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Municipalidad de Providencia
Liceo Carmela Carvajal de Prat
Departamento de Biologa
Introduccin
Los procesos metablicos presentes en los seres vivos se llevan a cabo gracias a enzimas de naturaleza
proteica. Una de ellas es la catalasa. Dicha enzima ayuda a descomponer el perxido de hidrgeno - un
agente oxidante poderoso y daino - en oxgeno y agua, previniendo la acumulacin de burbujas de
dixido de carbono en la sangre.
En el presente trabajo, demostraremos de forma emprica como se ve afectada esta accin enzimtica
mediante tres experimentos. Primeramente, juzgaremos la incidencia de la naturaleza del tejido (vegetal
o animal) en la actividad enzimtica. En segundo lugar, consideraremos la diferencia de temperatura en
los tejidos y por ltimo, la incidencia del pH gracias a la intervencin de agua destilada, cido
clorhdrico e hidrxido de sodio.
Junto con conocimientos previos, analizaremos los resultados obtenidos a partir de la variacin de los
factores nombrados anteriormente que influyen en la accin enzimtica. Conocer este fenmeno es
importante porque tiene muchas aplicaciones en la bioqumica, biotecnologa, medicina, etc.
Experimento N1 Accin de la Catalasa
Materiales
- Papa
- Hgado de pollo
- Cronmetro
- Bolsas para los desechos
- Paos para limpiar
- Cloro para desinfectar
- Cuchara de t
- 3 vasos de precipitado
- Pipetas
- Agua destilada
- Agua oxigenada
- Encendedor o fsforos
- Pajuela
Procedimiento
1. Coloque en cada tubo de ensayo 5 cc de agua oxigenada
2. Proceda de la siguiente manera:
Vaso 1: 5 cc de agua oxigenada (control)
Vaso 2: 5 cc de agua oxigenada + raspado de papa
Vaso 3: 5 cc de agua oxigenada + papilla de hgado
1
Situaci
n inicial
Situaci
n final
3. Observe el desprendimiento de las burbujas en cada tuvo y anote los resultados en la siguiente tabla:
N Vaso
Velocidad de
reaccin
1
5 cc de H2O2
No presenta
reaccin
2
5 cc de H2O2 +
raspado de
papa
3
5 cc de H2O2 +
papilla de
hgado
5 segundos
Reaccin
inmediata
(menos de 1
segundo)
Caractersticas
iniciales
Cantidad de
gas
Solo se presenta
H2O2 (lquido
transparente)
Pasta grumosa
de color
amarillo pastel.
No presenta
liberacin de
gas
Mnima
cantidad de gas
Cambios observados
No hay cambios observados
Sube mayormente la
temperatura y emergen una gran
cantidad burbujas.
Preguntas de comprensin:
1. A qu se debe que la velocidad de reaccin enzimtica sea mayor en un tejido que en otro?
La variacin en dicha velocidad se debe a la diferencia de cantidad de la enzima catalasa. sta se
presenta en mayor cantidad en tejidos animales por lo que reaccion ms rpido.
2. Introduzca la pajuela al interior del vaso precipitado, registre sus observaciones. Qu gas libera este
compuesto por accin de la catalasa? De qu manera lo comprob?
Es liberado oxgeno (O2). Fue comprobado mediante una combustin, ya que al introducir la pajuela
encendida, la llama de fuego aument su tamao y energa calrica.
3. Qu sustancias cambian durante la reaccin en los vasos precipitado 1 y 2?
En el vaso 1 no hay cambios. En el vaso 2 se produce una espuma de carcter denso y blanca gracias a la
obtencin de H2O y O2
4. A qu se debe el aumento de temperatura percibida en los vasos de precipitado? Explique
A la liberacin de energa calrica durante la accin enzimtica que se produce (catalasa sobre perxido
de hidrgeno)
5. Qu se entiende por especificidad enzimtica? Explica con un ejemplo experimental distinto al
realizado en el laboratorio.
Se puede explicar mediante la enzima sacarasa presente en la levadura que acta sobre el sustrato
sacarosa, pero no sobre el sustrato almidn pues cada enzima acta sobre un sustrato especfico (en este
caso, la sacarosa)
6. Cul es el sustrato donde acta la catalasa?
El sustrato donde acta la catalasa es el perxido de hidrgeno (H2O2), descomponindolo en oxgeno y
agua.
Experimento N2 Efecto de la temperatura
Materiales:
- Hgado de pollo
- 3 vasos de precipitado
- Pipetas
- Hielo
Procedimiento:
1. Etiquete 3 vasos de precipitado
2. La papilla de hgado debe ser molida y dividida en tres porciones: la primera de estas porciones ser
cocida en agua hirviendo a 100C, la segunda porcin debe congelarse a temperaturas -10C por espacio
de una semana, el hgado congelado debe ser transportado en un pocillo que contenga hielo para
Situaci
n inicial
2
- Mechero
- Agua destilada
- Agua oxigenada
- Papel milimetrado
Situaci
n final
Condicin
de la
enzima
Activa
1
5gr de papilla
de hgado
cruda + 2 cc de
H2O2
2
Denaturada Marrn claro Nula
5 gr de papilla
de hgado
cocida + 2 cc de
H2O2
3
5 gr de papilla
de hgado
congelada + 2
cc de H2O2
Inactiva
Preguntas de compresin:
Rojo intenso
Baja
Cambios
observados
Efervescencia con
abundantes
burbujas.
Liberacin de
calor.
No se observan
cambios.
Se
forma
una
espuma densa con
burbujas pequeas
que revientan y
desaparecen.
1. Basndose en los resultados obtenidos, realice grficos en papel milimetrado; que representen el
efecto de la temperatura sobre la actividad de la catalasa.
con tuvo de seguridad y observe. A continuacin introduzca el papel pH y registre los cambios.
1
Situaci
n inicial
Situaci
n final
- Agua destilada
- Hidrxido de sodio (NaOH = 0,050 M)
- cido clorhdrico (HCl = 0,1 M)
- Agua oxigenada (H2O2)
- Papel
milimetrado
5. Anote sus resultados en la siguiente
tabla:
N Vaso
Valor
del pH
1
5 gr de papilla
de hgado
cruda
+ 5 cc de agua
destilada
+ 2 cc de H2O2
2
5 gr de papilla
de hgado
cruda
+ 5 cc de
NaOH
+ 2 cc de H2O2
3
5 gr de papilla
de hgado
cruda
+ 5 cc de HCl
+ 2 cc de H2O2
7
(neutro)
Caractersticas Presencia de
iniciales del
reaccin
hgado
Color marrn
Presenta
rojizo
reaccin
enzimtica
12,7
(bsico)
Color marrn
rojizo
Presenta
reaccin
enzimtica
1 (cido)
Color marrn
rojizo
No presenta
reaccin
enzimtica
Cambios observados
pH
pH NaOH=
12.69
pH HCl=
1
Preguntas de comprensin:
1. El pH matemticamente se define como el logaritmo negativo de la concentracin de protones en los
cidos, en el caso de una sustancia alcalina se debe restar el pH al pOH (valor = 14). Basndose en esta
informacin calcule el pH del HCl y NaOH. Incorporar dichos valores en la tabla de datos.
pH de NaOH:
pH de HCl:
-log(0.050) = pOH
-log (0.1) = pH
14 - pOH
pHresultados obtenidos, realice
pH= -(-1)
2. Basndose
en =los
un grfico en papel milimetrado; que represente el
efecto de pH sobre la actividad de la catalasa.
12.69 = pH
pH=1