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(Bayer), por lo que las grficas que mostraremos corresponden a este instrumento,
aunque en algunos casos la forma de las grficas no coincida con las de otros
autoanalizadores de otras marcas comerciales, el fundamento numrico es el mismo.
Como vemos en la figura 1, se representa un informe hematolgico de un perro y en la
tabla I se resumen las abreviaturas que suelen aparecer en los informes A partir del
informe, comentaremos todos los parmetros de la serie roja, blanca, plaquetas y
variaciones de todos ellos en patologas concretas.
Figura 1
TABLA I
LEU = Leucocitos/L
HEM =Hemates/L
HB = Hemoglobina total g/dL
HCT = Hematocrito %
VCM = Volumen corpuscular medio fL
HCM = Hemoglobina corpuscular media pg
CHCM = Concentracin de hemoglobina corpuscular media g/dL
RDW = Ancho de distribucin de hemates %
HDW = Ancho de distribucin de hemoglobina g/dL
PLQ = Plaquetas/L
VPM = Volumen plaquetar medio fL
PDW = Ancho de distribucin de plaquetas %
PTC = plaquetocrito %
NEUT = Neutrfilos/L %
LINF = Linfocitos/L %
MONO = Monocitos/L %
EOS = Eosinfilos/L %
BASO = Basfilos/L %
LUC = Clulas grandes no teidas/L %
Abreviaturas (y sus unidades) que suelen aparecer en los informes hematolgicos.
SERIE ROJA
En el canal de clulas rojas y plaquetas, el instrumento esferocita los hemates, los hace
pasar por un capilar de uno en uno y los cuenta, dando el nmero de hemates por
volumen de plasma (HEM x106/L), y por medio del lser determina el volumen y el
ndice de refraccin de los mismos. Al estar las clulas esferocitadas, puede determinar
el volumen sin error (VOLUM. HEM), midiendo su dimetro. El volumen medio de
hemates para un perro es de 45 a 95 fL, y para un gato de 29 a 70 fL. De la suma de la
determinacin del volumen obtenido clula por clula y del nmero de hemates, se
calcula:
HC: hematocrito o la relacin del volumen de hemates con el de la sangre total.
HC = VCM x HEM/1000
VCM: volumen corpuscular medio de cada hemate. Se calcula por estadstica.
En la figura 2 se representa la grfica de volumen de hemates dentro de dos lneas, que
comprenden los valores normales antes indicados. Como podemos observar, en esta
grfica se ordenan los hemates por tamao de menor a mayor, por lo tanto podemos
deducir que la grfica es simplemente una curva de Gauss. En algunas ocasiones esta
grfica se desplaza hacia la izquierda, lo que significa que existe una poblacin
importante de clulas que son pequeas. En el informe entonces aparecen 1,2 o 3 cruces
en microcitsis (MICRO). Por el contrario, si la grfica se desplaza hacia la derecha, la
poblacin dominante ser macroctica (MACRO), apareciendo cruces en esa casilla del
informe.
Figura 2
Los lmites de la curva de esta grfica deben estar comprendidos entre los valores de
volumen antes indicados, por lo que otro parmetro a tener en cuenta es el ancho de
distribucin de hemates, o el ancho de la curva (RDW), el cual representa de forma
numrica, el coeficiente de variacin del mnimo y mximo de la curva, o histograma de
la figura 2.. Su utilidad es informar numricamente de la existencia de anisocitsis, es
decir de la variacin del volumen eritrocitario. sto ocurre cuando existen varias
poblaciones de distinto tamao. Si tenemos un RDW elevado y en el histograma hay
una poblacin desplazada hacia la izquierda, y/o hacia la derecha, en el informe
aparecern cruces en anisocitsis (ANISO).
Al medir el ndice de refraccin de los hemates, el instrumento calcula la concentracin
de hemoglobina por hemate (CONC HB), siendo de 25 a 39 g/dL en perros y de 26 a
40 g/dL en gatos. De la suma de esta concentracin, medida clula a clula, se
determina por clculo:
CHCM: concentracin corpuscular media de hemoglobina o la cantidad de hemoglobina
contenida en 100 mL de hemates. CHCM = HB/HCTx100.
Exactamente igual que para el volumen de los hemates, obtenemos una grfica de
concentracin de hemoglobina (figura 3), donde se distribuyen de menor a mayor las
distintas cantidades de hemoglobina contenida en los hemates, siendo el ancho de esta
curva (HDW) el parmetro que nos informa sobre posibles fenmenos de anisocroma
(ANISOCR). La desviacin del histograma de hemoglobina hacia la izquierda, por tanto
implica hipocroma (HIPO) y hacia la derecha hipercroma (HIPER). El HDW, por
consiguiente, ser la desviacin estndar de la curva de hemoglobina, y un valor de este
parmetro elevado significa anisocroma, apareciendo en el informe cruces en la casilla
de ANISOCR.
Figura 3
Adicionalmente, el instrumento determina la hemoglobina (HB) de forma habitual
(convirtindola en cianometahemoglobina, y midindola espectrofotomtricamente), y a
partir de ah por clculo se obtiene la HCM: hemoglobina corpuscular media o valor
medio de hemoglobina en cada hemate.
HCM = 10 x HB/HEM.
Una vez definidos estos parmetros, veremos la utilidad de todos estos ndices, que es
simplemente poder clasificar los distintos tipos de anemias. Normalmente se define una
anemia como un descenso en los valores de hemoglobina y/o del hematocrito, por
debajo de lo normal.
En las ANEMIAS FERROPNICAS suele existir parte de la poblacin de hemates que
son microcticos, pero a veces el nmero de ellos es tan pequeo, que no suele afectar al
VCM total. Adems, aunque las anemias ferropnicas no son regenerativas (para
considerar una anemia como regenerativa, el ndice de reticulocitos debe de ser de 2.5
mayor), la consecuente respuesta de la mdula sea produce clulas macrocticas
hipocrmicas, con lo cual el VCM suele llegar a ser normal. En este caso, para llegar a
un diagnstico acertado el valor del VCM no nos sirve, por lo que debemos fijarnos en
la desviacin de los histogramas de volumen de hemates y concentracin de
hemoglobina (figura 4A), donde observamos que claramente hay una poblacin
destacada hacia la izquierda en cada uno de ellos, es decir existe una poblacin de
clulas microcticas, y cierta cantidad de hemoglobina baja (hipocroma). As mismo
aparecern alarmas en MICRO e HIPO, as como RDW y HDW alterados. Si
posteriormente medimos los niveles de hierro srico y son bajos, corroboraremos el
diagnstico.
Figura 4
Las ANEMIAS REGENERATIVAS se producen nicamente por dos causas: por
hemlisis y hemorragias. En este tipo de anemias, la alta produccin de clulas por parte
de la mdula sea (para reemplazar los hemates perdidos) aporta a la sangre gran
cantidad de clulas jvenes y precursoras, entre ellas los reticulocitos. Las clulas
precursoras son macrocticas e hipocrmicas. Este tipo de clulas tambin aparecen en
transfusiones y muestras sanguneas de varios das. En la figura 4B podemos observar
como en el histograma del volumen de hemates existe una poblacin macroctica (la
curva se desplaza hacia la derecha), y sin embargo en el grfico de concentracin de
hemoglobina, aparece una poblacin en la zona de la izquierda, indicando hipocroma.
Esto se traducir en forma de alarmas morfolgicas de MACRO e HIPO. As mismo,
los valores de RDW y HDW aparecern aumentados. La consecuencia es que este tipo
de informe nos refleja un aumento de la eritropoyesis, hecho que aparece en anemias
inmunomediadas, hemorragias y en infecciones producidas por hemobartonella (en
gatos) y a veces en babesiosis y ehrlichiosis.
Existe una tercera posibilidad de anemia, y es la que cursa con clulas macrocticas y
normocrmicas. Esta situacin puede ocurrir en gatos, a veces en infeccin por el virus
de la leucemia felina, y en perros en algunos casos raros de mal absorcin de vitamina
B12 o en tratamientos con antagonistas de los folatos (difenilhidantona y metotrexato,
por ejemplo). En un proceso de CID (coagulacin intravascular diseminada) se
producen esquistocitos, o fragmentos de hemates que pueden tambin pueden aparecer
en el histograma como clulas microcticas.
Las plaquetas se cuentan en el mismo canal que los hemates, aunque sus resultados se
diferencian de stos, debido a que tienen un ndice de refraccin distinto entre s.
Mientras que los hemates este ndice est por encima de 1.38, el de las plaquetas no
supera esta cifra. Por tanto, de la misma forma que con los hemates, tambin se obtiene
un histograma de su volumen (figura 5) o VOLUM. PLQ, as como el volumen
plaquetar medio o VPM, siendo de 6 a 11 fL en perros, y de 4 a 6 fL en gatos.
Figura 5
Estos dos parmetros nos van a ser de gran utilidad para evaluar una trombocitopenia.
Un VPM aumentado nos estar indicando una activacin de la trombopoyesis, dado que
las plaquetas grandes suelen ser ms jvenes que las pequeas, y la causa puede ser
debida a una trombocitopenia, aunque no se pueda diferenciar el origen de la misma.
VPM aumentados tambin se pueden hallar en alteraciones de la mdula sea,
coagulacin intravascular diseminada y trombocitopenia inmunomediada. Adems, para
las plaquetas tambin se obtienen otros ndices, como son el plaquetocrito o PTC, que
indica la relacin del volumen de plaquetas con el de la sangre total, y el ancho de
distribucin de plaquetas (PDW) que representa el ancho de la curva de VOLUM. PLQ.
Nos podemos encontrar un PDW aumentado en trombocitopenias inmunomediadas y en
ehrlichiosis. En este caso el nmero de plaquetas es pequeo y la curva de VOLUM.
PLQ es casi una lnea (figura 6).
Tambin podemos saber si existe agregacin plaquetaria, por una imagen caracterstica
que se visualiza en la grfica de perox (figura 7). En esta grfica se observa una nube de
puntos de forma lineal, orientndose a 45 0 en dicha grfica. Esa nube de puntos son
plaquetas agregadas, y el nmero total de plaquetas puede estar disminudo. En otras
ocasiones podemos observar un pico a la izquierda del histograma de plaquetas, que
corresponde a fragmentos de hemates.
Figura 6
LEUCOCITOS
Dos son los canales por los que el instrumento determina el nmero de leucocitos y sus
diferentes tipos de poblaciones, as como clulas precursoras y patolgicas de la serie
blanca. Uno de ellos es el canal de peroxidasa. En este canal se clasifican los distintos
tipos de leucocitos. Una vez lisados los hemates, se cuenta el nmero de leucocitos
(entre 5.000 y 15.000), y por mtodos citoqumicos se determina la actividad
peroxidsica de cada poblacin de leucocitos, clasificndose cada uno de ellos en base a
su tamao y actividad peroxidsica. En la figura 8 se muestran las distintas reas donde
se orientan cada una de las poblaciones de leucocitos en un perro.
Figura 8
As, los linfocitos se agrupan hacia la izquierda y abajo del histograma, ya que son
clulas pequeas y poco teidas, y los neutrfilos arriba y a la derecha, al ser mayores y
poseer mayor tincin. En gatos, los eosinfilos son las clulas ms grandes, aunque no
se tien con la peroxidasa, por lo que se localizan en la parte superior de la grfica,
encima de los neutrfilos. Como hemos visto anteriormente, tambin se cuentan en el
canal de perox las plaquetas agregadas. Existe un parmetro que es el ndice de
actividad peroxidsica media de la poblacin de neutrfilos, o MPXI. Si es alto, indica
la presencia de cayados, dando alarmas en forma de cruces en la casilla D. IZQ. Si por
el contrario es bajo, indica una patologa de la serie mieloide. El MPXI en un perro se
halla comprendido entre 0 y 8, y en un gato entre 0 y 10.
Hay tambin un rea donde se agrupan las LUC o clulas grandes no teidas, que
corresponden a linfocitos grandes hiperactivos, linfoblastos, mieloblastos y en general
clulas patolgicas. El porcentaje de LUC normal se halla entre el 0 y 3 % en perros, y
entre el 0 y 1 % en gatos. Estas clulas no se tien con peroxidasa, y su aumento nos
puede ayudar a diagnosticar una posible leucemia. La figura 9 muestra una grfica de un
perro (resultado real) con leucemia linfoblstica aguda (foto 1). Se puede observar como
la mayora de las clulas estn encuadradas en la zona de LUC, ya que los linfoblastos
son clulas grandes que no se tien con la peroxidasa. Tambin se observa una
poblacin anormal en el histograma de baso-lobularidad, en la zona correspondiente a
los basfilos, debida a un aumento de linfoblastos. Un aumento de LUC se traduce en
alarmas como IG + (granulocitos inmaduros), ATIP + (linfocitos atpicos).
Figura 9
Foto 1
neutrfilos, por lo que estas clulas se localizan en el cuello del gusano. Si existe una
severa granulacin txica de los neutrfilos, el ncleo tambin es menos denso, y estas
clulas tambin se acumulan en la zona del cuello del gusano. El ndice de
lobularidad (IL) refleja el grado de segmentacin de los leucocitos. Si el ndice es alto,
la poblacin es predominantemente poli lobulada, indicando un aumento de la serie
granuloctica, como en el caso de inflamaciones o infecciones. Si por el contrario este
ndice es bajo, la poblacin que abunda es la mononucleada, indicando que existe
desviacin a la izquierda, en forma de alarma (D. IZQ +), o alteraciones de la serie
linfoide o mieloblstica, apareciendo en este caso una alarma en BLASTS (blastos). En
casos extremos donde el nmero de eosinfilos es muy alto, pueden aparecer stos
como una panza en el cuerpo del gusano. Por ltimo, algunos artefactos pueden
aparecer en la zona de los PMN, como es el caso de la lipemia. Los quilomicrones se
localizan en esta zona en forma de S, por debajo del cuerpo del gusano.
CONCLUSIONES
La automatizacin en los laboratorios es actualmente algo habitual, no slo por el alto
nmero de muestras que se procesan a diario, sino por la precisin en los anlisis. Los
humanos tendemos a creer en lo que vemos, y es difcil concebir que un instrumento sea
capaz de distinguir entre distintos tipos de clulas. Sin embargo, afortunadamente hoy
en da existen autoanalizadores que realizan con xito este tipo de anlisis. Con
instrumentos como el descrito en este artculo, no slo podemos determinar el nmero
de clulas blancas, rojas y plaquetas, sino que adems podemos detectar clulas
precursoras y patolgicas, y diagnosticar con antelacin a la realizacin de pruebas ms
especficas y sofisticadas, distintas patologas de la sangre.
El gran avance de los analizadores hematolgicos son las grficas que procesan. En el
caso de los hemates, por medio de curvas que representan su tamao y cantidad de
hemoglobina, podemos ser capaces de clasificar, a simple vista, el tipo de anemia e
incluso detectar clulas rojas precursoras. Tambin podemos saber si existen fragmentos
de hemates. Con las plaquetas podemos saber si su nmero es real, por estar o no
agregadas. Pero el mayor avance en hematologa veterinaria, con este tipo de
instrumentos, es la determinacin de los distintos tipos de clulas blancas. Se pueden
determinar las cinco poblaciones de leucocitos en perros y gatos, pudiendo saber por su
nmero si existe un proceso inflamatorio, desviacin a la izquierda, tendencia a un
proceso alrgico o una infeccin parasitaria. Pero lo ms importante es que podemos
detectar clulas tumorales, en forma de clulas precursoras, y por medio de las grficas
y los ndices numricos, saber si el animal es normal o presenta alguna alteracin como
las leucemias, parvovirosis o eosinofilia, entre otras.
Por tanto, la ventaja que presenta, los informes de este tipo es la rapidez y la precisin
con la que nos enfrentamos a una patologa de tipo hematolgico, o de otro tipo, pero
que se refleja en cambios en los parmetros normales sanguneos. Aprendiendo a
observar todos los datos que el informe nos proporciona, sacaremos el mayor partido a
los resultados hematolgicos.
TABLA II
PERROS --------------------------------------------------------- GATOS
PERROS/GATOS
Neutrfilos: 45 76 %./ 35 75 %.
Linfocitos: 16 45 %. / 20 55 %.
Monocitos: 1 - 8 %./ 1 - 4 %.
Eosinfilos: 1 10 %. / 1 10 %.
Basfilos: 0 2 %./ 0 2 %.
FUNCIN DE LOS DISTINTOS LEUCOCITOS:
Debemos considerar cmo acta cada tipo de leucocito para poder entender en qu tipo
de alteraciones puede variar su nmero, lo cual se reflejar en la frmula leucocitaria.
De forma general, podemos dividirlos en fagocitos e inmunocitos.
Los fagocitos son los neutrfilos, eosinfilos, y monocitos. Son clulas que aparecen
como primera lnea de defensa contra agentes infecciosos. Su nmero, por tanto, se
incrementar en todos los procesos que impliquen una agresin, tanto bacteriana como
parasitaria. Hay que tener en cuenta, sin embargo, que los eosinfilos no tienen un papel
predominantemente fagocitario, como veremos ms adelante. Aunque todos los
fagocitos no actan de la misma forma, es importante sealar que son atrados, frente a
cualquier agresin, hacia un lugar especfico del organismo por medio de antgenos
(propios o extraos), o por sustancias quimiotcticas liberadas. Este fenmeno de
atraccin celular se denomina quimiotaxis. Esto significa que en procesos
inflamatorios, donde se libera una gran cantidad de este tipo de mediadores, tambin
nos encontraremos con un alto porcentaje de fagocitos.
Segn lo expuesto, su nmero aumentar en procesos:
1. Infecciosos.
2. Inflamatorios.
3. Inmunomediados.
Los inmunocitos son los linfocitos. stos se dividen en linfocitos T y B. Los linfocitos T
son los responsables de la inmunidad celular. Su papel es el de reconocer a un antgeno
extrao y desencadenar toda la respuesta inmunitaria. Aparte de controlar y regular el
sistema inmunitario, tambin pueden actuar directamente sobre virus o clulas
tumorales. Los linfocitos B por su parte, tras su transformacin en clulas plasmticas,
producen inmunoglobulinas o anticuerpos, siendo los responsables de la inmunidad
humoral. El papel de los anticuerpos es mediar en la identificacin exacta del antgeno
extrao, y promover en definitiva la actuacin especfica de las clulas fagocticas y en
general la respuesta inmunitaria. Ciertos clones de linfocitos B permanecen como
circulantes actuando como memoria del sistema inmunitario y facilitando una respuesta
ms rpida ante una posterior exposicin a los mismos antgenos. Las clulas de
memoria son las responsables de la inmunidad que se adquiere al paso de muchas
infecciones o inducida por la vacunacin.
Neutrfilo
Cayado
Monocito
Eosinfilo
Linfocito
NEUTRFILOS
NEUTROFILIA
Glucocorticoides
NEUTROPENIA
LINFOCITOS
LINFOCITOSIS
Anestesia
Estrs (en gatos)
Leucemia linfoctica
LINFOPENIA
Vacunas
Glucocorticoides
Quilotrax
MONOCITOS
MONOCITOSIS
Linfosarcomas
Inflamacin crnica
Anemia autoinmune
EOSINFILO
EOSINOFILIA
PIF
Alergias
Parsitos (filariosis)
Procesos asmticos (en gato)
BASFILOS
EOSINOPENIA
BASOFILIA
Granuloma eosinoflico
Glucocorticoides
Hipersensibilidad (alergias)
Mastocitomas
CONCLUSIONES
La frmula leucocitaria, como hemos visto, nos puede dar gran informacin sobre el
estado general de salud de un animal, pero hay que considerar tambin el nmero total
de leucocitos, para su correcta evaluacin. Como cualquier resultado analtico, la
frmula leucocitaria por s misma no es capaz de confirmarnos una patologa especfica.
Si los resultados obtenidos nos inducen a pensar que existe algn proceso patolgico,
esta sospecha se debera complementar con otro tipo de anlisis. En el caso de
inflamaciones, si son debidas a parsitos habr que detectarlos por medio de pruebas
inmunolgicas u observacin directa. Si el proceso es bacteriano, debera buscarse el
origen y realizar cultivos microbiolgicos. Actualmente existen mtodos analticos que
nos evidencian la presencia de ciertos virus. Las neoplasias nicamente se pueden
confirmar por estudios anatomopatolgicos, como citologas o biopsias. Todos estos
mtodos confirmativos, inducidos por los resultados de la frmula leucocitaria, siempre
apoyan al diagnstico clnico.
BIBLIOGRAFIA
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1993.
-Cowell R.I., Tyler R.D. and Meinkoth J.H. Citologa y hematologa diagnstica en el
perro y el gato. Multimdica. Barcelona, 1999.
- Rebar A..H. The white cell and disease. Veterinary Learning System. USA, 1990
- OrnsteinA.H. Advances in automated Anlisis. Miami. Thurman Associates, 1971.
- Muoz, Otilia Ferrer y Rodn. Interpretacin de las respuestas leucocitarias.
Pequeos Animales, Madrid, 1997.
RETICULOCITOS.
Los reticulocitos son clulas precursoras de los hemates y una elevada concentracin de
ellos en sangre
significa que nos hallamos ante una
ANEMIA REGENERATIVA. La mejor forma de saber si una anemia es o no
regenerativa, es determinar el NDICE DE RETICULOCITOS (IR).
IR = (% Hematocrito/45) x % Reticulocitos
Si el ndice de reticulocitos (IR) es mayor de 2.5, la anemia es regenerativa.
COAGULACIN.
Las pruebas de coagulacin se determinan en un coagulmetro Coatron M1 (Kemia)
monocanal termostatizado, en plasma obtenido de sangre recogida en citrato sdico. La
concentracin de citrato debe ser del 3,2 % y la proporcin sangre:citrato debe ser de
9:1.
Las pruebas que se realizan rutinariamente son:
PT o protrombina, agrupa a varios factores de coagulacin, constituyendo la va
intrnseca y comn.
PTT o cefalina, el conjunto de estos factores de coagulacin es la va extrnseca y
comn.
Fibringeno
Aunque se puede determinar cualquier factor, el ms importante es el factor Von
Willebrand ya que de todas las alteraciones hereditarias de la hemostasia, es la ms
frecuente en perros.
Los factores de coagulacin se sintetizan en el hgado, y varios de llos de las vas
extrnseca e intrnseca (II, VII,IX y X) son dependientes de la vitamina K para poder
desempear su papel. Por eso muchas cusas de alteraciones en la coagulacin son
debidas a problemas hepticos severos o a dficit de vitamina K.
Hay que tener en cuenta que el citrato sdico de los tubos est en forma lquida y en
cantidad considerable, por lo que si la cantidad de sangre extrada no llega a la marca de
llenado que indican todos los tubos, sta estar ms diluda y por tanto los tiempos de
coagulacin pueden ser ms alargados.
PDF o Productos de Degradacin del Fibringeno
Los trombos que aparecen en ciertas enfermedades estn formados por fibrina con
enlaces cruzados, cuya digestin producida por la plasmina, da lugar a los PDF
molecularmente distintos a los del fibringeno. La aparicin de PDF detectables en una
muestra de sangre con citrato sdico, es indicativo de un proceso de caogulacin
intravascular diseminada (CID).
BIBLIOGRAFIA
- Nelson, R.W. y Couto, G.G. Manual de medicina interna en pequeos animales.
Harcourt; 2000 (740 -749).
- Vives, J.L. y Aguilar, J.L. Manual de tcnicas de laboratorio en hematologa. Salvat
;1990 (383 - 400).
- Kitchen, S., Olson, J.D. and Preston, F.E. Quality in Laboratory Hemostasis and
Thrombosis. Wiley-Blackwell, 2009.
- XXVI Congreso Anual de AMVAC. Madrid, 2009.