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I.

INTRODUCCIN
A.- CARBOHIDRATOS
Los glcidos, azcares, carbohidratos o sacridos son aldehdos o cetonas
polihidroxilados (osas), o productos derivados de ellos por polimerizacin (sidos),
reduccin (alcoholes polihdricos y ciclitoles), oxidacin (cidos aldnicos, urnicos y
sacricos), sustitucin (aminoazcares) y esterificacin (sulfatos y fosfatos); cuya
frmula emprica es: (CH2O)n, n31. Se clasifican por:
Por su estructura
molecular
Monosacridos
: glucosa,
fructosa,
galactosa
Disacridos:
sacarosa,
maltosa,
lactosa
Polisacridos:
almidn,
glucgeno,
quitina

Por el nmero de
tomos de
carbono
Triosas: C3
Tetrosas: C4
Pentosas: C5
Hexosa:
C6
Heptosas: C7

Por su naturaleza
de la funcin
carbonlica
Aldosas:
Aldehdo
Cetosas:
Cetona

Por su actividad

Reductores.
Azcares
oxidados por
el reactivo
de Tollens o
los reactivos
de Benedict
o Fehling.
No
reductores

Entre los polisacridos ms importantes tenemos:


Glucgeno:
Es el polisacrido de reserva comn en los animales. El
glucgeno se almacena en el hgado y msculos.
Almidn:
Es la forma habitual de hidrato de carbono empleado para
almacenamiento de energa en las plantas, es un polmero
compuesto por subunidades de -glucosa. El almidn tiene dos
formas: la amilosa, la forma ms sencilla, no est ramificada,
mientras que la amilopectina, que es la forma frecuente,
normalmente est compuesta por aproximadamente 1000
unidades en una cadena ramificada. 2
Celulosa:
Polisacrido que se localiza en los vegetales como principal constituyente de las
paredes celulares. Desde el punto de vista industrial y comercial la celulosa es

1 E. Herrera. Elementos de La Bioqumica. 309pp


2 Elder Solomon. Biologa 53pp

importante por la obtencin de ciertos productos, por ejemplo: el algodn, algodn


plvora (se emplea como explosivo sin humo), rayn y celofn. 3
Quitina:
Es un homopolisacrido lineal compuesto por residuos de N-acetilglucosamina unidos
por enlaces ( 1->4).La nica diferencia qumica con respecto a la celulosa es el
cambio del grupo hidroxilo en C-2 por un grupo amino acetilado. Es el componente
principal de la mayora de los artrpodos.4

B.- LPIDOS
Constituyen un grupo qumicamente diverso de
compuestos cuyas caracterstica comn y definitoria
es su insolubilidad en agua. Las funciones biolgicas
de los lpidos son tan diversas como su qumica. En
muchos organismos, las grasas y los aceites son las
formas principales de almacenamiento energtico;
mientras que los fosfolpidos y esteroles constituyen
los principales elementos estructurales de las
membranas biolgicas. Otros lpidos, aun estando
presentes en cantidades relativamente pequeas,
juegan papeles cruciales como cofactores enzimticos,
como transportadores electrnicos, pigmentos que absorben la luz, anclas hidrficas
para protenas chaperonas que ayudan en el plegamiento de las protenas de
membrana, agentes emulsionantes en el tracto digestivo, hormonas y mensajeros
intracelulares.5
Son molculas constantes en todos los seres vivos donde participan como fuente de
energa. as un gramo de lpido otorga aproximadamente 9.3 kilocaloras. En los
animales se almacena en el, donde constituyen en reserva energtica, mientras en las
plantas se almacena en semillas en forma de aceites para ser utilizados durante la
germinacin.
Al almacenarse en el tejido celular subcutneo forma una barrera que impide que
pierda el calor producido en el tejido muscular. Las ballenas y los osos polares Y otros
animales polares soportan las bajas temperaturas porque tienen gran cantidad de lpido
bajo la dermis.
Los lpidos se clasifican en saponificables e insaponificables. La saponificacin es una
reaccin qumica entre un cido graso y una base o alcalino, en la que se obtiene
como principal producto la sal de dicho cido y de dicha base. Estos compuestos tienen
la particularidad de ser antipticos, es decir tienen una parte polar y otra apolar (o no
polar), con lo cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. Por

3 Tito Chvez. Biologa. 23pp


4 Lehninger. Principios de Bioqumica. 247pp
5 Lehninger. Principios de la Bioqumica. 343pp

ejemplo, los jabones son sales de cidos grasos y metales alcalinos que se obtienen
mediante este proceso.

Lpidos Saponificables
Simples
Acigliceridos
Ceridos

Complejas
Fosfolipidos
Glucolipidos

Lpidos
Insaponificables
Derivadas
Terpenos
Esteroides
Prostaglandinas

II.-OBJETIVOS

Reconocer la presencia de almidn y azcares reductores en muestras problema.


Reconocer algunas propiedades fisioqumicas de los lpidos.
Identificar la presencia de lpidos en muestras problema.

III. MATERIALES Y MTODOS.


Materiales del alumno por mesa

Lmina porta y cubre objetos.

2 ml (40 gotas) de orina (la primera del da y en ayunas).

5 ml (100 gotas) de aceite de cocina.

2 ml (40 gotas) de leche evaporada.

2 ml (40 gotas) de leche descremada.

2 ml (40 gotas) de jugo de mandarina.

Un trozo pequeo de papa, cebolla, zanahoria, pan y manzana.

Materiales del Laboratorio.


Tubos de ensayo

Pinza de madera

goteros

Estufa
Cocina
Vaso de precipitacin de 500 ml para bao mara
Reactivo de Sudan III en solucin alcohlica

Lugol
Solucin glucosa al 1%

Bencina
NaOH al 20%

Detergente

Reactivo de Benedict

Agua Destilada

Placa Petri

Otros

IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES


Experimento 1: Reconocimiento de Almidn:
-

Colocar en placas petri un trozo de papa, cebolla, zanahoria, pan, y manzana.


Agregar dos gotas de lugol a cada una de las muestras y anotar los resultados.

Con
lugol

Muestr
a

Observaciones

Presencia de
almidn (si/no)

Papa

La coloracin es intensa

Porcenta
je de
almidn

Cebolla

No se tie. No hay cambios

No

16.6%
Trazas

Zanaho
ria
Pan

Reaccin lenta, se tie


ligeramente
Reaccin violenta. La coloracin
es intensa
No se observan cambios

No

0.3%

52.1%

Manzan
No
Trazas
a
La papa, al ser un tallo de reserva contiene tambin almidn se tio de azul pero no tan
violentamente como el pan.
La cebolla y la zanahoria tuvieron una reaccin parecida, no se tieron casi nada y
tambin el proceso fue lento, porque no son estructuras de gran capacidad de reserva.
El pan fue el ms reactivo, ya que esta hecho casi todo de almidn, se tio
rpidamente de un azul-violeta oscuro.
Finalmente la manzana no se tio, el lugol no actu sobre ya que al ser un fruto, solo
contiene glucosa y fructosa, las cuales son muy pequeas como para reaccionar con el
lugol.

Reaccin del Lugol: Este mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en
contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico)
toma un color azul-violeta caracterstico6.
Si la disolucin de la placa petri se torna de color azul-violeta, la reaccin es positiva.
Fundamento: La coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce
entre las espiras de la molcula de almidn. No es por tanto, una verdadera reaccin
qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades
fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta.

6 Brandwein. Biologa. 162pp

Experimento 2: Reconocimiento de azcar reductor o Reaccin de Benedict:


Muestra

Turquesa

Contenido de azcar
reductor
(muy abundante,
abundante, trazas)
Ausencia

Rojo ladrillo

Muy abundante

Tubo 3: Jugo de fruta

mbar

Abundante

Tubo 4: Orina

Verde

Traza

Tubo 1: Agua destilada


Tubo 2: Glucosa

Observacin
(despus del bao
mara)

Tubo 1: En agua destilada se puso el reactivo de Benedict solo, luego de exponer a


bao mara se observ un color azul, color del reactivo.

Tubo 2: En presencia de glucosa (C6H12O6) se aade el reactivo y luego del bao mara
cambia a color rojo ladrillo esto debido a la reaccin producida entre el grupo aldehdo
(CHO) y el sulfato de cobre.
Tubo 3: El jugo de fruta (mandarina) que contiene fructosa, tambin se us el
reactivo de Benedict y tambin luego del bao mara, se observ un color mbar. Dio
positivo (con el reactivo ya estable) debido a que esta cetohexosa se tautomeriza a
glucosa (que es capaz de reducir al ion cprico).
Tubo 4: La orina, reacciono positivo, cambiando a un color verde, esto debido a la
presencia anormal de azucares.
En qumica, la reaccin o prueba de Benedict identifica azcares reductores
(aquellos que tienen su OH anomrico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y
celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu 2+ que tiene color azul a Cu+,
que precipita de la solucin alcalina como Cu 2O de color rojo-naranja.
El reactivo de Benedict consta de:

Sulfato cprico;

Citrato de sodio;

Carbonato anhidro de sodio.

Adems se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

Este mtodo colorimtrico se usa para identificar monosacridos. El color del


reactivo de Benedict es azul . Una reaccin positiva (que detecte monoscridos)
resulta en la observacin de un cambio de color en verde, amarillo , naranja y rojo.
La reaccin:
El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino, el ion cprico
(otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehdo
del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado
rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu 2O).
El medio alcalino facilita que el azcar est de forma lineal, puesto que el azcar en
solucin forma un anillo de piransico o furansico. Una vez que el azcar est lineal,
su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion cprico en solucin.
En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetopentosa) es capaz de dar
positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio
alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario
enlico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cprico).
Los disacridos como la sacarosa (enlace (1 2)O) y la trehalosa (enlace (11)O),
no dan positivo puesto que sus OH anomricos estn siendo utilizados en el enlace
glucosdico.
En resumen, se habla de azcares reductores cuando tienen su OH anomrico libre, y
stos son los que dan positivo en la prueba de Benedict. 7

7 Jos M. Macarullla. Biomolculas. 38pp

Experimento 3: Propiedades de los Lpidos


Enumerar 3 tubos de ensayo son los siguientes insumos:
- Tubo 1.- Colocar 2 ml de agua destilada + 1 ml de aceite, agitar la muestra para
observar una emulsin transitoria. Dejar reposar para observar luego la formacin de
dos capas (mezcla heterognea).
-Tubo 2.- Colocar 2 ml de agua destilada + 1 ml de aceite, aadir una pizca de
detergente, agitar y observar una emulsin permanente.
-Tubo 3.- Colocar 2 ml de bencina + 1 ml de aceite, observar lo q ue ocurre.
MUESTRA
Tubo 1 : aceite + agua

Tubo 2 : aceite + agua


+detergente
Tubo 3 : aceite + bencina

OBSERVACION

REACCION

Se forma una mezcla


heterognea con dos
capas
El detergente
emulsifica al aceite
Se solubiliza
totalmente gracias a la
accin de la bencina

NO

SI
SI

- La mezcla de aceite y agua se observ la propiedad de la densidad, la mezcla fue


heterognea y en dos faces claras, agua abajo y aceite arriba.
- En la mezcla de aceite, agua, detergente, en cambio el detergente emulsifico las
grasas lo cual permiti una mejor mezcla, esta vez fue heterognea pero en un menor
grado ya no tan notorio como en el primer caso.

- El aceite en bencina, la mezcla fue homognea, ya que lo semejante disuelve lo


semejante.
El agua sola no es capaz de disolver la grasa que compone
y contiene la suciedad. Un detergente en cambio s,
debido a la capacidad que tiene para formar emulsiones
con los materiales solubles en grasas; las molculas de
detergente rodean a la suciedad hasta incluirla en una
envoltura denominada micela, la parte apolar de la
molcula de detergente se disuelve en la gotita de grasa
mientras que los grupos carboxilato, polares, se orientan
hacia la capa de agua que los rodea. La repulsin entre
cargas iguales evita que las gotas de grasa se unan de
nuevo. Se forma as una emulsin que se puede separar de
la superficie las grasas del agua.8
Experimento 4: Reconocimiento de Lpidos:
Primero enumeramos 4 tubos de ensayo. Luego en cada tubo colocamos lo siguiente:

Tubo 1: Colocamos 1 ml. de agua destilada y agregamos 3 gotas de reactivo


Sudan lll en solucin alcohlica. Debemos tener cuidado de no agitar la solucin.

Tubo 2: Colocamos 1 ml. de aceite, agregamos 3 gotas de reactivo Sudan lll en


solucin alcohlica. No agitamos la solucin.

Tubo 3: Colocamos 1 ml de leche evaporada normal y agregamos 3 gotas de


reactivo de Sudan lll en solucin alcohlica. No agitamos la solucin.

Tubo 4: Colocamos 1 ml de leche descremada y agregamos 3 gotas de reactivo


de Sudan lll. No agitamos y anotamos los resultados.
Muest

ra
Tubo 1: Agua destilada
Tubo 2: Aceite
Tubo 3: Leche
evaporada
Tubo 4: Leche
descremada

Observacin
Se forma una mezcla homognea.
Se diluye totalmente
Se forma una mezcla heterognea,
formando 2 fases.
Se forma una mezcla heterognea,
formndose 2 capas.
Se forma una mezcla heterognea,
formando 2 fases.

8 Emilio Herrera. Elementos de la Bioqumica. 495pp

Contenido de Lpido
(S/No)
No
S
S
S

12% de
grasas
1.5% de
grasas

Al agua destilada se agrego Sudan III el cual es de color rojo.


Al agregar Sudan III al aceite se tie de un rojo intenso, separado del
aceite, en forma de un anillo en la parte superior.
Algo similar a la leche evaporada, tambin se formo un anillo en la parte
superior, aunque la mezcla era algo ms viscosa.
Y la leche descremada tuvo el mismo resultado, pero en menor cantidad,
era un anillo rojo pero ms delgado que el de la leche evaporada. 9

9 Dr. Claudio Montero. Manual de tcnicas de Histoqumica Bsica.

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