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I.

Municipalidad de Providencia
Liceo Carmela Carvajal de Prat
Departamento de Biologa

Macarena Arvalo (2)


Carolina Bascun (3)
Constanza Muoz (20)
Brbara Navarrete (21)
Ignacia Oyarzn (27)
4D
Lunes 6 de Abril de 2015

Introduccin
Los procesos metablicos presentes en los seres vivos se llevan a cabo gracias a enzimas de naturaleza
proteica. Una de ellas es la catalasa. Dicha enzima ayuda a descomponer el perxido de hidrgeno - un
agente oxidante poderoso y daino - en oxgeno y agua, previniendo la acumulacin de burbujas de
dixido de carbono en la sangre.
En el presente trabajo, demostraremos de forma emprica como se ve afectada esta accin enzimtica
mediante tres experimentos. Primeramente, juzgaremos la incidencia de la naturaleza del tejido (vegetal
o animal) en la actividad enzimtica. En segundo lugar, consideraremos la diferencia de temperatura en
los tejidos y por ltimo, la incidencia del pH gracias a la intervencin de agua destilada, cido
clorhdrico e hidrxido de sodio.
Junto con conocimientos previos, analizaremos los resultados obtenidos a partir de la variacin de los
factores nombrados anteriormente que influyen en la accin enzimtica. Conocer este fenmeno es
importante porque tiene muchas aplicaciones en la bioqumica, biotecnologa, medicina, etc.
Experimento N1 Accin de la Catalasa
Materiales
- Papa
- Hgado de pollo
- Cronmetro
- Bolsas para los desechos
- Paos para limpiar
- Cloro para desinfectar
- Cuchara de t

- 3 vasos de precipitado
- Pipetas
- Agua destilada
- Agua oxigenada
- Encendedor o fsforos
- Pajuela

Procedimiento
1. Coloque en cada tubo de ensayo 5 cc de agua oxigenada
2. Proceda de la siguiente manera:
Vaso 1: 5 cc de agua oxigenada (control)
Vaso 2: 5 cc de agua oxigenada + raspado de papa
Vaso 3: 5 cc de agua oxigenada + papilla de hgado
1

Situaci
n inicial

Situaci
n final

3. Observe el desprendimiento de las burbujas en cada tuvo y anote los resultados en la siguiente tabla:

N Vaso

Velocidad de
reaccin

1
5 cc de H2O2

No presenta
reaccin

2
5 cc de H2O2 +
raspado de
papa
3
5 cc de H2O2 +
papilla de
hgado

5 segundos

Reaccin
inmediata
(menos de 1
segundo)

Caractersticas
iniciales

Cantidad de
gas

Solo se presenta
H2O2 (lquido
transparente)
Pasta grumosa
de color
amarillo pastel.

No presenta
liberacin de
gas
Mnima
cantidad de gas

Pasta de aspecto Abundante


viscoso y
cantidad de gas
grumosos,
marrn rojizo.

Cambios observados
No hay cambios observados

Sube la temperatura del vaso y


se observa un poco de espuma

Sube mayormente la
temperatura y emergen una gran
cantidad burbujas.

Preguntas de comprensin:
1. A qu se debe que la velocidad de reaccin enzimtica sea mayor en un tejido que en otro?
La variacin en dicha velocidad se debe a la diferencia de cantidad de la enzima catalasa. sta se
presenta en mayor cantidad en tejidos animales por lo que reaccion ms rpido.
2. Introduzca la pajuela al interior del vaso precipitado, registre sus observaciones. Qu gas libera este
compuesto por accin de la catalasa? De qu manera lo comprob?
Es liberado oxgeno (O2). Fue comprobado mediante una combustin, ya que al introducir la pajuela
encendida, la llama de fuego aument su tamao y energa calrica.
3. Qu sustancias cambian durante la reaccin en los vasos precipitado 1 y 2?
En el vaso 1 no hay cambios. En el vaso 2 se produce una espuma de carcter denso y blanca gracias a la
obtencin de H2O y O2
4. A qu se debe el aumento de temperatura percibida en los vasos de precipitado? Explique
A la liberacin de energa calrica durante la accin enzimtica que se produce (catalasa sobre perxido
de hidrgeno)
5. Qu se entiende por especificidad enzimtica? Explica con un ejemplo experimental distinto al
realizado en el laboratorio.
Se puede explicar mediante la enzima sacarasa presente en la levadura que acta sobre el sustrato
sacarosa, pero no sobre el sustrato almidn pues cada enzima acta sobre un sustrato especfico (en este
caso, la sacarosa)
6. Cul es el sustrato donde acta la catalasa?
El sustrato donde acta la catalasa es el perxido de hidrgeno (H2O2), descomponindolo en oxgeno y
agua.
Experimento N2 Efecto de la temperatura
Materiales:
- Hgado de pollo
- 3 vasos de precipitado
- Pipetas
- Hielo
Procedimiento:
1. Etiquete 3 vasos de precipitado
2. La papilla de hgado debe ser molida y dividida en tres porciones: la primera de estas porciones ser
cocida en agua hirviendo a 100C, la segunda porcin debe congelarse a temperaturas -10C por espacio
de una semana, el hgado congelado debe ser transportado en un pocillo que contenga hielo para

mantener su baja temperatura. La tercera porcin se descongelar la noche anterior al experimento, ya


que se usar descongelado a temperatura medio ambiente.
3.
vaso 1: 5 gr de papilla de hgado + 2 cc de H2O2
vaso 2: 5 gr de papilla de hgado cocida por 15 + 2 cc de H2O2
vaso 3: 5 gr de papilla de hgado en hielo por 15 + 2 cc de H2O2
1

Situaci
n inicial

2
- Mechero
- Agua destilada
- Agua oxigenada
- Papel milimetrado

Situaci
n final

4. Realice sus observaciones y anote sus resultados en la siguiente tabla:


N Vaso

Condicin
de la
enzima
Activa

Color inicial Presencia


Temperatura
de
reaccin
Marrn
Alta
La papilla se encontraba
a temperatura ambiente
rojizo
y al reaccionar, la
temperatura del vaso se
elevo

1
5gr de papilla
de hgado
cruda + 2 cc de
H2O2
2
Denaturada Marrn claro Nula
5 gr de papilla
de hgado
cocida + 2 cc de
H2O2

3
5 gr de papilla
de hgado
congelada + 2
cc de H2O2

Inactiva

Preguntas de compresin:

Rojo intenso

Baja

La papilla fue cocida a


100C, al momento del
experimento se
encontraba a
temperatura ambiente,
cuando le agregamos el
H2O2 el vaso conserva la
misma temperatura que
tena.
La papilla estaba
congelada a -10C ,y
cuando le agregamos el
H2O2 el vaso se entibio
levemente

Cambios
observados
Efervescencia con
abundantes
burbujas.
Liberacin de
calor.
No se observan
cambios.

Se
forma
una
espuma densa con
burbujas pequeas
que revientan y
desaparecen.

1. Basndose en los resultados obtenidos, realice grficos en papel milimetrado; que representen el
efecto de la temperatura sobre la actividad de la catalasa.

2. A partir de su grfica establezca la relacin entre la temperatura y la actividad enzimtica en 2 lneas.


La enzima catalasa se encuentra activa y en su estado ptimo a temperatura ambiente. En cambio, a t
extremadamente menores que ese rango, la enzima se inactiva y a t extremadamente ms altas, se
desnaturaliza.
3. A bajas temperaturas regularmente las enzimas se inactivan, fenmeno llamado inactivacin; al
respecto conteste:
a. Qu diferencia esencial existe entre la denaturacin y la inactivacin?
En la denaturacin la enzima sufre la ruptura de sus enlaces perdiendo su forma y estructura especfica
(a alta t , proceso irreversible), en la inactivacin pierde la capacidad de reaccin, sin perder estructura
(a baja t, proceso reversible).
b. En qu forma lo demostrara? (Debe ser diferente al ejemplo)
Ocurre denaturacin al cocer un huevo, donde perder sus caractersticas iniciales, tornndose insoluble
y cambiando de color, mientras que si el huevo es congelado, las enzimas se inactivan solo mientras est
sometido a esa t.
Experimento N3 Efecto del pH
Materiales
- Hgado de pollo
- 3 vasos de precipitado
- Pipetas
- Cuchara
Procedimiento
1. Etiquete 3 vasos de precipitado
2. En cada vaso de precipitado coloque 1 cucharada de papilla de hgado, y luego proceda como muestra
la tabla. A continuacin observe lo que sucede en los vasos 2 y 3 al agregar agua oxigenada, no olviden
de registrar todas sus observaciones.
3. Proceda de la siguiente manera:
Vaso 1: 5 gr de papilla de hgado cruda + 5 cc de agua destilada
Vaso 2: 5 gr de papilla de hgado cruda + 5 cc de NaOH
Vaso 3: 5 gr de papilla de hgado cruda + 5 cc de HCl
4. Cuando haya depositado en cada vaso la papilla de hgado, solicite a su profesora que agregue los
reactivos correspondientes (NaOH y HCl). A continuacin agregue a los tres tubos, 5 cc de H2O2, tpelos

con tuvo de seguridad y observe. A continuacin introduzca el papel pH y registre los cambios.
1

Situaci
n inicial

Situaci
n final
- Agua destilada
- Hidrxido de sodio (NaOH = 0,050 M)
- cido clorhdrico (HCl = 0,1 M)
- Agua oxigenada (H2O2)
- Papel
milimetrado
5. Anote sus resultados en la siguiente
tabla:
N Vaso

Valor
del pH

1
5 gr de papilla
de hgado
cruda
+ 5 cc de agua
destilada
+ 2 cc de H2O2
2
5 gr de papilla
de hgado
cruda
+ 5 cc de
NaOH
+ 2 cc de H2O2
3
5 gr de papilla
de hgado
cruda
+ 5 cc de HCl
+ 2 cc de H2O2

7
(neutro)

Caractersticas Presencia de
iniciales del
reaccin
hgado
Color marrn
Presenta
rojizo
reaccin
enzimtica

12,7
(bsico)

Color marrn
rojizo

Presenta
reaccin
enzimtica

1 (cido)

Color marrn
rojizo

No presenta
reaccin
enzimtica

Cambios observados

Cuando se le agrega el agua


destilada no ocurre ningn
cambio. Cuando se le agrega el
agua oxigenada se liber una
enorme cantidad de burbujas y
libera una gran cantidad de
calor.
Cuando se le agreg el
hidrxido de sodio (NaOH) no
ocurrieron cambios. Cuando se
le agreg el agua oxigenada se
form una espuma blanca y
densa compuesta por pequeas
burbujas.
Cuando se le agrega cido
clorhdrico (HCl) al hgado,
entra en proceso de coccin y
cambia a un color marrn
claro. Cuando se le aade el
agua oxigenada, no ocurre
nada.

pH

pH NaOH=
12.69

pH HCl=
1

Preguntas de comprensin:
1. El pH matemticamente se define como el logaritmo negativo de la concentracin de protones en los
cidos, en el caso de una sustancia alcalina se debe restar el pH al pOH (valor = 14). Basndose en esta
informacin calcule el pH del HCl y NaOH. Incorporar dichos valores en la tabla de datos.

pH de NaOH:

pH de HCl:

-log(0.050) = pOH

-log (0.1) = pH

14 - pOH
pHresultados obtenidos, realice
pH= -(-1)
2. Basndose
en =los
un grfico en papel milimetrado; que represente el
efecto de pH sobre la actividad de la catalasa.
12.69 = pH
pH=1

3. A partir de su grfica establezca la relacin entre el pH y la actividad enzimtica.


La relacin consiste en que la enzima acta con ms eficacia en la solucin cuando esta posee un pH
ptimo. Entre mayor sea la distancia entre el pH ptimo y el pH de la solucin, menos eficaz ser la
enzima.
4. Investigar Cmo afecta el pH a la reaccin enzimtica?
Las enzimas actan bajo rangos de valores de pH determinados (pH ptimo). Si la enzima se ve afectada
por otros valores de pH, su actividad enzimtica disminuir o simplemente no habr.
5. Investigue Cul es el pH ptimo para la actividad enzimtica de la catalasa?
El valor ptimo para la actividad enzimtica de la catalasa es 7,6
Conclusin
Mediante este experimento hemos logrado concluir la importancia de las enzimas como catalizadores o
aceleradores de los procesos metablicos en los seres vivos, adems de analizar los distintos factores que
van a influir en la accin enzimtica; como lo son la cantidad de enzimas presentes, temperatura, y pH.
El primer factor queda demostrado en el experimento 1 cuando se compara la reaccin que tiene el
hgado y la papa al agregar H2O2, as comprobamos que la panita posee mayor cantidad de catalasa al
reaccionar ms rpido y producir ms burbujas que la papa; estas burbujas corresponden al oxgeno
liberado en la degradacin del perxido de hidrgeno, lo que constatamos al introducir la pajuela
encendida dentro del vaso. El segundo factor fue demostrado en el experimento 2, ya que tanto el hgado
que fue expuesto a 100C (enzima desnaturalizada), y el que se encontraba a -10C (enzima inactiva) no
reaccionaron al HO, a diferencia del hgado que se hallaba a t ambiente (enzima activa) en el cual s
hubo reaccin. El tercer factor es comprobado en el experimento 3 al agregar NaOH y HCl a dos
. http://www.2bachillerato.es/biologia/tema5/p5.html
muestras
de hgado, cambiando el pH de stas. Se infiere de lo anterior que la eficacia de una enzima en
. http://www.ehu.es/biomoleculas/enzimas/enz1.htm
su
reaccin no depende solo de ella, si no de las condiciones en las que se encuentra.
.http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/AlimentaMETABOLISMOyENZIMAS.htm
. http://www.ehowenespanol.com/fuentes-enzimas-vegetales-lista_260775/
Bibliografa
.Cintica enzimtica: manejo de datos, Universidad de Oviedo. Departamento de bioqumica, facultad
de biologa y veterinaria.
.http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/enzimas/
.http://www.puntajenacional.cl/materia/planEstudio/id/5

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