Bioseguridad

BIOSEGURIDAD
CONCEPTO DE
BIOSEGURIDAD
Segn la OMS(2005) es un conjunto de
normas y medidas para proteger la
salud del personal, frente a riesgos
biolgicos, qumicos y fsicos a los que
est expuesto en el desempeo de sus
funciones, tambin a los pacientes y al
medio ambiente.
PROF.AGDA.LIC.ANA COMBOL
BIOSEGURIDAD
Debe existir un programa diseado en forma

particular
Este programa debe contemplar polticas de

bioseguridad
Responsable de Bioseguridad
Comit de Bioseguridad.
R ESPONSABLE DE
B IOSEGURIDAD
El responsable principal es el Director del laboratorio
Puede delegar a un responsable de Bioseguridad, o en

Laboratorios de gran tamao al Comit de Bioseguridad de la
Institucin
Se la asignan varias tareas por ej. , asegurar que las polticas y

programas de Bioseguridad se sigan y se apliquen
Verificar que todo el personal haya recibido la capacitacin

adecuada
Promover la educacin continua
Investigar accidentes e incidentes
Revisar peridicamente los procesos, los procedimientos y los

protocolos
C OMIT DE BIOSEGURIDAD
Tiene las funciones de desarrollar polticas y

reglas de buenas prcticas
Notifica al responsable de la Institucin
Est constituido por profesionales del

laboratorio, representantes del equipo tcnico,
del personal de lavado de material y
esterilizacin , del personal de limpieza y
personal administrativo
PRINCIPIOS DE
BIOSEGURIDAD
UNIVERSALIDAD
USO DE BARRERAS
ELIMINACIN DE MATERIAL
CONTAMINADO
UNIVERSALIDAD
Las medidas deben involucrar a todos lo

pacientes trabajadores y del servicio
independiente de conocer o no su
serologa.
Todo el personal debe seguir las

precauciones estndares rutinariamente
para prevenir la exposicin de la piel y
mucosas.
USO DE BARRERAS
Evitar la exposicin directa a todo tipo de
muestras orgnicas
Lavado de manos, uso de guantes, lentes
mascarillas, gorro, tnicas, cmaras de

seguridad biolgicas
Inmunizaciones (VAT, HB)
Estructura edilicia, mobiliario, limpieza
E LIMINACIN
DE MATERIAL
CONTAMINADO
Es un conjunto de procedimientos a
travs de los cuales se procesan los
materiales utilizados en la atencin
de los pacientes , toma de muestras,
realizacin de los exmenes y la
eliminacin de las muestras biolgicas
sin riesgo para los operadores y la
comunidad
10
TIPOS DE AGENTES
FSICOS
ruidos, temperatura, gases, radiaciones,
etc.
QUMICOS
sustancias txicas inflamables, irritantes,
etc.
BIOLGICOS
N IVELES
11
DE BIOSEGURIDAD
El Centro de Control y Prevencin de

Enfermedades de EEUU, (CDC) detalla 4 niveles de
Bioseguridad
para el manejo de agentes
biolgicos.
Por lo tanto los laboratorios que desarrollan las

tareas con muestras infecciosas puede ser
clasificados en 4 tipos de acuerdo a los niveles de
bioseguridad.
En cada uno de ellos las buenas prcticas se

desarrollan segn los documentos y protocolos
establecidos .
12
EQUIPOS DE SEGURIDAD
BIOLGICA
Son cmaras de circulacin forzada que segn
sus especificaciones y diseo, proporcionan
diferentes niveles de proteccin.
Son fundamentales en un Laboratorio de
Microbiologa Clnica.
Se clasifican segn el nivel y tipo de proteccin.
NIVELES DE
BIOSEGURIDAD
13
NIVEL DE BIOSEGURIDAD 1
Agentes que tienen pocas probabilidades

de provocar enfermedades en los seres
humanos o animales
Agentes patgenos que pueden producir

enfermedades humanas o animales, pero
existen medidas preventivas y
teraputicas eficaces y el riesgo de
propagacin es limitado en el laboratorio y la
comunidad.
Agentes patgenos que suelen provocar

enfermedades graves en el ser humano o el
animal. Existen medidas preventivas y
teraputicas eficaces .
Agentes patgenos que suelen provocar

enfermedades graves en el ser humano o
el animal y que se transmiten fcilmente
de un individuo a otro. Normalmente, no
existen medidas preventivas y
teraputicas eficaces.
BIOLGICOS
14
GRUPO I - Escaso riesgo para el individuo y para la comunidad.
GRUPO II - Riesgo individual moderado para los individuos y limitado para

la comunidad.
Ej. S. typhi, virus Hepatitis B
GRUPO III - Son de alto riesgo para el individuo, bajo para la comunidad.
Ej. E.coli
Ej. M. tuberculosis, Brucella sp
GRUPO IV - Son de alto riesgo para el individuo y para la comunidad.
Ej. virus Ebola

15
CABINA BIOLGICA
TIPO I
Estas cabinas no previenen la exposicin por contacto ni

garantizan la proteccin del producto manipulado.
Abiertas frontalmente se asemejan a las campanas de uso

qumico.
Utilizadas para trabajar con grupos de riesgo tipo 1 y 2.
16
CABINA BIOLGICA
TIPO I
CABINA BIOLGICA II
17
Adems de proteger al operario, ofrecen proteccin

al producto de contaminacin externa.
Son vlidas para el manejo de agentes biolgicos de

los grupos 1, 2 y 3.
Existen 2 tipos:
II B1 y II B2, se diferencian principalmente en la

velocidad del flujo y la proporcin de aire que se
recircula.
18
CAMARA BIOLGICA
TIPO II
19
CABINA BIOLGICA III
Utilizadas para trabajar con nivel de riesgo 3 y 4.
Ofrece mxima proteccin al trabajador y al

ambiente.
Hermticamente cerradas, con flujo de presin

negativa.
Presenta filtros (HEPA) para el ingreso y extraccin

del aire (completamente purificada).
20
CABINA BIOLGICA
TIPO III
21
LABORATORIOS
BSICOS DE NIVEL I Y II
Instalado para trabajar con microorganismos de los grupos de

riesgo tipo 1 y 2.
El trabajo se realiza sobre mesadas de trabajo utilizando

prcticas estndar.
Se usarn en todo momento tnicas y guantes protectores

adecuados para el trabajo en el laboratorio.
Se usarn gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de

proteccin cuando sea necesario proteger los ojos y el rostro de
salpicaduras, impactos y fuentes de radiacin ultravioleta
artificial.
En las zonas de trabajo estar prohibido comer, beber, aplicar

cosmticos o manipular lentes de contacto.
22
PROCEDIMIENTOS
Estar estrictamente prohibido pipetear con la boca. Para

extraer o agregar lquidos y/o soluciones deben utilizarse
dispositivos pipeteadores mecnicos o automticos.
Todos los procedimientos deben llevarse a cabo con

precaucin a fin de minimizar la creacin de salpicaduras o
aerosoles.
Todos los derrames, accidentes y exposiciones sern

notificados al supervisor; se seguirn prcticas estrictas
para la contencin de los derrames.
23
DECRETO N 586/09
24
DECRETO N 586/09
25
DECRETO N 586/09
26
DECRETO N 586/09
MVOTMA-MSP
27
DECRETO N 586/09
LAVADO DE MANOS
28
MATERIALES
Agua
Jabn lquido en frasco dispensador (de

preferencia)
Toalla de papel o secador de manos automtico
PROCEDIMIENTO DEL
LAVADO DE MANOS
29
Abrir la canilla.
Mojarse las manos (no agua caliente)
Aplicar jabn (si usa jabn de pastilla lavarlo antes y despus del
uso).
Frotarse las manos al menos 20 segundos, frotndose la palma,

dedo por dedo, lavando debajo de las uas y el dorso de la mano.
Enjuagarse con agua limpia. El agua se debe escurrir hacia la

mueca.
Secarse con toallas desechables y con la misma cerrar la canilla.

DESINFECCIN
30
CONCENTRACIN DEL AGENTE
Adecuar la concentracin del desinfectante y

el tiempo de accin.
Con concentraciones mnimas no solo no se

eliminan los microorganismos, sino que
permiten su desarrollo.
31
DESINFECCIN
La temperatura aumenta el poder bactericida del

agente, siempre que no lo desnaturalice
La presencia de materia orgnica como mucus, pus,

sangre influye negativamente en la actividad de los
desinfectantes, incluso llega a inactivarlos.
Los desinfectantes se clasifican en: nivel alto, medio y

bajo, segn la intensidad de su actividad sobre los
microorganismos
CLASIFICACIN DE
LOS DESINFECTANTES
32
DESINFECTANTES DE ALTO NIVEL
Se caracterizan por actuar sobre los esporos

bacterianos, produciendo una esterilizacin
qumica si el tiempo es adecuado.
EJEMPLOS:
xido de etileno (GAS)

Glutaraldehdo al 2 %
Perxido de hidrgeno al 10%
33
NIVEL ALTO
OXIDO DE ETILENO
Es un gas
Se utiliza ampliamente para la esterilizacin de
instrumentos termolbiles, materiales biolgicos,
plsticos especficos
La esterilizacin funciona por gravedad, es muy
complejo y dificultoso
Ventajas : el material queda perfectamente estril
Desventajas: es altamente txico, irrita ojos y
mucosas. Una vez finalizado el ciclo de esterilizacin
el gas debe evacuarse del equipo y eliminar por
arrastre con aire
NIVEL ALTO
34
Glutaraldehdo al 2%
Es esporicida para tiempos de accin
de 6 a 10 horas.
Ventaja: No corroe los metales
Desventaja: es txico para la piel y
mucosa , tambin desprende vapores
txicos para el aparato respiratorio
Luego de la esterilizacin, al
instrumental debe realizarse un
enjuague con agua destilada estril
NIVEL MEDIO
35
No destruyen esporos, destruyen hongos, virus no

lpidos, grmenes de la tuberculosis.
EJEMPLOS:
Hipoclorito de sodio (diluido)
Compuestos iodados (alcohol iodados)
Alcoholes (alcohol ETANOL al 70)
36
NIVEL MEDIO
Hipoclorito de sodio
Ventajas: Son los desinfectantes ms
econmicos, efectivos e inocuos
Su accin es liberar cloro molecular que en
presencia de agua da un poderoso agente
oxidante
Tiene una dbil accin esporicida, tuberculicida,
destruye el virus del VIH y el virus de Hepatitis
B. (VHB)
Desventajas: presencia de materia orgnica,
exposicin a la luz de la soluciones acuosas
En presencia de agua tibia actan ms
intensamente pero se degradan pronto
37
NIVEL MEDIO
Hipoclorito de sodio
La unidad se llama partes por milln (ppm)
o gramo por litro (g/l)de cloro activo
Agua Jane o sello rojo solucin cristal
(40.000 ppm) (40 g/L) , Electrn (5.000 ppm)
(5 g/L)
Preparar la dilucin diariamente antes de su
empleo.
Mantener el producto en un lugar fresco y
protegido de la luz
Respetar la concentracin segn necesidad
38
HIPOCLORITO DE SODIO
DESINFECCIN DE MATERIAL LIMPIO, es decir sin restos

de sangre o lquidos corporales diluciones de uso 0.05%
y 0.1 % (500 y 1000 ppm)
DESINFECCION DE MATERIAL CONTAMINADO, con

sangre pus, ser recomienda concentraciones al 0.5%
(5000 ppm) muy corrosivo, debe vigilarse tiempo de
inmersin de los objetos
LAVADO DE MATERIAL
39
Primero
cada laboratorio tendr un protocolo de

lavado de material especfico. En general el material
muy contaminado antes de lavarlo hay que
esterilizarlos en un autoclave destinado a tal fin,
luego lavar.
Si no hubiese autoclave, se utilizar hipoclorito de

sodio en inmersin a 0.5 % o sea 5000 por 30
cuidando si hubiera piezas metlicas. Puede
utilizarse otro desinfectante de nivel medio.
LAVADO DE MATERIAL
40
Para
materiales sin sangre o otros fluidos corporales

realizar una desinfeccin con hipoclorito de sodio al 0.1 %
(1000 ppm) y luego lavar con detergente.
Todo
material se debe lavar con detergente no inico y

posteriormente se enjuaga con abundante agua de la
canilla , realizando un ltimo lavado con agua destilada.
Se
usar si amerita, cepillo para tubos u otro material de

vidrio
ALCOHOLES
41
Su mecanismo de accin es destruir la membrana de las

bacterias. Se utiliza como desinfectante o como antisptico
La concentracin ms efectiva es el alcohol 70% (dilucin
del alcohol 96 en agua destilada)
La materia orgnica inactiva los alcoholes
Es esporicida, es turberculicida, fungicida, y destruye virus.
Se utiliza para termmetros, limpieza de mesadas, pinzas
Se vende preparado en comercios, como solucin lquida o
gel.
42
DESINFECTANTES DE BAJO
NIVEL
Son los que no destruyen los esporas bacterianas

Ni los grmenes de la Tuberculosis
Ni los virus no lipdicos
Compuestos de amonio cuaternario (amonaco lquido)
Se utilizan para limpieza domstica
DILUCIN
43
Formula a utilizar Vd x Cd= V x Cc
Vd. volumen deseado
Cd. Concentracin deseada
V =?
Cc. Concentracin conocida
44
HIPOCLORITOS
COMERCIALES
45
CALCULOS 100 g/l o 100.000 ppm o 10 g%
40 g/l o 40.000 ppm o 4 g %
FORMULA Vd x Cd= V x Cc
Quiero preparar una solucin para una rea crtica 1 litro al 0.5 % =
5000 ppm
1 litro =1000 ml
1000 x 5000= V x 100.000
V= 1000x5000/ 100000
V= 50 ml Tomamos una probeta de plstico y medimos 50 ml de

hipoclorito comercial y le agregamos 950 ml de agua , 1000 ml de
.L .A C
hipocloritoP al.A 0,5
%
ROF
GDA
IC
NA
OMBOL
OTRA DILUCIN
46
Ej. PARA PISOS O MESADAS
Tenemos una solucin comercial 40 g/l o 40000 ppm
Preparar 10 litros de solucin al 0.05 % o 500 ppm
Clculo
10 litros = 10.000 ml
10.000 x 500 = V x 40.000
V= 10.000 X 500/40.000
V = 125 ml Medimos 125 ml en la probeta y lo agregamos al

balde con 9875 ml de agua aprox. 10 litros
47
ALCOHOL 70
TABLA DE GAY LUSSAC
48
Para preparar alcohol 70
se realiza el
siguiente clculo:
Por
cada 100 ml de alcohol 95 agregar 39 ml de

agua destilada.
Rotular el recipiente
Ej.
que lo contiene
Preparar alcohol 70 en gran cantidad.

medimos 2000 ml de alcohol 95 y agregamos en
otra probeta 780 ml de agua destilada
49
ESTERILIZACION
Proceso mediante el
cual se alcanza la
muerte de todas las
formas de vida
microbianas
Incluyen bacterias y sus

formas de resistencias
(esporas), hongos y
virus
MUERTE
50
Prdida irreversible de la
capacidad de reproducirse
el microorganismo
Un objeto est estril o no lo

est, en trminos absolutos
51
ESTERILIZACIN
Procedimiento fsico o qumico
Los procedimientos qumicos fueron vistos por el

glutaraldehdo al 2 %
Procedimiento fsico, tenemos energticos y mecnicos
Procedimiento fsico: calor hmedo o seco
Procedimiento mecnico: filtracin
52
CALOR HMEDO
La esterilizacin trmica destruye los

microorganismos en forma gradual
Utiliza vapor de agua a 121 C y a 1 at de presin o
1 bars por 15 a 20 minutos
El primer efecto letal es la ruptura de la cadena de
ADN que provocan la muerte celular
El aparato a utilizar es el autoclave
AUTOCLAVE
53
54
DESCRIPCIN
VERTICAL DE MANEJO MANUAL
La fuente de calor puede ser elctrica o a gas

Consta de dos cilindros uno externo con mltiples tornillos, con
tapa de cierre hermtico y un cilindro interno donde se coloca el
material a esterilizar
El recipiente externo contiene vlvula de seguridad, manmetro
y/o termmetro y una llave de salida o escape
En el recipiente interno se coloca agua destilada
Donde se producir el vapor de agua
Primero ,luego de cerrado hay que purgar el aire
Paso siguiente cuando se elimina el aire y fluye el vapor se cierra y
comienza subir la temperatura, se estabiliza a 121 y a 1
atmsfera de presin controlando la fuente de calor
Luego de 20 minutos se apaga y se deja enfriar sin abrir la tapa
MATERIAL
55
Todo material debe estar envuelto en papel camilla y

atado o utilizar envoltorio de diseo especfico para
esterilizacin
Ej. de marcas comerciales combinacin de papel y

polmero transparente
Para autoclave de vapor y xido de etileno
Sellable por calor
CALOR SECO
56
Requiere mayor temperatura y tiempo que el autoclave
Las temperaturas son:
160 C. 2 horas
170 C.. 1 hora o
180 C 30 minutos
El horno Poupinell o de esterilizacin consta de un recinto

metlico de doble pared, con aislante y una puerta
La fuente de calor es elctrica
Contiene un ventilador, para mejor circulacin del aire caliente

CALOR SECO
57
Se deben colocar paquetes pequeos y espaciados

Todos rotulados con el material que contienen y la fecha
La
carga del horno se debe realizar en fro (de lo contrario su

interior alcanzar la temperatura ANTES que el material)
58
CONTROLES DE
ESTERILIZACIN
59
Existen tres tipos:
Fsicos
Qumicos
Biolgicos
CONTROLES FSICOS
60
Estn relacionados al operario

que realiza los procedimientos y
la vigilancia de ciertos
parmetros, como presin,
tiempo, temperatura.
61
CONTROLES QUMICOS
Consiste en tiras de papel con una sustancia que cambia

de color al ser expuesto a la temperatura
correspondiente
Con este tipo de papel debe realizarse en todo ciclo de

esterilizacin
Ventaja: permite conocer el resultado con rapidez
Desventaja: dice poco sobre el tiempo de exposicin
CONTROLES
BIOLGICOS
62
Son los ms seguros
Consisten en una ampolla conteniendo un papel de

filtro impregnado con espora de bacterias capaces de
resistir temperaturas cercanas a los procesos
realizados
Se utilizan esporos de Bacillus estearothermophilus

para autoclave y Bacillus subtilis para el horno
Poupinell
CONTROL BIOLGICO
63
Este sistema se coloca a incubar rompiendo la

ampolla, si hay microorganismos vira el color
del indicador de pH, revelando la falla del
procedimiento.
Se deber esterilizar todo de nuevo
Se realiza este proceso una vez por semana
64
CONTROLES
65
ESTERILIZACIN
El funcionario que trabaja en esterilizacin tanto

con autoclave como estufa Poupinell debe usar
proteccin personal.
Guantes de neopreno o termoresistentes

delantales trmicos y cubre brazos trmicos
66
EN CASO DE DERRAME DE
FLUIDO BIOLGICO O ROTURA
DE MATERIAL DE VIDRIO CON
FLUIDO BIOLGICO
PROCEDIMIENTO
Respuesta inmediata
Utilizar gafas o tapaboca quirrgico
Colocar guantes de neopreno y delantal especial
Cubrir con toalla de papel u otro material absorbente o sustancia gelificantes o
solidificantes para que no se expanda
Verter desinfectante de nivel medio 5000 ppm o al 0.5% por 30
Se comienza a verter desde el exterior hacia el centro del derrame
Los vidrios rotos si hubiere, utilizar pinzas y descartar en envases rgidos para su
eliminacin final
Limpiar y luego desinfectar nuevamente la zona afectada
Eliminar los materiales contaminados
Limpiar con pao de piso u otro elemento, desinfectndolo con hipoclorito de
sodio a 5000 ppm por 30
Notificar del incidente al supervisor
67
BIBLIOGRAFIA

Bioseguridad

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Debe existir un programa diseado en forma

Este programa debe contemplar polticas de

El responsable principal es el Director del laboratorio

Puede delegar a un responsable de Bioseguridad, o en

Se la asignan varias tareas por ej. , asegurar que las polticas y

Verificar que todo el personal haya recibido la capacitacin

Promover la educacin continua

Investigar accidentes e incidentes

Revisar peridicamente los procesos, los procedimientos y los

Tiene las funciones de desarrollar polticas y

Notifica al responsable de la Institucin

Est constituido por profesionales del

Las medidas deben involucrar a todos lo

Todo el personal debe seguir las

mascarillas, gorro, tnicas, cmaras de

El Centro de Control y Prevencin de

Por lo tanto los laboratorios que desarrollan las

En cada uno de ellos las buenas prcticas se

Se clasifican segn el nivel y tipo de proteccin.

Agentes que tienen pocas probabilidades

Agentes patgenos que pueden producir

Agentes patgenos que suelen provocar

Agentes patgenos que suelen provocar

GRUPO I - Escaso riesgo para el individuo y para la comunidad.

GRUPO II - Riesgo individual moderado para los individuos y limitado para

Ej. S. typhi, virus Hepatitis B

Ej. M. tuberculosis, Brucella sp

GRUPO IV - Son de alto riesgo para el individuo y para la comunidad.

Ej. virus Ebola

Estas cabinas no previenen la exposicin por contacto ni

Abiertas frontalmente se asemejan a las campanas de uso

Utilizadas para trabajar con grupos de riesgo tipo 1 y 2.

Adems de proteger al operario, ofrecen proteccin

Son vlidas para el manejo de agentes biolgicos de

II B1 y II B2, se diferencian principalmente en la

CABINA BIOLGICA III

Utilizadas para trabajar con nivel de riesgo 3 y 4.

Ofrece mxima proteccin al trabajador y al

Hermticamente cerradas, con flujo de presin

Presenta filtros (HEPA) para el ingreso y extraccin

Instalado para trabajar con microorganismos de los grupos de

El trabajo se realiza sobre mesadas de trabajo utilizando

Se usarn en todo momento tnicas y guantes protectores

Se usarn gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de

En las zonas de trabajo estar prohibido comer, beber, aplicar

Estar estrictamente prohibido pipetear con la boca. Para

Todos los procedimientos deben llevarse a cabo con

Todos los derrames, accidentes y exposiciones sern

Jabn lquido en frasco dispensador (de

Toalla de papel o secador de manos automtico

Mojarse las manos (no agua caliente)

Frotarse las manos al menos 20 segundos, frotndose la palma,

Enjuagarse con agua limpia. El agua se debe escurrir hacia la

Secarse con toallas desechables y con la misma cerrar la canilla.

CONCENTRACIN DEL AGENTE

Adecuar la concentracin del desinfectante y

Con concentraciones mnimas no solo no se

La temperatura aumenta el poder bactericida del

La presencia de materia orgnica como mucus, pus,

Los desinfectantes se clasifican en: nivel alto, medio y

DESINFECTANTES DE ALTO NIVEL

Se caracterizan por actuar sobre los esporos