FECHA DE REALIZACION: FECHA DE ENTREGA: 2014/04/12 2014/04/08
2 INTRODUCCION El laboratorio de microbiologa representa, a diferencia de otras ramas de la biologa prerrequisito imprescindible para su desarrollo como ciencia, inventos como: el microscopio, los medios de cultivos,tinciones, pruebas y recuentos entre otros han sido pilares en el desarrollo de la microbiologa, es por esta razn que los estudiantes deben comprender los procedimientos bsicos en la tcnica de manejo de los microorganismos para lograr un buen aprendizaje de la microbiologa. Es importante que el estudiante al final de la prctica comprenda el uso de los instrumentos y equipos que se usan y la importancia de tener una manipulacin adecuada del material. El concepto de asepsia y de trabajo ordenado ayuda al desarrollo de la prctica Cita bibliografa: Manual para la introduccin al laboratorio de microbiologa, Manuel Ricaurte Toro, Primera Ed, Noviembre 2005 Manual de tcnicas bsicas para un laboratorio de salud, OPS, Ed panamericana sur,2009 3 OBJETIVOS
3.1 GENERAL Conocer los instrumentos bsicos usados en el laboratorio de microbiologa as como relacionarse con estos para darles un buen uso y tener las precauciones necesarias 3.2 ESPECIFICOS
Identificar materiales y equipos de uso frecuente en el laboratorio. Conocer el uso y funcin de materiales y equipos del laboratorio.
4 METODOS El estudiante se relaciona con cada uno de los equipos y materiales que va utilizar, entiende su uso y precauciones para la elaboracin de la prctica.
5 MATERIALES Y REACTIVOS Mecheros Cajas Petri Microscopios Asas microbiolgicas Tubos tapa rosca algodn de rama Pipetas Autoclave Incubadora Aceite de inmersin Placas preparadas Cmara de flujo laminar Bao mara
6 MARCO TEORICO Los equipos de laboratorio de microbiologa en general se utilizan tanto para realizar una manipulacin o experiencia o para llevar a cabo medidas y recoger datos. El trmino material hace referencia a aquello que pertenece o que es relativo a la materia. Sin embargo, la nocin vara de acuerdo al contexto. En este sentido, los materiales tambin pueden ser elementos agrupados en un conjunto que puede utilizarse con algn fin especfico. Estos elementos pueden ser tanto reales como virtuales o abstractos. El material de laboratorio permite nombrar a la amplia variedad de instrumentos o herramientas que se utilizan, como el concepto lo indica, en un laboratorio. Este material puede estar fabricado con vidrio, plstico, metal, porcelana, madera, goma u otros componentes. El microscopio, mecheros, cajas Petri, pipetas, incubadora, autoclave, los frascos y los refrigerantes, junto con otros materiales son otros de los elementos que forman el conjunto de materiales de laboratorio de microbiologa. La mayora de estos materiales estn constituidos por vidrio, loque permite la visualizacin del lquido que se desea medir. En algunos casos, el material volumtrico est fabricado con plstico transparente, que resultams econmico y evita la reaccin entre el lquido y el vidrio que surge conalgunos componentes qumicos. Los materiales en los que se combinen las sustancias estn fabricados convidrio ptico, vidrio de gena o vidrio duro.
Cita bibliografa: ToodSanford y Davidshon, El laboratorio de diagnstico clnico, Ed Marban, 20 Ed, Espaa 2005 7 PROCEDIMIENTO Observacin y reconocimiento de materiales MICROSCOPIO: El Microscopio es aquel instrumento diseado especialmente para poder apreciar elementos muy, muy pequeos y que obviamente resultan prcticamente imperceptibles para la visin humana. El tipo de microscopio ms comn que se cre fue el ptico, el cual consiste en una o varias lentes las cuales permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona gracias a la refraccin. Algunos otros tipos son: microscopio simple, compuesto, de fluorescencia, de luz ultravioleta, en campo oscuro, petrogrfico, de contraste de fase, de luz polarizada, confocal, electrnico, electrnico de transmisin, electrnico de barrido, de iones de campo, de sonda de barrido, de fuerza atmica, de efecto tnel, virtual y antimateria ASA BACTERIOLOGICA: Se utiliza en procedimientos de siembras de bacterias, Est formada de una base que puede estar hecha de platino, acero, aluminio y un filamento que puede ser de nicromo, tungsteno o platino que termina o en aro o en punta, este instrumento de laboratorio nos ayuda transportar o arrastrar microorganismos de un medio a otro medio para su adecuado desarrollo, as como para la realizacin de frotis. Manteniendo verticalmente el mechero se flama toda la longitud del asa hasta la incandescencia Se recomienda poner inicialmente el extremo del asa en el cono azul de la llama durante 6 segundos como precalentamiento para evitar salpicaduras, luego pasar a la zona de ms calor (cono amarillo) hasta que enrojezca Deje enfriar el asa cerca de la llama TAPONES DE ALGODN Algunos medios de cultivo utilizados en el laboratorio de microbiologa se disponen en tubos, los mismos que deben ser tapados con tapones de algodn para evitar contaminaciones y permitir la entrada de oxgeno. Tome una pequea cantidad de algodn de rama y fabrique un tapn consistente , de tal manera que este entre y salga con facilidad de la boca del tubo Ensaye la forma de tapar y destapar un tubo con tapn de algodn, utilizando para esto el dedo meique que rodea al tapn, mientras que con la mano contraria sostiene el tubo. Repita este procedimiento sosteniendo dos tubos a la vez y luego tres. No olvide flamear la boca del tubo despus de destaparlo y antes de volverlo a tapar, para evitar que se contamine con microorganismos del medio ambiente CAJAS PETRI Las cajas Petri son recipientes de vidrio o de plstico destinadas a recibir medios de cultivos slidos, para el cultivo de microorganismos. La posicin con la que se coloca seria siempre con la tapa hacia abajo y la base hacia arriba cuando se trabaja con bacterias, cuando se trabaja con hongos miceliales har lo contrario. Para destapar la caja debe levantar la base y sostenerla en su mano izquierda , dejando la tapa en la mesa pero cerca de la llama y no por tiempo prolongado, para evitar contaminacin. Tambin puede destaparse teniendo su base en la palma de la mano y levantando la tapa con sus dedos Para comprender el procedimiento, observe la demostracin de su instructor. TUBO TAPA ROSCA Los tubos de tapa rosca tiene la misma funcin que los tubos con tapn de algodn con la diferencia que los medios de cultivo pueden ser almacenados por mayor tiempo Mantener el tubo con la mano izquierda y destornille la tapa con el dedo meique de su mano derecha. No debe depositar la tapa o el tapn de algodn sobre la mesa, sino mantenerlos en la mano. Flame la boca del tubo una vez destapado y antes de volver a tapar
MATERIAL CONTAMINADO Todo material utilizado despus de realizar un cultivo bacteriano quedara contaminado, por lo que deber ser depositado en recipientes que puedan ser llevados luego al autoclave para su respectiva esterilizacin. AUTOCLAVE Equipo utilizado para esterilizar material para realizar cultivos o material contaminado ya utilizado luego del cultivo, utilizar la esterilizacin hmeda con 121 C 1,5 libras de presin durante 15 minutos Abrir el autoclave , sacando el pasador y desenroscando la tapa Sacar la bandeja y colocar en el interior agua destilada hasta que cubra los tubos que se encuentran en el interior Colocar la bandeja y sobre ella colocar el material a ser esterilizado, material de vidrio debe envolverse en papel de empaque, tubos para rosca no deben estar cerrado completamente. El material contaminado se colocara en fundas plsticas apropiadas antes de introducirlo. Cerrar la puerta y colocar el pasador , ajustar la puerta fuertemente Verificar que la vlvula de escape este cerrada En el reloj colocar 40 minutos, este es el tiempo necesario para que el interior llegue a 121 grados C, 1.5 lbs presin y se mantenga por minutos. Controlar peridicamente el nanmetro verificando la presin. Luego del tiempo abrir la vlvula de escape y luego abrir la puerta y quitar el pasado. El material contaminado desecharlo de acuerdo a las normas de bioseguridad Citas bibliogrficas: Definicin ABC, Microscopio, Diccionario ABC: http://www.definicionabc.com/ciencia/microscopio.php#ixzz2yi8S8pHr Gua equipamiento bsico en bacteriologa, Soledad Caimanque, Eliana Escudero, Ed DUOCUC,2000:http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/ 39586.pdf 8 OBSERVACIONES Despus de realizar las tareas, estaremos en la capacidad de diferenciar e identificar los diferentes materiales del laboratorio, para seleccionar de manera adecuada los distintos instrumentos para una determinada experiencia. 9 CONCLUSIONES
Es muy importante haber reconocido todos los materiales a utilizar en el laboratorio y saber su utilidad para la prctica. Tambin es necesario para prevenir cualquier accidente no provocado y no lamentar consecuencias. Una de las conclusiones es haber reconocido algunos reactivos que se debe tener cuidado y cogerlo con los guantes para prevenir algn tipo de contaminacin. 10 RECOMENDACIONES La idea es entonces que los estudiantes aprendan el uso de los materiales del laboratorio de una manera distinta y la precauciones que se deben tomar en cuenta para el manejo de reactivos, de manera que al momento de entrar a un laboratorio ellos se sientan seguros de tomar el material adecuado para realizar su prctica, sin afanes pero ponindole todo el empeo posible. Tener el mandil siempre puesto para evitar contaminacin en la ropa cuando se encuentre en el laboratorio. Tener los guantes puestos cuando se trabaje en cultivos de hongos obacterias en las placas o tubos a utilizar. Antes de empezar cualquier experimento desinfectar la zona donde se trabajara No poner cuadernos grandes sobre la zona donde se trabaje ni meter loslapiceros en la boca para prevenir algn tipo de infeccin. 11 BIBLIOGRAFIA
Definicin ABC, Microscopio, Diccionario ABC: http://www.definicionabc.com/ciencia/microscopio.php#ixzz2yi8S8pHr Gua equipamiento bsico en bacteriologa, Soledad Caimanque, Eliana Escudero, Ed DUOCUC,2000:http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/ 39586.pdf ToodSanford y Davidshon, El laboratorio de diagnstico clnico, Ed Marban, 20 Ed, Espaa 2005 Manual para la introduccin al laboratorio de microbiologa, Manuel Ricaurte Toro, Primera Ed, Noviembre 2005 Manual de tcnicas bsicas para un laboratorio de salud, OPS, Ed panamericana sur,2009 12 ANEXOS 12.1 CUESTIONARIO DE EVALUACION
a) Porque se tiene que colocar el cultivo de la caja Petri hacia arriba y la ms pequea hacia abajo? Se utiliza en los laboratorios principalmente para el cultivo de bacterias, mohos y otro microorganismos, solindose cubrir el fondo con distintos medios de cultivo segn el microorganismos que se quiera cultivar. Si se quieren observar colonias, durante el tiempo de incubacin de los microorganismos sembrado en la placa esta se mantiene boca abajo, es decir apoyada sobre la tapa. De este modo, el agar queda en la parte superior y al condensarse el vapor de agua que generan los microorganismos por su metabolismo, cae sobre la tapa, evitando que los microorganismos se diluyan, manteniendo fijos el sustrato. b) Cul es el acido que se coloca en la tincin de BAAR y cul es el porcentaje? Acido clorhdrico al 3% Cita bibliogrfica: Charles, K. Microbiology Review. Sixth Edition. Medical Examination Publishing Company. INC. USA.1977.