Red de Revistas Cientficas de Amrica Latina, el Caribe, Espaa y Portugal

Sistema de Informacin Cientfica

Irma Guillermina Czares Mndez, Fernando de la Jara Alcocer, Anglica Rodrguez Dorantes, Mateo
Armando Cadena Hinojosa
Comparacin de Patrones Electroforticos de Protenas e Isoenzimas en Tubrculos Sanos y con Sntomas de
Punta Morada de Siete Variedades de Papa (Solanum tuberosum L.)
Revista Mexicana de Fitopatologa, vol. 21, nm. 2, julio-diciembre, 2003, pp. 102-108,
Sociedad Mexicana de Fitopatologa, A.C.
Mxico
Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=61221202

Revista Mexicana de Fitopatologa,

ISSN (Versin impresa): 0185-3309
mrlegarreta@prodigy.net.mx
Sociedad Mexicana de Fitopatologa, A.C.
Mxico

Cmo citar?

Fascculo completo

Ms informacin del artculo

Pgina de la revista

www.redalyc.org
Proyecto acadmico sin fines de lucro, desarrollado bajo la iniciativa de acceso abierto

102

/ Volumen 21, Nmero 2, 2003

Comparacin de Patrones Electroforticos de Protenas e

Isoenzimas en Tubrculos Sanos y con Sntomas de
Punta Morada de Siete Variedades de Papa
(Solanum tuberosum L.)
Irma Guillermina Czares-Mndez, Fernando de la Jara-Alcocer, *Anglica Mara
Rodrguez-Dorantes, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas (ENCB-IPN), Lab. de
Nematologa Agrcola, Depto. de Parasitologa, *Lab. de Fisiologa Vegetal, Depto. de
Botnica, Prolongacin de Carpio y Plan de Ayala, Casco de Sto. Toms, Col. Popotla,
Mxico, D.F. CP 11340; y Mateo Armando Cadena-Hinojosa, Instituto Nacional de
Investigaciones Forestales Agrcolas y Pecuarias (INIFAP), Campo Experimental Valle
de Mxico (CEVAMEX), Apdo. Postal 10, km 18.5 Carr. Mxico-Lechera, Chapingo,
Edo. de Mxico CP 56230. Correspondencia: ircazares@yahoo.com
(Recibido: Septiembre 10, 2002 Aceptado: Diciembre 30, 2002)
Czares-Mndez, I.G., de la Jara-Alcocer, F., RodrguezDorantes, A.M., y Cadena-Hinojosa, M.A. 2003.
Comparacin de patrones electroforticos de protenas e
isoenzimas en tubrculos sanos y con sntomas de punta
morada de siete variedades de papa (Solanum tuberosum L.).
Revista Mexicana de Fitopatologa 21:102-108.
Resumen. Se investigaron posibles diferencias en la presencia
y concentracin de algunos de los componentes bioqumicos
presentes en los tubrculos sanos y enfermos con punta
morada (PMP) de siete variedades de papa (Solanum
tuberosum), determinando y comparando los patrones
electroforticos de las protenas totales, lo que revel
protenas de bajo peso molecular, y de las isoenzimas de
esterasas, catalasas y peroxidasas. Los resultados obtenidos
mostraron que el nmero de protenas, la presencia de
protenas de bajo peso molecular, los patrones isoenzimticos
de esterasas y la actividad de las peroxidasas, proporcionan
informacin que permite diferenciar los tubrculos sanos de
los que presentan sntomas de PMP.
Palabras clave adicionales: Fitoplasmas, esterasas, catalasas,
peroxidasas.
Abstract. The possible difference in occurrence and
concentration of some biochemical components in healthy
potato (Solanum tuberosum) tubers, and in those affected with
potato purple top (PPT) were investigated. Protein
electrophoretic patterns of total proteins were determined and
compared, revealing low molecular weight proteins, and
isozymes esterases, catalases and peroxidases. The results
obtained show that the number of proteins, the presence of
low molecular weight proteins, the isoenzymatic esterase

patterns, and peroxidase activity, provide information that

enables the differentiation of healthy from affected tubers
with ppt.
Additional keywords: Phytoplasmas, esterases, catalases,
peroxidases.
La punta morada (PMP) de la papa (Solanum tuberosum L.)
en Mxico es una enfermedad asociada etiolgicamente a
fitoplasmas (Cadena-Hinojosa, 1974; Almeyda-Len et al.,
1999) parecidos a los clasificados como 16 SrI y 16SrII (Lee
et al., 1998; Leyva y Martnez, 2001), transmitidos a la planta
por insectos de la familia Cicadellidae (Zavala-Quintana y
Cadena-Hinojosa, 1998). Las plantas de papa afectadas
presentan alteraciones fisiolgicas que disminuyen la calidad
y rendimiento de los tubrculos, adems, dichos tubrculos
no se pueden utilizar como semilla. En la actualidad, esta
patologa se presenta en la mayora de las zonas paperas del
pas, con incidencia de hasta 60% en algunas ocasiones,
afectando negativamente el rendimiento y la calidad del
producto (Cadena-Hinojosa, 1993). En trabajos previos,
Mahmoun et al. (1984), estudiaron la relacin existente entre
los patrones isoenzimticos de las amilasas, esterasas y la
aspartato amino transferasa, as como los marcadores
morfolgicos y patrones electroforticos de protenas de
organismos animales y vegetales, para la identificacin de
variedades filogentica y taxonmicamente relacionados. Se
ha observado que la infeccin por patgenos conduce a la
rpida formacin extracelular de agentes oxidantes (Doke,
1985; Medhy, 1994), donde los sistemas enzimticos de las
catalasas y de las peroxidasas son los responsables de la
eliminacin del perxido de hidrgeno en las plantas. Las

Revista Mexicana de FITOPATOLOGIA/

catalasas convierten el perxido de hidrgeno en agua y
oxgeno, mientras que las peroxidasas convierten el perxido
de hidrgeno en agua con la ayuda de un sustrato reductor.
Existen evidencias disponibles que indican que la capacidad
de controlar los niveles de perxido de hidrgeno es uno de
los factores que contribuyen a la resistencia contra varios
agentes biticos y abiticos estresantes de las plantas
(Willekens et al., 1995). Los objetivos de este trabajo fueron:
a) determinar algunas alteraciones fisiolgicas en tubrculos
de papa sanos y afectados con PMP, frescos y almacenados,
con base en sus patrones electroforticos de las protenas
totales, e isoenzimas de esterasas, catalasas y peroxidasas;
b) comparar los patrones electroforticos de tubrculos sanos
y afectados con PMP, frescos y almacenados, y c) determinar
si las posibles diferencias entre los patrones electroforticos
de b) podran ser tiles para diagnosticar la enfermedad antes
de la aparicin de sntomas.
MATERIALES Y MTODOS
Material biolgico. Se utilizaron tubrculos sanos (con brote
normal) y tubrculos afectados de PMP, de siete variedades
proporcionadas por el Instituto Nacional de Investigaciones
Forestales, Agrcolas y Pecuarias (INIFAP), Campo
Experimental Valle de Mxico (CEVAMEX) (Cuadro 1).
Todas las pruebas se efectuaron en tubrculos frescos y
almacenados (5-6 meses), pero como no hubo diferencia
significativa (t-pareada p > 0.5) entre stos, los resultados
que se presentan son los de tubrculos frescos, sanos, y con
sntomas de PMP.
Extraccin de la muestra. Los extractos crudos de tubrculos
de papa se prepararon colocando 1.0 g del tejido sin epidermis
en un tubo Eppendorf sobre hielo. Se agregaron 0.2 ml de
regulador de fosfatos 0.02M, pH 7.2, 25 mg de vidrio molido,
y luego, se adicionaron tres inhibidores de proteasas (5l de
EDTA-cido etilen diamino tetractico-200 mM, 10l de
PMSF -fenil-metil-sulfonil-floruro- 100 mM y 10 l de
pHMB -cido para-hidroximercuribenzico- 100 mM). El
tejido se macer durante 30 seg y se centrifug a 20,000 g
durante 15 min a 4C. El sobrenadante se diluy con solucin

Cuadro 1. Variedades de papa (Solanum tuberosum) proporcionados

por el Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y
Pecuarias, Campo Experimental Valle de Mxico, y determinacin
de sntomas observados en los tubrculos.
Variedad
Sntomasz
Localidad
Alpha
Gigant
Michoacn
Nortea
Sangema
Zafiro
06-Toll

Sntoma de brote dbil y L-M

Sntoma de brote dbil y L-M
No brotada y M
Sntoma de brote fino y M-F
No brotada y M
No brotada y M
Brote dbil y L-M

Cedro Calimaya
Cedro Calimaya
Sierra de Texcoco
Sierra de Texcoco
Sierra de Texcoco
Sierra de Texcoco
Sierra de Texcoco

L, M y F, grado de pardeamiento que presentan los tubrculos de

algunas variedades, segn su susceptibilidad o resistencia a la punta
morada de la papa; L-M = de ligero a moderado; M = moderado;
M-F = de moderado a fuerte.

103

de glicerina (1:7 con regulador de fosfatos 0.02M pH 7.2)

1:2, depositando alcuotas de 20 l en tubos de Eppendorf
que se guardaron a -70C hasta su uso.
Anlisis electrofortico. La separacin electrofortica de
protenas se realiz segn Laemmli (1970) en geles de
poliacrilamida, con el gel concentrador al 4% T y el de
corrimiento al 10%T. Los marcadores de peso molecular
empleados fueron: -macroglobulina de 180 kDa, galactosidasa de 116 kDa, fructosa 6-fosfato cinasa de 84
kDa, piruvato cinasa de 58 kDa, fumarasa de 48.5 kDa,
deshidrogenasa lctica de 36.5 kDa y triosafosfato isomerasa
de 26.6 kDa. Los geles se tieron con azul de Coomasie G.
Los pesos moleculares de las protenas se calcularon con base
en sus Rf. Para obtener las grficas correspondientes de las
imgenes de las bandas de protenas de los corrimientos se
us un programa computarizado (Jandel Scientific, Sigma
Gel, Gel Analysis Software Versin 1.0), y se realiz un
anlisis de similitud entre los tratamientos utilizando el
programa NTSYS (Rohlf, 1993); con base en la presencia o
ausencia de protenas reveladas se elabor un fenograma de
similitudes (Rohlf, 1993).
Caracterizacin isoenzimtica. Para la deteccin
isoenzimtica se prepararon geles de poliacrilamida sin SDS
al 7.5% T, 10% T y 12% T. Los extractos de los tubrculos se
mezclaron slamente con la solucin de azul de bromofenol
0.5% en glicerina al 20%. La caracterizacin isoenzimtica
se determin mediante la aplicacin de tinciones especficas
para esterasas, catalasas (Harris y Hopkinson, 1976) y
peroxidasas (Shaw y Prasad, 1970), midiendo al final su Rf.
Los experimentos se realizaron tres veces cada uno. Los
corrimientos electroforticos de protenas se realizaron en
geles de acrilamida al 10%T (Fig. 1).
RESULTADOS
En los geles se observ un mayor nmero de bandas en los
tubrculos sanos que en los enfermos (excepto en las
variedades Michoacn y Sangema); tambin, algunas bandas
presentes en tubrculos sanos presentaron un color ms
intenso debido al mayor contenido de protenas. Se observ
la presencia de una protena de bajo peso molecular en
tubrculos con sntomas de PMP de Alpha, Gigant, Nortea
y el clon 06-Toll. Tubrculos sanos de Alpha, Michoacn,
Sangema y el clon 06-Toll presentaron una protena de 33.9
kDa. Tubrculos sanos y con PMP de Alpha, Gigant,
Michoacn y Nortea presentaron una protena en comn de
12.0 kDa, mientras que los de Sangema, Zafiro y el clon 06Toll presentaron una protena de 57.9 kDa. Los tubrculos
con sntomas de PMP de Alpha, Gigant, Michoacn y Nortea
presentaron una protena de 19.5 kDa, mientras que los de
Gigant, Michoacn, Nortea y Zafiro presentaron una protena
de 38.4 kDa. Se present un mayor nmero de protenas en
tubrculos sanos, excepto en Michoacn y Sangema (Cuadro
2). Los perfiles isoenzimticos y el nmero de isoenzimas de
esterasas en tubrculos sanos y con sntomas de PMP se
presentan en la Figura 2 y Cuadro 3, respectivamente. En la

104

A/C A/S

/ Volumen 21, Nmero 2, 2003

PM

G/C

SG/C SG/S 06/C 06/S

G/S M/C M/S

PM

Z/C

Z/S

N/C N/S A/C

Cuadro 2. Peso molecular de las protenas obtenidas de

tubrculos de papa (
) sanos y con sntomas
de punta morada.
No. de bandas
.
Variedadz
Alpha - C
10
10.60 - 68.90
Alpha - S
14
10.90 - 115.40
Gigant - C
11
10.60 - 76.60
Gigant - S
15
12.00 - 129.20
Michoacn - C
11
10.60 - 76.56
Michoacn - S
11
12.00 - 102.40
Nortea - C
11
11.20 - 74.34
Nortea - S
12
12.00 - 115.10
Sangema - C
13
11.00 - 106.20
Sangema - S
11
10.60 - 114.86
Zafiro - C
11
10.00 - 85.24
Zafiro - S
13
11.00 - 195.00
06-Toll - C
13
10.00 - 118.60
06-Toll - S
14
10.40 - 132.34
z
Sano = S; Con sntoma de punta morada = C.

G/C G/S SG/C

Fig. 1. Corrimiento electrofortico de protenas en geles de

acrilamida obtenidos de tubrculos de papa (Solanum
tuberosum) sanos y con sntomas de punta morada.
Variedades: A = Alpha, G = Gigant, M = Michoacn, N =
Nortea, SG = Sangema, Z = Zafiro, 06 = Clon 06-Toll. PM
= Marcadores de peso molecular colocados en el tercer y
quinto carril, respectivamente. /C = Tubrculo con sntomas
de punta morada. /S = Tubrculo sano.
Figura 3 se muestra la catalasa que se present en los
tubrculos sanos y con sntomas de PMP. Los tubrculos sanos
y con sntomas de punta morada presentaron slo una
isoenzima de 90.73 kDa, por lo que no se presenta el Cuadro
correspondiente. En la Figura 4 se muestran los perfiles
isoenzimticos de peroxidasas que revelaron los tubrculos
sanos y con sntomas de PMP. Ya que los tubrculos sanos
presentaron slo una isoenzima peroxidasa de 141.20 kDa,
tampoco se presenta el cuadro correspondiente. En el Cuadro
4 se muestra el nmero de isoenzimas de peroxidasas en
tubrculos con sntomas de PMP. Los tubrculos con sntomas
presentaron dos o tres isoenzimas ms que los tubrculos
sanos, excepto en las variedades Alpha y el clon 06-Toll. En
el Cuadro 5 se resumen los resultados obtenidos. El fenograma
de similitudes (Fig. 5) muestra que en un grupo se encuentran
las variedades Michoacn y Gigant con sntomas de PMP
(MC y GC), con una similitud mayor a 0.85, a las que se
agrega Alpha con sntomas (AC), con similitud mayor a 0.8.
En otro grupo se encuentran Michoacn y Nortea sanas,
con una similitud ligeramente mayor a 0.8.
DISCUSIN
Patrones electroforticos. Los tubrculos sanos presentaron

A/C A/S

SG/C SG/S

PM

06/C

G/C

06/S

G/S

PM

M/C M/S

Z/C

Z/S

N/C N/S A/C

A/C

A/S

Fig. 2. Corrimiento electrofortico en geles de acrilamida de

isoenzimas de esterasas de tubrculos sanos y con sntomas
de punta morada. Tubrculos de papa (Solanum tuberosum)
variedades: A = Alpha, G = Gigant, M = Michoacn. N =
Nortea, SG = Sangema, Z = Zafiro, 06 = Clon 06-Toll. PM
= Marcadores de peso molecular colocados en el tercer y
quinto carril, respectivamente. /C = Tubrculo con sntomas
de punta morada. /S = Tubrculo sano.
un mayor nmero de protenas que los enfermos, y las bandas
se observaron ms teidas (mayor concentracin). En general,

Revista Mexicana de FITOPATOLOGIA/

105

Cuadro 3. Isoenzimas de esterasas (kDa) de tubrculos de papa (Solanum tuberosum) sanos y

con sntomas de punta morada.
Tubrculos sanos
Variedad
59.7 68.7 72.1 79.2 87.0 105.1 116.0 139.4 168.5 177.6 No.
Alpha
+z
+
+
+
+
+
6
Gigant
+
+
+
+
+
5
Michoacn
+
+
+
+
+
5
Nortea
+
+
+
+
+
5
Sangema
+
+
+
+
4
Zafiro
+
+
+
+
4
O6-Toll
+
+
+
+
4
Tubrculos con sntomas de punta morada

Alpha
+
Gigant
+
Michoacn
+
Nortea
+
Sangema
Zafiro
+
O6-Toll
+
z
Presente = +; ausente = -

+
+
+
+
+
+
+

los tubrculos con sntomas mostraron una protena de menor

peso molecular (de 10 a 11 kDa), caracterstica que no se
present en los tubrculos sanos, lo que sugiere la presencia
de protenas de respuesta al patgeno (PR o b), como se ha
observado en algunas especies de tabaco hipersensibles a la
infeccin del virus del mosaico, donde se encuentran protenas
relacionadas con la patognesis prot-b, de 12.5 a 36.3 kDa
de PM (Jean y Asselin, 1984). En la variedad Sangema de
los tubrculos sanos presentaron tambin una protena de bajo
peso molecular (10.6 kDa). Los patrones electroforticos
obtenidos a partir de los extractos de tubrculos sanos y los
enfermos no permiten hacer la diferenciacin entre ambos,
ni tampoco son tiles para agrupar las variedades en estudio
de acuerdo con sus caractersticas sintomticas en el campo,
ya que se sabe que Gigant y el clon 06-Toll son tolerantes a
PMP (Mateo Armando Cadena-Hinojosa, 2000 datos no
publicados); la variedad Alpha es moderadamente tolerante,
Michoacn Sangema y Zafiro son susceptibles y la Nortea
es ltamente susceptible al pardeamiento. No se observ
similitud entre los patrones electroforticos de las distintas
variedades de papa, lo que sugiere que a pesar de pertenecer
al mismo gnero, se comportan de modo diferente,
confirmando que no proceden de la misma lnea, aunque
algunas variedades compartan una o dos protenas, como se
observ entre Alpha y Sangema, Gigant y Michoacn, y entre
Zafiro y Sangema.
Fenograma de similitudes. El fenograma se divide en dos
grandes ramas, en una se encuentran las variedades Zafiro,
Clon 06 Toll y San Gema, las que presentan cercana entre
sus respectivos tubrculos sanos y enfermos, lo que nos hace
suponer que no hubo alteracin en el nmero de bandas de
protenas por efecto de la infeccin. En la otra rama, aparecen

+
+
-

A/C

+
+
+
+

+
+
+
+
+
+
-

+
+
+
+
+

A/S

PM

G/C

SG/C SG/S Z/C

Z/S

4
5
5
5
3
4
4

G/S

M/C M/S N/C N/S

06/C 06/S

PM

N/S

N/C

Fig. 3. Corrimiento electrofortico en geles de acrilamida de

isoenzimas de catalasas de tubrculos de papa (Solanum
tuberosum) sanos y con sntomas de punta morada. Variedades:
A = Alpha, G = Gigant, M = Michoacn, N = Nortea, SG =
Sangema, Z = Zafiro, 06 = Clon 06- Toll. PM = Marcadores
de peso molecular colocados en el tercer y sptimo carril,
respectivamente. /C = Tubrculo con sntomas de punta
morada. /S = Tubrculo sano.

106

/ Volumen 21, Nmero 2, 2003

Cuadro 4. Isoenzimas de peroxidasas (en kDa) de tubrculos
de papa (Solanum tuberosum) con sntomas de punta morada
(PMP).
Tubrculos con sntomas de PMP

A/C

A/S

SG/C SG/S

PM

Z/C

G/C

Z/S

G/S M/C M/S N/C N/S

PM

06/C 06/S Z/S

Fig. 4. Corrimiento electrofortico en geles de acrilamida de

isoenzimas de peroxidasas de tubrculos de papa (Solanum
tuberosum) sanos y con sntomas de punta morada. Variedades:
A = Alpha, G = Gigant, M = Michoacn, N = Nortea, SG =
Sangema, Z = Zafiro, 06 = Clon 06-Toll. PM = Marcadores
de peso molecular colocados en el tercer y quinto carril,
respectivamente. /C = Tubrculo con sntomas de punta
morada. /S = Tubrculo sano.

Variedad 54.2 61.8 141.2 154.1 168.1

Alpha
-z
+
Gigant
+
+
Michoacn +
+
Nortea
+
+
Sangema
+
+
Zafiro
+
+
+
O6-Toll
+
z
Presente = +; ausente = -.

No. de
isoenzimas

1
2
2
2
2
3
1

dos subdivisiones, en la primera estn agrupados los

tubrculos sanos de Gigant, Alpha, Nortea y Michoacn,
mientras que la otra subdivisin incluye a los tubrculos con
sntomas de PMP de estas variedades, lo que sugiere que el
contenido de protenas en estas variedades fue modificado
por causa del fitoplasma, habiendo mayor diferencia entre
los tubrculos sanos y enfermos de Alfa y Gigant. Como las
protenas producidas son resultado de la expresin de la
informacin gentica, se puede asumir que Zafiro, 06-Toll y
San Gema tienen una cercana gentica que las capacita para
resistir cambios debidos a la accin del fitoplasma.
Esterasas. Todos los tubrculos, tanto sanos como enfermos,
presentaron la isoenzima de 59.7 kDa excepto la variedad
Sangema. Otra isoenzima comn fue la de 72.1 kDa que slo
estuvo ausente en los tubrculos sanos de Alpha y Sangema.

Cuadro 6. Comparacin de las caractersticas sobresalientes de protenas totales

e isoenzimas entre los tubrculos de papa (Solanum tuberosum) sanos y con
sntomas de punta morada.
Caractersticas
No. de
No. de
en el campo
protenas
isoenzimasz
y
Variedad
totales
Est. Cat. Per.
06-Toll/s
Normal
14
4
1
1
06-Toll/c
Tolerante
13
4
1
1
Gigant/s
Normal
15
5
1
1
Gigant/c
Tolerante
11
5
1
2
Alpha/s
Normal
14
6
1
1
Alpha/c
Medianamente tolerante
10
4
1
1
Michoacn/s
Normal
11
5
1
1
Michoacn/c
Susceptible
11
5
1
2
Sangema/s
Normal
11
4
1
1
Sangema/c
Susceptible
13
3
1
2
Zafiro/s
Normal
13
4
1
1
Zafiro/c
Susceptible
11
4
1
3
Nortea/s
Normal
14
5
1
1
Nortea/c
Altamente susceptible
11
5
1
2
y
/s = Sin sntomas; /c = Con sntomas.
z
Est. = Esterasas; Cat. = Catalasas; Per. = Peroxidasas.

Revista Mexicana de FITOPATOLOGIA/

0.70

0.75

0.80

0.85

107

0.90
A/C
G/C
M/C
N/C
M/S
N/S
A/S
G/S
SG/C
SG/S
06/C
06/S
Z/C
Z/S

Fig. 5. Fenograma de similitudes entre tubrculos de siete variedades de papa (Solanum tuberosum)
sanas y con sntomas de punta morada, basado en los corrimientos electroforticos tomando
como referencia la presencia o ausencia de protenas (Rohlf, 1993). Variedades: A = Alpha, G =
Gigant, M = Michoacn, N = Nortea, SG = Sangema, Z = Zafiro, 06 = Clon 06-Toll. /C =
Tubrculo con sntomas de punta morada. /S = Tubrculo sano.
Estas dos variedades presentaron mayor nmero de
isoenzimas, mientras que las otras cinco presentaron el mismo
nmero de isoenzimas, tanto en tubrculos sanos como
enfermos. Los patrones isoenzimticos de los tubrculos con
sntomas de PMP en Gigant y Michoacn fueron los mismos,
lo que concuerda con el fenograma de similitudes de protenas
en donde se agruparon con una similitud mayor de 0.85. As
mismo, los patrones isoenzimticos de los tubrculos sanos
de Gigant, Michoacn y Nortea fueron iguales, lo que
tambin concuerda con el fenograma, donde se agruparon
las variedades sanas Michoacn y Nortea con una similitud
mayor de 0.8. La actividad de esta isoenzima sirvi para
diferenciar tubrculos sanos de enfermos en Alpha, Nortea,
Zafiro y el clon 06-Toll, ya que los patrones isoenzimticos
de los tubrculos sanos y los de los enfermos fueron diferentes.
Estas isoenzimas aumentan su nmero y actividad en papas
susceptibles a infecciones por Pseudomonas solanacearum
(Lpez-Flores, 1994), lo cual pudiera suceder en forma
similar en Alpha y Sangema afectadas por fitoplasmas. Se ha
reportado que estas isoenzimas estn implicadas en la
degradacin de la pared celular de las plantas y, por tanto,
en la madurez y senectud de las mismas. As mismo, su
presencia tambin se utiliza para la identificacin de
variedades filogentica y taxonmicamente relacionadas
(Doke, 1985; Medhy, 1994).
Catalasas. En el presente trabajo, slo se demostr la
presencia de una catalasa de 90.7 kDa, tanto en tubrculos
sanos como con sntomas de PMP; sin embargo, no fue de
utilidad para diferenciar tubrculos sanos de enfermos. Se
supone que esta isoenzima es caracterstica de las variedades,
y por lo tanto puede tener relacin gentica con la especie (S.

tuberosum) estudiada. En la bibliografa consultada no se

encontr soporte para confirmar esta hiptesis.
Peroxidasas. Tanto los tubrculos sanos como los que
presentaron sntomas de PMP mostraron la presencia de una
isoenzima de 141.2 kDa, la cual pudiera ser caracterstica
de las siete variedades estudiadas. Sin embargo, los tubrculos
con sntomas mostraron de dos a tres isoenzimas diferentes.
Las variedades Nortea y Sangema presentaron las dos
mismas isoenzimas (de 141.2 y 168.1 kDa). Con base en los
resultados obtenidos, se sugiere que la actividad de la
peroxidasa brinda mejores perspectivas para separar
tubrculos sanos de los enfermos de cinco de las siete
variedades de papa, exceptuando a Alpha y el clon 06-Toll.
CONCLUSIONES
En relacin a la determinacin de contenido protico, la
posibilidad de diferenciar un tubrculo sano de uno afectado
por punta morada (PMP) depende de la variedad, ya que
Zafiro, el Clon 06-Toll y San Gema prcticamente no
modificaron su contenido cualitativo de protenas, aunque
disminuyeron su contenido cuantitativo; Alfa, Gigant, Nortea
y Michoacn modificaron notoriamente su contenido de
protenas, lo que podra servir para hacer la diferenciacin.
Se observ un mayor nmero de protenas en tubrculos
sanos, a excepcin de las variedades Michoacn y San Gema.
Los tubrculos con sntomas de PMP presentaron mayor
nmero de protenas de bajo peso molecular, lo que sugiere
la presencia de protenas de respuesta al patgeno. Tubrculos
sanos de Gigant, Michoacn, Nortea, Sangema y Zafiro
presentaron mayor nmero de isoenzimas de peroxidasas que
los tubrculos con sntomas de PMP.

108

/ Volumen 21, Nmero 2, 2003

LITERATURA CITADA
Almeyda-Len, I.H., Rubio-Cobarrubias, O.A., CadenaHinojosa, M.A., Daz-Valasis, M., Zavala-Quintana, T.,
Rocha-Pea, M.A. y Daz-Trujillo, A. 1999.
Implementacin de tcnicas para la deteccin del agente
causal de la Punta Morada de la Papa en plantas e insectos
vectores. Informe Anual del Proyecto de Investigacin.
Laboratorio de Biotecnologa Monterrey, CIR Noreste
INIFAP. 20 p.
Cadena-Hinojosa, M.A. 1974. Estudios sobre la Punta
Morada de la Papa. Tesis de Maestra en Ciencias. Colegio
de Postgraduados, Montecillo, Edo. de Mxico. 66 p.
Cadena-Hinojosa, M.A. 1993. La Punta Morada de la Papa
en Mxico: Incidencia y Bsqueda de Resistencia.
Agrociencia, Serie Proteccin Vegetal 4:247-256.
Doke, N. 1985. NADPH-dependent O 2 generation in
membrane fractions isolated from wounded potato tubers
inoculated with Phytophthora infestans. Physiological
Plant Pathology 27:311-322.
Harris, H., and Hopkinson, D.A. 1976. Handbook of Enzyme
Electrophoresis in Human Genetics. North Holland Publ.
Co., New York/ Oxford. 356 p.
Jean, G., and Asselin, A. 1984. Detection of pathogenesisrelated proteins (PR or b) and of other proteins in the
intercellular fluid of hypersensitive plants infected with
tabacco mosaic virus. Canadian Journal of Botany 62:565569.
Laemmli, U.K. 1970. Cleavage of structural proteins during
the assembly of the head of Bacteriophage T4. Nature
227:680-685.
Lee, I.M., Gunderson-Rindal, D.E., and Bertaccini, A. 1998.
Phytoplasma: Ecology and genomic diversity. Symposium.
New Perspectives on Phytopathogenic Mollicutes.

Phytopatology 88:1350-1366.
Leyva-Lpez, N.E. y Martnez-Soriano, J.P. 2001. Deteccin,
caracterizacin y aspectos ecolgicos de fitoplasmas
asociados a enfermedades de la papa. Memorias del
XXVIII Congreso Nacional de la Sociedad Mexicana de
Fitopatologa. Quertaro, Quertaro, Mxico. Resumen F18.
Lpez-Flores, R. 1994. Caracterizacin eletrofortica de
protenas e isoenzimas en plantas y cultivos in vivo de
papa (Solanum tuberosum L.). Tesis de Mestra en
Ciencias, Colegio de Postgraduados, Montecillo, Edo. de
Mxico. 132 p.
Mahmoun, H.S., Gatenhous, J.A., and Boulter, D. 1984.
Inheritance and mapping of isoenzymes in pea (Pisum
sativum L.). Theoretical and Applied Genetics 68:559-566.
Medhy, M.C. 1994. Active oxygen species in plant defense
against pathogens. Plant Physiology 105:467-472.
Rohlf, J. 1993. NTSYS-PC (Numerical Taxonomic and
Multivariate Analysis System). Applied Biotatistics, Inc.
Program.
Shaw, R.C., and Prasad, R. 1970. Starch Gel Electrophoresis
of Enzymes. A Compilation of Recipes. Biochemical
Genetics 4:297-320.
Willekens, H., Ins, D., Van Montagu, M., and Van Camp.
1995. Molecular Breeding Catalases in Plants. Kluwer
Academic Publishers, Belgium. 305 p.
Zavala-Quintana, T. y Cadena-Hinojosa, M.A. 1998. Punta
Morada de la Papa. 8 Congreso Nacional de Productores
de Papa y 2 Simposium Internacional de la Papa.
Tecnologa de Cultivo de Papa. CONPAPA, INIFAP,
Mxico. Resmenes de Tecnologas de Cultivo de Papa.
Metepec, Estado de Mxico. pp. 17-19.