You are on page 1of 27

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Biologa Celular y Molecular


Gua de Prcticas

Lima Per

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

FAMURP

Dr. Elio Ivn Rodrguez Chvez


Rector

Dr. Manuel Huamn Guerrero


Decano de la Facultad de Medicina Humana

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Instrucciones Generales
El estudiante ingresar al laboratorio vistiendo el mandil
blanco manga larga (largo). Y a la hora indicada en la Gua de
Matricula.
Est PROHIBIDO
laboratorio.

Fumar,

Comer

Beber

dentro

del

Est PROHIBIDO el uso de telfono celulares dentro del


laboratorio.
Todo material biolgico ser manipulado con guantes y segn
lo requiera la prctica se utilizar mascarilla.
Est PROHIBIDO
qumicas.

pipetear

con

la

boca

las

soluciones

Los alumnos participarn activamente durante el desarrollo de


cada prctica como parte de su evaluacin.
Antes de iniciar la practica correspondiente el alumno rendir
un test para verificar que posea los conocimientos bsicos
introductorios y conozca:
Conceptos tericos bsicos para esa practica
Los objetivos de cada prctica.
El material y equipo de laboratorio necesario para la
realizacin de
dicha prctica.

Material de uso permanente (obligatorio)


El material obligatorio y de uso permanente para cada
practica constar de lo siguiente:
- Material indicado en la gua de prctica.
- Laminas porta objetos: una caja por mesa de trabajo.
- Laminas cubreobjetos: una caja por mesa de trabajo.
- Guantes descartables: dos pares por alumno.
- Mandil blanco largo (manga larga).
- Gua de prctica y colores.
3

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Presentacin de resultados
Los resultados sern presentados al finalizar la prctica en el
formato respectivo.
Toda la gua de prctica ser presentada al finalizar el
semestre acadmico (Opcional).

CRONOGRAMA DE PRACTICAS 2015 I

SEMANA
23/3 al 27/3
30/03 al 03/4
06/4 al 10/4
13/04 al 17/4
20/4 al 24/4
27/4 al 01/5
04/5 al 08/5
11/5 al 15/5
18/5 al 22/5
25/5 al 29/5
01/6 al 05/6
08/6 al 12/6
15/6 al 19/6
22/6 al 26/6
29/6 al 03/7

TITULO DE LA PRACTICA
Microscopa
Niveles de organizacin de los seres vivos
Medicin de poblaciones celulares
Interaccin de sistemas autopoyeticos eucariotas
multicelulares y procariotes.
Organizacin celular: Clulas Procariotas y
Eucariotas
Receptores de Membrana: Antgenos sanguneos
EXAMEN PRACIAL
Permeabilidad de la Membrana Celular
Identificacin de Citoesqueleto y Organelas
celulares
Cromatina Sexual: Cuerpo de Barr
Identificacin del Ncleo Interfsico
Divisin Celular
Extraccin de ADN y Tcnicas en Biologa Celular y
Molecular
Gametognesis
EXAMEN FINAL

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

BIOSEGURIDAD DENTRO DEL


LABORATORIO
Las normas de bioseguridad adecuadas para la
permanencia en el laboratorio son las
siguientes:
1.
El ingreso se realizar con el mandil
puesto.
2.
El cabello se mantendr recogido
durante la permanencia en el laboratorio,
evitando as una posible contaminacin.
3.
No se permitir el ingreso a las
personas que presenten minifaldas, shorts
o bermudas, al igual que las personas que
presenten
sandalias
o
zapatos
descubiertos.
4.
Sobre las mesas de trabajo solo se
podr colocar el material requerido para
realizar las prcticas y el material
obligatorio.

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

5.
Antes de manipular las muestras
biolgicas el estudiante deber colocarse
los guantes descartables.
6.
Se utilizara mascarillas o gafas segn lo
requiera la prctica.
7.
Se utilizaran propipetas para medir
cualquier solucin. No utilizar la boca.
8.
Se realizaran coloraciones sobre varillas
de vidrio localizadas en los respectivos
lavaderos de cada mesa.
9.
Al trmino de la prctica se dejara el
material utilizado y el rea de trabajo
limpio.
10. Durante la permanencia en el
laboratorio est prohibido comer, fumar
o beber.

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO


Introduccin:
En el laboratorio y en las prcticas es esencial la utilizacin de instrumentos y
materiales para el manejo de los reactivos, colorantes y muestras. Hay una
serie de materiales que nos va a permitir el desarrollo de las practicas, es por
eso necesario el reconocimiento de estos, cual y como es su uso, por eso muy
importante reconocerlos.
Material de vidrio:
Bagueta: se utiliza para agitar sustancias.

Caja De Petri: Existen de diferentes medidas; es utilizada para preparar


cultivos de hongos y bacterias, y tambin para seleccionar muestras de
animales.

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Frasco Gotero: Son de color blanco o mbar. Sirven para guardar de una
manera segura los reactivos, regularmente se administra con conteo de gotas.

Tubos de ensayo: Estos recipientes sirven para hacer experimentos o


ensayos, los hay en varias medidas y aunque generalmente son de vidrio
tambin los hay de plstico

Pipetas: Permiten medir volmenes. Las hay en dos presentaciones:


a) Pipetas graduada: Es un elemento de vidrio que sirve para dar
volmenes exactos, con esta pipeta, se pueden medir distintos volmenes
de lquido, ya que lleva una escala graduada.

b) Pipeta volumtrica: Es un elemento de vidrio, que posee un nico valor


de medida, por lo que slo puede medir un volumen.

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

c) Pipetas pasteur.

Laminas excavadas: lminas de porcelana con 12 pozos para observar


reacciones de aglutinacin para determinar grupo sanguneo.

Mecheros de vidrio para alcohol

Otros materiales:
Propipeta: este se utiliza junto con la pipeta para trasvasar lquidos de un
recipiente a otro.

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular


Hojas de bistur.

Gradilla para tubos de ensayo.


pipetas.

Universidad Ricardo Palma


Pinzas de madera

Gradilla para

Equipos:
Incubadora

Microscopio compuesto de campo claro


600 grs.

Centrfuga

Balanza de 0

10

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

PRACTICA N 1
MICROSCOPA
El microscopio es uno de los instrumentos ms importantes y verstiles usados
por la ciencia para la identificacin y la compresin de los principios generales
y las particularidades especiales en lo que se refiere a la estructura de las
clulas, los tejidos y los rganos. Es difcil encontrar algn campo de la ciencia
o de la industria donde no se utiliza el microscopio.
Este es un instrumento que permite amplificar la imagen de un objeto
pequeo. La imagen puede ser observada directamente, fotografiada o
percibida por fotoclulas u otros receptores, dependiendo de la naturaleza y
del uso que haya de hacerse de esta imagen.
Fundamentos de la microscopia
La microscopia tiene como base:
*

La radiacin aprovechable por la longitud de onda, como fuente de


poder, que permite usar la longitud de onda del espectro de luz, en la
11

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

*
*

microscopia ptica a
electrnica.
El poder de resolucin
La magnificacin.

las

ondas

Universidad Ricardo Palma


electrnicas

en

la

microscopia

Estas propiedades fundamentales de la microscopia, permiten examinar


detalles mnimos de la estructura y ultraestructura de la clula, de sus
organelas, y de los microorganismos. As mismo permite detectar
imperfecciones en metales, cristales, cermica, tipo de rocas, minerales,
fsiles, etc.
Clases de microscopios
Los microscopios pueden clasificarse como:
Microscopio simple, que esta compuesto por un lente.
imagen virtual y derecha. Ejemplo la lupa.

Estos forman una

Microscopios compuestos, formados por varios lentes. Estos se caracterizan


por formar una imagen real e invertida y son de varios tipos.
MICROSCOPIOS OPTICOS:
El microscopio ptico comn sigue siendo el instrumento ms importante para
la enseanza y la investigacin de muchas especialidades como la biologa
celular.

Entre los que pertenecen a la microscopia ptica tenemos:


Microscopio Compuesto de Campo Claro.
Breve resea histrica:
En 1590 Hans y Zacaras Janssen (Middleburg, Holanda) construyeron el primer
microscopio compuesto. Este consista de un tubo con lentes en ambos
extremos, cerca de uno de ellos se coloca el objeto (objetivo) y por el otro
extremo se observa (ocular). Este instrumento artesanal constituy la base
conceptual de la microscopia moderna.
Antonio Van Leewenhoek (1673) us un magnificador simple y un soporte para
el espcimen y observ protozoarios infusorios (ciliados) a una magnificacin
de aproximadamente 275 X. El descubri microorganismos en agua y en 1683
public sus primeros dibujos de bacterias, tambin descubri el
espermatozoide humano.

12

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Giovanni Batista Amici (1827), es famoso por los microscopios de alta calidad,
introdujo un conjunto de sistemas acromtico. El incidi en la importancia del
espesor del cubre y porta objeto para la calidad de la imagen. Invent el
objetivo de inmersin.
El trabajo de Amici sirvi para que un grupo de microscopistas de Carl Zeiss,
Ernst Abbe y Otto Schott, disearan el sistema de inmersin usando un aceite
que tenga el mismo ndice de refraccin que el vidrio, incidieron en la
importancia de la apertura numrica.
Asimismo en 1886 introdujeron los objetivos apocromticos para el
microscopio.
En los primeros aos del siglo XX, el profesor Kohler ide el mtodo de
iluminacin microscpica, conocido universalmente como "iluminacin Kohler";
tambin diseo y perfeccion el microscopio de luz ultravioleta.
Partes:
A. El Sistema de Soporte
Consiste en:
La Base
El Brazo
El Revlver
La Platina
B. El Sistema de Aumento.
Los Objetivos: Lentes donde se forma a la imagen real, invertida
y aumentada del espcimen que se observa.
Aumento:
El objetivo de 10x aumenta 10 veces.
El objetivo de 40x aumenta 40 veces.
El objetivo de 100x aumenta 100 veces.
Los objetivos secos son: 4X, 10X, 40X, El objetivo de 100x utiliza
como medio ptico del aceite de inmersin.
Apertura numrica (A.N)
Es la medida de la capacidad de un objetivo para colectar rayos de
luz difractados que pasen a travs del espcimen.
La AN es calculada como el producto del seno. (Mitad del cono de
luz que acepta el objetivo) y el ndice de refraccin (IR) del medio
ptico en el cual est trabajando el objetivo
AN = sen (IR)
El valor de la AN, est indicado en cada lente objetivo:
0.30 en el Objetivo de 10x
0.65 en el Objetivo de 40x
1.30 en el objetivo de 100x
A medida que aumenta la apertura numrica mayor es el poder de
Resolucin.
13

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Resolucin
Es la capacidad del microscopio para discriminar dos puntos
situados uno cerca de otro (poder de resolucin). Esta capacidad se
extienda hasta una distancia mnima que el instrumento es capaz
de distinguir (limite de resolucin).
La resolucin (r) tiene un valor diferente para cada objetivo y se
calcula de la siguiente manera:
r=

= 550 nm
numrica

0.61 .
AN
0,61

constante

El Ocular: son un conjunto de lentes que permiten magnificar la


imagen aumentada por el objetivo. Acta como una lupa es decir
proyecta una imagen virtual y derecha de la definida por el
objetivo. Por ejemplo si la imagen del objetivo aumenta 40 veces
(objetivo de 40x) y enseguida de 10 veces mediante el ocular de
10x, el aumento ser de 400 veces.

C. El Sistema de Iluminacin.

Fuente luminosa.
Muchos microscopios bsicos, utilizan espejos o focos de bajos
voltajes. La luz natural o artificial es focalizada, va un sistema de
lentes colectores en el condensador.

Condensador
En los microscopios de luz transmitida, el condensador concentra
un cono de luz de la misma apertura numrica (AN) del objetivo
con el que se observa la muestra.

Diafragma
Se encuentra dentro del condensador, se utiliza para reducir o
ampliar la cantidad de luz que ingresa al condensador.

D. El Sistema de Ajuste o Enfoque.


Tornillo Macromtrico.
Tornillo Micromtrico.
Tornillo de ajuste del condensador (eleva o baja el condensador)
Elevador del diafragma (cierra o abre el diafragma)
Tornillos reguladores de la platina.
14

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Fuente de luz

Para conseguir una buena iluminacin:


*
*
*
*
*

Utilice el objetivo de menor aumento.


Eleve la lente frontal del condensador a una distancia de 1 a 2 mm de la platina
Cercirese que el diafragma este abierto.
Dirija el espejo a la fuente de luz (solo si el microscopio cuenta con uno).
Observe por el ocular y desplace la platina girando con una de sus manos el micromtrico.

Enfoque
*

*
*
*

Colocar la muestra sobre la platina y sujetarla.


Girar el revlver hasta el objetivo de 10x.
Gira el tornillo macromtrico y lleva la platina a una distancia de 1 a 2mm entre el objetivo
y la lmina preparada ESTA OPERACIN DEBES HACERLA SIN COLOCAR TU OJO
SOBRE LOS OCULARES.
Ahora coloca ambos ojos abiertos sobre los oculares. NO COMETAS EL ERROR DE
CERRAR O SEMICERRAR ALGUNO DE TUS OJOS.
Una vez realizado lo anterior empieza a desplazar hacia abajo la platina, utilizando el
tornillo macromtrico hasta que empieces a visualizar el espcimen que se encuentra en la
muestra que has preparado. Este enfoque se llama ENFOQUE GRUESO.
Luego gira el revlver hasta el objetivo de 40x. Rota el revolver, de manera que cambias de
objetivo sin necesidad de bajar la platina.
Empieza a girar, con tus dedos pulgar e ndice de ambas manos, el tornillo micromtrico en
un mismo sentido hasta que puedas observar ntidamente el espcimen, ESTO ES EL
ENFOQUE FINO, que se ajusta a la visin de cada observador.
Sigues observando los especmenes de la misma manera que con el objetivo de menor
aumento. Que cambios notas ahora explica a que se deben.

Tcnica de la inmersin:
Consiste en colocar una gota de aceite de inmersin entre el cubreobjetos y la lente frontal del
objetivo de mximo aumento. Para ello, teniendo ya enfocado el objeto a un aumento menor, se
gira levemente el revlver, se coloca una pequea gota de aceite de inmersin sobre el
15

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

cubreobjetos, luego se sigue girando hasta enfocar con el objetivo de mayor aumento y se procede
al ajuste con el tornillo micromtrico.
Terminada la observacin se eleva el tubo o se baja platina y se limpia el objetivo con papel de
seda o lente suave que puede estar humedecido en un detergente especial para lentes.
II) OBJETIVOS
1.
2.

Identificar los diferentes componentes del microscopio.


Realizar el enfoque fino y observar detalles de la muestra.

III) MATERIALES
Deben traer los estudiantes:
1. Muestra:
Pulga (dentro de un frasco con agua) por alumno.
2. Material Obligatorio.
3. Lancetas (01 por alumno)
4. Papel toalla.
El laboratorio proporcionar:
1.- Microscopios compuestos de campo claro.
2.- Lminas patrn de corte de lirio.
3.- Papel lente
IV) PROCEDIMIENTO
Preparacin y Observacin de la muestra:
*
*
*
*
*
*
*

Toma una lmina portaobjeto limpia. Estas lminas y los cubreobjetos siempre debes
tomarlo por los bordes usando tus dedos pulgar e ndice. NUNCA OLVIDES ESTO.
Coloca tu cubre objeto sobre hoja de papel bond extendida sobre la mesa de trabajo.
Con un gotero coloca, en el centro del portaobjeto, una pequea gota de agua y sobre esta
la pulga, cubre la muestra con el cubreobjeto y seca los bordes.
Si el cubreobjetos se encuentra inclinado, se coloca un trozo de papel filtro y de presiona.
En otra lmina se coloca la muestra de gota de sangre sin agregarle agua. A este tipo de
lminas preparadas se denominan preparaciones hmedas.
Coloca una de las lminas sobre la platina y asegrala con las pinzas del sistema de
desplazamiento que tiene la platina.
Procura que la muestra que has preparado se encuentre en el centro del orificio de la
platina.
Recuerda que para enfocar la muestra primero debes hacerlo con el objetivo de menor
aumento (10) y observando con los dos ojos para que puedas apreciar mejor la muestra y
observar tambin el puntero que se encuentra en uno de los oculares.

Recomendaciones para el uso del Microscopio ptico:


1. Comience siempre las observaciones con el objetivo de menor aumento. Esto le dar una
visin integral del preparado y le permitir seleccionar las mejores areas o las de especial
inters, que luego observar con mayores aumentos.
2. La iluminacin debe ser homognea y de buena intensidad pero no excesiva y deber
modificarla de acuerdo con el objetivo que est utilizando.
16

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

3. Siempre que se haga una observacin, ajuste el enfoque con el tornillo micromtrico aun
cuando ya haya sido enfocado por otra persona previamente.
4. Recuerde que el microscopio ptico otorga imgenes invertidas del objeto, por lo tanto el
movimiento que realice de la platina ser inverso al corrimiento de la imagen.
5. Todo dibujo que realice de la observacin debe ser esquemtico, respetando las
proporciones de los elementos que observa.
6. Los portaobjetos y cubreobjetos deben estar limpios y secos.
7. Si el liquido excede la lamina cubreobjetos utilizar papel filtro.
V) CUESTIONARIO
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Que diferencias existen entre un microscopio compuesto de campo claro y un microscopio


confocal?.
Por qu no puedes observar membrana plasmtica y ribosomas con un microscopio
ptico?.
Crees que pueda existir algn organismo vivo, cuyo tamao sea menor a 0.2 um, porque
no podemos observarlo?
Que funcin cumple el tornillo micromtrico y el tornillo macromtrico?
Mencione otros tipos de Microscopios electrnicos y su aplicacin en la medicina.
Defina 03 tipos de microscopios pticos.
Defina 02 tipos de microscopios electrnicos.

VI) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Karp, Gerald. 2008 Biologa Celular y Molecular 5ta. Edicin, Mc Graw


Hill.Ulrich
Welsch, Johannes Sobotta
2009 Histologa. 2da edicin.
Editorial Mdica Panamericana.
http://www.agro.unlpam.edu.ar/catedras-pdf/biologia2010/Apuntes
%20Te%F3ricos%202010/Microscop%EDa%202010.pdf

Resultados de Laboratorio

17

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Muestra: .
Colorante o Coloracin:
Clula que observa: .
Estructura:

Muestra: .
Colorante o Coloracin:
Clula que observa:
Estructura:

VB Dra. Carola Chambers

Fecha:

PRACTICA N 2
NIVELES DE ORGANIZACIN DE LOS SISTEMAS VIVIENTES

18

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

I) INTRODUCCIN
Desde nuestros orgenes nos hemos interesado por conocer a los seres
vivos que nos rodean; nos hemos preocupado por desentraar el misterio de la
vida. Una de las primeras respuestas a esta interrogante la dieron los
vitalistas, quienes sostenan que los seres vivos posean una fuerza vital que
los haca distintos a los no vivos. Los mecanicistas, en cambio, pensaban que
los organismos eran algo especial, pero no radicalmente distinto de la materia
inanimada, por lo que plantearon que funcionaban del mismo modo que una
maquina. En la actualidad los bilogos ms que responder a la pregunta de
que es la vida, se han enfocado al estudio de lo que significa ser vivo; para ello
se ha propuesto un nuevo enfoque, denominado organicismo, que sostiene que
los seres vivos se encuentran organizados en distintos niveles jerrquicos, que
se caracterizan por poseer programas genticos conformados a travs del
proceso evolutivo y que son los que controlan los fenmenos vitales.
En la materia viva existen varios grados de complejidad, denominados
niveles de organizacin. Dentro de los mismos se pueden diferenciar
niveles abiticos (materia no viva) y niveles biticos ( materia viva).
Los diferentes niveles son:
1.- Nivel subatmico: integrado por las partculas subatmicas que forman
los elementos qumicos (protones, neutrones, electrones).
2.- Nivel atmico: son los tomos que forman los seres vivos y que
denominamos bioelementos. Del total de elementos qumicos del sistema
peridico, aproximadamente un 70% de los mismos los podemos encontrar en
la materia orgnica. Estos bioelementos los podemos agrupar en tres
categoras:

Bioelementos primarios: funcin estructural


Bioelementos secundarios: funcin estructural y cataltica.
Oligoelementos o elementos vestigiales : funcin cataltica.

3.- Nivel molecular: En l se incluyen las molculas, formadas por la


agrupacin de tomos (bioelementos). A las molculas orgnicas se les
denomina Biomolculas o Principios inmediatos. Estos Principios
Inmediatos los podemos agrupar en dos categoras, inorgnicos (agua, sales
minerales, iones, gases) y orgnicos (glcidos, lpidos, protenas y cidos
nucleicos).
En este nivel tambin debemos agrupar las macromolculas y los virus.
Las primeras resultan de la unin de monmeros (aminocidos, nucletidos,
etc...) y los segundos son la unin de protenas con cidos nucleicos.
4.- Nivel celular: donde nos encontramos a la clula (primer nivel con vida).
Dos tipos de organizaciones celulares, Eucariota (clulas animales y
vegetales) y
Procariota (la bacteria). Los organismos unicelulares (Ej.
Protozoos) viven con perfecta autonoma en el medio, pero en ocasiones nos
podemos encontrar agrupaciones de clulas, las colonias, que no podemos
19

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

considerar como seres pluricelulares por que a pesar de estar formados por
miles de clulas cada una vive como un ser independiente.
5.- Nivel pluricelular: constituido por aquellos seres formados por ms de
una clula. Surge de la diferenciacin y especializacin celular. En l
encontramos distintos niveles de complejidad: tejidos, rganos, sistemas y
aparatos.
Mientras los tejidos son conjuntos de clulas de origen y forma parecida
que realizan las mismas funciones, los rganos son un conjunto de tejidos
diferentes que realizan actos concretos.
Los sistemas son conjuntos de rganos parecidos, al estar constituidos
por los mismos tejidos, pero que realizan actos completamente
independientes. Los aparatos (Ej. aparato digestivo), formados por rganos
que pueden ser muy diferentes entre s (Ej. dientes, lengua, estmago, etc...),
realizan actos coordinados para constituir lo que se llama una funcin
biolgica (Ej. nutricin).
6.- Nivel de poblacin: los individuos de la misma especie (aquellos que son
capaces de reproducirse entre s y tener descendencia frtil) se agrupan en
poblaciones
(individuos de la misma especie que coinciden en
el tiempo y en el espacio).
7.- Nivel de ecosistema: las poblaciones se asientan en una zona
determinada donde se interrelacionan con otras poblaciones (COMUNIDAD O
BIOCENOSIS) y con el medio no orgnico (Biotopo). Esta asociacin
configura el llamado ECOSISTEMA, objeto deestudio de los bilogos. Los
ecosistemas son tan grande o tan pequeo como queramos, sin embargo el
gran ecosistema terrestre lo forman la Biosfera (biocenosis) y el astro Tierra
(biotopo).
Niveles de Organizacin de los seres vivos

20

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

El atributo ms sobresaliente de los seres vivos es, quiz, su complejidad y su


alto grado de organizacin. Poseen estructuras internas intrincadas que
contienen muchas clases de molculas complejas. Se presentan, adems, en
una gran variedad de especies diferentes. Por el contrario, la materia
inanimada de su entorno (el agua, el suelo, las rocas) est habitualmente
constituida por mezclas fortuitas de compuestos qumicos sencillos de escasa
organizacin estructural.
En segundo lugar, cada una de las partes componentes de los seres vivos
cumple un propsito o funcin especficos. Esto es cierto no slo en lo
referente a estructuras visibles (alas, ojos, flores, etc.) como a estructuras
microscpicas (el ncleo o la membrana celular) o submicroscpicas
(protenas, azcares, lpidos, etc.). En los organismos vivos es completamente
legtimo preguntarse cul es la funcin de una molcula determinada.
Los organismos vivos tambin presentan la capacidad de extraer y transformar
la energa de su entorno a partir de materias primas sencillas, y de emplearla
para edificar y mantener sus propias e intrincadas estructuras. A esta
capacidad es a lo que llamamos nutricin.
Tambin presentan la capacidad de recibir estmulos del exterior y de elaborar
una respuesta ante los mismos, lo que se denomina funcin de relacin.
Si seguimos nuestro anlisis de los sistemas vivientes nos encontramos que
estn organizados por multiniveles que van desde la clula a organismos o
individuo, y que cuando los individuos se relacionan entre s y con el ambiente
que ocupan, tambin definen niveles de organizacin superiores. En biologa
las jerarquas se establecen de acuerdo al siguiente orden:
BIOSFERA
. Ecosistemas
. Comunidades
. Poblaciones
INDIVIDUO U ORGANISMO
. Sistema de rganos
. rganos
. Tejidos
CLULA
. Organelas
. Asociaciones supramoleculares
. Macromolculas o molculas biolgicas
. Componentes del entorno
II) OBJETIVOS
1. Observar y conocer los principales multiniveles de organizacin desde
individuo u organismo hasta la clula, tomando como modelo de estudio el
ratn.
2. Verificar las interrelaciones entre sistemas de rganos, tejidos, clulas y
molculas

21

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

III) MATERIALES
Los alumnos agrupados por pareja de trabajo debern traer lo
siguiente:
1. Estuche de diseccin o las siguientes piezas: tijera recta, pinzas, mango de
bistur n 4,
estiletes, sonda acanalada.
2. Un ratn blanco vivo (adulto).
3. Una tabla de diseccin de espuma tecknopor, medida 20x30 cm. Sin forrar.
4. 1 pao yess
5. Alfileres
6. Una Bolsa negra para eliminar los desechos.
7. Papel Toalla.
8. Material Obligatorio.
Que proporciona el laboratorio:
1. Microscopio compuesto de campo claro
2. Distencil
3. Algodn.
4. Jeringa de tuberculina.
5. Pipetas.
6. Propipetas.
7. Placas Petri
8. Tubos de ensayo
9. Baguetas de vidrio
10. Gradillas
11. Colorante Wright.
12. Agua Oxigenada.
13. Papel lente.
IV) PROCEDIMIENTO
Morfologa externa del organismo en estudio.
1.

Observe el ratn de cabeza a cola e identifique los rganos externos que


forman parte de los sistemas: digestivo, respiratorio, excretor,
reproductor, auditivo y visual.
Observa minuciosamente el sistema tegumentario e identifique los
rganos que lo forman.

2.

Del organismo a los rganos.


1.

Sacrifique el ratn colocndolo en posicin dorso ventral (boca abajo)


sobre el
plano de la tabla de diseccin.
2. Con ayuda del pao yess cubrir al ratn dejando una de las extremidades
inferiores expuesta.
3. Estirar la extremidad inferior y colocarle 0.1ml. de distencil con ayuda de
la jeringa de tuberculina. Esperar unos minutos.
4.
Coloque el ratn muerto en posicin ventro dorsal (boca arriba) y
con ayuda de la pinza pellizque la piel, en la lnea medio ventral, tire en

22

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

sentido contrario cuidadosamente y realice un pequeo corte con la


tijera.
5. Introduzca la sonda acanalada, con el canal hacia arriba hasta la parte
donde inicia el esternn y haga un corte longitudinal en la pared del
cuerpo siguiendo el canal de la sonda. Tenga cuidado de no perforar
rganos de la regin abdominal.
6. Observe y reconozca los rganos que se encuentran dentro de la
cavidad.
7. Observe en la cavidad torcica, la presencia del msculo diafragma.
8. Introduzca la sonda acanalada rompiendo el diafragma y corte el
esternn (la pieza esqueltica central, entre las extremidades
anteriores). Tenga cuidado de no daar los rganos que estn en la
cavidad torcica.
9. Identifique los rganos que se encuentran en esta cavidad: corazn, los
plumones, la trquea.
10.
Identifique el sistema reproductor de su espcimen. Reconozca si
es macho o hembra. qu rganos lo forman?

23

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

De los rganos a las clulas.


La sangre es un tejido que forma parte del sistema circulatorio.
1
Con la tuberculina descartable punce el corazn y tome muestra de
sangre. (con un Angulo de 90)

2. Coloque una gota en el extremo de una lmina porta objeto, luego con otra
lmina haga una extensin o frotis (con un ngulo de 45)

3.
4.

Deje secar y coloree con Wright


Luego observe al microscopio a menor aumento (l0) y mediano aumento
(40). Qu nivel de organizacin biolgica esta Ud. observando?

De las clulas a las molculas.


Como puede comprobar, los rganos estn formados por tejidos y las unidades
estructurales de estos son las clulas. Estas, a su vez, contienen organelas y
molculas biolgicas: protenas polisacridos, lpidos y cidos nucleicos. Las
enzimas son protenas catalizadores que se encuentran en todas las clulas.
Los catalizadores tienen la caracterstica de aumentar las velocidades de
reacciones que ya son energticamente favorables al disminuir la energa de
activacin. Las enzimas deben catalizar reacciones qumicas en las apacibles
condiciones celulares: 37 c, pH 6.5 7.5 y solventes acuosos. Para demostrar
la actividad enzimtica se realizar lo siguiente:
1.

Tome una pequea muestra de hgado, rin y msculo del ratn, se


coloca cada muestra en una placa Petri y se cortan en pequeos
cubitos, con ayuda de la tijera o del bistur.

24

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular


2.
3.
4.

Universidad Ricardo Palma

Coloque los cubitos en tres tubos de ensayo diferentes, un tubo para


cada muestra.
Con ayuda de la bagueta de vidrio triture los cubitos en los tubos que ya
contienen 1 ml de perxido de hidrgeno.
Observe y compare los resultados obtenidos en los tres tubos.

En todos los tejidos vivos las clulas se encargan de producir la enzima


catalasa, la cual cataliza la reaccin que descompone el perxido de
hidrgeno, producto del metabolismo celular.
V) CUESTIONARIO
1. Haga un cuadro donde considere Ud. los principales sistemas y rganos del
ratn.
2. Explique Ud. como est interrelacionado el sistema respiratorio con el
sistema
digestivo.
3. A qu nivel de organizacin pertenece la catalasa? Escriba la ecuacin de
reaccin de la catalasa.
4. Cul es el papel que desempea el diafragma?
5. Mencione Ejemplos de: Asociaciones supramoleculares, Macromolculas
6. Mecione las funciones que cumplen los siguientes rganos: hgado y
riones.

VI) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS


Audesirk T. & Audesirk G.. 1996: Biologa: La vida en la tierra. 4ta. Edicin.
Pretice-Hall Hispanoamericana, S.A. Mxico, Nueva York, Bogot, Londres.
Ondarza R.N. 1996.Biologia Moderna . 10 a. Edicion. ed.Trillias. Mexico,
Argentina , Espaa.
Rosaura Ruiz Gutirrez 2006. 1ra edicin. Editorial Pearson Education.
Impreso en mexico.
http://www.noticiasmvs.com/#!/noticias/explican-las-diferencias-sexuales-queprovocan-el-cancer-de-higado-354.html

Hoja de resultados
Muestra: .
Clula que seala el puntero:
...
Colorante: ...
25

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

Tcnica que se utilizo para obtener la muestra:

Identificar las estructuras internas:

(seale con una flecha las

estructuras).

Dibuje la reaccin enzimtica para cada una de las


muestras:

Msculo

Hgado

Rin

26

Gua de Practicas de Biologa Celular y Molecular

Universidad Ricardo Palma

27

You might also like