estratgico de la tripanosomosis en Ganadera Doble Propsito Rita Tamasaukas Jazmn Florio-Luis de Pineda El incremento demogrfico, el aumento de los ingresos y de la urbanizacin muestran en la actualidad, un notable crecimiento de la demanda de alimentos de ori- gen animal en los pases en desarrollo: la revolucin ganadera. No obstante, el cam- bio climtico ha generado impacto sobre los ecosistemas y sobre el comportamiento epidemiolgico de las enfermedades; por otro lado, el alto costo de los productos far- macuticos est afectando el manejo sanitario preventivo y curativo bovino. La biotecnologa se est utilizando en diversos campos de la produccin y sani- dad animal. Entre sus principales aplicaciones en ganadera se encuentra la identifi- cacin y el chequeo de parentesco, la construccin de mapas genticos y el desarrollo de nuevos tratamientos de enfermedades. Los marcadores moleculares constituyen hoy una herramienta moderna y poderosa para el viejo arte de la seleccin. En Venezuela, las afecciones causadas por los agentes hemotrpicos parasitarios de los Gneros Anaplasma (Anaplasma marginale), Babesia (Babesia bigemina y B. bo- vis) y Trypanosoma (Trypanosoma vivax) estn distribuidos en forma endmica, es de- cir, siempre se encuentran presentes en todos los estados del pas con vocacin gana- dera, en especial coincidiendo con las variaciones estacionales (Tamasaukas, 2008). Incluso las especies citadas pueden presentarse en forma simultnea, lo que motiv el desarrollo del concepto de tetraloga hemoparasitaria (Tamasaukas et al., 2000) para indicar su presencia endmica, habindose incluso descritos brotes agudos de enfer- medad hemotrpica mixta (Tamasaukas et al., 1998; Tamasaukas et al., 2000; Ta- masaukas, 2008; San Juan-Lions, 2010). Los altos costos por mortalidad, prdidas productivas, reproductivas, medidas preventivas y curativas en animales enfermos, han motivado para ofrecer una revisin sobre la situacin actual, logros y desafos en el estudio, diagnstico y control de la tri- panosomosis para un desarrollo sustentable de la ganadera doble propsito. 396 Logros & Desafos de la Ganadera Doble Propsito. 2014 TRIPANOTOLERANCIA El trmino tripanotolerancia viene dado por una condicin gentica que permi- te que los animales sean capaces de mantener los valores del hematocrito y controlar la tasa de crecimiento de la consecuente infeccin, mantener el peso de los animales infectados, as como contrarrestar los efectos negativos de la infeccin por el Trypano- soma vivax (dIeteren et al., 1998; CIP-UPWARD, 2003; van der Waaij et al., 2003; Hill et al., 2005). Aunque esta condicin no elimina la transmisin del parsito, dis- minuye considerablemente la prevalencia del mismo en zonas endmicas, permitien- do complementar la seleccin y programas de cruzamiento que se vienen realizando a nivel de productores e instituciones pblicas y privadas (FAO, 2008; Florio et al., 2011; Tamasaukas et al., 2012). En Venezuela se ha reportado, por caracterizacin fenotpica, la tripanotoleran- cia en algunos bovinos con nfasis en bovinos criollos (Agudo et al., 2009), dado que los criollos en Amrica provienen de troncos filogenticos pertenecientes al Ibrico y al Aquitanicus del Bos primigenius y representantes del Bos hamaticus de frica (Lan- daeta-Hernndez, 2008; Mass, 2011). De igual manera, se destaca la raza bovina Sene- pol que posee caractersticas genticas de la Ndama de Senegal (raza Bos taurus afri- cana identificada como tripanotolerante). Los bovinos Bos taurus o mestizos con pre- dominio Bos taurus muestran una condicin de tripanotolerancia, coincidiendo con lo reportado por estudios africanos utilizando otras razas pertenecientes a la especie Bos taurus (Gachohi et al., 2009; Stein, 2011). Este comportamiento hace suponer que hay una condicin gentica comn entre las diversas razas Bos taurus involucradas (Stein, 2011). Se ha sealado que los beneficios econmicos de realizar una mejora gentica a travs del uso de marcadores moleculares para lograr la tripanotolerancia producira ingresos de US$ 281 millones vs. US$ 32 millones de evaluacin y seleccin en campo de animales que presenten la enfermedad. Con el uso de marcadores moleculares se prev el poder evitar a futuro la enfermedad mediante la identificacin de bovinos re- sistentes o los tolerantes y por ende su seleccin como futuros padres, logrando una disminucin notable de la mortalidad por causa de la enfermedad, en costos en el ma- nejo sanitario preventivo y curativo y prdidas productivas y reproductivas por causa de esta enfermedad (Bishop et al., 2002). De esa forma, sera posible disminuir la aplicacin de tratamientos con tripano- cidas, los cuales son altamente txicos y costosos, produciendo un animal que en con- diciones normales puede controlar tanto la parasitemia como la anemia, sin necesidad de aplicar drogas, produciendo un animal cuyo productos (leche y carne) sern de ca- lidad, al estar libre de residuos, reduciendo el riesgo en salud pblica que su presencia ocasionan en los productos y sub-productos, as como minimizar las posibilidades de aparicin de resistencia a los frmacos por subdosificacin (Miranda & Gonzlez, 2010; Cassalett et al., 2011). Una condicin para realizar la identificacin de animales tripanotolerantes y tripanosusceptibles, es la valoracin del reto parasitario al cual los animales estn ex- puestos en condiciones naturales. Durante la ltima dcada, se ha venido detectando en Venezuela la prevalencia de la tripanosomosis bovina por T. vivax, con valores que Logros & Desafos de la Ganadera Doble Propsito. 2014 Avances y perspectivas sobre diagnstico y control estratgico de la tripanosomosis en GDP 397 varan de 20,8% a 57,8% por exmenes serolgicos y de 1 a 3,9% de infecciones activas mediante exmenes parasitolgicos directos (Tamasaukas et al., 2010). La mayor fre- cuencia de animales positivos a Trypanosoma vivax se encuentra en animales de razas importadas, principalmente Holstein, Pardo Suizo, y otras de origen Bos indicus. Esto puede atribuirse a que son animales altamente susceptibles y a las prdidas de la con- dicin de tripanotolerancia, atribuible a los cruzamientos, como ha sido evidenciado en pases africanos (Tamasaukas et al, 2010). DETERMINACIN DE TRIPANOTOLERANCIA La gran variabilidad observada en los animales utilizados en los sistemas de produccin doble propsito en el llano venezolano, implica responder Qu tipo de animal sera el ms apropiado para las condiciones agroclimticas particulares de cada regin? Este hecho coincide con la poltica del Estado venezolano de rescatar el ganado criollo autctono, que responde a las inclemencias del trpico. En ese caso, una seleccin por tripanotolerancia, aunada con un sistema de buenas prcticas gana- deras, conduciran al incremento de un rebao nacional con mayores probabilidades de sobrevivencia en comparacin con la de los animales importados, en las zonas ms susceptibles. Entre los avances en la investigacin para la determinacin de la tripa- notolerancia en animales DP se ha sugerido la evaluacin de estrategias biotecnolgi- cas de gentica molecular, como los marcadores moleculares para la identificacin de QTLs (Quantitative Trait Locus), para su inclusin en hembras y machos mejora- dores del rebao DP en los llanos centrales. Estudios derivados de la caracterizacin de los marcadores fenotpicos (hemti- cos, clnicos, parasitolgicos, bioqumicos, inmunoserolgicos e identificacin del tipo animal por caracteres zoomtricos) han mostrado resultados muy alentadores no solo para el control de la tripanosomosis, sino tambin para su utilizacin en las estra- tegias de manejo reproductivo y mejoramiento animal gentico (Agudo et al, 2009). Con la caracterizacin biomolecular de las cepas de T. vivax, por ejemplo, utili- zando la tcnica de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR, Polimerase Chain Reaction) favorecera la determinacin de la variabilidad patognica y la epidemiolo- ga del parsito (Tamasaukas, 1995; Reinfenberg et al., 1997), el estudio del polimor- fismo gentico de caracteres heredables, la identificacin y caracterizacin de marca- dores moleculares para tripanotolerancia (Dirie et al., 1993; Morlais et al., 2001; Bissa- dou, 2002; van der Waaij et al., 2003). De esa forma, se avanzara tcnica y cientfica- mente para establecer los rboles filognicos de T. vivax y derivar los estuches de diag- nstico con las diversas cepas activas, regionalizadas y bien definidas para cada am- biente, pues la adopcin de mtodos de estandarizacin y de control estadstico de los procesos, contribuyen a la generacin de productos de calidad y estabilidad para su uso masivo. Se ha logrado evidenciar que, los parsitos responden a seales del hospedador para controlar su crecimiento y proliferacin, a las cuales responde el parsito con otras seales para establecer y mantener la infeccin y causar la enfermedad en los animales tripanosusceptibles (Bisadou, 2002; van der Waaij et al., 2003). Vincendeau &Bouteille (2006) indican que, las modificaciones en el sistema inmune son variadas, 398 / Rita Tamasaukas & Jazmn Florio-Luis de Pineda el principal material antignico, la gliocoprotena de superficie o VSG, est asociada a la evasin de la respuesta inmune, sea por disfuncin en las redes de citocinas como en la produccin de anticuerpos. Por otra parte, el uso de antgenos heterlogos (T. evansi) para el diagnstico de tripanosomiasis bovina ha sido aceptado, por lo prctico de su produccin (mediante infecciones experimentales en ratas) y debido a su reactividad cruzada con anticuer- pos derivados de la respuesta inmune ante una exposicin a T. vivax (Rossi et al., 2008); adems, la propensin es a desarrollar tcnicas con antgenos homlogos para el diagnstico especie-especfico para incrementar la eficiencia de la especificidad del diagnstico. Dentro de estas estrategias, sin duda alguna, las que ofrecen un futuro ms pro- misorio en trminos mediatos es el desarrollo de tcnicas de inmuno-ensayo enzim- tico (ELISA), con apoyo de la PCRpara la obtencin de los antgenos puros de calidad de T. vivax (Tamasaukas et al., 2010; Tamasaukas, 2011a). Estos estudios, aunque bien orientados por la evidencia previa de reacciones cruzadas entre T. vivax y T. evansi no han logrado el cometido de obtener resultados satisfactorios por la prdida en la espe- cificidad y en la confiabilidad de los valores predictivos de ELISA, al usar a T. evansi como fuente de antgeno para el diagnstico de T. vivax en rebaos bovinos. La identificacin de los principales antgenos de trypanosomas y su produccin como molculas recombinantes o pptidos sintticos, conduce al desarrollo y valida- cin de nuevas pruebas basadas en el empleo de molculas definidas. En la actualidad, se siguen trabajos para mejorar la especificidad y sensibilidad de las pruebas serolgi- cas o indirectas para la determinacin de anticuerpos (Ac-ELISA), con la produccin eficiente de Ac-especie-especficos, y poder alcanzar un alto nivel de estandarizacin que an no se ha logrado mediante la utilizacin de extractos totales de parsitos (OIE, 2004; Tamasaukas, 2011). Tanto la inmunofluorescencia indirecta (IFI) como el Ac-ELISA son pruebas de deteccin de anticuerpos con altos valores de sensibilidad y especificidad, aun- que variables segn el tipo de antgeno utilizado. Ambas detectan respuestas inmu- nitarias a infecciones actuales y pasadas y pueden, en consecuencia, proporcionar solamente un diagnstico preliminar de infeccin activa, al determinar los ttulos de anticuerpos. El inmunodiagnstico necesita un equipo costoso y sofisticado y ex- periencia, la que no est siempre disponible. Debe llevarse a cabo en laboratorios es- pecializados, existiendo un amplio atraso entre el muestreo real y la disponibilidad de los resultados. Sin embargo, el Ac-ELISApara anticuerpos se presta a un alto grado de automa- tizacin y estandarizacin. La colecta y el almacenamiento de muestras pueden reali- zarse con facilidad mediante el uso de papeles de filtro. Todos estos factores hacen del ELISA para anticuerpos una prueba muy til para determinar a gran escala la distri- bucin de tripanosomosis (OIE, 2004). El Ac-ELISA homlogo, con extractos purifi- cados especie-especficos de T. vivax resulta ms eficiente para el diagnstico serol- gico de la tripanosomosis, tal como se ha determinado en estudios en campo con diag- nsticos parasitolgicos directos (frotis sanguneo o coloreados, Quantitative Buffy Coat o QBC en tubos capilares QBC IDEXX) e indirectos (IFI, Ac-ELISA) (Ta- masaukas et al., 2012). Logros & Desafos de la Ganadera Doble Propsito. 2014 Avances y perspectivas sobre diagnstico y control estratgico de la tripanosomosis en GDP 399 Para el diagnstico serolgico de la tripanosomosis, en los proyectos biotecno- lgicos que abarcan procesos de identificacin y caracterizacin del tipo animal tripa- notolerante que precisa determinar valores de seropositividad (entre los criterios para la caracterizacin fenotpica), se requiere el uso de tcnicas ms efectivas para ello, como lo es el Ac-ELISA, con antgenos especie-especficos apoyados con PCR, a fines de la validacin regional y certificacin internacional de la tcnica, segn las normas de la Organizacin Internacional para la Sanidad Animal (OIE, 2005). La caracterizacin fenotpica de la tripanotolerancia es un paso previo para lue- go realizar la caracterizacin molecular con el fin de identificar la presencia de los ge- nes que codifican para esa condicin. Adems permitir avanzar en el conocimiento de la presin de seleccin de reproductores que demuestren esta carga gentica, en es- pecial, en los programas de uso sustentable y de preservacin de recursos zoogenti- cos autctonos, como son las razas criollas. Para diagnstico de rutina, las perspectivas se orientan a la evaluacin de pro- ductos antignicos de T. vivax para protocolos de ELISA y el desarrollo de los estu- ches de ELISApara el diagnstico certero y precoz de esta afeccin hemotrpica; ade- ms del inmunoensayo de capa fina (ICF) que ser utilizada en el mejoramiento de las medidas de control y seguimiento epidemiolgico a nivel nacional e internacional, al ser elaborados con las principales cepas regionales del parsito con su pedigre, susti- tuyendo tcnicas diagnsticas tradicionales como la observacin directa del parsito. La especificidad de las tcnicas de ELISAse refuerza en gran medida por la calidad de los antgenos y reactivos que se utilicen. Para ELISA indirecto (Ac-ELISA), uno de los requerimientos crticos es la observancia del procedimiento de identificacin y se- leccin del antgeno (T. vivax) a usar en la sensibilizacin de la placa; para ello, una herramienta biotecnolgica que blinda la produccin de estos antgenos, es la tcnica de PCR (Tamasaukas et al., 2012). Partiendo de las bases metodolgicas de los trabajos antes mencionados, se eva- lan tres productos antignicos de T. vivax: extracto crudo total, extracto soluble pu- rificado fraccionado y extracto antignico desnaturalizado, todos derivados de tripa- nosomas procclicos y/o metacclicos, aislados, estabilizados o clones, usados para for- matos de ELISAen tres sistemas: sangre total (slido, en papel filtro), plasma y/o sue- ro (lquido) (Tamasaukas et al., 2012). Estos materiales son valorados segn los par- metros de sensibilidad, especificidad, valor predictivo, ndice de kappa (k), ndice de concordancia, prueba de Mac Nemar, repetibilidad intra-ensayo, repetibilidad inter- ensayo (Ortiz-Losada et al., 2007; Tamasaukas et al., 2012). Por otra parte, la evaluacin de la respuesta inmunitaria a la tripanosomosis tambin es una perspectiva objeto de estudio, ya que se ha indicado que las respuestas de citocinas VSG-especficas asociadas con la resistencia a la tripanosomosis africana murina son dependientes de la fase de la infeccin, con las respuestas de citoquinas de tipo I, crticas durante la fase temprana de la infeccin, mientras que las respuestas de citocinas de tipo II parecen ser ms importante durante las fases tardas de la infec- cin y crnicas de la enfermedad (Namangala et al., 2009). Debido a las similitudes notables en el curso de la infeccin con PLC(-/-) (phospholipase-C-deficient Trypanosoma brucei brucei) en ratones B6B-F1 (ratones tri- panotolerantes C57BL/6 x BALB/c-F1) con la de los bovinos NDama tripanotoleran- 400 / Rita Tamasaukas & Jazmn Florio-Luis de Pineda tes infectados naturalmente con T. congolense, representa un modelo adecuado para estudiar el curso de las respuestas inmunitarias de la infeccin durante la tripanoso- miasis bovina (Namangala et al., 2009). En la actualidad, en Espaa, se est desarrollando una investigacin en el Servi- cio Regional de Investigacin y Desarrollo Agroalimentario (SERIDA), la cual pre- tende la resecuenciacin del receptor de la quimiocina CXCtipo 4 XCR4- relaciona- do con la inmunidad y aptitud (fitness) con dos objetivos: establecer los patrones evolutivos y los efectos de seleccin de este gen, comparando muestras de Bos taurus europeo y africano con ganado cebuino (B. indicus) y otros miembros de la Tribu Bo- vini, incluyendo gaur-B. frontalis, y establecer relaciones de asociacin entre los poli- morfismos encontrados con la estrongilosis y la tripanotolerancia. Para ello, se contar con muestras obtenidas en campo, provenientes de ganado africano y fenotipadas para la presencia de tripanosomas circulantes en sangre. Se aplicarn tecnologas de captura de secuencias en arreglos de fase lquida y posterior anlisis de las secuencias mediante secuenciadores de alto rendimiento. Esta tecnolo- ga, que permite una resecuenciacin simultnea y econmica de varios miles de pares de bases del genoma, est indicada en aplicaciones finalistas para la deteccin de mu- taciones en regiones concretas del genoma, ms que en el genoma completo (Goya- che-Goi, 2011). La raza etope Sheko fue reportada como tripanotolerante (Stein et al., 2011) y habindose sealada la relacin de los locus Tir1, Tir2 y Tir3 con la tripanotolerancia (Nganga et al., 2010). En ganado Criollo Limonero (Bos taurus), las evidencias de cam- po sugieren la presencia de resistencia natural a hemoparsitos (Esquivel-Villalobos, 2012). La caracterizacin fenotpica de razas locales (o razas candidato) y su compara- cin con otras razas susceptibles presentes en el mismo mbito geogrfico, es el reto ideal. Se han identificado cambios temporales en la expresin gnica de las clulas mononucleares en sangre perifrica de hospedadores infectados por tripanosoma du- rante la progresin de la enfermedad. Estas diferencias en mayor grado existen entre bovinos de razas tripanotolerantes y las tripanosusceptibles. Utilizando un ensayo de microarreglos con un oligonucletido largo y su validacin por PCR cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR: quantitative Real Time-Polimerase Chain Reaction) fueron analizados los genes de expresin de aquellas clulas en bovinos infectados por T. con- golense a lo largo de 34 das del curso de la infeccin (OGorman et al., 2009). Los modelos de ratn para estudios de tripanosomosis han proporcionado ideas fundamentales en los mecanismos de variacin antignica, como la interaccin de los tripanosomas con el compartimiento de clulas B-adaptativas, el impacto de la inmu- nidad innata en complicaciones asociadas de la enfermedad y la influencia de la saliva de la mosca tsets en el inicio de la infeccin. Hasta la fecha, la mayora de estos datos obtenidos de infecciones experimentales an no se han validado en infecciones natu- rales. Sin embargo, los patrones de citoquinas que regulan la interaccin hospeda- dor-parsito ya han mostrado pruebas relevantes. Por ejemplo, fueron validados en ganado, la relacin entre la VSG (Variant Surface Glycoprotein: glicoprotena varia- ble de superficie) y la induccin de TNF (Trypanolytic factors: factores tripanolti- cos) y el rol posterior del TNF en el inicio de la anemia asociada con la inflamacin. Logros & Desafos de la Ganadera Doble Propsito. 2014 Avances y perspectivas sobre diagnstico y control estratgico de la tripanosomosis en GDP 401 Por otra parte, la implicacin del equilibrio IFN-c (Interfern-c)/IL-10 (Interleukina 10) en el control de las cargas parasitarias y su patogenicidad, han sido reportadas en la tripanosomosis africana humana (HAT). Por el contrario, las observaciones experi- mentales relacionadas con la disfuncin de las clulas B y la ineficacia de la vacuna podra ser muy relevante para las infecciones naturales, pero an no se han explorado en condiciones de campo (Magez & Caljon, 2011). INMUNIDAD A LOS TRIPANOSOMAS, UN DESAFO EN EL CAM- PO TERAPUTICO Teniendo en cuenta las recientes herramientas en el campo de la inmunologa innata, que incluye el uso de eliminacin de genes o modelos de animales transgni- cos, los anticuerpos monoclonales dirigidos a molculas especficas de inters y al uso de agonistas/antagonistas especficos, en un futuro cercano podra ser interesante abordar una serie de preguntas como una prueba directa de la contribucin de los di- versos componentes de la inmunidad innata hacia la tripanosomosis. En el campo te- raputico de la tripanosomosis, Namangala (2012) formula unas preguntas relaciona- das con componentes de la inmunidad a tripanosomas. Las interrogantes que se sea- lan a continuacin tienen un potencial teraputico y constituyen un desafo para me- jorar el control de la tripanosomosis humana, as como las interrelaciones con las in- fecciones por especies de Trypanosoma en animales. 1. Cmo interacta la T. brucei gambiense con la inmunidad innata de los primates para resistir la actividad ltica de la Apolipoprotena L1 (APOL-1) y las toxinas relacionadas y cmo hace que el mecanismo difiera de la evasin inmune SRA (SRA: trypanosome lysosomal protein)-mediada por T. brucei. rhodesiense? 2. Cul es el mecanismo de la absorcin por los tripanosomas del TLF2 (Trypano- some Lytic Factor 2: factor tripanoltico tipo 2)? 3. Cul es el papel directo del sistema del Complemento, en particular la va de la unin m, anano-lectina de la activacin del complemento, durante la tripanoso- mosis? 4. Dado que los Tip-DCs han sido reportados como patognicos durante la tripano- somosis. Cmo los Tip-DCs difieren de las DCs convencionales en trminos de su funcin durante la tripanosomosis? Cul (es) tipo (s) celular (es) est (n) invo- lucrada (s) en la produccin de mediadores pro y anti-inflamatorios asociados con tripanotolerancia; cules estn involucrados en la hiperproduccin de estos mediadores que conducen a tripanosusceptibilidad? Qu conduce a la activa- cin de tales clulas patognicas durante la tripanosomosis? 5. La tripanotolerancia parece requerir un cambio secuencial de la produccin de M1 (monocytic cell 1: clula monoctica tipo 1) a M2 (monocytic cell 2: clula monoctica tipo 2). Qu factores median este cambio? Se produce M2 durante las infecciones naturales con tripanosomas? 6. Hace poco se report (Courtin et al., 2006) la existencia de polimorfismo en los ge- nes TNF-a (Tumour Necrosis Factor alfa: factor alfa de necrosis tumoral) y IL- 10 (Interleukina 10) los cuales juegan un papel crucial en la determinacin de la resistencia a la HAT (Human African Trypanosomosis). Interesa conocer: Hay 402 / Rita Tamasaukas & Jazmn Florio-Luis de Pineda polimorfismo en dichos genes de inters como el TNF-a, NO (Nitric oxide: xi- do ntrico), IL- 10, IFN-c (Interfern c) durante modelos experimentales y natu- rales de la tripanosomosis? 7. Cul es el papel preciso de las clulas NK(Natural Killer) en la tripanosomosis? CONCLUSIONES La tripanosomosis bovina es una afeccin hemotrpica de importancia econ- mica en los sistemas de produccin con rumiantes, caracterizada como una enferme- dad endmica y de distribucin espacial en todo el territorio venezolano con valores variables de prevalencia y seroprevalencia segn la zona agroecolgica y la poca del ao. La tripanotolerancia es una condicin de base gentica que posibilita la identifi- cacin y la caracterizacin fenotpica y molecular de animales portadores de los genes que la codifican. Es de gran utilidad para establecer estrategias de mejoramiento ge- ntico de las razas doble propsito en Venezuela y para derivar en programas de re- produccin y seleccin sustentables con nfasis en los llanos venezolanos, donde la tripanosomosis sigue siendo una enfermedad de importancia econmica. La importancia en la identificacin de animales tripanotolerantes radica princi- palmente en: a) la tripanosomosis es un enfermedad endmica en Venezuela; b) se presenta en distintas zonas agroecolgicas del pas; c) no hay vacuna disponible para su prevencin; d) las drogas utilizadas para su profilaxis son altamente txicas, costo- sas y en algunos casos susceptibles de fraude; e) las drogas dejan residuos en la leche, carne y al ambiente; f) la aparicin de resistencia a las drogas disponibles en el merca- do, sobre todo por subdosificacin; g) es posible lograr disminuir los costos de pro- duccin, en especial en pequeos sistemas de produccin ganaderos; h) la seleccin por tolerancia es factible aplicarla porque la tripanosomosis no es una zoonosis; i) la necesidad de preservacin y uso sustentable de recursos zoogenticos autctonos. Las tcnicas de gentica molecular estn disponibles para su ejecucin en los re- baos ganaderos doble propsito, con la finalidad de identificar genes deseables en la poblacin bovina y mitigar los efectos del cambio climtico, sobre las razas estableci- das (no autctonas), con menos posibilidades de soportar las inclemencias de las con- diciones climticas actuales y futuras. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS Agudo L, Tamasaukas R, Silva A, Snchez J, Ron J, Fernndez M, Florio J, Vintimilla M, Colmenares O, Rivera S. 2009. Tipo bovino trypanotolerante y trypanosusceptible doble propsito en la regin de los llanos Centrales de Venezuela. I: Identificacin y ca- racterizacin fenotpica. REDVET. Rev. Electrn. Vet. Barbosa L, Restrero P. La Raza Senepol. Zoociencia. UDCA. Colombia. Revista Virtual Zootecnia. Bissadou K. 2002. Contribution l tude de la diversit gntique de populations bovi- nes au Bnin. Mmoire prsent pour obtenir le diplme dingnieur agronome zoote- chnicien. Ecole Superieure dAgronomie. Universit de Lome. CIRDES. Burkina-Faso, frica. 110 pp. Logros & Desafos de la Ganadera Doble Propsito. 2014 Avances y perspectivas sobre diagnstico y control estratgico de la tripanosomosis en GDP 403 Bishop S, Jong M, Gray D. 2002. Opportunities for incorporating genetic elements into the management of farm animal disease: Policy Issues. FAO. Background Study. N 18. 39 pp. Cassalett E, Parra A, Baldrich R. 2011. Diagnstico y caracterizacin molecular de infec- ciones naturales por Trypanosoma spp. en bovinos de la Orinoqua Colombiana Corpoica. Cienc Tecnol Agropecu 12 (1): 86-91. CIP-UPWARD. 2003. Conservacin y uso sostenible de la biodiversidad agrcola. Libro de Consulta. Entendiendo la diversidad agrcola. Tomo I. Centro Internacional de la Papa. Perspectivas de los Usuarios con la Investigacin y el Desarrollo Agrcola. Los Ba- os, Laguna, Filipinas. 3 Tomos: 136. dIeteren G, Authie E, Wissocq N, Murray M. 1998. Trypanotolerance, and option for sustainable livestock production in areas at risk from trypanosomiasis. Rev Sci Tech 17 (1): 154-175. Dirie M, Otte M, Thatthi R, Gardiner P. 1993. Comparative studies of Trypanosoma Duttonella vivax. Parasitol. 106: 21-29. Esquivel-Villalobos C. 2012. La raza, el pelo y la piel en funcin del bienestar animal. Mundo Pecuario, VIII (1): 73-85. FAO. 2008. Informe Pecuario. FAO (Ed.). Roma, Italia. 92 pp. Gonzlez J, Melndez R. 2007. Seroprevalencia de la tripanosomosis y anaplasmosis bo- vina en el Municipio Juan Jos Mora del estado Carabobo, Venezuela, mediante la tcni- ca de ELISA. Rev Cient FCV-LUZ 17 (5): 1-7. Florio-Luis J, Tamasaukas R, Agudo L. 2011. La Trypanotolerancia en Ganadera Bovi- na en la Repblica Bolivariana de Venezuela: nfasis Bovinos Criollos. Actas Iberoam Conserv Anim. Vol 1. ISSN (ON LINE) 2253-9727. Gachohi J, Bett B, Murilla G. 2009. Factors influencing the prevalence of trypanosomo- sis in Orma Boran (trypanotolerant) and Teso zebu (trypanosusceptible) cattle crosses in Teso District, western Kenya. Livest Res Rural Dev 21 (12). Goyache-Goi F. 2011. Caracterizacin del gen CXCR4 bovino y su promotor: filogenia en la tribu bovini, deteccin de seleccin y asociacin con la tripanotolerancia. Proyectos SERIDA. Hill E, OGorman G, Agaba M, Gibson J, Hanotte O, Kemp S, Naessens J, Coussens P, MacHugh D. 2005. Understanding bovine trypanosomiasis and trypanotolerance: the promise of functional genomics. Vet Inmunlog Inmunopath 105: 247-258. Landaeta-Hernndez A. 2008. Ganado Criollo. Evolucin y Perspectivas. Universidad del Zulia, Facultad de Ciencias Veterinarias, Unidad de Investigaciones Zootcnicas, Maracaibo. Venezuela. Rancho Carora Blogspot. Magez S, Caljon G. 2011. Mouse models for pathogenic African trypanosomes: unrave- lling the immunology of hostparasitevector interactions. Parasite Immunology 33 (8): 423-442. Maas P. 2011. Aurochs - Bos primigenius. In: TSEW(2014). The Sixth Extinction Web- site. Miranda M, Gonzales JL. 2010. Evaluacin epidemiolgica de la tripanosomiasis bovina en el Pantanal de San Matas. Tesis Mdico Veterinario Zootecnista. Bolivia. 68pp. Morlais I, Ravel S, Grbaut P, Dumas V, Cuny G. 2001. New molecular marker for Trypanosoma (Duttonella) vivax identification. Acta Tropical 80 (3): 207-213. 404 / Rita Tamasaukas & Jazmn Florio-Luis de Pineda Namangala B, De Baetselier P, Beschin A. 2009. Both Type-I and Type-II Responses Contribute to Murine Trypanotolerance. J Vet Med Sci 71 (3): 313-318. Nganga J, Soller M, Iraqi F. 2010. High resolution mapping of trypanosomosis resistan- ce loci Tir2 and Tir3 using F12 advanced intercross lines with major locus Tir1 fixed for the susceptible allele. BMC Genomics. 11: 394. doi: 10.1186/1471-2164-11-394. OIE. 2004. Organizacin Internacional para la Sanidad Animal. Manual de la OIE sobre animales terrestres 2004. OIE. 2005. Oficina Internacional de Epizootias (OIE). Validacin y certificacin de pruebas de diagnstico. OGorman G, Park S, Hill W, Meade K, Coussens P, Agaba M, Naessens J, Kemp J, Ma- cHugh D. 2009. Transcriptional profiling of cattle infected with Trypanosoma congo- lense highlights gene expression signatures underlying trypanotolerance and trypanosusceptibility. BMC Genomics. 1 (10): 207. Ortz-Losada E, Silva-Cabrera E; Izquierdo-Marquz M. 2007. Normalizacin y evalua- cin del inmunoensayo ABICAP-BRUpara el diagnstico serolgico de la brucelosis bo- vina. REDVET Rev. electrn. Vet VIII (4). Abril. Reifenberg J, Solano P, Cuisance D, Duvallet G. 1997. Contribution of the PCR techni- que for a better understanding of the epidemiology of animal trypanosomosis in West Africa. In: Proc first intern Conf on Salivarian trypanosomes (FAO animal production and health paper 136). Tryplink-L discussion list 9-14 December 1996. Rossi M, Sigales S, Zapata D. 2008. Inmunoensayo de capa fina (ICF) en el serodiagns- tico de la tripanosomiasis bovina causada por el Trypanosoma vivax. Rev Cienc Vet 49 (2): 81-89. San Juan-Lions CF. 2010. Enfermedades causadas por hemoparsitos en ganado bovino. Revisin. Fac Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad de Crdoba. Berstegui. Espaa. 43 pp. Stein J. 2011. Trypanotolerance and phenotypic characteristics of four Ethiopian cattle breeds. Doctoral Thesis. Swedish University of Agricultural Sciences. Uppsala, Sweden. 63pp. Stein J, Ayalew W, Rege E, Mulatu W, Lemecha H, Tadesse Y, Tekle T, Philipsson J. 2011. Trypanosomosis and phenotypic features of four indigenous cattle breeds in an Ethiopian field study. Vet Parasitol 31:40-47. Tamasaukas R. 1995. Estudio General de la Trypanosomiasis Bovina. Univ Nac Exp R- mulo Gallegos, San Juan de los Morros, Estado Gurico, Venezuela. Trabajo de Ascenso a la Categora Titular. 342 pp. Tamasaukas R. 2008. Tetraloga hemoparasitaria en ganadera doble propsito venezola- na. En: Desarrollo Sostenible de Ganadera Doble Propsito. 2008. C Gonzlez-Stagna- ro, N Madrid Bury, E Soto Belloso (eds). Ediciones Astro Data, Maracaibo. XXVII: 314-325. Tamasaukas R, Roa N, Ruiz H, Rodrguez I, Baldizn A, Aso P. 1998. Valores hematol- gicos en infecciones naturales con Trypanosoma vivax en fincas bovinas del Estado Guri- co, Venezuela. Act Cient Ven. 49 (Supl. 2): 336. Tamasaukas R, Aguirre A, Ron J, Roa N, Cobo M. 2000. Tetraloga hemoparasitaria en algunas fincas bovinas del municipio Santa Rita, estado Gurico, Venezuela. Rev Fac Ciencias Veterinarias. UCV. 41 (4): 101-108. Logros & Desafos de la Ganadera Doble Propsito. 2014 Avances y perspectivas sobre diagnstico y control estratgico de la tripanosomosis en GDP 405 Tamasaukas R, Agudo-Castellanos L, Silva-Ravelo A, Florio-Luis J, Vintimilla-Ta- masaukas M, Rivera-Pirela S. 2010. Hemoparasitosis en ganadera doble propsito vene- zolana, diagnstico y control: una revisin. Agron Mesoamerica 21 (1): 367-381. Tamasaukas R. 2011a. Evaluacin de productos antignicos especie-especficos de Trypanosoma vivax para su aplicacin en el diagnstico por ELISA de la trypanosomo- sis bovina. Proyecto Tesis Doctorado en Ciencias, Postgrado Facultad de Ciencias Vete- rinarias. Universidad Central de Venezuela. Maracay, Aragua, Venezuela.78 pp. Tamasaukas R. 2011b. Hemoparasitosis en ganadera doble propsito de Venezuela. Se- minario I Doctorado en Ciencia, Postgrado en Medicina Veterinaria. Facultad de Cien- cias Veterinarias. Universidad Central de Venezuela. Maracay, Aragua, Venezuela. 32 pp. Tamasaukas R, Florio F, Cobo M, Rivera S. 2012. Evaluacin de un extracto antignico especie-especfico de Trypanosoma vivax en el diagnstico por ELISAde la trypanosomo- sis bovina. I Parte. Valores hematolgicos, de prevalencia y de seroprevalencia. Jornadas de Investigacin. FCV, UCV. Universidad Central de Venezuela. Maracay. 28-30 Junio 2012. Van der Waaij E, Hanotte O, Van Arendonk J, Kemp S, Kennedy D, Gibson J, Teale A. 2003. Population parameters for traits defining trypanotolerance in an F2 cross of NDama and Boran Catte. Live Prod Sci 84 (3): 219-230. Vincendeau P, Bouteille B. 2006. Immunology and immunopathology of African trypa- nosomiasis. An Acad Bras Cienc 78 (4): 645-665. 406 / Rita Tamasaukas & Jazmn Florio-Luis de Pineda