DETERMINACIN DE DO, DBO Y DQO

Resumen
La demanda qumica de oxgeno (DQO) determina la cantidad de oxgeno requerido para oxidar la
materia orgnica en una muestra de agua residual. Se determina mediante la oxidacin por reflujo
en solucin cida (H2SO4) con un exceso de K2Cr2O7 en presencia AgSO4 y de HgSO4 adicionado
para remover la interferencia de los cloruros. Despus de la digestin, el remanente de K 2Cr2O7 sin
reducir se titula con sulfato ferroso de amonio; se usa como indicador el complejo ferroso de
ortofenantrolina (ferroina).
La Demanda Biolgica de Oxgeno (DBO) es una medida de oxgeno que usan los
microorganismos para descomponer el agua. El nivel de DBO se determina comparando el nivel de
OD de una muestra de agua tomada inmediatamente con el nivel de OD de una muestra de agua
que ha sido incubada durante 5 das. La diferencia entre los dos niveles de OD representa la
cantidad de oxgeno requerido para la descomposicin de cualquier material orgnico en la
muestra y es una buena aproximacin del nivel de la DBO.
Palabras clave: Oxgeno disuelto, demanda qumica, demanda biolgica, oxidacin, digestin,
indicador, materia orgnica, interferencia, titulacin, catalizador, incubar.

Abstract
The chemical demand of oxygen (DQO) determines the amount of required oxygen to oxidize the
organic matter in a waste water sample. It is determined by means of the oxidation by ebb tide in
acid solution (H2SO4) with an excess of K2Cr2O7 in AgSO4 presence and added HgSO4 to
remove the interference of chlorides. After the digestion, the surplus of K2Cr2O7 without reducing is
calld with ferrous ammonium sulphate; the ferrous complex of ortofenantrolina is used like indicator
(ferroina).
The Biological Demand of Oxgeno (DBO) is an oxygen measurement that uses the
microorganisms to disturb the water. The DBO level is determined comparing the level of OD of a
water sample taken immediately with the OD level of a water sample that has been incubated
during 5 days. The difference enters OD levels both represents the amount of oxygen required for
the decomposition of any organic material in the sample and is a good approach of the level of the
DBO.
Key words: Dissolved oxygen, chemical demand, biological demand, oxidation, digestion, indicator,
organic matter, interference, degree, catalyst, to incubate.

Determinacin de OD, DBO y DQO

INTRODUCCIN

debe garantizarse que se suministren las

condiciones adecuadas para el desarrollo y
trabajo de los microorganismos, as que se debe
proporcionar los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacterial tales como N y P y eliminar
cualquier sustancia txica en la muestra. Es
tambin necesario que exista una muestra de
organismos suficiente en cantidad y en variedad
de especies, comnmente llamada simiente,
durante la realizacin del ensayo.

1. OXGENO DISUELTO, OD
La determinacin de OD es muy importante en
ingeniera ambiental, por ser el factor que
determina la existencia de condiciones
aerbicas o anaerbicas en un medio particular.
La determinacin de OD sirve como base para
cuantificar DBO, aerobicidad de los procesos de
tratamiento, tanto de aireacin en los procesos
de tratamiento aerbico y grado de polucin de
ros. El OD se presenta en cantidades variables
y bajas en el agua; su contenido depende de la
concentracin y estabilidad del material orgnico
presente y es, por ello, un factor muy importante
en la auto purificacin de los ros. Los valores de
OD en aguas son bajas y disminuyen con la
temperatura. El oxgeno libre en solucin,
especialmente, cuando est acompaado de
CO2 es un agente de corrosin importante del
hiero y el acero.

2. DEMANDA
BIOQUMICA
OXGENO, DBO

Si no estn adaptadas al sustrato particular

existente en la botella de DBO, las bacterias
morirn o disminuirn en nmero hasta que
logren adaptarse; es importante, por lo tanto ,
obtener suficientes aclimatadas para conseguir
valores verdaderos de la concentracin
orgnica.
La temperatura escogida para determinar el
valor de DBO es de 20C y se debe mantener
constante durante el tiempo del ensayo, la
velocidad de las reacciones durante el ensayo
se ver afectada si se modifica la temperatura;
por consiguiente los resultados obtenidos no
seran los correspondientes al procedimiento
estndar y, en consecuencia, no seran
comparables.

DE

Uno de los ensayos ms importantes para

determinar la concentracin de la materia
orgnica de aguas y aguas residuales en el
ensayo de DBO a cinco das. Especialmente la
DBO es una medida de la cantidad de oxgeno
utilizado por los microorganismos en la
estabilizacin
de
la
materia
orgnica
biodegradable, bajo condiciones aerbicas, en
un perodo de 5 das y a 20C.

3. DEMANDA QUMICA DE OXGENO,

DQO
La demanda qumica de oxgeno es un
parmetro analtico de polucin que mide el
material orgnico contenido en una muestra
lquida mediante oxidacin qumica. La
determinacin de DQO es una medida de la
cantidad de oxgeno consumido por la porcin
de materia orgnica existente en la muestra y
oxidable por un agente qumico oxidante fuerte.
Especficamente representa el contenido
orgnico total de la muestra, oxidable por
dicromato en solucin cida. El ensayo tiene la
ventaja de ser ms rgido que el DBO y no est
sujeto a tantas variables como las que pueden
presentarse en el ensayo biolgico. Todos los
compuestos orgnicos, con unas pocas
excepciones, pueden ser oxidados a CO 2 y agua
mediante la accin de agentes oxidantes fuertes,
en condiciones cidas.

En aguas residuales domsticas, el valor de la

DBO a 5 das representa en promedio un 65 a
70% del total de la materia orgnica oxidable. La
DBO, como todo ensayo biolgico, requiere
cuidado especial en su realizacin, as como
conocimiento d las caractersticas esenciales
que deben cumplirse, con el fin de obtener
valores representativos confiables. El ensayo
supone la mediad de la cantidad de oxgeno
consumido por organismos vivos en la utilizacin
de la materia orgnica presente en un residuo;
por lo tanto es necesario garantizar que durante
todo el perodo del ensayo exista suficiente OD
para ser utilizado por los organismos. Adems,
1

ROMERO, Jairo Alberto, Acuiqumica. Escuela Colombiana

de Ingenieria. Bogot, Colombia, 1996. Pginas 106-119.-

Determinacin de OD, DBO y DQO

Limitaciones e interferencias :

cuantitativamente bajo las condiciones

de la prueba; para concentraciones altas
de estas especies, se pueden hacer las
correcciones al valor de DQO obtenido,
segn los clculos estequiomtricos en
caso de conocer su concentracin
inicial.

a) Los compuestos alifticos voltiles de

cadena lineal no se oxidan en cantidad
apreciable, en parte debido a que estn
presentes en la fase de vapor y no
entran en contacto con el lquido
oxidante; tales compuestos se oxidan
ms efectivamente cuando se agrega
Ag2SO4 como catalizador. Sin embargo,
ste reacciona con los iones cloruro,
bromuro
y
yoduro
produciendo
precipitados
que
son
oxidados
parcialmente.

MTODO EXPERIMENTAL

b) Las dificultades causadas por la

presencia de los haluros pueden
superarse en buena parte, aunque no
completamente, por acomplejamiento
antes del proceso de reflujo con sulfato
de mercurio (HgSO4), que forma el
haluro mercrico correspondiente, muy
poco soluble en medio acuoso. Si bien
se especifica 1 g de HgSO4 para 50 mL
de muestra, se puede usar una menor
cantidad cuando la concentracin de
cloruro sea menor de 2 000 mg/L,
mientras se mantenga una relacin

HgSO4:Cl de 10:1. La tcnica no se

debe usar para muestras que contengan

ms de 2 000 mg de Cl /L; existen otros

procedimientos
diseados
para
determinar la DQO en aguas salinas.

DQO

5 ml de muestra
0.1 g HgSO4

Perlas de vidrio

0.5 ml reactivoH2SO4
(H2SO4 - AgSO4)
Agitar

Dejar enfriar
5 ml K2Cr2O7
0.0417M
Mezclar
6 ml H2SO4
Agitar
cuidadosamente

Reflujo 1 Hora

c) El nitrito (NO2 ) tiene una DQO de 1,1

mg de O2/mg de NO2 -N, y como las

concentraciones de NO2 en aguas rara

vez son mayores de 1 o 2 mg NO2 -N/L,

esta interferencia es considerada
insignificante y usualmente se ignora.
Para evitar una interferencia significante

debida al NO2 , agregar 10 mg de cido

sulfmico por cada mg de NO2 -N

presente en el volumen de muestra
usado; agregar la misma cantidad de
cido sulfmico al blanco de agua
destilada.

Enfriar

Diluir la muestra a 20 ml
Enfriar
Valorar con FAS
0.25 M

Diagrama 1. Protocolo determinacin de DQO.

Indicador: Rojo Verde

d) Las especies inorgnicas reducidas,

tales como iones ferroso, sulfuro,
manganoso,
etc.,
se
oxidan
3

DBO

Debido al alto contenido de materia orgnica presente en la

muestra se utilizaron 10 ml de K2Cr2O7 como exceso de
oxidante.

http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas
/Determinacion_de_DQO.htm

Determinacin de OD, DBO y DQO

Con muestras cuya DBO no exceda de 7 mg/L

se puede determinar el valor de DBO
directamente de la siguiente manera:

Materiales

a) Se llenan dos o ms botellas de DBO

con muestra previamente aireada para
obtener un valor de OD cercano al valor
de saturacin.
b) Se determina en por lo menos una
botella la cantidad de OD inicial. Las
dems botellas se incuban durante 5
das a 20C.
c) Despus de los 5 das de determina la
cantidad de oxgeno remanente o
oxigeno disuelto final.
d) Se calcula la DBO de la muestra por
diferencia entre el valor de OD inicial y
el valor del OD final.

3 Frascos de vidrio
1 Bureta
1 Baln de reflujo
1 Columna de reflujo
3 Erlenmeyer
Papel vinipel
1 Soporte Universal
1 Trpode o anillo
1 Placa de calentamiento
1 Mechero
1 Esptula
3 Pipeta de (1 ml 5 ml 10 ml)
1 Churrusco

Reactivos

OD (Winkler)

Muestra
2 ml MnSO4 2M

2 ml lcali
(Yoduro de acida)

H2SO4
HgSO4
k2Cr2O7
Reactivo de H2SO4
Yoduro de Acida
MnSO4
Almidn
Na2SO3

Equipos

Tapar

Agitar

1 Equipo de reflujo

RESULTADO Y DISCUSIN

Precipitado

La muestra analizada es muestreada en una

industria de cosmticos, esta agua es
proveniente de los desechos de la misma, y es
un agua previamente sometida a tratamiento.

2 ml H2SO4
Tapar

Agitar

Dejar reposar 5`

DQO

Observaciones

Tomar alcuota 5ml

Los 5 ml de muestra ms el sulfato de mercurio

(HgSO4, slido de color blanco) y el reactivo de
cido sulfrico (H2SO4, HgSO4), provocaron una
reaccin muy exotrmica. Se agito durante cinco
minutos aproximadamente y se dejo enfriar. Se
le agregaron pedazos de porcelana para
controlar la posterior ebullicin.

2 ml almidn
Titular con Na2SO3
0.025 N

Diagrama 2. Protocolo determinacin de DBO.

Indicador: Azul Incoloro

Determinacin de OD, DBO y DQO

Una vez fro, al adicionarle el dicromato de

potasio (k2Cr2O7) la mezcla se coloreo.

De acuerdo con el protocolo, la muestra se

deba diluir a 20 ml, en mi caso particular, el
volumen obtenido era superior a 20 ml por el
volumen de dicromato de potasio agregado de
ms, por lo tanto, mediante conversiones se
determin lo siguiente:

La posterior adicin de cido sulfrico produjo

gran liberacin de calor y la mezcla se torn de
color verde.
Se esperaba un color rojo al agregarle el cido
sulfrico, lo que indica que no hay dicromato de
potasio en exceso, por lo tanto se le adicion a
la mezcla 5 ml ms de dicromato de potasio, an
as la mezcla se torno caf, no roja, como se
esperaba.

5 ml muestra + 0.5 ml HgSO4 + 5 ml K2Cr2O7 +

6 ml H2SO4 = 16.5 ml muestra.
Lo que indica que para 16.5 ml de muestra se
requieren 3.5ml de agua. Por lo tanto, al
adicionar los 5 ml de exceso de dicromato de
potasio el volumen final sera de (16.5 ml
muestra + 5 ml K2Cr2O7) 21.5 ml, lo que indica
que para este volumen se requiere 5.8 ml de
agua, de acuerdo con la primer proporcin, y el
volumen final de la dilucin ser entonces de
27.3 ml.

La mezcla se puso en reflujo durante una hora,

el montaje realizado fue el siguiente:

Posteriormente se procedi a tomar alcuotas de

8 ml, a cada una se le agreg unas gotas de
ferroina, sin cambio de color aparente, la
solucin contino de color pardo.
De acuerdo con las titulaciones la muestra de
agua corresponde a un 1% para la muestra de
dilucin directa, sin embargo, por la excesiva
presencia de materia orgnica, se utiliz un
agua de dilucin al 5% para la posterior
determinacin de DBO.

Agua

Para realizar el clculo, al volumen de FAS

utilizado para la titulacin del blanco (mezcla de
todos los reactivos, excepto el agua a analizar)
se le resto el volumen utilizado en la titulacin de
la muestra.

Muestra

Resultados

Alcuota 8 ml.

Datos
Titulaciones
1
2
3
Volumen FAS gastado muestra 0.4 ml 0.4 ml 0.4 ml
Promedio
0.4 ml
Volumen FAS gastado blanco
0.85ml
Tabla 1. Reporte de titulaciones para determinacin de
DQO.

Figura 1. Montaje de reflujo realizado para determinacin de

DQO.

Pasados los 60 minutos, la muestra se dejo

enfriar a temperatura ambiente.

Clculos
Volumen FAS = Vol. Blanco Vol. Muestra

Determinacin de OD, DBO y DQO

Volumen FAS = 0.45 ml

(

) (

) (

) (

) (

Discusin
De acuerdo con la teora, el fundamento del
mtodo para la determinacin qumica de
oxgeno consiste en que la mezcla ms las
cantidades conocidas de dicromato de potasio y
cido sulfrico es sometida a reflujo durante dos
horas (en mi caso se someti slo a una hora de
reflujo); durante este perodo la materia orgnica
oxidable reduce una porcin de dicromato,
mientras que la parte restante se determina
mediante la titulacin con sulfato ferroso
amoniacal (FAS). La cantidad de dicromato
reducida es una medida de la materia orgnica
oxidada.

Lo anterior ocurre por la excesiva cantidad de

materia orgnica, la cual redujo todo el
dicromato y no qued parte de este para ser
titulada con FAS, sin embargo, se parte del
supuesto del cambio colorimtrico de un verde a
otro ms oscuro para efectuar la determinacin
de demanda qumica de oxgeno.
Por otro lado, a la muestra y el cido se le
agregan otros reactivos, para controlar las
interferencias, tales como los cloruros. Los
nitritos y otros iones inorgnicos como hierro
ferroso, manganeso manganoso, sulfitos y
sulfuros, susceptibles de oxidacin por
dicromato en las condiciones del ensayo.

Las reacciones se pueden representar de la

siguiente manera:
=

Mat. Orgnica + Cr2O7 + H 2Cr

H2O

+++

+ CO2 +

En general, en aguas residuales los cloruros

constituyen la interferencia ms importante pues
introducen un error por exceso en el valor de la
DQO, el sulfato mercrico evita la interferencia
causada por los cloruros, pues en presencia de
cloruros forma cloruro de mercurio (HgCl2) un
complejo por reactivo.

El in dicromato es el agente oxidante porque en

solucin cida consume electrones y el cromo
hexavalente se reduce a cromo trivalente.
=

Cr2O7 + 14H + 6e 2Cr

Cr

6+

+ 3e Cr

+++

+ 7H2O

3+

Despus de la digestin de la materia orgnica

con dicromato se determina la concentracin de
dicromato residual mediante sulfato ferroso
amoniacal, el cual suministra los iones ferroso
++
reductores, Fe .
++

6Fe

+++

+ Cr2O7 + 14H = 6Fe

De acuerdo con la literatura, la ferrona

contienen 1.10 fenantrolina, la cual forma un
colpejo de color rojo con el in ferroso. A medida
que el dicromato, color naranja, es reducido a
Cr+++, color verde, los iones Fe+++ forman un
complejo con el indicador de ferrona para
producir un color carmelita rojizo. El vire final
debera ser muy claro, de un color azul verdoso
a rojo carmelitoso. En mi caso, el color desde el
inicio fue verde, el cambio consisti en el cambio
de verde medianamente oscuro a verde oscuro.

+ 2Cr

+++

DBO

Observaciones
Para la determinacin de DBO5 fue necesario
preparar una muestra para incubar durante 5
das a partir del agua residual y el agua de
dilucin. Fue necesario tambin hacer la
valoracin del blanco despus de incubado, es
decir, del agua de dilucin, y por ltimo la
valoracin de la muestra sin diluir y sin incubar.
Los valores de cada titulacin son presentados a
continuacin.

+ 7H2O

El in ferroso divalente es oxidado por el ion

dicromato a hierro frrico trivalente.
El punto final de la titulacin, tericamente se
determina colorimtricamente usando ferrona
como indicador.

El agua de dilucin fue preparada a partir de

agua destilada, 1 ml de solucin buffer de
fosfato, 1 ml de solucin de sulfato de magnesio,

Determinacin de OD, DBO y DQO

1 ml de solucin de cloruro de calcio y 1 ml de

solucin de cloruro frrico, y adicionalmente se
inoculo con una mezcla de aguas residuales, por
cada litro de agua de dilucin.
El blanco y las muestras diluidas fueron
incubados en frascos de mbar para evitar la
interferencia de la luz a una temperatura de
20C.
Antes de realizar las titulaciones, es necesario
agregar a las muestras sulfato de manganeso
(MnSO4) 2M, lcali, agitar, se forma un
precipitado, eneste momento se agrega cido
sulfrico por las paredes, se tapa para evitar que
entre oxgeno al agua y se agita suavemente, la
muestra se dej reposar por 5 minutos, se utiliza
almidn como indicador que vira de azul a
incoloro y finalmente se titula con tiosulfato de
sodio.

Discusin
De acuerdo con la teora, se considera que el
ensayo de la DBO tiene una exactitud del 5%, y
por lo tanto, los valores calculados deberan
satisfacer dicha variacin.

El precipitado formado al agregar el lcali y y el

sulfato de manganeso es de color caf.

El mtodo se basa en el hecho de que el

++
oxgeno oxida el in Mn a un estado superior
de valencia en condiciones alcalinas, y en que el
manganeso en estados superiores de valencia
es capaz de oxidar el in I a yodo libre I2 en
condiciones cidas. La cantidad de yodo
liberado es medida con solucin estndar de
tiosulfato y es equivalente a la cantidad de
oxgeno disuelto originalmente presente en la
muestra.

Lo anterior corresponde al mtodo de Winkler

para determinacin de DO y en muestras
incubadas para anlisis de DBO.
Resultados
Datos
Titulacin
1
2
Volumen de Na2SO3 gastado
1.4
1.1
muestra sin diluir
Promedio
1.18 ml
Volumen de Na2SO3 gastado
1.25
1.2
testigo
ml
ml
Promedio
1.22
Volumen de Na2SO3 gastado
0.9
0.8 ml
muestra diluida
ml
Promedio
0.8 ml
Tabla 2. Reporte de titulaciones para determinacin de
DBO.

3
1.0

Las reacciones involucradas en el proceso

pueden representarse en la forma siguiente:

1.2
ml

Si no existe oxgeno,

0.7
ml

++

Mn

+ 2OH = Mn(OH)2 (precipitado blanco)

MnSO4 + 2KOH = Mn(OH)2 + K2SO4

Si existe oxgeno,

Clculos
(

2MnSO4 + O2 + 4H2O = 2MnO(OH)2 + 2H2SO4

(

++

Mn + 2OH + O = MnO2 + H2O (Precipitado

carmelita)

Donde:

Mn(OH)2 + O = MnO2 + H2O (Precipitado

carmelita)

ODT = O.D. final del testigo, frasco con agua de dilucin

solamente, mg/L
ODF = O.D. final de la muestral diluida, mg/L
ODI = O.D. inicial de la muestral sin diluir, mg/L

MnO2 + 2I + 4H = Mn

++

+ I2 + 2H2O

Determinacin de OD, DBO y DQO

I2 + 2Na2S2O3 = Na2S4O6 + 2NaI

Conclusiones

Si la muestra se caracteriza por un

predominio de material qumicamente
oxidable
pero
no
oxidable
biolgicamente, el valor de la DQO ser
mayor que el de la DBO.
En aguas con materia orgnica en
exceso, los interferentes son ms
acentuados.
En aguas residuales cuyo contenido de
materia orgnica sea muy alto, la
oxidacin del dicromato de potasio ser
alta, y por lo tanto el exceso de
dicromato ser mnimo para la reduccin
del mismo y en la titulacin con FAS.
El valor obtenido en la determinacin de
DBO fue muy pequeo, tanto que esta
pudo haber sido calculada de manera
directa por diferencia entre el valor de
OD inicial y el final.

BIBLIOGRAFA
ICONTEC. Norma Tcnica Colombiana 3629.
Gestin ambiental. Agua. Demanda Qumica de
Oxgeno. 1994
ROMERO, Jairo Alberto, Acuiqumica. Escuela
Colombiana de Ingenieria. Bogot, Colombia,
1996. Pginas 106-119.

En Internet:

http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/
Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_
DQO.htm
http://www.k12science.org/curriculum/di
pproj2/es/fieldbook/dbo.shtml