Determinacin cualitativa de Biomoleculas orgnicas 1er ciclo Pgina 1
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INTRODUCCION
Dentro de las caractersticas emergentes de los seres vivos encontramos la organizacin y complejidad de su estructura, lo que les permite cumplir con diferentes procesos metablicos para fijar o liberar energa necesaria para la vida. El metabolismo es la suma de todas las reacciones qumicas necesarias para satisfacer las necesidades primarias.
Dentro del metabolismo se encuentran los procesos del anabolismo (formacin desustancias) y el catabolismo (degradacin de sustancias). Las sustancias involucradas en estos procesos son comnmente conocidas como biomoleculas. Dentro de las biomolculas encontramos las inorgnicas y las orgnicas; Las inorgnicas son aquellas que no son formadas por los seres vivos, entre estas se encuentran el agua, gases y sales y por el contrario las orgnicas son las elaboradas en los diferentes procesos fisiolgicos.
El agua es la sustancia ms abundante en la clula viva y llega a representar ms del70% de su peso. Esta molcula es de gran importancia pues la mayor parte de las reacciones intracelulares se llevan a cabo en ambiente acuoso y todos los organismos se han diseado alrededor de las propiedades del agua, tales como su carcter polar, su capacidad para formar enlaces de hidrgeno y su alta tensin superficial (Gonzlez et. al2006).
La clula, adems de hacer uso del agua, utiliza varios elementos en la formacin de las biomoleculas: macroelementos, microelementos y oligoelementos. Los macroelementos son: Carbono, Hidrogeno, Oxigeno y Nitrgeno; el principal es el carbono, que debido a su propiedad tetravalente, es decir la facilidad de formar enlaces covalentes sencillos y dobles, forma cerca de medio milln de compuestos orgnicos. Los macroelementos representan hasta un 95% del peso seco de los seres vivos. Los microelementos son: Ca,P, K, S, Cl, Na y Mg, estos hacen parte de entre el 0,3 y el 5% del peso seco y suponen casi el 10% de la biomasa. Los oligoelementos o trazas (B, F, Fe, Co, Cu, Mn, Zn, Mo y I, entre otros) estn presentes en cantidades muy pequeas.
Las biomolculas orgnicas son los carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nucleicos, cada uno de ellos con caractersticas definidas y funciones especficas, propiedades que adquieren por la variedad de grupos funcionales que poseen. La biomolculas al romperse liberan energa la cual es utilizada en el proceso del metabolismo para el funcionamiento celular. Las biomolculas estn presentes en una gran variedad de alimentos que a diario consumimos en nuestra alimentacin.
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Objetivos
Determinar cualitativamente los carbohidratos reductores presentes en muestras biolgicas. Determinar cualitativamente los carbohidratos no reductores presentes en muestras biolgicas. Determinar cualitativamente las protenas presentes en muestras biolgicas.
Materiales y Mtodo a) Materiales
I. Muestras biolgicas: manzana, papa, huevo, leche, harina, uva, etc. II. Fsforos III. 1 L de alcohol de 96 GL IV. Tubos de ensayo V. Mechero VI. Placas Petri VII. Vaso precipitado VIII. Gradillas IX. Pipetas Graduadas X. Pinzas de madera XI. Piceta XII. Reactivo de fehling XIII. Solucin de sacarosa al 5 % (p/v) XIV. Solucin de Glucosa al 5 % (p/v) XV. Sulfato de cobre XVI. Hidrxido de sodio XVII. Navaja
b) Mtodos
Determinacin de carbohidratos reductores (Azucares reductores). 1) Fundamento: Reactivo de Fehling- Es una reaccin cualitativa que sirve para determinar la presencia de un UNIVERSIDAD LATINOAMERICANA CIMA BIOLOGIA CELULAR
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azcar reductor que no sea sacarosa (carece de a carbono anomtrico y no es azcar reductor). El reactivo de Fehling presenta sulfato de cobre, carbonato de sodio, citrato de sodio y agua. En la reaccin para determinar a los azucares reductores los agente estabilizantes de la reaccin son el carbono y el citrato, el sulfato de cobre es el `reactante especficamente el Cu que va a reaccionar con los grupos qumicos de aldehdos y cetonas. Que en reacciones de oxido reduccin el Cu se convierte en Cu2O dando un color rojo ladrillo que precipitara posteriormente 2) Procedimiento
.-Rotular los tubo de ensayo .-Seguir las indicaciones del cuadro
COMPONENTES
TUBOS DE ENSAYO 1 2 3 4 5 Solucin de Glucosa 2ml Leche evaporada 2ml Manzana rallada 2ml Mosto de Uva 2ml Solucin de sacarosa 2ml Reactivo de Fehling 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml
Determinacin de carbohidratos no reductores (Almidn)
1) Fundamento.- Esta prueba se basa en la especificidad del almidn cuando est presente en solucin, la cual da un color azul en presencia del YODO. El yodo presenta: Yoduro de potasio y yodo bisublimado, ms agua (solucin de Lugol). El yodo de la solucin tiene afinidad por los enlaces alfa (1-4) y alfa (1-6) de la molculas de almidn; esta interaccin del yodo por dichos enlaces producen el cambio de coloracin. La UNIVERSIDAD LATINOAMERICANA CIMA BIOLOGIA CELULAR
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amilosa en disolucin coloidal toma color azul, el amilo pectina de una coloracin rojo violceo.
2) Procedimiento
.-Rotular los tubos de ensayo .-Seguir las indicaciones del cuadro
Componentes
Tubos de ensayo 1 2 3 4 5 Solucin de almidn 2ml Papa rallada 2ml Clara de huevo 2ml Solucin de harina 2ml Solucin de Glucosa 2 ml Reactivo de Lugol 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas
Determinacin de Protenas
1) Fundamento.- Reactivo de Biuret- Se debe a los componente que presenta: el hidrxido de sodio y sulfato de cobre; el cual el agente denaturante de las protenas es el hidrxido y el reactante es el sulfato de cobre. Las protenas despus de ser denaturadas facilitan la interaccin de Cu con los pares de electrones sin compartir del grupo amino del pptido mediante enlaces de coordinacin con la formacin de un completo coloreado purpura- violceo
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2) Procedimiento
.- Rotular los tubos de ensayo.
.-Aadir 0.5 ml de NaOH al 40%, y 4 gotas de sulfato de cobre al 1 % a cada tubo.
COMPONENTES TUBOS DE ENSAYO 1 2 3 4 Huevo 1ml Leche 1ml Solucin de almidn 1ml 1ml NaOH 40% 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml SO4Cu2 1% 4 gotas 4 gotas 4 gotas 4 gotas
Resultados
1) Determinacin de carbohidratos reductores ( azucares reductores)
Graficar sus observaciones
Los azucares reductores al combinarse o al agregarle el reactivo de Fehling UNIVERSIDAD LATINOAMERICANA CIMA BIOLOGIA CELULAR
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Llenar el siguiente cuadro
Muestra Azucares Reductores ( + o - ) Leche evaporada (+) Glucosa (+) Manzana rallada (+) Mosto de uva (+) Solucin de sacarosa (-)
2) Determinacin de carbohidratos no reductores (almidn)
Graficar sus observaciones.
No es una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta. Este complejo es sensible a la temperatura, ya que si se calienta el tubo, el color desaparece. Esto se debe a que las espiras del almidn se "desarman", por as decirlo, y el yodo se libera. Una vez fro, las espiras se reorganizan y se vuelve a ver el color. UNIVERSIDAD LATINOAMERICANA CIMA BIOLOGIA CELULAR
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Llenar el siguiente cuadro.
Muestra Almidon (+ o - ) Leche evaporada (+) Clara de huevo (-) Solucin de harina (+) Papa rallada (+)
3) Determinacin de protenas
Graficar sus observaciones
Llenar el siguiente cuadro
Muestra Proteinas (+ o - ) Leche (-) Clara de huevo (+) Solucin de harina (-)
El reactivo del biuret (sulfato de cobre en una base fuerte) reacciona con los enlaces del pptido y cambia el color cuando entra en contacto con otra sustancia, tornndose VIOLETA. Mientras ms cantidad de protena est presente en la solucin, ms oscuro es el color. UNIVERSIDAD LATINOAMERICANA CIMA BIOLOGIA CELULAR
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Discusin Las biomolculas, son molculas que constituyen a todo ser vivo. Una clula viva est formada bsicamente por los cuatro bioelementos ms abundantes C, H, O y N, que combinados entre ellos de diferentes formas, originan una gran cantidad de compuestos los cuales constituyen la mayor cantidad de masa en una clula. El agua, compuesto lquido indispensable para la vida, est tambin conformada por bioelementos, su importancia radica en que la mayora de reacciones intracelulares se llevan a cabo en medio acuoso. Las biomolculas se pueden dividir en biomolculas orgnicas e inorgnicas. Las biomolculas inorgnicas, son fundamentales para la vida pero no son producidas por seres los vivos, en este grupo se encuentran, el agua y sales inorgnicas. Por otro lado, las biomolculas orgnicas, son aquellas que poseen una estructura a base de carbono y son sintetizadas por los seres vivos, estas a su vez se dividen en: Los Glcidos o carbohidratos, compuestos por carbono, hidrgeno y oxgeno, solubles enagua. Son la fuente ms importante de suministro de energa en los seres vivos, se dividen en monosacridos (azcares simples), la unin de dos monosacridos forman los disacridos y la unin de 3-20 monosacridos forman oligosacridos, de igual manera la unin de numerosos monosacridos constituyen los polisacridos. Los Lpidos, compuestos por carbono e hidrgeno, y en menor medida por oxgeno, insolubles en agua, una de sus principales caractersticas. Su principal funcin es almacenar energa en los seres vivos, dentro de este grupo se encuentran los triglicridos (grasas), fosfolpidos y esteroides.
Conclusiones
Segn los resultados obtenidos durante todo el tiempo de trabajo en el laboratorio se demostr que ninguna sustancia muestra la misma composicin que la solucin original. En conclusin podemos decir que, vemos que ninguna de estas soluciones analizadas era culpable. como podremos haber visto, estos procesos nos sirven para reconocer si existe o no cierto tipo de sustancias en una solucin y a la ves el reconocimiento de las biomoleculas al combinarse con los reactivos presentes en cada procedimiento y son procesos fciles de realizar para mejorar el entendimiento del estudiante
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