados, leos e graxas, microbiolgicos).
A amostra composta constituda por uma srie de amostras simples,
coletadas durante um determinado perodo e misturadas para constituir uma nica amostra homogeneizada. Este procedimento adotado
para possibilitar a reduo da quantidade de amostras a serem analisadas, especialmente quando ocorre uma grande variao de vazo e/ou
da composio do lquido. A amostragem pode ser realizada em funo
(a) do tempo (temporal); (b) da vazo; (c) da profundidade do local a ser
amostrado; (d) da margem ou distncia entre um ponto de amostragem
e outro (espacial). A composio de amostra realizada de acordo com
o objetivo de cada trabalho e definida pelo coordenador tcnico no
momento da elaborao do projeto.
O perodo total da amostragem composta poder ser subdividido, de
acordo com a capacidade de processamento do laboratrio. Quando
o laboratrio de ensaios se encontra em local distante dos pontos de
amostragens, recomenda-se que as amostras sejam compostas em perodos menores que 24 horas, devido aos tempos mximos para a realizao de ensaios de alguns parmetros, de forma a no exceder o prazo
de validade da amostra.
A amostragem integrada aquela realizada com amostradores que
permitem a coleta simultnea, ou em intervalos de tempo o mais
53
prximo possvel, de alquotas que sero reunidas em uma nica

amostra.
Para uma melhor representatividade do local amostrado, pode-se tambm realizar a amostragem com rplicas (duplicata ou triplicata), quando a amostra coletada de modo sequencial e independente, em um
determinado perodo de tempo ou espao.
A coleta de gua varia tambm em funo da profundidade em que foi
realizada, podendo ser superficial ou em diferentes distncias abaixo
da superfcie. A coleta de gua superficial a que ocorre entre 0 e 30
centmetros da lmina dgua, enquanto que a em profundidade ocorre
abaixo de 30 centmetros da lmina dgua e deve ser realizada obrigatoriamente com o auxlio de equipamento adequado, tomando-se o
cuidado de no provocar a suspenso do sedimento prximo ao fundo.
Os nveis de profundidade so definidos pelo coordenador tcnico no
momento da elaborao do projeto, de acordo com o objetivo de cada
trabalho. A profundidade total do local de amostragem verificada em
campo, com auxlio de uma corda metrada com um peso extra, tipo poita, ou com ecobatmetro da embarcao.
Toda vez que o procedimento de coleta for realizado com apoio de embarcao, assim que for confirmada sua ancorao no ponto onde ser
realizada a coleta, a embarcao deve ser mantida na mesma posio, no
podendo ser ligada para reposicionamento at o final do procedimento.
3.2.2 Preservao de amostra

Independente da natureza da amostra, a estabilidade completa para
cada constituinte nunca pode ser obtida. As tcnicas de preservao,
a seleo adequada dos frascos e a forma de armazenamento, tm por
objetivo retardar a ao biolgica e a alterao dos compostos qumicos; reduzir a volatilidade ou precipitao dos constituintes e os efeitos de adsoro; e/ou preservar organismos, evitando ou minimizando
alteraes morfolgicas, fisiolgicas e de densidades populacionais,
em todas as etapas da amostragem (coleta, acondicionamento, transporte, armazenamento, at o momento do ensaio).
As alteraes qumicas que podem ocorrer na estrutura dos constituintes acontecem, principalmente, em funo das condies fsico-qumi-
54
cas da amostra. Assim, metais podem precipitar-se como hidrxidos, ou

formar complexos com outros constituintes; os ctions e nions podem
mudar o estado de oxidao; ons podem ser adsorvidos na superfcie
interna do frasco de coleta; e outros constituintes podem dissolver-se
ou volatilizar-se com o tempo.
As aes biolgicas podem conduzir alterao da valncia de
elementos ou radicais. Os constituintes solveis podem ser convertidos
em matria orgnica e, com a ruptura das clulas, esses constituintes
podem ser liberados na soluo. Os ciclos biogeoqumicos, como do
nitrognio e do fsforo, so exemplos dessa influncia biolgica na
composio da amostra.
As tcnicas de preservao de amostras mais empregadas so: adio
qumica, congelamento e refrigerao.
Adio qumica
O mtodo de preservao mais conveniente o qumico, atravs do
qual o reagente adicionado prvia (ensaios microbiolgicos) ou imediatamente aps a tomada da amostra, promovendo a estabilizao
dos constituintes de interesse por um perodo maior. Contudo, para
cada ensaio existe uma recomendao especfica (Anexo 1). Geralmente realizada com o auxlio de um frasco dosador, frasco conta-gota,
pipeta, proveta, entre outros.
Congelamento
uma tcnica aceitvel para alguns ensaios e serve para aumentar o
intervalo entre a coleta e o ensaio da amostra in natura, sem comprometer esta ltima.
inadequada para as amostras cujas fraes slidas (filtrveis e no
filtrveis) alteram-se com o congelamento e posterior retorno
temperatura ambiente, e para a maioria das determinaes biolgicas e
microbiolgicas. Os ensaios que permitem esta tcnica de preservao
constam no Anexo 1.
Refrigerao
Constitui uma tcnica comum em trabalhos de campo e pode ser utilizada para preservao de amostras mesmo aps a adio qumica,
sendo empregada frequentemente na preservao de amostras para
55
ensaios microbiolgicos, fsico-qumicos orgnicos e inorgnicos, biolgicos e toxicolgicos. Os ensaios que permitem esta tcnica de preservao constam no Anexo 1.
3.3 Acondicionamento, Transporte e

Armazenamento de Amostras
3.3.1 Acondicionamento
Neste item encontram-se orientaes para o acondicionamento de
amostras, quanto ao tipo, limpeza e preparo dos recipientes utilizados.
3.3.1.1 Tipos de Recipientes

Os tipos de recipientes mais utilizados para coleta e preservao de
amostras so os de plstico autoclavvel de alta densidade (polietileno,
polipropileno, policarbonato ou outro polmero inerte) e os de vidro,
com boca larga (mais ou menos 4 cm de dimetro) para facilitar a coleta
da amostra e a limpeza. Estes dois tipos de materiais apresentam vantagens e desvantagens (Tabela 1).
Tabela 1. Comparao entre recipientes de vidro (borossilicato) e polietileno,
polipropileno ou outro polmero inerte.
Material
Condies
Operacionais
Plstico (polmero inerte)
Interferncia
com a amostra
Indicado para todas as

anlises de compostos
orgnicos. Inerte a maioria dos
constituintes, exceto a forte
alcalinidade. Adsorve metais
em suas paredes.
Indicado para a maioria dos

compostos inorgnicos,
biolgicos e microbiolgicos.
Pode contaminar amostras
com ftalatos.
Peso
Pesado
Leve
Resistncia
quebra
Muito Frgil
Durvel
Limpeza
Fcil
$
remoo de componentes
adsorvveis
Sim
Apenas por tcnicas de uso

pouco comum no Brasil, como
xido de etileno e radiao
gama. Alguns tipos so
autoclavveis.
Esterilizvel
56
Vidro (Borossilicato)
Os recipientes de plstico apresentam maiores vantagens por serem

leves e resistentes quebra, e so recomendados quando o plstico
aceitvel na coleta, devido ao baixo custo e menor adsoro de
ons de metais. Recipientes de polietileno tambm podem ser usados,
porm so menos rgidos e, consequentemente, apresentam uma
menor resistncia autoclavao.
Os frascos podem ser de vidro neutro ou de borossilicato. A desvantagem
deste tipo de material o seu peso e a possibilidade de quebra durante
o seu manuseio e transporte. O vidro de borossilicato o recomendado
por ser inerte maior parte dos materiais e indicado para determinados
tipos de ensaios, como os microbiolgicos, pesticidas e de leos e graxas;
entretanto, possui um custo mais elevado.
Os recipientes podem ser tambm do tipo descartvel ou reutilizvel.
Os recipientes descartveis so utilizados quando o custo da limpeza
alto. Estes devem estar limpos, serem prova de vazamento e, quando
necessrio, estreis. Os recipientes reutilizveis so usados quando o
custo de limpeza baixo em comparao com o custo de aquisio de
novos recipientes. Devem ser de fcil lavagem e, se necessrio, resistentes a temperaturas elevadas.
A capacidade dos recipientes varia em funo do volume de amostra
necessrio para os ensaios a serem efetuados. O frasco geralmente
precisa ter capacidade suficiente para conter a amostra e deixar um
espao que permita uma boa homogeneizao, a menos que o procedimento recomende a coleta com o frasco totalmente cheio. Normalmente, empregam-se frascos de 250mL, 500mL, 1L e 5L. Todavia,
recipientes com capacidades menores ou maiores podem ser necessrios, de acordo com as determinaes a serem realizadas. No caso das
amostras de sedimento, podem ser acondicionadas em potes ou sacos
plsticos de polietileno, potes de vidro de cor mbar ou papel alumnio
e sacos plsticos reforados (APHA, 2005).
fundamental que tanto o recipiente, como a tampa e o batoque
estejam livres do analito de interesse, especialmente quando os limites
de quantificao so baixos. No caso de ensaios orgnicos, no usar
frascos plsticos, exceto aqueles feitos de polmeros fluorinados, tal
como teflon (PTFE politetrafloretileno), pois alguns analitos da
amostra podem ser adsorvidos pela parede do recipiente plstico e/
57
ou alguns contaminantes do recipiente plstico podem ser liberados

na amostra. Evitar recipientes plsticos sempre que possvel, devido
ao seu potencial de contaminao, principalmente por steres de
ftalato. Considerando que alguns compostos orgnicos (como tambm
os pigmentos fotossintetizantes) so fotodegradveis, necessrio
utilizar frascos de vidro de cor mbar ou, na impossibilidade, envolver
os frascos transparentes em papel alumnio ou kraft. Para a anlise de
metais, tomar cuidado para que a amostra no entre em contato com
batoques metlicos; para a realizao de ensaios microbiolgicos, os
recipientes devem ser esterilizados. Como regra geral, as tampas e os
batoques devem garantir uma boa vedao da amostra, especialmente
durante o transporte.
3.3.1.2 Limpeza e Preparo de Recipientes

A limpeza dos recipientes, tampas e batoques de grande importncia
para impedir a introduo de contaminantes nas amostras com o analito de interesse. Um exemplo dessa contaminao o uso de detergentes comuns para lavar recipientes que sero empregados nos ensaios
de surfactantes e fosfatos. Portanto, deve-se garantir que os procedimentos de lavagem sejam eficazes para a limpeza e no acrescentem
interferentes nos resultados analticos (qualidade e composio dos
detergentes, pureza das solues usadas, tempo de contato com os reagentes, controle da temperatura, dentre outros).
Os procedimentos manuais mais utilizados na limpeza e preparo de
frascaria so listados a seguir (limpeza bsica e especial). Procedimentos automticos podem ser empregados utilizando-se mquina de lavagem de vidraria, escolhendo o programa apropriado para cada tipo
de frascaria.
a) Limpeza bsica de frascaria
i. Deixar os frascos, tampas e batoques de molho em soluo de de
$ 869

o dos resduos da amostra e possveis etiquetas;
ii. Esfregar os frascos com gaspilho at retirada total dos resduos;
iii. Esfregar com esponja de ao e detergente neutro a parte externa
dos frascos;
iv. Enxaguar com gua corrente para retirada do detergente (se
necessrio, usar gua quente);
58
%
$ $%"
Colocar em estufa entre 70C e 100C, durante duas horas, para
$3

absorvente;
vii. Tampar e armazenar em local apropriado (livre de poeira).
v.
vi.
No caso de recipientes novos descartveis ou de vidro, enxaguar

cada frasco, tampa e batoque com gua destilada ou deionizada.
Normalmente este procedimento suficiente para garantir a limpeza
dos frascos. Entretanto necessrio realizar teste de branco de
frascaria para atestar a limpeza dos frascos.
b) Limpeza especial
Os procedimentos especiais de lavagem so adotados para a limpeza
dos recipientes para os ensaios de metais, fosfatos e fsforo total, compostos orgnicos (semivolteis e volteis), microbiolgicos e mutagenicidade.
Ensaios de Metais
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Imergir os frascos e suas tampas em soluo de cido ntrico 10%,

mantendo-os assim por no mnimo 48 horas;
Retir-los da soluo, escoando-os bem;
Enxagu-los com gua destilada ou deionizada;
U3

@"
4

6
$

ensaio do branco de lavagem (item 4.1.3. Branco de Frascaria);

%

X@

Y"
Aps o resultado satisfatrio do ensaio de branco de frascaria,

Recomenda-se, para cada lote, a realizao do ensaio de branco de lavagem para todos os metais de interesse, utilizando-se a mesma tcnica que ser empregada na determinao.
Esta lavagem empregada nos recipientes para os ensaios de cromo
hexavalente, metais, semimetais e metais dissolvidos (Anexo 1).
59
Ensaios de fosfatos e fsforo total

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Imergir os frascos e suas tampas em soluo de cido clordrico

10%, mantendo-os assim por no mnimo 48 horas;
Retir-los da soluo, escoando-os bem;
Enxagu-los com gua desmineralizada.
U3

@"
4

6
$

ensaio do branco de lavagem (item 4.1.3. Branco de Frascaria);

%

X@

Y"
Aps o resultado satisfatrio do ensaio de branco de frascaria,

Ensaios de Compostos Orgnicos Semivolteis

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9
Remover os resduos dos frascos, com gua corrente quente para

retirar a sujeira grosseira;
Lavar com detergente enzimtico 0,5%, ou similar, com auxlio de
gaspilho e esponja de limpeza;
Enxaguar abundantemente com gua corrente quente (no mnimo 5
vezes) ou na mquina de lavar com gua quente (no mnimo 2 vezes);
Enxaguar com gua destilada;

X7w83?88Y

8 horas, para remover completamente qualquer composto orgnico. Uma alternativa para a remoo desses compostos a rinsagem
dos frascos com metanol ou isopropanol;
As tampas e os septos devem ser lavados pelo mesmo procedimento, entretanto o processo de secagem deve ser realizado em estufa
em temperatura inferior 100oC.
4

$

ensaio do branco de lavagem (item 4.1.3 Branco de Frascaria);
Armazenar em local protegido (livre de poeira);
Aps o resultado satisfatrio do ensaio do branco de frascaria,

Esta lavagem empregada nos recipientes para os ensaios de

fenis por cromatografia, herbicidas fenoxicidos, PAH (Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos)/Benzo(a)Pireno, Pesticidas
organoclorados/PCB (Bifenilas policloradas) e Pesticidas organofosforados (Anexo 1).
60
Ensaio de Compostos Orgnicos Volteis

1.
2.
3.
4.
5.
6.
Remover os resduos dos frascos, com gua corrente quente para

retirar a sujeira grosseira;
Lavar com detergente enzimtico a 0,5% ou similar, com auxlio de
gaspilho e esponja de limpeza;
Enxaguar com gua corrente quente (no mnimo 5 vezes), ou enxaguar na mquina de lavar com gua quente (no mnimo 2 vezes);
Enxaguar com gua destilada e secar em estufa em temperatura
entre 100oC - 150C por no mnimo1 hora.
#
@
X
reutilizado) e a tampa, entretanto o processo de secagem deve ser
realizado em estufa em temperatura inferior 105oC.
Armazenar em local protegido (livre de poeira)
Esta lavagem empregada nos recipientes do tipo V Vial (COV e

THM) (Anexo 1).
Ensaios Microbiolgicos
Limpeza dos recipientes
Lavar os frascos e tampas, interna e externamente, com uma soluo de detergente alcalino 0,1% ou equivalente, com o auxlio de
um gaspilho;
2. Enxaguar os frascos cerca de dez vezes em gua corrente e uma
@% gua destilada ou deionizada, enchendo e esvaziando
totalmente os frascos;
3. Acondicionar as tampas e os frascos em posio vertical e com o
bocal voltado para baixo para retirar o excesso de gua.
4
1.
Aps a lavagem necessria a adio de preservantes e a esterilizao

dos frascos para garantir que estejam livres de contaminao microbiolgica. Deve ser testada a eficincia do processo de autoclavao
com bioindicadores.
Adio de Preservantes
Os frascos para a coleta de amostras destinadas a anlises
microbiolgicas de guas e efluentes clorados devem conter um
4
61
agente neutralizador de cloro residual (tiossulfato de sdio) e um

agente quelante (EDTA etileno diamino tetracetato de sdio), em
quantidades adequadas para neutralizar cloro e quelar metais pesados
que possam estar presentes nessas amostras.
Para anlise de efluentes clorados, adicionar tiossulfato de sdio em
quantidades suficientes para obter-se uma concentrao de 100mg/L
na amostra (por exemplo, 0,1mL de uma soluo 10% para 120mL de
amostra), o que ir neutralizar at 15mg/L de cloro residual. Para coleta de gua tratada, a concentrao de tiossulfato de sdio pode ser reduzida: 0,1mL de uma soluo 3% para 120mL de amostra iro neutralizar at 5mg/L de cloro residual. necessrio conhecer previamente
os teores de cloro residual de novos pontos de amostragem para que
os frascos de coleta possam ser preparados com as quantidades adequadas de tiossulfato de sdio.
Um agente quelante deve ser adicionado, caso a amostra possa conter
metais pesados (cobre, nquel, zinco etc) em concentraes superiores
a 0,1 mg/L. Nessa situao provvel, adicionar 0,3mL de uma soluo
15% de EDTA para cada 120mL de amostra.
Essas solues devem ser adicionadas aos frascos de coleta antes da
esterilizao.
Aps a adio dos agentes quelantes e neutralizadores de cloro livre,
o frasco fechado e a tampa e o gargalo recobertos com papel alumnio, de modo que fiquem protegidos da contaminao pelo manuseio,
durante todo o processo de coleta. importante que a tampa esteja ligeiramente frouxa para evitar a ruptura do frasco, facilitar a circulao
de vapor e eliminar o ar do seu interior no processo de esterilizao.
Aps o processo de esterilizao, rosquear completamente a tampa do
frasco e fixar o papel alumnio com elstico.
Para a coleta de lodo de esgoto e sedimento no h necessidade
de adio de reagentes. Autoclavar os frascos e proteger a tampa e
gargalo com um pedao de papel alumnio. Depois de autoclavado,
manusear o frasco sem a remoo do papel alumnio para evitar a
sua contaminao.
62
Esterilizao dos recipientes

Para a esterilizao dos recipientes, devem ser observados os cuidados
necessrios em funo do tipo de recipiente, como descrito a seguir:
4
i. Recipientes de vidro neutro

Esterilizar em estufa temperatura de 170oC a 180C, durante duas horas.
ii. Recipientes de plstico autoclavvel
Autoclavar a 121C e 0,1 MPa (1 atm), durante 15 a 30 minutos.

Deve ser realizado teste de esterilidade dos frascos e teste de neutralizao do cloro residual livre, aps a esterilizao.
4 " w@ "" "
(Tcnica de Moore)
A mecha confeccionada em tecido de crepe ou gaze esterilizada,
que deve ser dobrado cinco vezes, mantendo as dimenses de 23cm
de largura x 46cm de comprimento em cada dobra (Fig. 6). A partir da
base inferior de 23cm, cortam-se 5 tiras de 4,5cm de largura e 36cm de
comprimento, deixando-se 10cm livres na parte superior sem cortar,
onde ser fixado o fio de nilon para servir de suporte para a mecha
(Fig. 7). A metragem do fio de nilon utilizada dever ser determinada de acordo com a profundidade do ponto de coleta a ser amostrado,
garantindo que a mesma fique totalmente imersa. Para as coletas em
rios, represas ou crregos, as mechas devero possuir em seu interior
um peso fixado, para facilitar a imerso da mesma. Embrulhar em papel
kraft e autoclavar a 121C durante 15 minutos.
63
Figura 6. Dimenses do tecido de gaze para a confeco da mecha para coleta de amostras para
anlise de patgenos.
(A)
(B)
Figura 7. Mecha empregada na tcnica de Moore: (A) Esquema; (B) foto da mecha de gase com
meio de transporte (Carry Blair) (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).
Ensaios de mutagenicidade (Teste Ames)

Limpeza dos recipientes
Lavar os frascos e tampas de borossilicato, interna e externamente,
com uma soluo de detergente tipo Extran alcalino 0,1%, com auxlio de um gaspilho;
2. Enxaguar de oito a dez vezes com gua corrente, at que visualmente no se perceba o resduo do detergente;
3. Lavar com uma soluo de cido sulfrico/cido ntrico 10% (6+1);
4. Enxaguar de oito a dez vezes em gua corrente e 1 vez em gua
destilada ou deionizada;
4
1.
64
Acondicionar as tampas e os frascos com a boca voltada para baixo,

para retirar o excesso de gua;
6. Secar em estufa temperatura acima de 50C;
7. No necessria a posterior esterilizao dos recipientes.
5.
4
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Fibras de Blue Rayon

@

*X

$ @mente ao tiosulfato de cobre ftalocianina) em bquer com gua deionizada usando basto de vidro por 5 minutos, por quatro vezes;
@
$
"

$

Q X[89 @@Y

em agitador mecnico por 1 hora;
Aps esse perodo, descartar a soluo de solventes. Repetir essa
etapa por duas vezes;

$
*QX[89@@Y

uma noite;
@
*

9
6$
ocasionalmente;

*
@

A soluo de metanol deve ser concentrada em evaporador rota

@
Q
Q@

que possam interferir na anlise (branco);

%
*

$%
3.3.2 Transporte e Armazenamento

O transporte das amostras coletadas deve ser realizado sob refrigerao, assim como a etapa de armazenamento at o momento de ensaio,
observando as excees especificadas no Anexo 1.
3.4 {?"#

w"
Os trabalhos de campo so realizados em condies e locais muito
variados, podendo resultar em acidentes. Para que os riscos de
acidentes possam ser reduzidos, deve-se alertar e treinar os tcnicos
envolvidos, providenciando os equipamentos de proteo individuais
(aventais, botas, luvas, culos de segurana, capa de chuva, protetor
solar) e coletivos adequados ao trabalho a ser realizado, bem como ter
disponvel uma caixa de primeiros socorros.
65
A seguir, so feitas consideraes e recomendaes para algumas das

atividades que oferecem maiores riscos de acidentes para os trabalhos
em campo.
3.4.1 Transporte Rodovirio

O prprio deslocamento do tcnico e dos equipamentos ao local de
amostragem oferece grandes riscos. No s os inerentes ao deslocamento, como os decorrentes do transporte concomitante do material
de coleta, principalmente quando houver embarcao, equipamentos
especiais, frascos de vidro e reagentes para a preservao de amostras.
Esses materiais no devem ser transportados junto aos passageiros.
Recomenda-se armazenar adequadamente os materiais, de preferncia, no porta-malas ou na caamba do veculo. A capacidade mxima de
peso e volume do veculo deve ser observada. obrigatria a utilizao
de cinto de segurana, mesmo em pequenos trajetos, conforme exige a
legislao vigente.
Os frascos que acondicionam os reagentes utilizados na preservao
de amostras devem ser preferencialmente de plstico e com batoques
de vedao para impedir vazamentos. No caso de serem de vidro, os
frascos devem ser calados e protegidos adequadamente para no se
quebrarem durante o transporte.
3.4.2 Acesso aos Pontos de Amostragem

Locais de difcil acesso e prximos a pontes, estradas movimentadas e
locais de trfego intenso de mquinas etc., podem aumentar a probabilidade de acidentes, muitas vezes evitveis. Uma ponte, por exemplo,
pode constituir-se em caminho mais fcil para se atingir o meio de um
rio e retirar a amostra. Na sua maioria, porm, esses locais so muito
movimentados, h estreitamento de pista e pequena faixa de segurana para pedestres, o que dificulta a parada do veculo e oferece riscos
aos tcnicos que executam os trabalhos. Por isso, a coleta em pontes
deve ser precedida da colocao de dispositivo de sinalizao adequado, que proporcione proteo contra veculos em trnsito.
Regies com muita vegetao, nas quais o acesso aos pontos de coleta
realizado por meio de trilhas, oferecem maior risco de picadas de
insetos e mordeduras de cobras ou outros animais. Portanto, nesses
66
locais a ateno deve ser redobrada e deve-se usar vestimenta

adequada, como calas compridas, botas, perneira, chapu etc.
Repelentes para insetos podem ser utilizados, desde que sejam usadas
luvas durante o manuseio das amostras para ensaios qumicos, a fim de
evitar a contaminao das mesmas.
3.4.3 Embarcaes
A utilizao de embarcaes para coleta de amostras em rios, represas,
reservatrios, reas estuarinas e no mar muito frequente. Por isso, a
verificao das condies gerais da embarcao, da carreta e dos seus
acessrios importante para se evitar atrasos e acidentes durante o
trajeto e o percurso embarcado at o local de amostragem. Devem ser
verificadas as condies de funcionamento do conjunto de equipamentos. So itens obrigatrios: motor, tanque e mangueira de combustvel,
bateria, tampes de casco, remos, colete salva-vidas em nmero suficiente para toda a tripulao, ncora, extintor de incndio, cordas, luzes de sinalizao noturna da embarcao e da carreta e estepe para
a carreta. Recomenda-se ainda outros acessrios, como bssola, ecobatmetro, GPS, telefone celular, sistema de radiocomunicao, sinalizadores de fumaa colorida, alm de peas de manuteno bsica do
motor (velas, caixa de ferramentas, leo 2 tempos para o motor etc.).
Toda documentao da embarcao e da carreta, bem como a habilitao nutica dos operadores das embarcaes, devero estar em ordem. Deve-se levar em considerao a compatibilidade da localizao
dos pontos com a categoria da habilitao nutica do condutor.
Quando o trabalho exigir a operao da embarcao longe da costa
ou em reas, rios ou reservatrios, sob jurisdio da Marinha do
Brasil necessrio estabelecer um ponto de apoio em terra (marinas,
barragens, clubes, Capitania dos Portos, Polcia Militar/Ambiental,
etc.), informando o plano de trabalho e a rota de navegao, um nmero
de celular ou a frequncia do rdio para contato. Recomenda-se, ainda,
obter informaes prvias sobre as condies meteorolgicas da
regio e ter em mos mapas ou cartas nuticas e tbua de mars. No
caso de amostragem de longa durao, importante ter a bordo gua
potvel e alimentao leve.
Recomenda-se que a equipe de trabalho tenha treinamento em natao bsica e sobrevivncia de nufragos.
67
3.4.4 Manipulao de Reagentes e Solues

A preservao de amostras com a utilizao de reagentes qumicos tem
provocado inmeros acidentes. Deve-se evitar a manipulao inadequada e a tcnica de pipetar o reagente com auxlio da boca, evitando-se com isso queimaduras nas mos, corpo e nos ps, ataque ao esmalte
dos dentes e a ingesto acidental do reagente.
A quebra de frascos e pipetas de vidro poder ser evitada com a utilizao de frascos plsticos, tipo conta gotas ou pissete dosadoras, os
quais permitem adicionar diretamente na amostra a quantidade necessria de reagente, sem o emprego de pipetas.
3.4.5 " "+`? "?" "" "

Resduos Slidos
Quando os pontos de amostragens esto localizados dentro das indstrias, os tcnicos envolvidos estaro expostos a todos os riscos de acidentes inerentes quela rea. Portanto, devem receber treinamento
adequado para a sua permanncia, bem como estar munidos de equipamentos de segurana exigidos pela indstria.
Como os efluentes lquidos podem apresentar diversos compostos
qumicos e/ou constituintes infecto-contagiosos, os tcnicos devem
estar preparados para manuse-los de forma segura, prevenindo-se
contra todos os tipos de acidentes, quer do ponto de vista txico ou
explosivo, quer do ponto de vista de contaminao e riscos biolgicos.
Como exemplo, efluentes contendo cianeto e arsnio apresentam toxicidade elevadas, mesmo em baixas concentraes; solventes, em geral,
apresentam risco de exploso; vrios compostos qumicos podem ser
carcinognicos ou apresentar risco de queimadura; esgotos e resduos
domsticos podem conter microrganismos patognicos.
Portanto, os tcnicos precisam ser treinados para as situaes de
emergncia que podem ocorrer nos locais das amostragens, como as
indstrias, as estaes de tratamento de esgotos, os aterros sanitrios
e industriais e as plantas de incinerao de resduos slidos.
68
3.5 Preparo de Solues e Reagentes

3.5.1 Formol Neutralizado
importante destacar que existem diferenas entre as solues
de formol (formalina) e de formaldedo. O formol contm em sua
composio em mdia 40% de formaldedo. Por esse motivo uma
soluo de formol 10% (formalina 10%) equivale a uma soluo de
formaldedo a 4%. Portanto, para fins de padronizao no texto deste
Guia todas essas solues foram expressas com base em formol.
a) !

$
X ton e zooplncton):
Adicionar 5g de bicarbonato de sdio (ou 20g de tetraborato de
sdio) em 1L de formol P.A.
b) Procedimento para o emprego em amostras de bentos:
Medir o pH do formol com fita indicadora de pH ou pHmetro;
Acrescentar, aos poucos, quantidade suficiente de bicarbonato
de sdio (ou tetraborato de sdio) para que o pH torne-se 7.
3.5.2 Formol Neutralizado, com Sacarose

Diluir 40g de sacarose (acar) em 1L de formol P.A. previamente neutralizado com bicarbonato de sdio ou tetraborato de sdio.
3.5.3 Meio de Transporte Cary e Blair (Tcnica de Moore)

Frmula: 1,5g de tioglicolato de sdio (C2H3NaO2S),1,1g de fosfato de
sdio dibsico anidro (Na2HPO4), 5g de cloreto de sdio (NaCl) e 5g
de agar.
4
4
4
4
4
!
$

X

*
4

>Y
cante e acrescentar 991mL de gua destilada;
Aquecer em banho-maria fervente, com agitao constante at
completa dissoluo, mantendo o meio por mais 15 minutos, para
esteriliz-lo;
Estabilizar o meio de cultura a uma temperatura de 50oC a 55C,
em banho-maria;
Adicionar, assepticamente, 9mL de cloreto de clcio (CaCl2)1%;

^6]867"
69
Distribuir volumes de 300mL em sacos plsticos estreis de 20L;

Fechar os sacos e etiquetar com o nome do meio de cultura, nome
do responsvel pelo preparo, datas de preparo e validade e o nmero do lote;
4 Armazenar em refrigerador de 2oC a 8C;
4 Vlido por 15 dias.
4
4
3.5.4 Soluo de Acetato de Zinco (Zn (C2H3O2)2) 2M

4
4
4
4
4
Pesar 220g de acetato de zinco em bquer de 1L;

Adicionar cerca de 500mL de gua destilada;
Agitar at dissoluo;
Transferir para balo volumtrico de 1L;
Completar o volume com gua destilada.
3.5.5 Soluo de cido Clordrico (HCl) 1+9 (10%)

Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 600mL
de gua destilada;
4 Acrescentar, vagarosamente, 100mL do cido concentrado;
4 Completar o volume para 1L com gua destilada.
4
3.5.6 Soluo de cido Clordrico (HCl) 1+1 (50%)

de gua destilada;
4 Acrescentar, vagarosamente, 500mL do cido concentrado;
4
3.5.7 Soluo de cido Ntrico (HNO3) 1+9 (10%)

de gua destilada;
4 Acrescentar, vagarosamente, 100mL do cido ntrico concentrado;
4
3.5.8 Soluo de cido Ntrico (HNO3) 1+1 (50%)

de gua destilada;
4 Acrescentar, vagarosamente, 500mL do cido ntrico concentrado;
4
70
3.5.9 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) 1+1 (50%)

de gua destilada;
4 Acrescentar, vagarosamente, 500mL do cido sufrico concentrado;
4
3.5.10 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) 1+9 (10%)
Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 600 mL

de gua destilada;
4 Acrescentar, vagarosamente, 100mL de cido sulfrico;
4 Completar o volume de gua destilada para 1L.
4
3.5.11 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) / cido Ntrico

(HNO3) 10% (6+1)
4
Misturar 6 partes da soluo de cido sulfrico 10% e 1 parte da

soluo de cido ntrico 10%.
3.5.12 Soluo Alcali-Iodeto-Azida

Em balo volumtrico de 1L, dissolver 500g de hidrxido de sdio
(NaOH) P.A. e 150g de iodeto de potssio (KI) P.A. em gua destilada (em banho de gua fria ou gelo);
4 Acrescentar 10g de azida sdica (NaN3), dissolvidos em 40mL de
gua destilada;
4
NOTA: No caso de amostras de gua do mar, no necessria a adio

de azida sdica.
3.5.13 Soluo de lcool 70 GL

4
4
Diluir o lcool comercial 96 GL em gua destilada;

>
$

X$ 3
Lussac), at que se atinja 70GL.
3.5.14 Soluo de Carbonato de Magnsio (MgCO3) 1%

4
U@
9$
$@
%
100mL de gua destilada.
71
3.5.15 {w?w w

(CaCl2.2H2O) 1%
Em um balo volumtrico de 100 mL dissolver 1g de cloreto de

clcio dihidratado em 100mL de gua destilada;
4 Homogeneizar at a completa dissoluo do sal.
4
3.5.16 Soluo de Corante Rosa-de-bengala 0,1%

4
Adicionar 1g do corante em 1L de soluo de formol 10% ou etanol

70-95oGL.
3.5.17 Soluo de Detergente Alcalino 0,1 %

de gua destilada;
4 Acrescentar 1mL do detergente;
4
3.5.18 Soluo de Detergente Enzimtico 0,5 %

de gua destilada;
4 Acrescentar 5mL do detergente;
4 Completar o volume de gua destilada para 1L.
4
3.5.19 Soluo de EDTA (C10H16N2O8) 15%
Em balo volumtrico de 1L, dissolver 150g de EDTA em gua

destilada;
4
3.5.20 Soluo de Formol 4%

4
Em uma proveta, diluir 1 parte de formol P.A. em 24 partes de gua

destilada.

4

destilada.

4
72

destilada.

4

destilada.
3.5.24 Soluo de Fluoreto de Potssio 20%

@
9@
788$

(KF.2H20) P.A. em gua destilada.
4
3.5.25 Soluo de Hidrxido de Sdio (NaOH) 10M

Dissolver 400g de hidrxido de sdio (NaOH) em 500mL de gua
destilada;
4 Transferir para um balo volumtrico de 1L;
4
3.5.26 Soluo de Amido

4
4
4
4
4
Pesar separadamente 2g de amido solvel P.A. e 0,2 g de cido saliclico P.A.;

Transferir para bquer de 200mL. Adicionar 10mL de gua deionizada e agitar at dissoluo;
Adicionar 95mL de gua deionizada quente;
Levar a aquecer at a fervura, durante 5 minutos;
Deixar esfriar e acondicionar em frasco de polipropileno, ao abrigo
da luz.
3.5.27 Soluo de Lugol (iodo ressublimado e iodeto de

potssio - KI)
Adicionar 10g de iodo puro, 20g de iodeto de potssio e 20g de
cido actico glacial, em 200mL de gua destilada;
4 Manter ao abrigo da luz.
4
3.5.28 Soluo Metanol/Amnio (50+1 v/v)

4
Acrescentar 20mL de hidrxido de amnia a 1L de metanol.
3.5.29 Soluo de Sulfato Manganoso 2,14 M

4
4
Dissolver 400 g de MnSO4.2H2O em gua destilada;

Filtrar e completar o volume com gua destilada para 1L em balo
volumtrico.
73
3.5.30 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 0,0125 N

padronizada
4
4
4
4
4
Pesar 3,1025g de tiossulfato de sdio P.A. em bquer de 500mL;

Adicionar cerca de 400mL de gua deionizada e agitar at dissoluo;
Transferir para balo de 1000mL;
Adicionar 1 g de Hidrxido de Sdio P.A. e agitar at dissoluo;
Completar o volume para 1L com gua deionizada, homogeneizar e
guardar em frasco escuro.
3.5.31 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 3%
Em balo volumtrico de 1L dissolver 30 g de tiossulfato de sdio

(Na2S2O3) em 100mL de gua destilada;
4
3.5.32 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 10%
Em balo volumtrico de 1L dissolver 100g de tiossulfato de sdio

(Na2S2O3) em 100mL de gua destilada;
4
3.5.33 Soluo Transeau

Acrescentar seis partes de gua destilada, trs partes de lcool etlico
95o GL e uma parte de formol P.A..
74
CAPTULO
4 CONTROLE DE QUALIDADE NA AMOSTRAGEM

A amostragem considerada como um fator crtico em todo o processo
analtico; na verdade frequentemente o ponto mais frgil do processo e necessita de cuidado especial. A preocupao com a real influncia
da coleta nos resultados tem sido cada vez maior, dentre outros motivos, em consequncia dos processos de acreditao dos ensaios na
NBR ISO/IEC 17.025.
Vrios rgos internacionais tm proposto formas de garantir a qualidade dos procedimentos de coleta, como por exemplo, o EURACHEM
que, em 2007, publicou o documento Medidas de incerteza de amostragem um guia de mtodos e estratgias (RAMSEY & ELLISON, 2007),
propondo uma metodologia para a estimativa da incerteza associada
aos procedimentos de coleta. Seguindo essa tendncia o INMETRO
publicou, no final de 2009, os critrios para acreditao da amostragem de guas e matrizes ambientais com o intuito de orientar os laboratrios que esto requerendo acreditao nessa rea (INMETRO
NIT-DICLA-057, 2009).
Os controles de qualidade do processo de amostragem devem ser
estabelecidos antecipadamente atividade de coleta e ter seus critrios
de aceitao e de tomada de deciso definidos. A utilizao destes
controles deve ser planejada considerando os analitos de interesse, as
caractersticas da amostragem e os custos envolvidos. Esse planejamento
fundamental para garantia da integridade e representatividade da
amostra que trazida ao laboratrio para anlise.
Para se estabelecer um sistema de qualidade da amostragem
consistente, vrios aspectos devem ser considerados, uma vez que
influenciam direta e indiretamente na representatividade da amostra.
Esses aspectos dizem respeito adoo de procedimentos que
CONTROLE DE QUALIDADE NA AMOSTRAGEM
75
consigam detectar interferncias que possam ocorrer no processo de

amostragem. Os principais controles de qualidade adotados durante a
amostragem so descritos a seguir.
4.1 Brancos
So controles realizados para avaliar a presena de contaminao em
partes especficas dos procedimentos de coleta. Normalmente usada
gua deionizada, com comprovada iseno dos compostos que sero
avaliados. Nesse tipo de controle, a presena de resultados positivos
para um analito especfico pode indicar que ocorreu contaminao similar nas demais amostras.
4.1.1 Branco de Campo e de Viagem

O branco de campo usado para a verificao de contaminaes ambientais que podem ser adicionadas s amostras durante os procedimentos de coleta. O branco de viagem verifica a ocorrncia de contaminao durante o transporte (laboratrio campo laboratrio).
So preparados no laboratrio trs frascos de branco (A, B, e C) com
gua deionizada. O frasco A encaminhado imediatamente para anlise e os demais vo a campo. No ponto de coleta, o frasco B permanece na caixa de transporte, enquanto o frasco C retirado, aberto e
exposto ao ambiente durante todo o procedimento de coleta. Ao final,
o frasco C fechado, armazenado na caixa de transporte juntamente
com as demais amostras coletadas e o frasco B, sendo todos submetidos ao processo analtico requerido. Recomenda-se a realizao de
pelo menos um controle (trs frascos) para cada viagem realizada. Os
resultados de cada controle so obtidos conforme descrito a seguir:
(B A) = Branco de viagem
(C B A) = Branco de Campo
4.1.2 Branco de Equipamentos

Os procedimentos de branco de equipamento podem ser usados tanto para avaliar a eficincia da lavagem dos equipamentos de coleta em
laboratrio como em campo (rinsagem). No caso da realizao em
campo, serve para verificar a eficincia da lavagem realizada nos equi-
76
pamentos entre os pontos de coleta, minimizando a possibilidade de

contaminao cruzada.
Para sua realizao, utiliza-se gua deionizada, que ao fim do processo de lavagem usada como ultima gua de enxgue do equipamento,
devendo ser coletada e analisada para o(s) parmetro(s) de interesse.
As amostras devem apresentar resultados abaixo do limite de quantificao do mtodo.
4.1.3 Branco de Frascaria

usado para verificar a possibilidade da contaminao da amostra pelos frascos de coleta. Podem ser usados para verificar a presena de
contaminao de frascos descartveis ou para avaliar a eficincia da
lavagem de frascos reutilizveis.
Aps preservao dos frascos (quando pertinente ao mtodo), os mesmos so encaminhados ao(s) laboratrio(s), para realizao dos ensaios de interesse, devendo apresentar resultados abaixo do limite de
quantificao do mtodo analtico.
No caso do ensaio de branco para compostos orgnicos semi-volteis,
os frascos devem ser preenchidos com solvente (usualmente o
diclorometano) e encaminhados para o laboratrio para verificar
a ausncia de contaminao, indicando assim a eficincia do
procedimento de lavagem.
4.1.4 Branco de Sistema de Filtrao

Para anlise de metais dissolvidos deve-se averiguar se a unidade
filtrante, a ser empregada na filtrao das amostras em campo, est
isenta dos analitos de interesse.
Retira-se uma quantidade representativa de filtros do lote (aproximadamente 1% a 4% do total), que so pr-condicionados pela filtrao
de 50mL de gua deionizada, volume esse desprezado. Em seguida,
filtra-se 100mL de gua deionizada, que deve ser coletada, preservada
e encaminhada ao laboratrio para anlise dos analitos de interesse.
O lote ser aprovado se os resultados estiverem abaixo do limite de
quantificao.
77
4.2 Duplicata de Campo

usada para medir a preciso e repetitividade dos procedimentos de
coleta, atravs da comparao dos resultados da anlise de duas amostras coletadas de um mesmo local, que so encaminhadas ao laboratrio como amostras cegas (USEPA, 2005).
So retiradas duas amostras ao mesmo tempo de um local (R1 e R2), as
quais so encaminhadas ao laboratrio e analisadas. A variao entre
os resultados das duplicatas (RPD) calculada de acordo com a frmula a seguir (AUSTRALIA, 2007):
Equao 2
De um modo geral, so consideradas normais variaes no resultado
na ordem de 20% (AUSTRALIA, 2007). Porm possvel e em alguns
casos recomendvel definir outros critrios de avaliao, como por
exemplo, no caso de ensaios biolgicos, onde devem ser avaliados e
estabelecidos, durante a validao, critrios adequados realidade
do ensaio.
4.3 Temperatura de Transporte e Armazenamento

Na maioria dos casos, as amostras devem ser transportadas sob
refrigerao. Procedimentos de controle de temperatura devem
ser realizados para garantir que o sistema adotado eficiente, tais
como: medida da temperatura de frasco controle (gua deionizada
ou glicerina) ou utilizao de datalog na caixa trmica, equipamentos
esses adequadamente calibrados. A temperatura das amostras deve
ser avaliada no momento de chegada ao laboratrio pela medida
da temperatura do frasco controle ou registros do datalog e o valor
obtido deve ser relacionado temperatura da gua e do ambiente no
momento da coleta e ao tempo de armazenamento.
As amostras devem ser analisadas o mais rapidamente possvel, quando
da sua chegada ao laboratrio; entretanto, em determinadas situaes,
as amostras que possuem prazo de validade mais longo podem ser
armazenadas em cmara fria ou geladeira at o momento do ensaio,
sendo que a temperatura desses equipamentos deve ser controlada
por termmetros calibrados e adequadamente registrados, para fins
de rastreabilidade.
78
4.4 Incerteza da Amostragem

O termo incerteza da amostragem usado para expressar as variabilidades temporal, espacial e inerente da amostra coletada. Para o clculo de incerteza de amostragem, uma das metodologias aplicadas a publicada pelo EURACHEM em 2007, a qual baseada na replicao dos
procedimentos de amostragem ou partes deles (rplica de amostras),
conforme mostra a Figura 8. Esse mtodo o mais adequado para fins
ambientais, pois considera que os analitos investigados podem variar
em funo do tempo e do espao.
PONTO DE COLETA
AMOSTRA 1
ANLISE 1
AMOSTRA 2
ANLISE 2
ANLISE 3
ANLISE 4
Figura 8. Esquema de replicata para clculo de incerteza da amostragem.
Clculo da incerteza
A incerteza obtida por meio do desvio padro relativo (RSD), que
calculado pela diferena relativa entre as duplicatas de cada etapa do
esquema proposto na Figura 8 (NORWAY, 2007, p. 18-19).
4
Cada duplicata produz os resultados xi1 e xi2.

O valor absoluto Di (da diferena entre cada duplicata calculado para
cada etapa:
Di = | xi1 xi2 |
Equao 1
79
A seguir calcula-se a mdia
de cada duplicata:
Equao 2
A partir das equaes 1 e 2, calcular a diferena relativa, di , atravs da
equao:
A seguir, calcular a mdia da diferena relativa, d, das n duplicatas realizadas
O desvio padro relativo, RSD, calculado usando a constante estatstica de 1,128 (quando se analisa duplicatas):
A Tabela 2 resume os controles de qualidade requeridos no processo

de amostragem.
80
81
No Aplicvel
Item 4.1.3
Item 4.1.4
No
Aplicvel
Contaminao nos
frascos e avaliao
dos procedimentos de
lavagem
Contaminao durante
o procedimento de

Q
Preciso e
repetitividade dos
procedimentos de
coleta
Branco de
frascaria
Branco do
sistema de

Q
Duplicata de
Campo
(Fonte: EPA - Austrlia, 2007 adaptado)
Branco de
equipamentos
Contaminao cruzada
Preparo de
3 frascos A,
B e C (item
4.1.1)
Ao no
laboratrio
Validao da
lavagem
item 4.1.2
Contaminao durante
o transporte
Contaminao
ambiental
Contaminao
investigada
Resduos aps lavagem

dos equipamentos de
coleta
Branco de campo
e de viagem
Tipo de Controle
Item 4.2
No Aplicvel
1 para cada 20 amostras

(5% do total)
1% a 4% do lote avaliado
1% a 4% do lote avaliado
toda vez que o

equipamento for usado
Lavagem entre pontos

de coleta item 4.1.2
No Aplicvel
1 vez por ano (quando

utilizado 1 equipamento
por ponto de coleta)
1 jogo (3 frascos) por

atividade ou a cada 10
amostras
Recomendao mnima
No Aplicvel
Branco de Viagem: levar fechado a campo,

em caixa trmica, juntamente com
as demais amostras. No retirar nem
manusear em campo. Transportar ao
laboratrio para anlise.
Branco de Campo: abrir o frasco de coleta

e exp-lo ao ambiente pelo mesmo
perodo que a amostra. Fechar o frasco e
transport-lo ao laboratrio para anlise.
Ao em campo
Tabela 2. Resumo dos controles de qualidade requeridos para amostragem
Determinao de Slidos Sedimentveis

em campo - Cone Imhoff- Foto Carlos
Jesus Brando/CETESB.
CAPTULO
5 EQUIPAMENTOS DE AMOSTRAGEM
Nesse captulo so apresentados os diversos tipos de equipamentos
de amostragem, sendo que as metodologias de coleta e as peculiaridades esto detalhadas nos captulos especficos de amostragem de
guas superficiais, sedimentos, guas tratadas, efluentes lquidos e
corpos hdricos receptores.
Os equipamentos empregados nas determinaes em campo e na medio de vazo sero tratados em captulos especficos.
5.1 Amostradores de Superfcie

5.1.1 Balde de Ao Inox
O balde normalmente utilizado para amostragem na superfcie de
corpos dgua em geral, deve ser confeccionado em ao inox AISI 316L
polido, para evitar incrustaes nas costuras de solda, e apresentar
volume adequado para a finalidade da amostragem (Fig. 9).
Deve ser autoclavado para as coletas microbiolgicas (em poos
freticos e reservatrios de gua potvel). Em amostragens onde no
exigida a esterilidade do balde, o mesmo dever ser ambientado com
gua do prprio local, antes da coleta propriamente dita.
EQUIPAMENTOS DE AMOSTRAGEM
83
Figura 9. Balde de ao inox (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).
5.1.2 Coletor com Brao Retrtil

utilizado em amostragem de guas superficiais, como em sadas
de efluentes, em locais de coleta de difcil acesso por meio de outros
equipamentos (Fig. 10). O brao retrtil permite que se alcance o local
desejado para coleta, mesmo permanecendo na margem. Dependendo dos ensaios a serem realizados, o copo coletor pode ser de plstico
(plstico inerte), acrlico ou ao inox AISI 316L, e deve ser liso ou polido
para evitar incrustraes.
(A)
(B)
(C)
Figura 10. Coletor com brao retrtil: (A) Vista lateral do equipamento montado; (B) Vista do
balde e do brao retrtil desmontado; (C) Vista superior do balde coletor (Fotos: Carlos Jesus
Brando/CETESB).
84
5.1.3 Batiscafo
Esse equipamento empregado para coletar amostras que no podem
sofrer aerao, como aquelas destinadas aos ensaios de oxignio dissolvido
e sulfetos, e permite coletar amostras superficiais ou subsuperficiais at
30 cm da lmina dgua. Coletas abaixo desta profundidade devem ser
realizadas com amostradores de profundidade.
Consiste de um tubo cilndrico, confeccionado em ao inox AISI 316L
polido (Fig. 11), em cujo interior coloca-se um frasco de vidro de boca
estreita e tampa esmerilhada de 300mL (frasco de DBO). A gua a ser
amostrada entra por um tubo localizado na parte superior central da
tampa e atinge o interior do frasco, permitindo que o ar contido seja
expulso por um orifcio lateral medida que ele vai sendo preenchido
com gua. O volume do batiscafo permite uma renovao da gua dentro do frasco de DBO, removendo assim todo o ar que poderia alterar
os resultados.
(A)
(B)
(C)
Figura 11. Batiscafo: (A) Batiscafo fechado; (B) Esquema ilustrativo em corte do equipamento;
(C) Batiscafo aberto (Fotos: Carlos Jesus Brando/CETESB).
5.2 Amostradores de Profundidade (coluna dgua)

5.2.1 Garrafas de van Dorn e de Niskin
Esses equipamentos permitem a coleta de amostras na superfcie e em
diferentes profundidades. Os tipos mais empregados so van Dorn e
Niskin. No so indicados para ensaios que requerem grandes volumes
de amostra e para coleta de organismos de maior mobilidade.
85
As garrafas podem ser confeccionadas com tubo cilndrico de PVC

rgido, acrlico ou de ao inox AISI 316L polido com capacidade variadas,
por exemplo de 2L, 6L e 10L (Fig. 12 e Fig. 13).
Figura 12. Esquema de uma Garrafa de van

Dorn (Fonte: CETESB, 1988).
Figura 13. Garrafa de Niskin (Foto: Carlos J.

Brando /CETESB).
Mergulha-se a garrafa aberta em ambas as extremidades e, aps atingir a profundidade desejada, solta-se o mensageiro (Fig.14), que fecha
hermeticamente o amostrador. Essas garrafas podem ser utilizadas
para coleta tanto de fluxo vertical como horizontal, dependendo do sistema de desarme (Fig.15 e Fig.16). Para estudos de microdistribuio,
devem ser empregadas as garrafas de fluxo horizontal, que podem ser
arranjadas em srie.
(A)
(B)
Figura 14. Mensageiro: (A) Equipamento industrializado; (B) Mensageiro manufaturado

(Fotos:Carlos Jesus Brando/CETESB).
86
(A)
(B)
Figura 15.5 [%f

;>5 ;+>5
(Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).
(A)
(B)
Figura 16. 5 [%f '

! ;> 5 ;+> 5
montada (Fotos: Carlos Jesus Brando /CETESB).
5.2.2 Armadilha de Schindler-Patalas (Trampa)

utilizada em estudos qualitativos e quantitativos da comunidade
planctnica. Confeccionada em acrlico transparente (Fig. 17), tem o
formato de cubo ou paraleleppedo e capacidades variveis (geralmente entre 5 e 30L). Apresenta uma rede de nilon em um de seus lados,
com dimetro de poro conhecido, por onde a gua do local filtrada e
os organismos planctnicos ficam retidos. Pode ser utilizada para obter amostras pontuais ou integradas da coluna dgua, sendo a operao deste equipamento detalhada no Captulo 6 (item 6.1.7.4 Comunidade Zooplanctnica).
87
Figura 17. Armadilha de Schindler-Patalas (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).
5.2.3 Bomba de gua

Apresenta a vantagem de se obter grandes volumes de gua e em diferentes profundidades e muito empregada na coleta de organismos
zooplanctnicos. Para aplicao, submerge-se uma mangueira flexvel
ligada a uma bomba de gua at a profundidade desejada, deixando-se
passar gua do local em abundncia. Sua operao est descrita com
mais detalhes no Captulo 6 (6.1.7.4 Comunidade Zooplanctnica).
5.2.4 Redes de Plncton

H vrios tipos de redes de plncton e, apesar de apresentarem
melhorias importantes ao longo do tempo, modelos simples ainda so
muito utilizados (Fig. 18).
A rede tem a forma de um cone e as costuras devem ser feitas com
cuidado, a fim de que os organismos no fiquem retidos nas dobras.
Na extremidade inferior encaixa-se um copo (Fig. 19), que pode
ser rosqueado e apresentar orifcios vedados com malha de nilon
adequada para a reteno dos organismos planctnicos em estudo e
para diminuir o acmulo de gua no interior do copo.
88
(B)
(A)
Figura 18. Rede de plncton: (A) Vista frontal da rede e copo coletor; (B) Vista lateral da rede
e copo coletor (Fotos: Carlos Jesus Brando /CETESB).
(A)
(B)
Figura 19. Copo coletor de rede de plncton: (A) Inox; (B) PVC (Foto: Carlos Jesus Brando /
CETESB).
As redes mais indicadas so aquelas confeccionadas com malha de

nilon monofilamento, que no so facilmente suscetveis s alteraes
e deformidades. Trs cordis so amarrados equidistantemente
na extremidade superior da rede (aro da boca de rede), aos quais se
prende uma corda, que deve ser graduada quando se quer conhecer
89
a profundidade do arrasto. Redes pequenas podem apresentar uma

haste lateral de tamanho fixo, ou um brao retrtil, para estudos
qualitativos de organismos que vivem prximos s margens ou em
vegetao.
As caractersticas da rede (comprimento, largura, dimetro da boca,
modelo, dimetro do poro da malha etc.) e o tipo de arrasto (horizontal,
vertical, oblquo ou estratificado) devem ser definidos de acordo com
o objetivo do estudo e com as caractersticas do local, especialmente o
tamanho da abertura da malha, que vai variar em funo da classe de
organismos que se deseja avaliar. Deve-se lembrar que, por mais finas
que sejam as malhas, a capacidade da rede em reter os organismos est
limitada a uma frao do plncton total, e no coleta toda a variedade
de organismos existentes na massa dgua.
Para estudos qualitativos, uma forma simples de coletar o plncton
mergulhar a rede na gua, retirando-a e deixando escorrer a gua
retida atravs da malha.
Para medida quantitativa do plncton, necessrio medir a quantidade
de amostra a ser filtrada, o que pode ser feito por meio de uma proveta,
balde de inox AISI 316L polido ou de um recipiente qualquer de volume aferido. O ideal acoplar um fluxmetro calibrado (Fig. 20) entre o
centro e o aro da boca da rede, que medir com maior preciso o volume de gua que passa pela rede.
A rede amplamente empregada para estudos qualitativos do fitoplncton e quali-quantitativos do zooplncton; informaes quantitativas do fitoplncton geralmente so obtidas com amostras coletadas com
garrafas. Detalhes sobre a coleta com redes de plncton encontram-se no
Captulo 6 - Comunidades Fitoplanctnica e Zooplanctnica.
90
Figura 20. Fluxmetro (Foto: Csar Augusto M. Roda/CETESB).
5.3 Amostradores de Fundo

Um bom amostrador de fundo (sedimentos) deve obter amostras
representativas do sedimento, sendo que a escolha do equipamento
mais apropriado depende das caractersticas do sedimento, volume e
eficincia necessrios, e objetivos do estudo. Adequaes no desenho
do equipamento, controle na velocidade de descida e conhecimento
prvio do local so procedimentos que podem auxiliar para um bom
trabalho de amostragem.
A amostragem de sedimentos pode ser realizada utilizando-se
pegadores ou testemunhadores (core sampler ou corer), que devem
ser preferencialmente usados sobre uma superfcie de apoio (ex.:
barco ou plataforma). Em geral, pegadores so utilizados em estudos
da distribuio horizontal de variveis fsicas, qumicas e biolgicas dos
sedimentos, enquanto que os testemunhadores adequam-se a estudos
da distribuio vertical (em perfil) dessas mesmas variveis. Redes,
delimitadores e substratos artificiais so amostradores exclusivos da
biota aqutica associada aos substratos (bentos).
5.3.1 Pegador de Ekman-Birge

Este tipo de amostrador um dos mais utilizados em reservatrios,
tanto pela facilidade de operao do equipamento, quanto por sua eficincia, e adequado para avaliao da contaminao de sedimentos
finos de ecossistemas aquticos. Como se trata de um equipamento
muito leve, no indicado para locais com correnteza moderada ou
forte e em substrato duro.
91
O desenho original foi feito por Ekman em 1911, posteriormente

descrito por Birge em 1922 e modificado por Lenz em 1931 e 1932
(OSullivan e Reynolds, 2004).
O pegador Ekman-Birge (Fig.21) constitudo por uma caixa, confeccionada preferencialmente em ao inoxidvel AISI 316L polido, onde
se prendem duas garras em forma de concha e cujo mecanismo de fechamento funciona por meio do uso de mensageiro. No topo da caixa
esto inseridas, por meio de dobradias, duas portinholas que se abrem
na descida do pegador, para que ele ganhe velocidade, tenha melhor
fixao no sedimento e previna a formao de ondas de choque. Essas
portinholas se fecham na subida, prevenindo a lavagem da superfcie
do sedimento e o extravasamento do material coletado.
(A)
(B)
Figura 21. Pegador Ekman-Birge: (A) Equipamento desmontado; (B) Equipamento montado
(Fotos: Csar Augusto M. Roda/CETESB).
O tamanho padro possui as dimenses de 15cm de largura x 15cm de

comprimento x 15cm de altura, mas pode ser encontrado em verses
maiores (15cm x 15cm x 23cm, 23cm x 23cm x 23cm e 30cm x 30cm x
30cm). Verses com altura maior que a largura so aconselhveis para
coleta de sedimentos muito moles.
92
Para armar o pegador, as garras devem ser puxadas para cima e um anel
terminal ligado ao cabo de ao atado s garras deve ser enganchado
em um pino localizado no topo do amostrador. O amostrador deve ser
imerso perpendicularmente ao barco (que dever estar ancorado)
ou plataforma fixa de onde for lanado. Uma vez no fundo, quando
a corda estiver perfeitamente reta e esticada, lanar o mensageiro
pela corda, que ativar o mecanismo de desarme, provocando o fechamento das garras e a captura do sedimento. preciso cuidado na
armao do pegador, pois no existem travas de segurana e o fechamento se d rapidamente.
O pegador Ekman-Birge necessita de pesos adicionais para sua perfeita penetrao em sedimentos mais grossos (arenosos), locais muito
profundos ou com correnteza. Em locais com sedimentos finos (silte e
argila, predominantemente), esse pegador tende a aprofundar-se demais, sendo necessrio lanar o mensageiro assim que este alcana o
fundo, a fim de evitar o transbordamento da amostra.
A verso modificada por Lenz (Fig. 22) permite o fracionamento da
amostra de sedimento. Apresenta fendas horizontais equidistantes
em um dos lados da caixa, onde encaixada uma chapa inteiria
verticalmente para impedir a perda do material coletado. Para o
fracionamento da amostra, essa chapa deve ser retirada e chapas
adicionais de ao inoxidvel (de dimenses similares seco
transversal do pegador) so inseridas horizontalmente nas
fendas laterais, de modo a isolar somente a camada de sedimento
de interesse (desprezando-se o restante).
93
(A)
(B)
Figura 22. Kw ^+

\ !;>X
Z%

(B) Vista frontal do equipamento fechado com fracionador de sedimento inserido (Fotos: Csar
Augusto M. Roda/CETESB).
5.3.2 Pegador Petersen e van Veen

Muito utilizados para amostragem de fundos de areia, cascalho e argila,
so capazes de escavar (morder) substratos grossos devido ao seu
peso elevado e sistema de alavanca. De acordo com a necessidade, como
a existncia de uma forte correnteza no local, o peso do equipamento
pode ser aumentado pela adio de peas metlicas.
So construdos preferencialmente em ao inoxidvel AISI 316L polido
e podem ser confeccionados em vrios tamanhos. Geralmente so
manejados com o auxlio de um guincho fixo na borda da embarcao
ou outro ponto de apoio. Por no possuirem travas de segurana,
requerem cuidado no manuseio.
O pegador Petersen possui um sistema de braos armados em
pantgrafo que, quando tensionados, mantm aberta a caamba
94
por meio de uma trava. Quando o pegador chega ao fundo, a tenso

desaparece e libera a trava. O fechamento do pegador somente ocorre
quando o cabo novamente tracionado para a retirada do pegador
da gua, permitindo a coleta do sedimento. A verso modificada (Fig.
23) alterou o formato da seco transversal da caamba, de circular
(formato original) para semicircular, e a posio dos braos.
Figura 23.

;? J%% _) >
O pegador van Veen difere do Petersen original por possuir um sistema de fechamento formado por corda ou corrente, e caamba em semicrculo (Fig. 24). A fixao dos braos na borda das garras fornece
maior estabilidade na descida e no fechamento deste pegador, com
relao ao pegador Petersen original. A presena de orifcios no topo
da caamba minimiza a formao de ondas de choque na descida, evitando a lavagem da camada superficial do sedimento e o afastamento
da epifauna, e permitindo maior velocidade de operao.
95
Figura 24. Pegador van Veen (Foto: Csar Augusto M. Roda/CETESB).
5.3.3 Pegador Ponar

O pegador Ponar considerado o melhor equipamento para a coleta qualitativa e quantitativa do bentos em substrato grosso (Burton,1992), e o mais frequentemente usado, devido reduo na formao de ondas de choque.
Pode ser encontrado em dois tamanhos: padro (rea de captura
aproximada: 0,052m2) e pequeno (0,023m2) (petite Ponar). O primeiro requer guincho na operao e aconselhado para ambientes
pristinos (maior diversidade bilogica), e o segundo indicado para
ambientes poludos.
Esse amostrador apresenta pino de segurana para manuseio e transporte, e formado por um par de garras que descem tensionadas por
meio de um pino com mola e que fecham quando apropriadamente posicionadas no fundo. Possui placas laterais e uma tela no topo da caamba que previnem a perda de material no fechamento. Sobre a tela
h ainda uma placa de borracha que impede a lavagem e consequente
perda de material durante a subida (Fig. 25). Pesos adicionais podem
ser acoplados ao equipamento a fim de estabilizar a sua descida.
96
Figura 25. Z% ;? _|

\%' KK$+>
5.3.4 Pegador Shipek

Este amostrador consiste em um cilindro de ao, semelhante a um
tambor cortado metade (longitudinalmente), e montado em um
dispositivo provido de molas helicoidais de alta presso (Fig. 26).
Quando as molas so acionadas, o cilindro gira rapidamente em 180,
para dentro do sedimento, recolhendo a amostra superficial com um
mnimo de distrbio. A amostra retirada fica bem protegida do efeito
de lavagem que poderia ocorrer na subida do sistema.
97
(A)
(B)
Figura 26. Pegador Shipek - (A) Desmontado; (B) Montado (Foto: CETESB).
5.3.5 Amostrador em Tubo ou Testemunhador

Apropriado para a coleta de sedimentos finos em gua doce, esturios e mares, em baixas e altas profundidades. considerado o mais
adequado a estudos de dinmica e distribuio vertical dos elementos
qumicos e biolgicos nessa matriz, pois provoca baixa perturbao no
perfil do sedimento coletado e na interface sedimento-gua. mais
eficiente em substrato compactado, com menor teor de gua, onde se
obtm amostras ntegras. Requer embarcao e guincho, embora algumas verses menores possam ser operadas manualmente.
Esse equipamento consiste de um cilindro, geralmente de ao inoxidvel AISI 316L polido, com tubo coletor interno de plstico resistente
e inerte (ex.: acrlico, politetrafluoretileno teflon, cloreto de polivinil
- PVC e polietileno de alta densidade). Pode ser simples ou mltiplo (tubos paralelamente acoplados); de dimetro e comprimento variveis;
gravitacionais ou manuais.
No modelo Kajak-Brinkhurst (K-B) (Fig. 27), encontra-se conectada
uma ponteira cnica de borda cortante na extremidade inferior do cilindro de ao, onde se prende um retentor em forma de meia laranja.
O retentor, fabricado com material flexvel, tem como funo deixar
entrar a amostra e impedir a sua sada. Esse modelo operado com
mensageiro, que o tcnico lana ao sentir que o equipamento penetrou
adequadamente no sedimento. O mensageiro fecha uma vlvula, gerando um vcuo parcial dentro do tubo durante a retirada do amostrador do fundo, que ajuda a reter o sedimento. Para o funcionamento
apropriado do mensageiro, a corda que prende o testemunhador deve
estar esticada verticalmente superfcie da gua.
98
O manuseio adequado normalmente requer dois tcnicos para perfeita estabilidade do equipamento, principalmente em locais com correnteza e mais profundos, e os modelos oceanogrficos, de maior porte,
necessitam de guincho. Podem formar ondas de choque, minimizadas
com a diminuio da velocidade de descida do equipamento que, por
outro lado, pode provocar uma menor profundidade de penetrao.
Em locais com correnteza ou profundos, recomenda-se que o modelo tenha aletas (para proporcionar maior hidrodinamismo) e permita
a utilizao de pesos adicionais (se possvel no meio do equipamento),
para evitar a inclinao durante a sua descida e aumentar a penetrao
no substrato, respectivamente.
?
%/% ' ]w^+
w'%;^+ >;? KK$+>
Maiores informaes sobre os mtodos de fracionamento de amostras

obtidas com testemunhadores podem ser obtidas em MUDROCH e
MACKNIGHT (1994).
Modelos manuais (Fig. 28) so utilizados em ambientes rasos ou por
megulhadores em locais profundos. Podem ser construdos com um
tubo de PVC rgido de 25cm de dimetro e cerca de 50cm de comprimento, ou mais. Na extremidade inferior podem ser feitos recortes,
para facilitar sua penetrao no sedimento, e prximo extremidade
superior podem ser feitos dois recortes horizontais atravs dos quais
se acopla uma barra para facilitar seu manuseio.
99
Figura 28. Pegador Manual (Fonte: CETESB, 1988).
5.3.6 Draga Retangular

A draga retangular apropriada para amostragem por arrasto, geralmente no ambiente marinho. Devido ao seu tamanho, necessita de
guincho e embarcao apropriada, e indicada para a coleta de organismos de maior porte, como crustceos, equinodermos e macroalgas.
Consiste de uma armao metlica, de dimenses variadas, qual se
prende uma rede resistente, com malhas de abertura selecionadas
conforme o material que se quer amostrar (Fig. 29). frente da armao h duas hastes que so unidas a um cabo, por onde feita a descida
e a subida do equipamento. O equipamento lanado na gua e arrastado com o barco em movimento, sendo recomendada a padronizao
do tempo ou distncia percorrida pelo arrasto para a comparao dos
resultados (semiquantitativos).
100
Figura 29. Draga Retangular (Fonte: CETESB, 1988).
5.3.7 Delimitadores
Embora tenham sido concebidos para amostragem quantitativa de
bentos e macrfitas, os delimitadores so mais utilizados em estudos
qualitativos ou semiquantitativos de locais rasos de diversos ambientes
(de 30cm a 70cm de profundidade, em gua doce, esturio e marinho),
costes rochosos e manguezais, por definirem uma rea de coleta. No
caso desses equipamentos, a experincia do profissional fundamental
para que uma boa amostragem seja realizada.
Consistem de uma armao de rea definida, na qual pode estar acoplada uma rede. Quanto menor a malha da rede, maior ser a resistncia correnteza, maior o refluxo e, consequentemente, maior a perda
de material. A malha de 0,25mm retm a maioria dos estdios larvais
de insetos aquticos, mas malhas de 0,50mm a 0,90mm so as mais utilizadas para evitar o refluxo.
O delimitador do tipo Surber (Fig. 30) consiste em uma rede que se
mantm aberta por uma moldura quadrada, perpendicular a outra
moldura de igual tamanho. Quando em operao, a moldura que
suporta a rede fica em posio vertical enquanto que a moldura
horizontal, que corresponde rea de amostragem, pressionada
manualmente contra o fundo. o mais usado e tambm o mais indicado
para a amostragem em locais de difcil acesso, pois dobrvel e mais
leve, o que facilita o seu transporte em terreno acidentado.
101
Figura 30.

$%&;? \%\`%KK$+>
O Hess-Canton (Fig. 31), outro tipo de delimitador, pode ser montado em

tubo de PVC ou acrlico, onde so feitas duas aberturas: uma a ser posicionada para montante, protegida por uma rede, de forma a no permitir contaminao por material indesejado, e a outra, oposta primeira, contm a
rede, em forma de saco em que os organismos so aprisionados. A rea
interna do tubo corresponde rea de amostragem.
Figura 31. Delimitador Hess-Canton (Foto: Helena M. Watanabe/CETESB).
102
Nos amostradores Surber e Hess-Canton, a correnteza utilizada

como fora motriz que conduz os organismos desalojados da rea delimitada, por raspagem com as mos ou ps, para o fundo das redes. No
momento da coleta deve-se tomar cuidado para que no fiquem frestas na base do equipamento e para que no se perturbe o substrato rio
acima. Para minimizar as perdas de organismos, recomenda-se acoplar
material flexvel, como esponjas, sua base.
O delimitador de bentos de substrato consolidado (costes rochosos)
para porcentagem de cobertura consiste em uma armao retangular de PVC, que pode ser de 22cm x 18cm (amostrando uma rea de
396cm2), na qual so presos fios de nilon em intervalos regulares, tanto na direo horizontal, quanto na vertical (Fig. 32 e Fig. 33).
Figura. 32. Detalhe do delimitador

Figura 33. Dimenses do delimitador (Fonte:
para estimativa da porcentagem de
_}\HK\\}@@KK$+>
cobertura de comunidades de costo
' ;? \`K$**/KK$+>
Outro mtodo utilizado para as avaliaes de cobertura das populaes

de substrato consolidado o fotogrfico. As fotografias so tomadas
com a utilizao de uma cmera fotogrfica com lente close-up (Fig.
34), que enquadra, por meio de um suporte com um delimitador, uma
rea padronizada do substrato.
103
Figura. 34. _=Z%

5 = ^% %

Z% [';? %
? KK$+>
Para a determinao da estrutura espacial de comunidades de costo

podem ser utilizados vrios tipos de amostradores, cujas dimenses
esto relacionadas distribuio dos indivduos no substrato, bem
como a presena de espcies menos comuns e mesmo raras. A figura
35 apresenta um delimitador para essa finalidade confeccionado em
madeira, com dimenso de 10cm x 50cm, dentro do qual corre um
menor, de 10cm x 10cm, subdividido em quadrculos de 1cm x 1cm
(Milanelli, 1994). Os delimitadores anteriormente mencionados nas
figuras 32 e 33 tambm podem ser empregados para amostragem da
porcentagem de cobertura (dimenso de 22cm x 18cm); a diferena
consiste no modo de amostragem devido s finalidades distintas
(Lopes, 1997 e Milanelli, 2003).
104
Figura 35. Detalhe do delimitador para estimativa da estrutura espacial de comunidades de

'

%

( 6 ;? _}\HK\\}
1994/CETESB).
A determinao do declive de costo rochoso feita por meio de duas

rguas. Ambas so confeccionadas em madeira, com comprimento
de 200cm, marcada de 1cm em 1cm, com numeraes a cada 10cm.
A largura da barra varivel, preferencialmente em torno de 5cm, com
espessura em torno de 1cm, o que a torna suficientemente resistente
e de fcil manuseio.
As definies do declive e do perfil da praia so feitas com um declivmetro, aparelho desenvolvido pela CETESB. constitudo por trs barras cilndricas de ao, com 1 metro de comprimento cada, e uma barra
horizontal que corre por duas barras verticais, uma delas graduada em
centmetros (Fig. 36).
Figura 36. Medidor de declive de praia (Fonte: Milanelli, 2003/CETESB).
105
5.3.8 Rede Manual

Redes manuais servem coleta qualitativa ou semiquantitativa da macrofauna bentnica em ambientes rasos (lnticos e lticos), de at 70
cm de profundidade, e da fauna associada a bancos de macrfitas (Fig.
37) em gua doce. Na avaliao semiquantitativa, o esforo amostral
deve ser padronizado em termos temporais ou espaciais. Um mtodo
bastante utilizado em biomonitoramento com macroinvertebrados
bentnicos em riachos chamado kick sampling. Neste mtodo, a
rede manual, geralmente de formato retangular, posicionada transversalmente ao curso do rio, de forma a ter sua abertura direcionada
para a nascente. O tcnico coletor posiciona-se frente da rede e literalmente chuta o substrato desde uma distncia previamente padronizada. Com este movimento, os organismos que colonizam este substrato sero desalojados e capturados na rede.
Com abertura de forma triangular, retangular ou semicircular (Rede
D), a rede deve ter preferencialmente abertura de malha de 0,25mm a
0,90mm. Aberturas menores acarretam problema de refluxo de gua,
podendo ocasionar perda de organismos.
Figura 37. Rede Manual (Foto: Helena M. Watanabe/CETESB).
106
5.4 {?
" w
Existe uma variedade grande de tipos de substratos artificiais,
desenvolvidos para diferentes ambientes e objetivos de amostragem.
De uma forma geral, esses amostradores prestam-se amostragem
qualitativa e semiquantitativa da macrofauna bentnica e do
perifton, em ambientes lticos pouco profundos ou lntico litorneo.
A amostragem com substrato artificial no destrutiva e adequase a: (a) estudos de biomonitoramento da qualidade das guas em
ambientes de acesso restrito; (b) inventrio faunstico em reas
de proteo ambiental; (c) atividades de educao ambiental; (d)
auxiliar no levantamento faunstico, somando-se a outras tcnicas
de amostragem; (e) coleta em situaes em que seja impraticvel
o uso de outros amostradores, como em rios mais profundos (em
que as dimenses do substrato artificial sejam compatveis com a
profundidade local, no perodo seco), de fundo pedregoso ou em laje.
As principais desvantagens em seu uso referem-se : (a) necessidade
de duas viagens a campo (instalao e coleta); (b) suceptibilidade ao
vandalismo, o que acarreta perda ou m gerao de dados; (c) limitao
do histrico do dado extenso do perodo de exposio; (d) avaliao da qualidade da gua e no do sedimento natural; (e) necessidade
de definio prvia do tempo de exposio ideal (em que no h mais
aumento de riqueza no processo de colonizao), que ir variar com o
tipo de substrato e ambiente de estudo.
Estudos com substratos artificiais devem ser evitados no vero, j que
enchentes podem aumentar a probabilidade de perda e causar distrbios no processo de colonizao.
5.4.1 Cestos com Pedras (Zoobentos)

Os cestos preenchidos com pedras desenvolvidos pela CETESB (Fig.
38) so retangulares, confeccionados em tela plstica resistente e com
abertura de malha de 1cm a 2cm (KUHLMANN et al, 2003). Exibem
uma ala superior para facilitar a manipulao, feita em tubo fino de
PVC. So preenchidos com pedra de brita de dimetro aproximado de
4cm e seu peso final , em mdia, entre 7kg e 8kg. O uso da pedra de
brita foi adotado tendo em vista sua rugosidade, que facilita a colonizao, e fcil obteno.
107
Figura 38. $%&

'
&
;? _
\
%' KK$+>
Na instalao, cada cesto deve ser preso pela ala a uma corda de nilon, fixada em um ponto da margem pela outra extremidade. Como
ponto de fixao podem ser usadas rvores ou, quando essas no
ocorrerem, estacas de madeira. importante camuflar (com barro
ou vegetao, por exemplo) tanto as estacas quanto as partes expostas da corda. As rplicas de substrato devem ser colocadas em
pontos diferentes, selecionados de forma aleatria com distncia mnima de 2 metros, mas prximos margem. A localizao dos cestos
deve ser registrada em um croqui ou registro fotogrfico do local de
coleta para facilitar seus resgates.
Como medida preventiva perda de animais por lavagem pelo filme
de tenso superficial da gua, pode-se (a) costurar um pedao de tela
no fundo e nas laterais do cesto; (b) colocar uma rede manual sob o
cesto, antes de retir-lo da gua, lavando o material aprisionado na
rede no saco plstico, onde o cesto for acondicionado; (c) acondi-
108
cionar o cesto diretamento no saco plstico, ainda quando este estiver

sob a superfcie da gua.
5.4.2 !w? ?$K"

Flutuadores constituem uma opo, dentre os substratos artificiais utilizados para o estudo e coleta de perifton. Os flutuadores desenvolvidos pela CETESB (Fig. 39) so retangulares, confeccionados com dois
tubos de PVC e comportam lminas de vidro usadas em microscopia
comum, que so presas em encaixes existentes nas placas laterais de
acrlico. Em uma das extremidades de cada tubo de PVC, h um orifcio
que permite amarrar uma corda de nilon e prender o flutuador em um
ponto fixo da margem, como uma rvore, por exemplo (Fig. 40).
(A)
(B)
Figura 39.$%&

[%% Y

;> X
%

[%% ;+>X
[%%
yf
;? )
Z%
)
&

Souza/CETESB).
A localizao dos flutuadores deve ser registrada em um croqui ou

registro fotogrfico do local de coleta, anotando-se pontos de
referncia e coordenadas geogrficas para facilitar o resgate dos
mesmos. aconselhvel a instalao dos flutuadores em locais
pouco frequentados e protegidos, para evitar a perda pelo manuseio
por estranhos e/ou roubo.
Existem flutuadores de diferentes modelos, como aqueles com tubos
ou placas mltiplas de diferentes materiais (por exemplo madeira,
acrlico) ao invs de lminas. Perifitmetros podem ser comprados em
algumas lojas especializadas em material e equipamentos para estudos
limnolgicos e podem ser usados em reservatrios ou rios/riachos.
109
Figura 40.$%&

[%% Y

' =

% [%% ;? )
Z%
)
&
$ %!KK$+>
5.5 Substrato Natural

"/{\]]
Perifitmetros com escovas so utilizados para coleta de perifton em
substratos naturais consolidados (rochas) e podem ser usados para coleta em rios e riachos rasos, em rochas que no podem ser removidas.
4
O perifitmetro com escova adaptado pela CETESB (Fig. 41) consiste

em um tubo de acrlico ao qual so acoplados uma escova e uma pra
de suco. A escova presa na parte superior do equipamento por
uma pea de borracha flexvel, que permite moviment-la em todas as
direes por meio de um cabo, externo. Um furo permite a passagem
de uma mangueira de borracha, qual se prende uma pra de suco.
Do outro lado do tubo, uma mangueira mais fina serve para transferncia da amostra do equipamento para o frasco de coleta.
110
Figura 41.
| ^X}$**/
;? )
Z%
)
&

Souza/CETESB).
Na parte inferior do equipamento, que aberta, uma borracha com

dimetro de medida conhecida permite que o equipamento seja
encostado no substrato que se pretende amostrar, possibilitando uma
medida quantitativa, relativa rea do amostrador, dos organismos
coletados.
Na Tabela 3 esto relacionados os amostradores de substratos apresentados nesse captulo, trazendo as principais vantagens e desvantagens das aplicaes de seus usos.
111
#
wWY" |" "w?"" ""
?"
"^| "
EQUIPAMENTO
AMBIENTE
USO
PEGADORES
Ponar

$ {

profundos e margens
de reservatrios.

$

(arenoso cascalho).

6
toxicolgicos,
microbiolgicos e de
comunidades bentnicas.
@

X[7? 2)
mais indicada para ambientes
marinhos, estuarinos e
pristinos de gua doce; a
menor (232 cm2) para locais
de gua doce poludos.

@

$
quantitativa e qualitativa da
comunidade bentnica.
Petersen ou van

$ {

profundos e margens
de reservatrios.

$

(arenoso cascalho).

6
toxicolgicos,
microbiolgicos e de
@

X[^^ 2 e
1000 cm2) mais indicada
para ambientes marinhos
e estuarinos; a menor (390
cm2) para locais de gua doce.

@

$

$ {
$
profunda de
reservatrios e regies
de fraca correnteza
em rios.

X

$Y

6
toxicolgicos,
microbiolgicos e de

@

$
Q%

Q
$

vertical do sedimento.
Ekman-Birge
112
VANTAGENS
DESVANTAGENS
PEGADORES

@

amostrador quantitativo
em substrato duro para a

previnem a perda de
amostra no fechamento
e reduzem a formao de
ondas de choque.
$
Q

$

amostragens com testemunhador (corer).
@

guincho.

mole, podendo haver perda de partculas

adequadamente organismos que se enterram
mais profundamente.
$

6
galhos ou outros detritos, acarretando perda
de amostra.
@

Q

por metais que possam compor a estrutura do
$
X@

$
confeco do equipamento).

@

$
@
sedimento.

$

@

necessitam de guincho.

6@

ondas de choque e de organismos que se
enterram mais profundamente
$

por pedras, galhos ou outros detritos,
acarretando perda de amostra.
@

Q

$
X@

$
@
Q

%
pela existncia de placas
que se abrem no topo.

ntegra, permitindo
subamostragem.

$

@

duro ou sob correnteza moderada ou forte.
$

totalmente por falha no mecanismo.
@

Q

$
X@

$
@

do amostrador.
Continua...
113
#
wWY" |" "w?"" ""
?"
"^| " (continuao)
EQUIPAMENTO
AMBIENTE
USO
REDES e DELIMITADORES
Simples ou
mltiplo
Manual
114

$ {

profundos e regio
profunda de
reservatrios.

X

$Y

6
toxicolgicos,
microbiolgicos e de
@

X][6\ 2)
mais indicada para ambientes
marinhos e estuarinos; a
menor (20,3 cm2) para locais
de gua doce.

@

$

6

de gua doce rasos.

X

$Y

6
toxicolgicos,
microbiolgicos e de

@

$
VANTAGENS
DESVANTAGENS

$
6

Q
$


Q

sedimento-gua mnima.

de organismos que se
enterram profundamente
em sedimento mole.

permite maior nmero de
replicatas, com reduo do
tempo de ensaio.
@

(por ex.: fechamento por
gravidade ou mensageiro),
dimetros e comprimentos.

@@
funcionamento automtico
que previnem a perda da
amostra.

Q
da amostra por metais que
possam compor a estrutura
do pegador devido ao uso de
material inerte na confeco
dos tubos removveis.

$
@
apresentar problemas de funcionamento e
ocasionar perda da amostra.

$6

repetio da operao e retirada de tubos.
@

$6
permite preciso na estimativa da biomassa
bentnica e de densidade populacional de
organismos bentnicos de maior porte.

$
operao.

@

perda de sedimento na retirada da amostra.

$
6

Q
$


Q

sedimento-gua mnima.

de organismos que se
enterram profundamente
em sedimento mole.

amostral permite maior
nmero de replicatas, com
reduo do tempo de ensaio.
@

comprimentos.

Q
da amostra por metais que
possam compor a estrutura
do pegador devido ao uso de
material inerte na confeco
dos tubos removveis.

$6

repetio da operao e retirada de tubos.
@

$6
permite preciso na estimativa da biomassa
bentnica e de densidade populacional de
organismos bentnicos de maior porte.

@

perda de sedimento na retirada da amostra .
Continua...
115
#
wWY" |" "w?"" ""
?"
"^| " (continuao)
EQUIPAMENTO
AMBIENTE
USO
Rede para
kick sampling
Hess
Surber

com escova
116

(profundidade inferior
a 32 cm) de correnteza
moderada.

$

(arenoso grosso, cascalho e
seixos).

bentnicas.

@

$
semi-quantitativa e
qualitativa da comunidade
bentnica.

moderada.

$

seixos).

bentnicas.

@

$

moderada.

$

seixos).

bentnicas.

@

$
$ {

com rochas.

@

$
comunidade periftica.
VANTAGENS
DESVANTAGENS

processamento analtico.

Q
operao.

custo.

6@
ser capaz de reconhecer os diferentes mesohabitats do local.

cercada, o que impede
a perda lateral de
organismos.


Q
operao.

$
substratos, podendo ocorrer perda
de organismos pela parte inferior do
equipamento. Adaptaes com espuma
na base do equipamento melhoram a sua
aderncia ao fundo, minimizando essa perda.

correnteza branda.

6@
ser capaz de reconhecer os diferentes meso
habitats do local.
@6
transporte, principalmente em trilhas.


Q
operao.
.

$
substratos, podendo ocorrer perda
de organismos pela parte inferior do
equipamento. Adaptaes com espuma
na base do equipamento melhoram a sua
aderncia ao fundo, minimizando essa perda.

$
lateral da rede, devido a rea de amostragem
no ser totalmente cercada.

correnteza branda.

6@
ser capaz de reconhecer os diferentes mesohabitats do local.

%Q
rea amostral.
Q

fcil confeco e custo
relativamente baixo.

&
rios rasos, com rochas.
%
escova, borrachas e mangueiras antes do uso
entre diferentes locais de coleta.

%Q

substrato.
Continua...
117
#
wWY" |" "w?"" ""
?"
"^| " (continuao)
EQUIPAMENTO
AMBIENTE
USO
SUBSTRATO ARTIFICIAL
118
Cesto com
pedras

6

$
de reservatrios.

$

(arenoso a rochoso).

bentnicas (amostragem
semiquantitativa e
qualitativa).
Flutuador com
lminas

6

$
de reservatrios.

$@
qualitativa da comunidade
periftica.
VANTAGENS
DESVANTAGENS
SUBSTRATO ARTIFICIAL

%

$
locais duros demais para uso
de outros amostradores.


Q
operao.

%Q
$
espacial e temporalmente varivel.
Por isso, exige um estudo prvio de tempo
de colonizao dos organismos para cada
ambiente em que o equipamento for
empregado.
$@$ XQ
retirada).

Q
perodo de colonizao.
@
$
$6
favorecendo a coleta de insetos.
Consequentemente, no retrata a estrutura
da comunidade bentnica do local de
amostragem.

vandalismo ou inundaes no local.

%

coleta.


Q
operao.

custo.
%Q
$
espacial e temporalmente varivel. Por
isso, exige um estudo prvio de tempo de
colonizao dos organismos para cada
ambiente em que o equipamento for
empregado.
$@$ XQ
retirada).

Q
perodo de colonizao.
@
$
$
favorece o estudo de diatomceas.
Consequentemente, no retrata a estrutura
da comunidade periftica do local de
amostragem.

vandalismo ou inundaes no local.
119
5.6 Amostradores de Ncton

Existe uma variedade muito grande de amostradores de ncton para
fins cientficos (estudos de comunidades, de taxonomia, bioacumulao etc.) e a escolha do equipamento depende de diversos fatores, tais
como: caractersticas do ambiente (rio, reservatrio etc.), objetivos
de estudo, estrutura da comunidade do local e poca do ano. uma
amostragem que envolve vrios tcnicos e geralmente se estende por
muitos dias, o que torna necessrio um planejamento detalhado, considerando a disponibilidade de pessoal, recursos materiais e financeiros. Desta forma, antes de definir os procedimentos de amostragem de
ncton, composto majoritariamente por peixes, necessrio consultar
o item 6.1.7.8 do Captulo 6, Comunidade Nectnica.
Os amostradores de ncton podem ser passivos ou ativos. Amostradores passivos so fixos ou estacionrios, como anzol, espinhel, armadilha, rede de espera etc. Amostradores ativos so mveis, como as redes de deriva (rede de lance) e de arrasto e tarrafas. A captura com os
amostradores passivos depende do movimento dos peixes em relao
ao aparelho, enquanto que nos ativos, os peixes so capturados a partir do movimento do amostrador. Amostradores como anzol, espinhel
e armadilhas dependem no s do movimento como tambm do comportamento do peixe em relao isca utilizada. Quando do uso de redes, a escolha do tamanho das malhas (abertura entre ns) depender
dos organismos e dos ambientes a que so destinadas.
Outros recursos podem ser utilizados na coleta de amostras ictiolgicas cientficas, como por exemplo: drogas (como o timb), arpes e aparelhos eltricos. A seguir so listados alguns dos equipamentos mais
utilizados na pesca cientfica para amostragem da comunidade nectnica. importante destacar a necessidade de atender a legislao especfica em vigor que rege esta atividade.
5.6.1 Aparelhos de Pesca Passivos

Rede de espera
A rede de espera sem o emprego de isca muito utilizada para a
amostragem de peixes, pode ser empregada em diversos ambientes, e
sua disposio na massa liquida no plano vertical. Tambm conhecida
como rede de poita, pode ser armada na superfcie, meio e fundo.
Consiste basicamente de uma malha retangular, de comprimento e
120
altura variveis, presa a um cordel superior no qual esto dispostas

as bias a intervalos regulares (tralha de bias) (Figs. 42, 43 e 44).
Na parte inferior h um cordel com pesos a intervalos regulares (tralha
de chumbo). Na rede de superfcie, a tralha de bias deve apresentar
poder de flutuao suficiente para sustentar o peso da panagem e a
tralha de chumbo (lastro de baixo peso) e a rede deve ser presa a uma
bia ancorada, ou na margem.
Figura 42. Rede de espera de superfcie (Fonte: CETESB, 1988).
121
Figura 43. Rede de espera armada (Foto: Adriana C. C. R. de Deus/CETESB).
Figura 44. Retirada da rede de espera (Foto: Adriana C. C. R. de Deus/CETESB).
122
Variaes no peso e na tralha de chumbo permitem a disposio da

rede no meio da coluna dgua ou ancorada no fundo. Assim, a rede
de espera de fundo (Fig. 45) deve ter lastros mais pesados e bias
menores. As extremidades dos cabos de bia e da rede so presas na
margem ou a uma bia demarcada na superfcie da gua, por meio de
um cabo suficientemente resistente para permitir a retirada da rede.
H tambm redes de espera com duas ou mais panagens diferentes
sobrepostas, presas a um nico cordel de bias e de chumbada, como a
rede feiticeira (ou de tresmalho).
Figura 45.) 5% ;?

?
'
$
^KZ%
utilizado com permisso).
Espinhel ou linhada
H uma grande variedade de espinhis e, basicamente, so constitudos de uma linha mestra ao longo da qual se aplicam linhas secundrias com anzis. A quantidade de linhas secundrias e o tipo de anzol
vo depender das espcies de peixes a serem capturadas. O espinhel
de superfcie possui bias ao longo da linha mestra, sendo suas extremidades presas a boas separadas e ancoradas ou presas em troncos,
pedras ou qualquer outro suporte; o espinhel de fundo no apresenta
bias ao longo da linha mestra (Fig. 46).
123
Figura 46.Kf

'J
;?
?
'
$
^KZ%%

!
permisso).
Canio ou vara de pesca

Esse mecanismo de pesca constitudo de uma vara de bambu e uma linha de nilon resistente, com ou sem bia, e anzol na extremidade com
isca viva ou artificial. Esse tipo de pesca pode ser realizado com uso de
embarcao ou no (Fig. 47).
124
Figura 47. Canio ou vara de pesca (Foto: Adriana C. C. R. de Deus/CETESB).
Curral (rede de estacas ou cerco)

Constitui-se de um cerco geralmente feito de taquaras tranadas,
fixado no substrato por meio de estacas, onde existe apenas uma
abertura que permite a entrada do peixe, mas no a sua sada. Por isso,
importante garantir que a parede do curral tenha altura suficiente
para permanecer sempre acima do nvel da gua (para que possa ser
feita a vistoria e coleta dos organimos) e trama bem fechada (para
impedir a fuga dos peixes) (Fig. 48).
125
Figura 48. Curral (Foto: CETESB).
Cesto ou canastra
Armadilha de forma varivel, podendo ser cnica, cncava ou em fundo
de saco. Sua confeco tambm varivel, podendo ser de taquara
tranada, arame tranado ou aros de arame recobertos de malhagem
de algodo (Figs. 49 e 50).
Figura 49. Cesto ou canastra (Foto: Adriana C. C. R. de Deus/CETESB).
126
Figura 50. Cesto ou canastra (Foto: CETESB).
Covo
Tipo de armadilha, de forma cilndrica ou cnica, que permite a
entrada do peixe, mas no a sada, podendo ser usado com ou sem isca.
A entrada do covo de forma cnica, com o vrtice voltado para o
interior, sendo flexvel de modo a permitir a entrada do peixe. Na
sua confeco emprega-se tela metlica, arame, taquara ou arame
revestido de malha de nilon, algodo etc. (Fig. 51).
(A)
(C)
(B)
Figura 51.
5
'
;>
'5
6
;+>
'
para pesca da lagosta; (C) Armadilha para peixes de pequeno porte em rios (Fonte: American
?
'
$
KZ%%

!
>
127
5.6.2 Aparelhos de Pesca Ativos

Rede de lance
Empregada principalmente para amostragem de peixes em corredeiras
suaves e sem obstculos, e em braos de esturio.
tambm chamada de rede de deriva, pois lanada no corpo dgua e
acompanhada pela embarcao. Semelhante rede de espera, consta
de um nico pano, mas o cordel inferior apresenta lastro de pesos
menores e no usa poita nem bias ancoradas. Nas extremidades da
rede so colocados flutuadores que servem de guia e fazem com que
ela permanea aberta durante o trajeto.
Rede de arrasto
Constituda de panagem inteira ou de duas partes. Na parte superior
so colocadas bias e na inferior, as chumbadas. As extremidades superiores e inferiores de cada lado da rede so amarradas a hastes laterais
de madeira. Em locais pouco profundos, o arrasto pode ser feito diretamente pelas hastes, enquanto que em locais de maior profundidade
e correnteza, onde necessria a utilizao de embarcao, uma corda
de trao pode ser presa em cada uma das extremidades das hastes
(Figs. 52 e 53).
(A)
(B)
Figura 52. Rede de arrasto manual: (A) Foto da rede de arrasto manual em operao; (B)
KZ% % ;?
?
'
$
? Z%
utilizados com permisso).
128
Figura 53. ) & ;?

?
'
$
KZ%
utilizado com permisso).
Rede de saco
Consta de um pano de confeco semelhante a da rede de espera.
No seu centro forma-se um saco semelhante a um coador, com malha
de dimetro maior que o das extremidades. A sua fixao se faz como a
da rede de espera (Fig. 54).
(A)
(B)
Figura 54. Rede de arrasto manual do tipo saco: A) Foto da rede de arrasto manual tipo saco
;+> KZ% ' ;?
?
'
$
?
esquema utilizados com permisso).
Tarrafa
Empregada em locais de pouca profundidade, consta de uma rede de
forma cnica, presa pelo vrtice a um cabo, e cuja base circular provida
de tralha de chumbo, destinada ao fechamento do aparelho quando
o cabo tracionado. O seu lanamento feito de modo que possa
se abrir no ar, atingindo a superfcie da gua na maior rea possvel, e
afundando rapidamente em virtude da tralha de chumbo (Fig. 55).
129
(A)
(B)
Figura 55. Tarrafa: (A) Tarrafa em uso; (B) Vista superior da tarrafa (Fotos: CETESB e
Adriana C. C. R. de Deus).
Linha de arrasto (corrico)

Consta de uma linha resistente com anzol e isca artificial, usada com o
barco em movimento.
Pu e coador
So aparelhos geralmente utilizados para recolhimento de espcimes
durante atividades de pesca ou em episdios de mortandade de organismos aquticos. So constitudos de um crculo de metal ao qual se
prende uma rede afunilada de tamanho variado. O crculo de metal
preso a um cabo de bambu, madeira ou a um cordel. Dependendo da
regio, a malha da rede pode diferir (Figs. 56 e 57).
(A)
(B)
Figura 56. Pu: (A) Vista lateral (Foto: Adriana C. C. R. de Deus); (B) Equipamento em uso
;?
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130
Pesca Eltrica
A pesca eltrica um mtodo de amostragem empregado para fins
cientficos. Esse tipo de coleta normalmente utilizado em ambientes
de guas rasas. A pesca eltrica pode ser empregada a partir de embarcao preparada para esse fim ou por meio de aparelhagem adaptada
para uso mvel, tipo mochila (Fig. 57). Independentemente do equipamento a ser empregado, devem ser observadas as medidas de segurana necessrias para coleta em campo, principalmente as relativas
aos riscos inerentes a descargas eltricas.
Figura 57.J
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y; '
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$
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5.6.3 Manuteno e Cuidados com os Equipamentos de Pesca

Esses equipamentos de pesca (redes, tarrafas, covos, cestos e pus)
aps sua utilizao, devem ser lavados com gua limpa em jatos fortes;
se necessrio, utilizar uma soluo suave de detergente neutro e
deix-los secar a sombra, esticadas ao abrigo da luz e armazenados em
local adequado, longe de outros equipamentos que possam danificlos.
Durante o transporte devem ser acondicionados em embalagem
adequada, tipo caixa de madeira ou isopor. A parte mais delicada dos
equipamentos de pesca deve ser protegida como, por exemplo, em um
balde ou saco de polietileno.
131
Filtrao de amostra para

metais dissolvidos - Foto
Carlos Jesus Brando/CETESB
CAPTULO
6 AMOSTRAGEM DE GUA BRUTA E SEDIMENTOS

Em um estudo bsico de avaliao da qualidade das guas e do sedimento deve-se levar em considerao os seus usos preponderantes. Para tanto, recomenda-se consultar o captulo Planejamento de
Amostragem. De uma maneira geral, a amostragem em rios, riachos e
pequenos cursos dgua feita a montante e a jusante das fontes poluidoras, quando essas existem. Dependendo do objetivo do estudo,
pode-se adicionar pontos de coleta para avaliar o grau de poluio ou
assimilao de carga orgnica ao longo do trecho avaliado, por exemplo. Convm evitar a coleta de amostras em reas onde possa ocorrer
estagnao da gua e em locais prximos margem interna das curvas,
exceto para a coleta de sedimentos e organismos bentnicos.
Para cursos dgua maiores deve-se levar em considerao a existncia
e o grau de mistura dos lanamentos (afluentes e efluentes) no corpo
receptor, tanto lateral (de uma margem outra) como verticalmente
(da superfcie ao fundo). A mistura na direo lateral muitas vezes
ocorre mais lentamente que a mistura na direo vertical. Por outro
lado, deve-se considerar que a gua do corpo principal pode adentrar
o tributrio pela superfcie ou pelo fundo, devido diferena de
densidade causada pela temperatura, sais dissolvidos ou turbidez.
Para se obter uma amostra representativa, essas possibilidades devem
ser avaliadas durante o perodo de caracterizao ou monitoramento,
realizando coleta de amostras em pontos mltiplos ao longo do eixo
transversal (Fig. 58) ou vertical do corpo dgua quando no houver
certeza da completa mistura.
AMOSTRAGEM DE GUA BRUTA DE SEDIMENTOS
133
Figura 58\

! J
=%%
%
gua (Fonte: CETESB, 1988).
Legenda: A - Controle na regio superior da rea em estudo (referncia ou background); B Monitoramento de fontes poluidoras no pontuais (exemplo: poluio agrcola); C - Amostragem
de descargas poluidoras no ponto de seu lanamento no corpo receptor; D - Pontos mltiplos
Q6
@

" E - Amostragem
em tributrios, na rea de sua desembocadura no corpo receptor em estudo (no esquema,
o monitoramento a montante do tributrio obtido por meio da amostragem em D); F Monitoramento a jusante do tributrio, aps sua mistura no corpo.
A no ser que sejam necessrias informaes sobre a qualidade da

gua durante perodo chuvoso, a amostragem poder ser suspensa durante ou logo aps fortes chuvas, pois pode ocorrer aumento
significativo da vazo do curso dgua. No caso dos estudos que necessitem de informaes sazonais, a amostragem deve ter continuidade e mesmo os dados obtidos no perodo de chuvas podero ser
englobados aos demais.
134
Em ambientes lnticos (lagos, reservatrios, audes etc.), a programao de amostragem depende no s dos seus usos (recreao, aquicultura, gerao de energia, agricultura, indstria, esgotamento sanitrio, drenagem pluvial e abastecimento pblico), como
tambm dos objetivos do estudo, tais como: taxa de sedimentao,
disperso e degradao de poluentes orgnicos, distribuio e comportamento de metais e pesticidas, eutrofizao e carga de nutrientes, estudos ictiofaunsticos, entre outros. Cada caso requer uma
metodologia especfica, tanto de coleta quanto de ensaios e interpretao de dados.
Para definio dos ensaios a serem realizados nas guas superficiais
(bruta) e sedimento e o enquadramento das classes e usos,
fundamental manter-se atualizado, consultando a legislao vigente
nos sites das instituies responsveis pela sua elaborao e/ou
homologao, como ANA (Agncia Nacional de guas), ANVISA
(Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria), CONAMA (Conselho
Nacional do Meio Ambiente), IBAMA (Instituto Brasileiro do Meio
Ambiente), SMA (Secretaria do Meio Ambiente) de cada estado, e
critrios internacionais adotados pela OMS (Organizao Mundial de
Sade), USEPA (Agncia de Proteo Ambiental dos Estados Unidos),
Environment Canada, Comunidade Europia, entre outros.
Nas coletas de gua bruta e sedimento de uma forma geral recomenda-se que:
1. a coleta de gua seja realizada antes da coleta de sedimentos;
2. os primeiros frascos a serem preenchidos de gua do local devem
ser direcionados aos ensaios microbiolgicos, biolgicos e aos que
no podem sofrer aerao, e
3. $

importante lembrar que, neste guia, considerado como gua
superficial os primeiros 30cm da lmina dgua, e gua em profundidade
aquela coletada na coluna dgua abaixo dos 30cm superficiais e acima
de 1m do fundo.
Para que sejam evitados problemas de contaminao cruzada durante a amostragem, deve-se utilizar materiais de coleta diferentes para
cada amostra, como por exemplo, um balde e uma corda em cada ponto
135
amostrado. Caso isto no seja possvel, esses materiais devem ser lavados em campo com gua destilada ou deionizada e ambientados, ou
seja, enxaguados com gua do local a ser amostrado.
A seguir, sero considerados os procedimentos para a coleta de amostras em gua bruta (camada superficial e em profundidade) e em sedimento para os diversos ensaios. A preservao, tipo de recipiente,
volume requerido e prazo de validade da amostra esto descritos no
Anexo 1.
6.1 Coleta e Preservao de Amostras

para Ensaios em gua Bruta
6.1.1 Qumicos (exceto metais dissolvidos)
Procedimentos de coleta em guas superficiais:
Encher o balde de ao inox ou a garrafa de van Dorn de fluxo horizontal e
distribuir seu volume proporcionalmente nos diversos frascos destinados
aos ensaios qumicos, como forma de garantir a homogeneidade da amostra; (Fig. 59);
Repetir o procedimento at que todos os frascos estejam com o volume de
gua necessrio para os ensaios, tomando o cuidado de manter um espao
vazio no frasco para sua posterior homogeneizao;
No caso de amostras que no podem sofrer aerao (oxignio dissolvido,
sulfeto, compostos orgnicos volteis e fenis), a garrafa de van Dorn de
fluxo horizontal ou o batiscafo devero ser empregados (Fig. 60). No caso da
utilizao da garrafa de van Dorn, a mangueira deve ser introduzida estrangulada at o fundo do recipiente, liberando-se lentamente o regulador de
fluxo da mangueira e deixando-se extravasar duas vezes, ou mais, o volume
do frasco, no deixando espao vazio;
Efetuar as preservaes requeridas (ver Anexo 1) (Fig. 61);
Acondicionar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao, para transporte.
136
(A)
(B)
(C)
Figura 59. =%%

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Carlos Jesus Brando/CETESB).
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(A)
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Figura 61

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(Fotos: Carlos Jesus Brando/CETESB).
137
Procedimento de coleta em guas de profundidade:

Coletar com garrafa de profundidade (ex.: garrafa de van Dorn de fluxo vertical) no estrato de interesse. importante que o equipamento no promova a suspenso do sedimento; para tanto, recomenda-se a coleta de gua at
1m acima do fundo, exceto quando o estrato abaixo de 1m for de interesse
(Fig. 62);
Desconectar a mangueira da garrafa e desprezar a gua contida na mangueira;
Distribuir seu volume proporcionalmente nos diversos frascos destinados aos
ensaios qumicos, como forma de garantir a homogeneidade da amostra;
Repetir o procedimento at que todos os frascos estejam com o volume de
gua necessrio, tomando o cuidado de manter um espao vazio para sua
posterior homogeneizao. No caso de amostras que no podem sofrer aerao (oxignio dissolvido, sulfeto, compostos orgnicos volteis e fenis),
a mangueira deve ser introduzida estrangulada at o fundo do recipiente, liberando-se lentamente o regulador de fluxo da mangueira e deixando-se extravasar duas vezes ou mais, o volume do frasco, no deixando
espao vazio;
Efetuar as preservaes requeridas (ver Anexo 1);
Figura 62. 5%

5 ?%f X

(Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).
138
6.1.2 Metais Dissolvidos

Para o ensaio de metais dissolvidos, a gua do local dever ser filtrada em campo. A gua filtrada a que ser encaminhada para o ensaio.
A unidade filtrante deve passar por um pr-condicionamento antes da
filtragem, como forma de prepar-la para receber a amostra. Podem
ser utilizadas seringa e unidade filtrante descartveis para cada ponto
de coleta, que devem ser recolhidas para descarte apropriado. A filtragem da amostra tambm pode ser realizada por meio de bomba de vcuo manual ou movida a gerador de eletricidade.
Procedimento para o pr condicionamento da unidade filtrante:
Encher uma seringa estril com gua deionizada;
Conectar uma unidade filtrante de 0,45m na seringa;
Passar um volume de 50mL de gua deionizada pelo filtro.
Procedimento de coleta de amostra para metais dissolvidos em guas superficiais:

Coletar a amostra de gua do local com auxlio de um balde confeccionado
em ao inox (AISI 316L), ou de uma garrafa de van Dorn horizontal;
Encher a seringa, preenchendo todo o seu volume;
Conectar o filtro precondicionado ponta da seringa;
Pressionar o mbolo da seringa e recolher a amostra filtrada em frasco de
coleta apropriado (Fig. 63);
Repetir o procedimento at obter o volume necessrio para o ensaio;
Caso ocorra saturao do filtro, substitu-lo por outro novo j pr-condicionado, e completar o volume necessrio para o ensaio;
Efetuar as preservaes requeridas (ver Anexo 1);
Guardar o(s) filtro(s) e seringa(s) para descarte, conforme procedimento de
cada laboratrio.
Procedimento de coleta de amostra para metais dissolvidos em guas de

profundidade:
Coletar a amostra de gua de profundidade com garrafa de van Dorn vertical;
Desconectar a mangueira da garrafa e desprezar a gua contida na mangueira;
Preencher um frasco descartvel de 1L e retirar uma alquota com a seringa,
preenchendo todo o seu volume;
Conectar o filtro precondicionado ponta da seringa e proceder conforme
protocolo para gua superficial.
139
Figura 63. ?

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CETESB).
6.1.3 Ecotoxicolgicos
Sero abordados os procedimentos de coleta e preservao de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos e de toxicidade aguda com bactria luminescente Vibrio fischeri (Teste Microtox).
Ensaios ecotoxicolgicos so procedimentos nos quais as respostas de
organismos aquticos so usadas para detectar ou avaliar, a presena
ou efeito, de uma ou mais substncias, despejos lquidos ou fatores
ambientais, considerados isoladamente ou em conjunto. Esses ensaios podem ser realizados em condies controladas de laboratrio
ou em campo.
Neste guia so abordados apenas os procedimentos de coleta para
realizao de ensaios ecotoxicolgicos em condies controladas de
laboratrio.
Nesses ensaios os organismos teste so expostos amostra bruta
(gua superficial ou sedimento) ou a vrias concentraes da amostra
em soluo (efluente), por um determinado perodo. Aps o perodo de
140
teste verifica-se os efeitos da amostra em relao alguns parmetros

biolgicos, como mortalidade, crescimento e reproduo, dentre
outros. Os organismos de gua doce e marinha mais comumente
empregados constam da Tabela A4 do Anexo 1.
Outro ensaio frequentemente empregado para a triagem de toxicidade
aguda em amostras de gua e sedimento (gua intersticial) o ensaio
com a bactria Vibrio fischeri tambm conhecido como teste Microtox.
A bactria marinha Vibrio fischeri emite luz naturalmente em ambientes
aquticos favorveis e na presena de substncias txicas bactria,
a luminescncia diminui, sendo esta diminuio de intensidade de luz
proporcional toxicidade da amostra.
A escolha dos ensaios depender do objetivo do estudo. No caso de
atendimento legislao recomenda-se utilizar mtodos padronizados elaborados pela ABNT ou rgo internacional de padronizao.
Procedimentos para coleta de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com
organismos aquticos e Microtox em guas superficiais:
Preencher todo o volume do frasco sem deixar volume morto, de maneira a
evitar a presena de ar;
Tampar o frasco, deix-lo em repouso por alguns minutos e verificar se no
existem bolhas de ar no seu interior. Caso haja presena de bolhas, bater
levemente nas laterais do frasco, visando o desprendimento das bolhas;
Completar o volume do frasco, se necessrio;
Identificar a amostra;
Procedimentos para coleta de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com

organismos aquticos e Microtox em guas de profundidade:
Aps a coleta com garrafa de van Dorn, desconectar a mangueira de ltex da
garrafa;
Desprezar a gua contida na mangueira de ltex e encher o frasco,
preenchendo todo o volume do frasco sem deixar volume morto, de maneira
a evitar a presena de ar;
Tampar o frasco e seguir os procedimentos descritos no item anterior.
141
6.1.4 Mutagenicidade com Salmonella/Microssoma (Teste de

Ames)
O teste de Salmonella/Microssoma tem por objetivo detectar a presena de substncias que possam produzir danos genticos nos organismos expostos. No caso de amostras ambientais, o objetivo detectar
a presena destes compostos no meio e no avaliar diretamente o seu
efeito neste ou naquele indivduo ou populao. O ensaio utiliza diferentes linhagens de Salmonella typhimurium, na presena e na ausncia de ativao metablica, capazes de detectar compostos que atuam
por meio de mecanismos de ao diferentes. O teste foi desenvolvido
especificamente para deteco de mutagnese induzida quimicamente e pode ser realizado tanto em amostras lquidas, aps esterilizao,
quanto em extratos orgnicos. Podem ser avaliadas amostras de guas,
efluentes, solos, sedimentos, lodos e material particulado. O procedimento adotado para a coleta de guas superficiais e de profundidade
empregando balde e amostradores especficos o mesmo empregado
para anlises qumicas (item 6.1.1) (Fig. 64).
Figura 64. &

f ;? %
Brando/CETESB).
142
As amostras de gua podem tambm ser coletadas empregando-se o

mtodo denominado Blue rayon in situ (Sakamoto & Hayatsu, 1990).
As mechas de Blue rayon (ver preparo Captulo 3) so acondicionadas
em redes de nilon, com um peso no fundo, e estas so conectadas a
uma bia. O conjunto colocado no ponto de amostragem e as fibras
permanecem imersas por 24 horas. Aps este perodo o conjunto removido e as mechas de Blue rayon levadas ao laboratrio.
Maiores informaes relativas a tipos de frascos empregados, armazenamento e preservao das amostras esto detalhadas na Tabela A6
do Anexo 1.
6.1.5 Microbiolgicos
A contaminao das guas por excretas de origem humana ou animal
pode torn-las um veculo na transmisso de agentes de doenas
infecciosas. Dessa forma, a vigilncia da qualidade microbiolgica
da gua essencial, sendo requerida pelas legislaes aplicadas
nos mais diversos usos da gua. Embora sejam disponveis mtodos
para determinao dos microrganismos patognicos responsveis
pelas doenas de veiculao hdrica, essas anlises so complexas,
demoradas e dispendiosas. Alm disso, somente pessoas e animais
infectados eliminam esses microganismos, que podem estar em
concentraes extremamente baixas nas amostras de gua e requerem
mtodos especficos de concentrao. Por esse motivo, a pesquisa de
patgenos realizada somente em condies especficas, por exemplo,
na ocorrncia de surtos, em estudos de vigilncia epidemiolgica
ambiental de patgenos, estudos de avaliao de risco microbiolgico,
entre outras. Na rotina para monitoramento da gua e atendimento
das regulamentaes de sua qualidade so realizadas as anlises dos
microrganismos indicadores de poluio fecal, os quais podem indicar
o risco da presena de microrganismos enteropatognicos.
A anlise de indicadores microbianos na gua um mtodo bastante
sensvel e especfico para deteco de poluio de origem fecal, no
sendo adequada a anlise qumica para esse objetivo. As anlises devem ser realizadas com regularidade e frequncia, uma vez que a poluio fecal intermitente e poucas amostragens podem no ser suficientes para detect-la. Deve-se, portanto, dar preferncia a um mtodo
simples, ao invs de vrios mtodos ou um mtodo complexo, embora
143
nem sempre os resultados apresentem uma relao direta com patgenos mais persistentes no ambiente.
Alm de fornecer informaes sobre a presena de contaminao fecal
na gua, as anlises microbiolgicas so teis para se avaliar a eficcia
de mtodos de tratamento para determinados grupos de microrganismos. Por exemplo, a presena de bacterifagos pode indicar que os vrus no foram removidos, e a presena de clostrdios sulfito-redutores
pode estar demonstrando a presena de microrganismos mais persistentes. A contagem de bactrias heterotrficas aerbicas pode fornecer informaes sobre a disponibilidade de nutrientes na gua que
propiciam o crescimento bacteriano, o que pode resultar em problemas estticos, ou na presena de microrganismos patognicos oportunistas, tais como Pseudomonas aeruginosa, Legionella sp e Aeromonas
sp. Para esses, existem tcnicas especficas de deteco, que no so
utilizadas rotineiramente, mas somente quando necessrio para resolver problemas relacionados sua presena.
A coleta de amostras de gua para exame microbiolgico apresenta
tcnica diferenciada em gua bruta e tratada e deve ser realizada sempre antes da coleta de qualquer outro tipo de ensaio ou determinao
de campo, a fim de se evitar o risco de contaminao do local de amostragem com frascos ou amostradores no estreis.
O frasco deve ser preparado previamente no laboratrio, estril e
conter (a) EDTA em quantidade necessria para complexar metais
pesados que possam estar presentes na amostra (por exemplo, cobre),
e (b) tiossulfato de sdio, se houver a suspeita da presena de cloro
livre (Captulo 3 - Ensaios Microbiolgicos). Este frasco no deve ser
ambientado e a coleta deve ser pontual, ou seja, a amostra para ensaio
microbiolgico no deve ser composta.
144
Procedimentos de coleta de amostras para ensaio microbiolgico em

guas superficiais
As amostras para anlises microbiolgicas devem, preferencialmente, ser
recolhidas diretamente nos frascos esterilizados que sero enviadas para
anlise; ou em baldes esterilizados.
Remover a tampa do frasco, juntamente com o papel alumnio protetor,
tomando cuidado para evitar a contaminao da amostra pelos dedos das
luvas ou outro material;
Manter a tampa sobre o frasco no momento da coleta a uma distncia de
aproximadamente 10 centmetros, para evitar a contaminao da parte interna da tampa ou queda de qualquer material no interior do frasco;
Encher o frasco com a amostra at aproximadamente (trs quartos) do
seu volume, para possibilitar sua homogeneizao durante o processo de
ensaio no laboratrio (Fig. 65);
Fechar imediatamente o frasco, fixando muito bem o papel alumnio protetor em volta da tampa;
(A)
(B)
Figura 65 =%%

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145
Procedimentos de coleta de amostras para ensaio microbiolgico em guas

de profundidade
Aps a coleta da amostra do local com garrafa de van Dorn, desconectar a
mangueira de ltex;
Desprezar a gua contida na mangueira de ltex da garrafa de van Dorn;
tomando cuidado para evitar sua contaminao pelos dedos das luvas ou
outro material;
Encher o frasco atravs da mangueira de ltex, at aproximadamente
(trs quartos) do seu volume, para possibilitar sua homogeneizao durante
o processo de ensaio no laboratrio:
aproximadamente 10 centmetros, para evitar a contaminao da parte interna da tampa ou queda de qualquer material no interior do frasco;
Acondicionar e transportar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao
(Fig. 66).
Figura 66

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y

f
J
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146
As amostras para ensaios de bactrias patognicas podem ser obtidas

de duas formas distintas: coleta de gua do local (observando o preparo da frascaria na coleta para ensaios microbiolgicos), ou instalao
de uma mecha que, aps ser retirada do local, deve ser transportada
em meio de transporte Cary e Blair. Orientaes para a confeco da
mecha e preparo do meio de transporte Cary e Blair encontram-se no
Captulo 3 (Ensaios Microbiolgicos).
Procedimento de coleta com mecha (Bactrias patognicas)
Imergir a mecha no ponto de coleta, amarrando previamente o seu fio de
nilon em local seguro;
Deixar a mecha no local por um perodo de 48h ou mais, de acordo com a
finalidade do estudo;
Retirar a mecha, colocando-a em saco plstico esterilizado contendo meio
de transporte Cary e Blair;
Acondicionar e transportar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao.
6.1.6 Balneabilidade de Praias

As praias a serem monitoradas e seus pontos de coleta devem ser
definidos considerando os diversos fatores que influem na sua
balneabilidade. Esses pontos so selecionados em funo da frequncia
de banhistas, da fisiografia da praia e dos riscos de poluio que possam
existir e devem ser revistos periodicamente.
As amostras de gua para balneabilidade so coletadas no local considerado mais representativo, na regio de profundidade aproximada
de 1 metro, que representa a seo no corpo de gua mais utilizada para a
recreao. Deve-se tambm observar certa distncia da rea de influncia
de cursos dgua eventualmente contaminados, para que as amostragens
sejam representativas das condies de balneabilidade da praia.
As condies de amostragem tm um importante papel no resultado
do monitoramento de balneabilidade e devem ser aquelas consideradas as mais crticas. As amostragens devem ser realizadas nos dias
de maior afluncia do pblico s praias, geralmente aos domingos,
e preferencialmente na mar vazante no caso de guas marinhas,
na qual, em princpio, observa-se maior contribuio e menor diluio
dos efluentes.
147
Recomenda-se que a periodicidade de amostragem das praias seja estabelecida em funo da poca do ano, frequncia de banhistas e do
ndice de ocupao residencial das regies prximas sua orla. Assim,
as praias mais frequentadas devem ser monitoradas semanalmente.
As praias menos frequentadas, mas que j passam por um processo de
urbanizao em suas imediaes, podem ser avaliadas por meio de monitoramento mensal sem, no entanto, serem classificadas conforme as
categorias preconizadas pela Resoluo Conama relativa ao controle
da qualidade da gua para balneabilidade (CONAMA n 274/00). O
acompanhamento da evoluo da qualidade destas praias deve ser realizado em carter preventivo e, se forem constatados ndices indicadores
de contaminao fecal em quantidades significativas, o monitoramento
deve ser conduzido semanalmente. Na poca de temporada (meses do
vero e das frias escolares), deve ser prevista a intensificao do monitoramento para as praias com maiores ndices de contaminao.
No Estado de So Paulo informaes adicionais sobre a balneabilidade
das praias podem ser obtidas na pagina oficial da CETESB (www.
cetesb.sp.gov.br), especialmente nos Relatrios Anuais Qualidade das
guas Litorneas do Estado de So Paulo, e na pgina da Secretaria
do Meio Ambiente do Estado de So Paulo (www.ambiente.sp.gov.br).
Procedimentos de coleta de amostras para ensaios microbiolgicos, para
avaliao de balneabilidade das praias interiores e litorneas
A coleta deve ser realizada em local com maior frequncia de banhistas;
O tcnico deve adentrar na gua at linha de cintura do banhista;
tomando cuidado para evitar sua contaminao pelos dedos das luvas ou
outro material (Fig. 67);
aproximadamente 10 centmetros, para evitar a contaminao da parte interna da tampa ou queda de qualquer outro material no interior do frasco;
seu volume, para possibilitar sua homogeneizao durante o ensaio no laboratrio;
148
Figura 67. =%

;> =

&
y
;?
Foto Carlos Jesus Brando/CETESB).
6.1.7 Comunidades Biolgicas

As comunidades biolgicas fornecem a melhor base para a avaliao da
integridade ecolgica dos ecossistemas aquticos. Uma vez que o dado
biolgico gerado a partir da coleta de organismos vivos, que podem
escapar captura ou apresentar comportamento migratrio ou distribuio espacial heterognea no local de investigao, o programa de
amostragem biolgica deve ser cuidadosamente planejado para que os
resultados tenham aplicabilidade e reflitam com fidelidade a qualidade
do hbitat.
Sempre que for possvel, as estaes para monitoramento biolgico
(biomonitoramento), ou caracterizao ecolgica, devem ser as mesmas que aquelas estabelecidas para o levantamento qumico, fsico e
bacteriolgico, de forma que todas as coletas sejam concomitantes.
Para efeito de comparao, os pontos de coleta devem ter condies
ecolgicas similares dentro do mesmo projeto ou programa de monitoramento; por exemplo, devem estar localizados na mesma regio em
lagos e reservatrios (litornea, limntica e profunda), ou serem em
rios de ordens similares (1, 2, 3, 4 ordens).
importante que sejam levantados, ao mesmo tempo, dados relativos
ao meio fsico como, por exemplo, granulometria do sedimento,
transparncia e cor da gua, velocidade e vazo da corrente, largura
149
e profundidade do leito, tipos de hbitat presentes no local (por

exemplo, proximidade de corredeiras, remansos, vrzeas, presena
de macrfitas e cobertura vegetal das margens). Devem tambm ser
observadas condies do local, tais como uso e ocupao do solo,
presena de despejos industriais e urbanos, extrao de areia ou
outra atividade de minerao.
Para se comparar diferentes pontos de coleta essencial tambm que
todos sejam amostrados aproximadamente ao mesmo tempo. A periodicidade de amostragem depende da comunidade a ser analisada, mas
se alguma situao atpica ocorrer, como descarga ou derramamento
de substncias qumicas, as amostragens devem ser realizadas a intervalos de tempo menores, de modo a acompanhar a recuperao das
comunidades.
A seleo do tamanho da estao de amostragem influenciada pelos
grupos taxonmicos a serem estudados e pela natureza do problema
a ser investigado. Para fitoplncton e macroinvertebrados, um local
adequado de amostragem pode cobrir pequenas reas ou volumes,
enquanto que para peixes uma estao pode se estender de 100m2
a 1000m2, dependendo da densidade das populaes e do territrio
usual da espcie sob investigao.
A amostragem de comunidades biolgicas pode ser dividida basicamente
em trs tipos, conforme o objetivo do trabalho ou projeto: qualitativa,
semiquantitativa e quantitativa. O tipo da amostragem define os
equipamentos e o esforo da coleta, necessrios. A amostragem
qualitativa serve a estudos de comparao espacial e/ou temporal,
baseados na composio faunstica e/ou florstica. Neste caso, no h
transformao dos dados em unidade de rea ou volume. Amostras
semiquantitativas podem ser obtidas de duas formas: a) o esforo
amostral (tempo) medido no emprego de mtodos qualitativos de
coleta, ou b) amostradores quantitativos so usados em coleta no
aleatria e sem rplicas. A amostragem mais exigente , sem dvida, a
quantitativa, em que so amostradas unidades de rea ou volume bem
definidos. Preferencialmente so realizadas rplicas (ou unidades
de amostragem), tomando-se cuidados relativos ao tamanho e
distribuio das unidades de amostragem na rea de estudo.
Os dados da coleta quantitativa se prestaro a objetivos mais
amplos, fornecendo a possibilidade de se estimar densidades ou
150
biomassas das populaes de organismos, alm das informaes

obtidas pelos outros dois tipos de amostragem.
Existem vrios estudos definindo o nmero de rplicas necessrio em
relao confiabilidade estatstica que se deseja obter na amostragem quantitativa. Em geral, so aplicadas frmulas onde se empregam
dados (mdia, desvio ou erro padro, varincia) provenientes de uma
campanha de amostragem preliminar. Os dados obtidos sero tanto mais confiveis quanto mais cuidadosamente definidos o local de
amostragem e o nmero de rplicas (para maiores informaes recomenda-se a consulta Elliott,1977 e Merritt & Cummins, 1996).
O plano de amostragem depende dos objetivos do projeto ou do programa de monitoramento. Cada caso requer uma metodologia especfica, tanto de coleta, quanto de ensaios e interpretao de dados.
6.1.7.1 "! "" @ "wwa! a)

H diversos mtodos para se avaliar a biomassa vegetal de um
ecossistema aqutico. Alm da estimativa do standing-stock por meio
da contagem do nmero de organismos num dado volume de gua
(determinao do fitoplncton, seja de gua doce ou marinha), pode-se
efetuar a estimativa pela determinao da concentrao de pigmentos,
sobretudo de clorofila a. A clorofila a que um pigmento comum a todos
os vegetais, representa de 0,1% a 9,7% do peso do material orgnico
em todas as algas planctnicas, sendo por isso, o indicador preferido
para estimar a biomassa algal.
Entretanto, as molculas de clorofila no so estveis; dependendo
das condies do meio, tais como mudanas do pH, temperatura, ou
luminosidade excessiva, elas podem sofrer degradao, originando
produtos conhecidos como feopigmentos. A feofitina a um produto
da degradao da clorofila a, que pode interferir grandemente nas medidas deste pigmento, por absorver luz na mesma regio do espectro
que a clorofila a. A relao entre clorofila a e feofitina a em ambientes
aquticos tem grande importncia na indicao do estado fisiolgico
da comunidade fitoplanctnica.
A determinao quantitativa da clorofila a propicia a avaliao do grau
de trofia do ambiente, ou seja o grau de enriquecimento por nutrien-
151
tes, podendo ainda ser utilizada para uma estimativa da biomassa algal,
bem como da produo primria.
Procedimentos de coleta
As amostras para determinao das concentraes de clorofila a e
feofitina a devem ser obtidas preferencialmente em replicata, por ponto
de coleta. A distncia entre as rplicas determinada aleatoriamente.
Estas rplicas so coletadas na superfcie, at 30cm de profundidade.
Deve-se sempre enxaguar o frasco com gua do local antes de introduzir a alquota que servir de amostra para exame. O frasco no deve ser
totalmente preenchido, a fim de facilitar a homogeneizao da amostra
antes da filtragem.
Os recipientes utilizados para o armazenamento de amostras para a
determinao de clorofila devem ser de vidro neutro, devido sensibilidade de algumas algas ao meio alcalino. Utilizar preferencialmente
vidros escuros (frasco mbar de 1L) com tampa rosqueada. No caso
de se utilizar outro tipo de frasco de vidro neutro, este deve ser protegido por folha de papel alumnio, para que no haja penetrao de
luz, evitando o metabolismo fotossinttico, bem como a degradao da
molcula de clorofila. Os frascos plsticos devem ser evitados, pois o
material tende a aderir nas paredes, resultando em perdas nas determinaes.
A amostra deve ser filtrada em campo, imediatamente aps a coleta;
caso isto no seja possvel, deve ser mantida refrigerada at a chegada
ao laboratrio, o que dever ocorrer em um prazo mximo de 48 horas
(ver detalhes no Anexo 1). Quando o pH da amostra for inferior a 6, ou
se considerado necessrio, a amostra pode ser preservada com carbonato de magnsio 1%.
152
Procedimentos para coleta de amostras para ensaio de clorofila a e feofitina

a em guas superficiais:
Antes da amostragem, deve-se verificar se h anlises correlatas como, por
exemplo, nutrientes, fitoplncton e teste de toxicidade, para se ter o cuidado
de distribuir alquotas da mesma amostragem nos diferentes frascos;
Realizar a coleta a aproximadamente 30cm abaixo da lmina dgua. Esta
coleta pode ser feita manualmente (submergindo o frasco de coleta), com
um balde de ao inox polido AISI 316L ou garrafa de amostragem;
Preencher o frasco de coleta de forma que fique um espao que possibilite a
homogeneizao da amostra.
Caso a filtrao no possa ser realizada no local, a amostra deve ser imediatamente armazenada ao abrigo da luz e transportada em caixa trmica com
gelo, nunca excedendo o prazo de 48 horas aps a coleta para a filtrao.
Procedimentos para coleta de amostras para ensaio de clorofila a e feofitina a em amostras de profundidade:
exemplo, nutrientes, fitoplncton e teste de toxicidade, para se ter o cuidado
Aps a coleta com garrafa de van Dorn, desconectar a mangueira de ltex da
garrafa;
Desprezar a gua contida na mangueira de ltex, e transferir para um frasco
de vidro, sendo que este no deve ser totalmente preenchido para que possa ser feita a homogeneizao de seu contedo no laboratrio;
Caso a filtrao no possa ser realizada no local, a amostra deve ser imediatamente armazenada ao abrigo da luz e transportada em caixa trmica com
gelo, nunca excedendo o prazo de 48 horas aps a coleta, para ser filtrada.
153
Procedimentos para filtrao das amostras para ensaios de clorofila a e feofitina a em campo:
Materiais:
Membrana filtrante (47mm de dimetro) de fibra de vidro ou membrana
filtrante de celulose hidroflica com porosidade entre 0,45mm e 1,0mm.;
Conjunto para filtrao a vcuo para membranas de 47mm de dimetro
(Figs. 68 e 69);
Pina de ponta reta, de ao inoxidvel, borda plana;
Envelope de papel pardo do tipo kraft, para armazenar o filtro com o contedo filtrado;
Proveta de 500mL a 1L;
Pisseta com gua destilada;
Bomba de vcuo, para filtragem sob presso (Figs. 70 e 71);
Frasco envolvido em papel alumnio ou dessecador, contendo slica gel,
onde os envelopes com as amostras so armazenados e mantidos sob
refrigerao.
Procedimentos:
Homogeneizar a amostra por cerca de dez vezes antes de iniciar a filtrao.
O volume de gua a ser filtrado pode variar de 0,05L a 1L, dependendo
da concentrao de organismos ou partculas em suspenso existentes na
amostra. Filtrar a maior quantidade possvel, preferencialmente todo o volume coletado, e anotar esta informao (volume filtrado);
Filtrar em membrana (47mm de dimetro) de fibra de vidro ou membrana
filtrante de celulose hidroflica com porosidade entre 0,45mm e 1,0mm.;
Este processo no deve exceder 10 minutos e a amostra deve permanecer
protegida da luz;
Aps o trmino da filtragem, lavar o funil internamente com gua destilada;
Com o auxlio da pina, dobrar o filtro contendo o material nele retido, uma
nica vez ao meio, sem que haja contato manual;
Guardar o filtro em envelope contendo indicaes do volume filtrado, identificao de amostras, ponto de amostragem, data e outras informaes que
sejam necessrias;
Colocar o envelope imediatamente em frasco escuro, ou envolvido em papel
alumnio, contendo slica gel;
Devido ao fato de que, temperatura ambiente e sob a ao da luz, as
molculas de clorofila degradam-se muito rapidamente, o frasco contendo
as amostras filtradas deve ser colocado, imediatamente aps a filtragem,
sob refrigerao at o momento de sua chegada ao laboratrio;
Transportar o frasco para o laboratrio de destino, sob refrigerao, em
caixa trmica com gelo. Se a amostra for demorar mais de 48 horas para
ser entregue no laboratrio, este frasco deve ser mantido congelado at a
ocasio do transporte.
154
Figura 68. $
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Figura 69.$
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Figura 70.+ &X=% _ % ;? %+ KK$+>
Figura 71.+ &X=% KJ

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156
6.1.7.2 Comunidade Fitoplanctnica

O termo fitoplncton refere-se comunidade de organismos
microscpicos fotossintetizantes que vivem em suspenso nas diversas
camadas de gua. Em ambientes de gua doce, o fitoplncton constitudo
principalmente por algas (clorofceas, diatomceas, euglenofceas,
crisofceas, dinofceas e xantofceas) e cianobactrias.
A distribuio vertical est predominantemente associada zona euftica onde, devido presena de energia luminosa, realizam a fotossntese. Constituem parte da comunidade responsvel pela produo
primria de um ecossistema aqutico sendo, portanto, a base da cadeia
alimentar tanto de ambientes marinhos como de gua doce.
A comunidade fitoplanctnica, de uma forma geral, pouco abundante
em ambientes pobres em nutrientes (oligotrficos). Entretanto, pode
estar bem representada por organismos de vrios grupos. J em
ambientes ricos em nutrientes (eutrficos), a comunidade geralmente
abundante com presena de espcies pertencentes a um nico grupo.
Como principal consequncia da eutrofizao destaca-se a proliferao
excessiva de algas e cianobactrias, fenmeno conhecido como florao
ou bloom, sendo as cianobactrias os organismos mais frequentes em
floraes de guas continentais (Fig.72). Esses microrganismos podem
produzir toxinas altamente potentes, conhecidas como cianotoxinas,
as quais podem apresentar efeitos neurotxicos, hepatotxicos ou
dermatotxicos.
(A)
(B)
Figura 72 ? % +

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157
Outros fatores influenciam a composio e distribuio da comunidade

de fitoplncton, alm da quantidade de nutrientes da gua, tais como:
vento, correnteza, estratificao, circulao, hora do dia, profundidade
de penetrao da luz, intensidade luminosa, estao do ano e presena
de material txico, entre outros.
O desequilbrio da comunidade fitoplanctnica pode trazer vrios problemas qualidade da gua, como: gosto e odor, colorao acentuada,
variao na concentraco de oxignio dissolvido, alm de que algumas
espcies apresentam potencial para produzir toxinas. Estes problemas
se agravam principalmente quando o uso da gua est direcionado
para abastecimento pblico.
O ensaio de fitoplncton, sua identificao e quantificao, so de
grande interesse para avaliar as condies ecolgicas de um ecossistema aqutico, prevenir ou controlar situaes indesejveis ou incompatveis com a finalidade de utilizao de um determinado manancial.
Procedimentos de Coleta do Fitoplncton
A amostragem para ensaio de fitoplncton pode ser feita de vrias
maneiras, dependendo do objetivo do estudo. Na gua superficial pode
ser realizada em uma nica tomada, de uma forma integrada (quando
vrias coletas da gua superficial so reunidas em uma amostra), ou
em rplicas (duas ou mais, que sero analisadas individualmente). Na
coluna dgua, pode ser feita em vrias profundidades e compostas
em uma nica amostra ou analisadas individualmente (rplicas).
recomendvel que em amostragens de rotina para programas de
monitoramento a coleta seja realizada, se possvel, no mesmo perodo
do dia. importante ressaltar que dentro do grupo das cianobactrias
existem espcies que possuem aertopos as quais podem migrar na
coluna dgua de acordo com a intensidade luminosa. Esta caracterstica
importante principalmente nas amostragens em guas captadas para
consumo humano, nas quais a altura da tomada da gua, bem como a
integrao de dados de toda coluna dgua, devem ser considerados.
158
Procedimentos para coleta manual de amostras, para ensaio fitoplncton,

em guas superficiais:
A coleta manual pode ser realizada com o balde de inox ou, na falta deste,
com o prprio frasco. Para tanto, deve-se submergir o frasco de 1 L (mbar,
de boca larga) na camada superficial (at 30cm) ou preench-lo com ajuda de
um balde de ao inox AISI 316L, tomando-se o cuidado de no preench-lo
completamente para facilitar a homogeneizao em laboratrio;
exemplo, nutrientes, clorofila a e teste de toxicidade, para se ter o cuidado
Manter a amostra refrigerada e ao abrigo da luz. Se necessrio, adicionar
ainda em campo, formol at uma concentrao final de 5%, ou lugol, procurando manter uma alquota, em um frasco menor (100mL), refrigerada para
observao do material vivo.
OBS - Procedimentos para a coleta manual de amostras de floraes de cianobactrias: Quando h formao de nata superficial no ponto de coleta,
proceder como descrito acima, tomando o cuidado ao se colocar o balde ou
o frasco na gua, para no movimentar muito a massa flutuante. Distribuir
alquotas da mesma amostragem nos diferentes frascos.
Procedimentos para coleta de amostras para ensaio de fitoplncton, com

auxlio de equipamento:
Coleta com garrafas de profundidade van Dorn horizontal e vertical
A coleta com garrafa pode ser utilizada para amostragem superficial e de
profundidade.
Aps a coleta com a garrafa na profundidade desejada, desconectar a mangueira de ltex;
Desprezar a gua contida na mangueira de ltex e distribuir a amostra para
o(s) frasco(s) o mais rpido possvel tomando-se o cuidado de no preench-lo(s) completamente, para facilitar a homogeneizao no laboratrio. Neste
caso tambm deve ser observado se h anlises correlatas como clorofila a
e teste de toxicidade para que as alquotas distribudas nos diferentes frascos sejam provenientes de uma mesma amostragem;
ainda em campo, formol at uma concentrao final de 5%, ou lugol, procurando manter uma alquota, em um frasco menor (100mL), refrigerada para
observao do material vivo.
159
A coleta com redes de plncton geralmente empregada em estudos

qualitativos e pode ser feita por meio de arrasto horizontal e vertical,
principalmente. H vrios tipos de redes disponveis, sendo as mais indicadas para o estudo do fitoplncton as de malha de nilon com abertura de 20m a 45m. Recomendam-se as redes longas e de boca larga,
que possibilitam maior rea de filtrao. importante destacar que a
coleta com rede no permite a quantificao precisa do fitoplncton.
Alm disso, algumas espcies muito pequenas (nanoplncton) no so
retidas no copo, impossibilitando o conhecimento da comunidade total. Para ambientes com muito material em suspenso, como alguns
rios, recomenda-se a coleta com redes de at 60m, pois as de malhas
menores entopem e inviabilizam a filtragem do material.
Procedimentos de coleta horizontal do fitoplncton com rede:
Amarrar uma corda na extremidade da rede;
Em seguida, mergulha-se a rede na gua a uma profundidade at 30cm;
Com auxlio de uma embarcao realizado um arrasto na superfcie por
tempo determinado, tomando-se o cuidado de evitar a zona de turbulncia
provocada pelo deslocamento da embarcao;
A amostra retida no copo da rede transferida para um frasco. Com auxlio
de uma pisseta de gua destilada, efetuar a lavagem, de fora para dentro do
copo, como forma de retirar o material aderido ao mesmo;
ainda em campo, formol at uma concentrao final de 5%, ou lugol ou soluo Transeau.
Procedimentos de coleta vertical do fitoplncton com rede:

Mergulhar a rede na gua at a profundidade desejada;
Suspender a rede lentamente at a superfcie;
A amostra retida no copo da rede transferida para um frasco. Com auxlio
de uma pisseta de gua destilada, efetuar a lavagem de fora para dentro do
copo, como forma de retirar o material aderido ao mesmo;
Caso haja necessidade de uma quantidade maior de organismos
fitoplanctnicos, repetir o procedimento descrito nos itens anteriores;
ainda em campo, formol at uma concentrao final de 5%, ou lugol ou soluo Transeau.
160
Procedimentos de Coleta para Determinao de Cianotoxinas:

A amostragem deve ser realizada na superfcie da gua, coletando-se apenas
a nata superficial, diretamente com frasco ou balde de inox;
Armazenar em frasco de polietileno de 5 litros sob refrigerao.
Obs.: Quando no houver presena de nata, pode-se realizar arrastos
(vertical e/ou horizontal) com rede procurando concentrar o maior nmero de
organismos; armazenar em frasco adequado sob refrigerao.
6.1.7.3 Comunidade Periftica

O perifton, segundo Wetzel (1983) constitui uma complexa comunidade de microrganismos (algas, bactrias, fungos e animais) aderidos a
substratos orgnicos (vivos ou mortos) ou inorgnicos.
Os primeiros amostradores artificiais de perifton foram desenvolvidos
por Moebius em 1883 para coleta de animais em ambientes marinhos,
utilizando lminas de microscpio (SCHWARTZBOLD, 1990). A maioria dos estudos sobre a comunidade periftica tem como foco as cianobactrias e algas, remetendo-se raiz nomenclatural do termo (fton).
O perifton tem papel importante no metabolismo dos ecossistemas
aquticos continentais, sendo considerado um dos produtores primrios mais significativos tanto em ambientes lnticos como em ambientes lticos. Em muitos ecossistemas, o perifiton pode contribuir com
cerca de 70 - 80% de matria orgnica para a produtividade total. Alm
disso, destaca-se como regulador do fluxo de nutrientes.
Organismos perifticos colonizam muitos habitats de rios e lagos e tm
sido utilizados como indicadores biticos de caractersticas do ambiente e para biomonitoramento.
Dentre as caractersticas que tornam esta comunidade boa indicadora
da qualidade da gua incluem-se:
4 Sendo ssseis, esto sempre submetidos s condies do local e

$

"
161
4 Apresentam a relao volume/superfcie grande, o que favorece

o acmulo de certas substncias qumicas e contaminantes como
DDT, Dieldrin, 32P, 65Zn, etc.;
4 Tem ampla ocorrncia e distribuio;
4 H dados disponveis sobre sua autoecologia e limites de tolerncia;
4 Por seu ciclo de vida curto e alta taxa de reproduo, respondem
rapidamente a mudanas ambientais e tem requerimentos am X
Y6
torna excelentes indicadores de qualidade da gua. Esta comunidade tem sido utilizada para monitoramento e avaliao da qualidade,
tanto em gua doce, como no meio marinho.
Estudos de perifton de guas continentais podem incluir toda a comunidade ou partes desta, tais como diatomceas. Com essa perspectiva,
os equipamentos e aparelhos desenhados para coleta de perifton tambm foram caracterizados para amostragem de toda a comunidade ou
para a coleta de assemblias como as diatomceas.
Uma reviso sobre metodologias de coleta utilizando substratos artificiais foi feita por SLDECKOV (1962). PANITZ (1980) testou
substratos artificiais variados para amostragem de perifton em reservatrios e SCHWARTZBOLD (1990) fez uma comparao entre metodologias de amostragem de perifton tanto em substratos artificiais
como naturais.
Mtodos comumente utilizados para coleta de perifton de gua doce
Os mtodos de coleta de perifton podem ser classificados como:
4 coleta manual de substratos naturais captura total ou de parte de
substratos naturais (folhas, ramos, pedras);
4 coleta com delimitador captura em rea determinada do substrato natural, mediante perturbao manual do substrato (como por

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4

3
6
nizao, sem destruir ou perturbar o ambiente em amostragem
X
@
Y
Quaisquer destes mtodos podem ser utilizados para amostragens
quantitativas, no entanto a comparao entre pontos s pode ser feita
quando os habitats investigados forem similares. No caso de utilizao
162
de substratos artificiais, necessria tambm a padronizao do tempo de exposio.

4?"w
A avaliao dos substratos naturais disponveis no ambiente em estudo, comparando facilidade de coleta, constncia de ocorrncia em todos
os pontos amostrais e possibilidade de uso, bem como a avaliao da possibilidade de uso do mesmo equipamento/aparelho para coleta, seja em
substratos naturais ou artificiais, parte da preparao da coleta.
Os substratos naturais devem ser padronizados, dentro do possvel,
quanto ao tamanho das pedras, o tipo de folhas (forma, rugosidade e
desenvolvimento maduras, mas no senescentes) e ramos (quanto
espessura, formato e rugosidade).
No caso de uso de substratos artificiais, estes devem ser instalados no
local previamente coleta propriamente dita, para teste do tempo de
colonizao.
Um procedimento comum em qualquer metodologia de coleta
de perifton o clculo de rea raspada/coletada, que possibilita
a expresso dos resultados posteriores em organismos por rea.
A exatido dos resultados depende diretamente dessas medidas que
precisam, portanto, ter a maior acurcia possvel.
Outro cuidado que deve ser comum a qualquer metodologia a limpeza de acessrios, aparelhos e equipamentos entre coleta de rplicas e
principalmente entre pontos. Esta limpeza deve ser feita com gua do
local (entre rplicas) e com gua potvel (de torneira) entre um ponto
de coleta e outro.
A seguir so descritos procedimentos de coleta de perifton em
substratos naturais (folhas, ramos e pedras) e artificiais (flutuador com
lminas de vidro).
4 "w
Pode-se amostrar a comunidade periftica de substratos naturais
orgnicos (folhas, ramos), inorgnicos (pedras) ou utilizar substratos
artificiais. Substratos naturais podem ser amostrados em rios/riachos
e margens de reservatrios.
163
A escolha dos substratos depende de sua disponibilidade no local, do

tempo e oramento disponveis.
Procedimentos para coleta de perifton em substratos naturais (folhas, ramos, pedras pequenas):
Vistoriar o local em busca das melhores plantas, ramos e/ou pedras. A seleo deve levar em conta submerso, evitando-se substratos expostos, e padronizao de rplicas, optando-se por substratos o mais semelhantes em
textura e tamanho. Devem ser coletadas pelo menos trs rplicas de cada
substrato (Figs. 73 e 74);
Cortar ramos e folhas selecionados com auxlio de tesoura, que deve ser lavada com gua do local depois da coleta de cada rplica. Colocar o material
coletado em bandeja, com o lado a ser raspado para cima (Figs. 75 e 76);
Raspar cada um dos substratos com pincel macio, lavando o material raspado para o frasco de amostra com gua destilada, com auxlio de pisseta.
A gua deve ter um volume conhecido (neste caso, 150mL). No caso das pedras e das folhas, raspar apenas a parte superior (Fig. 77);
Homogeneizar as amostras e dividir em 2 frascos, sendo 80mL para anlise
de clorofila a e 70mL para anlise da comunidade;
Preservar a amostra para estudo da comunidade com 6mL de formol 4%, 3
gotas de lugol ou soluo Transeau (1:1). Manter a amostra para anlise de
clorofila a refrigerada;
Medir comprimento e dimetro dos ramos, com auxlio de rgua e paqumetro. Desenhar com lpis o contorno das folhas e pedras raspadas, em papel
vegetal. Os desenhos sero usados posteriormente para medida da rea,
com medidor de rea foliar. A rea dos ramos calculada por aproximao
da figura geomtrica mais prxima (cilindro). As medidas de rea permitem
a expresso dos resultados em organismos/cm2 (Figs. 78, 79 e 80).
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167
Em rios/riachos rasos onde ocorram pedras grandes que no possam

ser removidas, a coleta do perifton pode ser realizada com o perifitmetro com escova, modificado de Vis (VIS, 1997; VIS et al, 1998).
Procedimentos para coleta de perifton em substrato natural consolidado (pedras grandes demais para serem deslocadas) com perifitmetro com escova:
Selecionar as pedras a serem amostradas;
Encostar a borracha da parte inferior do equipamento na pedra, no local
mais plano possvel evitando que gua entre ou saia de dentro do tubo (Fig.
81 A);
Escovar toda a superfcie delimitada pelo equipamento, tentando retirar
todo o perifton sem usar muita fora (Fig. 81 B);
Colocar a extremidade com a mangueira livre no frasco de coleta. Levantar a
mangueira com a pra na extremidade e bombear at que toda a gua e perifton raspado tenham sido transferidos do interior do equipamento para o
frasco de amostra (Fig.81, C);
Preservar a amostra com lugol, formol 4% ou soluo Transeau (1:1).
(A)
(B)
(C)
Figura 81.

56
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168
Substratos artificiais, como flutuadores com lminas de vidro podem

ser usados em rios/riachos ou reservatrios onde haja razovel proteo contra vandalismo (locais mais distantes, com margens florestadas,
propriedades privadas).
Os tubos de vidro cilndricos e lminas de microscpio so considerados excelentes substratos artificiais por seu baixo custo, boa aderncia
e colonizao do perifton, facilidade de remoo do biofilme aderido e
fcil delimitao de rea e volume.
Procedimentos para coleta de perifton em substrato artificial com flutuador de lminas de vidro:
Selecionar o local para instalao do flutuador, evitando a exposio e
acesso a estranhos, e determinar ponto de fixao na margem;
Prender o flutuador ao ponto fixo. Desenhar um croqui do local, anotar
coordenadas geogrficas e registrar fotograficamente, de modo a
possibilitar o resgate do equipamento;
Deixar o flutuador no local pelo tempo pr-determinado, usualmente, 15
dias (Fig. 82 A);
Depois do tempo pr-determinado, voltar ao local e retirar o equipamento
da gua, colocando-o em bandeja (Fig. 82 B);
Abrir o flutuador soltando dois dos parafusos das extremidades;
Retirar uma lmina de cada vez, raspar o perifton com pincel macio no
frasco de amostra, lavando com pisseta e gua. Preservar as amostras com
lugol, formol 4% ou soluo Transeau (1:1);
Pode-se optar por analisar a amostra completa em laboratrio. Nesse caso,
a lmina dever ser colocada sem raspagem, diretamente no frasco de coleta e preservada.
169
(A)
(B)
Figura 82.

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Fixao e preservao de amostras de perifton

Para a fixao e conservao do perifton existem vrios processos e
produtos citados na literatura:
4 Congelamento - uma forma de preservao utilizada para anlise
de biomassa, composio de diatomceas e abundncia semiquantitativa de txons como clorofceas e cianobactrias. Este o nico
mtodo prtico para preservao de grandes amostras para anlise
de biomassa;
4 Soluo Transeau a desvantagem deste preservante a grande
quantidade de soluo necessria, o que torna o custo elevado e
inviabiliza o seu uso em excurses de coletas de maior durao ou
com grande nmero de amostras;
4 Soluo de formol 4 a 10% neutralizado pode ser usada para
preservao de amostras pequenas ou subamostras, para anlise
quantitativa e composio taxonmica;
4 Lugol actico 5% pode ser usado para amostras pequenas ou
subamostras, para anlise quantitativa e composio taxonmica.
A soluo de Lugol facilita a sedimentao (particularmente de pequenas diatomceas) e mantm estruturas celulares frgeis. Entretanto, este preservante s se mantm ativo por 1-2 anos, e as amostras
devem ser armazenadas no escuro e em frascos mbar.
Tanto o formol como o Lugol mantm as formas das algas sem carapaas. Formol o preservante usado mais comumente porque no degrada as estruturas das organelas ou colorao de algas sem carapaa.
Este preservante permanece ativo indefinidamente.
170
6.1.7.4 Comunidade Zooplanctnica

Os organismos zooplanctnicos so aqueles que vivem em suspenso
devido sua limitada capacidade de locomoo; podem ocupar toda a
coluna de gua, desde a superfcie at grandes profundidades. A maioria dos invertebrados est representada no zooplncton, seja como
adultos, larvas, ou ambos, assim como os ovos e larvas de peixes (vertebrados), e podem ocupar diferentes nveis trficos. Alguns dos organismos permanecem no ambiente planctnico durante todo o seu ciclo de
vida (holoplncton), outros, s parte dele (meroplncton), como larvas
de diversos grupos (poliquetos, crustceos, insetos e peixes). So encontrados em praticamente todos os ambientes aquticos, como lagos,
charcos, lagoas, esturios, oceanos e em muitos rios.
Apesar de apresentarem capacidade limitada de deslocamento horizontal, demonstram uma excepcional capacidade de migrao vertical.
Por isso, alm de uma distribuio horizontal heterognea, apresentam movimentos verticais diferenciados em resposta a diversos estmulos, como alimento, reproduo, luminosidade, correntes etc. Essa
migrao vertical pode ser dividida basicamente em dois tipos:
4 sazonal: associada reproduo ou a fatores fsico-qumicos.
Animais que vivem em guas profundas podem deslocar-se para
a superfcie numa determinada poca do ano para se reproduzir,
por exemplo, e animais que vivem na superfcie no inverno podem
mover-se para guas mais profundas e frias no vero, e vice-versa;
4 diria: associada principalmente intensidade luminosa. Cada
espcie tem preferncia por determinada intensidade de luz,
movendo-se mais para a superfcie ou mais para o fundo, medida
que o sol se eleva ou se pe durante o dia, sendo que a nebulosidade

@
A concentrao mxima do zooplncton ocorre, em geral, nas camadas
superficiais onde h, entre outros fatores, concentraes mais elevadas de alimento. Contudo, a quantidade de zooplncton de um local
depende da resposta a estmulos promovidos por diversos outros fatores, como perodo do dia, estao do ano, concentrao de nutrientes,
presena de substncias txicas na gua, entre outros. O tamanho dos
organismos zooplanctnicos geralmente varia de poucos micrmetros
at mais de 20mm e incluem flagelados, ciliados, rotferos, coppodes,
cladceros e outros invertebrados (Tab. 4).
171
#
wxYw""@wK ^? """
Grupo
Limites de tamanho
Ultrananoplncton ou
Picoplncton
< 2m
Principais organismos
Bactrias livres
!$6
alguns rotferos
Nanoplncton
2m - 20m
Microplncton
20m - 200m
|

6 6$6
rotferos, cladceros e coppodes
Mesoplncton
200m - 2mm
Cladceros, coppodes,
quetognatos e larvceos
Macroplncton
2mm - 20mm
Pterpodos, coppodes,
eufausiceos e quetognatos
20mm - 200mm
Cefalpodes, eufausiceos,
sergestdeos e mictofdeos
Micronecton
Megaloplncton
> 200mm
Cifozorios, Taliceos
Fonte: OMORI & IKEDA, 1984, modificado.
A comunidade zooplanctnica responde rapidamente s alteraes ambientais devido ao curto ciclo de vida dos organismos, fazendo com que
possam ser empregados como indicadores da qualidade da gua. Apesar disto, a natureza transitria e a distribuio frequentemente agrupada muitas vezes tornam necessria a interpretao de seus resultados conjuntamente com outros dados biolgicos, fsicos e qumicos,
coletados simultaneamente. Alm disso, o ambiente planctnico conta
com a presena comum, ainda que normalmente em baixas densidades,
de organismos bentnicos que fazem incurses na massa dgua ou so
ressuspensos na coluna dgua em funo de turbulncia e mistura de
gua, como na zona de influncia de rios, ocorrncia de chuvas e ventos
fortes, especialmente em locais rasos (<20m).
Muitos aparelhos de coleta foram desenvolvidos para essa comunidade em funo, principalmente, da variabilidade na distribuio do
zooplncton, da diversidade de ambientes e da capacidade de fuga e
de escape dos zooplanctontes e, por isso, no h um mtodo que colete toda a variedade de organismos. Na tabela 5 encontram-se algumas a
recomendaes para a escolha do aparelho de coleta.
172
Tabela 5. Recomendaes para a seleo do equipamento de coleta de zooplncton em diferentes ambientes.
Amostras
pontuais
Amostras
integradas
horizontalmente
Garrafas
Armadilhas
Bombas
Equipamento
Redes
Amostras integradas
verticalmente
Amostras
em
vegetao
guas
pelgicas ou
profundas
guas
litorneas
ou rasas
++
++
++
++
++
++
++
++
++
Legenda: (-) Pouco recomendado; (+) Recomendado; (++) Muito recomendado.
Como a distribuio do zooplncton geralmente agregada e durante

a coleta ocorre fuga e escape dos organismos, torna-se necessrio
aumentar o volume coletado por amostra ou adicionar rplicas (ou
ambos). Apesar de no existir definio quanto ao volume mnimo a
ser amostrado, pois depende da finalidade da investigao, sabe-se
que, em ambientes oligotrficos, estuarinos e costeiros, necessrio
coletar um volume muito maior (geralmente centenas de litros) do
que em ambientes eutrficos; j nesses ltimos a concentrao de
zooplncton frequentemente alta. Recomenda-se coletar um volume
mnimo, por rplica, de 100L para o zooplncton de gua doce e de 5m3
para o costeiro/estuarino e a obteno de pelo menos duas rplicas em
cada ponto de amostragem. Uma vez estabelecido o procedimento
e o equipamento de coleta, muito importante que estes no sejam
alterados ao longo do estudo, a fim de possibilitar a comparao
dos resultados. Na necessidade de informaes adicionais, deve-se
complementar com mais outro tipo de amostragem.
A seguir sero descritos os procedimentos para as coletas mais rotineiramente empregadas, sem mencionar tcnicas bioacsticas e de
observao in situ. Maiores detalhes sobre coleta de zooplncton
podero ser encontrados em APHA (2005), BOLTOVSKOY (1981),
De BERNARDI (1984), OMORI & IKEDA (1984), PINTO-COELHO
(2004) e UNESCO (1968).
173
i - Procedimentos de coleta com garrafas e armadilhas

A garrafa do tipo van Dorn a mais utilizada, porm h diversos outros
tipos de garrafas que podem ser empregados na coleta de zooplncton.
bastante eficiente para capturar organismos pequenos, que
apresentam baixa capacidade de locomoo e fuga, como protozorios
e rotferos. Por coletarem um volume pequeno (2L a 30L), quase
sempre necessitam de vrios lances para capturar as formas raras ou
de maior mobilidade. Por isso, no so recomendadas para ambientes
oligotrficos ou profundos. Para organismos maiores (cladceros e
coppodes), so preferidas bombas, armadilhas e redes. A armadilha
(ou trampa) uma associao de uma garrafa de maior capacidade e
uma rede.
As amostras obtidas com garrafas van Dorn ou com armadilha de
Schindler-Patalas so geralmente filtradas em redes de nilon de
malha conhecida. Podem ser utilizadas para ensaio qualitativo ou
quantitativo, em estudos para o conhecimento da distribuio vertical
do zooplncton, sendo estes equipamentos mais prticos para ambientes aquticos pequenos, como lagoas rasas ou pequenos lagos.
As principais vantagens que as garrafas e armadilhas exibem so a possibilidade de coleta em qualquer profundidade e o conhecimento do
volume preciso de gua em que os organismos foram capturados. Ambas podem ser empregadas satisfatoriamente em ambientes eutrficos, onde a abundncia de zooplncton e matria orgnica em suspenso podem reduzir a eficincia de outros equipamentos, em estudos de
microdistribuio e da zona litornea. Recomenda-se que a garrafa e a
armadilha sejam transparentes e sem partes brilhantes, a fim de reduzir a fuga de organismos mais velozes.
Estes equipamentos podem ser empregados para obter amostras pontuais ou integradas. A amostra pontual obtida simplesmente lanando-se em um determinado local, uma nica vez, o equipamento de coleta. J a amostra integrada o resultado de diversos lances realizados
no mesmo intervalo de tempo e reunidos em uma nica amostra.
174
Coleta de amostras para ensaio de zooplncton com garrafa van Dorn:

Lanar a garrafa de van Dorn e coletar na profundidade desejada, quantas
vezes forem necessrias;
A cada lance efetuado, filtrar o seu contedo em rede de plncton (a seleo
da malha depende de que classe de tamanho ou grupo de organismos se
deseja avaliar);
Remover o copo da rede, vertendo a amostra para o frasco de coleta;
Limpar o copo da rede, vertendo seu contedo para o frasco de coleta quantas vezes forem necessrias para a completa remoo dos organismos;
Adicionar formol e completar com gua filtrada (zooplncton de gua doce)
ou com gua do local (zooplncton marinho) at obter uma soluo de
formol 10% neutralizado. Em amostras de gua doce, adicionar previamente ao formol, 100mL de gua gasosa e esperar por 15 minutos, aproximadamente;
Sempre que possvel, adicionar de 5mL a 10mL de soluo do corante
rosa de bengala 0,1%;
Fechar bem o frasco coletor e mant-lo ao abrigo da luz.
A coleta integrada de zooplncton ao longo da coluna dgua com garrafa ou armadilha deve ser realizada de forma homognea (a mesma
quantidade de lances) em cada estrato, desde a superfcie at prximo
do fundo (geralmente de 0,5m a 1m do fundo).
Coleta de amostras para ensaio de zooplncton com armadilha de
Schindler-Patalas
Lanar a armadilha e coletar na profundidade desejada;
Retirar a armadilha da gua;
Remover o copo, vertendo a amostra para o frasco de coleta;
Limpar o copo da rede, vertendo seu contedo para o frasco de coleta
quantas vezes forem necessrias para a completa remoo dos organismos
(figs. 83 A, B, C, D, E, e F);
Ao final de todos os lances, adicionar formol ao frasco de coleta e completar
com gua filtrada (zooplncton de gua doce) ou com gua do local
(zooplncton marinho), at obter uma soluo de formol 10% neutralizado.
Em amostras de gua doce, adicionar previamente ao formol, 100mL de
gua gasosa e esperar por 15 minutos, aproximadamente;
Sempre que possvel, adicionar de 5mL a 10mL de soluo do corante rosa
de bengala 0,1%;
175
(A)
(D)
(B)
(E)
(C)
(F)
Figura 83: ! Y

' $'
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KZ%

;+>KZ%

y ;>
;> f ;K> 5k

5 ;?> \ f

paredes (Fotos: Jos Jorge Neto/CETESB).
ii - Procedimentos de coleta com bombas

As bombas podem ser usadas em estudos qualitativos e quantitativos
do zooplncton. Contam com a facilidade de manejo, preciso da profundidade de coleta e facilidade de clculo do volume de gua coletado.
Contudo, deve-se selecionar uma bomba cujas engrenagens no fragmentem os organismos, que precisam permanecer intactos para identificao.
As bombas contam com a limitao da profundidade em que podem
operar e do dimetro relativamente pequeno do tubo de entrada,
que dificulta a captura de organismos maiores, mais ativos e que
podem evitar facilmente a suco na entrada do tubo. Para evitar
esse problema, um funil pode ser colocado no bocal para diminuir
a velocidade de entrada da gua e aumentar a rea de ao do
176
equipamento, principalmente em ambientes pouco turbulentos, nos

quais podem ocorrer erros maiores de amostragem.
iii - Procedimentos de coleta com redes de plncton
As redes de plncton so a aparelhagem mais empregada no estudo do
zooplncton geral. Apesar disto, h um considervel nmero de erros
associados amostragem com redes, desde aqueles decorrentes do
arrasto propriamente dito (volume, fuga, escape, seletividade, estrato
amostrado, contaminao, colmatagem, distribuio agrupada, eficincia de filtrao, etc) at aqueles associados perda de organismos, que
ficam aderidos malhagem, durante a transferncia do material para
o frasco de coleta. No entanto, as redes de plncton so preferveis s
garrafas e armadilhas para amostragem em ambientes oligotrficos,
onde o zooplncton menos abundante ou onde elevada quantidade
de biomassa necessria para as anlises.
De uma forma geral, deve-se utilizar redes cujos poros sejam, pelo
menos, 25% menores que a largura dos organismos desejados
(BOLTOVSKOY, 1981). Para o estudo do zooplncton geral de gua
doce recomenda-se usar malha com porosidade de 60m a 75m e
para o zooplncton marinho entre 150m e 250m.
A fuga de organismos, um dos principais problemas relacionados
amostragem com rede, pode ser reduzida pelo uso de redes maiores,
de cores discretas, sem partes brilhantes, velocidades aumentadas
(entre 0,5m/s e 1,0m/s), e remoo de acessrios da frente da rede.
Se o objetivo for um estudo quantitativo, deve-se equipar as redes com
fluxmetro calibrado entre o centro e a borda da boca da rede, para
estimar o volume de gua filtrado pelo arrasto. O procedimento para
a calibrao do fluxmetro est descrito em Hubold (1979). Quando
no se dispe de fluxmetro, pode-se estimar o volume filtrado (m3)
durante o arrasto vertical por meio da frmula:
volume de gua filtrado (m3) = rea da boca da rede (m2) x profundidade
de coleta (m).
Esse procedimento, contudo, no recomendado por levar a uma estimativa pouco precisa do volume filtrado, devido ao erro introduzido
pela colmatagem.
177
Os arrastos mais empregados na coleta de zooplncton so o horizontal

e o vertical.
(a) Arrasto horizontal
D-se preferncia amostragem por arrastos horizontais em determinados estratos, em lugares rasos, prximos s margens, ou onde
grande a influncia de fatores fsicos, como o vento e correntezas. Este
tipo de coleta tem a finalidade de estimar a distribuio e abundncia
do zooplncton dentro de uma camada de gua em particular. Deve-se
fixar um flutuador junto boca da rede para mant-la na profundidade
desejada.
Procedimentos de coleta por meio de arrasto horizontal:
Lanar a rede na gua, tomando-se o cuidado de anotar a leitura inicial do
fluxmetro;
Estando a rede na profundidade desejada, iniciar lentamente o seu deslocamento de forma que a rede fique longe da zona de turbulncia causada pelo
motor da embarcao;
A velocidade do arrasto no deve ser superior a 0,5m/s;
Depois de decorrido o tempo determinado de arrasto, puxar lentamente o
cabo no qual a rede est amarrada e retirar a rede da gua lentamente;
Imediatamente aps a sada da boca da rede da gua, anotar a leitura final
do fluxmetro;
Remover o copo da rede com o zooplncton concentrado, vertendo a amostra para o frasco de coleta;
Limpar o copo da rede, vertendo seu contedo para o frasco coletor, quantas vezes forem necessrias para a completa remoo dos organismos;
Adicionar formol neutralizado at uma concentrao final de 10% (proporo de 1 parte de formol para 9 partes de amostra) e completar o frasco coletor com gua filtrada (no caso de zooplncton de gua doce) ou com gua
do local (no caso de zooplncton marinho);
de bengala 0,1%;
(b) Arrasto vertical

A coleta por meio de arrasto vertical , em geral, mais apropriada do
que o arrasto horizontal pois o zooplncton pode apresentar-se verticalmente descontnuo, com tendncia a se concentrar nas camadas
mais profundas durante o dia, por exemplo. Entretanto, esse tipo de
178
amostragem deve ser realizado em regies onde os fatores fsicos,

como correntezas, interferem pouco na coleta da amostra.
Procedimentos de coleta por meio de arrasto vertical:
Lanar a rede na gua lentamente, tomando-se o cuidado de anotar a leitura
inicial do fluxmetro;
Descer a rede at 0,5m-1,0 m do fundo. importante evitar que a rede no
bata no fundo, o que ressuspenderia o sedimento e contaminaria a amostra;
Subir lentamente a rede e, imediatamente aps a sada da boca da rede da
gua, anotar a leitura final do fluxmetro. A velocidade do arrasto deve ser
de 0,5m/s, aproximadamente;
Retirar a rede da gua. No caso da rede subir com muito material aderido
malha, recomendvel submerg-la (deixando a boca da rede fora dgua) a
fim de que a gua do local empurre, de fora para dentro, os organismos que
ficaram aderidos;
Remover o copo da rede com o zooplncton concentrado, vertendo a amostra para o frasco de coleta;
Limpar o copo da rede com a gua da pisseta, vertendo o contedo do copo
para o frasco coletor quantas vezes forem necessrias para a completa remoo dos organismos, principalmente das malhas laterais;
Adicionar formol neutralizado at uma concentrao final de 10% (proporo de 1 parte de formol para 9 partes de amostra) e completar o frasco coletor com gua filtrada (no caso de zooplncton de gua doce) ou com gua
do local (no caso de zooplncton marinho);
de bengala 0,1%;
(c) Cuidados a serem tomados na coleta de zooplncton com redes:

4 a coleta com rede deve ser realizada com o maior cuidado possvel,
evitando-se sacudidas e golpes contra o casco da embarcao para
evitar fuga dos organismos;
4

@

@

no permitir o entupimento da malha (colmatagem);
4
@

6
@

6
que exigiria correo imediata;
4 importante limpar a rede entre dois pontos de coleta com gua do
local; esse procedimento ajuda na desobstruo dos poros do cone

X Y@ Q
pela presena de organismos de outro local.
179
iv - Fixao e preservao de amostras de zooplncton

Existem vrios produtos empregados na fixao e conservao do
zooplncton, sendo o formol (5 a 10%) neutralizado e o etanol (70 a
95GL) os mais amplamente utilizados. Recomenda-se a adio da soluo de formol neutralizado com sacarose (item 3.5.2.) para prevenir
a distoro da carapaa e a perda de ovos em cladceros de gua doce
e a adio da soluo corante rosa-de-bengala 0,1% (10mL, dentro de
24 horas aps a coleta), tanto como forma de destacar organismos em
ambientes trbidos, como para controlar a perda de organismos durante a manipulao para o ensaio.
A fixao do zooplncton deve ser realizada imediatamente aps a coleta
(de 5 a 10 minutos), para evitar a deteriorao e reduzir a predao ainda
no frasco. Contudo, alguns grupos zooplanctnicos contraem o corpo com
a aplicao do fixador, como alguns rotferos, dificultando a identificao
posterior. Para reduzir esta contrao, pode-se refrigerar rapidamente
a amostra viva, ou adicionar um pouco de gua quente ou gua gasosa
(100mL, aproximadamente) logo aps a coleta da amostra. Esperar 5 a
10 minutos e preencher o frasco completamente com a soluo fixadora (para reduzir as perdas do zooplncton que fica aderido s paredes do
frasco), sendo recomendada a proporo mnima de 2/3 desta soluo.
Amostras de zooplncton conservam-se por longos perodos, desde
que estejam armazenadas em locais abrigados de luz, com temperaturas entre 5oC e 20C, e o nvel da soluo conservadora seja periodicamente verificado.
6.1.7.5 "}? "

O termo macrfitas aquticas refere-se a plantas superiores de
tamanho macroscpico que habitam os ambientes aquticos. Este grupo
apresenta uma grande heterogeneidade filogentica e taxonmica,
podendo incluir desde macroalgas, pteridfitas at angiospermas.
Alguns dos gneros mais conhecidos so os aguaps (Eichhornia),
alface-dgua (Pistia), vitria-rgia (Victoria) e taboa (Typha). Sua
presena mais notada na regio litornea dos ambientes aquticos,
incluindo ambientes de gua doce, estuarinos e marinhos, sendo
possvel classific-las em cinco grupos distintos, conforme seu bitipo.
Elas podem ser plantas enraizadas, emersas, com folhas flutuantes
ou submersas. Outros grupos so as plantas livres submersas ou
180
flutuantes. A sua distribuio espacial no ambiente depende do grupo

a que pertencem. Plantas enraizadas com folhas emersas ou flutuantes
esto condicionadas profundidade, j que seus pecolos tm um limite
fsico de comprimento, sobretudo no que diz respeito s trocas gasosas.
As plantas submersas enraizadas so limitadas pela transparncia da gua.
J as plantas flutuantes e as submersas livres tm outras limitaes como
nutrientes, vento e correnteza, por isso no so frequentes em ambiente
lticos, mas sim em reservatrios, podendo inclusive se transformar em
um problema para o abastecimento, gerao de energia e navegao.
A contribuio das macrfitas aquticas na produtividade de um
ecossistema e na criao de habitats para o desenvolvimento de outras
espcies justifica a sua importncia.
As metodologias de utilizao de macrfitas aquticas como
instrumento de monitoramento de ambientes aquticos podem ser
divididas em duas linhas bsicas: a primeira que utiliza as alteraes
na composio das comunidades como indicadoras de um impacto
(estudos fitossociolgicos) e a segunda que utiliza ensaios qumicos
do material vegetal para determinar a eventual bioacumulao de
contaminantes (estudos de bioacumulao).
Macrfitas aquticas so amplamente utilizadas como bioindicadoras
da qualidade da gua de ambientes lnticos e lticos. Entretanto torna-se necessrio que haja o conhecimento prvio das suas caractersticas, bem como das condies que limitam sua ocorrncia e crescimento; da proliferao e manejo da espcie utilizada.
+" ?" ""w"
Esses estudos pressupem um levantamento detalhado da composio especfica dos diferentes ecossistemas e levam em considerao
tanto as variaes de habitats como as variaes sazonais. Alguns artigos apresentam a listagem de espcies encontradas em diferentes regies do Brasil (IRGANG; GASTAL JNIOR, 2003), mas muitas delas
so consideradas semicosmopolitas. Para a identificao at nvel de
espcie, algumas vezes necessrio recorrer s partes reprodutivas,
apesar de existirem chaves mais direcionadas s partes vegetativas
(COOK,1996; HOEHNE, 1979).
Existem algumas metodologias para levantamentos qualitativos e
quantitativos, sendo mais utilizados para ambientes aquticos os
181
mtodos de parcelas, por meio de amostragem aleatria, ou em

transectos. Em POTT e POTT (2003) so apresentados mtodos
de levantamento em transectos com diagrama de distribuio de
espcies em relao profundidade e distncia da borda. Pode-se
ainda, a partir destes levantamentos, calcular a porcentagem de
cobertura ou de abundncia/dominncia das diferentes espcies.
Em APHA (2005), so apresentados mtodos de mapeamento,
incluindo o sensoriamento remoto, mtodos de levantamento
das populaes de macrfitas aquticas, metodologias de
coleta e abordagens quantitativas, bem como mtodos para a
avaliao de produtividade. Para avaliaes de biomassa deve-se
considerar que a biomassa de plantas enraizadas est em grande parte
enterrada.
Tcnicas de levantamento utilizadas:
4
4
4
4
4
4
Imagens de satlite (Landsat)

Imagens de satlite de alta resoluo (Ikonos)
|$

$

Levantamentos em campo (GPS e SIGs)
$
$
Ecobatimetria tridimensional

"" "
A biomassa de macrfitas o peso do material vegetal contido acima e
abaixo da lmina dgua, inclusive do material presente no interior do
sedimento, expresso por unidade de rea.
Por intermdio de um amostrador de rea conhecida, um quadro ou
parcela introduzida no local selecionado do banco de macrfitas aquticas, coleta-se em sacos plsticos todo o material vegetal vivo e morto
contido em seu interior. Posteriormente, o material seco e pesado
e o resultado final expresso por unidade de rea (maiores detalhes
encontram-se descritos em POMPO & MOSCHINI-CARLOS, 2003).
ii - Estudos de bioacumulao
Os estudos de bioconcentrao por macrfitas objetivavam, inicialmente,
a reduo da concentrao de nutrientes no ambiente, por meio das plantas. No entanto, um trabalho realizado por SEIDEL (1966) demonstrou
que Scirpus lacustri tambm era capaz de absorver grandes quantidades de
182
compostos orgnicos, como pentaclorofenol e EDWARD (1975) demonstrou a sua utilidade em estudos com pesticidas (DDT) e PCBs.
MAURI et al. (1988) fizeram estudos de absoro de mercrio com
Elodea densa e determinaram que a absoro podia ocorrer tanto pelas
razes como pelas folhas das macrfitas aquticas. Tambm estudaram
o processo de descontaminao, que consiste na eliminao dos
contaminantes para a gua, podendo ainda ocorrer a translocao
desses contaminantes do tecido velho para o jovem, ou vice-versa.
Os estudos podem ser passivos (Tab. 6), quando se coleta o material
em determinado ambiente para ensaio posterior, ou ativos, quando
introduz-se material no contaminado no meio, para ser recolhido e
analisado posteriormente.
Tabela 6. Caractersticas principais dos estudos passivos e ativos e determina
"" "}? "
TIPO DE COLETA
DEFINIO
VANTAGENS
DESVANTAGENS
Bioacumulao
Passiva
Coleta de

aquticas
presentes no
ambiente
Utiliza-se
espcimes que
ocorrem nos locais
a serem estudados;
Leva em
considerao
um possvel
desenvolvimento
de resistncia
(gentico) das
populaes dos
diferentes locais.
Em estudos
sazonais, ou com
comparaes
temporais algumas
espcies podem
desaparecer do
ambiente;
Ativa (ou
Mtodo de
Transplante) Bioacumulao
ativa.
Consiste em
introduzir material
no contaminado,
no meio, que ser
posteriormente
recolhido e
analisado.
Padronizao
da idade e
material vegetal
transplantado.
Podem ser
realizadas
comparaes em
qualquer poca
do ano, e para
qualquer perodo
de exposio.
Deve-se
realizar ensaios
preliminares dos
contaminantes nas
amostras.
As amostras
introduzidas
devem ser

para poderem ser
recolhidas.
Coleta de

aquticas
presentes no
ambiente
Utiliza-se
espcimes que
ocorrem nos
locais a serem
estudados.
Mtodo destrutivo
que elimina
material de uma
rea determinada.
Determinao
da biomassa
183
6.1.7.6 Comunidade Bentnica de gua Doce

Em projetos que integrem ensaios qumicos, fsicos, biolgicos e ecotoxicolgicos dos sedimentos, a coleta de amostras para ensaio da
comunidade bentnica deve anteceder as dos demais parmetros,
minimizando-se assim o efeito da perturbao do sedimento pelo
equipamento de coleta, que pode provocar a fuga ou a lavagem dos
organismos.
A escolha do amostrador a ser empregado na coleta da fauna bentnica depende do objetivo do trabalho, do tipo de ambiente a ser estudado e do substrato encontrado no local de coleta. Os amostradores
podem ser classificados em:
4 Pegador - captura, em rea, uma poro do sedimento do ambiente
em amostragem;
4 Corer - captura, em profundidade, uma poro do sedimento do
ambiente em amostragem;
4 Rede e Delimitador - capturam, em rea, mediante perturbao
manual do substrato; e
4

3
6
%Q6
destruir ou perturbar o ambiente em amostragem.
Amostragens qualitativas e semiquantitativas de bentos de gua
doce podem ser obtidas com o uso de qualquer tipo de amostrador, mas no segundo caso, o esforo amostral, em geral medido como tempo de coleta para redes ou nmero de unidades
amostrais para pegadores, corer, delimitadores e substratos artificiais, dever ser padronizado. Amostragens deste tipo em geral se destinam a um levantamento faunstico completo, em que
todos os tipos de habitat do ponto de coleta devem ser investigados, mesmo que para isso seja necessria a utilizao de mais de
um mtodo e/ou equipamento. Comparaes entre pontos de coleta diferentes s sero vlidas quando habitats similares forem
considerados. Embora este tipo de coleta consuma menos tempo,
a experincia e habilidade do operador tornam-se fundamentais,
pois necessrio que se defina, em campo, todos os diferentes tipos de habitat a serem amostrados.
No ensaio de bentos a pegada total considerada, inclusive a gua que
acompanha a amostra e o material orgnico e inorgnico grosseiro.
184
Nem todo tipo de amostrador se presta para amostragens quantitativas,

j que necessria a existncia de uma rea amostral definida, como
em pegadores, corers e delimitadores. Embora o nmero de rplicas
necessrio para tais amostragens seja calculvel a partir de dados
obtidos em estudos piloto, frequentemente estabelece-se como
trs a quantidade mnima de unidades amostrais, considerandose o tempo de processamento das anlises e a necessidade de
fornecimento rpido dos dados. Entretanto, a obteno de cinco
rplicas aumentaria a preciso e a exatido estatstica do dado e,
portanto, seria ideal.
Ao se realizar amostragem de organismos bentnicos ou de
sedimento para ensaio fsico-qumico, desaconselhvel a coleta
sobre pontes; uma vez que o sedimento sob ponte no o natural
do curso do rio.
Muitos pegadores, ao descer, formam ondas de choque na coluna
dgua que promovem uma lavagem na superfcie a ser coletada e, consequentemente, subestimam as populaes bentnicas amostradas.
O controle da velocidade de descida minimiza esse problema, mas o
ideal adotar aparelhos que apresentem mecanismos ou estruturas
que evitem essa perturbao do substrato.
O pegador Ekman-Birge solucionou satisfatoriamente esse problema
ao apresentar portinholas duplas em sua face superior, que se abrem na
sua descida e se fecham na subida. Sua eficincia na coleta de amostras da
zona profunda de lagos e reservatrios, onde predominam sedimentos
finos, tem sido demonstrada em uma srie de trabalhos comparativos
e, de fato, esse o equipamento mais empregado em estudos de bentos
destes locais. O corer mltiplo pode ser tambm uma boa opo,
principalmente na amostragem de populaes de menor tamanho e
que se enterram profundamente, como de vermes Oligochaeta. J o
corer simples, que possui rea amostral restrita, requerer um maior
nmero de rplicas para estimativas populacionais confiveis. Em
ambos os casos, a amostragem de organismos de maior porte, como os
grandes bivalves sul-americanos, comprometida pela pequena rea
de captura deste tipo de equipamento. A Ekman modificada por Lenz e
os equipamentos do tipo corer permitem fracionamento da amostra de
sedimento e, consequentemente, estudos da distribuio vertical das
populaes bentnicas.
185
Na zona marginal de lagos e reservatrios e em rios, onde o substrato

tende a ser mais grosso e duro, o pegador do tipo Ponar o que tem
sido considerado o melhor equipamento para amostragens quantitativas de bentos, sendo, por essa razo, o mais frequentemente usado.
Sua verso maior (523cm2) tem sido recomendada para ambientes preservados, enquanto que, para ambientes poludos, tem se considerado
suficiente a rea de pegada da verso menor (232cm2). Os pegadores
Petersen e van Veen, assim como o modelo modificado que funde esses dois aparelhos, tambm tm sido utilizados, embora no apresentem solues eficientes ao problema da formao de ondas de choque.
Em riachos rasos (profundidade inferior a 30cm) a rede D para coleta com o mtodo kick sampling e os delimitadores, que apresentam
reas de amostragem definida, so ideais para a coleta de organismos
bentnicos. No caso do kick sampling, onde o coletor perturba o fundo com os ps, deslocando os organismos para dentro da rede, fundamental padronizar e anotar o tempo de amostragem. A abertura de
malha da rede pode variar (de 0,35 a 0,6mm) e, embora as malhas mais
finas retenham populaes de menor tamanho e indivduos em estgios iniciais de desenvolvimento, essas promovem maior perda de material por refluxo. Na amostragem com equipamentos do tipo Surber
ou Hess, em que o substrato perturbado com as mos, recomendado o uso de luvas grossas para proteo contra objetos cortantes.
Nas coletas com redes e delimitadores, organismos de maior porte, visualizados no momento da coleta, podem ser retirados manualmente
da rea de coleta e colocados em frasco, sem serem jogados na rede.
Com este cuidado preserva-se sua integridade estrutural, facilitando
sua identificao.
A amostragem com substrato artificial tem como maiores vantagens
no ser destrutiva e padronizar o substrato de coleta. Porm, preciso
que se tenha em mente que as comunidades que colonizam os substratos frequentemente diferem daquela encontrada no substrato natural.
Na instalao desses equipamentos preciso se preocupar em minimizar perdas por vandalismo e inundaes e a recuperao deve ser
realizada ao mesmo tempo, de forma a que todos tenham sido teoricamente submetidos ao mesmo processo de colonizao.
Assim como o mtodo, o local de amostragem variar tambm com o
objetivo do trabalho. Por exemplo, em estudos que se destinem ava-
186
liao da qualidade de sedimento, a coleta da fauna bentnica dever ser realizada na zona de deposio de sedimentos finos, ou seja, na
margem deposicional ou remansos em rios e na regio profunda em
reservatrios e lagos. Neste caso, adequado o uso de pegadores ou
corer. Por outro lado, amostragens do bentos da zona sublitoral servem aos estudos de gradientes ambientais dentro de um reservatrio.
J a aplicao de ndices biticos em riachos pede uma amostragem
exaustiva, ou seja, de todos os tipos de habitat existente no ponto de
coleta, devendo, dependendo do ndice a ser aplicado, ser qualitativa
ou semiquantitativa.
Alguns dados fsicos e qumicos devem acompanhar a amostragem de
bentos para facilitar a discusso posterior dos resultados. A listagem
completa de variveis depender do local e do objetivo do projeto, mas
pode-se considerar como medidas mnimas a serem tomadas: profundidade, rea do amostrador ou tempo de colonizao, granulometria,
teor de matria orgnica e de umidade no sedimento, transparncia
da gua, velocidade da corrente, tipo de ambiente coletado (canal ou
margem/corredeira ou remanso para rios e riachos; litoral, sublitoral
ou profunda para reservatrios e lagos) e oxignio de fundo.
Cuidados na coleta
Alguns cuidados para prevenir erros de amostragem ou contaminao
da amostra por organismos que no pertenam ao local devem ser tomados na coleta. Essas aes dependero do tipo de amostrador usado
e esto apontadas a seguir.
187
Pegadores e Testemunhadores:
Desconsiderar amostras quando o pegador ou corer no tiver fechado
corretamente;
Amostras ideais devem ter volume correspondente a cerca de 2/3 da capacidade total do amostrador;
Lavar o amostrador entre dois pontos de coleta;
Cada amostra corresponder ao volume de uma pegada.
Substrato artificial (cesto com pedras)

Retirar rapidamente o cesto;
Inserir o cesto em sacos plsticos etiquetados ou rede antes de passar pelo
filme de tenso superficial, de forma a evitar a lavagem dos organismos;
Cada amostra corresponder ao contedo de um cesto.
Redes e Delimitadores
Amostrar todo tipo de habitat (p.ex.: canal, margens, vegetao, remansos)
existente no ponto de coleta;
No perturbar o ambiente a montante do amostrador, ou seja, processar a
amostragem de jusante para montante;
Evitar o escape de material pelas laterais da rede e pela face inferior dos
delimitadores;
Concentrar no fundo da rede o contedo aprisionado lavando-a com gua
de torneira e despejar o concentrado em frasco de coleta etiquetado;
Cada amostra corresponder ao contedo de um esforo amostral (tempo
para a rede e unidade de rea para os delimitadores).
Quando a coleta for realizada em local muito distante, envolvendo um

perodo de amostragem prolongado, adequado que as lavagens de
amostras coletadas com pegador ou corer sejam efetuadas em campo
para facilitar o transporte. Para tanto necessrio levar para campo
a rede ou peneira de lavagem, cuja malhagem ser definida de acordo
com o objetivo do estudo. A lavagem dever ser feita sob gua corrente
e o material retido armazenado em potes plsticos devidamente
etiquetados e fixados em formol em concentrao final na amostra de
10% ou lcool 70 GL.
188
6.1.7.7 Comunidade Bentnica Marinha

Esta comunidade abrange organismos ssseis, cavadores ou que se locomovem ou se arrastam sobre o substrato. Seus representantes ocupam toda a rea desde o nvel da mar alta at profundidades abissais,
compreendendo diversos tipos:
4 formas ssseis: animais tais como esponjas, cracas, mexilhes, poliquetas, algas macroscpicas e muitas diatomceas;
4 formas que se locomovem ou arrastam: caranguejos, lagostas,
coppodes, anfpodes, outros crustceos, protozorios, bivalvos,
gastrpodos e alguns peixes;
4 formas cavadoras: maioria dos bivalvos e poliquetos, alguns crustceos e equinodermos.
De acordo com o tamanho, os organismos do bentos so geralmente
classificados em:
4 Macrofauna ou macrobentos: compreende os organismos retidos
pela peneira com malha de 0,5mm (equivalente ABNT n. 35). Enquadram-se nesta categoria a maioria dos organismos cavadores ou
perfuradores de sedimentos no compactados, e os organismos que
se locomovem sobre sedimentos duros, incluindo os mais ativos;
4 Meiofauna ou meiobentos: inclui a maioria dos menores metazorios, que passam atravs da malha de 0,5mm (ABNT n. 35), e se
subdivide em:
Meiofauna temporria: composta pelos representantes jovens
pertencentes a qualquer grupo da macrofauna que possuem
estgios juvenis bentnicos; podem ser muito abundantes em
certos locais de amostragem;
Meiofauna permanente: composta por animais adultos de pequenas dimenses, tais como: rotferos, gastrotrqueos, tardgrados, ostrcodos, nemtodos, alguns poliquetas, gastrpodos, holoturides, tunicados etc.;
4 Microfauna: organismos que necessitam de tcnicas microscpicas
especiais para serem examinados. Incluem protozorios e outros
seres de dimenso semelhante.
Sob certos aspectos, o estudo da fauna bntica que habita a regio entre as mars mais fcil (por ser mais acessvel) do que nas reas localizadas abaixo delas, mas como o hbitat est sujeito tanto a condies
aquticas como areas, os fatores que influenciam sua distribuio so
189
mais complexos. Deve-se assinalar que uma determinada comunidade

bentnica vive em um determinado tipo de substrato, o qual, por sua
vez, representa um certo conjunto de condies fsico-qumicas do local de coleta.
Outros aspectos gerais influenciam a distribuio da comunidade
bentnica:
4 Profundidade: A densidade e a diversidade dos organismos tende a
decrescer com o aumento da profundidade das estaes de amos
$"

6

encontrados os organismos cavadores;
4 Latitude: A densidade e a variedade de organismos aumentam da
regio polar em direo ao equador;
4 Sedimento: O nmero e a diversidade de organismos diminuem

$
"$
6 Q
de ondas ou correntes e esto localizados perto de esturios ou
desembocadura de rios, onde h maior taxa de precipitao de
partculas orgnicas e certa oscilao na salinidade. Em sedimentos arenosos h grande quantidade de organismos cavadores, e em
@

i - Costo rochoso
Costes rochosos compreendem formaes de rochas cristalinas
baslticas ou granticas, presentes entre a terra e o mar, podendo
apresentar diferentes configuraes como falsias (substratos ngremes e elevados), costes amplos com superfcie homognea ou
recortada, ou campos de mataces de diferentes formas, tamanhos
e grau de agregao.
A superfcie rochosa favorece a colonizao e o desenvolvimento de
uma comunidade biolgica muito rica, a qual se encontra adaptada tanto a se aderir / fixar nesse tipo de substrato, como a suportar as adversidades ambientais ocorrentes principalmente nos limites da zona da
oscilao das mars (zona entre-mars).
Na zona entre-mars as algas e animais esto sujeitos a nveis variveis
de dessecao, temperatura, salinidade, hidrodinamismo etc, e cada
espcie encontra-se adaptada a exigncias ambientais especficas.
190
Dessa forma a comunidade biolgica desses ambientes apresenta uma

estrutura espacial em estratos (zonao) ao longo do gradiente vertical
do substrato. As flutuaes abiticas e biticas alteram marcadamente
a composio da comunidade em diferentes locais e ao longo das estaes do ano (variaes espao/temporais).
Tendo em vista essas particularidades, para o estudo dessas
comunidades fundamental estabelecer um protocolo de coleta e
amostragem que atenda os objetivos do pesquisador, cujas principais
abordagens esto contempladas a seguir. Ressalta-se que para esse
tipo de coleta, as mesmas devem ser realizadas durante baixamares
de sizgia, com consulta prvia Tbua das Mars editada pela DHN
(Diretoria de Hidrografia e Navegao).
a) Coleta para determinao da porcentagem de cobertura por espcies ssseis dominantes (amostragem quantitativa)
Contagem in loco:
Selecionar uma rea no costo, cuja largura deve estar relacionada ao grau
de homogeneidade da superfcie. Superfcies mais heterogneas devem ter
largura maior (a ordem de grandeza das reas de amostragem de algumas
dezenas de metros);
Em caso de locais formados por mataces, estabelecer subreas similares
quanto inclinao, orientao geogrfica e hidrodinamismo;
Demarcar a largura da rea de amostragem por meio de dois pinos de ao
cravados rocha, acima da zona ocupada pela comunidade biolgica. Os pinos alm de marcar a rea, servem como encaixe para parafusos utilizados
na amarrao das cordas e como sustentao ao pesquisador (EPI);
Unir os dois pinos por meio de uma corda graduada a intervalos regulares
de 22cm,o qual est associado largura do delimitador de campo utilizado
que apresenta 22cm x 18cm de rea;
Sortear, previamente em laboratrio, as marcas da corda que iro orientar a colocao do delimitador sobre a rea de ocupao da espcie a ser
amostrada;
Em campo, posicionar o delimitador (ver Captulo 5) na direo da marcao
sorteada, sobre a populao a ser amostrada, em sua rea mais densa de
ocupao, e contar as intersees sob as quais os indivduos dessa populao ocorrem;
Anotar o resultado em uma ficha de campo contendo local, data, horrio do
registro, espcie, denominao do ponto de amostragem e do nmero da
rplica.
191
Coleta pelo mtodo fotogrfico:

Consiste na utilizao de uma cmera fotogrfica subaqutica, com
lenteclose-up que enquadra a fotografia por meio de um suporte com um
delimitador e flashes estroboscpicos. Para realizar a coleta pelo mtodo
fotogrfico, deve-se:
Selecionar uma rea no costo, cuja largura deve estar relacionada ao grau
de homogeneidade da superfcie. Superfcies mais heterogneas devem ter
largura maior;
Em caso de locais formados por mataces, estabelecer subreas similares
quanto inclinao, orientao geogrfica e hidrodinamismo;
Demarcar a largura da rea de amostragem por meio de dois pinos de ao
cravados rocha, acima da zona ocupada pela comunidade biolgica;
Unir os dois pinos por meio de uma corda graduada. A graduao da corda
apresenta intervalos regulares, os quais so da mesma largura da rea padronizada pelo delimitador da mquina. Sortear, em laboratrio, as marcas
da corda que iro orientar a colocao do delimitador sobre a populao da
espcie a ser amostrada;
Em campo, posicionar o delimitador da cmera fotogrfica na direo da
marcao sorteada, sobre a populao a ser amostrada, e tirar a fotografia.
Devido presena dos flashes, as fotos podem ser tiradas durante a noite
desde que observados os EPIs adequados;
Em laboratrio, as fotos so analisadas no computador, por meio de editores
de fotos, sendo subdividida em 100 pontos de interseo homogeneamente
distribudos. Este procedimento pode ser feito tambm com o auxlio de um
projetor de slides ou projetor multimdia, sendo as fotos projetadas contra
uma cartolina branca subdividida da mesma forma;
So contados os pontos de interseo sob os quais indivduos da populao
esto presentes.
192
b) Coleta para determinao da estrutura espacial (zonao)

Contagem in loco:
Estabelecer um transecto vertical no costo, com 50cm de largura.
A delimitao do transecto feita com a utilizao de dois pinos de ao
cravados rocha acima da comunidade biolgica, distanciados em 50cm. Dois
pinos tambm podem ser cravados na rocha no limite inferior da zona entremars, para que assim a rea de amostragem esteja perfeitamente fixada;
Deve-se unir os pinos com uma corda que desce em ambos os lados do transecto at a base da rocha ou linha dgua, formando um trilho que vai orientar a colocao do delimitador (ver Cap. 5) de forma correta ao longo do
transecto;
A corda previamente marcada com lpis dermatogrfico ou tinta indelvel
a intervalos de 10cm, para auxiliar o posicionamento do delimitador nos
diferentes nveis do costo;
Posiciona-se o delimitador prximo linha dgua ou base da rocha,
conforme o caso, e conta-se o total de quadrculas no interior das quais
determinada espcie encontra-se presente;
Organismos (animais e vegetais) com identificao duvidosa devem ser
coletados para confirmao taxonmica em laboratrio ou para envio a
especialistas;
Os organismos devem ser coletados vivos e acondicionados em frascos
com tamanho proporcional ao tamanho dos indivduos e com tampa de boa
qualidade. Os vidros devem ser etiquetados, com identificao do local e
data de coleta, nvel do transecto, quando for o caso. importante que alm
das etiquetas externas, sejam feitas etiquetas internas, em papel vegetal,
escritas a lpis, pois as externas podem borrar ou ser perdidas;
Repete-se o procedimento paulatinamente, nvel a nvel no costo,
obedecendo-se as marcaes da corda, at o limite superior de distribuio
da comunidade;
Sugere-se a realizao de, pelo menos, 10 rplicas para as amostragens
quantitativas e trs transectos para a amostragem estratificada.
193
Coleta pelo mtodo fotogrfico:

Estabelecer um transecto vertical no costo. A delimitao do transecto feita
com a utilizao de dois pinos de ao cravados rocha, um acima dos limites da
comunidade biolgica, e outro prximo linha dgua ou base da rocha;
Os pinos so unidos por uma corda com marcaes feitas a intervalos de
18cm, constituindo um transecto perpendicular linha dgua;
So tiradas fotografias digitais contguas, desde o nvel superior at o nvel
prximo base da rocha ou linha dgua;
Em laboratrio, as fotos so analisadas no computador, por meio de editores de fotos, sendo subdividida em 100 pontos de interseo homogeneamente distribudos. Este procedimento pode ser feito tambm com o auxlio
de um projetor de slides ou projetor multimdia, sendo as fotos projetadas
contra uma cartolina branca subdividida da mesma forma;
So contados os pontos de interseo sob os quais indivduos das diferentes
populaes esto presentes;
Sugere-se a realizao de, pelo menos, 10 rplicas para as amostragens
quantitativas e trs transectos para a amostragem estratificada.
c) Coleta para amostragem qualitativa

Estabelecer uma rea padro de amostragem, representativa do costo de estudo, a qual comporte a estrutura fisiogrfica dominante da rea de interesse;
Deve-se padronizar, tanto quanto possvel, o tamanho da rea amostral, o
tempo de coleta (esforo amostral) e o nvel de detalhamento em coletas
sucessivas e entre pontos de coleta;
As observaes devem ser feitas minuciosamente, sendo as ocorrncias dos
organismos registradas em ficha de campo. As identificaes devem ser realizadas de acordo com o conhecimento do tcnico coletor;
Organismos (animais e vegetais) com identificao duvidosa devem ser coletados para confirmao taxonmica em laboratrio ou para envio a especialistas.
Os organismos devem ser coletados vivos e acondicionados em vidros com
tamanho proporcional ao tamanho dos indivduos e com tampa de boa qualidade. Os vidros devem ser etiquetados, com identificao do local e data
de coleta, nvel do transecto, quando for o caso. importante que alm das
etiquetas externas, sejam feitas etiquetas internas, em papel vegetal, escritas a lpis, pois as externas podem borrar ou ser perdidas.
Os invertebrados e as algas devem ser fixados com formol neutralizado, diludo a 10%. Animais pequenos podem ser alternativamente preservados
com lcool 70GL.
Estocar as amostras em local escuro at o ensaio.
194
ii - Praias
As praias so ambientes costeiros compostos basicamente de material
inconsolidado mineral, mais frequentemente areias, podendo conter
tambm lodo (silte, argila), cascalhos, pedras roladas, seixos, calhaus,
conchas de moluscos, restos de corais, algas calcrias etc.
Estes ambientes se estendem, perpendicularmente linha da costa, desde o nvel de baixa-mar at a zona de vegetao permanente,
restingas, dunas e falsias, sendo divididos em pores denominadas
ante-praia e ps-praia. A ante-praia representa a zona entre-mars
propriamente dita, a qual recebe os efeitos das ondas, enquanto que a
ps-praia s atingida pelos borrifos das ondas, ou ocasionalmente em
mars vivas excepcionais.
As praias so ambientes costeiros extremamente importantes
ecologicamente, seja pela sua prpria riqueza biolgica, seja
pelo importante papel que desempenham em relao aos outros
ecossistemas costeiros. A riqueza e composio biolgica so
extremamente variveis, dependendo do tipo e localizao da praia.
A riqueza em espcies de uma praia pode chegar a vrias dezenas
de espcies, principalmente pertencentes aos grupos dos moluscos,
aneldeos - poliquetos e crustceos. Vrios outros grupos esto
presentes, mas em menor abundncia e variedade de espcies.
Da mesma forma que em costes rochosos, as praias so ambientes
bastante complexos, com grande variedade de fauna, ocupando os diferentes microhabitats disponveis. A caracterizao das comunidades
de praias baseia-se em sua composio de espcies, riqueza, densidade
das populaes, distribuio espacial das comunidades (zonao horizontal e vertical), variaes temporais (sazonais, anuais, bianuais etc.),
entre muitos outros fatores.
Comumente, para avaliao dessa varivel, utilizam-se amostradores ou
delimitadores (cilndricos ou em forma de caixa) com tamanhos variveis,
aplicados em transectos contnuos ou no, perpendiculares linha dgua,
tambm com largura e nmero de rplicas definidas pelo pesquisador.
Para a coleta, os delimitadores so introduzidos no sedimento at
a profundidade de objetivo do estudo (10cm ou mais) sendo o material
coletado com o prprio delimitador ou com o auxlio de uma pequena p.
195
As amostras devem ser lavadas preferencialmente com gua do prprio local, logo aps a amostragem, para evitar choque osmtico.
Considerando que durante a preservao muitos organismos se contraem, dificultando a observao de estruturas importantes para a sua
identificao, alguns taxonomistas solicitam que os organismos sejam anestesiados antes da fixao com formol ou com lcool. Deste
modo, importante que se contate os especialistas que colaboraro
com os trabalhos de identificao, que indicaro, se ou qual, anestsico
dever ser utilizado.
Procedimentos detalhados a respeito dessas metodologias podem ser
encontrados em Amaral et al. (1994a; 1994b; 1988; 1995a; 1995b;
1991;1990), Belcio et al. (1989; 1995), Leite et al (1988; 1992), Lopes (1993); Lopes et al (1989); Monteiro (1980), Morgado et al (1994),
Pardo et al (1993; 1994), Reis et al. (1994), Rodrigues et al (1986), Rodrigues et al (1988), Salvador et al (1995), Shimizu (1990; 1992; 1994).
No que diz respeito s praias, as principais variveis ambientais determinantes da estrutura das comunidades biolgicas so o declive e a
topografia (perfil), as caractersticas granulomtricas do sedimento e
o hidrodinamismo. A metodologia de amostragem de declive e perfil de
praias encontra-se na Tabela 7, a seguir.
#
wY w" ww"Y
Equipamento
Forma de amostragem
rea de amostragem
Rplicas
196
Declivmetro, metros dobrveis.

Ao longo do transecto, perpendicular linha dgua,
em medidas lineares contguas.
Limitada pelas franjas do infralitoral e supralitoral.
Depende do objetivo do trabalho. Coletas nos cantos das praias possibilitam uma melhor caracterizao. Se for vivel apenas uma rplica em cada ponto,
devem-se padronizar as coletas no meio das praias.
iii - Infralitoral
Bentos marinho infralitoral composto pelos organismos que habitam
os sedimentos permanentemente submersos. Segundo sua posio no
substrato, os organismos bentnicos podem ser classificados como:
4 epifauna - vivem sobre o substrato;
4 infauna - vivem no interior de tubos e galerias no sedimento e
4 fauna intersticial - vivem nos interstcios dos gros.
a) Coleta para amostragem no infralitoral
4w }?
Em regies estuarinas ou costeiras, de um modo geral, as coletas so
realizadas com o auxlio de um pegador de fundo, do tipo Petersen
modificado, que amostra uma rea correspondente a 1/17m2. Em casos
onde a profundidade grande, prefervel lanar mo de pegadores
mais pesados, para favorecer a coleta do sedimento. Em ambiente
marinho o pegador mais utilizado o tipo van Veen, com capacidade
de 1/10m2.
Procedimento de coleta:
Aps agarrar o fundo, o pegador puxado bordo (com auxlio de
guincho eltrico ou manual, preferencialmente com o auxlio de um
pau de carga) e aberto no interior de uma cuba de polietileno de tamanho adequado. Se o volume de sedimento amostrado no for representativo em relao ao volume interno do pegador, deve-se desprezar
a amostra e repetir o procedimento. Para isso, deve-se orientar a embarcao para outra posio no local. Para uma boa caracterizao da
comunidade biolgica, deve-se trabalhar com replicaes, cujo nmero
(n) deve ser estabelecido por ocasio de amostragens preliminares.
importante que se considere cada local de amostragem no como um
ponto mas como uma rea, e que as rplicas sejam obtidas nessa rea
e no exatamente no mesmo local, para que a variabilidade natural seja
explorada. Esse aspecto de fundamental importncia para minimizar
concluses equivocadas sobre o ambiente. Recomenda-se, portanto,
que se alterne as coletas nas bordas da embarcao e que se derive um
pouco entre as coletas das amostras.
197
As amostras devem ser transferidas para o interior de sacos plsticos

reforados ou lavadas em campo, onde so empregadas peneiras de
malha 0,5mm (no caso de triagem de macrobentos) e gua do local.
Muitos organismos se contraem durante a preservao dificultando
a observao de estruturas importantes para a sua identificao, sendo recomendado por alguns taxonomistas que os organismos sejam
anestesiados antes da fixao com formol ou com lcool. importante que esses especialistas, que colaboraro com os trabalhos de identificao, sejam contatados para indicar se ou qual o anestsico dever
ser utilizado.
Os sacos plsticos de amostra e os frascos de material preservado devem ser etiquetados por dentro (com etiqueta vegetal) e por fora (com
etiqueta a caneta, ou lapis dermatogrfico), contendo informaes tais
como o nmero da amostra, o nmero do ponto de coleta e da rplica,
nome do projeto, data de coleta.
4w }?w
Pegadores amostram uma rea definida, podendo-se ento a partir
da calcular a densidade populacional da comunidade bentnica em
estudo sendo, portanto, uma amostragem quantitativa. Dependendo
do objetivo do estudo, uma amostragem qualitativa apenas, oferece
informaes suficientes. Nesse caso o que se obtm uma estimativa
da riqueza em espcies da comunidade em questo, sem, no entanto,
saber o nmero de indivduos presentes de cada espcie.
Nesse tipo de coleta, utiliza-se uma draga que opera por arrasto horizontal. Como uma grande rea amostrada, esse tipo de coleta permite avaliar de modo eficiente a riqueza em espcies da comunidade de
determinado stio, principalmente se o tempo de arrasto for elevado.
Aps coletado o sedimento, o mesmo deve ser lavado e estocado conforme descrito no item acima.
6.1.7.8 Comunidade Nectnica

O ncton constitudo pelos organismos capazes de nadar ativamente contra as correntes. Fazem parte deste grupo a grande maioria dos
peixes, mamferos aquticos (baleia, peixe-boi, por exemplo), crustceos (como o camaro), e moluscos cefalpodes (como as lulas).
198
O maior grupo dentre os organismos nectnicos constitudo pelos

peixes, e so eles que normalmente so estudados com mais intensidade no ambiente aqutico. Esses organismos distribuem-se em cerca de
20 mil espcies, das quais mais de 8 mil so comerciveis e comestveis,
sendo cerca de 41% em gua doce e 58% nos oceanos.
Os peixes so vertebrados aquticos, pecilotrmicos cujos corpos podem
apresentar diferentes formas e tamanhos, podendo ainda ser ou no recobertos por escamas. Movimentam-se por meio de nadadeiras e, geralmente, possuem brnquias para absorver o oxignio dissolvido na gua.
A coleta de ncton exercida unicamente com fins de pesquisas por instituies ou pessoas devidamente habilitadas denominada pesca
cientfica. Antes de realizar um procedimento de amostragem de ncton fundamental consultar a legislao de aquicultura e pesca vigente
no Brasil.
De acordo com o Cdigo de Pesca (Decreto-Lei n 221, de 28 de fevereiro
de 1967 - Cdigo de Pesca - Dispe sobre a Proteo e Estmulos Pesca e d
outras providncias), necessria autorizao pelos rgos competentes
para expedio cientfica cujo programa se estenda pesca, que
depender de prvia anuncia. O Instituto Chico Mendes (ICMBio)
mantm em sua pgina na Internet uma seo destinada a servios
on-line, onde possvel o acesso ao Sisbio (Sistema de Autorizao e
Informao em Biodiversidade), inclusive para obter Autorizaes e
Licenas para Fins Cientficos e Didticos. O Sisbio um servio de
atendimento distncia que permitir aos pesquisadores, por meio
do preenchimento e envio de formulrios eletrnicos pela Internet,
solicitar autorizaes, licenas e incluir colees cientficas, didticas e
particulares no Cadastro Nacional de Colees Cientficas.
Diversos Estados possuem legislaes especficas de pesca que devem
ser consultadas. No caso do Estado de So Paulo, o Cdigo de Pesca
Estadual (Lei Estadual (So Paulo) n 11.165, de 27 de junho de 2002 Cdigo de Aquicultura e Pesca do Estado de So Paulo) estabelece que nas
investigaes relacionadas pesca, com coleta de seres vivos, as instituies e pessoas devidamente habilitadas devero ser autorizadas
pelo rgo estadual competente, que decidir sobre a manuteno da
execuo dos projetos e avaliar os relatrios que lhe sero obrigatoriamente encaminhados.
199
Os tipos de estudo com a comunidade nectnica mais frequentemente

realizados so:
4 Ensaio da contaminao dos organismos (peixes, crustceos, moluscos etc).
4 Ensaio para determinao de metais, microncleo e cometa em
sangue de peixe
4 Ensaio de episdios de mortandades de peixes e/ou outros organismos nectnicos.
4 Ensaio da estrutura da comunidade de peixes.
i - Contaminao dos organismos
Os organismos para ensaio de contaminantes podem ser coletados
de qualquer uma das formas descritas no item ensaio da estrutura da
comunidade de peixes, podendo, inclusive, ser adquiridos de pescadores locais, desde que estejam em boas condies (no podem estar
em decomposio). Caranguejos e siris tambm podem ser adquiridos
de coletores locais. Quando o material for adquirido dos pescadores,
deve-se ter a certeza do local onde foram coletados.
Devido aos baixos limites de deteco de vrias substncias, os
procedimentos laboratoriais e de campo para ensaio de contaminantes
em organismos aquticos so especialmente importantes, pois uma
contaminao das amostras pode ocorrer durante qualquer estgio da
coleta, manuseio, armazenamento ou ensaio.
200
Procedimentos de coleta:
Lavar os organismos coletados na gua do ambiente logo aps a coleta para
remover qualquer material estranho da superfcie externa;
Os peixes e ou outros organismos aquticos nectnicos devem ser enviados ou trazidos para o laboratrio, em gelo, dentro de um prazo de 24 horas
aps a coleta. O material coletado deve ficar coberto por uma camada de
gelo durante o transporte;
Reduzir ao mximo a manipulao das amostras em campo e evitar contato com
fontes de contaminao (fumaa do motor do barco, graxas, poeira) e o gelo;
Evitar a contaminao pelo gelo usado para refrigerar as amostras. Os moluscos com concha, os crustceos e os peixes inteiros devem ser embrulhados individualmente em papel alumnio ou pelo menos por espcie e colocados em sacos plsticos limpos que evitem a entrada da gua e devidamente
etiquetados com a data, ponto de coleta e espcie;
As amostras devem ser colocadas no gelo o mais rapidamente possvel aps
a coleta. Se o tempo de trnsito das amostras at o laboratrio for maior que
24 horas, prefervel o uso de gelo seco;
Amostras para ensaio microbiolgico devem chegar no laboratrio em um
prazo mximo de 24 h e NO devem ser congeladas, apenas refrigeradas;
Caso o objetivo do trabalho seja o ensaio de contaminantes orgnicos e/ou
inorgnicos, os organismos, aps o devido acondicionamento, podero ser
congelados diretamente no freezer;
O estudo de metais em sangue de peixes tem o seu procedimento descrito a
seguir.
ii - Determinao de metais, microncleo e cometa em sangue

Para complementar os estudos de monitoramento ambiental, o biomonitoramento tem sido amplamente usado para avaliar a exposio de
um sistema biolgico a substncias xenobiticas.
O uso de biomarcadores, como os de exposio e efeito, pode fornecer
informaes relevantes, como a real exposio dos organismos a
contaminantes presentes no meio, o que pode levar a aes imediatas
de preveno e controle. A determinao de metais em sangue pode
ser utilizada para refletir a exposio recente dos organismos a essas
substncias qumicas. Pode-se avaliar tambm a atividade genotxica
de xenobiticos pelo aumento na frequncia de microncleos nas
clulas sanguneas de peixes expostos ou pela avaliao de quebras na
molcula de DNA nestas mesmas clulas no ensaio cometa.
201
Realizar puno caudal, ou outra tcnica adequada espcie em estudo,
com seringas previamente heparinizadas ou com EDTA;
Para os testes de cometa e microncleo, o sangue deve ser coletado no indivduo vivo;
Transferir as amostras de sangue para microtubos contendo aproximadamente 50 L de heparina ou EDTA, a fim de evitar sua coagulao;
Homogeneizar os microtubos imediatamente por inverso, de oito a dez vezes;
Manter os microtubos sob refrigerao e ao abrigo de luz para posterior
processamento laboratorial.
iii - Mortandades de peixes e/ou outros organismos nectnicos

Para que se consiga determinar a(s) causa(s) de uma mortandade de
peixes, a preocupao principal que o atendimento seja feito o mais
rpido possvel.
As coletas das amostras de gua (e sedimento, caso seja necessrio),
devem ser definidas conforme as suspeitas de possveis causas e preservadas conforme as metodologias descritas neste guia.
A escolha das variveis fsicas e qumicas a serem determinadas depende de vrios fatores, tais como: caractersticas de ocupao do solo na
regio, presena de despejos de indstrias ou de esgotos domsticos
etc. Os ensaios biolgicos incluem fitoplncton (em casos de floraes
de algas), coliformes (em casos de contaminao pelo lanamento de
esgotos) e teste de toxicidade.
essencial que seja coletada uma amostra de gua montante e no
prprio local onde est ocorrendo a mortandade e, caso se julgue
necessrio, uma amostra jusante.
202
Coletar gua e sedimento para os ensaios considerados necessrios, conforme orientaes descritas neste guia;
Coletar, pelo menos, 5 peixes moribundos ou que acabaram de morrer, de
cada espcie;
Envolver os peixes em papel alumnio coloc-los num saco plstico, guardar
numa caixa trmica com gelo e encaminh-los ao laboratrio para ensaio;
NO coletar peixes mortos h algum tempo e que j esto em decomposio;
Observar o comportamento dos peixes que esto morrendo (se vm
superfcie abocanhar o ar, se apresentam movimento descoordenado, etc.);
Observar alterao no aspecto externo dos peixes, como: presena de
fungos, manchas, colorao das brnquias, etc.;
Todos os dados observados em campo devem ser sistematicamente anotados em ficha especfica e, sempre que possvel, os peixes e o local de coleta
devem ser fotografados.
iv - Estrutura da Comunidade de Peixes

Em estudos quantitativos, os equipamentos de captura devem
ser colocados por um tempo padronizado (normalmente 4 horas),
como as redes de espera. Estudos qualitativos no envolvem coleta
padronizada, mas sim a utilizao de vrios tipos de equipamentos,
uma vez que todas so seletivas.
A escolha de aparelhos de coleta (redes de espera de diversas malhagens, cercos, etc.), depende das caractersticas fsicas do meio aqutico, como presena ou no de rochas, pedras, guas paradas, vegetao
aqutica, entre outras.
Deve-se coletar nos locais mais adequados para obteno da maior
diversidade possvel de espcies. Estes locais devem ser escolhidos
levando-se em considerao principalmente as informaes de pescadores da regio a ser estudada. Deve-se considerar tambm a poca do
ano, tendo em vista que algumas espcies so migratrias, o que significa que s possvel captur-las em perodos muito especficos.
203
Capturar alguns exemplares das espcies presentes no local e colocar em
sacos plsticos, refrigerar e enviar para o laboratrio, onde podem ser congelados;
Colocar, adicionalmente, alguns exemplares de cada espcie em frascos ou
sacos plsticos reforados, contendo uma soluo neutra de formol (10% a
20%) para identificao taxonmica. Esses exemplares devem permanecer
nesta soluo por, pelo menos, 1 a 2 semanas, pois a fixao pode levar de
poucos dias (para espcimes pequenos) a uma semana (para os espcimes
maiores). Pode-se inclusive aplicar a soluo com auxlio de uma seringa;
Se possvel, fotografe em campo um exemplar de cada espcie. Para tanto,
seleciona-se um exemplar recm tirado da gua, quando ainda apresenta
todas as tonalidades das cores, e que esteja inteiro (principalmente a nadadeira caudal);
Recomenda-se a colocao de uma etiqueta numerada no exemplar fotografado, para a confirmao posterior da identificao, e de uma rgua, para se
ter noo do tamanho do exemplar.
6.2 Ensaios de Contaminantes e Nutrientes em Sedimentos

Sedimento todo material originado da destruio (decomposio) de
qualquer tipo de rocha ou material de origem biolgica, transportado e
depositado (alctone) ou apenas depositado (autctone) na superfcie
terrestre. Os sedimentos compem-se de partculas de diferentes tamanhos, formas e composio qumica.
Um diagnstico ambiental abrangente deve integrar informaes dos
compartimentos gua e sedimento. As concentraes de poluentes na
gua indicam a carga que o ambiente recebe no momento da coleta, enquanto que o sedimento reflete a contaminao ocorrida e acumulada
no sistema ao longo de um perodo de tempo.
Contaminantes e nutrientes adsorvidos nos sedimentos podem ser
disponibilizados coluna dgua e biota por meio de processos fsicos, qumicos e biolgicos, servindo como fonte interna e contnua de
poluentes.
Por essas razes, o uso do sedimento como instrumento de avaliao
da qualidade dos ecossistemas aquticos, vem ganhando crescente
ateno da comunidade cientfica mundial desde a dcada de 80.
204
Deve ser salientado que o ensaio do sedimento auxilia a tomada de decises sobre as medidas que devem ser adotadas no estabelecimento
de programas de controle, mitigao e recuperao do ambiente como,
por exemplo, na avaliao do processo de dragagem e disposio de sedimentos em canais de navegao. O gerenciamento ambiental deve
ser subsidiado por uma classificao da qualidade do sedimento, que
preferencialmente integre as caractersticas fsicas, qumicas, biolgicas e ecotoxicolgicas deste compartimento.
Considerando outros objetivos, o sedimento pode ser tambm
classificado segundo, por exemplo, sua granulometria, teor de matria
orgnica, teor de gua, textura, cor e origem geolgica.
Devido complexidade do ensaio do sedimento, a sua coleta deve ser
realizada de acordo com procedimentos especficos, estabelecidos de
acordo com o objetivo do estudo.
Como procedimento geral, a gua que cobre o sedimento deve ser retirada por sifonamento ou vertendo o equipamento de coleta. O material
orgnico deve ser mantido no ensaio de teor orgnico (COT e resduos), enquanto que o inorgnico (por exemplo, pedras e cascalhos) deve
ser mantido no ensaio de granulometria. Para os outros parmetros,
pode-se efetuar uma catao do material grosseiro antes de se armazenar as amostras nos recipientes.
Cuidados devem ser tomados para que as condies de oxirreduo do
sedimento amostrado sejam mantidas, j que os sedimentos oxidam-se
rapidamente quando em contato com o ar, alterando a disponibilidade
de contaminantes. Para tanto, a amostra deve ser o mnimo exposta ao
ar e o recipiente de coleta preenchido at boca.
Para coleta de amostra composta necessrio que exatamente o mesmo volume seja tomado de cada rplica e que a homogeneizao seja
bem executada. Para evitar a oxidao, os volumes das rplicas a serem
misturados devem ser mantidos, at o momento da homogeneizao,
em saco plstico ou bandeja de ao inox ou qualquer outro recipiente,
de acordo com os ensaios a serem realizados.
Durante a coleta, deve-se evitar alguns efeitos negativos, tais como:
ondas de presso na descendncia do equipamento, resistncia e
205
inclinao na penetrao do sedimento, lavagem durante a retirada

e transbordamento. Uma descida muito rpida, por exemplo, pode
provocar ondas de choque e mau funcionamento do equipamento.
Todos os procedimentos de coleta acarretam um certo grau de distrbio na integridade da coluna de sedimento. Em estudos geocronolgicos, paleolimnolgicos, de biorrevolvimento e de trocas qumicas na interface sedimento-gua, por exemplo, torna-se necessrio a obteno
de amostras mais ntegras possveis. Nestes casos indicado o uso de
amostradores em tubo (corer) que tambm permitem o fracionamento
da amostra, fundamental para estudos do perfil do sedimento.
Na amostragem do depsito recente (camada superficial de sedimento de 2cm a 6cm) devem ser usados pegadores que possibilitam o fracionamento da amostra (Ekman-Birge modificada por Lenz e tubo).
Nesses casos, muitas vezes no se consegue volume suficiente em
uma s pegada, sendo necessrio compor vrias pegadas numa mesma
rplica antes de distribuir o material nos recipientes de amostragem.
Do mesmo volume devem ser retiradas amostras para ensaios qumicos e ensaios ecotoxicolgicos.
O volume de coleta para ensaio ecotoxicolgico com sedimento depende do tipo e nmero de testes que sero realizados por amostra e da
distribuio para os diferentes laboratrios. O ideal coletar um recipiente para cada tipo de teste e uma amostra de sedimento controle,
obtida em local no degradado.
Amostras efetuadas com corer e destinadas a ensaios qumicos do
perfil vertical do sedimento devem ser manuseadas cuidadosamente,
de forma a evitar mistura dos estratos, e podem ser congelados em
campo, com nitrognio lquido, para posteriores fracionamentos.
Conforme os ensaios a serem realizados no sedimento, deve-se
utilizar frascos e equipamentos adequados as atividades de coleta de
amostras, bem como materiais de apoio, como por exemplo colheres
de ao inox ou polietileno inerte, bandejas de ao inox ou polietileno
inerte, caixas trmicas, etc. Podemos citar como exemplo os compostos
orgnicos que podem ser absorvidos em plsticos (exceto teflon)
ou degradados em vidro alcalino. Nestes casos necessrio utilizar
frascos de borossilicato, de cor mbar com tampa rosquevel e septo
206
de teflon. No caso de metais, como sdio, ltio e potssio, recomendase que as amostras sejam acondicionadas em frascos de polietileno ou
polipropileno, pois os mesmos podem ser adsorvidos em superfcies de
vidro ou aumentar sua concentrao por absoro. Os ensaios, tipos
de frascos, prazo de anlises, encontram-se no Anexo 1.
207
Coleta de sedimento com Pegador

Jesus Brando/CETESB
CAPTULO
7 AMOSTRAGEM DE GUAS PARA ABASTECIMENTO

PBLICO
A gua tratada deve ser coletada em locais que foram submetidos a algum
tipo de tratamento (convencional ou simplificado), como sistemas de produo (Estao de Tratamento de gua - ETA), de reservao, rede de distribuio e solues alternativas coletivas de abastecimento de gua.
Para definio dos locais de amostragem e ensaios a serem analisados
em um sistema de tratamento de gua para consumo humano necessrio o conhecimento das etapas da produo desde a retirada da gua
do manancial, passando pela aduo, tratamento, reservao e distribuio, at a entrega ao consumidor final, levando-se em conta ainda
as caractersticas especficas de cada unidade de produo (Fig. 84),
trabalhando em consonncia com o Plano de Segurana da gua (PSA),
conforme orientao da Organizao Mundial da Sade (WHO, 2011)
e com as legislaes de gua de consumo humano vigentes.
Figura 84. Esquema de um sistema de produo e distribuio de gua. Fluxo operacional: (1)
Manancial de abastecimento; (2) Aplicao de produtos qumicos; (3) Sistema de Floculao;
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AMOSTRAGEM DE GUAS PARA ABASTECIMENTO PBLICO
209
Os procedimentos operacionais que devem ser adotados nesse

contexto dependem de fatores como: tipo de manancial de
abastecimento (rio, lago, represa, subsolo, chuva etc.); qualidade
inicial da gua (composio qumica e biolgica); distncias
percorridas; fatores climticos, topogrficos e ambientais; aplicao
de produtos qumicos durante o processo e tempo de contato
necessrio para as respectivas reaes qumicas e biolgicas; tipo
de tratamento requerido etc.
A frequncia, o nmero mnimo de amostras, os locais, os parmetros
a serem analisados e os valores mximos permitidos so definidos
pela legislao vigente sobre qualidade da gua para consumo humano. Alm disso, os responsveis pelo abastecimento de gua devem
manter avaliao sistemtica do sistema ou soluo alternativa
coletiva de abastecimento de gua, sob a perspectiva dos riscos
sade, com base na ocupao da bacia contribuinte ao manancial,
no histrico das caractersticas de suas guas, nas caractersticas
fsicas do sistema, nas prticas operacionais e na quantidade da
gua distribuda, conforme os princpios dos Planos de Segurana
da gua (PSA) recomendados pela Organizao Mundial de Sade ou
definidos em diretrizes vigentes no pas.
7.1 Vigilncia da qualidade da gua para consumo humano

O monitoramento da qualidade da gua pode ser entendido como uma
atividade de vigilncia ou de investigao e consiste em avaliar, continuamente, a qualidade da gua consumida pela populao, permitindo
a identificao de fatores de riscos e a definio de estratgias de melhoria da situao existente, alm do acompanhamento dos impactos
resultantes das medidas implementadas.
Considerando que o objetivo do controle da qualidade comprovar a
potabilidade da gua fornecida para consumo humano, verificar pontos
crticos do sistema e fornecer subsdios para a rea operacional, corrigindo de imediato as possveis anomalias detectadas, natural que seu
plano de amostragem seja o mais abrangente possvel.
Os pontos de coleta de amostras podem ser selecionados por uma
composio entre os pontos crticos e no crticos, endereos fixos
e variveis. A escolha deve objetivar a obteno de informaes do
210
abastecimento e consumo de gua no municpio. A representatividade

desejada pode ser composta por critrios de distribuio geogrfica e
identificao de situaes de riscos.
Os critrios a serem observados na definio dos pontos de amostragem
do monitoramento de vigilncia da qualidade da gua devem incluir:
4 U
Q$$
&

ma de distribuio; sada de reservatrios de distribuio; pontos
na rede de distribuio; reas mais densamente povoadas; pontos
no monitorados pelo controle (solues alternativas, fontes individuais no meio urbano, escolas na zona rural, etc.).
4 Locais estratgicos: reas com populaes em situao sanitria
precria; consumidores mais vulnerveis (hospitais, escolas, creches, etc.); reas prximas a pontos de poluio (indstrias, lixes,
pontos de lanamento de esgoto, cemitrios, etc.); reas sujeitas
presso negativa na rede de distribuio; pontos em que os resultados do controle indiquem problemas recorrentes; solues
alternativas desprovidas de tratamento ou de rede de distribuio;
veculo transportador e reas que, do ponto de vista epidemiolgi 6Q
7.2 Coleta em Estao de Tratamento de gua (ETA)

Os locais de amostragem para o controle das condies de
operacionalidade da estao e consequente caracterizao da
qualidade da gua produzida, devem ser escolhidos no decorrer
do processo (entrada da ETA, floculao, decantao, filtrao,
desinfeco/fluoretao/sada da ETA), cujos pontos de tomada de
amostras geralmente esto disponveis no laboratrio da estao
(Fig. 85). Recomenda-se no alterar a vazo das torneiras, pois haver
alterao significativa nas caractersticas da gua, comprometendo o
controle de qualidade realizado pelo operador.
211
Figura 85. Torneiras localizadas no laboratrio da ETA para controle das etapas do processo de
tratamento (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).
Parmetros operacionais importantes para serem monitorados na

gua captada (fonte) incluem turbidez, tempo de vazo e reteno, cor,
condutividade, condies meteorolgicas, absorbncia em UV, algas; e
no processo de tratamento deve-se controlar a concentrao do desinfetante e tempo de contato, pH, turbidez e cor entre outros, dependendo do tipo de tratamento a ser aplicado.
7.3 Coleta em Sistemas de Distribuio

A proteo do sistema de distribuio essencial para assegurar a qualidade da gua de consumo humano. Os sistemas de distribuio por
inclurem longas extenses de tubulaes, reservatrios de estocagem, interconexes e por estarem sujeitos a adulterao e vandalismo,
so vulnerveis contaminao qumica e microbiolgica.
Quando o suprimento de gua intermitente, a baixa presso de gua
resultante possibilita o ingresso de gua contaminada no sistema atravs de fraturas, fendas, juntas e furos presentes na tubulao. Apesar
de no desejvel, a intermitncia no suprimento de gua muito comum e o controle de gua nessa situao um desafio, uma vez que os
riscos de infiltrao e refluxo aumentam significativamente.
212
Os microrganismos naturalmente presentes na gua (amebas de

vida livre, bactrias heterotrficas, fungos), sob condies favorveis
podem colonizar o sistema de distribuio formando biofilmes. No
h evidncia que os microrganismos normalmente presentes nos
biofilmes constituam risco para a sade da populao em geral, com
algumas excees como o caso da Legionella que coloniza tubulaes
de edifcios, bem como a populao de indivduos seriamente
imunocomprometidos (WHO, 2003).
A gua que entra no sistema de distribuio deve ser microbiologicamente segura e biologicamente estvel. O sistema de distribuio por
si s deve fornecer uma barreira segura para evitar a contaminao da
gua no sistema de distribuio durante o transporte at o consumidor. importante manter um residual de desinfetante no sistema de
distribuio para proteger contra a contaminao e limitar problemas
de crescimento bacteriano (WHO, 2011).
Fenmenos naturais, como enchentes, seca e movimentos sismolgicos,
e atividades antrpicas como trfego pesado e obras civis podem afetar
significativamente as tubulaes de gua dos sistemas de distribuio
e levar ao aparecimento de epidemias. Medidas especficas e imediatas
devem ser tomadas para prevenir a sade da populao incluindo o
aumento da frequncia de amostragem.
O monitoramento operacional de sistemas de distribuio canalizados
deve incluir parmetros como: cloro residual, indicadores bacterianos
de contaminao fecal (E.coli, coliformes termotolerantes), coliformes
totais, bactrias heterotrficas, pH, fluoreto, cor e turbidez.
A escolha dos pontos de amostragem depender de cada sistema de
abastecimento. As amostragens para anlises microbiolgicas e seus
parmetros associados como cloro residual so realizadas em maiores
frequncias e em pontos de coleta dispersos. Ateno especial deve ser
dada tambm aos pontos de coleta e frequncia de amostragem para
constituintes qumicos provenientes de tubulaes e soldas e que no
so controlados diretamente pela legislao e por constituintes que
podem ser formados no sistema de distribuio como trihalometanos
(THMs).
213
O uso de amostragem estratificada randomizada para os sistemas de

distribuio tem se mostrada efetiva (WHO, 2011).
7.3.1 Procedimentos de coleta na rede de distribuio

A retirada de amostra para ensaio da gua contida na rede de distribuio geralmente feita em uma torneira prxima ao hidrmetro da
residncia ou outra que receba gua diretamente da rede de abastecimento pblico (Figs. 86 e 87).
Figura 86.

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| ;? X 6
)
&

CETESB).
Figura 87

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y '
| ;? X 6

Ribeiro/CETESB).
214
Abrir a torneira e deixar escoar por dois a trs minutos ou o tempo

suficiente para eliminar a gua estagnada na tubulao. A torneira no
dever ter aeradores ou filtros, nem apresentar vazamento.
necessrio ter certeza que a gua seja proveniente da rede de
distribuio e no de caixas ou reservatrios internos, por meio do
teste de cavalete. Esse teste consiste em fechar o registro de entrada
de gua da rede de distribuio e abrir a torneira indicada para a coleta;
se no houver escoamento de gua pela torneira, conclui-se que
realmente a gua proveniente da rede de distribuio.
Se necessrio a torneira pode ser desinfetada com aplicao de uma
soluo de hipoclorito de sdio 100mg/L. Neste caso, o excesso de hipoclorito de sdio deve ser removido antes da coleta. A desinfeco da
torneira ou o uso de balde e cordas estreis somente necessrio para
coleta de ensaio microbiolgico.
Abrir a torneira a meia seco, para que o fluxo seja pequeno e no haja
respingos, deixar escoar por aproximadamente um a dois minutos. Posicionar o frasco de maneira que no tenha contato com a torneira para
evitar possveis contaminaes. No momento da coleta deve ser realizada a determinao de cloro residual livre.
7.3.2 Procedimentos de coleta em reservatrio domiciliar

A coleta de amostra pode ser realizada na torneira de sada de gua
do reservatrio, na sada do registro de controle ou diretamente
do reservatrio com auxlio de balde de ao inox e cordas estreis
(Fig. 88). No momento da coleta deve ser realizada a determinao de
cloro residual livre.
215
(A)
(B)
Figura 88 y

& J
;>+J

;+>+ J

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)
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7.4 Procedimentos de Coleta em Solues

Alternativa Coletiva de Abastecimento de gua
Soluo alternativa coletiva de abastecimento de gua para consumo
humano toda modalidade de abastecimento coletivo, destinada a fornecer gua potvel, com captao subterrnea ou superficial, com ou sem
canalizao e sem rede de distribuio incluindo as indstrias, fontes, poo
comunitrio, distribuio por veculo transportador, entre outras.
Os procedimentos para coleta de amostra devem levar em considerao as caractersticas individuais de cada unidade que, de forma geral,
encontram-se mencionados neste captulo.
7.4.1 Poos Freticos e Profundos Equipados com Bomba

A gua do poo deve ser bombeada por tempo suficiente para eliminar
a gua estagnada na tubulao. A coleta deve ser realizada em uma
torneira prxima da sada do poo ou na entrada do reservatrio.
Se necessrio, a torneira pode ser desinfetada com aplicao de uma
soluo de hipoclorito de sdio 100mg/L. Neste caso, o excesso de
hipoclorito de sdio deve ser removido antes da coleta. Realizar a
determinao de cloro residual livre se o poo for clorado.
7.4.2 Poos Freticos Sem Bomba

A coleta deve ser realizada com auxlio de balde de ao inox e corda estril. O conjunto balde e corda s deve ser desembalado no momento
da coleta, para evitar contaminao.
"
Utilizar um conjunto para cada ponto de amostragem, para evitar

a contaminao cruzada de um ponto de coleta para outro e, consequentemente, da prpria amostra. Descer o balde at que afunde na
gua evitando-se o contato com as paredes do poo e da corda com a
gua. Aps enchimento, retir-lo com os mesmos cuidados. Realizar a
determinao de cloro residual livre se o poo for clorado. Para coleta
de amostras em veculo transportador de gua, pode ser adotado esse
mesmo procedimento.
Procedimento de coleta em ETA, rede de distribuio, reservatrios ou solues alternativas de abastecimento pblico
Encher todos os frascos diretamente da torneira ou com auxlio de equipamentos;
Para o ensaio microbiolgico1, remover a tampa do frasco juntamente com o
papel alumnio protetor, mantendo-a a uma distncia de aproximadamente
10 centmetros, para evitar contaminao;
seu volume, para possibilitar sua homogeneizao;
Fechar imediatamente o frasco, fixando o papel alumnio protetor em volta
da tampa;
Para os demais ensaios, repetir o item 1 acima, at que todos os frascos
estejam com o volume necessrio para os ensaios. No caso de compostos
orgnicos volteis, no dever haver espao vazio;
Preservar as amostras conforme Anexo e acondicion-las em caixa trmica,
sob refrigerao para transporte.
1
O frasco para ensaio microbiolgico no deve ser ambientado. A coleta deve

ser realizada sempre antes de qualquer outro procedimento e a amostra no
pode ser composta.
Para pesquisa de microrganismos patognicos em gua tratada grandes

volumes devem ser analisados considerando a baixa concentrao
desses microrganismos nessas guas. Nesse caso volumes de 400L
a 1000L devem ser concentrados na prpria ETA ou nos pontos da
rede de interesse, empregando sistemas especficos de filtrao, com
cartuchos e membranas filtrantes variveis de acordo com o patgeno
a ser pesquisado (APHA, 2005).
/
Determinao de pH em
sedimento - Foto Carlos
Jesus Brando/CETESB
CAPTULO
8 AMOSTRAGEM DE EFLUENTES LQUIDOS

Ao se retirar uma amostra de qualquer efluente pretende-se que esta
reproduza dados sobre as condies reais das guas residurias geradas pelo processo, sendo o mais representativa possvel. Para assegurar tais condies, o tcnico deve conhecer todo o processamento
industrial e o funcionamento das unidades geradoras de efluentes que
possam interferir nas caractersticas dos despejos.
A confiabilidade e a representatividade de qualquer programa de
amostragem para a avaliao dos efluentes lquidos e dos corpos
hdricos receptores dependem fundamentalmente da seleo
criteriosa dos parmetros a serem analisados, dos pontos de coleta de
amostras e da utilizao correta das tcnicas de coleta e preservao
de amostras, pois os efluentes lquidos variam em sua composio
qualitativa e quantitativa, frequncia e tipo de emisso, de acordo com
as atividades desenvolvidas.
A importncia da anlise dos efluentes lquidos tem aumentado devido a necessidade de avaliar o possvel impacto de seu lanamento
em cursos de gua e na rede pblica coletora de esgotos, o que exige das fontes de poluio compilar e manter os registros e controle
de todas as atividades de monitoramento, para que possam ser implantadas medidas preventivas e/ou corretivas para controle de qualidade ambiental.
Um programa de caracterizao de efluentes lquidos tem como
objetivos principais:
4 @

de guas residurias, de maneira global ou de determinadas unidades, visando otimizao da sua operao e do seu desempenho;
AMOSTRAGEM DE EFLUENTES LQUIDOS
219
4 @
$

6Q
tratamento de esgotos domsticos, aterros sanitrios e industriais
e plantas de incinerao de resduos, bem como as possveis alteraes na qualidade do corpo receptor causadas pelo lanamento
6 @ @
Q es e aos padres de qualidade do corpo receptor e de emisso/
Q $Qdual e federal vigente;
4 Obter dados e informaes para fornecer subsdios a elaborao
de projetos de sistemas de tratamento de guas residurias de empreendimentos em implantao;
4

3
6
xiliares ou acabados do processo industrial e que so agregados ao
6
6@

Q
%Q

industrial, dentro de um programa de preveno poluio;
4 Determinar as cargas poluidoras potenciais e/ou remanescentes
de empresas, em programas de controle de poluio de uma regio

$
"
4 U

Q
$

6Q
$6

cobrana por parte da empresa gerenciadora do sistema pblico de
esgotos e de minimizao de impactos sobre os mesmos;
4 @
Q$
6
@
pelos aterros sanitrios e industriais e reas contaminadas.
Y\ |" ""+`? "$|}?"

Para um melhor entendimento das diferentes caractersticas dos
efluentes lquidos, os mesmos podem ser classificados de acordo com
sua origem em: (1) efluentes industriais, (2) efluentes industriais em
esgotos domsticos, (3) efluentes de plantas de incinerao de resduos slidos e (4) efluentes percolados gerados em aterros sanitrios e
industriais.
Y\Y\+`? "/?" "

Os efluentes lquidos em uma indstria, alm dos esgotos domsticos,
podem ser compostos por: efluentes do processo produtivo, gua de
refrigerao, gua de condensao, gua de lavagem de equipamentos,
220
efluentes de equipamentos de controle de poluio do ar (lavador de

gases de chamin ou de cabine de pintura) e pelos efluentes no pontuais, como as guas pluviais contaminadas, lavagem de pisos externos
e derramamentos em reas externas rea industrial.
O tipo da indstria e o completo entendimento do processo produtivo permitiro o conhecimento da origem dos efluentes lquidos industriais, bem como os materiais poluentes neles contidos. O tipo da
indstria e o completo entendimento do processo produtivo permitiro o conhecimento da origem dos efluentes lquidos industriais, bem
como dos materiais poluentes neles contidos.
Uma indstria, independentemente de sua atividade, sempre apresenta a gerao de esgotos domsticos, que corresponde aos descartes
de banheiros e de refeitrios. A sua carga orgnica mdia per capita
praticamente a mesma, qualquer que seja o ramo industrial; porm,
verifica-se que sua concentrao varia com a hora do dia, com o dia da
semana e com a condio climtica.
Outro fator que influencia as caractersticas qualitativas e quantitativas dos esgotos domsticos nas indstrias a existncia, ou no, de
refeitrios e de chuveiros para os funcionrios tomarem banho. As vazes de pico, nestes casos, ocorrem nos horrios das refeies e nos
trminos de turnos.
Uma parcela preponderante da gua utilizada pelas indstrias em seus
processos produtivos, na maioria dos casos, descartada na forma de
efluentes lquidos, que, em funo das substncias neles contidas, podem causar poluio ao serem lanados nos corpos de gua. Portanto,
os efluentes lquidos gerados devem ser submetidos a um Sistema de
Tratamento de guas Residurias (STAR), corretamente dimensionado
e operado, para possibilitar seu lanamento em um corpo hdrico ou em
um sistema pblico de esgotos.
preciso, portanto, realizar o levantamento industrial, processo que
envolve o conhecimento do(a): perodo de funcionamento da indstria;
nmero de empregados; fluxograma do processo industrial; planta
da fbrica; matrias primas; produo; uso da gua; efluente gerado;
sistema de tratamento dos efluentes; condies de funcionamento dos
equipamentos industriais; e, condies de gerenciamento da indstria.
221
|^? "

As indstrias trabalham normalmente em turnos de oito horas; algumas funcionam em trs turnos, totalizando 24 horas por dia. Geralmente, o funcionamento de segunda a sexta-feira, mas algumas so
ininterruptas.
Alm do horrio de funcionamento da produo, necessrio verificar
se o regime produtivo contnuo ou no, e se os processos so
cclicos. preciso tambm verificar se a gerao de despejos ocorre
principalmente durante o perodo de funcionamento da fabricao
ou nos outros perodos (como no final da jornada diria, nos perodos
noturnos, nos finais de semana etc.), geralmente decorrente de
lavagens e limpezas.
*"
O nmero de empregados indicar o volume e a carga orgnica dos
esgotos domsticos gerados. A existncia ou no de refeitrios tambm
ir influenciar nas caractersticas do despejo.
Neste item devero ser includos todos os funcionrios existentes no
local em estudo (funcionrios prprios e terceirizados), tanto das reas
produtivas como das reas administrativas e de apoio.
!w?""?" w
O conhecimento do processo industrial de fundamental importncia
em qualquer trabalho de caracterizao pois, para cada tipo de processamento haver diferentes particularidades, tais como produtos auxiliares ou catalisadores que podero proporcionar diferentes caractersticas aos despejos gerados, tanto nos seus constituintes quanto nas
suas concentraes e vazes.
O fluxograma do processo industrial permitir ao tcnico visualizar a
necessidade, ou no, da segregao dos despejos e, dessa forma, definir quantos sero os pontos de amostragem para a caracterizao dos
efluentes de uma indstria.
w ^

A planta da fbrica, juntamente com a indicao dos sistemas de distribuio de gua e das redes de coleta de efluentes lquidos, iro facilitar
no s o entendimento do fluxo do processo industrial como tambm
222
a visualizao da possibilidade da implantao de medidas de controle interno, como a recuperao de matria prima ou outros produtos
derramados no piso e que sero arrastados nos efluentes lquidos. Permitir tambm verificar a possibilidade de recirculao de efluentes
lquidos antes ou aps sofrerem um tratamento especfico, assim como
a existncia, ou no, de uma adequada segregao de despejos.
O conhecimento da rede de coleta de efluentes, da localizao da estao de tratamento e dos locais de disposio de resduos slidos (caso
haja), ir possibilitar a escolha dos melhores pontos de amostragem,
para que a caracterizao seja representativa. Tambm importante
a indicao do sistema de coleta de esgotos domsticos na planta do
empreendimento, para os casos de indstrias em que haja incompatibilidade de tratamento conjunto dos mesmos.
necessrio tambm que a rede de guas pluviais seja indicada na
planta do empreendimento, uma vez que, quando contaminadas, so
consideradas efluentes lquidos e, como tais, devem ser tratadas adequadamente antes de sua disposio final. Ressalta-se que a prtica de
reunir as guas pluviais no contaminadas aos efluentes proibida por
lei, caracterizando-se como uma diluio e, portanto, no aceita pelos
rgos de controle ambiental.
/^_""
""
A relao de matrias primas e dos produtos auxiliares ir contribuir
para a definio do tipo de amostras a serem coletadas e dos parmetros a serem analisados. Para isto, necessrio conhecer o princpio
ativo de cada substncia e no somente o seu nome fantasia.
Alm desta relao, deve-se ter conhecimento das quantidades
utilizadas, dos mtodos de armazenamento e das condies de
segurana quanto aos derramamentos, que podero representar
fontes potenciais de poluio.
^ /^_""
?
A relao dos produtos fabricados, as quantidades e a frequncia de
fabricao dos mesmos, os tipos de embalagens utilizadas, os locais de
armazenamento e a porcentagem da gua incorporada ao produto, sero muito importantes num trabalho de caracterizao de um despejo
industrial.
223
Por meio destes dados possvel fazer a comparao entre indstrias

similares com relao aos fatores de emisso, representados pelas
vazes especficas do efluente (por exemplo, m3 de gua utilizada por
tonelada de produto) e cargas poluidoras especficas (por exemplo, kg
de poluente por tonelada de produto), para estabelecer exigncias de
reduo destes valores, se necessrio.
/^_""
?"?
Um balano hdrico completo, contendo a indicao de todas as
informaes sobre o uso da gua, de extrema importncia. Para isso,
deve-se dispor de dados de fluxo de gua industrial (gua de processo,
gua incorporada ao produto e gua liberada pela matria prima), gua
de refrigerao, gua resultante de lavagens de pisos e equipamentos,
gua utilizada nos equipamentos de controle de poluio do ar e gua
para consumo humano (ingesto, lavatrio, descarga sanitria, preparo
de alimentos).
/^_""
`?
As peculiaridades na gerao do efluente lquido (tais como: perodo e
frequncia de cada descarte), a possibilidade de medir a vazo por
linha de descarte, as redes de coleta e as condies de acesso aos
locais de amostragem so fatores primordiais para a definio de
qualquer campanha de amostragem de efluentes lquidos. Quando
necessrio, importante o conhecimento da existncia, ou no, de segregao de despejos.
{" `? "
O prvio conhecimento da descrio do sistema de tratamento de
efluentes, assim como o seu fluxograma, proporcionar ao responsvel
pela amostragem uma viso global. Permitir, tambm, uma precisa definio dos pontos de amostragem e dos parmetros a serem analisados, principalmente nos casos de avaliao de desempenho do sistema
de tratamento.
_"^? "}? "?" "
As condies de conservao dos equipamentos e dos maquinrios indicam a probabilidade de quebra e, por isso, podem significar perda de
matria prima ou de subprodutos com consequente aumento na gerao de efluentes lquidos.
224
w _" "

As condies de gerenciamento de uma indstria do uma idia de
como os assuntos relacionados ao controle da poluio so tratados.
Quando existe a preocupao da implantao de programas de treinamento para os funcionrios, tanto no campo produtivo como na parte
ambiental, com certeza as caractersticas de seus efluentes sero diferentes daquelas indstrias onde esta poltica no existe.
Para realizao de um levantamento industrial confivel fundamental que os itens anteriormente citados sejam verificados com preciso.
Alm dos dados fornecidos pela indstria, as observaes efetuadas
no processo produtivo e nos pontos geradores de efluentes lquidos
iro possibilitar uma melhor definio do plano de amostragem, com a
escolha precisa da frequncia e tempo de amostragem, com uma descrio detalhada das condies fsicas do ponto de coleta e medio de
vazo, e a correta escolha dos parmetros a serem analisados.
Alm da checagem das informaes anteriormente citadas, dever
ser verificada a existncia de interligaes indevidas, tais como:
guas de refrigerao com efluentes industriais, guas pluviais e/ou
de refrigerao, existncia de by pass no efluente bruto, entre outras.
Portanto, torna-se indispensvel uma criteriosa inspeo na indstria
por parte do responsvel pela amostragem, para a seleo adequada
dos equipamentos a serem utilizados na campanha de amostragem e
para o dimensionamento da equipe que realizar os trabalhos.
Y\Y+`? "" "/?" "" "

A presena de efluentes industriais misturados ao esgoto domstico
em sistemas pblicos de tratamento de esgotos normalmente resulta em despejos com caractersticas diferentes daquelas onde somente existe esgoto domstico. Portanto, cuidados especiais devero ser
adotados na seleo dos parmetros a serem analisados.
Y\YW+`? " "w "/

"|?"{w"/?" "?~" w"
Embora guarde pontos em comum com efluentes industriais, este tipo
particular de efluente no domstico apresenta particularidades no
225
plano de amostragem que devem ser observadas para que os resultados da avaliao sejam representativos.
Os pontos principais de gerao de efluentes numa planta de incinerao de resduos so:
\Y Quench (resfriamento brusco de gases), quando efetuado por equipamentos via mida, tais como: lavador Venturi, torre de spray e
torre de enchimento;
Y Equipamentos de controle de poluio do ar por via mida;
WY
@Q"
xY guas de lavagens de pisos da planta de incinerao;
yY guas de drenagem de resfriamento de escria de resduo industrial incinerado, e;
Y guas de lavagem de baas de armazenamento de resduo hospitalar.

A maior contribuio de vazo , sem dvida, proveniente dos equipamentos de controle de poluio do ar via mida.
Deve-se conhecer a quantidade e a composio do resduo introduzido no incinerador, a quantidade e o tipo de combustvel utilizado e os
equipamentos que geram efluentes. tambm importante a avaliao
da rede de coleta de efluentes e de guas pluviais, pois em caso de derramamento e posterior lavagem decorrente do manuseio, transbordo
e transporte de grandes quantidades de resduos (algumas vezes perigosos), estes se caracterizam em efluentes e, portanto, devem ser tratados adequadamente.
Y\Yx+`? "w" " "/?" "

{ "
A disposio de resduos slidos em aterros industriais e sanitrios
gera lquidos percolados, conhecidos como chorume, que podem infiltrar e contaminar o lenol fretico e, portanto, devem ser coletados e
adequadamente caracterizados.
importante ressaltar que este efluente apresenta uma composio
qumica que varia de acordo com a idade do aterro, condies climticas, etc.; fatores estes que dificultam a determinao de sua caracterizao qualitativa e quantitativa.
226
Yw " +`? "$|}?"

A elaborao de um plano de amostragem de efluentes lquidos deve
considerar vrios aspectos, tais como: objetivo da avaliao, localizao do empreendimento, tempo da amostragem, pontos de retirada
de amostras, dimensionamento da equipe tcnica, material necessrio
para realizao dos trabalhos, conhecimento do levantamento industrial, vistoria prvia no local, conhecimento da atividade industrial, de
seu processo de fabricao e da hidrografia da regio (quando o efluente descartado em rios) e parmetros a serem analisados no efluente
para avaliao do atendimento a legislao ambiental de controle de
poluio das guas.
Os tcnicos precisam observar e anotar todas as condies de funcionamento da unidade geradora dos efluentes no dia da avaliao e/ou
caracterizao, que possam interferir nas caractersticas do despejo a
ser amostrado.
YY\$w ""

Na escolha dos locais de amostragem deve-se considerar que:
4 @%
importncia para o clculo da carga poluidora, e consequente
@Q
6

coleta de amostras compostas;
4 O ponto da amostragem deve ser representativo e com
turbulncia, de modo a se obter uma boa mistura. Devem ser
evitados locais situados a montante de vertedores devido
sedimentao de slidos;
4 As amostras devem ser tomadas no centro do canal, onde a
velocidade mais alta e a sedimentao de slidos mnima;
4 O local deve ser de fcil acesso.
Para definio dos pontos de amostragem, devem ser considerados os
objetivos envolvidos na campanha de amostragem, tais como: avaliao do desempenho do sistema de tratamento, verificao do atendimento aos padres de legislao, obteno de informaes para
elaborao de um projeto de um STAR e implantao de medidas de
preveno poluio.
227
YY#""

Aps a seleo dos pontos de amostragens e dos parmetros a serem analisados, deve-se definir o tipo da amostra, a frequncia e o perodo da amostragem para, finalmente, detalhar a organizao e a execuo dos trabalhos.
A coleta pode ser realizada manualmente ou com auxlio de amostrador automtico e as amostras podem ser simples ou compostas.
A amostra simples indicada para os casos onde a vazo e a composio do lquido no apresentam variaes (qualitativas e quantitativas)
significativas e todas as informaes que se deseja podem ser obtidas
por meio de uma nica amostra.
A amostra composta adotada para possibilitar a minimizao do
nmero de amostras a serem analisadas e, principalmente, quando
h uma grande variao do volume da vazo e/ou da composio
do efluente. Tanto a amostragem simples como a composta foram
descritas de uma forma mais abrangente e com mais detalhes no
captulo 3 Organizao dos Trabalhos de Campo.
O tempo e a vazo podem ser utilizados como base para a composio
das amostras compostas. Quando o tempo a base da composio, um
volume fixo de amostra retirada do fluxo de efluentes, em intervalos
fixos de tempos.
Este tipo de composio recomendado para os casos onde a variao
da frequncia da vazo conhecida e o intervalo entre as vazes seja
o menor possvel.
Nestes casos, para clculo do volume de cada alquota a ser coletada,
utiliza-se a frmula:
onde:
Val : volume de cada alquota

Vam : volume total da amostra
n: nmero de alquotas
228
Quando a vazo a base da composio da amostra, os volumes das

alquotas sero proporcionais as variaes das vazes instantneas do
efluente. Para o clculo do volume de cada alquota, a frmula utilizada :
onde:
Val: volume da alquota

Qi : vazo instantnea
Qm: vazo mdia
Vam: volume total da amostra
n: nmero total de alquotas
Como a vazo instantnea Qi varia a cada momento, o volume de cada
alquota tambm ir variar proporcionalmente. O volume da amostra
Vam funo dos parmetros a serem analisados no laboratrio e a
vazo mdia Qm corresponde mdia obtida durante o perodo da
referida amostra.
O perodo de tempo no qual a amostra dever ser composta ir
depender dos objetivos do programa. Sugere-se que para um processo
produtivo contnuo (24 h/dia), o perodo mnimo de amostragem seja de
uma jornada diria de trabalho, de forma a obter uma correlao com
as caractersticas da produo. Neste caso sugere-se que seja realizada
uma campanha constituda de 4 amostras, cada uma delas coletadas num
perodo de 6 horas, com alquotas coletadas a cada 30 ou 60 minutos.
Para alguns parmetros no possvel realizar composio de amostras,
sendo exigida a coleta de amostra simples. Fazem parte desse grupo
de parmetros os leos e graxas, sulfeto, oxignio dissolvido, solventes
halogenados, indicadores microbiolgicos, entre outros, que podem ser
alterados (transferncia de frascos, volatilizao, oxidao e reduo,
perda de viabilidade, etc) durante o processo de composio ou pelo
prazo requerido para anlise. Para esses casos, a amostra simples
normalmente coletada na penltima alquota da amostra composta.
229
Coleta com
garrafa de van
Dorn - Fluxo
Horizontal - Foto
Carlos Jesus
Brando/CETESB
YYW{w"+""{w@"

A escolha dos parmetros depender, alm dos objetivos do programa
citados anteriormente, do tipo de efluente industrial e da classe
dos corpos hdricos receptores. Para tanto, fundamental manterse atualizado, consultando a legislao vigente nos sites das
instituies responsveis pela sua elaborao e/ou homologao,
como ANA (Agncia Nacional de guas), Anvisa (Agncia Nacional
de Vigilncia Sanitria), Conama (Conselho Nacional do Meio
Ambiente), Ibama (Instituto Brasileiro do Meio Ambiente, OMS
(Organizao Mundial de Sade), SMA (Secretaria do Meio Ambiente)
de cada estado, entre outros.
Para a avaliao dos efluentes visando implementao de sistemas de
reso de gua, os parmetros a serem analisados dependero do processo produtivo e de quais contaminantes sero tolerados no reso.
Na tabela 8 esto indicados os parmetros pertinentes a diversas
atividades industriais; contudo, esta tabela deve ser utilizada apenas
como referncia, devendo o tcnico acrescentar ou no outros parmetros, com base no levantamento industrial e na vistoria realizada
na indstria.
231
232

X
Ferro Solvel
X
X
Fenis
Estanho
X
X
Bebidas
DBO
Cereais
DQO
Cromo Total
Cromo Hexavalente
Coliformes Totais
Cobre

Coliformes termotolerantes
Cianeto

Chumbo

X
Baterias
Cdmio
Boro
Brio
Abatedouros e

Arsnio

Amnia
Alumnio
+*{/%{
#/%{+/*{#/
#
wY @#|+`? "/?" " \

!"
233
pH
X
X
Temperatura
Zinco
X
X
Surfactantes
Sulfatos
Sulfetos
X
X
Solventes Halogenados
Solventes Aromticos
X
X
Continua...
X
X
Srie de Resduos
Resduo Sedimentvel
Selnio
leos e Graxas
Prata
Nitrognio Total
Nitrognio Orgnico
Nitrognio Nitrito
Nitrognio Nitrato
Nitrognio amoniacal
Nquel
Mercrio
Mangans
Fosfatos
Fluoretos
234
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X
X
X
X
Cobre
Coliformes
termotolerantes
Coliformes Totais
Ferro Solvel
Fenis
Estanho
DQO
DBO
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Cromo Hexavalente
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Cianeto
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235
X
X
X
Nitrognio Orgnico
Nitrognio Total
leos e Graxas
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Sulfatos
Sulfetos
X
X
Surfactantes
Temperatura
Zinco
X
X
Solventes Aromticos
Srie de Resduos
Selnio
Resduo Sedimentvel
Prata
Nitrognio Nitrito
Nitrognio Nitrato
Nitrognio amoniacal
Mercrio
Nquel
Mangans
X
X
Fosfatos
Fluoretos
Continua...
236
w
X
Ferro Solvel
Fenis
DQO
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Estanho
Cromo Total
Cromo Hexavalente
Coliformes Totais
Coliformes termotolerantes
Cobre
Chumbo
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237
leos e Graxas
pH
Srie de Resduos
Solventes Aromticos
Sulfatos
Sulfetos
Surfactantes
Temperatura
Zinco
Selnio
Nitrognio Total
Nitrognio Orgnico
Resduo Sedimentvel
Nitrognio Nitrito
Nitrognio Nitrato
Prata
Nitrognio amoniacal
Nquel
Mercrio
X
Mangans
Fosfatos
Fluoretos
YYxw"{#

Quando se deseja efetuar apenas a avaliao do desempenho de um
STAR como um todo, os pontos de amostragem a serem escolhidos so
a entrada e a sada do sistema; porm, se avaliao em estudo alguma unidade do STAR, os locais escolhidos devero ser a entrada
e a sada da unidade. Por exemplo: para um tratamento biolgico
realizado atravs de um sistema de lodos ativados, muitas vezes
necessrio avaliar a operao do tanque de aerao; para isto,
necessrio que a amostra seja coletada dentro desta unidade e no
retorno de lodo. Portanto, para cada caso necessrio o conhecimento
dos parmetros de operao de cada unidade ou do sistema de tratamento, para escolher os locais adequados de amostragem para a avaliao de seu desempenho.
A avaliao de um desempenho no sistema de tratamento levar em
conta:
4 Aspectos quantitativos relativos vazo e capacidade hidrulica
do sistema de tratamento; e,
4 Aspectos qualitativos relativos s caractersticas fsicas, qumicas e
$

No caso de sistemas biolgicos com baixa eficincia no seu funcionamento, onde todas as condies fsico-qumicas e hidrulicas encontram-se de acordo com os valores recomendados, necessrio verificar os possveis compostos txicos ao sistema e, neste caso, os ensaios
a serem realizados devero ser extensamente pesquisados na relao
de todos os produtos qumicos utilizados, independente da quantidade
e da finalidade de seu uso.
YYy+w
{#
A obteno de informaes para dimensionamento de um projeto de
sistema de tratamento, em muitos casos, necessita de uma amostragem prvia em diferentes pontos, para verificar se h necessidade de
segregao de linhas geradoras de efluentes.
Os pontos de amostragem devem ser selecionados de forma a
representar as caractersticas dos efluentes a serem tratados. Caso
os efluentes sejam lanados em vrias linhas e unificados antes da
238
entrada do STAR, a amostragem dever ser feita aps a unificao

das linhas. Caso no seja possvel esta reunio, a amostragem dever
ser feita em cada linha, caracterizando o efluente a ser tratado.
imprescindvel que a amostragem de efluentes seja representativa, ou
seja, a sua caracterizao deve ser realizada por meio de amostragem
composta por alquotas coletadas, preferencialmente, com o volume
proporcional a vazo no efluente bruto durante, pelo menos, o perodo
dirio de produo da empresa.
YY "_"$"w

Para a avaliao dos efluentes lquidos de uma indstria, quanto
ao atendimento s condies e padres de emisso (lanamento),
deve-se selecionar os ensaios pertinentes quele tipo de atividade
industrial, e outros especficos quela empresa, levando-se em conta
suas particularidades, observadas no roteiro de informaes descritas,
no necessitando analisar todos os parmetros listados na legislao
estadual e/ou federal.
Quando a indstria apresenta em sua relao de matria prima muitos
compostos qumicos de grande complexidade, como defensivos
agrcolas, e o laboratrio no possui todos os padres analticos
para sua determinao, deve-se escolher outros ensaios que possam
indicar a presena de tais compostos qumicos no efluente ou no corpo
receptor, para possibilitar a sua melhor caracterizao.
No caso de estao de tratamento de esgotos domsticos, a escolha
dos ensaios ir depender, alm das suas caractersticas (que so
bastante conhecidas), dos possveis tipos de indstrias existentes na
regio e cujos efluentes drenam para esta estao.
Para as anlises dos efluentes de plantas de incineradores, ou do
lquido percolado em aterros industriais, deve-se verificar os possveis
constituintes existentes nos materiais incinerados ou nos resduos
dispostos, para possibilitar a seleo dos ensaios adequados.
No caso da legislao do Estado de So Paulo, alm da amostragem no
efluente final, necessrio amostrar o efluente bruto, para a verificao da eficincia na remoo de carga poluidora em termos de DBO5
dias, 20C, a qual normalmente expressa em kg DBO/dia.
239
Para a verificao quanto ao atendimento s condies e padres de

qualidade do corpo receptor, deve-se escolher os ensaios indicados
na legislao que esto relacionados com a atividade industrial em
questo, em que estes possam ser alterados pelo lanamento do
efluente lquido, sendo necessrio realizar a amostragem no corpo
receptor, a montante e a jusante dos lanamentos da indstria ou da
unidade geradora de efluentes lquidos.
Deve-se sempre certificar que no local escolhido a jusante, o efluente
descartado esteja completamente misturado massa lquida do corpo
receptor, de tal forma que somente este lanamento seja o causador
das possveis alteraes na sua qualidade.
As indstrias que apresentam algum tipo de disposio de resduos
slidos ou de lquidos no solo devero realizar amostragem no
aqufero, por meio de poos de monitoramento, para verificar possvel
contaminao das guas subterrneas.
Para o atendimento aos padres da legislao importante incluir
os ensaios toxicolgicos. Apesar de no constar a obrigatoriedade
do ensaio de Ames na legislao vigente, este tem se tornado uma
informao importante no diagnstico ambiental e no monitoramento
da qualidade dos corpos dgua receptores.
240
CAPTULO
9 ENSAIOS EM CAMPO
Neste captulo sero abordados os ensaios frequentemente conduzidos em campo devido ao curto prazo requerido pela anlise, o que
implica em cuidados especficos para sua realizao. Para evitar a contaminao do local de coleta, todos os resduos dos ensaios realizados
em campo devem ser recolhidos.
9.1 Cloro Residual - Mtodo DPD

Existem trs tipos de determinao de cloro residual na gua tratada
(livre, total e combinado). O cloro residual livre aquele presente na
forma elementar dissolvida (Cl2), ou como cido hipocloroso (HClO),
ou como on hipoclorito (ClO). O cloro residual total a soma do cloro
residual livre com o cloro residual combinado. O cloro residual combinado a subtrao do cloro residual livre do cloro residual total.
Devido instabilidade e degradao rpida do cloro residual livre, a sua
determinao deve ser realizada em campo, antes da coleta das demais
amostras, podendo-se utilizar um kit comparador colorimtrico mtodo DPD (N, N-dietil-p-fenilenediamina) ou um fotmetro de
campo do tipo pocket. O cloro livre faz a oxidao do DPD, formando
uma substncia de colorao rosa que tem sua intensidade diretamente
proporcional concentrao de cloro residual.
A determinao do cloro residual livre a mais comum nos trabalhos
que envolvem redes de distribuio de gua para consumo humano,
pois empregado na desinfeco da gua. Em todas as amostras
coletadas para anlises microbiolgicas deve ser efetuada, no
momento da coleta, medio de cloro residual livre ou de outro
composto residual ativo, caso o agente desinfetante utilizado
no seja o cloro. Conforme a Portaria n 518/2004 do Ministrio
da Sade, art. 13, aps a desinfeco, a gua deve conter um teor
ENSAIOS EM CAMPO
241
mnimo de cloro residual livre de 0,5mg/L, sendo obrigatria a

manuteno de, no mnimo, 0,2mg/L em qualquer ponto da rede de
distribuio e um teor mximo de cloro residual livre, em qualquer
ponto do sistema de abastecimento, de 2,0mg/L.
Procedimentos para ensaio de cloro residual livre
Abrir a torneira e deixar a gua escorrer por dois ou trs minutos;
Lavar as cubetas (do kit ou pocket) com a amostra;
Encher as cubetas, at o menisco de marcao, com a amostra a ser analisada
(gua da torneira);
Adicionar os reagentes e realizar a determinao conforme orientao do
fabricante;
Anotar os resultados, que sero expressos em mg/L de cloro residual livre.
9.2 Oxignio Dissolvido - Mtodo Eletromtrico

Existem trs mtodos eletromtricos para a determinao de oxignio
dissolvido em corpos dgua:
4 !
$
3
$

es de oxignio dissolvido prximo ao zero e presena de sulfeto
elevada. O sistema trabalha por pulso eltrico e no necessita de
agitao.
4 Galvnico O sistema constitudo de uma clula galvnica que,
pela difuso do oxignio dissolvido atravs da membrana, realiza a
determinao. Necessita de agitao e ideal para determinao
de oxignio dissolvido em todos os tipos de gua.
4 tico O sistema realiza a determinao por luminescncia, no
necessita de agitao, e ideal para a determinao de oxignio
dissolvido em todos os tipos de gua.
A determinao pode ser realizada diretamente no corpo dgua ou no
recipiente coletor de amostras com a utilizao de um oxmetro e sonda acoplada, onde o comprimento do cabo depender da profundidade
do local a ser amostrado. Os procedimentos de ajustes dos equipamentos eletromtricos devem ser realizados de acordo com as recomendaes e especificaes tcnicas do fabricante.
242
Para a determinao do oxignio dissolvido em rea estuarina ou marinha, deve-se efetuar a correo da salinidade antes do ensaio.
Anotar os resultados, que sero expressos em mg/L de oxignio dissolvido.l
9.3 %k""w w

pela Azida Sdica
O mtodo de Winkler (modificado pela azida sdica) ainda o mtodo
mais empregado para a determinao do oxignio dissolvido.
Pode ser empregado para a determinao do oxignio dissolvido em
corpos dgua em geral, guas de abastecimento, guas residurias e
guas do mar. Aplica-se para as concentraes de oxignio dissolvido
superiores a 0,1mg/L, sendo que o mtodo no se aplica a amostras
que contenham interferentes, como: sulfito, tiossulfato, politionato,
cloro livre e hipoclorito. Nesses casos, podem ser empregadas outras
modificaes do mtodo de Winkler ou o mtodo eletromtrico.
A coleta de amostra realizada com a utilizao de equipamentos
apropriados, que no permitem a aerao da amostra, como batiscafo
para coleta de amostras superficiais ou garrafa de van Dorn (fluxo
vertical ou horizontal) para coleta em profundidade.
ENSAIOS EM CAMPO
243
Procedimentos para coleta de oxignio dissolvido - mtodo Winkler, modificado pela azida sdica
Coletar a amostra com auxlio de batiscafo, na superfcie, ou com garrafa de
van Dorn, enchendo o frasco de DBO;
Adicionar imediatamente 2mL de soluo de sulfato manganoso e, em seguida, 2mL de soluo reagente alcali-iodeto azida, tendo o cuidado de verter lentamente os reagentes na borda do frasco e no trocar a ordem dos
reagentes;
O sulfato manganoso reage com o hidrxido de sdio para produzir um
precipitado flocoso de hidrxido manganoso, que pode variar de branco at
marrom, dependendo da concentrao de oxignio dissolvido;
Fechar bem o frasco de DBO, sem deixar bolhas de ar no interior;
Agitar bem o frasco fechado para dispersar o precipitado de hidrxido manganoso uniformemente na amostra;
Deixar o precipitado sedimentar at aproximadamente a metade do volume
do frasco. No caso de gua do mar, o tempo de contato da amostra com o
precipitado deve ser de, pelo menos, dois minutos;
Agitar novamente muito bem, para que a reao seja completa;
Encaminhar a amostra para ensaio no laboratrio.
244
Procedimentos para ensaio de oxignio dissolvido em campo ou no laboratrio - mtodo Winkler, modificado pela azida sdica
Materiais e reagentes necessrios para titulao:
Base, haste, garra, Erlenmeyer de 250mL, bureta de 10mL classe A, pipeta volumtrica de 100mL classe A ou tubo de Nessler de 100mL graduado,
pra de laboratrio;
cido sulfrico 1+1; soluo de fluoreto de potssio; soluo de tiossulfato
de sdio 0,0125N e soluo indicadora de amido.
Procedimento:
Depois de realizado o procedimento acima para coleta e preservao da
amostra, acrescentar 2mL de soluo de fluoreto de potssio (no caso de
amostra de gua estuarina ou marinha no se acrescenta essa soluo);
Acrescentar em seguida 4mL de soluo de cido sulfrico 1:1, com cuidado, fechar o frasco e agitar muito bem para dissolver completamente o material precipitado;
Transferir imediatamente 100mL para um Erlenmeyer, com auxlio de um
tubo de Nessler graduado ou pipeta volumtrica de 100mL;
Titular a amostra com a soluo de tiossulfato de sdio 0,0125N at a deteco de cor amarelo palha, usando a soluo de amido como indicadora;
O ponto final da titulao dado pelo primeiro desaparecimento da cor azul
caracterstica;
Expresso do resultado:
A concentrao de oxignio dissolvido dada por:
V1 x 2 x Fc = mg/L OD
V1 = Volume gasto na bureta
Fc = fator de correo do tiossulfato de sdio;
Os resultados sero expressos em mg/L de oxignio dissolvido.
9.4 Condutividade e Salinidade

A capacidade da gua em conduzir a corrente eltrica pode ser expressa numericamente pela condutividade/salinidade, que est relacionada
diretamente com as concentraes inicas e temperatura. A condutividade indica a quantidade de sais presentes na gua, fornecendo uma
medida indireta da concentrao de poluentes e uma indicao das
modificaes na composio do corpo dgua. Concentraes acima de
100S/cm (micro Siemens/cm) geralmente indicam ambientes impactados; valores altos podem tambm indicar caractersticas corrosivas
da gua. Em ambientes salobros, estuarinos e no mar, a expresso do
resultado de condutividade mS/cm (mili Siemens/cm).
ENSAIOS EM CAMPO
245
A salinidade absoluta a concentrao de todos os ons dissolvidos na

gua e, na prtica, no pode ser medida diretamente, sendo necessria
a determinao da salinidade prtica (S). uma grandeza adimensional, sendo o termo 0/00 substitudo por Sx10-3. A salinidade prtica pode
ser determinada por mtodos indiretos relacionados com medies de
propriedades fsicas como condutividade, densidade, ndice de refrao (refratmetro), entre outros.
Esses dois tipos de ensaios (condutividade e salinidade) so realizados
preferencialmente em campo, diretamente no corpo dgua, ou por
meio de amostra coletada com equipamentos apropriados, como balde
de ao inox (na superfcie) ou garrafa de van Dorn. No caso do emprego
de equipamento, a amostra acondicionada em um frasco descartvel
e a determinao pode ser realizada imediatamente aps a coleta ou
encaminhada ao laboratrio, caso no tenha o equipamento disponvel
no momento da coleta.
A determinao da condutividade e salinidade realizada com um condutivmetro/salinmetro acoplado a uma sonda ou sensor (ou refratmetro para a salinidade), sendo que os procedimentos de ajustes dos
equipamentos eletromtricos devem ser realizados de acordo com as
recomendaes e especificaes tcnicas do fabricante.
9.5 pH - Potencial Hidrogeninico - Mtodo Eletromtrico

O potencial hidrogeninico (pH) o cologaritimo da concentrao de
ons hidrognio em uma amostra, expresso em mol/L. Seu valor varia
de 0 a 14, onde gua com pH menor que 7 considerada cida; com
valor acima de 7 considerada bsica ou alcalina; e, com valor igual a 7
considerada como uma gua neutra.
Quanto menor for o valor do pH de uma substncia, maior a concentrao de ons hidrnio (H3O+) e menor a concentrao de ons OH-; o
inverso verdadeiro para gua bsica ou alcalina.
A membrana do eletrodo separa dois meios de concentraes de pH
diferentes (faixa cida e alcalina). Desenvolve-se entre os dois lados da
membrana uma diferena de potencial, que proporcional diferena
de pH entre os meios, sendo esta diferena medida pelo eletrodo de
medio contra uma referncia.
246
A determinao de pH realizada preferencialmente direto no corpo

dgua, quando possvel, ou em uma amostra coletada com equipamento apropriado, como balde de ao inox (superfcie) ou com auxlio de
uma garrafa de van Dorn em profundidade.
importante ressaltar que a determinao de pH deve ser realizada
com eletrodos especficos. Os procedimentos de ajustes dos
equipamentos eletromtricos devem ser realizados de acordo com as
Procedimentos para ensaio de pH - mtodo eletromtrico
Coletar a amostra com auxlio de batiscafo na superfcie ou com garrafa de
van Dorn, enchendo um frasco descartvel;
Ligar o phmetro (potencimetro) e aguardar at que os valores se estabilizem, ou seja, no fiquem variando;
Lavar os eletrodos com gua deionizada e enxug-los delicadamente com
papel absorvente;
Calibrar o equipamento com as solues padro de pH, conforme orientao do fabricante;
Retirar os eletrodos da soluo padro, lav-los com gua deionizada e
enxug-los;

"
Esperar os valores se estabilizarem e fazer a leitura do resultado;
Retirar os eletrodos da amostra, lav-los e deix-los imersos em soluo de
acordo com o manual do fabricante;
Desligar o equipamento.
Prazo mximo para este ensaio de 15 minutos a partir do momento da
coleta de amostra.
9.6 Potencial Redox - Eh ou ORP - Mtodo Eletromtrico

O potencial de oxidao e reduo (ORP, do ingls Oxidation Reduction
Potential), tambm conhecido como potencial Redox (Eh) e serve
para avaliar as reaes qumicas de um meio, atravs do equilbrio
entre as reaes de oxidao e reduo.
A determinao do ORP realizada com eletrodo especfico, utilizando-se um medidor de pH (pHmetro), ajustado em mV (mili Volts).
Os procedimentos de ajustes devem ser realizados de acordo com as
ENSAIOS EM CAMPO
247
9.7 Temperatura da gua e Ar

A medio da temperatura da gua na superfcie pode ser realizada com
termmetro de imerso parcial, submergindo-o diretamente no corpo
dgua ou atravs dos sensores de temperatura dos equipamentos eletromtricos utilizados para os ensaios de pH, condutividade e oxignio dissolvido ou termistores especficos disponveis no mercado. Na impossibilidade de medir a temperatura diretamente no corpo dgua, realizar a medida
em um balde de ao inox com volume de 5 litros a 10 litros de amostra ou
frasco descartvel imediatamente aps a coleta.
Para a determinao da temperatura em profundidade, utilizar um dos
equipamentos eletromtricos citados acima, com sonda de profundidade e sensor de temperatura, utilizando como resultado da medio o
valor expresso no display do equipamento.
A determinao de temperatura do ar pode ser realizada com os sensores acima, mantendo o termmetro ou sensor na posio vertical,
evitando incidncia direta da luz solar.
9.8 Transparncia
A transparncia da gua obtida com auxlio do disco de Secchi. Para
tanto, necessrio observar as seguintes condies, sempre que possvel: o operador deve se posicionar de tal maneira que sua viso fique
vertical ao eixo central do disco; realizar a determinao em condies
de cu claro, preferencialmente sombra, e selecionar um local com
pouca agitao ou ondas.
O disco submerso no local onde ser realizada a determinao at
seu desaparecimento do campo visual. Repetir a operao para certificao de que o disco est no seu limite de visualizao e efetuar a medio deste limite no cabo graduado de apoio do equipamento. Anotar
os resultados na ficha de coleta.
9.9 Turbidez - Mtodo Nefelomtrico

Turbidez a reduo da transparncia de uma amostra aquosa devido
presena de material em suspenso. O mtodo utilizado para leitura
da turbidez o nefelomtrico que um mtodo secundrio, indireto.
Baseia-se na determinao da intensidade de luz dispersa pela amostra num ngulo de 90 em relao direo da luz incidente, comparada com a intensidade de luz dispersa por uma suspenso-padro.
248
A determinao da turbidez pode ser realizada em campo com o auxlio

de um turbidmetro e seus procedimentos de ajustes devem ser realizados de acordo com as recomendaes e especificaes tcnicas do
fabricante, ou encaminhada ao laboratrio, caso no tenha o equipamento disponvel no momento da coleta. Anotar os resultados na ficha
de coleta.
9.10 Slidos Sedimentveis - Cone Imhoff

todo material slido que sedimenta por ao da gravidade em uma
amostra aquosa. A amostra para o ensaio de slidos sedimentveis no
requer preservao qumica e pode ser analisada em campo (ensaio
imediato) ou no laboratrio em at, no mximo, 24 horas aps a coleta.
Princpio do mtodo
O mtodo consiste na sedimentao, por ao da gravidade, dos slidos
de densidade superior ao da gua presentes na amostra.
ENSAIOS EM CAMPO
249
Procedimentos para ensaio de slidos sedimentveis em campo ou

laboratrio - mtodo do cone Imhoff
Materiais:

696@
6 $
Q"
Basto de vidro;
Suporte com argola com 80mm;
Cronmetro;

&
Amostras apresentando colorao muito intensa podem impedir a visualizao do slido sedimentvel;
Amostras com alto teor de slidos podem no apresentar sedimentao
@@
Nota: Caso a fase sedimentada apresente heterogeneidade no momento da

leitura, cancelar a determinao e efetuar novo ensaio.
Determinao:

"
$%

9

6
homogeneizando durante todo o processo de transferncia;
Deixar em repouso por 45 minutos;
Com um basto de vidro, deslocar delicadamente as partculas aderidas
parede do cone com movimentos circulares, para que as mesmas possam
sedimentar;
Deixar sedimentar por mais 15 minutos;
Verificar o volume sedimentado, em mL/L.
Expresso dos resultados:
0,1mL/L a 2,0mL/L uma unidade decimal
2,0mL/L a 10mL/L mltiplos de 0,5
11mL/L a 40mL/L nmeros inteiros
42mL/L a 100mL/L nmeros inteiros pares
150mL/L a 1000mL/L mltiplos de 50.
9.11 Medidores e Amostradores Automticos

Nos primeiros projetos de monitoramento automtico dos cursos dgua,
as medies eram realizadas por instrumentos mecnicos e os registros
efetuados em papel. Esses instrumentos, destinados medio de grandezas hidrometeorolgicas, determinavam as chuvas e as variaes de nvel
250
dos rios e reservatrios por meio de bias e balanas que moviam pequenas engrenagens e deslocavam uma caneta registradora sobre um rolo de
papel contnuo. Os registros, em forma de grfico, representavam as
variaes do parmetro medido, em funo do tempo. Essa onerosa
forma de registro implicava necessidade de manuteno constante dos
equipamentos de medio, acionamento frequente dos mecanismos
por corda do relgio e reposio tambm frequente dos rolos de papel
e da tinta da caneta. Por fim, a transformao dos anagramas em dados
numricos era realizada por leitura manual dos grficos, com emprego
de rguas especficas, o que demandava uma carga de trabalho considervel para se dispor dos resultados necessrios s anlises dos dados.
O grande desenvolvimento tecnolgico do monitoramento automtico
foi determinado pela evoluo dos processos eletroeletrnicos,
que possibilitaram a substituio dos movimentos mecnicos dos
sensores por impulsos eltricos. Os mecanismos de relojoaria deram
lugar a motores eltricos sincronizados, alimentados por baterias. Mais
recentemente, os progressos na rea da informtica propiciaram a
transformao dos impulsos eltricos em cdigos digitais que podiam ser
gravados em dispositivos magnticos com capacidade de armazenamento
gigantesca. Registradores virtuais de tempo sincronizados s leituras dos
dados dispensaram os sensores mecnicos, permitindo informar, para
cada dado coletado, a hora correspondente.
Atualmente, a telemetria dos dados gerados em campo s centrais de
gerenciamento por meio da transmisso por celular, satlite e rede
ethernet tem permitido acompanhamento operacional ininterrupto
das estaes e postos de medio e a disponibilizao quase que
imediata dos dados gerados ao pblico usurio.
9.11.1 Monitoramento Automtico da Qualidade das guas

Denomina-se automtico o monitoramento que realizado por
dispositivos capazes de determinar os parmetros de interesse,
registrar, processar e, em sistemas mais sofisticados, interpretar os
dados de forma automtica e sistemtica, sem a necessidade constante
de superviso por parte de um operador.
Como o monitoramento constante e ininterrupto, permite detalhar
com mais preciso a evoluo da qualidade da gua ao longo de
ENSAIOS EM CAMPO
251
perodos de interesse, com a identificao de eventos cclicos ou

pontuais como, por exemplo, descargas de efluentes clandestinas, mau
funcionamento de estaes de tratamento de efluentes, contribuies
difusas durante episdios de chuvas, etc. Esses eventos manifestamse em curtos intervalos de tempo e dificilmente seriam detectados em
monitoramentos convencionais nos quais a coleta de amostras d-se
de forma manual.
Quando dotada de computador lgico programvel (CLP) e modem,
uma estao de monitoramento automtico pode transmitir os dados
gerados em tempo real, agregando uma srie de recursos ao monitoramento e, no caso da estao possuir amostrador automtico, coletar
amostras de gua a qualquer momento.
Estaes de monitoramento automtico podem tambm integrar
sistemas de alerta, emitindo sinais de alarme para fax, celular (SMS)
ou computador na sala de controle distncia quando da ocorrncia
de eventos crticos de qualidade da gua. Esse sinal de alarme pode,
ainda, ser combinado ao acionamento automtico de um amostrador
que passa a coletar amostras durante o evento.
Um software instalado no CLP comanda as operaes da estao e monitora o prprio sistema, informando mau funcionamento ou defeito
nos dispositivos, permitindo realizar ajustes a distncia.
Todo esse aparato tecnolgico tem viabilizado a disseminao de
estaes de monitoramento automtico de qualidade das guas. As
determinaes fsicas, qumicas e at biolgicas so realizadas em
campo por equipamentos eletromtricos e sensores que geram sinais
eltricos, os quais so enviados a dispositivos dotados de memria
eletrnica. Esses dispositivos, conhecidos como data-loggers, so hoje
fundamentais para as estaes de monitoramento, sendo capazes
de armazenar dados coletados durante semanas ou mesmo meses,
dependendo de sua capacidade e do intervalo de tempo entre medies.
Sensores especficos para cada ensaio so conectados aos diversos
canais de registro dos data-loggers. Cada um dos sensores fornece
uma determinada resposta eletrnica ao estmulo recebido durante
o contato com a gua. As respostas so registradas periodicamente
para que, aps a coleta dos dados armazenados com auxlio de um
252
extrator de dados ou computador porttil, haja a converso em valores

numricos.
Os ensaios medidos durante o monitoramento automtico geralmente incluem: pH, oxignio dissolvido, potencial redox, temperatura, salinidade, condutividade eltrica, turbidez, e nutrientes como amnia,
nitrato e cloreto. Sensores de ficocianina, ficoeritrina e clorofila foram
disponibilizados recentemente no mercado. As determinaes de fsforo, nitrognio, toxicidade, demanda bioqumica de oxignio (DBO),
demanda qumica de oxignio (DQO) e carbono orgnico total (COT)
compem a lista de ensaios que necessitam de equipamentos e estaes mais sofisticadas tecnicamente. A determinao de outros
parmetros em laboratrio para complementar o monitoramento
possvel mediante a coleta de amostras por amostradores automticos. Esses amostradores so constitudos de: a) interface digital para programao da amostragem; b) dispositivo de coleta de
amostras e bico dosador e c) compartimento refrigerado onde as
amostras ficam acondicionadas em frascos cuja quantidade bastante
varivel, dependendo do modelo do equipamento e da estratgia operacional adotada. A amostragem pode ser programada para ocorrer de
forma simples ou composta em cada frasco, alm de se estabelecer o
intervalo de tempo entre amostragens. Dessa forma, a amostra colhida
em cada frasco estar associada a uma data e hora inicial e final. Aps
o preenchimento, os frascos so encaminhados ao laboratrio para as
anlises de interesse.
Um exemplo de monitoramento automtico o realizado pela Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB) em algumas regies dentro do seu Monitoramento de Qualidade das guas. Os dados
so registrados a cada minuto e enviados por telemetria baseada em
celular a uma Central de Gerenciamento localizada em sua sede na
capital paulista, permitindo o acompanhamento online da qualidade
das guas nos corpos monitorados. Essas estaes funcionam como
minilaboratrios, onde a aparelhagem analtica para a determinao de pH, temperatura, oxignio dissolvido, condutividade eltrica
e turbidez fica abrigada em um container (Fig. 89). A gua amostrada continuamente por uma bomba de recalque instalada submersa
em uma estrutura metlica flutuante que acompanha as variaes de
nvel dgua e permite que a amostragem ocorra sempre a uma mesma
profundidade (Fig. 90).
ENSAIOS EM CAMPO
253
(B)
(A)
Figura 89. Vista interna do container de uma Estao Automtica de Monitoramento: (A)
Em primeiro plano o amostrador automtico refrigerado e, ao fundo, o gabinete onde esto
instalados o CLP e os medidores de pH, OD, temperatura e condutividade eltrica; (B)
Turbidmetro (Foto: Luis Altivo Carvalho Alvim/CETESB).
(B)
(A)
Figura 90. Vista da Estao Automtica de Monitoramento Rasgo, localizada no rio Tiet em

+ %$;>X
%%=
[%% Z%% & &
Z%;+>
;? \%

'
KK$+>
254
As estaes contam, ainda, com lingrafos que registram a variao do

nvel dgua e amostradores automticos refrigerados para acionamento por alarme ou pelo operador mediante programao in loco.
Os dados transmitidos Central de Gerenciamento so inseridos em
banco de dados e validados antes de serem disponibilizados aos pblicos interno e externo.
As estaes automticas exigem visitas de manuteno com frequncia
pr-determinada, variando de semanal a mensal, durante as quais
realizada a verificao de todos os equipamentos (vlvulas, medidores,
mdulos de lavagem automtica, amostrador), limpeza das clulas e
sensores, calibrao e aferio dos medidores, extrao de dados do
CLP, alm da lavagem do conjunto flutuante-bomba e tubulao de
recalque para garantir a fidelidade da gua amostrada.
Mais recentemente, as sondas multiparmtricas tm sido utilizadas
para o monitoramento automtico contnuo ou temporrio de corpos
dgua. Essas sondas tm formato cilndrico da ordem de 10 cm de
dimetro e 50 cm de altura e exigem para sua instalao somente um
suporte do tipo mo-francesa dotado de roldana com corda ou cabo de
ao para ajuste da profundidade de imerso da mesma, devidamente
apoiado na margem do corpo dgua ou instalado na extremidade de
um pier. No caso de reservatrios ou represas, as sondas podem ser
instaladas em estruturas flutuantes apoitadas. A alimentao eltrica
da sonda garantida por baterias internas suficientes para perodos
extensos de medio, dependendo da frequncia de determinao
e registro programada. A telemetria dos dados pode ser realizada de
forma anloga de uma estao convencional. Esse tipo de equipamento
tem experimentado rpida evoluo tecnolgica nos ltimos anos,
podendo-se encontrar no mercado sensores para determinao de
quase todos os parmetros citados anteriormente.
O uso de sondas multiparmetro constitui, dessa forma, alternativa interessante a ser considerada no projeto de redes de monitoramento automtico da qualidade de corpos dgua. Esses equipamentos so tecnicamente
confiveis e exigem infra-estrutura mais simples para a sua instalao em
comparao s estaes automticas convencionais, compostas de container e sistema de bombeamento, o que implica custos menores tanto na
implantao quanto na manuteno ao longo de sua vida til.
ENSAIOS EM CAMPO
255
Determinao de Cloro
residual - Foto - Carlos
Jesus Brando
CAPTULO
10
10 MEDIO DE VAZO
Cada vez mais se tem reconhecido a importncia da interpretao conjunta dos dados de quantidade (vazo) e qualidade. A informao de
vazo de um corpo dgua ou despejo de efluentes, aliada aos dados
de qualidade, possibilita o clculo das cargas poluidoras, expressas em
quantidade no tempo, geralmente kg/dia ou t/ano. Em se tratando de
um processo industrial, a vazo permite determinar o balano de massa no sistema para determinado elemento.
Para a medio de vazo necessria equipe tcnica treinada e apta a
fazer uso de vrios mtodos e dispositivos, dependendo de uma srie
de fatores, tais como: objetivo da medio; porte do curso de gua;
tipo, variabilidade e regime do escoamento; acessibilidade ao local;
recursos tcnicos, humanos e econmicos e tempo, disponveis.
A vistoria prvia do local imprescindvel e indicar o mtodo de medio mais adequado. Nessa etapa, pode ser necessrio que o tcnico
de campo estime a vazo por mtodos simples, como o volumtrico ou
com uso de flutuadores.
Saliente-se que embora a determinao da vazo no seja atividade
do coletor de amostras, o mesmo pode contribuir de forma simples
e rpida para a sua determinao. Nos locais de amostragem prximos de um posto fluviomtrico dotado de rguas limnimtricas,
basta ao coletor realizar a leitura da rgua e registr-la em sua ficha
de coleta. Mediante parceria com a entidade responsvel pelo posto, essa leitura pode ser facilmente transformada no valor da vazo
do momento da coleta.
MEDIO DE VAZO
257
10.1 Medio de Vazo em Canais Abertos

Rios, crregos e ribeires constituem canais abertos cujas vazes
podem ser determinadas por vrios mtodos, podendo-se citar como
os principais:
4
4
4
4
4
4
volumtrico;

"
convencional com molinete hidromtrico;
acstico;
traador;
com dispositivos de geometria regular.
A medio de vazo em canais abertos considera parmetros caractersticos da seo de interesse, relacionados:
4 $
Q&
6
$

6
dade, dentre outros;
4 ao escoamento: distribuio de velocidades da massa lquida na seo.
Esses parmetros variam com o nvel dgua, cuja leitura realizada
com a instalao de rguas limnimtricas na seo (Fig. 91), e podem
ser definidos como:
4 rea molhada: rea da seo transversal ocupada por gua e
expressa em metros quadrados;
4
$

&

%

molhada, expressa em metros;
4 Profundidade: distncia da superfcie livre de gua ao leito, podendo
ser dada em termos da mdia, mxima e em determinada vertical.
258
Figura 91. Rguas Limnimtricas (Foto: Luis Altivo Carvalho Alvim/CETESB).
10.1.1 Mtodo Volumtrico

O mtodo volumtrico consiste em se medir o tempo necessrio para
o enchimento de um reservatrio de volume conhecido. Um balde ou
tambor pode ser usado no caso de pequenas vazes, mas o conceito
pode ser ampliado para o reservatrio de uma usina hidreltrica.
Quando aplicvel, o mtodo ser to mais preciso quanto forem o volume do reservatrio e o tempo medido para complet-lo. Em funo do
tempo de reao inerente ao ser humano na cronometragem, no devem ser escolhidos recipientes que impliquem tempos de enchimento
muito curtos, recomendando-se, no mnimo, 100 segundos.
A vazo ser obtida pela diviso do volume coletado pelo tempo medido.
10.1.2 Medio com Flutuadores

A estimativa da velocidade com o uso de flutuadores uma alternativa
simples e rpida, mas com preciso limitada. Recomenda-se escolher
um trecho de curso dgua retilneo que apresente margens paralelas,
declividade do leito constante e profundidade uniforme no sentido
longitudinal.
MEDIO DE VAZO
259
Esse mtodo aceitvel somente nos seguintes casos:

4 Ocorrncia de cheias com velocidades e profundidades impeditivas ao uso de embarcao para medio com molinete;
4 Escoamentos com velocidades extremamente baixas em que o uso
de molinete seja invivel.
O flutuador posicionado no meio do rio ou canal, permitindo-se que
ele percorra um pequeno trecho antes de se iniciar a cronometragem.
Dessa forma, o objeto adquirir, praticamente, a mesma velocidade da
gua que o circunda. A velocidade superficial obtida dividindo-se a
distncia percorrida pelo tempo medido. A velocidade mdia na seo
estimada multiplicando-se a velocidade superficial pelo fator 0,85.
Estimando-se a rea da seo transversal de escoamento, a vazo ser
calculada como o produto dessa rea pela velocidade mdia de escoamento.
10.1.3 Mtodo Convencional com Molinete Hidromtrico

O mtodo convencional de medio de vazes com molinete hidromtrico bastante utilizado e serve de referncia aos demais mtodos,
consistindo em se determinar a rea molhada e a velocidade mdia na
seo transversal de interesse, obtendo-se a vazo como o produto
dessas duas grandezas.
Para que sejam consideradas as variaes da geometria do leito e a
distribuio de velocidades da massa lquida, a seo dividida em um
nmero significativo de subsees delimitadas por verticais - linhas
imaginrias contidas no plano da seo transversal e perpendiculares
superfcie livre de gua. A distncia entre verticais depende da largura
do rio. O extinto Departamento Nacional de guas e Energia Eltrica
DNAEE, hoje Agncia Nacional de Energia Eltrica ANEEL, recomendava as distncias entre verticais relacionadas na tabela 09.
260
Tabela 9. Distncia recomendada entre verticais

Largura do rio (m)
Distncia entre verticais (m)
?
86?8
?3\
0,50
\{9[
1,00
9[{?8
2,00
?8{[8
?688
50 80
4,00
80 150
\688
150 250
8,00
7[8
12,00
|&U569~\wet al, 2001.
importante tomar nota do nvel dgua ao incio e final dos trabalhos,

sendo desejvel que o mesmo no se altere excessivamente durante a
Q6 3@
Q\
Em cada vertical, realizada a medio da profundidade (p). Calculando-se a profundidade mdia de cada subseo e multiplicando pela sua
largura, tem-se a rea. A soma dessas reas constituir a rea molhada
da seo.
Concomitantemente, so medidas as velocidades com molinete
hidromtrico (Fig. 92) em diferentes profundidades de cada vertical,
de forma se obter a velocidade mdia. No Brasil, normalmente
empregado o mtodo simplificado ou dos dois pontos para a
determinao da velocidade mdia:
4 86\86@ @
86\"
4 86\86@ 86786^
MEDIO DE VAZO
261
Figura 92. Molinete Hidromtrico (Foto: Luis Altivo Carvalho Alvim/CETESB).
O molinete hidromtrico constitudo de um eixo ao qual acoplada

uma hlice calibrada e um contato eltrico que aciona um contador de
rotaes. O nmero de rotaes por segundo dessa hlice correlaciona-se velocidade da massa lquida por meio de uma equao fornecida pelo fabricante do equipamento.
importante observar que cada hlice apresenta medidas vlidas
para determinada faixa de velocidades. No caso de velocidades muito
6@3%

X|$~?~]Y
Figura 93. Minimolinete Hidromtrico (Foto: Luis Altivo Carvalho Alvim/CETESB).
262
Figura 94. Micromolinete Hidromtrico (Foto: Luis Altivo Carvalho Alvim/CETESB).
O procedimento mais utilizado no Brasil para o clculo da vazo o da

Meia Seo, segundo o qual vazes parciais so calculadas para cada
subseo com uma vertical ao centro e delimitada pelas semidistncias s verticais adjacentes. Dessa forma, a rea de cada subseo ser
dada pelo produto da soma das semi-distncias pela profundidade da
vertical. Multiplicando-se essa rea pela velocidade mdia na vertical,
tem-se a vazo parcial nessa subseo. A soma dessas vazes parciais
resultar na vazo total da seo.
A seo de medio deve ser escolhida com critrio, de forma a que os
seguintes requisitos sejam atendidos:
4 Deve situar-se em trecho retilneo do rio;
4 Deve ser a mais regular possvel, sem obstculos - blocos de pedra,
bancos de areia, dentre outros - no fundo e nas margens;
4 No devem ser observadas zonas de estagnao ou de remanso,

Uma seo com as caractersticas citadas apresenta uma desejvel distribuio paralela de velocidades. No h necessidade de coincidncia
com a seo de rguas limnimtricas, desde que inexista contribuio
importante entre elas, sejam afluentes naturais ou despejos.
A medio de vazo em pequenos cursos dgua onde a profundidade
inferior a 1 metro requer poucos equipamentos: molinete, haste
graduada de fixao, contador de rotaes e trena ou cabo de ao
graduado. Nesse caso, a medio pode ser feita a vau - o operador
MEDIO DE VAZO
263
posiciona-se dentro do leito dgua - ou a partir de pequenas pontes.

A seo demarcada com cabo de ao graduado ou trena esticada de
margem a margem para servir de referncia ao posicionamento do
molinete nas verticais.
Em se tratando de rios maiores, com profundidades acima de 1m e/
ou largura superior a 10m, a medio normalmente realizada com
embarcao a partir da qual o molinete lanado. Um cabo de ao graduado
esticado de uma margem a outra e servir de suporte para o deslocamento
do barco e para o posicionamento das verticais. Para garantir a verticalidade
do molinete, utilizado abaixo do mesmo um lastro com forma hidrodinmica
e com peso proporcional velocidade da gua, podendo variar de 10 a 150kg.
O conjunto molinete-lastro suportado por cabo de ao especial - possui no
centro um fio que envia os impulsos correspondentes s rotaes da hlice
do molinete - preso a um guincho hidromtrico (Fig. 95). Esse guincho
firmemente fixado embarcao e constitudo de tambor dotado de
manivela com engrenagem e trava de segurana.
Figura 95. Guincho Hidromtrico (Foto: Luis Altivo Carvalho Alvim/CETESB).
A escolha da embarcao adequada um item importante a ser considerado devido sua relao direta com a segurana do pessoal e de
todo o equipamento. A anlise deve contemplar a estabilidade, borda
livre e potncia do motor. Entretanto, quanto maior a embarcao,
maiores sero o espao necessrio para manobra e as dificuldades para
transporte por via terrestre e colocao na gua.
264
10.1.4 Mtodo Acstico

O mtodo acstico utiliza os equipamentos denominados perfiladores
acsticos de corrente por efeito doppler ou, em ingls, acoustic doppler
current profiler6 $U!X|$~\Y Q
desse mtodo teve incio nos EUA na dcada de 1980 e, j na dcada
de 1990, chegou ao Brasil, onde vem se difundindo nas instituies que
desenvolvem trabalhos de hidrometria.
Figura 96. Perfilador Acstico de Corrente por Efeito Doppler ou ADCP (Foto: Luis Altivo
Carvalho Alvim/CETESB).
Esse tipo de equipamento emite pulsos de ultrasom que so refletidos

pelas partculas slidas em suspenso na massa lquida e pelo fundo.
Na prtica, o aparelho afixado na lateral da embarcao e conectado
a um notebook onde instalado o software fornecido pelo fabricante. Ento, so realizadas, no mnimo, duas travessias da seo do rio,
quando so registrados, simultaneamente: perfil de fundo ou batimetria; perfis e direes de velocidade e a trajetria descrita pelo barco.
O prprio software encarrega-se de registrar e processar as informaes colhidas e calcular a vazo total na seo.
MEDIO DE VAZO
265
O ADCP um equipamento que apresenta inmeras vantagens em

relao ao molinete, dentre as quais:
4 Medio de vazo em grandes profundidades, podendo chegar a
mais de 200m;
4 W $
6 @
Q

variam consideravelmente;
4 Maior preciso na determinao das velocidades e profundidades;
4 Medies mais rpidas, com menos equipamentos embarcados,
dispensando-se o uso de cabo de ao na seo e lastro;
4 #Q@%
@
Por outro lado, podem ser apontadas como desvantagens ou limitaes do ADCP:
4 Necessidade de capacitao tcnica dos operadores em informtica para a operao do equipamento em campo e interpretao dos
dados fornecidos pelo software em tempo real;
4 Custo relativamente elevado de aquisio;
4 Inadequao para medio de vazo em guas cristalinas ou com
turbidez muito baixa;
4 Como a medio realizada com o aparelho parcialmente

$6

Q@%
medida, sendo apenas estimadas as velocidades;
4 Como a medio realizada com o aparelho parcialmente submerso, corpos dgua muito rasos no admitem o mtodo.
Estudos comparativos entre dados de vazo obtidos pelos mtodos
convencional e acstico tm demonstrado uma correlao bastante
elevada, sem tendncia de um mtodo apresentar resultados sistematicamente superiores ou inferiores a outro.
10.1.5 Mtodo do Traador

Denomina-se mtodo do traador injeo, em determinado ponto do
rio, de uma soluo de produto qumico de concentrao conhecida e
relativamente elevada. A medio da concentrao na gua ser realizada com um salinmetro ou condutivmetro.
266
De forma anloga, pode-se utilizar como traador material fluorescente (normalmente fluorescena ou rodamina) ou radioistopo em soluo. Para a determinao da fluorescncia, utiliza-se um equipamento
denominado fluormetro e no caso de se optar pelo uso de radioistopos em soluo, a atividade radioativa ser medida diretamente em
campo com um detector cintilador.
(a) Injeo contnua
O procedimento de injeo contnua de uma vazo constante baseiase no princpio de que a diluio sofrida pela soluo injetada ser
diretamente proporcional vazo do corpo dgua. Dessa forma, a uma
distncia a jusante suficiente para que a mistura soluo-gua do rio
esteja completa, ser medida a concentrao do traador adicionado
na gua.
A vazo do corpo dgua ser dada por:
onde:
Q = vazo do rio (m?/s)
q = vazo injetada de soluo (L/s)
Cs = concentrao da soluo (g/L)
Cr = concentrao na gua do rio (mg/L)
A escolha do traador deve levar em considerao diversos aspectos,
dentre os quais:
4
4
4
4
4
custo;
alta solubilidade em gua;
baixa corrosividade e toxicidade;
ausncia na gua do rio;
decaimento da atividade ao longo do tempo do estudo, no caso de
material radioativo.
(b) Integrao
O procedimento de integrao ou injeo instantnea ocorre quando
um volume conhecido de soluo despejado em determinado ponto do
rio e, numa seo a jusante onde a mistura completa j tenha ocorrido,
amostras so tomadas durante todo o tempo de passagem da soluo.
MEDIO DE VAZO
267
A vazo ser dada pela equao seguinte, onde a concentrao do traador das amostras integrada no tempo:
onde:
Q = vazo do rio (m?/s)
V = volume de soluo despejado (L)
Cs = concentrao da soluo (g/L)
Cr = concentrao varivel do traador na gua do rio (mg/L)
T = tempo de passagem da soluo pela seo de amostragem (s).
Nessa variante do mtodo do traador, importante que nenhuma
parcela da soluo despejada seja retida em pontos de remanso ou de
gua parada.
10.1.6 Medio com Dispositivos de Geometria Regular

Os dispositivos de geometria regular, como as calhas Parshall e
os vertedores, so utilizados para medio de vazo devido ao
fato de as relaes cota-vazo serem conhecidas. Uma vez que as
dimenses desses dispositivos so padronizadas, elas podem ser
facilmente reproduzidas em campo, mantendo-se as equaes
determinadas em laboratrio.
Esses dispositivos aplicam-se medio de pequenas vazes, no mximo 5m?/s.
(a) Calha Parshall
!
X|$~wY
%
para medies contnuas de descarga e no requer caixa de tranquilizao a montante.
Suas principais desvantagens so a maior complexidade construtiva e
o custo elevado. Por outro lado, apresenta as seguintes vantagens em
relao aos vertedores:
4
$ @ Q

$6
como a circulao de sedimentos, nutrientes e vida aqutica;
4 uma nica estrutura permite medir uma ampla faixa de vazes.
268
(A)
(B)
Figura 97. Calha Parshall: (A) Vista superior em corte de uma calha Parshall; (B) Vista lateral
em corte longitudinal de uma calha Parshall (Fonte: CETESB, 1988).
A vazo dada por:

Q = 2,2 . W . Ha 3/2
onde:
Q = vazo (m?/s)
W = largura da garganta (m)
Ha = carga na seo convergente (m)
#
$767@
86?876][
Os smbolos utilizados pelas disposies construtivas so interrelacionados
e esto contidos nos manuais de Hidrulica. A largura da garganta o
tamanho nominal do Parshall e as demais dimenses dependem desse
valor. A equao mostrada somente pode ser aplicada se a calha apresentar
a veia de jusante - medida por Hb com escoamento livre.
(b) Vertedores de soleira delgada
Um vertedor de soleira delgada consiste em uma placa fina que intercepta transversalmente o fluxo dgua, provocando uma elevao a
montante e vertendo para jusante. Os vertedores de parede delgada
MEDIO DE VAZO
269
(Fig. 98) distinguem-se dos de soleira espessa pela largura da soleira.

Se for possvel observar paralelismo dos filetes na soleira, o vertedor
dito de soleira espessa.
(A)
(B)
Figura 98. Vertedores de parede delgada: (A) Soleira delgada; (B) Soleira espessa (Fonte:
CETESB, 1988).
O formato do recorte na placa por onde a gua escoa - triangular,

retangular, trapezoidal e outros - determina o tipo de vertedor e a
formulao estabelecida para o clculo da vazo, conforme mostrado
na Figura 99.
(A)
Q = 1,84 . L . H?7 onde:

Q = vazo (m?/s)
L = largura da crista (m)
H = carga (m)
(B)
Q = 1,84 . L . H?7 onde os smbolos

$
(C)
Q = 1,4 . H5/2 se o angulo for de 90;

os demais smbolos idnticos aos
acima
Figura 99. Vertedores de parede delgada: (A) Vertedouro retangular e clculo da vazo; (B)
Vertedouro trapezoidal e clculo da vazo; (C) Vetedouro triangular ou em V e clculo da
vazo (Fonte: CETESB, 1988).
270
# @% X96^]" 96^\" 96]Y @

Q
vertedor. Os valores de L e X so dados em funo de Hmax , que a
altura mxima da lmina dgua em metros, descontado o bordo livre,
&?max , X pelo menos 2 Hmax.
Como forma de tornar o escoamento a montante do vertedor o mais
regular possvel, pode-se instalar uma caixa de tranquilizao (Fig.
100 e 101). As dimenses da caixa podem variar para se adaptar s
condies reinantes em cada local, desde que resultem em escoamento
tranquilo. Adicionalmente, podem ser instaladas chicanas antes da
lmina do vertedor.
Figura 100. Caixa de tranquilizao com vertedor interno (Fonte: CETESB, 1988).
MEDIO DE VAZO
271
Figura 101. Caixa de tranquilizao corte longitudinal (Fonte: CETESB, 1988).
10.2 Medio de Vazo com Dispositivos Instalados

em Tubos
A seguir so apresentados os dispositivos medidores de vazo instalados
em tubos, com seus desenhos esquemticos e formulao bsica. So
&>

X|$987Y6
X|$98?Y6!
X|$98]Y6
$ X|$98[Y

X|$98\Y
10.2.1 Medidor Venturi
Figura 102. Medidor Venturi (Fonte: CETESB,1988).
272
onde:
Q = vazo (m?/s)
A = rea da garganta (m2)
H = carga diferencial de presso (m)
d1 = dimetro do tubo (m)

d2 = dimetro da garganta (m)
g = acelerao da gravidade (9,81m/s2)
Obs.: O coeficiente 0,98 j considera o fato de haver mercrio no
manmetro.
10.2.2 Medio com Bocais e Orifcios
Figura 103. Bocais e orifcios para medio de vazo (Fonte: CETESB, 1988).
MEDIO DE VAZO
273
onde:
A = rea da seo (m2)
Q = vazo (m?/s)
C = coeficiente de vazo adimensional para cada tipo de orifcio ou bocal
K = 4,42
H = H1 H2 , carga hidrulica (mca)
Os bocais distinguem-se dos orifcios e dos tubos a partir da relao
entre comprimento e dimetro (d). Esta relao tambm influi nos coeficientes de vazo e na velocidade do escoamento, se o orifcio estiver
instalado em uma canalizao.
10.2.3 Tubo de Pitot
Figura 104. Tubo de Pitot (Fonte: CETESB, 1988).
Q = S . V, onde:
Q = vazo (m?/s)
S = rea da seo (m2)
V = velocidade mdia na seo (m/s)
onde:
g = acelerao da gravidade (9,81m/s2)
H = P2 P1 (mca)
274
A velocidade mdia na seo obtida variando-se a posio do bocal.

Genericamente, a velocidade mdia oscila entre 0,5 e 0,8 da velocidade
no eixo.
10.2.4 Medidor Magntico
Figura 105. Medidor Magntico (Fonte: CETESB, 1988).
Q = Vv . VT . B, onde:
Q = vazo
Vv = voltagem induzida e proporcional a Vm
Vm = velocidade mdia
VT = a voltagem Vv amplificada levada a um compensador, a corrente
alternada transformada em contnua e levada ao multiplicador e
conduzida ao acumulador cuja leitura indica VT.
B = caracterstica da seo transversal do conduto (dimetro)
A formulao equivalente a Q = Vm.F, que pode ser obtida por leitura
direta do equipamento calibrado.
MEDIO DE VAZO
275
O medidor magntico pode ser instalado externamente a uma

canalizao, embora os eletrodos entrem em contato com o lquido.
10.2.5 Rotmetro
Figura 106. Rotmetro (Fonte: CETESB, 1988).
onde:
Q = vazo
K = coeficiente de descarga (fluidos tericos e reais)
= relao entre dimetro do tubo medidor e do flutuador
Df = dimetro do flutuador
F = fora que atua no flutuador, dependendo da diferena de densidade entre flutuador e lquido
= densidade do lquido
276
O rotmetro utilizado em lquidos claros e limpos. um equipamento

preciso e de baixo custo, sendao a vazo obtida por leitura direta no
tubomedidor, j graduado de forma conveniente.
10.3 Medio de Vazo em Tubos com Descarga Livre

A vazo em tubos com descarga livre pode ser obtida a partir do

$
X|$ 98w 98^Y
mtodo Califrnia (Figs. 109, 110 e 111).
10.3.1 Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato
Figura 107. Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato: (A) Vista em corte longitudinal do tubo;
(B) Detalhe do corte frontal do tubo (Fonte: CETESB, 1988).
onde:
Q = vazo (m?/s)
A = rea da seo molhada (m2)
X = distncia na horizontal (m)
Y = distncia na vertical (m)
MEDIO DE VAZO
277
Y = c + b (m)
c = profundidade na canalizao (m)
b = distncia do fundo do conduto at a superfcie do lquido que escoa (m)
O coeficiente 2,21 obtido a partir do equacionamento hidrulico,
considerando a veia fluda em escoamento sob ao da gravidade.
Para conduto ou canalizao inclinada (Fig. 108), o dispositivo deve
ser ajustado inclinao do conduto e calibrado, podendo ento ser
acoplado extremidade do conduto. Recomendase sua utilizao para
ngulos de inclinao pequenos.
Figura 108. Aplicao do Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato a canalizaes

inclinadas (Fonte: CETESB, 1988).
10.3.2 Mtodo Califrnia

O Mtodo Califrnia indicado para condutos horizontais (Fig. 109).
No caso de condutos inclinados, estes devem ser ligados a um comprimento de tubo horizontal por meio de uma mangueira, como ilustrado
na Figura 110.
278
(A)
(B)
Figura 109. Mtodo Califrnia: (A) Detalhe do corte frontal do tubo; (B) Vista em corte
longitudinal do tubo (Fonte: CETESB, 1988).
Q = K . h1,88, onde:
Q = vazo (L/s)
K = coeficiente de descarga que depende das caractersticas do conduto (m)
K868[w8689[77X Y
d = dimetro do conduto (cm)
h = altura da lmina dgua (cm)
h = d a (m)
a = altura do conduto no tomada pelo lquido (cm)
Figura 110. Mtodo Califrnia para condutos inclinados (Fonte: CETESB, 1988).
Existe tambm o Mtodo Califrnia Modificado, que uma adaptao

aos tubos cheios horizontais ou inclinados (Fig. 111). O ngulo pode
variar, mas o valor de Y fixo e igual a 0,25m. O valor 12,5 obtido
MEDIO DE VAZO
279
algebricamente a partir do equacionamento, considerando escoamento

sob ao da gravidade.
(A)
(B)
Figura 111. _J

5y
_
;> %& '
! ;+> %&

;?
CETESB, 1988).
Q = 12,5 . X . D2, onde:

Q = vazo (L/h)
X = L = comprimento na horizontal (cm)
D = dimetro interno do tubo (cm)
Y = distncia na vertical (m)
280
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288
ANEXOS
ANEXO 1 - PROCEDIMENTOS PARA O ARMAZENAMENTO E

PRESERVAO DE AMOSTRAS POR ENSAIO
A seguir, encontram-se listadas as recomendaes e orientaes de
como realizar o acondicionamento, preservao e armazenamento das
amostras por ensaio e demais cuidados que devem ser tomados por
ocasio da coleta. Informaes mais detalhadas sobre procedimentos
especficos podem ser obtidas nos Captulos 6 a 10.
Nas tabelas a seguir apresentamos:
4 a classe da amostra (A - amostra de gua tratada; B - amostra de
gua bruta; C - amostra de gua residuria; D - amostras de solo,
sedimento, lodo, material slido de dragagem, resduo slido e
semi-slido em geral; E - amostra de material biolgico);
4 o tipo do recipiente que deve ser utilizado para conter a amostra
coletada;
4 a quantidade de amostra;
4 @

%Q"
4 a preservao e os cuidados necessrios para garantir a estabilidade dos constituintes da amostra;
4 o armazenamento;
4 o procedimento que deve ser seguido para garantir a validade at o
momento do ensaio;
4 o prazo de validade, e
4 o tempo mximo de estocagem permitido para a realizao do
ensaio a partir do momento da coleta.
Os ensaios que utilizam o mesmo tipo de preservao podem ser encaminhados para o laboratrio de anlise em um nico recipiente e esto
agrupados na mesma linha nas tabelas a seguir. Por exemplo: cloreto,
fluoreto, nitrato, nitrito e sulfato.
ANEXOS
289
importante destacar a necessidade de manter-se atualizado sobre

os procedimentos para coleta dos diferentes ensaios, consultando
periodicamente a bibliografia recente e os responsveis tcnicos
dos laboratrios. Informaes adicionais sobre armazenamento e
preservao de amostras podem ser obtidas no Standard Methods for
the Examination of Water and Wastewater (APHA), e em publicaes
da U. S. Environmental Protection Agency(USEPA), entre outros.
Os prazos de validade estabelecidos para as anlises fsico-qumicas
nas tabelas a seguir (exceto para sulfeto) so os prazos mais restritivos
citados nas bibliografias acima para garantir a integridade da amostra.
290
ANEXOS
291
A, B, C
A, B, C
A, B, C
Cloro residual
total e livre (em
campo)
Condutividade
Condutividade
(em campo)
Cloreto,
Fluoreto,
Nitrato, Nitrito,
Sulfato
Cianeto
A, B, C
A, B
Alcalinidade
Cianeto total e
Cianeto livre
A, B
Classe da
Amostra
Acidez
Ensaio
P, V
250g
PP
(500mL)
250mL
250mL
(aproximadamente)
250mL
250mL
250mL
Quantidade
de Amostra
P, V
P, V
P, VB
Recipiente
(1)
Refrigerao a
4C 2C
Manter ao abrigo da luz
Refrigerao a
4C 2C
NaOH 10 M at pH>12
Resfriamento (em gelo)
Manter ao abrigo
da luz
Resfriamento
(em gelo)
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo)
-
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
24h
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo)
Continua...
Ensaio imediato
28 dias
Ensaio imediato
Cloreto, Fluoreto e
Sulfato - 28 dias
Nitrato e
Nitrito 48h
7 dias
24h
24h
Armazenamento
Preservao
Prazo de
Validade (2)
Tabela A1. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios fsico-qumicos inorgnicos - gua e Sedimento
292
A, B, C
A, B, C
Metais
dissolvidos
(solveis)
Ortofosfato
A, B, C
Metais
(exceto cromo
hexavalente),
Semimetais e
Dureza
Metais e
semimetais
B, C, D
Eh (em
campo)
Granulometria
A, B, C
A, B
Classe da
Amostra
Cromo
hexavalente
Cor,
Turbidez
Ensaio
P, V
P LE, V LE
PP LE
(500 mL)
P LE, V LE
PP
(700mL)
P LE, V LE
P, V
Recipiente
(1)
250mL
100mL
(aproximadamente)
250g
250mL
(aproximadamente)
700g
250mL
250mL
Quantidade
de Amostra
(4)
Resfriamento
(em gelo)
(3) Resfriamento (em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Adicionar HNO3 1+1

at pH<2
No requerida
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4oC 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Temperatura ambiente
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Armazenamento
48 h
6 meses
6 meses
Metais, Arsnio,
Selnio, Antimnio
e Dureza - 6 meses
Boro e
Mercrio - 28 dias
6 meses
Ensaio imediato
24h
48h
Prazo de
Validade (2)
Tabela A1. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios fsico-qumicos inorgnicos - gua e Sedimento (continuao)
ANEXOS
293
A, B, C
Salinidade
(em campo)
A, B, C, D
Salinidade
pH (em campo)
A, B
Odor
A, B, C
Nitrognio
amoniacal,
Nitrognio
orgnico,
Nitrognio
Kjeldahl,
Fsforo total
A, B, C
Oxignio
dissolvido
(em campo)
Fsforo total,
Nitrognio total
A, B, C
Oxignio
dissolvido
(Mtodo de
Winkler)
VDBO
VDBO
300mL
300mL
250g
(aproximadamente)
PP
250mL
300mL
(500mL)
P, V
VDBO
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo)
-
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo)
-
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
No requerido
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
H SO 1+1 at pH < 2
1mL de sulfato manganoso + 1mL de azida sdica

Sem resfriamento
Continua...
Ensaio imediato
6 meses
Ensaio imediato
24h
6 meses
Nitrognio - 7 dias;
Fsforo total 28 dias
Ensaio imediato
8h
294
A, B, C
Turbidez (em
campo)
-
VDBO
P, V
PP
(500mL)
P, V
Recipiente
(1)
300mL
1,5L
250g
(aproximadamente)
500mL
Quantidade
de Amostra
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo) (5)
-
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Armazenamento
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
Ensaio imediato
7 dias
24h
7 dias
7 dias
Prazo de
Validade (2)
Legenda: (1) Recipientes: V = Frasco de vidro neutro; VDBO = Frasco do tipo DBO (300mL), com tampa esmerilhada; LE = Limpeza especial (ver Captulo
3); P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; (2) A partir do momento da
coleta das amostras; (3) Filtrar em campo em membrana 0,45mm e adicionar HNO3 (1+1) at pH<2; (4) Filtrar em campo em membrana 0,45mm (5)
Adicionar 4 gotas de soluo 2N de acetato de zinco/100 mL da amostra, aguardar 15 minutos e adicionar NaOH at pH entre 9 e 10.
A, B, C
Sulfeto
Slidos totais,
{w""
Slidos volteis,
Umidade
A, B, C
A, B, C
Slidos totais,
{w""
Slidos volteis
Slidos
sedimentveis
Classe da
Amostra
Ensaio
Tabela A1. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios fsico-qumicos inorgnicos - gua e Sedimento (continuao)
ANEXOS
295
B, C
Compostos
orgnicos volteis
(COV) aromticos
(BTEXE)
COV aromticos
(BTEXE)
COV aromticos
(BTEXE)
COV halogenados
(SH)
A, B, C
Carbono orgnico
total (COT) /
Carbono orgnico
dissolvido (COD)
COT
Classe da
Amostra
Ensaio
V Vial LE
(4)
PVA (3)
(4)
V Vial LE
(4)
40mL
100g
(aproximadamente)
40mL
40mL
100g
(aproximadamente)
PVA
(3)
V Vial LE
(4)
300mL
Quantidade de
Amostra
VDBO
Recipiente
(1)
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Na2S2O3(9)
Resfriamento
(em gelo)
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Armazenamento
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Na2S2O3 (9)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
997
(gua salobra e marinha)
(somente Classe B, C)
Resfriamento
(em gelo)
H2SO4997
(gua doce)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
Continua...
14 dias
14 dias
14 dias
14 dias
7 dias
28 dias (6)
7 dias
28 dias (6)
Prazo de
Validade
(2)
Tabela A2. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de compostos qumicos orgnicos gua e Sedimento
296
B, C
A, B, C
A, B, C
COV halogenados
(SH)
COV
varredura
COV
varredura
COV varredura
DBO (demanda
bioqumica de
oxignio)
DQO (demanda
qumica de
oxignio)
B, C
COV halogenados
(SH)
Fenis por

(Pentaclorofenol /
2,4,6-Triclorofenol)
Classe da
Amostra
Ensaio
VA LE
(5)
P, V
1L
250mL
2 frascos
de 1L
100g
(aproximadamente)
PVA (3)
(100mL)
(4)
P, V
40mL
40mL
100g
(aproximadamente)
40mL
Quantidade de
Amostra
V Vial LE
(4)
V Vial LE
(4)
PVA (3)
(100mL)
(4)
V Vial LE
(4)
Recipiente
(1)
Na2S2O3 (9)
Resfriamento
(em gelo)
H2SO4997
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Armazenamento
7 dias
7 dias
28 dias (6)
24h
48h (6)
14 dias
14 dias
14 dias
14 dias
14 dias
Prazo de
Validade
(2)
Tabela A2. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de compostos qumicos orgnicos gua e Sedimento (continuao)
ANEXOS
297
B, C
Herbicidas
fenxicidos
clorados (2,4-D;
2,4,5-T; 2,4,5-TP)
leos e
Graxas totais
Herbicidas
fenxicidos
clorados (2,4-D)
A, B, C
Fenis totais
(ndice de fenis)
leos e
Graxas totais
A, B, C
Fenis por

(Pentaclorofenol /
Fenis totais
(ndice de fenis)
B, C
Fenis por

(Pentaclorofenol /
PVA
VA BL
(3)
VA LE (5)
VA LE (5)
PVA
VA BE
PVA (5)
(100mL)
VA LE (5)
100g
(aproximadamente)
1L
1L
1L
100g
(aproximadamente)
1L
100g
(aproximadamente)
1L
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
997
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo)
Na2S2O3 (9)
Resfriamento
(em gelo)
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
H2SO4997
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Continua...
28 dias
28 dias
7 dias
7 dias
28 dias
(7)
28 dias (6)
14 dias
7 dias
298
B, C
Pesticidas
organoclorados
/ PCB (Bifenilas
policloradas)
Pesticidas
organoclorados /
PCB
Pesticidas
organoclorados /
PCB
Pesticidas
organofosforados
B, C
HAP / Benzo(a)
Pireno
HAP
(Hidrocarbonetos
Policclicos
Aromticos) /
Benzo(a)Pireno
HAP / Benzo(a)
Pireno
Classe da
Amostra
Ensaio
VA LE (5)
PVA (5)
VA LE (5)
VA LE (5)
PVA (5)
VA LE (5)
VA LE (5)
Recipiente
(1)
1L
100g
(aproximadamente)
1L
1L
100 g
(aproximadamente)
1L
1L
Quantidade de
Amostra
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Na2S2O3 (9)
Resfriamento
(em gelo)
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Armazenamento
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Na2S2O3 (9)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Na2S2O3 (9)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
7 dias
14 dias
7 dias
7 dias
14 dias
7 dias
7 dias
Prazo de
Validade
(2)
Tabela A2. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de compostos qumicos orgnicos gua e Sedimento (continuao)
ANEXOS
299
A, B
Surfactantes
aninicos
THMFP
(potencial de
formao de THM)
Trihalometanos
(THM)
Trihalometanos
(THM)
V Vial LE
(4)
V Vial LE
(4)
VA BE
VA LE (5)
40mL
(8)
40mL
(8)
3 frascos
de 1L
250mL
1L
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Na2S2O3 (9)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Refrigerao a
4C 2C
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
14 dias
14 dias
(7)
48h
7 dias
Legenda: (1) Recipientes: VDBO = Frasco do tipo DBO (300mL), com tampa esmerilhada; BE = Boca estreita; BL = Boca larga; LE = Limpeza especial (ver
Captulo 3); P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); PVA = Frasco de vidro mbar do tipo pote; THM = Lavagem especial para uso em anlise
de THMFP (potencial de formao de THM); VA = Frasco de vidro de cor mbar; V Vial = Frasco de vidro de cor mbar, de borossilicato, com capacidade de 40mL (tipo Vial), com tampa rosquevel com septo de teflon; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Com tampa de rosca com septo
de teflon; (4) Os frascos devem estar totalmente preenchidos com a amostra, de maneira a evitar a presena de ar; (5) Com tampa de rosca com septo de
teflon ou folha de alumnio entre o frasco e a tampa; (6) Prazo mximo regulatrio segundo o Standard Methods, 21 ed., 2005; (7) Analisar o mais breve
possvel; (8) Coletar 2 (dois) frascos; (9) 50mg de Na2S2O3 para 1L de amostra e 3mg em 60mL para anlises deTHMFP.
B, C
Pesticidas
organofosforados
300
VA (boca
larga)
VA
VA
VA
Recipiente
(1)
1L
1L
1L
1L
Quantidade
de Amostra
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Lugol (ideal) Formol

ou Transeau
Formol/lugol
ou Transeau
Preservao (2)
Refrigerar (4C a 8 C) e
manter protegido da luz
48h
24h5
1 ms a 1 ano
dependendo da
preservao.
Armazenar em
temperatura ambiente,
protegido da luz
Refrigerar (4C a 8 C) e
manter protegido da luz
1 ms a 1 ano
dependendo da
preservao.
Prazo de Validade (3)
Armazenar em
temperatura ambiente
Armazenamento
Legenda: (1) Recipiente: VA = Frasco de vidro de cor mbar; (2) A preservao qumica necessria adicionada no recipiente no momento de sua
preparao (ver captulo 3); (3) A partir do momento da coleta das amostras; (4) Enzyme linked immuno assay; (5) A amostra pode ser mantida a -20oC por
tempo no definido na literatura, nesse caso somente as microcistinas totais sero determinadas, devido a ruptura das clulas; (6) Cromatografia lquida
de alta eficincia acoplada a espectrometria de massas.
A, B
Cianotoxinas
(LC-MS/MS)(6)
Cianobactrias
(quantitativa)
A, B
Cianobactrias
(qualitativa)
Microcistinas
(ELISA)(4)
Classe da
Amostra
Ensaio
Tabela A3. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de cianobactrias e cianotoxina
ANEXOS
301
10 dias (semi-esttico)/
Hyalella azteca
Crnico (semi-esttico)/
Ceriodaphnia dbia
Agudo (semi-esttico)/
Danio rerio ou
Pimephales promelas
Agudo (esttico)/
Danio rerio ou
Pimephales promelas
Agudo (esttico)/
Daphnia similis
Tipo de ensaio/
Organismo-teste
P
P
P
PP
(700mL)
Recipiente
(1)
Classe da
amostra
2Kg (3)
2L (3)
1L (3)
15L (3)
30L (3)
5L
10L (3)
2L (3)
1L (3)
Quantidade
de
amostra
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
gua Doce
Preservao
Refrigerao < 10C, sem congelamento
Congelamento a < -10C at 48h aps a coleta
Continua...
60 dias
60 dias
48h
12h

60 dias
48h
12h

60 dias
48h
12h
60 dias
48h
12h
Prazo de
validade
(2)
Armazenamento
Tabela A4. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos gua e Sedimento
302
10 dias (esttico)/
Leptocheirus plumulosus
PP (700mL)
PP (700mL)
2Kg (3)
2Kg (3)
2L (3)
1L (3)
2L (3)
1L (3)
Preservao
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
gua Marinha
Quantidade
de
amostra
Armazenamento
60 dias
60 dias
60 dias
48h
12h
60 dias
48h
12h
Prazo de
validade
(2)
Legenda: (1) Recipientes: P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte), do tipo pote; (2) A
partir do momento da coleta das amostras; (3) Os frascos devem ser totalmente preenchidos de maneira a evitar a presena de ar.
Recipiente
(1)
Classe da
amostra
Crnico (esttico)/
Lytechinus variegatus
Crnico (esttico)/
Lytechinus variegatus
Agudo (esttico) /
Mysidopsis juniae
Tipo de ensaio/
Organismo-teste
(continuao)
Tabela A4. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos gua e Sedimento
ANEXOS
303
A, B, C
Toxicidade aguda /

Toxicidade aguda /

PP
(500mL)
(3)
P PIP
(3)
Recipiente
(1)
500g
(aproximadamente)
30mL
Quantidade de
Amostra
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
Refrigerao de
2C a 5C
60 dias
60 dias
48h
Refrigerao de
2C a 5C
Congelamento a
-15C a -25C
Prazo de
Validade (2)
Armazenamento
Legenda: (1) Recipientes: P PIP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte), com sistema de fechamento com trava e lacre; PP = Frasco plstico
descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Os frascos devem estar totalmente preenchidos com a
amostra, de maneira a evitar a presena de ar.
Classe da Amostra
Ensaio / Organismo
Tabela A5. Armazenamento e preservao de amostras para testes de toxicidade aguda com bactrias luminescentes Vibrio
(Microtox) gua e Sedimento
304
A, B, C
A, B
Mutagenicidade
Mutagenicidade
Mutagenicidade
PP
(500mL)
(3)
VA LE
(4L)
>100g
(aproximadamente)
Blue Rayon (4)
Quantidade de
Amostra
Recipiente
(1)
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
28 dias
7 dias
Refrigerao entre
2C e 8C
Refrigerao entre
2C e 8C
14 dias
Prazo de
Validade
(2)
Refrigerao entre
2C e 8C
Armazenamento
Legenda: (1) Recipientes: LE = Limpeza especial (ver Captulo 3); PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; VA = Frasco de vidro
de cor mbar; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) 4L a 20L para gua bruta, 50L a 100L para gua tratada e 1L a 5L para gua residuria
(efluentes lquidos/ efluentes domsticos ou mistura de ambos); (4) Amostragem in situ.
Classe da
Amostra
Ensaio
Tabela A6. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de mutagenicidade (Salmonella/microssoma) gua e Sedimento
ANEXOS
305
Fungos bolores
e leveduras
Indicadores
virais
(6)
Indicadores
bacterianos
(5)
Ensaio
PP,SP LE
P, V, SP LE
PP, SP LE
P, V, SP LE
A, B, C
A, B, C
PP, SP LE
P, V, SP LE
P, V, SP LE
P, V, SP LE
A, B (gua de
consumo
humano)
Recipiente
(1)
Classe da
Amostra
200g
(aproximadamente)
100mL
200g
(aproximadamente)
100mL
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Refrigerao entre 2
C e 8C e proteger
da luz. No congelar
Refrigerao entre 2
C e 8C e proteger
da luz. No congelar
Continua...
24h
48h
24h
8h (R)
24h (AC)
30h (R)
24h (AC)
Prazo de
Validade
(4)
200g
(aproximadamente)
Refrigerao entre 2
C e 8C e proteger
da luz. No congelar
Armazenamento
24h (R, AC)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
(3)
100mL
100mL
100mL
Quantidade de
Amostra
(2)
Tabela A7. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios microbiolgicos - gua e Sedimento
306
100mL
P, V, SP LE
(11)
PP, SP LE
A, B, C
200g
(aproximadamente)
200g
(8)
PP, SP, LE
1 a 1000L
(8) (9)
Quantidade de
Amostra
(2)
P, V, SP LE
Recipiente
(1)
A, B, C
Classe da
Amostra
Resfriamento
(em gelo)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
(3)
Refrigerao entre 2
C e 8C e proteger
da luz. No congelar
Refrigerao entre 2
C e 8C e proteger
da luz. No congelar
Armazenamento
24h
24h
(10)
Prazo de
Validade
(4)
Legenda: (1) Recipiente: LE = Limpeza e preparo especial (ver Captulo 3); P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); PP = Frasco plstico
descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; V = Frasco de vidro neutro; SP = sacos plsticos estreis; (2) Coletar volumes (ou massas) suficientes de
amostra para as anlises a serem realizadas; (3) A preservao qumica necessria para as amostras das classes A, B e C adicionada no recipiente no
momento de sua preparao (ver captulo 3); (4) A partir do momento da coleta das amostras (R = prazo regulatrio, AC = anlise para controle); (5) Coliformes totais, Coliformes termotolerantes, E.coli, Enterococos, Clostridium perfringens e Pseudomonas aeruginosa; bactrias heterotrficas - somente para
gua de consumo humano; (6) Bacterifagos somticos e bacterifagos F-especficos; (7) Em amostras de gua de classe B e C, pode-se realizar o ensaio
de bactrias patognicas com mecha (tcnica de Moore), em meio de transporte Cary e Blair (ver captulo 3), sendo o prazo de validade de 96 horas; (8)
Coletar volumes (ou massas) compatveis com a contaminao da amostra, ou seja, quanto melhor a qualidade da matriz, maiores devem ser os volumes
ou massas coletados; (9) Volumes elevados devem ser concentrados em campo; (10) Para Giardia sp. e Cryptosporidium sp. o prazo de validade de 72
horas; (11) Para os microrganismos anaerbios estritos os frascos devem estar totalmente preenchidos com a amostra, de maneira a evitar a presena de
ar (anaerobiose requerida)
Bactrias
dos ciclos
biogeoqumicos
Microrganismos
patognicos
(bactrias, vrus,
protozorios e
helmintos) (7)
Ensaio
Tabela A7. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios microbiolgicos - gua e Sedimento (continuao)
ANEXOS
307
wwa e
! a
(Filtrada no
laboratrio)
wwa e
! a
(Filtrada em
campo)
VA BL
VA BL
Recipiente
(1)
1L (3)
1L (3)
Quantidade
de Amostra
Resfriamento
(em gelo) e proteger da luz

Q
Resfriamento
(em gelo) e proteger da luz
Preservao
(4)
Refrigerao entre
4C e 10C e manter
ao abrigo da luz
Armazenamento
28 dias
48h
Prazo de
Validade
(2)
Legenda: (1) Recipientes: BL = Boca larga; VA = Frasco de vidro de cor mbar; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) O frasco no deve ser
totalmente preenchido e quando solicitado as amostras devem ser coletadas em rplicas; (4) Aps a filtrao, a membrana filtrante deve ser colocada em
um envelope de papel do tipo kraft, devidamente identificado. O envelope deve ser acondicionado em frasco (ou dessecador) contendo slica gel, sendo o
frasco envolvido em papel alumnio, para proteger da luz. O frasco deve ser enviado ao laboratrio sob refrigerao e protegido da luz no prazo de 24 horas. Na impossibilidade de cumprimento deste prazo, o frasco contendo as amostras filtradas deve ser mantido no freezer e encaminhado posteriormente
sob refrigerao ao laboratrio.
Classe da
Amostra
Ensaio
#
wY@ "" """wwa^ a gua bruta
308
Classe da
Amostra
V (3), VA
VA BL
Recipiente
(1)
100mL
1L (4)
Quantidade de
Amostra
Armazenamento
Refrigerao entre 4C e
10C (5) e
manter ao abrigo da luz
Preservao
Resfriamento (em
gelo) (5) e
proteger da luz
Formol (6) ou
Lugol (7)
(8)
3 meses
24h
Prazo de
Validade
(2)
Legenda: (1) Recipientes: BL = Boca larga; V = Frasco de vidro neutro; VA = Frasco de vidro de cor mbar; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Para amostras fixadas em formol; (4) O frasco no deve ser totalmente preenchido; (5) Evitar o contato do frasco com o gelo, pois algumas cianobactrias so danificadas em temperaturas baixas como, por exemplo, as do gnero Cylindrospermopsis; (6) Formol neutralizado, at concentrao final de
5% (= formaldedo 2%); (7) Adicionar lugol at obter uma colorao de conhaque (0,3mL a 0,5mL / 100mL e em casos de florao 0,5mL a 1,0mL/100mL);
(8) As amostras preservadas com formol ou lugol devem ser acondicionadas e transportadas em caixa trmica separadas dos demais ensaios.
Fitoplncton

Fitoplncton
vivo
Ensaio
#
w]Y@ "" """ wK >?
ANEXOS
309
Classe da
Amostra
Recipiente
(1)
150mL (3)
Quantidade de
Amostra
24h
Refrigerao entre
4C e 10C e manter
ao abrigo da luz
Manter ao abrigo
da luz
Resfriamento e
proteger da luz
Formol (4) ou
Lugol (5)
Indeterminado
Prazo de
Validade
(2)
Armazenamento
Preservao
Classe da
Amostra
(250 mL)
P, V
Recipiente
(1)
100L
Quantidade
de Amostra
Formol ou Etanol 70
a 95 GL (3) (4)
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
Manter ao abrigo
da luz (5)
Refrigerao entre
4C e 10C
Armazenamento
Indeterminado
24h
Prazo de
Validade
(2)
Legenda: (1) Recipientes: P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); V = Frasco de vidro neutro; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Em formol neutralizado e diludo a 10%; (4) Para o zooplncton de gua doce, adicionar cerca de 100 mL de gua mineral gasosa, esperar 15 minutos e fixar com o formol neutralizado, com sacarose (concentrao final 10%)); (5) As amostras preservadas devem ser acondicionadas e transportadas
em caixa trmica, separadas dos demais ensaios.
Zooplncton

Zooplncton
vivo
Ensaio
Tabela A11. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de zooplncton
Legenda: (1) Recipiente: V = Frasco de vidro neutro; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) O frasco no deve ser totalmente preenchido;
(4) Concentrao final do formol neutralizado a 4% ou 3mL a 5mL de Lugol para 1 L de amostra; (5) As amostras preservadas com formol ou lugol devem
ser acondicionadas e transportadas em caixa trmica separadas dos demais ensaios.
^|
Perifton vivo
Ensaio
Tabela A10. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de perifton
310
"
Bioacumulao
SP
Recipiente
(1)
300g por frao a

ser analisada
Quantidade
de Amostra
Manter ao abrigo
da luz
Refrigerao entre
4C e 10C (2)
Resfriamento
em gelo;
Manter ao abrigo
da luz
Armazenamento
Preservao
Amostras secas e
maceradas: 3 meses
Amostras frescas:
7 dias
Prazo de
Validade
(2)
Legenda: (1) Recipiente: SP Sacos plsticos reforados descartveis (de polmero inerte); (2) A partir do momento da coleta das amostras.
Classe da
Amostra
Ensaio
#
w\Y@ "" """ "
ANEXOS
311
Classe da
Amostra
D, E
D, E
D, E
Ensaio
Bentos de gua
doce (pegador
ou substrato
w
Bentos de
gua doce
(delimitador ou
rede manual)
Bentos marinho:
Costes
rochosos
V, PP
PP
SP (4)
Recipiente
(1) (2)
Varivel (6)
(5)
(5)
Quantidade
de Amostra
Formol
(8) (9)
Formol (7) (9)

ou lcool 70C
Manter ao abrigo
da luz
Manter ao abrigo
da luz
Manter ao abrigo
da luz
Refrigerao entre
4C e 10C e manter
ao abrigo da luz
Resfriamento
(em gelo)
Manter ao abrigo
da luz
Formol (7) (9)
Armazenamento
Preservao
Tabela A13. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios com bentos
Continua...
Indeterminado
Indeterminado
Aps a lavagem e
preservao (7) (9):
Indeterminado
At a lavagem: 48 h
Aps a lavagem e
preservao (7) (9):
Indeterminado
At a lavagem: 24 h.
Prazo de
Validade
(3)
312
SP (4), V,
PP
SP (4), V,
PP (500 mL)
Recipiente
(1) (2)
Volume de 1
pegada ou 1
draga
Volume de 1
delimitador
para cada
nvel
Quantidade
de Amostra
Formol
(8) (9)
Resfriamento
(em gelo)
Manter ao abrigo
da luz
Formol
(8) (9)
Manter ao abrigo
da luz
Resfriamento
(em gelo)
Preservao
10C e manter ao abrigo
da luz
10C
Armazenamento
Indeterminado
At lavagem: 24 h.
Aps lavagem e
preservao (8) (9):
Indeterminado
Indeterminado
At a lavagem:
24 h.
Aps a lavagem e
preservao (8) (9):
Indeterminado
Prazo de
Validade
(3)
Legenda: (1) Recipientes: PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; SP - Sacos plsticos reforados descartveis (de polmero
inerte); V = Frasco de vidro neutro; (2) As amostras no lavadas em campo devem ser transferidas diretamente para dois sacos plsticos reforados, um
dentro do outro, e as bocas devem ser firmemente fechadas, de modo independente; para acondicionar as amostras lavadas em campo, os recipientes
mais apropriados so os recipientes de polietileno, tipo pote; para acondicionar os organismos retidos nas peneiras e triados, utilizar recipientes de vidro
com capacidades inferiores e variveis (10mL a 70 mL); (3) A partir do momento da coleta das amostras; (4) Manter o saco plstico em balde ou caixa at
o momento da lavagem da amostra; (5) Volume de 1 pegada ou 1 delimitador ou 1 substrato ou 1 perodo de passagem da rede; (6) Depende do nmero
de nveis do transecto e da necessidade de confirmao de identificaes; (7) Formol neutralizado, at a concentrao final de 5 a 10%; (8) Formol neutralizado, at a concentrao final de 10%; (9) As amostras preservadas com formol ou lugol devem ser acondicionadas e transportadas em caixa trmica
separadas dos demais ensaios.
D, E
D, E
Bentos marinho:
Praia
Bentos marinho:
Infralitoral
Classe da
Amostra
Ensaio
Tabela A13. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios com bentos (continuao)
ANEXOS
313
Microtubo
cnico (4)
PA (3)
500L de sangue
1mL de sangue
(aproximadamente)
10 a 20 indivduos de
cada espcie, dependendo do tamanho.
Quantidade
de Amostra
Heparina ou EDTA
Resfriamento
(em gelo)
Manter ao abrigo
da luz
Resfriamento
(em gelo)
Manter ao abrigo
da luz
Preservao
Refrigerao entre
2C e 8C (5)
Refrigerao entre
2C e 8C
Refrigerao entre
2C e 8C
24 horas
Indeterminado
Indeterminado
Indeterminado
24 horas
Refrigerao entre
4C e 10C (5)
Congelamento
Prazo de
Validade
(2)
Armazenamento
Legenda: (1) Recipientes: LE = Limpeza especial (ver Captulo 3); Microtubo cnico = Microtubo plstico descartvel (de polmero inerte), graduado,
com tampa e volume aproximado de 1,5 mL; PA = Papel alumnio para envolver as amostras de peixes; PP = Frasco plstico descartvel (de polmero
inerte), do tipo pote; SP = Saco plstico reforado descartvel (de polmero inerte) para o acondicionamento das amostras de peixes para avaliao de
comunidades nectnicas, ensaios de metais pesados, ensaios biomtricos e necroscpicos; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Somente
para ensaios orgnicos; (4) Para ensaios com sangue; (5) Em eventos de mortandade, nunca congelar os peixes, apenas resfri-los em gelo.
Cometas
Microncleos
Orgnicos
SP, PP LE
Metais
Recipiente
(1)
SP, PA (3)
Classe da
Amostra
Comunidades
Ensaio
Tabela A14. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de ncton (peixes)
ANEXO 2 GLOSSRIO
ADSORO - Aderncia de molculas sobre uma superfcie mineral
ou de partculas slidas por meios fsicos, sem comportar interao
qumica.
GUA BRUTA gua que no passou por nenhum tipo de tratamento
simplificado ou convencional (in natura), proveniente de rio, represa, lago,
poo fretico, nascente, esturio, mar etc.
GUA INDUSTRIAL gua utilizada exclusivamente em processamento
industrial, como matria-prima ou parte do sistema de produo.
GUA PLUVIAL gua proveniente da precipitao atmosfrica. O mesmo
que gua meterica e gua de chuva.
GUA RESIDURIA Despejo ou resduo lquido proveniente de atividades
domsticas (efluentes domsticos), industriais (efluentes industriais),
comerciais, agrcolas e outras, bem como a de sistemas de tratamento de
disposio de resduos slidos.
GUA SUBTERRNEA gua de subsolo que ocupa a zona saturada; num
sentido geral, toda a gua situada abaixo da superfcie do solo.
GUA TRATADA gua destinada ao consumo humano, submetida a

algum tipo de tratamento convencional (ETA - Estao de Tratamento
de gua) ou simplificado (filtrao, clorao, fluoretao etc.).
ALCTONE - O que no originrio da regio.
AMOSTRA Uma ou mais pores, com volume ou massa definida,
coletadas em corpos receptores, efluentes industriais, rede de abastecimento pblico, estaes de tratamento de gua e esgotos, rios, represas e outros, com o fim de inferir as caractersticas fsicas, qumicas,
fsico-quimicas e biolgicas do ambiente de onde foi retirada.
AMOSTRA SIMPLES/PONTUAL - Amostra coletada uma nica vez,
em um determinado instante, constituda por uma nica poro.
ANEXOS
315
AMOSTRA COMPOSTA - Amostra que pode ser coletada por: (a)

amostragens em funo de tempo (temporal); (b) amostragens em funo da vazo; (c) amostragens em funo da profundidade do local a
ser amostrado; (d) amostragens em funo da margem ou distncia
entre um ponto de amostragem e outro (espacial). Quando o objetivo
de um programa avaliar concentraes mdias de uma dada varivel
pode-se, em alguns casos, reduzir o nmero das amostras necessrias
ao ensaio, pela obteno de amostra composta, formada pela mistura
de alquotas individuais apropriadas. Aps a composio das alquotas
tem-se como produto final uma nica amostra.
AMOSTRAGEM Atividade que consiste em retirar uma frao representativa (amostra) de uma regio (gua, solo, efluentes, entre outros)
para fins de ensaio ou medio.
AMOSTRAGEM EM REPLICATA - Procedimento no qual duas ou mais
amostras so tomadas no mesmo ponto, de modo independente.
AMOSTRAGEM PROPORCIONAL VAZO Tcnica destinada
obteno de uma amostra, na qual a frequncia da coleta ou o volume
da amostra diretamente proporcional vazo da gua ou do efluente
bruto.
AQUFERO Toda formao geolgica capaz de armazenar e transmitir gua em quantidades apreciveis.
ATERRO SANITRIO Mtodo de disposio final de resduos slidos
(lixo) no solo, sem causar danos ao ambiente ou sade pblica.
AUTCTONE - O que originado no prprio local onde ocorre.
BALANO HDRICO DE UNIDADE INDUSTRIAL Relao entre as
entradas e sadas de gua e efluentes de cada unidade de processo industrial, indicando as fontes de abastecimento, usos internos, perdas
por evaporao ou incorporao ao processo produtivo, lavagens de
pisos e equipamentos, e efluentes gerados por qualquer fonte industrial ou domstica.
316
BIOMASSA Somatrio da massa orgnica viva existente num determinado espao, num dado instante. Pode ser expressa em peso mido
ou seco, por unidade de rea ou volume.
BIOTA Conjunto de vegetais, animais e microorganismos de uma determinada regio, provncia ou rea geogrfica.
CARGA POLUIDORA Quantidade de poluente transportado ou lanado em um corpo receptor.
COLETA DE GUA SUPERFICIAL a amostra coletada entre 0 e 30
cm da lmina dgua. Pode ser coletada com o auxlio de um balde de
ao inox, batiscafo e garrafas, ou diretamente do corpo dgua.
COLETA DE GUA EM PROFUNDIDADE - a amostra coletada em
profundidade superior a 30cm da lmina dgua, at 1m acima do fundo. Esta amostra deve ser coletada obrigatoriamente com o auxlio de
equipamento, tipo Garrafa de van Dorn.
DEPOSICIONAL Zona de baixa dinmica em ambientes de gua corrente, onde se deposita e acumula material no consolidado.
DRAGAGEM - Remoo de material slido do fundo de um ambiente
aqutico.
EFLUENTE INDUSTRIAL Resduo lquido proveniente de processos
industriais. Em geral, contm poluentes de diversas formas, como por
exemplo, de natureza qumica, que podem apresentar perigo sade
humana, prejuzos fauna e a flora, comprometimento do lazer, e outros. O mesmo que resduo lquido industrial, despejo industrial e esgoto industrial.
ESCOAMENTO SUPERFICIAL Parte da precipitao que escoa em
direo a um curso d gua pela superfcie do solo.
ESGOTO DOMSTICO Resduo lquido domstico, decorrente do
uso da gua em cozinha, sanitrio, chuveiro, lavatrio e lavanderia domstica. O mesmo que resduo lquido domstico e despejo domstico.
ANEXOS
317
ESGOTO MISTO Mistura de resduos lquidos domsticos com resduo lquido proveniente de processos industriais, ou de lavagem de
pisos e equipamentos pertencentes rea industrial.
ESPCIE-CHAVE Aquela que controla a estrutura da comunidade.
ETA Estao de Tratamento de gua.
EUTROFIZAO processo de enriquecimento por nutrientes,
principalmente nitrognio e fsforo, que tem como consequncia o
aumento da biomassa vegetal (fitoplncton e plantas aquticas). A eutrofizao das guas continentais pode ser um processo natural, porm, o descarte de efluentes domsticos e/ou industriais e lavagem de
solos agrcolas contendo muitos nutrientes (matria orgnica) acelera
o processo, causando a chamada eutrofizao artificial ou antrpica.
Ambientes enriquecidos so denominados ambientes eutrficos.
EXATIDO Grau de concordncia entre um valor medido e um valor
verdadeiro (referncia) de um mensurando.
FLORAO Multiplicao excessiva, geralmente de curta durao,
de uma ou algumas espcies fitoplanctnicas, frequentemente produzindo colorao visvel nos corpos dgua.
FLUXOGRAMA Diagrama demonstrativo dos estgios de um processo e suas interrelaes.
FRASCO DOSADOR Pissete de polietileno com ponteira dosadora
utilizada para armazenar e dosar solues preservantes adicionadas s
amostras durante as coletas em campo.
GASPILHO Escova com cerdas e ponta pincel, prpria para limpeza
de vidraria; o mesmo que escova rabo de gato.
GRANULOMETRIA - Propores relativas entre partculas de diferentes dimenses que entram na composio de solos, sedimentos e
agregados.
318
HBITAT Ambiente onde um organismo normalmente vive e que

oferece um conjunto de condies (biticas e abiticas) adequadas
sua sobrevivncia.
JUSANTE A partir de um ponto de referncia, direo para onde vo
as guas, em um curso dgua. Por exemplo, local do rio, posterior ao
lanamento do efluente, levando-se em considerao a direo para
onde correm as guas (rio abaixo).
LNTICO Ambiente aqutico em que o fluxo da massa de gua lento, como em tanques, lagos ou reservatrios.
LITORAL (zona) Pelo sistema limnolgico, regio de um lago que se
estende da linha litornea at o limite superior de ao de ondas.
LTICO Ambiente aqutico em que a massa dgua tem movimento,
como em rios e corredeiras.
MATERIAL BIOLGICO - Materiais ou lquidos de origem biolgica,
como peixes (inteiros ou suas partes), moluscos, sangue, urina, plantas,
invertebrados, ossos e alimentos.
MATERIAL ORGNICO GROSSEIRO Frao orgnica visvel, incluindo pedaos de madeira, folhas, fibras vegetais, restos de animais etc.
MENISCO superfcie curva de um lquido contido em um tubo estreito.
MITIGAO Atenuao de um impacto.
MONTANTE Posio relativa de um lugar acima de outro. Num curso
de gua, com relao corrente fluvial, a montante significa rio acima; por exemplo, um local do rio anterior ao lanamento do efluente,
levando-se em considerao a direo para onde correm as guas.
PECILOTRMICOS organismos que no tm mecanismos internos
que regulem a temperatura do seu corpo.
ANEXOS
319
PRESERVAO DE AMOSTRAS - Adoo de medidas desde o momento da coleta e transporte at seu armazenamento, com o intuito de
diminuir a reatividade ou inibir a atividade dos organismos, mantendo
o mximo possvel das caractersticas da amostra no momento da coleta. As formas de preservao de amostras so a refrigerao, congelamento e adio de produtos qumicos quando aplicvel.
PRESERVAO QUMICA - A adio de soluo ou produto qumico
com o objetivo de minimizar a reatividade dos compostos qumicos e
complexos, reduzir a volatilidade ou precipitao dos constituintes e os
efeitos da adsoro ou preservar organismos, evitando ou minimizando alteraes morfolgicas ou fisiolgicas.
PROFUNDA (zona) rea do fundo de um corpo hdrico (lago, reservatrio). Pelo sistema limnolgico, regio de um lago que se estende do
limite inferior da termoclina at sua maior profundidade.
SEDIMENTO - Material originado da decomposio de qualquer tipo
de rocha, material de origem biolgica em decomposio ou resduos
provenientes da ao humana que so transportados e depositados no
fundo dos corpos dgua.
SIZGIA (mar) Mar de grande amplitude que ocorre quando o sol e
a lua esto em sizgia, isto , quando a atrao gravitacional do sol e da
lua se somam. Ocorre por ocasio da lua cheia e da lua nova.
STAR (Sistema de Tratamento de guas Residurias) - Conjunto de
estruturas, dispositivos, instalaes, equipamentos e aparelhos diversos, de maior ou menor complexidade, utilizados para o tratamento e
disposio de guas residurias e do lodo resultante deste tratamento.
Semelhante ETE (Estaes de Tratamento de Esgotos).
SUBLITORAL (zona) Regio que tem como limite superior o nvel alcanado pela baixa-mar normal e como limite inferior aquele compatvel com a vida das fanergamas marinhas e das algas fotfilas; pelo sistema limnolgico, regio de um lago que se estende do limite inferior
da ao de ondas ao limite superior da termoclina; regio de fundo de
um lago permanentemente coberta por vegetao.
320
SUBSTRATO Aquilo que serve para fixao para organismos (planta

ou animal). . Ex. o substrato de uma alga epfita pode ser outra alga.;
TERMOCLINA camada intermediria de um lago estratificado, em
que se verifica uma brusca diferena de temperatura.
TRIPLICATA DA AMOSTRAS Trs amostras coletadas de modo sequencial e independente, em um determinado perodo de tempo ou espao, visando uma melhor representatividade do local amostrado.
VAZO Volume de fluido que passa em uma seo transversal de um
escoamento, por unidade de tempo.
ZONA FTICA (EUFTICA) Poro superior iluminada da massa
dgua, com luz suficiente para promover a fotossntese pelos vegetais
e microorganismos aquticos.
ZONAO Distribuio dos organismos em reas, camadas ou zonas distintas.
ANEXOS
321
ANEXO 3 RESOLUO ANA N 724/2011

RESOLUO N 724, DE 3 DE OUTUBRO DE 2011
Estabelece procedimentos padronizados para

a coleta e preservao de amostras de guas
superficiais para fins de monitoramento da
qualidade dos recursos hdricos, no mbito do
Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas (PNQA).
O DIRETOR-PRESIDENTE DA AGNCIA NACIONAL DE GUAS ANA, no uso da atribuio que lhe confere o art. 13, III, da Lei n. 9.984,
de 17 de julho de 2000, torna pblico que a DIRETORIA COLEGIADA,
em sua 420 Reunio Ordinria, realizada em 3 de outubro de 2011,
com fundamento no art. 12, II, da Lei n. 9.984, de 17 de julho de 2000;
considerando que a gesto sistemtica dos recursos hdricos, sem dissociao dos aspectos de quantidade e qualidade um dos instrumentos da Poltica dos Recursos Hdricos, conforme disposto no art. 3 da
Lei 9.433, de 08 de janeiro de 1997;
considerando que a ANA tem competncia para disciplinar, em carter
normativo, a implementao, a operacionalizao, o controle e a avaliao dos instrumentos da Poltica Nacional de Recursos Hdricos, conforme disposto no disposto no art. 4 da Lei n 9.984/2000;
considerando que o Conselho Nacional de Recursos Hdricos, por meio
do disposto na Resoluo n 58, de 30 de janeiro de 2006, instituiu a
necessidade de elaborao de um relatrio anual de conjuntura dos recursos hdricos, do qual o panorama de qualidade das guas do pas
elemento fundamental;
considerando o Acordo de Cooperao Tcnica ACT n 006/2010 celebrado entre a ANA e o Estado de So Paulo, por intermdio da Companhia
Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB), em 28 de maio de 2010;
ANEXOS
323
considerando o Termo de Cesso de Uso do Guia de Coleta e Preservao de Amostras de gua, Sedimento, Comunidades Aquticas
e Efluentes Lquidos, celebrado em 16 de fevereiro de 2011, tendo
como cedente a CETESB e como cessionria a ANA;
considerando os objetivos do Programa Nacional de Avaliao da
Qualidade das guas (PNQA) e seus componentes, formalizado na
278 Reunio Ordinria da Diretoria Colegiada da ANA, realizada em
14/04/2008;
considerando que a padronizao de procedimentos de coleta e preservao de amostras de guas superficiais um dos requisitos para
a obteno de dados de monitoramento representativos do meio ambiente estudado e passveis de serem analisados em conjunto com dados de outros corpos dgua do pas;
RESOLVE:
Art. 1 Estabelecer os procedimentos a serem observados pelos operadores das estaes de monitoramento de qualidade das guas superficiais, para fins de coleta e preservao de amostras, no mbito do
Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas (PNQA).
Art. 2 O monitoramento de qualidade das guas compreende o conjunto de aes e equipamentos destinados ao levantamento de dados
de parmetros indicadores de qualidade das guas superficiais.
Art. 3 Aprovar o Guia Nacional de Coleta e Preservao de Amostras
de gua, Sedimento, Comunidades Aquticas e Efluentes Lquidos,
na forma do Anexo desta Resoluo, como documento de referncia
tcnica para disciplinar os procedimentos de coleta e preservao de
amostras de guas superficiais destinadas ao monitoramento de qualidade dos recursos hdricos em todo territrio nacional.
Pargrafo nico os dados de monitoramento da qualidade das guas
para serem inseridos no Banco de Dados Hidro e comporem a rede nacional de monitoramento da qualidade das guas da ANA devero seguir, obrigatoriamente, as orientaes e procedimentos dispostos no
Anexo desta Resoluo.
324
Art. 4 Fica estabelecido o prazo de 1 (um) ano, contados a partir da

data de publicao desta Resoluo, para que as instituies ou rgos
aos quais esta norma se aplica, promovam as adequaes necessrias
a seu cumprimento.
Art. 5 de responsabilidade da Unio, dos Estados, dos Municpios e
do Distrito Federal a adoo das medidas necessrias para o fiel cumprimento do disposto nesta Resoluo.
Art. 6 Esta Resoluo entra em vigor na data de sua publicao.
VICENTE ANDREU GUILLO
Diretor-Presidente
ANEXOS
325

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GUIA NACIONAL DE COLETA

Repblica Federativa do Brasil

Superintendncia de Gesto da Rede

Auditoria Interna (AUD )

Superintendncia de Regulao (SRE)

Superintendncia de Usos Mltiplos e Eventos

Superintendncia de Fiscalizao (SFI)

Coordenao de Gesto Estratgica (CGE)

Superintendncia de Administrao, Finanas

Superintendncia de Planejamento de Recursos

GUIA NACIONAL DE COLETA E PRESERVAO DE AMOSTRAS

Agncia Nacional de guas

GUIA NACIONAL DE COLETA

Agncia Nacional de guas ANA, 2011

Companhia Ambiental do Estado de So

Companhia Ambiental do Estado de So Paulo.

Guia nacional de coleta e preservao de amostras: gua, sedimento, comunidades aquticas

GUIA NACIONAL DE COLETA E PRESERVAO DE AMOSTRAS

COMPANHIA AMBIENTAL DO ESTADO DE SO PAULO CETESB

Mara Elisa Pereira Salvador*

Nancy de Castro Stoppe*

AGNCIA NACIONAL DE GUAS - ANA

BANCO INTERAMERICANO DE DESENVOLVIMENTO - BID

Figura 2. Etapas principais para o planejamento de programas de amostragem

Figura 3. Efeito da variabilidade temporal na estimativa quantitativa da concentrao

Figura 5. Variao da qualidade de um corpo dgua considerando a distncia do ponto

Figura 7. Mecha empregada na tcnica de Moore: (AY"XB) foto da mecha

Figura 9. Balde de ao inox

Figura 12. Esquema de uma Garrafa de van Dorn

Figura 13. Garrafa de Niskin

Figura 18.  &XY

Figura 19.  

Figura 21. !$

Figura 22. !$

Figura 23. !$

Figura 24. !$

Figura 25. !$

Figura. 32. Detalhe do delimitador para estimativa da porcentagem de cobertura

Figura 34.> $

Figura 35. Detalhe do delimitador para estimativa da estrutura espacial de

Figura 37. >

Figura 49. 

Figura 50. 

Figura 56!Q &XY

Figura 57.! 

Figura 58 %Q$

Figura 60. 

Figura 61. Procedimento de preservao de amostra: (A) Adio de cido

Figura 62. Coleta de amostra em profundidade com garrafa de van Dorn

Figura 63. |

Figura 66. Acondicionamento e transporte de amostras para anlises

Figura 70.* >

Figura 71.* 

Figura 72. Florao ou Bloom de Cianobactrias no Reservatrio

Figura 76. Seleo de ramos e folhas - Material coletado na bandeja

Figura 77. $

Figura 79. Paqumetro utilizado para medida do comprimento e dimetro

Figura 80. >

Figura 83: Coleta de amostras de zooplncton com armadilha

Figura 84. Esquema de um sistema de produo e distribuio de gua. Fluxo

Figura 88. Coleta de amostras em reservatrio com balde e corda estreis:

Figura 89. Vista interna do container de uma Estao Automtica

Figura 90. Vista da Estao Automtica de Monitoramento Rasgo, localizada

Figura 91. $

Figura 7. Mecha empregada na tcnica de Moore: (AY"XB) foto da mecha

Figura 18. &XY

Figura 19.

Figura 21. !$

Figura 22. !$

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Figura 25. !$

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Figura 60.

Figura 63. |

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Tabela 2.

Tabela 4. Q% Q

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