MICROALGAS

Las microalgas son seres unicelulares capaces de asimilar el CO2 presente en el aire
empleando luz solar, agua y algunos nutrientes para producir diversos productos naturales de
alto valor agregado, protenas y aceites; por tal razn se han considerado como una fuente
potencial para la obtencin de biodiesel.

Las microalgas presentan varias ventajas sobre otros organismos vegetales terrestres como
por ejemplo:
-Se ha encontrado que para producir la misma cantidad de aceite que se obtiene a partir de
plantas oleaginosas como la palma africana, la cantidad de territorio requerido es mucho
menor.
-No requieren ser cultivadas en tierras frtiles o en zonas de cultivos tradicionales, ya que
pueden ser cultivadas en zonas desrticas o de escasa fertilidad, disminuyendo as el impacto
sobre cultivos agrcolas destinados para alimentos.
-Son capaces de fijar mayor cantidad de CO2 que los rboles y requerir menor cantidad de
agua que estos ltimos.



CHLORELLA VULGARIS
GENERALIDADES

Taxonoma de Chlorella vulgaris
Reino: Protoctista
Divisin: Chlorophyta
Clase Chlorophyceae
Orden: Chlorococcales
Familia: Oocystaceae
Gnero: Chlorella
Especie: vulgaris
Chlorella apareci en la Tierra hace aproximadamente 1.5 o 2 mil millones de aos. Es un alga
verdeunicelular de agua dulce; de forma esfrica, cerca de 2-10 micras de dimetro que es
extensamenteencontrada en lagos y pantanos por todo el mundo. El nombre Chlorella proviene
del griego Chloros,que significa verde, y del latn ella, que significa cosa pequea, y fue
descubierta y nombrada por elholands M.W. Beyerinck en 1890.

Es un gnero de algas unicelulares del filo Chlorophyta. Tiene forma esfrica, y no posee
flagelo. Chlorela contiene los pigmentos verdes fotosintetizadores clorofila a y b en su
cloroplasto. A travs de la fotosntesis se multiplica rpidamente, requiriendo slo dixido de
carbono, agua, luz solar y pequeas cantidades de minerales.
Su reproduccin se da mediante la formacin de autosporas y forman grupos irregulares o
colonias. Esta especie se encuentra en diferentes biotopos, incluso en simbiosis con ciliados,
esponjas, hidras y otros organismos.
Chlorella est siendo investigada como un nuevo recurso alimenticio (ya que una clula de
Chlorella contiene cerca de 50% de protenas, 5% de clorofila y un gran nmero de vitaminas y
carotenos) para utilizarse en las poblaciones humanas pobres de todo el mundo y para proveer
comida y oxgeno en viajes al espacio y en. Segn se ha documentado, posee beneficios
teraputicos,como la capacidad de desintoxicar al organismo de metales pesados como el Hg, el
Cd y el Pb entreotros qumicos, que son contaminantes agregados a insecticidas o plsticos.
Adems se piensa que posee la capacidad de prevenir el cncer En la


HABITAT
Esta microalga se halla en ros, lagos, humedales e incluso en suelos hmedos. Tambin se
cultiva para usos cientficos y comerciales en grandes cubas y estanques.

TECNICAS DE AISLAMIENTO


Figura ... Aislamiento y establecimiento de Cepas
Rayado en agar: consiste en colocar una gota de material microalgal en las placas con agar,
luego utilizando un asa metlica esterilizada se raya en zig-zag en forma superficial, tal como
se muestra en la figura. Finalmente las placas se sellan con Parafilm para evitar contaminacin
externa, y se mantienen durante el tiempo x en la cmara de cultivo.

Dilucin seriada: para este procedimiento se utilizan tubos de ensayo, en cuyos extremos se
coloca algodn hidrfilo cubierto por gasa. A un tubo que contena 1 mL de solucin nutritiva
estril se transfiri la colonia aislada de la placa Petri, luego los tubos se mantuvieron durante
un tiempo x en la cmara de cultivo. El tubo se agit manualmente peridicamente para su
oxigenacin. Luego de cierto tiempo por ejemplo 4 das, cuando la solucin microalgal
contenida en el tubo present una coloracin verde claro, se transfiri 0,1 mL a un nuevo tubo
con 0,9 mL de solucin nutritiva generndose una dilucin de 10 veces.







TECNICAS DE aislamiento


Tcnicas utilizadas en cada proceso biotecnolgico.
Microalga Tcnica de separacin Soporte
Dunaliella salina
Cromatografa
Columna Tierra de infusorio
Capa delgada Celulosa
Chlorella vulgaris
Columna Almidn hidrolizado
Capa delgada Dextrana T40
Porphyridium cruentum Extraccin diferencial
Bromuro de acetil
piridinium (cetabln)
.

Chlorella vulgaris
Los cultivos de Chlorella vulgaris, microalga que pertenece a la divisin Clorofita, poseen en su
composicin la presencia de clorofila, la que vara segn el gnero, pero en sentido general es el
pigmento predominante que les permite las transformaciones energticas a travs de la
fotosntesis.

Es conocido desde hace varias dcadas el poder antisptico de las clorofilas, que son empleadas
en pastas dentales y cremas desde los aos cuarenta del siglo xx.
Se realiz un estudio de la composicin pigmentaria de la biomasa de Chlorella vulgaris, y de sus
extractos alcohlicos y cetnicos, para conocer la composicin cloroflica y los posibles mtodos de
separacin.

La biomasa de Chlorella vulgaris es sometida a extracciones independientes con alcohol de 95 % y
acetona. Para la separacin de los componentes de estos extractos se utilizan tcnicas
cromatogrficas de columna y placa delgada, empleando diferentes adsorbentes: dextrana T40,
almidn hidrolizado, sacarosa y celulosa.

CONDICIONES PARA SU CONSERVACIN
Medio de cultivo
El medio de cultivo debe contener todos los elementos constituyentes de la clula como lo son el
nitrgeno (N), el fsforo (P), el hierro (Fe) y algunos metales traza (21).
El nitrgeno es necesario para la formacin de cidos nucleicos y protenas, Las fuentes ms
comunes de nitrgeno son el nitrato, nitrito, urea y amoniaco. Para la chlorella es el nitrato.
Fsforo es requerido para el crecimiento microalgal y la formacin del ADN y el ARN.
Hierro es el micronutriente ms importante, pues es vital para el funcionamiento del
metabolismo; es usado para el transporte de electrones, reduccin de nitritos y nitratos,
reduccin de sulfatos, fijacin del nitrgeno molecular y eliminacin de especies reactivas
como radicales libres y perxidos.
Micronutrientes: Para el adecuado crecimiento de las microalgas, stas requieren de los
metales trazas, entre los que se destacan manganeso, zinc, cobalto, cadmio, cobre, molibdeno
y nquel, lo cuales hacen parte de enzimas necesarias para el transporte de electrones, la
fijacin y transporte del CO2, la transcripcin del ADN, fijacin y transporte del nitrgeno
entre otras.
Temperatura
La Chlorella es un gnero de climas templados por lo que normalmente se desarrolla a
temperaturas entre 25 y 30C, algunas cepas incluso de la misma especie son capaces de crecer a
temperaturas elevadas respecto a otras, cuyas temperaturas optimas se encuentran entre 18-
25C; como es el caso de la chlorella vulgaris, a la se ha logrado cultivar con temperaturas de hasta
36C; con una temperatura optima de 32, 4C.


ASPECTOS NUTRICIONALES
Constituyentes: Chlorella se llama as porque de las excepcionalmente altas
cantidades de clorofila contenidos en ella, incluyendo la clorofila A y B. (2-
4%). Chlorella tambin contiene excepcionalmente altas cantidades de
protenas (58-60%), a la par con la protena animal gramo por gramo, aunque no
se puede considerar como una alternativa viable demasiado grande un volumen
tendra que ser ingerido para tener en cuenta las necesidades de protenas
normales. Otros constituyentes son el beta-caroteno (0,18%), todas las
vitaminas del complejo B (incluyendo B-12), vitaminas C, D y E, macrominerales
(por ejemplo, calcio, magnesio, hierro, fsforo) y oligoelementos, factor de
crecimiento de la Chlorella (CGF ), chlorellan, sulfato de dextrano, cidos grasos
(por ejemplo cido linolnico, cido palmitlinoleic, cido palmtico), cidos
nucleicos y fibra (Yance 1999, 230; Willard 1992, 84).
http://toddcaldecott.com/herbs/chlorella/
Utilizado como alimentos productores de energa en Asia durante siglos. En Japn, se utiliza
tradicionalmente como un tratamiento para las lceras duodenales, gastritis, hipertensin,
diabetes, hipoglucemia, asma y estreimiento. Ms recientemente, se ha promocionado como un
tratamiento efectivo para los niveles elevados de colesterol, un profilctico para protegerse de las
infecciones y, y el tratamiento adyuvante para el cncer. Chlorella ahora se utiliza como un
suplemento adjunto durante el tratamiento de radiacin para el cncer. Es abundante en clorofila,
una sustancia conocida para proteger el cuerpo contra la radiacin ultravioleta. A menudo se
combina con otros alimentos verdes naturales, como la espirulina, hierba de trigo, hojas de
cebada, ya veces algas.
Active compounds
Vitamins, including many B complex vitamins, (B-1, B-2, B-3, B-6, pantotheneic acid, folic acid,
biotin, PABA, inositol, B-12), vitamin A, calcium, magnesium, iron, zinc, iodine, phosphorus.
Se ha demostrado que es capaz de absorber grandes cantidades de metales, principalmente Cr 4+,
Fe 2+, Cu2+, Zn2+, Pb2+ y Hg2+. El proceso que realiza para incorporar los metales a sus clulas
consiste, a grandes rasgos, en dos etapas. La primera de ellas, denominada biosorcin, transcurre
en muy poco tiempo y es similar tanto en la pared celular como en toda la clula, es decir que
ambas estructuras introducen, en un tiempo similar, cadmio, plomo y cobre, mediante un
intercambio de iones en el que el Na, Mg y Ca resultan desplazados a favor de los metales pesados.
A continuacin el metal puede unirse a distintos grupos funcionales como aminas, alcoholes,
fosfatos, hidroxilos... Uno de los factores que contribuyen a la eficacia de este sistema es la
composicin de la pared celular, que posee una mezcla compleja de azcares, glucosamina,
protenas y cido urnico.
La segunda fase, llamada bioacumulacin requiere un perodo de tiempo mayor y a diferencia de
la primera etapa, se trata de un proceso activo en el que se piensa que interviene el metabolismo de
la clula. Por esta razn, aparecen diferencias significativas entre la cantidad de metales
acumulados por las diferentes partes de la clula que puede ser debido a las biomolculas
presentes en la membrana que pueden unirse a los metales.
RUTA METABOLICA DEL MICROORGANISMO PARA GENERAR EL PRODUCTO DESEADO

En bioqumica, una ruta metablica o va metablica es una sucesin de reacciones qumicas que conducen
de un sustrato inicial a uno o variosproductos finales, a travs de una serie de metabolitos intermediarios. Por
ejemplo, en la ruta metablica que incluye la secuencia de reacciones:

A B C D E

A es el sustrato inicial, E es el producto final, y B, C, D son los metabolitos intermediarios de la ruta
metablica.
Echemos el vistazo a las rutas metablicas que permiten a las microalgas la sntesis de cidos grasos:

Metabolismo lipdico de las microalgas
La imagen es compleja y adems est en ingls, lo s, pero vamos a ver cosas clave. El valo salmn con
cositas verdes dentro es el cloroplasto (plastid, ya sabis un poco ms de ingls je je). El cloroplasto toma el
CO2 y ste es convertido en el ciclo de Calvin (una ruta metablica compleja que aparece como un crculo) la
molcula de 3PGA, o cido 3- fosfoglicrico, de tres carbonos. El 3PGA, o bien se condensa en una molcula
de glucosa (seis carbonos), o bien se convierte en el piruvato, otra molcula de tres carbonos. Hay que
mencionar que las molculas de glucosa tambin pueden romperse para producir el piruvato. El piruvato se
convierte, en dos pasos de catlisis enzimtica con la necesaria presencia de la biotina (vitamina B7), en
malonil CoA, una molcula sobre la cual poder construir un cido graso, de lo se encargan las enzimas de
ciclo de sntesis de cidos grasos. En dicho ciclo el malonil CoA, que es una molcula de cido
mlico activada o preparada para la reaccin por acetil CoA (molcula clave en muchas rutas metablicas),
se enriquece en carbono y hidrgeno, se alarga y se convierte en lo que se denomina cido graso libre.
Despus los cidos grasos libres son trasladados al citosol, donde se condensan con las molculas de
glicerol, para formar los triacilgliceridos ( grasas ) o TAG, que son depositados en forma de cuerpos lipdicos
(TAG lypid body) en el cuerpo de la microalga, lo cual convierte al microalga en el contenedores de grasas.






http://es.wikipedia.org/wiki/Chlorella
http://astrolabio.phipages.com/storage/.instance_19324/astrolabio_vol11.2_art_04.pdf
http://www.tesis.uchile.cl/bitstream/handle/2250/111421/Memoria%20de%20T%C3%AD
tulo%20(Yasm%C3%ADn%20Hun).pdf?sequence=1
http://www.bdigital.unal.edu.co/7825/1/299883.2012.pdf
http://repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/6487/1/T-ESPE-047130.pdf