Laboratorio de Biologa para Ingenieros

ANTIOQUIA
Ingeniera

UNIVERSIDAD DE
Facultad de
Departamento de Ingeniera Qumica

PRACTICA 1
DETERMINACIN DE AMINOCIDOS Y PROTENAS

PROPSITO

Reconocer la presencia de algunos aminocidos en las protenas, a travs de reacciones

especficas que permiten su identificacin.

GENERALIDADES
Las protenas son el primer grupo de compuestos orgnicos de importancia biolgica.
Forman las dos terceras partes del peso seco de las clulas y son imprescindibles en todos
los procesos que se tienen en los seres vivos. Algunas transportan pequeas molculas e
iones al interior de las clulas. Otras, como los anticuerpos, reconocen y neutralizan
sustancias extraas al organismo, como los virus y las bacterias. Otras intervienen en la
generacin y transmisin de los impulsos nerviosos.
Reacciones caractersticas de aminocidos y protenas:

a. Reaccin de Ninhidrina: la ninhidrina, un agente oxidante, reacciona con los aminocidos a un pH entre 4 y 8 para dar un compuesto de color azul-prpura. Esta
reaccin se efecta tambin con aminas primarias y amonaco pero sin desprendimiento
de CO2.
Los aminocidos prolina e hidroxiprolina, tambin reaccionan con la ninhidrina, pero en
este caso se obtiene un color amarillo. El complejo coloreado sirve como base para la
deteccin y la medicin cuantitativa de -L-aminocidos.

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b. Reaccin Xantoproteica: El cido ntrico reacciona con algunas protenas que contengan
en su estructura con anillos aromticos dando un color amarillo que se oscurece hasta
anaranjado cuando se aade un lcali. Esta reaccin es positiva para las protenas que
contienen la fenilalanina, tirosina o triptfano.
c. Reaccin de Hopkins-Cole: el reactivo de Hopkins-Cole est formado por una mezcla de
cido sulfrico concentrado con cido gloxilico, este reacciona con protenas que
contengan triptfano dando un complejo color violeta.
d. Reaccin de aminocidos azufrados: Los aminocidos que contengan azufre, como es el
caso de la cistena y la metionina, reaccionan con acetato de plomo en medio bsico
formando un precipitado negruzco de sulfuro de plomo.
e. Reaccin de Ehrlich: La presencia de anillos aromticos fenlicos o nitrogenados en la
cadena lateral de los aminocidos se puede identificar mediante su reaccin con cido
sulfanlico y nitrito de sodio por formacin de colorantes azoicos fuertemente coloreados
permitiendo as detectar la presencia de tirosina e histidina libres o formando pptidos y
protenas.
f. Prueba de Biuret: Las sustancias que contengan dentro de la molcula varios grupos
amida muy cercanos dan una coloracin, usualmente violeta-prpura. Cuando se les
adiciona una pequea cantidad de sulfato de cobre (II) en medio alcalino. La coloracin se
2+
debe a la formacin de un complejo de coordinacin entre el Cu
y los grupos amida de
las uniones peptdicas.
Las protenas, proteosas y peptonas, dan positiva esta prueba. A medida que progresa la
hidrlisis de una protena, el color producido en la prueba de Biuret se decolora
gradualmente a rosa y despus desaparece ya que los pptidos ms pequeos y los
aminocidos no dan la coloracin.
g. Desnaturalizacin de las protenas: Este es un proceso por el cual el ordenamiento
espacial de ella cambia, de la estructura ordenada de la molcula nativa a una
configuracin tridimensional ms desordenada.
Durante la desnaturalizacin se rompen los enlaces de hidrgeno y los hidrofbicos, hay
un incremento en la entropa de la molcula con prdida de la actividad biolgica. Adems
la protena se vuelve menos soluble.

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MATERIALES:

Leche
Harina de trigo
Huevo
Tubos de ensayo
Bao mara

cido ntrico concentrado

Hidrxido de sodio al 25%
Sulfato de cobre al 1%
Reactivo de Biuret
Acetato de plomo al 2%

PROCEDIMIENTO.
Soluciones a preparar:

Solucin de albmina 50% v/v

Solucin harina de trigo

1. Reaccin de Xantoproteica: En tres tubos de ensayo coloque 2 ml de las siguientes

soluciones acuosas:
Tubo 1: Albmina
Tubo 2: leche
Tubo 3: Harina de trigo
A cada tubo adicione 5 gotas de cido ntrico concentrado y caliente al bao mara hasta
cambio de coloracin. Alcalinice la mezcla adicionando gota a gota hidrxido de sodio al
25%. Observe y anote los resultados

2. Reaccin de los aminocidos azufrados : En tres tubos de ensayo coloque 2 ml de las

siguientes soluciones acuosas:
Tubo 1: Harina de Trigo
Tubo 2: leche
Tubo 3: Albmina
A cada tubo adicione 3 gotas de hidrxido de sodio al 25% y 5 gotas de acetato de plomo
al 2%. Caliente la mezcla de reaccin al bao mara por 10 minutos. Observe y anote los
resultados.

3. Prueba de Biuret: En tres tubos de ensayo coloque 2 ml de las siguientes soluciones

acuosas:

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Tubo 1: Harina de trigo

Tubo 2: leche
Tubo 3: Albmina

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A cada tubo adicione 5 gotas de hidrxido de sodio al 25% y 5 gotas de sulfato cprico al
1%. Observe y anote los resultados.

4. Desnaturalizacin de protenas: en cuatro tubos de ensayos coloque 10 gotas de la

solucin acuosa de albmina y proceda de la siguiente manera: el tubo 1 calintelo
gradualmente en bao mara y observe la temperatura de coagulacin, a los otros tres
tubos adiciones, respectivamente:
Tubo 2: 20 gotas de etanol
Tubo 3: 5 gotas de HCl concentrado
Tubo 4: 5 gotas de hidrxido de sodio 50%
Agite y observe si se produce coagulacin.

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REPORTE DE DATOS

REACCIN

Xantoproteica

Aminocidos
Azufrados

Biuret

Desnaturalizacin

CONCLUSIONES

LECHE

ALBMINA

HARINA