Revista Cubana de Plantas Medicinales

versin On-line ISSN 1028-4796

Rev Cubana Plant Med v.13 n.4 Ciudad de la Habana sep.-dic. 2008

ARTCULO ORIGINAL

Actividad antimicrobiana de Tectona grandis L.
f.,Bursera simaruba (L.) Sarg. y Cedrela odorata L.

Antimicrobial activity of Tectona grandis L. f., Bursera
simaruba (L.) Sarg., and Cedrela odorata L.


Nidia M. Rojas Hernndez
I
; Mnica Rodrguez Uramis
II

I Doctora en Ciencias Biolgicas. Investigadora Titular. Profesora Auxiliar. Facultad de Biologa, Universidad de La Habana.
Ciudad de La Habana, Cuba.
II Licenciada en Microbiologa. Facultad de Biologa. Universidad de La Habana. Ciudad de La Habana, Cuba.


RESUMEN

INTRODUCCIN: Tectona grandis L. f. (teca), Bursera simaruba (L.) Sarg. (almcigo) y Cedrela odorata L. (cedro) son plantas
maderables que se explotan fundamentalmente por su madera. En Cuba, algunas de las partes de estas plantas se utilizan en
medicina tradicional, aunque pocos han sido los estudios para conocer sus propiedades antimicrobianas.
OBJETIVOS: evaluar la actividad antimicrobiana in vitro de extractos de diferentes partes de estas especies.
MTODOS: se prepararon extractos etanlicos de follaje y corteza de T. grandis y B. simaruba; as como de follaje, corteza y
madera de C. odorata, los cuales se probaron frente a 8 cepas de bacterias (4 grampositivas y 4 gramnegativas) y 12 cepas de 7
especies de levaduras del gnero Candida por el mtodo minimizado de difusin radial en medio agarizado en una sola capa con
cortes cilndricos. A los extractos activos se les determin la concentracin mnima inhibitoria frente a las cepas microbianas que
fueron susceptibles, y las concentraciones mnimas bactericidas y fungicidas se determinaron mediante diluciones dobles
seriadas en caldo con pases posteriores a medio agarizado.
RESULTADOS: 5 de los 7 extractos alcohlicos preparados presentaron actividad antimicrobiana. El porcentaje de bacterias
sensibles vari entre 12,5 y 50 %. No se encontr actividad antifngica frente a ninguna de las cepas de levaduras utilizadas. De
los 5 extractos activos, 3 presentaron actividad bacteriosttica y bactericida, mientras que el resto solo present actividad
bacteriosttica.
CONCLUSIONES: los extractos activos solo presentaron actividad antimicrobiana frente a las bacterias grampositivas y los
mejores resultados correspondieron a los extractos de follaje y corteza de teca, corteza de almcigo y madera de cedro.

Palabras clave: Actividad antimicrobiana, extractos alcohlicos, Tectona grandis, Bursera simaruba, Cedrela odorata.


ABSTRACT

INTRODUCTION: Tectona grandis L. f (teak), Bursera simaruba (L.) Sarg. (mastic tree) y Cedrela odorata L. (cedar) are
wooden plants that are fundamentally used because of their wood. In Cuba, some parts of these plants are employed in herbal
medicine, although few studies have been conducted to find out their antimicrobial properties.
OBJETIVES: to evaluate the antimicrobial activity in vitro of extracts from various parts of these species.
METHODS: ethanolic extracts from T. grandis and B simaruba leaves and barks as well as from C.odorata leaves, bark and wood
were prepared. They were tested against 8 bacterial strains (4 Grampositive and 4 Gramnegative) and against 12 strains of
7 Candida genus yeast species by using minimized method of radial diffusion in agar medium in a single cylindrical cut layer. The
minimal inhibitory concentration of these extracts against the susceptible microbial strains was estimated, and the minimal
bactericidal and fungicidal concentrations were determined through double serial dilutions in broth with further transfer to agar
medium.
RESULTS: five out of the 7 ethanolic extracts showed antimicrobial activity. No antifungal activity was found against any of the
yeast strains. Of the five active extracts, 3 showed bacteriostatic and bactericidal activity whereas the rest exhibited
bacteriostatic properties only.
CONCLUSIONS: the active extracts revealed their antimicrobial action against the Grampositive bacteria only, and the best
results were found in extracts from teak leaves and bark; mastic tree bark and cedar wood.

Key words: Antimicrobial activity, ethanolic extracts, grandis, Bursera simaruba, Cedrela odorata.




INTRODUCCIN

Del territorio cubano 26,95 % forma parte del patrimonio forestal de este pas. Entre las especies forestales que crecen en
Cuba, Tectona grandis L. f., Bursera simaruba (L.) Sarg. y Cedrela odorata L. se cultivan fundamentalmente por su madera.1 Sin
embargo, se tiene conocimiento de que algunas de sus partes han sido utilizadas con fines curativos en medicina tradicional,
aunque pocos han sido los estudios realizados para conocer sus propiedades farmacolgicas.2

Tectona grandis L. f., rbol conocido comnmente con el nombre de teca, se introdujo en Cuba y se ha plantado a lo largo del
archipilago cubano con excelentes resultados.2 En medicina tradicional, su madera convertida en polvo se utiliza para combatir
la dermatitis, mientras sus flores se emplean como diurticas y su leo es sudorfico.2,3

Bursera simaruba L. (almcigo) es un rbol que tiene un crecimiento rpido y abunda en todo el pas.4 La raz, la corteza y las
hojas de esta especie se emplean popularmente para el alivio de las diarreas y resfriados; adems, como tnico estomacal,
purgante y diurtico.5

Cedrela odorata L. (cedro) se cultiva en plantaciones comerciales a gran escala. La infusin de sus hojas se utiliza por los
campesinos cubanos para aliviar el dolor de muelas y odos. El tallo se usa como antipirtico y abortivo. Como usos generales se
cita su empleo para el alivio de los vmitos, la indigestin y el control de las hemorragias, entre otros.2

A pesar de que en Cuba se les atribuye a estas plantas propiedades medicinales, no se han encontrado trabajos cientficos que
avalen las propiedades que justifiquen su empleo, razn por la cual el propsito del presente trabajo es evaluar la presencia de
actividad antimicrobiana in vitro de extractos etanlicos, preparados con diferentes partes de estas especies forestales.

MTODOS

Material vegetal

Se prepararon extractos alcohlicos de follaje y corteza de Tectona grandis L.f. y Bursera simaruba L. En el caso de Cedrela
odorata L. se utilizaron hojas, corteza y madera.

Todo el material vegetal se colect e identific en el Instituto de Investigaciones Forestales (tabla 1). Las partes seleccionadas se
secaron a la sombra a temperatura ambiente y, posteriormente, las distintas partes identificadas por separado fueron reducidas
a polvo con un molino manual, las cuales se emplearon para preparar los extractos con etanol 90 % en un equipo Soxhlet. Una
vez realizada la extraccin, los extractos se llevaron hasta sequedad en un rotaevaporador. A partir de los extractos secos, se
prepararon extractos en etanol a una concentracin de 100 mg/mL y se guardaron en frascos mbar hasta el momento del uso.

Material microbiolgico

Los microorganismos usados proceden del Laboratorio de Antimicrobianos del Departamento de Microbiologa de la Facultad de
Biologa de la Universidad de La Habana. Se emplearon 12 cepas de levaduras del gnero Candida de origen clnico humano (4
cepas de Candida albicans, 2 de Candida tropicalis, una de Candida parapsilosis, una deCandida kefyr, 2 cepas de Candida
glabrata, una de Candida utilis y una de Candida krusei) y 8 cepas bacterianas de las especies siguientes: Serratia
marcescens ATCC 14056, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Escherichia coliATCC 25922, Bacillus subtilis ATCC
6633, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus aureus (cepa de origen clnico,
positiva a la prueba de Camp) y Micrococcus luteus (de origen ambiental).

Determinacin de la actividad antimicrobiana de los extractos

La evaluacin de la actividad antimicrobiana se realiz en 3 pasos:

1. Tamizaje general.

2. Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria.

3. Determinacin de la concentracin mnima bactericida.

Se utiliz el mtodo de difusin radial en monocapa de medio agarizado minimizado6 con pocillos de 2 mm de dimetro cada
uno, se aadieron los extractos etanlicos y el etanol empleado como control. Se realizaron 3 rplicas por concentracin para
cada extracto y cada cepa microbiana. Las placas se sometieron a una predifusin entre 4 y 10 oC por 2 h y luego se incubaron
durante 24 h a una temperatura de 35 oC para las levaduras y 37 C para las bacterias, al cabo de las cuales se realizaron las
lecturas. Se consider positivo todo halo de inhibicin detectable alrededor del pocillo de cada extracto que apareciera en las 3
rplicas correspondientes de esa concentracin frente a cada cultivo.

Para determinar la concentracin mnima inhibitoria (CMI) se utiliz el mismo mtodo anterior frente a aquellas cepas que fueron
sensibles, previamente, durante el tamizaje. Se trabaj en un rango de concentracin entre 100 y 3,12 mg/mL para cada
extracto.

Para la determinacin de la concentracin mnima bactericida se utiliz el mtodo de las diluciones dobles seriadas en caldo
nutriente con pases a medio slido,7 24 h despus de una incubacin de 30 a 35 oC. Las concentraciones finales de los extractos
fueron de 10 mg/mL, 5 mg/mL y 2,5 mg/mL.

Se prepararon para cada cepa los controles siguientes: control 1 (caldo nutriente), control 2 (caldo nutriente con extracto) y
control 3 (caldo nutriente con etanol).

RESULTADOS

De los 7 extractos alcohlicos empleados 5 mostraron actividad antimicrobiana frente a las cepas bacterianas, los cuales
correspondieron al extracto de follaje y de corteza de T. grandis, el de corteza de B. simaruba y los preparados con la corteza y
madera de C. odorata. Ninguno de los extractos preparados present actividad antifngica frente a las levaduras evaluadas.

La relacin de extractos activos y las cepas bacterianas susceptibles frente a ellos se muestran en la tabla 2.

Los extractos vegetales que presentaron mayor actividad antibacteriana fueron el de follaje de T. grandis y el de madera de C.
odorata, con actividad sobre 50 % de las cepas bacterianas evaluadas, mientras que los extractos de corteza de T. grandis y B.
simaruba fueron activos frente a 37,5 % de los cultivos. El extracto de corteza deC. odorata fue activo solo frente a 1 sola cepa,
lo cual corresponde con 12,5 % de los cultivos bacterianos probados.

En la tabla 3 se muestran los valores de CMI (mg/mL) para cada extracto donde se observa que el extracto de follaje de T.
grandis fue el de menor valor de CMI e igual para todas las cepas sensibles (6,25 mg/mL); mientras que el de la corteza de esa
misma planta fue el de los valores ms elevados que estuvieron entre 100 y 25 mg/mL.


En la tabla 4 se muestran los valores de concentraciones mnimas bactericidas (mg/mL) para los extractos que presentaron
actividad biocida. En ella se puede observar cmo el extracto de follaje de T. grandis present actividad biocida frente a todas las
cepas inhibidas. Los valores de CMB para este extracto fueron de 10 mg/mL para 3 de las cepas, mientras que para la
cepa S. aureus (Camp) fue de 5 mg/mL.


La CMB de B. simaruba tuvo un valor de 5 mg/mL y fue igual para las 2 cepas (S. aureus cepa Camp y M. luteus). El cultivo
de B. subtilis solo present actividad bacteriosttica mientras que en las otras 2 cepas la actividad fue tanto bacteriosttica como
bactericida.

La CMB del extracto de corteza de T. grandis tuvo un valor de 5 mg/mL y fue igual para las 2 cepas (S. aureus yM. luteus). El
cultivo de B. subtilis solo present actividad bacteriosttica, mientras que en las otras 2 cepas la actividad fue bacteriosttica y
bactericida.

DISCUSIN

Las plantas se han empleado desde tiempos ancestrales con fines medicinales para el tratamiento de diferentes enfermedades
humanas, incluidas las de naturaleza infecciosa. Hasta el advenimiento de la medicina moderna, los humanos dependieron de
ellas para el tratamiento de sus enfermedades.8

El presente trabajo demuestra que el uso emprico de las plantas en medicina tradicional sigue siendo un buen punto de partida
para la seleccin y el estudio de las propiedades farmacolgicas de sus extractos.9 Por otra parte, la ausencia de estudios
cientficos anteriores sobre la actividad antimicrobiana de estas 3 especies forestales justifica la investigacin realizada.

El hecho de no haber encontrado actividad frente al grupo de cepas de las diferentes especies del gneroCandida empleadas no
es un hallazgo raro, porque en general los productos metablicos de las plantas son menos activos frente a este grupo de
hongos unicelulares. Esto lo confirman estudios realizados por Martnez y Rossiquienes obtuvieron resultados similares con otras
plantas.10,11

Los resultados de la actividad antimicrobiana de los extractos vegetales van a depender de las caractersticas especficas de los
principios activos presentes en ellos y de su solubilidad en los solventes empleados para la extraccin. Esto explica el hallazgo de
extractos vegetales activos solamente frente a hongos o como en este caso, solo frente a bacterias, ya sean grampositivas o
gramnegativas; o frente a ambos grupos de bacterias cuando el extracto fue capaz de extraer una mezcla de componentes
activos presentes en la planta.

En el presente trabajo solo se hallaron extractos con actividad antibacteriana y especficamente frente a las cepas grampositivas.
Resultados similares obtuvieron Guerrero y otros,12 al probar extractos de 13 plantas ecuatoriales, mientras que Rojas y
otros13 en estudios realizados con gossypitrina (principio activo aislado de flores de Taliparitis elatum conocida en Cuba por el
nombre comn de majagua), demostraron que este compuesto puro presenta mayor actividad frente a bacterias gramnegativas
que sobre las grampositivas.

La actividad de los extractos frente a algunas cepas fue bacteriosttica y bactericida, mientras que en otras solo fue
bacteriosttica. No se pueden comparar los valores de concentracin mnima bactericida con los valores de concentracin mnima
inhibitoria para cada cepa, por haber utilizado mtodos diferentes para ambas determinaciones. Por otra parte, la pigmentacin
de los extractos etanlicos obtenidos de las diferentes partes de estas plantas, no permite el empleo del mtodo de diluciones
seriadas en caldo para la determinacin de los valores de CMI, porque la coloracin impide observar la presencia o ausencia de
crecimiento bacteriano en los tubos.

Del total de extractos alcohlicos elaborados con las diferentes partes de las especies forestales probadas, 71,4 % present
actividad antimicrobiana y siempre frente a las cepas bacterianas grampositivas. Ninguno de estos extractos present actividad
antifngica. De los extractos activos, 60 % present actividad bacteriosttica y bactericida, mientras que el resto solo present
actividad bacteriosttica. El extracto ms efectivo fue el de follaje de T. grandis, porque inhibi a todas las cepas y bacterias
grampositivas y fue el que present un menor valor de CMI.

Teniendo en cuenta la novedad de estos resultados se recomienda ampliar el estudio de la actividad antimicrobiana de especies
forestales que crecen en Cuba, con un mayor nmero de cepas bacterianas y fngicas de inters clnico. Sera conveniente
realizar estudios fitoqumicos para tratar de caracterizar los principios activos responsables de estas propiedades y evaluar la
toxicidad de estos extractos, como una alternativa para uso de nuevos fitofrmacos y su posible empleo teraputico.

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Recibido: 8 de agosto de 2008.
Aprobado: 24 de agosto de 2008.

Dra. C. Nidia M. Rojas. Facultad de Biologa. Universidad de La Habana. Ciudad de La Habana, Cuba. Correo
electrnico: mrumonica@yahoo.com


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