INVURNUS

En busca del conocimiento

Volumen 9 No. 2 (Julio-Diciembre 2014): 31-36

Universidad de Sonora
Unidad Regional Norte

ANLISIS

Evaluacin de tres cepas de levadura comercial en la produccin de Etanol

a partir de Melaza
De La Vara Morales Ivn1, Espinoza Ojeda Eligio2, Lugo-Sepulveda Ramn Efran2,
Valencia-Rivera Dora Edith2, Ortega-Garca Jess*2

1 Alumno del Programa de Qumico Biologo Clinico, del Departamento de Ciencias Qumico Biolgicas y Agropecuarias de la Unidad
Regional Norte de la Universidad de Sonora.
*2 Departamento de Ciencias Qumico Biolgicas y Agropecuarias de la Unidad Regional Norte de la Universidad de Sonora

Resumen
La produccin de alcohol a partir de melazas y los factores involucrados en el rendimiento en una planta productora de alcohol, estn
delimitados por: la cepa de levadura, el rendimiento en la produccin de etanol y la temperatura de fermentacin. Estos factores mejoran
el proceso industrial, el porcentaje de alcohol producido y la reduccin de la concentracin de los azcares residuales. El objetivo de
este trabajo es eficientizar el proceso industrial en la planta de produccin para que sea redituable, consolidarse y generar una derrama
econmica para la regin de Caborca, Sonora. En el presente trabajo de investigacin se compararon tres cepas de levaduras; Etanol
red, Safdistil plus y FT-858. Se realizaron fermentaciones con melazas de los aos 2012 y 2013. En las fermentaciones se cuantifico el
contenido de alcohol mediante densitometra y los azucares reductores con la tcnica de Lane-Eynon. La levadura FT-858 obtuvo el
mayor contenido de alcohol a la temperatura optima de 32C, con tiempos cortos de fermentacin y con mayor consumo de azucares.
Los rendimientos de alcohol a 98GL obtenidos por esta cepa fueron de 251 y 257 y de 309 y 315 litros por tonelada de melaza obtenida
en el ao 2012 y 2013, respectivamente.
Palabras clave: melaza, azucares reductores, produccin de etanol.

Evaluation of three strains of yeast commercial in ethanol production of molasses

Abstract
The production of alcohol from molasses and performance factors involved in plant alcohol producer, are delimited by the yeast strain,
the yield of ethanol production and the fermentation temperature. These factors improve the manufacturing process, the percentage of
alcohol produced and reducing the concentration of the residual sugar. The aim of this work is make efficient industrial process plant
production to be profitable, consolidate and generate an economic impact for the region of Caborca, Sonora. In the present investigation
three strains of yeast were compared; Ethanol network, plus Safdistil and FT-858. Fermentations were conducted with molasses 2012 and
2013. Fermentation alcohol content was quantified by densitometry and reducing sugars with the technique of Lane-Eynon. The FT-858
yeast had the highest alcohol content at the optimal temperature of 32C, with short fermentation times and increased consumption of
sugars. Yields of 98GL alcohol obtained by this strain were 251 and 257 and 309 and 315 liters per ton of molasses obtained in 2012
and 2013, respectively.
Key words: molasses, reducing sugars, ethanol production.

*Autor para envo de correspondencia: Av. Universidad e Irigoyen, s/n. Col. Ortiz. Caborca, Sonora, Mex. C.P. 83621.
E-mail:jortega@guayacan.uson.mx
2014 Editorial UNISON URN. Derechos reservados.

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INVURNUS, Vol. 9 No. 2 (2014): 31-36

Introduccin
Los conocimientos sobre la fermentacin fueron atesorados
desde la antigedad por importantes civilizaciones como la
Egipcia y la Asitica quienes la emplearon para la produccin
de bebidas alcohlicas, de igual manera la civilizacin
Azteca y China la utilizaron para obtencin de productos
alimenticios tales como las salsas fermentadas. El proceso
de fermentacin se mejor a partir de la identificacin de
cultivos microbianos y al control de las condiciones de los
procesos; as, se industrializ la fermentacin y dio origen
a grandes industrias como la alimentaria donde se destacan
la panificadora, la de bebidas alcohlicas, la industria
farmacutica en el campo de las vacunas y medicamentos,
la industria qumica donde producen cidos, aldehdos, etc.
(Piergallini, 2008).
La fermentacin a nivel industrial tiene como objetivo,
aumentar la eficiencia del proceso con el fin de obtener
mejores resultados en la produccin de productos, por medio
del control de variables de operacin y la aplicacin de las
teoras, en ciertas variables que determinan la eficiencia del
proceso como lo son: temperatura, pH, niveles de alcohol,
concentraciones del sustrato y biomasa entre algunas otras
no tan importantes (Amador, 2007).
La fermentacin alcohlica comprende toda una serie
de reacciones bioqumicas a travs de las cuales algunos
microorganismos, por medio de un conjunto de enzimas
producidas por ellos mismos o aadidas artificialmente,
realizan una transformacin de azcares para convertirlos
en etanol, dixido de carbono y energa exotrmica la cual
libera molculas de Adenosin trifosfato (ATP), las cuales
son necesarias para el funcionamiento metablico de las
levaduras (CONAE, 2008).
Una fermentacin puede llevarse a cabo en un rango de
temperaturas de 25 a 35C, esta variable juega un papel
muy importante en la reproduccin de las levaduras y de
las bacterias. Este parametro influye en la composicin
de los cidos grasos de las membranas plasmticas y en el
proceso para degradar los azcares por los microorganismos
utilizados en las fermentaciones (Concepcin, et. al. 2005).
Existen muchas clases de fermentaciones, dependiendo del
tipo de microorganismo que la produce, del substrato o
incluso de las condiciones establecidas, como son el pH o el
oxgeno (Garzn, 2009).
Una de las fermentaciones ms importantes y mejor
conocidas es la alcohlica, la cual es una biorreaccin
que permite degradar la glucosa en alcohol y anhdrido
carbnico mediante la siguiente reaccin qumica:

C6H12O6 + S. cerevisiae 2C2H5OH + 2CO2

Los microorganismo responsables de esta transformacin
son principalmente levaduras como Saccharomyces
cerevisiae, siendo la ms utilizada en el mercado dado al
gran porcentaje de viabilidad que presenta al ser sometida
al proceso de liofilizacin (Alarcon, 2010).
Sin embargo, existen diversos estudios donde se ha
comprobado una mayor o igual eficiencia en la produccin
de alcohol por otras cepas de levaduras. Tambin pueden
utilizarse bacterias como Zymomonas mobilis, para la cual
su uso industrial es mnimo debido a sus condiciones de
crecimiento, ya que la mayora de las bacterias no toleran
un pH cido por lo cual se deben mantener a un pH
ligeramente alcalino, condiciones ptimas para el desarrollo
no solo de esta bacteria sino para cualquier otra, teniendo
as un gran riesgo de contaminacin en las fermentaciones
(Alarcon, 2010).
Aparentemente esta reaccin es muy sencilla, pero la
secuencia de transformaciones para degradar la glucosa hasta
dos molculas de alcohol y dos de anhdrido carbnico es
un proceso muy complejo, puesto que al mismo tiempo la
levadura debe utilizar glucosa y otros nutrientes adicionales
para poder reproducirse. El rendimiento terico para la
transformacin de glucosa en etanol es de 0.511g de etanol
y 0.489 g de anhdrido carbnico por gramo de glucosa
(Cholata, 2010).
Al llevar a la prctica este nivel estequiomtrico es difcil
obtener el rendimiento anteriormente mencionado por que
la levadura utiliza la glucosa para producir otros metabolitos
indispensables para su crecimiento y desarrollo. A nivel
experimental vara entre 90 y 95% del terico mientras que
en la industria la variacin es de 87 al 93% (Vzquez, 2007).
En la bsqueda de mejorar el rendimiento en la produccin
de etanol, en el presente trabajo de investigacin se
compararon tres cepas de levadura de diferentes casas
comerciales; Etanol red (FERMENTIS), Safdistil plus
(FERMENTIS) y FT-858 (LNF).
Las pruebas de fermentacin se realizaron utilizando dos
tipos de melazas una adquirida el ao 2012 y la segunda
el ao 2013. Para cuantificar la produccin de etanol se
utiliz la tcnica de densitometra en unidades Gay-Lussac
(Secretaria de Comercio y Fomento Industrial. 1991.
NMX-F-277-1991) y para la cuantificacin de azucares
reductores se utiliz la tcnica de Lane-Eynon (Compendium
of International Analysis of Methods-OIV. 2009. Method
OIV-MA-AS312-01B).

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Materiales y mtodos
Material biolgico
Se evaluaron tres hbridos de la cepa Saccharomyces
cerevisiae liofilizada, fabricadas para su comercializacin
por diferentes casas comerciales.
1. Etanol red
(FERMENTIS MXICO)
2. Safdistil plus (FERMENTIS FRANCIA)
3. FT-858
(LNF BRASIL)
Etanol Red
Es una cepa especialmente seleccionada que se ha
desarrollado para la industria del etanol, es una cepa que
crece rpidamente y mantiene una mayor viabilidad celular,
est diseada para la produccin de alcohol a temperaturas
elevadas. Etanol red es capaz de maximizar los rendimientos
de alcohol bajo una gama definida de temperaturas.
Safdistil plus
Es una levadura hibrida seleccionada por Lesaffre
Internacional de R&D (Francia), por su cintica de
fermentacin superior, resistencia a la temperatura y
tolerancia al alcohol, es recomendada para fermentacin
tanto de azcar, jugos espesos de varias composiciones y
sustratos de grano.
FT-858

clarificadas utilizando carbn activado y posteriormente

filtrado con vaco.
Medio de cultivo
Las fermentaciones fueron llevadas a cabo realizando
diluciones melaza-agua hasta llevarla de 85B hasta 25B,
con ayuda de un refractmetro digital marca ATAGO modelo
DBX-55A, se pes 1.12 Kg de melaza adicionando 2.7 Kg de
agua para poder obtener 3.48 L de melaza diluida a 25B.
De cada melaza se tomaron tres muestras de un Litro y se
colocaron en botellas de plstico de dos Litros y se adicion
2 g/L de difosfato de amonio (DAP) como nutriente nico
para tener una concentracin de nitrgeno de 350 ppm. El
pH fue ajustado a 4.5 con cido fosfrico al 85% utilizando
un potencimetro digital marca HANNA modelo HI 99161.
Las temperaturas de fermentacin probadas fueron de 30,
31, 32, 33, 34 y 35C, esto despus de realizar estudios
de fermentacin preliminares a diferentes temperaturas con
diferentes sustratos. La temperatura fue controlada con un
bao mara elctrico con regulador de temperatura marca
MAPSA modelo BMT-8, con ayuda de un termmetro marca
BRANNAN de -20 a 110C.
Inoculacin con levaduras
Los medios de cultivo fueron inoculados con 0.5g de
levadura previamente hidratada en un matraz Erlenmeyer
de 250 mL, con 30 mL de agua a 30C durante 10 minutos.
Se prepararon dos replicas por cada levadura.
Determinacin de azcares reductores

Esta levadura en particular es diseada y distribuida

nicamente desde Brasil. Es una cepa aislada que se destaca
especialmente en fermentaciones con melazas y por algunas
caractersticas que son esenciales para la fermentacin
como: fermentacin de alto rendimiento, baja formacin
de espuma, altas tasas de multiplicacin en el arranque, no
floculante, alto grado de implantacin y supervivencia y la
tolerancia al estrs de la fermentacin.
Materia prima
Las melazas con las cual se trabaj se recibieron
de un ingenio ubicado en los Mochis, Sinaloa,
Compaa Azucarera de los Mochis S.A. de C.V.
Las melazas fueron compradas en el mes de Enero de los
aos 2012 y 2013, y fueron almacenadas en contenedores
de acero inoxidable con capacidad de 700,000 litros, ambas
melazas presentaron diferente contenido de azcares
reductores (AR) pero igual porcentaje de slidos 85B
(grados Brix). Antes de ser utilizadas ambas melazas se llev
acabo un proceso de acondicionamiento en el cual fueron

Esta prueba se llev a cabo por el mtodo de Lane-Eynon

y fue el mtodo utilizado para la cuantificacin de los
ART tanto en melazas de 85B como en las diluciones de
melaza a 25B y en el mosto fermentado para determinar
los azcares residuales (AR). Previamente al anlisis las
muestras fueron clarificadas, primero con carbn activado
al momento del enfriamiento posterior a la inversin de los
azcares, y despus se centrifugaron usando una centrifuga
marca PREMIERE modelo XC-2000 a 2500 rpm durante un
minuto para posteriormente titular con estas muestras las
soluciones Fehling.
Determinacin de alcohol (grados Gay-Lussac)
Los niveles de alcohol fueron determinados por densitometra
con alcoholmetros Dujardin-Salleron certificados (con rango
de 0-20GL realizando una destilacin previa de los mostos
al terminar la fermentacin como se indica a continuacin.
Se colocaron 200 mL de la muestra fermentada ms 200

De la Vara Morales y col., Evaluacin de tres cepas de levadura comercial en la produccin de Etanol

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INVURNUS, Vol. 9 No. 2 (2014): 31-36

mL de agua y se colocaron en un matraz de bola fondo

plano cuello largo de un litro, se adicion perlas de vidrio.
El matraz bola fue conectado a un condensador en espiral
de 30 cm de largo, y se procedi a calentar la muestra hasta
ebullicin utilizando una placa elctrica marca CIMAREC
modelo SP131325, se recolectaron 200 mL del destilado.
La densitometra se llev a cabo en una probeta de vidrio de
250 mL en donde fue sumergido el alcoholmetro con 200
mL del destilado.
Debido a que los niveles de la densitometra son afectados
por la temperatura se realiz un ajuste en las lecturas del
alcoholmetro considerando la temperatura de las muestras
destiladas para ajustar el grado alcohlico obtenido en las
lecturas, por medio de interpolacin donde se reportan la
variacin de alcohol con la variacin de temperatura o bien
realizando una lectura a temperatura de 20C en la cual no
se manifiesta efecto alguno en la graduacin (Compendium
of International Analysis of Methods-OIV. 2009. Method
OIV-MA-AS312-01B).

En las fermentaciones con las temperaturas de 30, 31 y

33C solo presentaron como inconveniente un incremento
de tiempo en los ciclos de fermentacin a medida que
descendi la temperatura, pero este parmetro no afect la
produccin de alcohol de las tres levaduras.
Efectuando un anlisis de slidos contra tiempo con un
refractmetro digital se logr observar el consumo de
azcar, midiendo su concentracin en B y los tiempos
de fermentacin en las tres levaduras para ambas melazas
(Figura 1 y 2). Con la melaza obtenida en el ao 2012 se

Resultados y discusin
Los resultados mostrados a continuacin representan al
menos cinco experimentos independientes, en cada uno de
los casos correspondientes.
Azcares reductores totales (ART)
Se determin el contenido de ART en ambas melazas de 85B
con las que se trabaj, Obteniendo como resultado: Melaza
utilizada el 2012 a 85B, 390 g/kg ART, representando el
44%, en relacin al peso total de melaza; Melaza utilizada
el 2013 a 85B, 497 g/kg ART, representando el 58%, en
relacin al peso total de melaza. Posteriormente se realizaron
diluciones agua-melaza para llevarlas de 85B hasta 25B
obteniendo como resultado: Melaza utilizada el 2012 a
25B, 126 g/L ART. en relacin al peso total de melaza.
Melaza utilizada el 2013 a 25B, 161 g/L ART. en relacin
al peso total de melaza. Este tratamiento es necesario para
proceder a la fermentacin. El suelo y el clima, la variedad y
la madurez de la caa, y las condiciones de procesamiento
en la fbrica, tienen influencia sobre la composicin de
la melaza. En consecuencia, una considerable variacin se
puede encontrar en el contenido de nutrientes, sabor, color,
y la viscosidad de la melaza. Pero, en general, la sacarosa es
el principal azcar presente (El-Gendy, et. al. 2013; Chen,
2003).

Figura 1. Fermentaciones llevadas a cabo por las levaduras

LNF FT858, Etanol Red y Safdistil Plus, utilizando como
sustrato la melaza adquirida en el ao 2012. (Nota: los
valores son graficados en esas escalas para una mejor
representacin de la informacin).

Temperatura y tiempo de fermentacin

La temperatura optima de fermentacin fue a los 32C,
debido a que en las temperaturas de 34 y 35C se observ
una disminucin de 0.2GL en todas las fermentaciones.

Figura 2. Fermentaciones llevadas a cabo por las levaduras

LNF FT858, Etanol Red y Safdistil Plus, utilizando como
sustrato la melaza adquirida en el ao 2013. (Nota: los
valores son graficados en esas escalas para una mejor
representacin de la informacin).

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obtuvieron las fermentaciones ms rpidas en relacin a la
melaza obtenida en el ao 2013. La levadura FT-858 tuvo
un tiempo de fermentacin de 28 h, despus la levadura
Safdistil plus con 32 horas y al final la levadura Etanol Red,
teniendo el mayor tiempo de fermentacin con 36 hrs de
duracin (Klomklieng, 2012).
Debido a la mayor cantidad de azcares reductores
determinados en la melaza del ao 2013, se observ un
mayor tiempo de fermentacin. Los tiempos de fermentacin
obtenidos en la levadura FT-858 fue de 32 horas, despus la
levadura Safdistil Plus tuvo un total de 41 horas y al final la
levadura Etanol red tuvo 47 horas.
Azcares residuales (AR)
Una vez terminadas las fermentaciones se determinaron
los azcares residuales (azcares quedan al finalizar la
fermentacin) para conocer la cantidad de azcar que no
fue consumido por las levaduras como resultado de las
fermentaciones con las melazas correspondientes a los aos
2012 y 2013 como se muestra en la Tabla 1. La levadura
FT-858 fue la que present el menor contenido de azcares
residuales de las tres levaduras en las fermentaciones en
las que se utiliz melazas como sustratos de los aos 2012
y 2013 que se probaron presentando una diferencia de
1 g/L y 0.5 g/L menos en comparacin con las otras dos
levaduras respectivamente. De igual manera se realiz el
anlisis de AR para las fermentaciones en la melaza del ao
2013, observndose nuevamente en la levadura FT-858
una disminucin de los azcares residuales, en casi 0.5
g/L en comparacin con las levaduras Etanol red y Safdistil
plus. La levadura FT-858 present un menor porcentaje de
azcar residual logrando consumir un mayor porcentaje
de azcares en las dos diferentes muestras de melazas.
Los resultados obtenidos estn por debajo de lo reportado
por Guarnizo-Franco, et. al. 2012, lo cual indica que la
fermentacin se realiz de manera ms eficiente para la
obtencin de alcohol.
Determinacin de alcohol (GL)
Los niveles de alcohol resultantes, para las fermentaciones en
la melaza del ao 2012 con 44% de ART son mostrados en

la Tabla 1, donde se observa que se obtuvo un rendimiento

para Etanol red y Safdistil plus de 251 L de etanol a 96GL
por tonelada de melaza y de 257 L para FT-858, iniciando
las fermentaciones a 25B detenindose a 15.5B en las
tres levaduras. Los niveles de alcohol resultantes, para
las fermentaciones en la melaza del ao 2013 con 58%
ART, son mostrados en la Tabla 1, donde se observa que
se obtuvo un rendimiento de 309 L de Etanol a 96GL
por tonelada de melaza para Etanol red y Safdistil plus y
aument nuevamente para FT-858 a 315 L/Ton, iniciando
las fermentaciones a 25B y detenindose a 13.5B en las
3 levaduras. Los resultados favorecieron nuevamente a la
levadura FT-858 la cual produjo 0.2GL ms en las dos
melazas, esto debido a que es una levadura especfica
para melazas creada en Brasil para esta finalidad y que
fue proporcionada para probarse en melazas obtenidas en
Mxico.
Conclusiones
De los resultados obtenidos se pudo concluir que la
temperatura ptima para obtener un mayor rendimiento en
la produccin de etanol para las tres levaduras fue 32C,
reduciendo con esto los costos de produccin. Asimismo
los tiempos de fermentacin dependieron de la levadura
utilizada como tambin de la cantidad de ART presentes
en las diluciones y del control de la temperatura en la
fermentacin. La levadura FT-858 diseada en Brasil realiz
una fermentacin ms rpida y mostr un mayor consumo
de azucares, presento el menor contenido de azcares
residuales y fue la que produjo una mayor concentracin
de alcohol, debido a que esta levadura es especfica para la
realizacin de fermentaciones con melaza.
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Tabla 1. Concentracin de azcar residual y concentracin de alcohol obtenidos al final de la fermentacin

utilizando melazas de los aos 2012 y 2013, a 32C.
Azcar residual (g/L)

Concentracin de alcohol (GL)

Levadura

Melaza del ao
2012

Melaza del ao
2013

Melaza del ao
2012

Melaza del ao
2013

FT-858

8.75

7.44

8.0

8.0

Safdistil plus

9.53

7.95

7.8

7.8

Etanol red

9.67

8.06

7.8

7.8

GL: Grados Gay Lussac.

De la Vara Morales y col., Evaluacin de tres cepas de levadura comercial en la produccin de Etanol

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