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Facultad de Farmacia

Universidad de Valparaso.







Informe de Laboratorio Bioqumica N 1:
PROPIEDADES FISICOQUMICAS DE LOS
AMINOCIDOS



Integrantes:
Ayleen Bertini
Constanza Montecinos
Nombre Profesor Coordinador:
Magdalena Corts
Nombre ayudantes:
Carolina Figueroa
Saylor Foster
Maximiliano Vicencio
Francisco
Fecha de entrega:
29 de Agosto, 2014





Introduccin
Los aminocidos son la unidad estructural bsica de las protenas, ellas estn unidas entre s
por enlaces peptdicos y su presencia en los seres vivos es indispensable para el desarrollo
de los mltiples procesos metablicos y fisiolgicos, tambin son responsables de la
formacin y reparacin de los tejidos, interviniendo en el avance corporal e intelectual.

Las protenas desempean un papel fundamental para la vida y son las biomolculas ms
verstiles y diversas. Por lo tanto es imprescindible conocer las maneras en que sus
componentes, los aminocidos pueden ser identificados, para as posteriormente crear
experimentos del tipo tecnolgico a travs de los distintos aminocidos creando nuevos
tipos de protena o estructura que puede ser utilizada para beneficio de la ciencia moderna y
humanidad en general.

Los distintos mtodos para la identificacin de estos aminocidos son de la Ninhidrina lel
cual sirve para todos los aminocidos identificando si estos presentan un grupo amino libre,
la reaccin de Adamkiewics que se basa con la capacidad de las protenas de reaccionar con
aldehdos, la reaccin Xantoproteica que identifica aminocidos aromticos activados y por
ltimo la reaccin de los grupos SH o de los aminocidos azufrados donde se logra
identificar los aminocidos azufrados y las protenas que los contienen.






























.-OBJETIVOS

Generales:
Identificar las muestras problemas mediante las propiedades fsicas qumicas
de las molculas.
Especficos
Aprender sobre las cuatro reacciones a utilizar y tener claridad en sus
caractersticas y diferencias.
Saber ms sobre las protenas a analizar y darles un sentido en la Nutricin.
Identificar la muestra de prolina, triptfano y glucosa mediante las
reacciones qumicas
Comprender los resultados obtenidos en las muestras de gelatina y clara de
huevo en las reacciones qumicas, basados en su composicin de
biomolculas.



























.-PARTE EXPERIMENTAL:

Experimento N 1: Reaccin Xantoproteica

Materiales utilizados: Reactivos:
-Propipeta -Agua destilada
-Piseta de agua destilada -HNO
3

-Gradilla -Muestras
-Tubos de ensayo
-Pipeta
-Vaso precipitado
-Guantes
-Bao termorregulable






























Reaccin Xantoproteica
Juntar todos los materiales ms las
muestras (clara de huevo, gelatina,
prolina, triptfano, glucosa.)

Numerar los 6 tubos y preparar de
acuerdo a la tabla dada en la gua

Agregar 3 gotas de HNO
3
a cada
tubo

Calentar todos los tubos por un
minuto en el bao termorregulable

Agregar amoniaco a cada tubo para
neutralizar y esperar resultados

Resultado
positivo

Resultado
negativo

Coloracin
Amarilla
Clara de huevo,
triptfano,
gelatina.
Gelatina, prolina,
glucosa y agua.




Experimento N 2: Reaccin De Ninhidrina

Materiales utilizados: Reactivos:
-Capilares de vidrio -Muestras
-Papel filtro -Ninhidrina al 2% en acetona
-Toalla nova -Agua destilada
-Estufa de secado
-Guantes





































Reaccin Ninhidrina





Juntar todos los materiales ms las
muestras (clara de huevo, gelatina,
prolina, triptfano, glucosa.)

Colocar papel filtro sobre toalla de
papel y marcar x separadas entre
s, con lpiz grafito.
Identificar cada x utilizando
siglas: A (agua destilada), M1-M5
(muestras 1-5).



Sembrar sobre cada x la muestra
correspondiente utilizando un
capilar e ir secando.
Cuando el papel se seque,
pulverizar el papel filtro con
Ninhidrina al 2% en acetona (bajo
campana).

Secar el papel en la estufa a 37C y
esperar resultados.

Resultado
positivo

Resultado
negativo

Coloracin
Amarilla
Coloracin
Violeta
Prolina
Clara de huevo,
gelatina, glucosa y
agua.
Triptfano




Experimento N 3: Reaccin de Adamkiewics

Materiales utilizados: Reactivos:
-Micropipeta -Agua destilada
-Piseta de agua destilada -Formaldehido
-Gradilla -Muestras
-Tubos de ensayo -cido sulfrico
-Vaso precipitado
-Guantes




































Reaccin Adamkiewics




Juntar todos los materiales ms las
muestras (clara de huevo, gelatina,
prolina, triptfano, glucosa.)

Numerar los 6 tubos y preparar de
acuerdo a la tabla dada en la gua

Adicionar 3 gotas de formaldehido
a cada tubo
Agitar cuidadosamente

Aadir 1 mL de cido sulfrico a
cada tubo muy lentamente por las
paredes del tubo.

Resultado
positivo

Resultado
negativo

Coloracin
Violeta
Triptfano, clara
de huevo.
Gelatina, prolina,
glucosa y agua.




Experimento N 4: Reaccin de Aminocidos Azufrados

Materiales utilizados: Reactivos:
-Micropipeta -Agua destilada
-Piseta de agua destilada -Hidrxido de sodio 1 M
-Gradilla -Muestras
-Tubos de ensayo -Acetato de plomo
-Vaso precipitado
-Guantes
-Pipeta
-Propipeta
-Bao termorregulable

































Reaccin de aminocidos
azufrados





Juntar todos los materiales ms las
muestras (clara de huevo, gelatina,
prolina, triptfano, glucosa.)

Numerar los 6 tubos y preparar de
acuerdo a la tabla dada en la gua

Adicionar 2 mL de hidrxido de
sodio 1 M a cada uno de los tubos.

Aadir 0,5 mL de acetato de plomo
a cada uno de los tubos.

Calentar a bao mara por 5
minutos todos los tubos

Sacar tubos y esperar que enfren

Resultado
positivo

Resultado
negativo

Clara de huevo. Prolina, triptfano,
glucosa y agua.
Agitar.





b. Observaciones por muestra problema (MP)

Triptfano: Correspondi a nuestra muestra M22, pues esta dio positiva en la reaccin
Xantoproteica, de la Ninhidrina y posteriormente en la de Adamkiewics sabiendo que esta
muestra es propia del aminocido Triptfano pudimos darle su identidad.

Prolina: Correspondi a nuestra muestra M3, ya que esta dio positiva en la reaccin de la
Ninhidrina, porque tiene un grupo amino, siendo la excepcin a esta reaccin, tras las
etapas de este mtodo dio color amarillo, por lo cual pudimos darle su identidad.

Glucosa: Correspondi a nuestra muestra M33, porque esta muestra junto con la de agua,
fue la nica que no reaccion con ningn mtodo utilizado. Como sabamos con
anterioridad que las muestras seran: clara de huevo, gelatina, prolina, triptfano y glucosa,
por descarte la glucosa corresponda a esta muestra, ya que es un monosacrido, o sea un
azcar perteneciente al grupo de carbohidratos los cuales no estn compuestos por
aminocidos.

Clara de huevo: Dio resultado positivo en la reaccin Xantoproteica por la presencia de
triptfano, un aminocido aromtico activado que reacciona positivamente tras este
mtodo, y posteriormente en la reaccin de Adamkiewics ya que en la literatura cientfica
se dice que la muestra dar positiva a este mtodo si contiene aunque sea una pequea
porcin de triptfano.

Gelatina: Dio resultado positivo en la muestra Xantoproteica con coloracin amarilla, ya
que entre sus componentes se encuentran los tres aminocidos aromticos estudiados.


















.-RESULTADOS
Resultado
obtenido
Resultado
obtenido
Resultado
obtenido
Resultado
obtenido
Resultado
obtenido
Color que determine resultado
positivo para cada reaccin
Clara de
huevo
Gelatina M3 M22 M33
Xantoproteica +
(amarillo)
+++
(amarillo)
- +++
(amarillo)
-
Ninhidrina - - +++
(amarillo)
+
(violeta)
-
Adamkiewics +
(morado)
- - +++
(morado)
-
Aminocidos Azufrados +
(gris leve)
- - - -
Identifique en base a sus
resultados
Clara de
huevo
( Protena )
Gelatina
(Protena de
colgeno)
Prolina Triptfano Glucosa

































.-DISCUSIN

a) Reaccin Xantoproteica

En la reaccin Xantoproteica los anillos fenilo que contengan un grupo activante pueden
ser nitrados produciendo un compuesto amarillo.
1


Protena extrada del colgeno en Gelatina:

Caractersticas: Formadas por los siguientes aminocidos: cido asprtico, cido
glutmico, alanina, arginina, fenilalanina, glicina, hidroxiprolina, histidina, isoleucina,
leucina, lisina, metionina, prolina, serina, tirosina, treonina, triptofano y valina. Los cuales
forman las protenas que nuestro organismo usa para crear nuevar protenas.
Funcin en el organismo: Sirven para construir tejidos, regular fluidos del cuerpo y regular
la masa muscular.
Entre los aminocidos nombrados anteriormente que formaran la estructura de la gelatina
analizada, podemos nombrar a la tirosina, al triptfano y a la fenilalalina, los cuales son
aminocidos aromticos ( en su estructura tienen un benceno ), en el experimento de la
Reaccin Xantoprotica la gelatina permaneca incolora en el tubo de ensayo, luego de el
paso n4 que consista en neutralizar la muestra con tres gotas de NH
3
la muestra se torna
de color amarillo por lo tanto podemos corroborar que la gelatina tiene aminocidos
aromticos activados ya que La produccin de un producto coloreado Amarillo al aadir
cido ntrico es una prueba para la presencia de tirosina o triptfano en una protena.
2

(Alices, 2009).


La clara de Huevo:

Caractersticas: cido asprtico, acido glutmico, alanina, arginina, cistina,
fenilalalina,glicina, hidroxiprolina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, prolina,
serina, tirosina, treonina, triptfano y valina son los aminocidos que se combinan para
formar las protenas de la clara del huevo
Funcin en el organismo: Las protenas de la clara de huevo son usadas por nuestro
organismo para formar nuestros msculos y tambin son necesarias para mantener nuestra
masa muscular.
2
En este caso tambin los aminocidos aromticos son nombrados, y la reaccin del
experimento para esta muestra fue que luego del paso 4 pas a ser ms solida que antes
esta, y un color amarillo transparentoso ocupaba gran parte. A simple vista se puede creer
que no hubo reaccin pero sin embargo al analizar las muestras junto con la literatura
cientfica tambin logramos refutar que la clara de huevo tiene aminocidos aromticos
activados.




Triptfano (M22):

Es un aminocido aromtico neutro, sirve para la prevencin de algunas enfermedades
cardiacas, inhibe el dolor y el insomnio, aumenta la liberacin de las hormonas de
crecimiento entre otras funciones en nuestro organismo.
Se observa una coloracin positiva para el triptfano y no para el aminocido prolina, esto
se debe a que el triptfano posee cadenas laterales aromticas y en cambio la prolina
presenta una cadena lateral aliftica. Adems se observa una coloracin anaranjada en el
triptfano ya que la adicin de base fuerte hace que el color se torne ms oscuro en este
caso la adiccin de NaOH.
1

La muestra luego de terminar el experimento de la Reaccin Xantoproteica qued con un
color amarillo oscuro, casi marrn, lo que corrobora que definitivamente la muestra,
entonces desconocida, se trataba de un aminocido activado. Sin embargo hasta el
momento an no sabamos cul, para identificarlo fue necesario continuar con el prctico.
Las dems muestras: Agua, M33 y M3 continuaron incoloras luego del experimento, por lo
tanto dieron negativo a la Reaccin Xantoproteica.

Resultados negativos:

El agua y la glucosa no son protenas, por lo tanto no poseen aminocidos de ningn tipo.
Lo que hace imposible que diera positivo a la prueba de identificacin de aminocidos
aromticos activados Xantoproteica. Y en el caso de la prolina, al ser una cadena aliftica,
no es un aminocido aromtico, por esto tambin dio negativo a la prueba.


b) Reaccin de la Ninhidrina

Luego del experimento n 2 de la Reaccin de la Ninhidrina, se logr identificar de color
violeta azulado la muestra M22 el triptfano, demostrando as que tiene un grupo de
aminocidos libres.
Tambin la muestra M3 hasta ahora desconocida result de color amarillo, como sabemos,
luego del estudio cientfico la prolina da coloracin amarilla luego de una Reaccin de
Ninhidrina, este aminocido tiene la capacidad de separarse de otros aminocidos neutros
por su alta solubilidad en disolventes hidroxilados, el color de la prolina ( casi incoloro ) se
mezcla con los pigmentos azulados de la Ninhidrina dando un color amarillo ms notorio e
intenso, como el que result en el papel filtro, en la marca de la muestra M3.
3
La clara de huevo result incolora tras la prueba de la Ninhidrina, casi transparentando el
papel filtro, la causa de esto se desconoce.

Resultados negativos:

Las dems muestras tambin resultaron incoloras, lo que quiere decir es que el agua, la
clara de huevo, la gelatina y la glucosa resultaron negativas para el experimento de la



Reaccin de la Ninhidrina, por lo tanto ni la gelatina ni el huevo tienen aminocidos con un
grupo amino libre.

c) Reaccin de Adamkiewics

Esta reaccin es propia del triptfano y las protenas que contengan este aminocido
tambin darn positivo a esta reaccin.
Tras realizar el experimento n3 la muestra M22 desconocida hasta ahora cambi
abruptamente su coloracin antes incolora, a un color parecido al marrn oscuro, un
derivado de violeta. Por lo tanto la muestra M22 corresponde al aminocido aromtico
Triptfano por el grupo ndol que contiene y su reaccin con el aldehdo, en este caso el
formaldehido.
En el caso de la clara de huevo, la muestra de esta se solidific en la parte superior,
mientras que la parte inferior segua lquida pero con una mancha marrn violeta en su
interior. De lo cual se puede inferir que la muestra dio atisbo de tener triptfano, sin
embargo no dio positivo en un 100%, lo cual nos lleva a preguntarnos si quizs es por la
consistencia de la clara de huevo o por algn otro factor.

Resultados negativos:

El agua y la glucosa al no ser protenas no tienen posibilidad de presentar un grupo ndol
como el triptfano, por lo tanto dieron negativo a esta reaccin.
En el caso de la gelatina, entre sus componentes tambin hay triptfano sin embargo en la
prueba nos dio resultado negativo, quizs el porcentaje de este aminocido es muy nfimo
como para llegar a ser evaluado. Y el aminocido prolina no posee ndol.

d) Reaccin de los grupos SH

Puesto que la prueba tena como funcin identificar los aminocidos azufrados como
cistena, cistina o metionina, las pruebas dieron negativo por no haber ninguno de estos
aminocidos en el anlisis.

Sin embargo en la clara de huevo, aparte de ponerse de color blanco tras el experimento,
mostraba atisbo de color gris en su composicin, tras la literatura cientfica, se puede
demostrar que entre los muchos aminocidos que componen esta sustancia, est la cistina la
cual es producto de la oxidacin de dos molculas de cisteina
4
, por lo cual la clara de huevo
si resulto positiva para esta Reaccin de Identificacin de los grupos SH o aminocidos
azufrados.












.- CONCLUSIONES

En cuanto a los objetivos propuestos a travs de los mtodos de identificacin de
aminocidos logramos identificar las muestras de agua, glucosa, triptfano y prolina gracias
a los resultados de cada muestra y a la recoleccin de datos.
Respecto a la clara de huevo y a la gelatina logramos identificar su gran variedad de
aminocidos gracias al estudio cientfico, el huevo es conocido como el alimento ms
completo si de protena y propiedades se trata, por esto en el sentido nutricional es tan
indispensable conocer sus componentes para as aplicar sus propiedades tecnolgicas en un
futuro cercano. Respecto a las reacciones de Adamkiewics y de la Ninhidrina nos sorprende
la exactitud para identificar los aminocidos de triptfano y prolina respectivamente.
Vindolo desde un punto de vista como nutricionista el prctico realizado es muy
importante para poder reconocer los aminocidos de cualquier protena a estudiar, con
materiales al alcance de cualquier laboratorio cientfico podemos llegar a conocer la
eficacia de los alimentos, sabiendo cules son sus componentes, a partir de esto conocer a
qu tipo de protena pertenecen y conocer sus funciones especficas en la fisiologa del ser
humano.
Las capacidades adquiridas pueden ser utilizadas para determinar la bioactividad de un
alimento en especfico basndonos en sus aminocidos, para as tener nocin de lo que
digerimos y de su impacto en nuestro propio cuerpo, nuestros futuros pacientes y seres
queridos.























Bibliografa:

1:
Hernndez, . G. ao 2010. Tratado de nutricin (Segunda ed., Vol. II). Madrid:
Editorial mdica Panamericana S.A.

2:
Bioqumica, H. A., ao 2009. Universidad Interamericana de Puerto Rico, Villanueva.

3
: Introduccin a la ciencia de los alimentos, Volumen 1, Owen R. Fennema.

4
: http://es.wikipedia.org/wiki/Enlace_disulfuro

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