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Liberacin
en matrices
de frmacos
biocermicas:
Avances y perspectivas
E ditores:
Mara Vallet Reg - Antonio Luis Doadrio Villarejo
ndice
Pgs.
27
31
39
65
85
111
141
173
203
I.
II.
III.
IV.
V.
VI.
VII.
NDICE
Pgs.
VIII.
237
Introduccin
MARA VALLET REG
Este libro nace del deseo de recoger una parte importante del trabajo
realizado en sistemas de liberacin de frmacos en matrices biocermicas. Esta lnea de investigacin tiene una doble vertiente, la dirigida a
introducir frmacos en biomateriales cuya aplicacin es reconstruir o
regenerar tejidos vivos, y la orientada al sistema ms tradicional de
introducirlos para su utilizacin va oral.
Esta monografa surge con la intencin de desarrollar la primera va,
ya que tras aos de trabajo investigador del equipo del Departamento de
Qumica Inorgnica y Bioinorgnica de la Facultad de Farmacia de la
Universidad Complutense de Madrid, se pens en la utilidad de recoger,
de forma sistemtica, los avances en este campo de investigacin. Sin
embargo, hay aspectos que podran quedar fuera, razn por la cual se
buscaron expertos que abordaran estos temas. Por tanto, el libro nace
con la intencin de recoger el trabajo realizado en la primera va, esto
es, liberacin de frmacos en biomateriales, acotando el campo al mundo de las biocermicas.
No era intencin desarrollar en esta monografa la segunda va, la
sntesis y posterior liberacin de frmacos va oral, ubicados en matrices
cermicas. Sin embargo, ni siquiera mencionarla podra desequilibrar la
mirada conjunta del tema. Sin duda alguna, merecera un estudio exhaustivo y completo.
Las cermicas con aplicaciones mdicas son un interesante campo
de investigacin y desarrollo para la obtencin de biomateriales tiles
en la fabricacin y/o fijacin de implantes. Con biomateriales en general, y biocermicas en particular, se pueden recambiar muchas piezas de
nuestro cuerpo (1-2). En la actualidad, para realizar una sustitucin sea
INTRODUCCIN
Las primeras cermicas que fueron utilizadas en aplicaciones mdicas, la alumina y la zirconia, son dos prototipos de cermicas conocidas
como inertes, razn fundamental por lo que fueron elegidas para su
utilizacin en implantes. A estas cermicas las caracteriza una cintica
de reaccin muy lenta, tanto que puede considerrselas como cermicas
casi inertes.
Pero naturalmente otras cermicas tienen cinticas de reaccin ms
rpidas, e incluso muy rpidas. Como en cualquier reaccin qumica, el
producto de reaccin de una sustancia con su entorno puede conducir
a un resultado no favorable, como es la corrosin de un metal, pero
puede tambin conducir a un producto de reaccin favorable que transforme qumicamente el producto de partida en el producto final deseado.
Este es el caso de las cermicas bioactivas, que en contacto con los
fluidos fisiolgicos, reaccionarn qumicamente en la direccin de producir hueso neoformado. Cuando se piensa en reparar una parte del
esqueleto, a priori podran existir dos posibilidades: reemplazar la parte
daada, o sustituirla regenerando el hueso. Este es el papel que juegan
las biocermicas bioactivas.
Las matrices cermicas pueden ser de naturaleza qumica muy variada, entre otras se pueden citar los fosfatos de calcio en general y la
hidroxiapatita y el -fosfato de calcio en particular como los representantes ms significativos de las biocermicas cristalinas (4), los vidrios
bioactivos muy representativos de las cermicas amorfas (5), las vitrocermicas bioactivas (6-7), los cementos de sales de calcio (8-10), todo
tipo de combinaciones de materiales bifsicos como, por ejemplo, hidroxiapatita-biovidrio (11-12) e hidroxiapatita--fosfato de calcio (13),
cermicas hbridas bioactivas (14) y materiales mesoporosos ordenados
de xido de silicio (15).
Los cirujanos aplican estas cermicas para relleno y/o sustitucin de
huesos, y en funcin de las necesidades unas veces las requieren en
forma de granulado, otras de piezas porosas o densas. Una modalidad
cada vez ms solicitada es en forma de inyectable, ya que facilita mucho
la ciruga que puede pasar a la categora de no invasiva (16). Y por
ltimo, en casos donde se requieran propiedades mecnicas slo alcanzadas por metales, se recurre a realizar recubrimientos cermicos sobre
las prtesis metlicas (17), logrando reducir la liberacin de iones al
organismo procedentes de la aleacin metlica del implante, consiguien9
FIGURA 1. Cermicas en forma de granulado (a), pieza porosa (b), densa (c), inyectable (d), recubrimiento cermico (e).
INTRODUCCIN
mientos, algunos tradicionales, otros novedosos, para resolver los problemas tcnicos de cada problemtica. Pero un componente habitual para
procesar cermicas y darles la forma deseada es aplicar altas temperaturas. Y este es el principal problema cuando se quieren incluir frmacos a
estas cermicas, ya que sus temperaturas de descomposicin son muy
bajas, frente a las altas temperaturas necesarias para conformar piezas
cermicas.
En esta monografa se vern distintos casos concretos donde se
soluciona este problema, logrando utilizar exclusivamente matrices
cermicas sin requerir la utilizacin de altas temperaturas de sinterizacin (18-19).
Sin embargo, el mtodo ms simple para conformar piezas cermicas sin utilizar altas temperaturas, para lograr su maridaje con los frmacos es recurrir a la utilizacin de polmeros (20-21), como tambin
se ver a lo largo de esta monografa.
De hecho, la liberacin controlada de frmacos en matrices polimricas ha sido un recurso muy empleado y explotado (22), pero una vez
ms, lo que puede ser muy til y adecuado para liberacin de frmacos
va oral puede no serlo para la liberacin de frmacos en implantes,
porque para determinadas prtesis, el material polimrico no es el ms
adecuado, o no es adecuado en absoluto. Esta es la razn por la que es
necesario explotar el campo de investigacin relativo a la inclusin de
frmacos en matrices cermicas, resolviendo en primer lugar, como
proceder sin utilizar temperatura, que es la va ms fcil y utilizada en
el mundo de las cermicas.
Por tanto se vislumbran distintos tipos de matrices para introducir
frmacos en implantes, segn sean de naturaleza polimrica, cermica o
mezclas polmero-cermica o mejor an, matrices de materiales compuestos polmero-cermica. Tambin algunos de estos recursos se vern
a lo largo de esta monografa.
Volviendo a las matrices exclusivamente cermicas, el abanico de
posibilidades es grande (Figura 2) y adicionarles distintos frmacos tambin lo es. Ms an, pueden agregrseles no slo frmacos, tambin
sustancias que propicien una cintica rpida de crecimiento del hueso
como son determinados pptidos y protenas.
11
FIGURA 2.
INTRODUCCIN
FIGURA 3.
Todas ellas con tamaos en el orden del nanmetro. Por tanto, cualquier material poroso puede albergar fcilmente estas molculas si sus
poros tienen tamaos superiores al nanmetro.
La porosidad de las matrices cermicas puede ser ordenada o desordenada. A lo largo de esta monografa veremos ambos casos. Sin duda
13
INTRODUCCIN
tibles de alojar distintos frmacos y cederlos de manera sostenida durante perodos de tiempo prolongados a un medio apropiado.
Tanto en las paredes de las matrices vtreas como en las de los
materiales mesoporosos ordenados de xido de siliceo abundan los grupos silanol (Figura 5),
que facilitan determinadas interacciones, como se ver en distintos captulos de esta monografa. Como ejemplo ilustrativo obsrvese la
figura 6, donde puede verse cmo se produce la interaccin entre el
grupo OH del silanol con el grupo COOH del ibuprofeno. Naturalmente, este tipo de interacciones se pueden modificar qumicamente, fun-
FIGURA 6.
15
INTRODUCCIN
17
FIGURA 8.
nologa.
INTRODUCCIN
FIGURA 9.
Multidisciplinaridad de la nanotecnologa.
19
FIGURA 10.
La informacin que se publica sobre nanos de cualquier tipo aumenta de forma exponencial en el tiempo, lo que dificulta asimilar de forma
equilibrada lo que est sucediendo. En cualquier caso la biotecnologa
ya tiene numerosos ejemplos de posibles aplicaciones (Figura 10) entre
las que figura la liberacin de frmacos.
Aunque con informacin todava confusa en ocasiones, pero con
trabajo de investigacin bien ya realizado, en marcha o con proyectos de
futuro, ya se sabe que es bueno utilizar nanoestructuras para mejorar la
liberacin de frmacos y sobre todo evitar efectos secundarios no deseados y que la nanotecnologa abrir la puerta a nuevos sistemas de anlisis y deteccin de frmacos.
En la Tabla I se recogen diversos factores que la nanotecnologa
impulsa en medicina, y la Tabla II ilustra las dimensiones de diversos
sistemas portadores para liberacin de frmacos.
20
INTRODUCCIN
Factores que la nanotecnologa impulsa en medicina
TABLA I.
Liberacin de frmacos
Anlisis de frmacos
Ingeniera de tejidos
Diagnsticos
TABLA II.
Estructura
Caractersticas
Molculas de
frmacos
1 nm
Nanocpsulas
50-200 nm
Nanopartculas
25-200 nm
Vesculas
25-3000 nm
Esferas bicapa uni o multilaminares que contienen el frmaco en las regiones lipdicas o acuosas
Lipoprotenas de
densidad
20-25 nm
Nanoemulsiones
20-50 nm
tes en los fluidos corporales. As, los anticuerpos se pueden unir a partculas magnticas coloidales, generalmente de xidos de hierro recubiertos de slice, o esferas de poliestireno embebidas en xidos de hierro. Cuando estas partculas se mezclan con una muestra de plasma
sanguneo, los anticuerpos reaccionan y se enlazan a la hormona diana.
Dado que el tamao de la nanopartcula ofrece tanto una gran superficie
especfica para la reaccin como una tendencia a desplazarse rpidamente en el seno de la disolucin, debido al movimiento browniano
trmico, las reacciones pueden ser bastante rpidas. La funcionalidad
magntica de la partcula permite la deteccin del complejo formado por
el anticuerpo y la hormona, separando y concentrando el producto de la
reaccin en la muestra de plasma. Se ha desarrollado incluso la deteccin de ADN mediante tcnicas de colorimetra, empleando nanocristales de oro funcionalizados con oligonucletidos, que se pueden ensamblar formando materiales con redes peridicas (35).
Se estn desarrollando partculas similares para la liberacin de
frmacos. Para esta aplicacin, se pueden unir frmacos bioqumicos a
nanocristales magnticos de forma que, mediante la aplicacin de campos magnticos, se pueden dirigir hacia las zonas del organismo donde
se desean liberar. Por ejemplo, se puede atacar un tumor maligno con la
liberacin y concentracin orientada de frmacos utilizando campos
magnticos. Tambin se pueden atacar las clulas extraas y causantes
de tumores mediante nanocristales con productos qumicos que se unan
a dichas clulas y las saquen del torrente sanguneo antes de que tengan
la oportunidad de degradarse. Diversos ejemplos han demostrado que es
posible capturar y eliminar 100 clulas tumorales de entre 50 millones
de clulas sanguneas en menos de una hora.
Una preocupacin importante en medicina es la administracin de
frmacos y drogas al paciente del modo ms aceptable fisiolgicamente.
En general, cuanto menor es el tamao del frmaco y del material de
recubrimiento empleado para encapsularlo, mejor es la absorcin del
frmaco por el organismo. Para esto tradicionalmente se han utilizado
materiales polimricos, que aunque no son objeto de esta monografa,
s creo deben al menos mencionarse, razn por la cual se incluye un
pequeo comentario. Como ejemplo la liberacin de frmacos con nanofibras de polmeros se basa en el principio de que la velocidad de
disolucin de un determinado frmaco aumenta con el rea superficial
22
INTRODUCCIN
23
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(15)
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(18)
(19)
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(21)
24
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INTRODUCCIN
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(37)
25
26
Prlogo
JUAN MANUEL REOL TEJADA
Presidente de la Real Academia Nacional de Farmacia
Las Ciencias del medicamento no terminan en el estudio del principio activo, sus caractersticas y modo de accin. La seguridad y la
eficacia de aqul dependen, en gran medida, del sistema de administracin. Todo el proceso de liberacin y su cintica juegan un papel extraordinario.
La investigacin de nuevos sistemas de administracin ha preocupado siempre a los galnicos. Estamos pues en presencia de una monografa de altsimo inters farmacutico. En este caso los autores nos van a
introducir en el mundo de la liberacin de frmacos en biomateriales.
Las cermicas pueden ser casi inertes o bioactivas. Cuando interaccionan con el frmaco producen una liberacin que obedece a determinadas leyes cinticas. Para eliminar el problema de la temperatura se
utilizan sustancias polimricas. El tamao de los poros es crtico, pero
pueden ser tiles si aquel tamao es superior al nanometro y es uniformemente regular.
Entramos as en el mundo de la nanociencia y la nanotecnologa, es
decir, la manipulacin de los tomos uno a uno, lo que nos lleva a una
revolucin cientfica sin precedentes, incluyendo, pues, la utilizacin en
medicina. La nanoestructura favorece la absorcin de medicamentos, el
reconocimiento molecular, el ataque especfico al crecimiento tumoral o
la liberacin selectiva de frmacos.
El lector tiene en sus manos un valioso texto de mxima actualidad
que han coordinado nuestro Acadmico de Nmero, Profesor A. Doadrio Villarejo y la Profesora Mara Vallet, que dirige el Departamento
PRLOGO
PRLOGO
29
Relacin de participantes
RELACIN
DE PARTICIPANTES
RELACIN
DE PARTICIPANTES
33
RELACIN
DE PARTICIPANTES
RELACIN
DE PARTICIPANTES
35
RELACIN
DE PARTICIPANTES
RELACIN
DE PARTICIPANTES
I.
1.
INTRODUCCIN
FIGURA 1.
MATERIALES
FIGURA 2.
FIGURA 3.
42
Mecanismo de sntesis.
MATERIALES
FIGURA 4.
FIGURA 6.
44
MATERIALES
MECANISMOS DE SNTESIS
Desde que se report por primera vez esta nueva familia de materiales, se han sintetizado nuevas estructuras mesoporosas con tensoactivos distintos a los cationes alquilamonio sencillos empleados inicialmente. De manera general, los agentes tensoactivos pueden clasificarse
en catinicos, aninicos, neutros y no inicos, aunque cada una de estas
categoras admite subdivisiones menores. En la figura 7 se representan
modelos moleculares extendidos de algunos compuestos caractersticos
de cada tipo. As, los tensoactivos catinicos pueden contener dos cadenas hidrofbicas unidas al mismo tomo de nitrgeno de la cabeza polar,
o bien cada una de las cadenas est unida a un tomo de nitrgeno
distinto, formando un esquema en el que la cabeza polar puede contener
2, 3 o ms tomos de nitrgeno. Los tensoactivos aninicos suelen
contener un grupo sulfnico o un fosfato como cabeza polar. Por otra
parte, en la mayora de los tensoactivos no inicos comerciales la parte
polar suele estar formada por polixido de etileno con un nmero varia-
FIGURA 7. Dibujo representativo de distintos tipos de surfactantes: catinicos, tetraalquilamonio (A) y geminal (B); no inicos, copolmero de poli(xidos de etileno y propileno) (C) y poli(xido de etileno) (D).
45
MATERIALES
En este ltimo grupo tambin habra que incluir aquellos casos en los
que, an emplendose un tensoactivo inico, la carga de ste est compensada por un in de signo opuesto. Un ejemplo del primer caso lo
constituye la sntesis descrita inicialmente para la familia M41S, en la
que se emplean tensoactivos catinicos del tipo alquiltrimetilamonio, y
la presencia de aniones silicato en disolucin se asegura al trabajar a pH
bsico. El caso contrario lo constituira, por ejemplo, el empleo de cidos carboxlicos de cadena larga como tensoactivos, y cationes de oxohidrxidos de aluminio como precursores del esqueleto inorgnico, lo
que conducira a la formacin de alminas mesoestructuradas. En el
caso de los tensoactivos no inicos, por ejemplo aquellos en los que la
cabeza polar la forman grupos polixido de etileno, prevalece la interaccin entre tomos de oxgeno del grupo ter y tomos de hidrgeno
pertenecientes a grupos silanol, Si-OH, de los oligmeros de slice, a un
pH moderado. Sin embargo, a pH fuertemente cido (por debajo del
punto isoelctrico de la slice, pH = 2) hay que considerar la posibilidad
de protonacin de los grupos Si-OH. En todos los casos es necesario
considerar que el pH de la disolucin determina la carga de las especies
qumicas que van a conformar el esqueleto inorgnico del material, y
por lo tanto condiciona el mecanismo de interaccin con el tensoactivo.
As, las especies de slice en disolucin estarn cargadas negativamente
a pH 9 (predominan los grupos Si-O), mientras que a pH neutro no
excesivamente cido la carga negativa es extremadamente pequea,
predominando los grupos Si-OH. En el caso de que se utilicen aminas
de cadena larga como tensoactivos, es necesario tener en cuenta que la
protonacin del grupo amino podra predominar incluso a pH ligeramente alcalino.
4.
En la Tabla 1 se relacionan diversas estructuras mesoporosas obtenidas con diferentes tensoactivos. Las distintas fases se identifican esencialmente por su patrn de difraccin de rayos X (o de difraccin de
electrones) caracterstico, y se han incluido en la tabla tambin las caractersticas porosas. Un examen detenido de la tabla permite extraer
varias conclusiones.
47
Material
Estructura
Mecanismo
Tipo de poro
FSM-16
hexagonal plana
a partir de kanemita
canales
canales
canales
MCM-41
hexagonal plana
S I
MCM-48
cbica bicontinua
S+ I
laminar
S I
bicapa
hex. desordenado
S0 I 0
canales
MSU
hex. desordenada
N I
canales
KIT-1
3D desordenada
S+ I
MCM-50
HMS
canales
SBA-1
cbica
S X I
SBA-2
hexagonal 3D
S+ I geminal
+
SBA-3
hexagonal plana
S X I
SBA-6
hexagonal 3D
S+ I
+
2 cavidades
cavidades/canales
canales
2 cavidades
SBA-8
rmbica
S I geminal
SBA-11
cbica
N0 H+ X I+
SBA-12
hexagonal 3D
N H X I
SBA-14
cbica
N0 H + X I +
0
SBA-15
hexagonal plana
N H X I
SBA-16
cbica 3D
N0 H + X I +
0
FDU-2
cbica 3D
N0 H + X I +
+
cavidades/canales
cavidades/canales
FDU-12
cbica 3D
N H X I
FDU-5
cbica bicontinua
N0 H + X I +
AMS
varias
S I
cavidades/canales
cavidades/canales
N H X I
canales
cavidades/canales
cbica 3D
FDU-1
cavidades/canales
varias cavidades
MATERIALES
des grupos. En primer lugar, las estructuras que contienen poros unidireccionales, como MCM-41 o SBA-15 (Figura 9). Ambas poseen un
empaquetamiento hexagonal de poros longitudinales, cuya seccin transversal se asemeja ms a un hexgono que a un crculo. No obstante,
difieren en que SBA-15 puede contener adems un sistema secundario
de microporos (poros cuyo dimetro es menor que 2 nm) que conectan
entre s los canales grandes, y cuya presencia depende en gran medida
de la temperatura de sntesis del material.
FIGURA 9.
49
FIGURA 10. Clculo del parmetro de red hexagonal y del espesor de pared en MCM41 o SBA-15 combinando datos obtenidos de difraccin de rayos X y adsorcin de N 2.
FIGURA 11.
5.
EL PARMETRO DE EMPAQUETAMIENTO
[1]
Donde V es el volumen efectivo de la porcin hidrfoba del tensoactivo, a0 es el rea superficial del grupo que forma la cabeza hidrfila,
y lc es la longitud de la cadena hidrfoba. El valor del parmetro g
determina la geometra bsica del tensoactivo, lo que influye, a su vez,
50
MATERIALES
en la forma de las micelas y por lo tanto en el tipo de estructura resultante (6). En general, valores pequeos de este parmetro conducen a
estructuras cuyos poros posen un radio de curvatura pequeo, mientras
que para un valor de g = 1 se formar una estructura laminar. La figura 12 ilustra la influencia del parmetro g en la formacin de distintas
estructuras mesoporosas.
6.
51
FIGURA 12.
52
El parmetro de empaquetamiento.
MATERIALES
Si el tamao de poro dicta qu clase de molculas pueden ser adsorbidas, su cantidad mxima est determinada por el volumen de poro, expresado generalmente como cm3 por gramo de material. En sistemas que
slo contienen mesoporos, el volumen total de poro coincide, naturalmente, con el volumen de poro correspondiente a los mesoporosos, pero son
mucho ms frecuentes los casos en los que adems de mesoporosos tambin existen microporos o incluso macroporos (poros cuyo dimetro es
superior a 50 nm), estando estos ltimos generalmente asociados a porosidad entre partculas, y cuya contribucin al volumen total de poro aumenta a medida que disminuye el tamao de partcula del material. El
volumen de poro es generalmente muy elevado, entre 0,5 y 1 cm3/g.
La superficie especfica, que se determina generalmente mediante el
mtodo BET a partir de las isotermas de adsorcin de nitrgeno, es
tambin muy alta, entre 500 y 1.000 m2/g, e incluso superior. Este parmetro tambin determina las propiedades de adsorcin del material, ya
que ste es un fenmeno superficial. El concepto de superficie comprende no slo la superficie externa, por as decir, del material, sino tambin
la superficie interna de las cavidades y canales, siempre que stos permitan el libre acceso a su interior de la molcula de nitrgeno que se
emplea en las mediciones.
7.
Como se seal anteriormente, para cada tipo de estructura la porosidad y el rea superficial dependen en cierta medida de las condiciones
de sntesis. Por lo tanto, es posible ejercer un cierto control sobre aque54
MATERIALES
55
9.
ESPESOR DE PARED
En estructuras mesoporosas con simetra hexagonal, se puede calcular fcilmente el grosor del esqueleto inorgnico por diferencia entre
el valor de la celda unidad y el dimetro de poro (Figura 10). Este valor
es lo que se conoce como espesor de pared. Para estructuras con
simetra no hexagonal, el clculo no es tan directo. Al igual que ocurre
con el dimetro de poro, los parmetros de sntesis tambin influyen en
el espesor de pared, que est relacionado con el grado de polimerizacin
de las especies de silicato presentes en la disolucin. Aquellos factores
que disminuyan su grado de polimerizacin promedio provocarn una
reduccin del espesor de pared. Este efecto ocurre al aumentar el pH de
sntesis, la concentracin de tensoactivo, o reducir la concentracin
de slice en el gel de sntesis.
10.
56
MATERIALES
FIGURA 14.
Se observa la presencia de una estructura fina de bandas bien definidas en la regin comprendida entre 400 y 650 cm1. A diferencia de
lo que ocurre en el caso de la faujasita, el espectro infrarrojo de MCM41 calcinada no muestra la presencia de bandas estrechas definidas, y lo
mismo se puede decir de otras estructuras mesoporosas, y es adems
muy similar al de la slice o slice/almina amorfas, en las que no existe
ninguna regularidad en la conexin entre tetraedros (Figura 14). Este
hecho indica que en los materiales mesoporosos descritos hasta el momento no existe un ordenamiento a larga distancia de los tetraedros SiO4
que conforman el esqueleto, es decir, no tienen estructura cristalina. El
anlisis de los espectros de rayos X conduce a la misma conclusin, ya
que se constata la ausencia de reflexiones correspondientes a valores
pequeos (unos pocos ngstroms) de distancias interplanares.
Adems de la ausencia de orden en la configuracin espacial de la
red tetradrica, sta se caracteriza tambin por contener un nmero muy
elevado de defectos de conectividad, es decir, no todos y cada uno de
los tetraedros est conectado a otros cuatro compartiendo tomos de
oxgeno. En el caso en que un tomo de oxgeno de un vrtice de un
tetraedro no est compartido con otro vecino, se forma un grupo silanol,
Si-OH. La presencia de estos grupos en el material da lugar a la apari57
FIGURA 15.
29
Si.
La presencia de una elevada concentracin de defectos de conectividad en los materiales mesoporosos es una consecuencia directa de su
mecanismo de formacin. En efecto, la interaccin entre el tensoactivo
y los oligmeros de silicato en disolucin se produce a travs de grupos
silanol Si-OH o del correspondiente anin, Si-O.
La concentracin de grupos Si-OH que contiene el material una vez
que se ha eliminado el tensoactivo depende tambin del mtodo elegido
para su eliminacin. En general, la calcinacin reduce la concentracin
de defectos, ya que provoca la condensacin de grupos Si-OH, sobre
todo los que estn asociados entre s formando enlaces de hidrgeno.
Por el contrario, la extraccin qumica del tensoactivo apenas modifica
la poblacin de grupos silanol.
58
MATERIALES
59
12.
Como se indic anteriormente, la estructura de los materiales mesoporosos presenta una elevada concentracin de defectos estructurales
bajo la forma de grupos silanol. Si se reemplaza el grupo H del silanol
por una especie qumica R susceptible de unirse mediante un enlace
covalente al tomo de oxgeno, se generan toda una familia de materiales hbridos, en los que la composicin qumica del fragmento R es
diferente a la del armazn inorgnico. Los casos ms comunes son
aquellos en los que R es un grupo funcional orgnico o un silano, es
decir, una especie qumica del tipo Si-R1, en donde R1 representa un
radical orgnico. Adems, ese grupo orgnico puede contener uno o ms
tomos reactivos, susceptibles a su vez de ser modificados qumicamente, segn se representa en el esquema [3].
Si-OH + XRY ---------- Si-O-RY + HX
[3]
FIGURA 17.
60
MATERIALES
El mtodo de co-condensacin permite la incorporacin de una cantidad relativamente elevada de grupos funcionales, que est comprendida generalmente entre 2 y 4 meq/g, en los casos ms favorables. No
obstante, es necesario tener en cuenta que la presencia de grupos funcionales que decoran las paredes del material tambin influyen apreciablemente en el mecanismo de interaccin con el tensoactivo. En casos
extremos, la presencia de una elevada cantidad de grupos funcionales
puede incluso impedir la formacin de la estructura mesoporosa deseada. La Tabla 2 muestra cmo la presencia de grupos propiltiol modifica
la fase mesoporosa obtenida (10).
TABLA 2.
Tipo de estructura
SiO2 2% SH
hexagonal
SiO2 5% SH
SiO2 7% SH 313K
cbica
SiO2 7% SH 323K
cbica
SiO2 7% SH 333K
hexagonal
SiO2 10% SH
cbica
61
FIGURA 18.
El mtodo de co-condensacin conduce generalmente a una distribucin homognea del tensoactivo a lo largo de las partculas del material,
y entre la superficie de las mismas y la superficie interna correspondiente
a los canales y cavidades. Sin embargo, la funcionalizacin post-sntesis
podra permitir en principio la funcionalizacin selectiva del material,
segn se muestra en el esquema de la figura 19 (11).
MATERIALES
encuentran formando parte del propio armazn de la estructura, figura 20, empleando el organosilano (C2H5O)3Si-C6H4-Si(OC2H5 (12). Las
paredes del material estn ordenadas, exhibiendo una periodicidad similar a la de un cristal tambin a lo largo de la direccin del canal.
FIGURA 20. MCM-41 con grupos fenilo componiendo las paredes. Figura adaptada de
la referencia 12.
BIBLIOGRAFA
(1)
63
(8)
(9)
(10)
(11)
(12)
64
II.
1.
INTRODUCCIN
Para estos estudios de liberacin se han empleado materiales mesoporosos del tipo MCM-41, de 3-4 nm de dimetro de poro y el MCM48 y ms recientemente SBA-15, de mayor dimetro (6-7 nm), y cuyas
estructuras se han discutido en otro artculo de esta monografa.
66
APLICACIONES
67
3.
FRMACOS ESTUDIADOS
68
APLICACIONES
4.
La adsorcin del frmaco se realiza por impregnacin de una disolucin del mismo a diferentes tiempos, manteniendo la temperatura
constante hasta comprobar el tiempo en el que se alcanza el lmite
mximo de adsorcin en la matriz mesoporosa, pudiendo estar en polvo
o prepararla en forma de comprimido. Pasado este tiempo, las muestras
se secan en estufa a 37 C durante 24 horas. A continuacin se analiza
la muestra por anlisis elemental para determinar la cantidad de frmaco
que ha adsorbido la matriz, volviendo a caracterizarse el material ya
cargado con el frmaco para comprobar que no sufre alteraciones.
FIGURA 1. Estructuras en 3D del Ibuprofeno y la Eritromicina comparados con el material. Se aprecia que la Eritromicina ocupara ms volumen de poro en el material
mesoporoso que el Ibuprofeno.
69
FIGURA 2.
FIGURA 3.
70
APLICACIONES
5.
INSTRUMENTACIN
FIGURA 4. Instrumentacin de HPLC para liberacin de frmacos. A) Inyector automtico. B) Sistema de doble bomba con controlador electrnico. C) Horno de columna
(opcional). D) Estacin de trabajo con software. Tomado de http://www.beckman.com/
products/images/analytical/hplc/hplc_main.jpg.
Actualmente, para la deteccin en zona visible-ultravioleta se emplean los nuevos detectores de matriz de diodos, que presentan sobre
71
todo las ventajas de una mayor velocidad de barrido y mnimo mantenimiento, junto a una absoluta reproducibilidad y fiabilidad, sin merma
de la sensibilidad, que incluso puede mejorar la de los detectores tradicionales. En la Figura 5 podemos ver un esquema de un detector de
matriz de diodos.
El software debe ser capaz de controlar todo el sistema cromatogrfico y proporcionar los datos de integracin de los picos cromatogrficos. Los programas actuales suelen estar basados en Windows 2000 o
Windows NT, ya que funcionan como estaciones de trabajo servidorcliente con capacidad de administrar ms de un equipo, y con la posibilidad de elaborar una poltica de restriccin de servicios para determinados usuarios. En la Figura 6 se muestra uno de los programas de
control e integracin para HPLC.
Una de las caractersticas de este software es la posibilidad de ver
los picos en 3D, siempre que se utilice un detector de diodos, lo que
hace que el cromatograma sea ms limpio y se aprecien mejor los
picos, tal como se muestra en la Figura 7, dndonos una idea relativa de
las concentraciones de stos.
Una moderna bomba para HPLC de tipo analtico controla flujos de
0 a 10 mL/min., aunque en el anlisis de liberacin de frmacos nos
movemos en flujos de 0,5 a 2 mL/min., por limitaciones de la presin
72
APLICACIONES
en las columnas que se utilizan, que para estas bombas es de 6.000 psi.
En la Figura 8 se muestra una bomba de este tipo.
FIGURA 6. Software de control e integracin de HPLC. Bsicamente, el programa muestra los picos cromatogrficos (A), el espectro visible-uv de cada uno de ellos (B) y una
tabla con los tiempos de retencin y la integracin (C).
FIGURA 7. Representacin en 3D mediante algoritmo matemtico de los picos cromatogrficos con un software para HPLC. Tomado de www.ribbonchem.it/ pagine/total/
total.htm.
73
FIGURA 8. Bomba analtica para HPLC. Capacidad de flujo de 0,01 a 10 mL/min. Presin mxima 6.000 psi. Control electrnico digital. Tomado de http://www.labhut.com/
images/static_pages/hplc/pumps/series3_large.jpg.
74
APLICACIONES
La funcionalizacin se realiza introduciendo el dimetiloctadecilclorosilano sobre la superficie de la slice, que reaccionar para enlazar
cadenas de carbono sobre el silanol, tal como vemos en la Figura 10.
FIGURA 10. Cadenas de octadecilsilano sobre una superficie de slice. Tomado de http:/
/hplc.chem.shu.edu/NEW/HPLC_Book/Adsorbents/ads_bphs.html.
La problemtica es cuan densa en la capa adherida. Aproximadamente hay cinco grupos OH % 2 (1 nm2) respecto a la superficie de slice
completamente hidroxilada. Los ligandos de alquilsilano, que son voluminosos, no pueden reaccionar con todos los grupos silanoles disponibles
debido al efecto estrico. Por su parte, el volumen de Van der Waals del
dimetiloctadecilclorosilano es aproximadamente 925 3, y su longitud a
lo largo del eje principal es de 22 . Por lo tanto, el ataque a la superficie
de esta molcula ocupar ~ 42 2. Podemos decir que por trmino medio
hay un ataque de ~ 2,5 molculas de alquilsilano % 2 en la superficie de
slice. As que tendremos tambin aproximadamente 2,5 grupos OH sin
reaccionar en la superficie debajo de la capa adherida (9).
Este proceso es el mismo que se utiliza para funcionalizar el material mesoporoso, como el SBA-15.
75
7.
MTODOS CROMATOGRFICOS
En la Tabla I se puede apreciar una relacin de las metdicas utilizadas en el anlisis cromatogrfico de los frmacos estudiados en la
liberacin a partir de materiales mesoporosos ordenados.
TABLA I.
Parmetros
Gentamicina
Amoxicilina
Eritromicina
Chicago Ski
6 blue
Columna
X-TerraC18
5m
X-TerraC18
5m
X-TerraC18
5m
X-TerraC18
5m
3,9 150 mm
3,9 150 mm
3,9 150 mm
3,9 150 mm
Acetonitrilo 80%
Metanol 30%
Acetonitrilo 45
% Metanol 70%
Agua 20%
KH2PO4
0,01M
Metanol 15%
Agua 30%
70%
Fosfato amnico
Fase mvil
0,01M 40%
Flujo
1 mL/min.
1 mL/min.
1 mL/min.
1 mL/min.
T. horno
25 C
25 C
45 C
35 C
Deteccin
211 nm
254 nm
215 nm
254 nm
Vol. inyeccin
10 L
10 L
50 L
10 L
tr
1,1 min.
1,6 min.
2,28 min.
1,4 min.
Bibliografa
Mtodo propio
Mtodo propio
www.waters.com
Mtodo propio
8.
CINTICAS DE LIBERACIN
APLICACIONES
Higuchi
Hixson-Crowell
(Ley de la Raz
Cbica)
Modelo de orden
cintico de
Jorgensen y
Christensen
Ecuacin
Aplicacin
% Q = kH . t0.5
Es un modelo de liberacin
controlada por difusin desde
matrices homogneas y matrices
granulares.
1 (1 F)1/3 = khc . t
Combinacin de
Higuchi y orden cero
con log tiempo
% Q = k0 t + kH t0,5
Indicativa de liberacin
controlada por difusin y
membrana que acta de barrera
de la misma.
Ec. de Peppas y
Korsenmeyer (Ley de
Potencia)
Mt / M0 = ktn
% Q = 100 [1 e(t-to/)]
% Q = k0 . t
Velocidad de liberacin
constante; sistemas erodibles con
rea superficial constante y
sistemas con membranas que
controlan la difusin, con
gradiente de concentracin
constante sobre la membrana.
Weibull
Orden cero
77
Kobservada
Gentamicina
3,1
Eritromicina
8,2
Amoxicilina
2,6
78
APLICACIONES
FIGURA 12.
Un parmetro de gran influencia en la liberacin es la funcionalizacin del material. Si la matriz de silica de SBA15 hexagonal, se funcionaliza con cadenas de C8 o con C18, se producen modificaciones en el
comportamiento del frmaco. Esto, lo podemos apreciar en la Figura 13,
donde se representan grficamente las curvas de liberacin de la eritromicina en el material funcionalizado y sin funcionalizar. Se puede observar en ella que se consigue una mayor retencin en el frmaco cuando se emplea el material funcionalizado, en especial con cadenas de C18
y con acetonitrilo como disolvente en el proceso de adsorcin de la
eritromicina. Lo mismo ocurre cuando utilizamos materiales mesoporosos cbicos, como el Ia3d, segn observamos en la Figura 14.
Adems, si comparamos dos materiales mesoporosos cbicos, como
el propio Ia3d y el MCM48, se observa una ms rpida liberacin en el
Ia3d, ambos sin funcionalizar (Figura 14) (11). El MCM48 tiene un
dimetro de poro de 3,6 nm, mientras que el del Ia3d es mayor (5,7 nm).
Por tanto, el tamao de poro influye en la liberacin, siendo ms rpida
en el de mayor poro.
79
FIGURA 13. Representacin grfica de la liberacin de Eritromicina en SBA15, sin funcionalizar y funcionalizado con cadenas de C18, adsorbido en T = Tolueno y ACE =
Acetonitrilo.
80
APLICACIONES
FIGURA 15.
kH
n 1+
2
100
APLICACIONES
83
III.
1.
INTRODUCCIN
MATRICES
2.
VIDRIOS BIOACTIVOS
Los vidrios bioactivos son buenos candidatos para fabricar biomateriales debido a su excelente biocompatibilidad (16-19), bioactividad
(20-39), elevada porosidad en funcin del mtodo de sntesis utilizado
(40-41), y su capacidad de reabsorcin parcial degradndose en productos tambin biocompatibles (42), siendo tanto osteoconductivos como
osteoinductivos (14, 39, 43). Sus aplicaciones clnicas son muy variadas
y pueden utilizarse como relleno de defectos seos (44), en reparacin
del hueso de odo medio (45), en crestas ilacas artificiales, para sustitucin de vrtebras, en reconstruccin de defectos periodontales (46) o
para aumentar el reborde alveolar (47).
Los vidrios son slidos con un elevadsimo desorden estructural o,
mejor an, lquidos con una viscosidad muy elevada. El mtodo tradicional de obtencin de vidrios es la fusin de una mezcla de componentes entre los que debe estar un formador de red, seguido de un enfriamiento rpido del fundido. El silicio es un candidato esplndido como
formador de red, ya que tiende a formar cadenas Si-O-Si. La estructura
de los vidrios de silicato est formada por tetraedros [SiO4] unidos por
sus vrtices a travs de oxgeno (Figura 1).
FIGURA 1. Representacin bidimensional de (a) red cristalina de SiO2, (b) red de SiO2
vtrea, y (c) red de slice con modificadores de red. En los tres casos el cuarto tomo de
oxgeno de cada tetraedro [SiO] se encuentra situado en un plano superior o inferior. En
(d) puede observarse, en detalle, los distintos constituyentes de un vidrio con modificadores de red.
(
Ca,
oxgeno puente,
oxgeno no puente,
Si).
La slice cristalina, por el hecho de ser cristalina, tiene una estructura ordenada y est formada exclusivamente por silicio y oxgeno. Sin
embargo, los vidrios puede incluir distintos cationes, conocidos como
87
FIGURA 2.
88
MATRICES
Los vidrios bioactivos obtenidos por este mtodo tienen claras ventajas respecto a los de fusin. No olvidemos que son vidrios para fabricar
implantes, por tanto, controlar la pureza es muy importante. Sin duda, este
mtodo logra controlar mucho ms la pureza del vidrio final, sin incluir
impurezas no deseadas, punto de muy difcil solucin en los vidrios obtenidos por fusin. A su vez, se logra una mezcla muy homognea, difcil
de obtener en el caso del fundido, lo que facilita un vidrio con un reparto
de componentes mucho ms homogneo. Adems al utilizar como punto
de partida un sol y no utilizar elevadas temperaturas, se consiguen obtener unas propiedades texturales excepcionales en cuanto a elevadas superficies especficas y grandes porosidades (14, 39) (Figura 3).
FIGURA 3.
sol-gel.
Otras ventajas de este mtodo son poder fabricar vidrios con composiciones mucho ms sencillas, incluso slo bifsicas (39) al no ser
necesario incluir modificadores de red con el solo objetivo de disminuir
la temperatura de fusin, como era el caso de Na2O, o permitir realizar
el proceso a bajas temperaturas.
La investigacin en vidrios de fusin se ha dirigido, principalmente,
a dos actividades: una, reforzar las propiedades mecnicas sin perder la
89
bioactividad, lo que se ha abordado, generalmente, preparando vitrocermicas y, otra, estudiar la influencia de la composicin. En la actualidad, vidrios y vitrocermicas bioactivos se estn utilizando clnicamente
con marcas registradas.
El incremento de bioactividad de los vidrios sol-gel se puede explicar teniendo en cuenta que las propiedades texturales del material, rea
superficial, volumen de poro y distribucin de tamao de poro tienen
gran influencia en su reactividad. El comportamiento de la superficie de
las biocermicas es un factor clave en la respuesta del implante. Por eso,
su caracterizacin es imprescindible. Cuanto mayor sea la superficie
especfica y la porosidad, mayor ser su reactividad y, por tanto, tendr
una cintica ms rpida en la respuesta. Por otro lado, las clulas tienen
claras preferencias por la forma de la superficie y su terminacin, lisa
o rugosa. Se ha puesto de manifiesto que la superficie especfica y
porosidad elevadas de los vidrios sol-gel tienen una marcada influencia
en la cintica de formacin de hidroxicarbonatoapatita (26, 27, 28). La
mayor reactividad de los vidrios sol-gel frente a los de fusin se pone
de manifiesto al comprobar que vidrios sol-gel con contenidos en SiO2
del orden del 90% son bioactivos, mientras que con esa composicin un
vidrio de fusin sera muy estable y no bioactivo (23).
Los vidrios bioactivos reaccionan con los fluidos y, como producto
de la reaccin, se forma carbonatohidroxiapatita. Este tipo de ensayos se
puede realizar en muy diversos fluidos, pero de cara a las aplicaciones
que se buscan, una buena eleccin es utilizar un fluido fisiolgico simulado, que tenga los mismo iones y en concentraciones similares a las del
plasma humano (48). El ensayo in vitro se puede llevar a cabo tanto en
sistema esttico como en sistema dinmico para reproducir mejor las
condiciones en las que se encontrar el vidrio cuando se ensaye in vivo
(29, 31). La Figura 4 muestra un esquema de ambos dispositivos. En
cualquier caso el inters de estos materiales, que son slidos amorfos
muy reactivos con composiciones plenamente compatibles con el cuerpo
humano, es que el producto obtenido tras la reaccin entre ellos y los
fluidos fisiolgicos sea una nanoapatita carbonatada y deficiente en
calcio equivalente a las apatitas biolgicas.
90
MATRICES
FIGURA 4. Protocolos esttico y dinmico. En este ltimo se hace circular el suero con
una bomba peristltica. En la figura se incluye la composicin y concentraciones de
suero fisiolgico simulado (SBF).
FIGURA 5. Esquema de las tcnicas de caracterizacin tiles para evaluar la bioactividad de los vidrios.
91
Una vez formada la capa de carbonatohidroxiapatita sobre la superficie del vidrio se procede a su caracterizacin por las tcnicas de superficie adecuadas al problema (14, 39). As, la informacin que suministra la incidencia rasante de difraccin de RX (Figura 6) permite seguir
la evolucin de la capa que se est formando. En efecto, al cabo de tres
das el perfil de difraccin es muy similar al del hueso, siendo ms
evidente a tiempos mayores.
MATRICES
FIGURA 8. Capa formada sobre el vidrio bioactivo. El anlisis por espectroscopia EDS
confirma su composicin en calcio y fsforo.
94
MATRICES
3.
Silicio - Propiedades
Propiedad
Biocompatibilidad
Biodegradabilidad
El silicio nanoestructurado se degrada sin aparente toxicidad in vivo. Aplicable en fabricacin de materiales
implantables.
Estabilidad cristalina
Micromecanizabilidad
Pureza
El silicio para aplicaciones electrnicas tiene una pureza que sera la envidia de casi todos los frmacos
(99,99999%)
Luminiscencia
Absorcin de luz
Semiconductividad
MATRICES
MATRICES
En la bsqueda de un mtodo para la obtencin de implantes bioactivos que, a su vez, funcionen temporalmente como sistemas de liberacin controlada de antibiticos, dos buenos candidatos son el vidrio
99
FIGURA 10.
micina.
MATRICES
FIGURA 11. Esquema del proceso de obtencin de una pieza de vidrio que incluye gentamicina distribuida de forma homognea.
FIGURA 12. a) Esquema de un defecto seo antes y despus de la insercin del implante;
b) Radiografas obtenidas de fmur de conejo despus de 1, 4, 8 y 12 semanas posteriores
al implante quirrgico; c) Radiografa del perfil del implante y de la zona perifrica
transcurridas 12 semanas despus de la implantacin.
FIGURA 13. Corte histolgico de la zona del implante al cabo de una semana en la
regin prxima al hueso trabecular (a). Corte histolgico en la zona del implante al cabo
de una semana en la regin prxima a la mdula sea trabecular.
102
MATRICES
FIGURA 14. Corte histolgico de la zona del implante al cabo de cuatro semanas de
implantacin.
FIGURA 15. Corte histolgico de la zona del implante al cabo de ocho semanas de
implantacin.
103
En la Figura 16 se pueden observar los niveles de gentamicina detectados en diversos rganos, as como en el hueso distal y proximal al rea
de implantacin frente al tiempo de implantacin. Los niveles locales
de gentamicina detectados en tejido seo son superiores a la concentracin mnima inhibitoria (CMI) para la gentamicina y son suficientemente
efectivos ya que se consideran txicos para la mayor parte de microorganismos resistentes. A su vez, se produce un descenso progresivo de los
valores de gentamicina en tejido seo a lo largo del tiempo, pero en todo
momento se mantienen por encima de la CMI hasta el final del ensayo, lo
que proporciona un rea local suficientemente grande como para impedir
que crezcan microorganismos sensibles al antibitico.
FIGURA 16. Esquema de las secciones del hueso (distal y proximal) obtenidas despus de
la implantacin (a). Representacin de los niveles de gentamicina encontradas en diferentes rganos en funcin del tiempo de implantacin (b).
MATRICES
CONCLUSIONES
Es posible fabricar con xito piezas para implantar formadas con vidrio sol-gel y antibiticos. Estas piezas presentan una excelente biocompatibilidad con una respuesta inflamatoria muy baja, osteointegracin
completa con aposicin directa del hueso neoformado, ausencia de tejido
fibroso alrededor del implante y fomento de la formacin de hueso a medida que el implante se reabsorbe. Simultneamente, previenen y/o atacan
posibles infecciones por efecto de la liberacin controlada del antibitico.
Se pueden considerar estos implantes como un nuevo sistema para
la liberacin local de gentamicina y, al mismo tiempo, como un material
capaz de promover la formacin de nuevo hueso.
BIBLIOGRAFA
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(18)
(19)
106
MATRICES
(20)
(21)
(22)
(23)
(24)
(25)
(26)
(27)
(28)
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107
(37)
(38)
(39)
(40)
(41)
(42)
(43)
(44)
(45)
(46)
(47)
(48)
(49)
(50)
(51)
(52)
(53)
108
MATRICES
(54)
(55)
(56)
(57)
(58)
(59)
(60)
109
1.
FIGURA 1.
El desarrollo de los CPC abri grandes expectativas, ya que se planteaba la posibilidad de utilizar un material moldeable, que poda adaptarse perfectamente a la cavidad donde deba implantarse, y que por
tanto presentaba un ptimo contacto entre el biomaterial y el tejido seo, necesario para estimular el crecimiento seo sobre el material [2, 3]. A partir de ese momento se desarrollaron otras formulaciones
de CPC [4-11]. En general, las distintas formulaciones de cementos de
fosfatos de calcio surgen de la combinacin de diversos ortofosfatos
de calcio con distintos grados de acidez o basicidad. En la Tabla 1 se
recogen las sales clcicas del cido ortofosfrico, que pueden ser utilizadas como reactivos en los CPC. Los primeros seis compuestos se
obtienen por precipitacin a baja temperatura en sistemas acuosos. Los
dems se obtienen solamente a alta temperatura.
112
LIBERACIN
TABLA 1.
Ca/P
Compuesto
Simbolo
Frmula
0.5
Fosfato monoclcico
monohidratado
MCPM
Ca(H2PO4)2.H2O
1.0
Fosfato diclcico
DCP
CaHPO4
1.0
Fosfato diclcico
dihidratado
DCPD
CaHPO4.2H2O
1.33
Fosfato octaclcico
OCP
Ca8(HPO4)2(PO4)4.5H2O
1.5-1.67
Hidroxiapatita
precipitada
PHA
Ca10-x(HPO4)x(PO4)6-x(OH)2-x
Fosfato de calcio
amorfo
ACP
Hidroxiapatita
sinterizada
SHA
Ca10(PO4)6(OH)2
0.5
Fosfato monoclcico
MCP
Ca(H2PO4)2
1.5
Fosfato triclcico
-TCP
-Ca3(PO4)2
1.5
Fosfato triclcico
-TCP
-Ca3(PO4)2
1.67
Hidroxiapatita
sinterizada
SHA
Ca10(PO4)6(OH)2
1.67
Oxiapatita
OXA
Ca10(PO4)6O
1.69
Apatita carbonatada
CAP
Ca8.8(HPO4)0.7(PO4)4.5(CO3)0.7(OH)1.3
2.0
Fosfato tetraclcico
TetCP
Ca4(PO4)2O
1.35-1.5
1.67
Componentes
Producto final
Referencia
Hidroxiapatita
[4]
Fosfato triclcico ,
Carbonato clcico
Fosfato monoclcico
monohidratado
Hidroxiapatita
carbonatada
[5]
Fosfato tetraclcico
Fosfato diclcico
Hidroxiapatita
[6]
Fosfato triclcico
Fosfato tetraclcico
Fosfato monoclcico
monohidratado
Hidroxiapatita
[7]
Fosfato triclcico
Fosfato diclcico
Carbonato clcico
Hidroxiapatita precipitada
Hidroxiapatita
carbonatada
[8]
Fosfato triclcico
Fosfato tetraclcico
Fosfato diclcico dihidratado
Hidroxiapatita
[9]
Fosfato triclcico
Fosfato monoclcico
monohidratado
Fosfato diclcico
dihidratado
[10]
114
LIBERACIN
Las propiedades de fraguado y endurecimiento de un cemento pueden ajustarse modificando distintas variables de procesado, como la composicin qumica de los reactivos, el tamao de partcula, la adicin de
semillas, etc. [12-15]. Esto hace de los cementos materiales muy verstiles, que se pueden adaptar a distintos requisitos clnicos para diversas
aplicaciones.
Diversos estudios llevados a cabo con este tipo de cementos han
puesto de manifiesto que se trata de materiales extremadamente biocompatibles, osteoconductores y que estimulan la regeneracin sea [16-20].
Los cementos apatticos se reabsorben mayoritariamente por procesos
de reabsorcin activa, mediados por la actividad celular. Estos procesos se basan en que los osteoclastos van degradando el material por
capas a partir de la interfaz hueso-cemento desde el exterior hacia el
interior. Sin embargo, algunos estudios han puesto de manifiesto que la
velocidad de reabsorcin de los cementos apatticos es excesivamente
lenta. En parte, esto es debido a que los CPC convencionales, aunque
son microporosos despus del fraguado, no tienen macroporosidad en el
rango en el que se estimula el crecimiento seo, y por tanto no permiten
el crecimiento del hueso hacia el interior del material ni su reabsorcin desde dentro. Esto dificulta su degradacin y su consiguiente transformacin en tejido seo en un periodo de tiempo adecuado. En este
sentido, una de las estrategias que se plantean en la actualidad para
aumentar la capacidad de reabsorcin de los CPC se dirige a la obtencin de CPC macroporosos, manteniendo simultneamente las caractersticas de inyectabilidad y capacidad de autofraguado [21, 22].
El desarrollo de materiales de tipo cemento, en especial para tratamientos de defectos seos, lleva asociadas diversas ventajas importantes
115
116
a)
b)
c)
d)
La reaccin de fraguado es una reaccin de disolucin y precipitacin a baja temperatura. El producto final de la reaccin es,
en muchos casos, una hidroxiapatita precipitada, qumica y estructuralmente muy similar a las apatitas biolgicas y con una
superfcie especfica mucho ms elevada que la de una hidroxiapatita cermica, y con una elevada microporosidad. Todos estos
factores contribuyen a que los cementos tengan una mayor reactividad que la hidroxiapatita cermica.
e)
Por ltimo, un aspecto especialmente importante para la temtica que nos ocupa en este libro: el hecho de que la reaccin de
fraguado de los cementos tenga lugar a baja temperatura permite la incorporacin de distintos tipos de frmacos susceptibles
de degradarse trmicamente, desde antibiticos hasta frmacos
antiinflamatorios, o factores de crecimiento para estimular determinadas respuestas biolgicas. Este aspecto proporciona un
gran potencial a este tipo de materiales como vehculos para la
dispensacin controlada de frmacos y su vectorizacin hacia
tejidos especficos, y en ellos se centrar el resto del presente
captulo.
LIBERACIN
2.
2.
b)
c)
LIBERACIN
(2)
Donde:
Mt es la cantidad de frmaco liberado en el tiempo t.
A es el rea superficial del dispositivo.
D es el coeficiente de difusin del frmaco en la matriz.
Cs es la solubilidad del frmaco en la matriz.
C0 es la concentracin inicial del frmaco en la matriz.
119
Def =
D '
(3)
donde:
Def es el coeficiente de difusin efectiva.
D es el coeficiente de difusin de los cristales que forman el cemento como tal.
es la porosidad del cemento.
es la tortuosidad del cemento.
Sustituyendo (3) en (1) queda:
Mt = A
D '
CS (2C0 CS )t
dM t A D ' CS (2C0 CS )
=
2
t
dt
120
(4)
(5)
LIBERACIN
de liberacin
del frmaco incorporado. As por ejemplo, Otsuka [30]
mostr que la porosidad de un cemento de hidroxiapatita carbonatada
1
aumentaba durante
la liberacin de indometacina, atribuyndolo a la de2
dM t A 2gradacin
D ' CS C0 del
cemento.
En este
=
(7) caso, la mayor reabsorcin del cemento
dt
2 se justific
t
por el hecho de que la hidroxiapatita carbonatada, obtenida al
aadir a los reactivos del cemento (TTCP y DCPD) distintas cantidades
de bicarbonato de sodio (NaHCO3), es ms reabsorbible que la hidroxiapatita estequiomtrica, utilizada en estudios previos. La reabsorcin de la
hidroxiapatita carbonatada con el tiempo produjo un aumento de porosidad, que se tradujo en un aumento de la velocidad de liberacin del frmaco. En resumen, al no mantenerse constante la porosidad, la cintica
de liberacin del frmaco no cumpla la ecuacin de Higuchi, y deja de
ser cierto que el nico mecanismo controlador de la liberacin del frmaco sea la difusin del mismo en la matriz de CPC. En cualquier caso, hay
que tener en cuenta que la mayor o menor velocidad de reabsorcin de la
matriz de CPC durante la liberacin del frmaco depende de diversos
factores, como la composicin qumica del cemento, su microestructura y
121
Dentro del mbito de la aplicacin de los CPC a la liberacin controlada de frmacos, los antibiticos son los medicamentos que se han estudiado con mayor profusin, debido a su aplicacin tanto en el tratamiento
de infecciones seas como a nivel profilctico. Es sabido que el tratamiento de infecciones eas puede alargarse fcilmente hasta ms de un ao,
debido a la escasa accesibilidad del lugar de infeccin para antibiticos
administrados de forma sistmica. Por otra parte, uno de los factores clave para el xito de las intervenciones quirrgicas encaminadas a la implantacin de una prtesis o de un material osteoconductor es la prevencin de infecciones bacterianas. De hecho, es sabido que la contaminacin
de heridas, o las infecciones postoperatorias que pueden seguir a la reparacin de fracturas, la colocacin de prtesis articulares o la ciruga de la
columna es un serio problema. Por este motivo es frecuente la administracin con carcter preventivo de antibiticos por va sistmica, tanto por
va oral como intravenosa. La utilizacin de CPC, que pueden incorporar
distintos antibiticos, puede ser til en este sentido.
Una de las vas por las cuales actualmente se hace frente a las
infecciones en el tejido seo es la implantacin de esferas de polimetacrilato de metilo (PMMA) cargadas con sulfato de gentamicina en el
lugar de infeccin. Sin embargo, estas esferas no son reabsorbibles y
122
LIBERACIN
Antibitico
Tipo de estudio
Referencia
TTCP, DCP
Flomoxef sodio
In vitro
[33]
-TCP, MCPM
Gentamicina
In vitro
[26, 27]
TTCP, -TCP
Tetraciclina
In vitro
[34]
Flomoxef sodio
In vitro
[35]
No especificado
Tobramicina
In vitro
[36]
TTCP, DCP
Gentamicina
Amikacina
In vitro
[37]
Ceftiofur
ACP, DCPD
Gentamicina
In vitro
[38]
TTCP, DCPD
Vancomicina
In vitro
[39]
In vivo
TTCP, DCP
Gentamicina
In vivo
[40]
Albecacin sulfato
In vivo
[41]
123
b)
Estudios in vitro
La reaccin de fraguado del cemento puede verse afectada o modificada por la introduccin del frmaco en los reactivos que constituyen
su fase lquida o en polvo, y como consecuencia modificar sus propiedades fsicas y mecnicas, como corroboran diversos estudios [26, 27,
33, 34, 36]. En general, en los cementos de tipo apattico, la incorporacin del antibitico produce un aumento del tiempo de fraguado y una
reduccin de la resistencia a la compresin [33, 34, 36]. Takechi y cols.
estudiaron especficamente el efecto de la incorporacin de flomoxef
sodium en distintas concentraciones (hasta un mximo de un 10%) en la
fase slida de un cemento formado por TTCP y DCPA [33]. Al ser muy
soluble, se puede considerar que el antibitico se disolva rpidamente
en la fase lquida del cemento. Observaron que la resistencia mecnica
del cemento se reduca considerablemente al aumentar la cantidad de
antibitico aadido. Esta reduccin fue atribuida a un aumento de la
porosidad y a cierta inhibicin de la reaccin de fraguado del cemento,
observndose la presencia de cierta cantidad de reactivos al aumentar la
cantidad de antibitico incorporado. La liberacin del frmaco segua la
cintica caracterstica de este tipo de materiales, descrita en el captulo
anterior. La cantidad total de antibitico liberada despus de 72 horas
era entre el 55 y el 60%.
Ratier y cols. [34] atribuyeron la reduccin de propiedades mecnicas observadas en un cemento de TTCP y -TCP por la adicin de
tetraciclina a la capacidad de quelacin de tomos de calcio del cemento
por parte de la tetraciclina. Una va que evit parcialmente este proble124
LIBERACIN
ma es la introduccin del antibitico previamente complejado con calcio, con el fin de limitar las interacciones del antibitico con el cemento.
Esto permiti aumentar la cantidad de antibitico introducido sin perjudicar seriamente la reaccin de fraguado ni las propiedades mecnicas
del cemento.
Hamanashi y cols. [39] estudiaron la incorporacin de vancomicina
en un cemento formado por TTCP y DCPD, con posible aplicacin para
tratar osteomielitis causada por MRSA. En los estudios in vitro observaron que la vancomicina se liberaba de forma efectiva durante dos
semanas en el caso de cementos que contenan un 1% de vancomicina,
y durante nueve semanas para cementos que contenan un 5% de vancomincina, obtenindose niveles superiores a las concentraciones efectivas contra distintos tipos de MRSA. La velocidad de liberacin dependa de la cristalinidad del cemento, y el antibitico se liber en un 95%
despus de los tiempos mencionados.
Bohner y cols. llevaron a cabo un estudio de la incorporacin de
sulfato de gentamicina tanto en polvo como en solucin, en un cemento
de DCPD, mucho ms reabsorbible que los cementos apatticos [26].
Los reactivos en polvo utilizados fueron -TCP y MCPM. En este caso,
la adicin del antibitico tambin modific las propiedades reolgicas y
mecnicas del cemento, pero en sentido contrario al reportado por Takechi y cols., produciendo un aumento del tiempo de fraguado del cemento, que era inicialmente excesivamente corto, y un aumento de la resistencia mecnica, que se atribuy a la presencia de iones sulfato en el
antibitico. La liberacin del frmaco fue muy rpida en las primeras
horas, siguiendo la ley de Higuchi, siendo proporcional a t1/2 hasta un
50% de antibitico liberado, tendiendo a estabilizarse a partir de este
valor. El antibitico se liber totalmente en unos siete das. No se detectaron diferencias significativas si el antibitico se incorporaba en
polvo o en la solucin, probablemente debido a la elevada solubilidad
del polvo, que haca que se disolviera inmediatamente, pasando en cualquier caso a la solucin. Se observ el efecto de la porosidad y del
tamao de poro sobre la cintica de la liberacin del frmaco, tal como
predicen las ecuaciones (6) y (7), explicadas en el captulo precedente.
Un aspecto interesante a tener en cuenta es la velocidad de liberacin del antibitico en los CPC, en comparacin con las perlas de
PMMA utilizadas frecuentemente como vehculo para la dispensacin
125
local de antibitico. En un estudio comparativo, Ethell analiz la cintica de liberacin de tres antibiticos distintos, gentamicina, amikacina
y ceftiofur, utilizando como vehculo o bien un CPC comercial basado
en TTCP y DCP, o bien esferas de PMMA [37]. El resultado fue que la
cantidad total de antibitico liberado al cabo de treinta das fue significativamente mayor para el CPC que para las esferas de PMMA. Para la
gentamicina y la amikacina, en ambos materiales la concentracin liberada superaba la dosis crtica para tener efectos bactericidas durante
treinta das. En cambio, la liberacin de ceftiofur se mantuvo en niveles
adecuados solamente durante siete das, tanto para el CPC como para las
esferas de PMMA, siendo por tanto inadecuado cuando es necesario
prolongar el potencial bactericida a largo trmino.
En los casos en los que la liberacin del antibitico se considera excesivamente rpida para algunas aplicaciones, una posible estrategia es la
incorporacin de algn aditivo polimrico que retrase la liberacin del
frmaco. En este sentido, se han llevado a cabo algunos estudios encaminados a la formacin de un gel en los poros del cemento, que incorpora el
antibitico. Takechi y cols. incorporaron alginato de sodio o quitosano en
el cemento [33, 35], adems del antibitico. Hay que sealar que el quitosano es un compuesto del cual se conocen efectos positivos en cuanto a
la formacin sea, al estimular la osteoconductividad, la osificacin endocondral y la osteoinduccin membranosa. Con los dos aditivos se consigui reducir ligeramente la liberacin en las etapas iniciales, y mantener la liberacin a niveles ligeramente superiores a los obtenidos con el
CPC convencional con el paso del tiempo. Bohner y cols. [27] aplicaron
una estrategia similar, adicionando cido poliacrlico (PAA) a un cemento de DCPD, con resultados similares, consiguiendo prolongar en el tiempo la liberacin de gentamicina, especialmente para PAA con elevado
peso molecular. La cintica de liberacin del frmaco estara en una primera etapa, controlada por difusin a travs de los poros del cemento
(proporcional a t1/2), para pasar a estar controlada en una segunda etapa
por la disociacin del sulfato de gentamicina del complejo formado con
el PAA, siguiendo una cintica de primer orden. La cantidad de gentamicina liberada oscil entre el 58 y el 100 dependiendo de la cantidad de
PAA aadido al cemento. Para elevados pesos moleculares se consigui
una liberacin constante de PAA durante ocho das, liberndose prcticamente el 100% de antibitico.
126
LIBERACIN
b)
Estudios in vivo
liclico [47]. Como es sabido, el cido saliclico tiene propiedades analgsicas y antiinflamatorias, y que adems tiene capacidad de complejar
calcio. Los resultados obtenidos mostraron que la adicin de dicho compuesto produca cambios muy importantes tanto en las propiedades reolgicas como en las propiedades mecnicas del mismo. Por una parte se
detect un aumento considerable de la inyectabilidad. Paralelamente, la
adicin del frmaco provoc una reduccin de la velocidad de reaccin
del cemento y un aumento de la resistencia mecnica final, de un 25%
a compresin y un 80% a flexin, que se atribuy a la reduccin de la
porosidad y del tamao de los cristales precipitados. Otsuka y cols.
llevaron a cabo un estudio de la cintica de liberacin in vitro del mismo
tipo de frmaco, la aspirina, en un cemento formado por TTCP, DCP y
HA. La velocidad de liberacin del frmaco aument al aumentar la
porosidad del cemento, que se modific variando la relacin lquido/
polvo empleada. Los resultados obtenidos indicaron que la cintica de
liberacin segua la ley de Fick modificada, estando controlada por la
difusin del frmaco en los poros del cemento.
TABLA 4.
Formulacin
del cemento
Medicamento
Grupo
Tipo de
estudio
Referencias
TTCP, DCPD, HA
Indometacina
Antiinflamatorios
no esteroideos
In vitro
In vivo
TTCP, DCP
Mercatopurina
Anticancergeno
In vitro
[28, 44]
TTCP, DCP
Estradiol
Hormona
In vitro
[45]
In vivo
No especificado
Nifedipino
Antagonista
del calcio
In vitro
[46]
-TCP
Metacrilamida
derivada
del cido
aminosaliclico
[47]
TTCP, DCP, HA
Aspirina
cido saliclico
In vitro
[48]
De entre todos los frmacos mencionados en la Tabla 4, probablemente el que se ha estudiado con ms detalle es la indometacina. Otsuka
y cols. llevaron a cabo diversos estudios sobre la incorporacin de in128
LIBERACIN
clulas tumorales. Otsuka et al. estudiaron su incorporacin a un cemento de TTCP y DCPD, observando que no se produca ninguna interaccin con la reaccin de fraguado del cemento [28, 44]. En cuanto a la
liberacin del frmaco in vitro, llegaron a conclusiones similares a las
presentadas para la indometacina, sealando adems una clara dependencia de la velocidad de liberacin con la porosidad del cemento, que
se puede controlar fcilmente modificando la relacin lquido/polvo de
la pasta del mismo [44].
El estradiol es una hormona sexual femenina del grupo de los estrgenos, que se puede utilizar para el tratamiento de sntomas provocados
por el dficit de estrgenos en la menopausia, como la prdida de masa
sea. Otsuka y cols. estudiaron la velocidad de liberacin de dicha hormona incorporada en un CPC, tanto in vitro, en SBF como in vivo,
implantando el cemento de forma subcutnea en ratas [45]. Un resultado
interesante fue que la velocidad de liberacin de estradiol fue inversamente proporcional a la concentracin de calcio del medio, en los estudios in vitro. Anlogamente, la liberacin del frmaco tambin fue mayor
en ratas con dficit de vitamina D y bajo nivel de calcio en el plasma,
que en ratas sanas, sugiriendo as un mecanismo autorregulador de la
liberacin del frmaco.
6.
6.
6.
Los factores de crecimiento son un gran grupo de polipptidos capaces de transmitir seales que afectan a la actividad celular [50]. Entre
estos factores, tiene especial inters para la regeneracin sea la superfamilia de los factores de crecimiento transformantes (TGF-SF), que
incluyen los factores de crecimiento transformantes 1, 2 y 3 (TGF1, 2 y 3), y las protenas morfogenticas seas (BMP), entre otras
protenas. Es conocido que estos factores de crecimiento pueden actuar
como agentes activadores de las complejas cascadas de fenmenos biolgicos que llevan a la formacin sea, acelerando el crecimiento seo.
En los ltimos aos, las tcnicas de recombinacin han hecho posible la produccin industrial de factores de crecimiento humanos en
130
LIBERACIN
LIBERACIN
caso del cemento con 6,28 g de BMP-2 se formaba hueso muy rpidamente, llegndose a la unin de la fractura sea al cabo de tres semanas. El cemento se reabsorba, excepto los grnulos de -TCP, y era
reemplazado por tejido seo en un plazo de seis semanas, recuperndose
la resistencia a torsin en un 99% a las nueve semanas. En el caso del
cemento con 1,26 g de rhBMP-2 solamente un 40% de las fracturas
llegaban a consolidar, y la resistencia a torsin era del 41% a las nueve
semanas. Ninguna fractura consolid en el caso del cemento sin rhBMP2. En conclusin, el cemento estudiado result ser un sustrato adecuado
para la dispensacin de la rhBMP-2, siendo adems reemplazado por
nuevo hueso al ser un material rpidamente reabsorbible. Resultados
similares fueron obtenidos por Kamegai y cols. [61].
Otras protenas que tienen una funcin relevante en el tejido seo y
que se han incorporado en CPC con el fin de buscar una mejor respuesta, tanto mecnica como biolgica, son el colgeno I y la osteocalcina [62]. La osteocalcina es la protena no colgena ms abundante en el
tejido seo, y juega un papel importante en los procesos de biomineralizacin. Los resultados obtenidos mostraron que la adicin de osteocalcina modific la microestructura del cemento, reduciendo el tamao de
los cristales de apatita precipitados durante el fraguado del mismo. Por
otra parte, la presencia de osteocalcina modific la respuesta celular
in vitro de clulas procedentes de osteosarcoma (SAOS-2), mejorando
la adhesin celular inicial. No se observaron efectos significativos en la
proliferacin celular.
Tambin el efecto de la incorporacin de insulina y albmina de
origen bovino en CPC basados en TTCP y DCP fue estudiado por Otsuka el al. [63]. Los resultados obtenidos mostraron que la presencia de
dichos frmacos de naturaleza polipeptdica no interfera en la reaccin
de fraguado del cemento. Su liberacin en una solucin tampn de fosfato se prolong durante ms de tres semanas, siguiendo la ecuacin de
Higuchi.
7.
CONCLUSIONES
como vehculos para la liberacin controlada y la vectorizacin de frmacos. Las propiedades fsico-qumicas de estos materiales, as como la
buena respuesta biolgica que provocan en el tejido seo les convierten
en buenos candidatos para su utilizacin como materiales portadores de
frmacos para ser liberados a nivel local, especialmente en patologas
del sistema msculo-esqueltico. Por otra parte, su capacidad de autofraguado a baja temperatura permite la incorporacin de todo tipo de
frmacos y molculas biolgicamente activas, sin problemas de desnaturalizacin o prdida de actividad. Por ltimo, su potencial inyectabilidad hace que estos materiales puedan ser utilizados en el marco de las
nuevas tecnologas de ciruga mnimamente invasiva, facilitando el tratamiento incluso en zonas de difcil acceso, de forma lo menos cruenta
posible para el paciente. Todas las caractersticas mencionadas, junto
con los resultados esperanzadores presentados a lo largo del captulo,
confieren a esta familia de materiales un gran potencial en el mbito de
la liberacin controlada de frmacos y de la regeneracin sea.
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GLOSARIO
BMP
protena morfogentica
CPC
DCP
fosfato diclcico
DCPD
HA
hidroxiapatita
MCPM
MRSA
PMMA
polimetacrilato de metilo
139
rh TGF-1
rh BMP-2
SBF
-TCP
-TCP
TTCP
fosfato tetraclcico
TGF
TGF-SF
140
En los ltimos aos se han desarrollado muchos sistemas de liberacin controlada de frmacos y su utilizacin ha aumentado, debido a las
ventajas que presentan frente a los mtodos tradicionales de dosificacin. Dentro de las posibles ventajas destacan: la administracin de la
dosis teraputica se realiza de forma controlada manteniendo la velocidad de liberacin deseada; la concentracin de la droga se mantiene en
el cuerpo dentro de un nivel teraputico ptimo durante todo el tratamiento; se minimiza la frecuencia de la droga a suministrar; se maximiza la relacin dosis-eficacia y se reducen los efectos colaterales.
En el caso particular del tejido seo, los sistemas de liberacin
controlada de frmacos resultan de gran importancia dado los bajos
niveles de frmaco que se alcanzan por los mtodos convencionales,
debido fundamentalmente a la escasa circulacin sangunea que presenta
el hueso. En este sentido, es necesario suministrar grandes cantidades de
droga por las vas tradicionales para que se alcancen niveles teraputicos en el tejido deseado, lo que provoca un alto riesgo de aparicin de
efectos colaterales. Esto ocurre de manera notable en el caso de la
quimioterapia y radioterapia utilizadas en el tratamiento de tumores, por
lo que la implantacin de sistemas que liberen drogas anticancergenas
y antitumorales en el lugar afectado, en vez de distribuirlo sistmicamente por todo el organismo, disminuira los efectos colaterales. Por
tanto, conseguir liberar el agente activo en la zona a tratar es un tema
de gran inters en la actualidad.
En este captulo se recoge un estudio sobre la utilizacin de matrices
conformadas con sulfato de calcio como sustitutivos seos. Las carac-
(ecuacin 1)
MATRICES
MATRICES
manas). Este autor afirma que las regiones de contorno externo reconstruidas con el sulfato son muy estables, incluso despus de haber sido
reemplazadas por hueso. En este sentido el autor dice: el hueso regenerado ser una rplica exacta del modelo del implante del CaSO4, de
manera que por cada molcula de sulfato de calcio reabsorbida se
genera una molcula de hidroxiapatita en su lugar. De esta forma el
cirujano puede moldear el contorno, tamao y forma del hueso que
l quiera regenerar, pudiendo casi garantizar que el hueso regenerado
ser prcticamente idntico al original.
El mecanismo exacto de sus propiedades osteoconductivas no se
conoce bien, aunque se han intentado dar algunas explicaciones. W. H.
Bell (19) establece que el xito del sulfato de calcio como implante seo
depende parcialmente de la rpida reabsorcin del implante por el husped. Beeson (17) concluye que el Plaster de Pars parece estimular la
osteognesis cuando se implanta en contacto con el hueso o periosteno.
Sidqui y col. (20) demostraron, in vitro, que tanto osteoblastos como
osteoclastos se adhieren al sulfato, ste es reabsorbido por los osteoclastos y forma lagunas de manera similar al hueso natural. Sin embargo,
parece que la teora ms aceptada para explicar la propiedades osteoconductivas del sulfato de calcio se deben a la capacidad del mismo para
proporcionar una fuente de iones inorgnicos que mantengan el crecimiento seo.
Aunque todava existen controversias sobre algunos resultados,
se puede considerar que el sulfato de calcio es un material implantable
biocompatible, no produce reaccin extraa importante cuando se implanta en el organismo, no inhibe el crecimiento seo, y puede ser implantado
en reas infectadas y ayudar a la regeneracin del hueso si periosteno o
hueso estn presentes como fuentes de osteoblastos permitiendo el intercrecimiento de vasos sanguneos y clulas osteognicas (23). En junio de
1996, la FDA (Fundation and Drugs Administration) aprob la utilizacin
de un sulfato de calcio de grado mdico, y en abril de 2004, una segunda
generacin de cementos conteniendo matriz sea desmineralizada.
Las principales aplicaciones de estos cementos de sulfato de calcio
derivan de su capacidad para actuar como relleno seo, como barrera
reabsorbible que limite el crecimiento de tejido blando, y como ligante
para la retencin de otros componentes en el sitio del implante. En la
actualidad, estos cementos de sulfato de calcio se utilizan en implantes
145
146
MATRICES
FIGURA 3.
polvo.
147
La introduccin de HA en la formulacin del cemento permite trabajar con una menor relacin lquido/polvo, con respecto al sulfato de
calcio slo, pudiendo obtenerse piezas con mejores propiedades mecnicas (2). En los cementos de sulfato de calcio puro no fue posible
trabajar con una relacin L/P inferior a 0,5, ya que la pasta se secaba
antes de que el lquido mojara todo el polvo. La presencia de HA hace
que la pasta sea manipulable durante ms tiempo. Esto es, la introduccin de HA modifica las propiedades reolgicas de la pasta. Las pastas
de HA/SCD presentan una viscosidad menor durante ms tiempo, comparada con las pastas constituidas slo por gypsum. Por lo tanto, en
presencia de HA, mayor es el tiempo durante el cual la pasta es inyectable y manejable, lo que representa una clara ventaja para los cirujanos
al tener ms tiempo para trabajar con el cemento y el paciente.
La presencia de HA en un cemento de sulfato de calcio modifica las
propiedades mecnicas del material resultante (28). As, la resistencia a
la compresin de las piezas HA/SCD disminuye al aumentar el contenido en hidroxiapatita, y a medida que aumenta el contenido en lquido,
como consecuencia del aumento de la porosidad del SCD (28).
Estos cementos constituidos de gypsum o gypsum/hidroxiapatita
presentan un diferente comportamiento cuando se introducen en un fluido corporal simulado (SBF), fluido generalmente utilizado en ensayos
de bioactividad in vitro (29). En ambos casos se observa una rpida
liberacin de iones calcio al medio, procedentes del SCD, de manera
que la concentracin de iones calcio aumenta en las primeras horas,
disminuyendo despus de cinco horas en el fluido. Despus de la inmersin de las piezas en SBF, el estudio por distintas tcnicas de caracterizacin muestra la formacin de una capa tipo apatita, similar a las
apatitas biolgicas (25), sobre la superficie de los cementos HA/SCD,
que no se observa en los cementos constituidos slo por gypsum (Figura 4). La formacin de esta capa tipo apatita, sobre los cementos bifsicos, se debe por una parte, a la parcial disolucin del sulfato de calcio
que origina un aumento de la concentracin de iones calcio en el medio,
y por otra, a la presencia de partculas de HA que actan como ncleo
de cristalizacin, facilitando la formacin de dicha capa. Por tanto, los
cementos que contienen HA son ms bioactivos (cintica de formacin
de la capa de apatita ms rpida) que los cementos constituidos slo por
gypsum (3).
148
MATRICES
(ecuacin 2a)
(ecuacin 2b)
MATRICES
das para el SCD, de 7 a 135 das para el sistema SCD/PLLA (tipo I),
o de 14-30 das para el sistema SCD/PLLA (tipo II). Por tanto, la presencia del polmero junto a la tcnica de preparacin del material bifsico permite graduar la reabsorcin del material.
De lo expuesto hasta ahora podemos decir que los cementos de
sulfato de calcio, slo o mezclado con otro componente, parecen satisfacer bastantes requerimientos para ser utilizados como implantes en el
relleno de cavidades seas. Un valor aadido a un implante seo es que
adems se pueda utilizar como sistema de liberacin de sustancias teraputicamente activas.
2.
2.
El empleo de sistemas de liberacin controlada de antibiticos directamente en el tejido seo resulta particularmente importante tanto
para la prevencin de la infeccin local como en el tratamiento de
la osteomielitis crnica, infeccin bacteriana o mictica, que aparece
en las fracturas abiertas y compuestas de los huesos largos donde es
frecuente la destruccin parcial o total de porciones del hueso. En la
ostiomielitis crnica, la presencia de hueso necrtico perjudica la difusin del frmaco administrado va sistmica, de modo que se hace
necesaria una prolongada administracin intravenosa del medicamento (37). La administracin de antibiticos va parenteral no es un
mtodo eficaz para alcanzar altas concentraciones locales del frmaco en el tejido. Dado que el sistema vascular distribuye el antibitico uniformemente a todo el organismo, slo una pequea dosis del
mismo alcanza la zona de infeccin. La mayor parte del antibitico se
elimina generalmente por el rin o hgado, de manera que si se alcanzan altas dosis sistmicas del antibitico, estos rganos pueden
resultar muy daados.
Teniendo en cuenta las desventajas que presenta la administracin
va sistmica de antibiticos, uno de los principales logros sera la administracin directa del antibitico en la zona infectada de manera que
se alcancen altos niveles locales del frmaco en dicha zona mientras se
mantengan niveles sistmicos bajos. Se trata pues de lograr que los
151
antibiticos se liberen en el sitio de la infeccin alcanzndose concentraciones locales mayores que la concentracin mnima inhibitoria (CMI)
sin que se alcancen niveles sistmicos peligrosos. En esta lnea se han
conseguido algunos xitos utilizando una pequea bomba implantable
de frmaco, irrigacin mediante succin o perfusin aislada de una extremidad. Sin embargo, su utilizacin implica muchas dificultades tcnicas y por tanto, su uso no est muy extendido.
En este sentido, resulta de gran inters la utilizacin de un material
implantable que contenga un antibitico que se libere localmente en la
zona de infeccin una vez implantado. En el diseo de un sistema de
liberacin controlada de antibiticos para el tratamiento de infecciones
seas, son vlidos los principios vigentes para los biomateriales de reparacin sea en general, es decir, el mejor material es aquel que se
biodegrade y sea sustituido o integrado por el nuevo tejido seo, una vez
cumplida la funcin para la cual fue diseado.
El sistema biomaterial/frmaco que ms se ha utilizado e investigado para la prevencin y tratamiento de infecciones seas es el cemento
de polimetacrilato de metilo (PMMA) conteniendo gentamicina, emplendose como profilctico en artoplastias de cadera, desde los aos
1970, y para el tratamiento de la ostiomielitis crnica. Sin embargo, el
PMMA es un material inerte y en algunos casos, el paciente debe ser
sometido a una segunda operacin para eliminar este implante (38, 39).
Por ello, la utilizacin de materiales degradables o reabsorbibles es una
buena alternativa.
Como ya se ha comentado a lo largo del captulo, los cementos de
sulfato de calcio se utilizan como biomaterial de relleno de defectos
seos. Es un material barato, fcil de esterilizar, estable, bien tolerado
por el organismo y no induce reaccin extraa. Adems, estos cementos
presentan otra ventaja y es la facilidad de incorporacin del frmaco
durante su elaboracin, su capacidad para ser moldeable, lo que permite
que el defecto se pueda rellenar totalmente y que exista un ntimo contacto entre el hueso y el cemento, permitiendo que el antibitico llegue
directamente al tejido seo. Por tanto, estos cementos presentan excelentes propiedades como matrices portadoras de sustancias teraputicamente activas. De hecho, el sulfato de calcio se ha utilizado in vivo
como matriz transportadora para la liberacin de antibiticos, factores
de crecimiento y protenas morfogenticas.
152
MATRICES
FIGURA 5.
153
La introduccin del frmaco en el cemento puede afectar a su comportamiento reolgico. En este sentido se ha observado que la introduccin de vancomicina acelera el proceso de fraguado (42), la tobramicina
lo retarda (42) mientras que la cefalexina monohidrato no lo modifica (43). Para evitar que el frmaco afectara al proceso de fraguado del
cemento o que se inactivara durante el mismo, otros autores han propuesto la introduccin del frmaco mediante impregnacin, una vez que
el cemento ha endurecido (44, 45).
La velocidad de liberacin del frmaco es una propiedad crtica de
todo sistema que vaya a ser utilizado como sistema de liberacin. En
ensayos in vitro, la caracterizacin de su cintica de liberacin se suele
realizar, generalmente, en soluciones tamponadas de fosfato a pH =
7,4 o en fluido corporal simulado (SBF), y la cuantificacin del frmaco se realiza por mtodos microbiolgicos o espectrofotomtricos.
Asimismo, es importante considerar cmo se va a llevar a cabo el
estudio de liberacin, esto es, si la solucin donde se libera el frmaco
se renueva o no, despus de cada medida. En este sentido, Maclaren
y col. (46) en un estudio in vitro de liberacin de tobramicina de una
matriz de SCD, demuestran que renovando la solucin, ms del 50%
del antibitico se libera en las primeras 24 horas; en caso contrario,
la liberacin del 50% de tobramicina se alcanza a los seis das de
ensayo. Por tanto, el mtodo de muestreo permite evaluar cmo funcionar el sistema de liberacin en los distintos entornos en los que
se pueda encontrar el implante.
Por otra parte, la utilizacin de estos sistemas de liberacin in vivo,
implica la esterilizacin del material. En este sentido, Dacquet y
col. (47) realizaron un estudio de la influencia del proceso de esterilizacin de los cementos, con radiacin , en la liberacin del frmaco.
Los sistemas fueron preparados mezclando SCH con el frmaco, teicoplanina, adicionando una solucin salina como lquido de fraguado. Los
resultados obtenidos muestran que los materiales no esterilizados presentaban una mayor liberacin de frmaco desde la matriz de sulfato.
Similares resultados a stos se observaron al comparar la cintica de
liberacin de frmaco en materiales recin preparados frente a los utilizados seis meses despus de su preparacin. Los autores concluyen
que el proceso de esterilizacin o el almacenamiento del material pudieron originar una parcial destruccin de la molcula de teicoplanina o
154
MATRICES
gentamicina se observa en teicoplanina y ciproflaxina (Figura 6b), mientras que la cintica de liberacin de vancomicina es parecida a la de la
amikacina. Cefalosporinas y amoxicilina sdica, que mostraron la menor estabilidad trmica, presentan una liberacin muy rpida, y tras tres
das de ensayo, su concentracin es inferior a la concentracin teraputica (Figura 6c). En el fusidato de sodio, frmaco menos soluble utilizado, la concentracin de frmaco liberado se mantiene prcticamente
constante durante los 21 das de ensayo, debido posiblemente a la precipitacin del mismo durante la preparacin del cemento (48, 49).
156
MATRICES
col. (51) proponen recubrir el cemento de SCD con un polmero biodegradable, un copolmero de cido polilctico-cido poligliclico.
Los cidos polilctico (PLA) y poligliclico (PGA), cidos poli-hidroxocidos, son polmeros biodegradables ampliamente utilizados en
aplicaciones mdicas. Con objeto de poder adaptar las propiedades de
los materiales basados en PLA o PGA, se han desarrollado sistemas
basados en copolmeros de PGA con PLA, este ltimo un polister de
carcter ms hidroffico. La hidrofobicidad del PLA limita la absorcin
de agua y reduce la velocidad de hidrlisis del esqueleto macromolecular en comparacin con el PGA. La utilizacin de estos copolmeros en
un implante no daa al organismo, ya que sus productos de degradacin
se encuentran presentes fisiolgicamente, y son degradados a agua y
dixido de carbono en el ciclo de Krebs (52, 53).
El recubrimiento SCD/vancomicina con el copolmero PLA/PGA se
lleva a cabo en una cabina de flujo laminar, sumergiendo la matriz base
en una solucin polimrica de los componentes (10% de cido poligliclico-90% de cido D, L, polilctico). Con objeto de estudiar la influencia del espesor del recubrimiento, recubren la matriz con una, dos
o seis capas del copolmero PLA/PGA, lo que conduce a recubrimientos
de 69, 94 y 162 mm de espesor, respectivamente (51).
Los estudios de liberacin in vitro (Figura 7) llevados a cabo en una
solucin tamponada de fosfato a pH = 7.4, muestran que la liberacin
de vancomicina de los cementos no recubiertos es muy rpida y masiva
inicialmente (conocido en la literatura anglosajona como efecto burst)
liberndose un 70% del contenido en frmaco durante el primer da.
Despus de tres semanas, la cantidad de antibitico liberada no alcanza
el 100% debido, segn los autores, a una adsorcin del mismo por el
sulfato de calcio.
En el caso de las matrices recubiertas con polmero, el efecto burst
inicial disminuye notablemente, desapareciendo incluso en el caso de
los recubrimientos de mayor espesor, que presentan una liberacin
prcticamente lineal, esto es, una liberacin sostenida del frmaco durante todo el experimento. Otro efecto originado por el recubrimiento
del implante es la disminucin de la cantidad de frmaco liberado al
final del ensayo, siendo en el caso de los recubrimientos de mayor
espesor, del orden de un 10% de la cantidad inicial. Teniendo en cuenta
158
MATRICES
captulo, la presencia de HA en la formulacin favorece la biocompatibilidad del material y formacin de nuevo hueso. En este estudio el
frmaco elegido fue una cefalexina monohidrato, cefasloporina semisinttica de primera generacin, indicada para el tratamiento de distintas
infecciones seas o dentales. Su estudio demuestra que la introduccin
de dicho frmaco en concentraciones de hasta un 10% en peso, no afecta
al tiempo de fraguado del cemento, ni a sus propiedades reolgicas que
siguen siendo similares a las que presentan los cementos en ausencia del
frmaco. Los resultados obtenidos por espectroscopia infrarroja y calorimetra diferencial de barrido indican que no se produce ninguna interaccin entre el frmaco y la matriz.
Para el estudio de liberacin del frmaco se eligieron cementos de
gypsum (SCD) o HA/gypsum (HA/SCD) de distinta densidad (Tabla I)
dado que la velocidad de liberacin del frmaco de la matriz podra depender de la densidad del material. Los ensayos de liberacin in vitro se
realizaron en una solucin de fluido corporal simulado (SBF) a pH = 7.4.
TABLA I. Muestras estudiadas junto con sus densidades aparentes.
(El contenido en cefalexina es de 1% en todos los casos)
Matriz
relacin L/P
Densidad (g/cc)
SCD1
1.6
0.58
SCD2
0.6
1.16
HA/SCD1
1.6
0.80
HA/SCD2
0.6
1.28
MATRICES
FIGURA 8. Concentracin de cefalexina liberada en funcin del tiempo para las distintas
matrices estudiadas.
Con objeto de estudiar la cintica de liberacin, los perfiles de liberacin se ajustaron a la siguiente funcin hiperblica:
ft = t/ (a + bt)
(ecuacin 3)
161
FIGURA 9. Tiempo de inmersin dividido por la fraccin de droga liberada en funcin del
tiempo para las matrices SCD. El grfico incluye el ajuste a la ecuacin t/ft = a + bt.
(ecuacin 4)
siendo K1 la constante cintica de Fickian, y K2 la constante de la velocidad de disolucin. La Figura 10 muestra el ajuste obtenido utilizando la ecuacin 4 para las muestras conteniendo HA. El mejor ajuste se
obtuvo para n = 0.6, poniendo de manifiesto que el proceso de liberacin del frmaco es gobernado principalmente por un mecanismo de
difusin. De hecho, el ajuste de la expresin indica que K1 = 0.10 0.01
(h0.6) y K2 0.
En la difusin de una sustancia biolgicamente activa de una matriz,
la porosidad es un valor crtico. Las muestras estudiadas presentan diferente porosidad (75 y 50%, respectivamente) y, sin embargo, la velocidad
de disolucin es similar. Estos datos indican que para estos grandes valores de porosidad, la velocidad de liberacin del frmaco es independiente
de la porosidad del cemento. Asimismo, la matriz de gypsum es muy so162
MATRICES
FIGURA 10. Fraccin de frmaco liberada en funcin de t0.6 para las muestras HA/SCD.
El grfico incluye el ajuste biexponencial a la ecuacin ft = K1tn + K2t2n (n = 0.6).
estudian la liberacin in vitro de dos frmacos (gentamicina y vancomicina) de una matriz constituida por HA nanocristalina/SCD, en la que el
SCD se encuentra formando partculas compactas entre las partculas de
HA, que forman agregados de cristales con forma de aguja (Figura 11).
En este caso, la introduccin del frmaco se realiza despus del proceso
de fraguado mediante impregnacin, al introducir el cemento HA/SCD en
una solucin que contiene al frmaco.
MATRICES
FIGURA 12.
FIGURA 13. Niveles de tobramicina sistmicos (a) y locales (b) detectados, cuando SCD/
frmaco se introduce en un defecto seo medular del hmero proximal (ensayos in vivo).
MATRICES
frmaco observadas en el tejido seo eran siempre ligeramente inferiores que los valores obtenidos in vitro. En cuanto a las concentraciones
de frmaco en el suero, importante cuando se consideran los efectos
secundarios sistmicos, destacar que en el caso de los implantes no
recubiertos, se detecta un pico de concentracin de vancomicina (inferior a los niveles txicos), a las tres horas de la implantacin, pero
despus se mantiene en niveles muy bajos. En el caso de los implantes
recubiertos no se detect vancomicina en el suero, durante todo el experimento.
La utilizacin del sistema SCD/copolmero PLA-PGA in vivo, indica la potencialidad del mismo en uso clnico, ya que el sistema permite
alcanzar niveles de frmaco en los tejidos seos que rodean al implante
superiores a la CMI de la mayora de los organismos causantes de la
infeccin sea, durante al menos cuatro semanas, sin inducir niveles
txicos en suero.
La eficacia de estos sistemas en los experimentos realizados en
animales ha sido tambin probada en clnica, en pacientes afectados de
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168
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MATRICES
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(42)
(43)
(44)
(45)
(46)
171
172
Cadera
Rodilla
Despacio
4.9
2.7
Normal
4.9
2.8
Deprisa
7.6
4.3
Subir escaleras
7.2
4.4
Bajar escaleras
7.1
4.9
5.9
3.7
5.1
4.4
Histricamente, las prtesis articulares e implantes han sufrido enormes variaciones. Cabe sealar que existen en el mercado una variedad
ingente de modelos y de diseos de prtesis e implantes. Lo que pone de
manifiesto el limitado conocimiento que se tiene sobre la funcin de las
articulaciones y, por otra parte, la capacidad de adaptacin que tiene el
organismo a los implantes y a los problemas que conlleva la naturaleza
metlica de estas prtesis e implantes. Solamente destacar los problemas
de corrosin electroqumica, la liberacin de iones metlicos al medio
fisiolgico, la degradacin por desgaste de las superficies metlicas debido a los movimientos articulares, o bien los fallos por fatiga que provoca
la fractura prematura del implante debido a la generacin de grietas y su
posterior crecimiento debido a las cargas mecnicas cclicas a las que el
174
LIBERACIN
FIGURA 1.
colonizacin de los huecos superficiales un anclaje mecnico de la prtesis. En la Figura 2 se muestra un corte transversal de una prtesis de
cadera con esferas sinterizadas en su superficie y el crecimiento del
hueso entre los huecos dejados por las esferas. Se puede comprobar la
buena fijacin mecnica de la prtesis.
LIBERACIN
mismo contenido mineral que el hueso humano (8-9). Esta capa tiene la
finalidad de que la adsorcin de protenas y la posterior colonizacin
por las clulas osteoblsticas, precursoras de hueso, fuera adecuada y
rpida. Estas capas se denominan capas bioactivas ya que ejercen una
actividad con el medio fisiolgico para activar los sistemas biolgicos.
Hay otras capas cermicas sobre metales que son bioinertes, las cuales
no ejercen ninguna interaccin con el medio fisiolgico sino que ejercen
una funcin de impedimento a la corrosin del implante o mejorar la
resistencia al desgate de una superficie articular pero no activa al sistema biolgico.
El reto es conseguir capas de fosfato de calcio bioactivas que permitan la rpida formacin de hueso con el objetivo de tener una buena
fijacin biolgica y mecnica y que el implante pueda cargarse de
manera casi inmediata a su implantacin. Tambin se pretende que
el recubrimiento bioactivo de fosfato de calcio sea reabsorbido y sea
reemplazado por hueso y de esta manera exista contacto entre hueso e
implante.
Adems de la mejora de la osteointegracin del implante, las capas
de fosfato de calcio mejoran la resistencia a la corrosin del implante
metlico, ya que aislan el metal del medio fisiolgico agresivo y tambin hacen disminuir la liberacin de iones metlicos del sustrato metlico al medio fisiolgico, ya que el recubrimiento acta de barrera
haciendo disminuir la velocidad de difusin de los iones metlicos al
medio.
Hay diversas tcnicas de obtencin de capas de fosfato de calcio o
apatitcas sobre metales utilizados como sustitivos de tejidos duros:
LIBERACIN
FIGURA 3.
Esta tcnica presenta algunos inconvenientes, como la falta de adhesin del recubrimiento cermico sobre el metal, la fuerza de adhesin
es dbil y crea zonas de espacio vaco entre el sustrato metlico y el recubrimiento bioactivo. En la Figura 4 se puede observar zonas de vaco
entre el implante dental de titanio y el recubrimiento cermico. Estas
cavidades estn conectadas y van hacia el interior del implante. En ocasiones, pueden ser colonizadas por bacterias que penetran hacia el interior del implante-recubrimiento provocando periimplantitis y obligan a
retirar al implante.
Aunque es la tcnica ms frecuente utilizada, presenta ms inconvenientes, como son las grietas producidas por el choque trmico en el proceso de depositar el recubrimiento desde alta temperatura a la ambiente,
as como la falta de cristalinidad del fosfato de calcio depositado debido a
la elevada velocidad de enfriamiento en el proceso de solidificacin.
179
Ablacin lser
La radiacin lser es la fuente de energa para evaporar hidroxiapatita y depositar capas delgadas en el sustrato metlico. La composicin
qumica, el grosor de la capa y la cristalinidad pueden ser controladas
por la energa de la fuente lser.
Se forma una nube de plasma en una zona prxima a la superficie
del sustrato que permite la colisin de partculas, reduciendo la velocidad de deposicion, lo que permite una mejor homogeneizacin y cristalinidad de la capa (19).
Mtodo termoqumico
Se trata de modificar la superficie del metal mediante un proceso
termoqumico transformndolo de bioinerte a bioactivo, dndole la capacidad de formar, in vivo o en una solucin fisiolgica simulada, una
capa de hidroxiapatita carbonatada.
180
LIBERACIN
Este es el mtodo en que se pueden incorporar frmacos en el recubrimiento, as como protenas que pueden favorecer la formacin del
hueso y evitar los procesos de infeccin que podran perjudicar el buen
comportamiento del implante o la prtesis. A continuacin, se expone
este mtodo de recubrimiento y la adicin de frmacos a la misma.
Mtodo termoqumico
Como ya hemos comentado, la apatita es un fosfato de calcio con la
misma composicin qumica que la fase mineral del hueso, lo que implica que es completamente aceptada en el cuerpo como una sustancia
propia. No habr reacciones inflamatorias importantes si se incorpora en
el cuerpo como un implante. No slo eso, sino que adems tiene la
ventaja de que una vez implantada, el tejido seo crece sobre ella con
enlace qumico directo, comportndose como lo que se denomina un
material bioactivo. Otra ventaja con este cermico es que puede ser
reabsorbible en el cuerpo si est en forma amorfa. La reabsorcin disminuye con la cristalinidad. Cuando es totalmente cristalina es prcticamente insoluble y muy estable, es decir, se incorpora en el hueso y
queda como un material inerte sin tejido conjuntivo a su alrededor.
La capa de apatita crece sobre la superficie del titanio depositndose
con enlace qumico, con lo que se incrementa de manera significativa la
estabilidad de la capa, se evitarn problemas de colonizacin bacteriana
en los espacios de la interfaz y se obtienen capas homogneas y de espesor controlado (20-21).
El depsito de la apatita termoqumicamente obtenida sobre el titanio
se puede realizar sobre el metal rugoso (previamente arenado o atacado
mediante cido), se quiere conseguir una mayor rapidez de osteointegracin (reducir el perodo en el que el paciente no debe realizar cargas
dentales) gracias a la bioactividad de la apatita depositada y a la vez conseguir una buena fijacin a largo plazo, ya que cuando se forme hueso
nuevo, ste colonizar la rugosidad del titanio producida por el mtodo
de la proyeccin de abrasivos y se conseguir adems de una fijacin qumica una fijacin mecnica. Es decir, se busca combinar los dos procedimientos (superficie bioactiva y rugosidad) para conseguir una mayor
fijacin a corto plazo (bioactividad) y a largo plazo (rugosidad).
181
Ion
SBF
Plasma humano
Na+
142,0
142,0
5,0
5,0
1,5
1,5
Ca
2,5
2,5
147,8
103,0
HCO3
4,2
27,0
HPO42
1,0
1,0
0,5
0,5
K+
Mg2+
2+
Cl
SO4
182
LIBERACIN
FIGURA 5.
Ti + 3OH Ti(OH)+3 + 4e
Ti(OH)+3 + e TiO2 H2O + 0,5 H2 (g)
Ti(OH)+3 + OH Ti(OH)4
Si el ataque de los grupos hidrxilos contina sobre el TiO2 ya hidratado,
se producen hidratos con cargas negativas en la superficie de las muestras
TiO2 nH2O + OH HTiO3 nH2O
Estas molculas cargadas negativamente se combinan con iones de sodio en la solucin acuosa, lo que resulta en la formacin de una capa de
hidrogel de titanato de sodio. Durante el tratamiento trmico, este hidrogel se deshidrata y se densifica para formar una capa de titanato de
sodio estable y amorfo. Cuando se sumerge en SBF se hidrata otra vez
y se transforma en un hidrogel de TiO2 por una liberacin de iones de
sodio de la capa de titanato de sodio a la solucin de SBF. Si el hidrogel
se cristaliza, la liberacin de estos iones va a tardar ms tiempo, lo que
retarda todo el proceso de nucleacin de la apatita.
El paso de liberacin de sodio est acompaado por un cambio de
iones con H3O+ del SBF que resulta en un aumento del pH de la solucin. El aumento del pH produce un aumento del producto de actividad
inica de la apatita, lo que resulta en la rpida formacin de la misma
sobre la superficie de titanio segn la reaccin de equilibrio siguiente:
10 Ca2+ + 6PO43 + 2OH Ca10 (PO4)6(OH)2
Con esta reaccin el ratio de supersaturacin con respecto a la apatita
en el SBF, que ya antes de sumergir los sustratos es fuertemente supersaturado, aumenta an ms. ste es un proceso que hace que la titania
hidratada induzca la nucleacin de apatita sobre la superficie del titanio.
Gracias a la supersaturacin, muchos ncleos de apatita se forman como
bolas pequeas por toda la superficie del Ti c.p. Una vez la nucleacin
ha empezado, los ncleos crecen espontneamente, consumiendo los
iones de calcio y de fosfato que contiene el SBF.
184
LIBERACIN
185
FIGURA 6.
FIGURA 7. Difractograma de rayos X de la placa lisa despus del tratamiento con NaOH
comparado con el obtenido por Kokubo [T. Kokubo, F. Miyaji, H. M. Kim y T. Nakamura.
Spontaneous Formation of Bonelike Apatite Layer on Chemically Treated Titanium
Metals. J. Am. Ceram. Soc., 79 (4) (1996) 1127-29]. Ti: Titanio, N: Titanato de sodio
(Na2Ti5O11), R: Rutilo (TiO2), N2 : titanato de sodio (NaTiO2).
186
LIBERACIN
FIGURA 8.
Para las placas lisas se poda observar que sobre esta capa homognea de apatita haba nuevos grupos de pequeas agrupaciones cristalinas, como si fuese una segunda nucleacin sobre la capa de apatita ya
existente (Figura 10). Esta observacin puede explicar el proceso de
crecimiento de la capa. As, se puede suponer que primero se crean
ncleos de cristales, que crecen rpidamente y forman una capa homognea. Luego, para aumentar el espesor del depsito, este proceso se
repite una vez tras otra, capa sobre capa.
187
FIGURA 9.
FIGURA 10.
188
LIBERACIN
FIGURA 11. Tejido seo formado alrededor del implante de titanio recubierto por apatita
mediante la tcnica termoqumica.
FIGURA 12.
190
LIBERACIN
Como ya hemos visto, estos recubrimientos se pueden obtener mediante inmersin en soluciones supersaturadas de fosfato de calcio a
temperatura ambiente, o bien, en fluidos fisiolgicos simulados, una vez
se ha tratado el titanio con agentes alcalinos fuertes. En contraste con el
plasma-spray, los agentes activos pueden ser aadidos en soluciones
supersaturadas y pueden gradualmente co-precipitar con los cristales de
fosfato de calcio. Este mecanismo permite que la incorporacin del
antibitico se realice de una manera uniforme en la capa de fosfato de
calcio y su liberacin sea controlada, con el fin de prevenir o parar la
infeccin local post-operatoria.
Uno de los grupos de investigacin que han destacado en los avances de esta tcnica es el Grupo de Investigacin en Biomateriales de la
Universidad de Leiden en Holanda. M. Stigter, K de Goot y P. Layrolle
incorporaron tobramicina en capas de fosfato de calcio en sustratos
de titanio. Este antibitico es de gran espectro y eficaz contra bacterias
grama-negativa y algunas grama-positivas. La tobramicina puede prevenir el crecimiento de la Staphylococcus aureus, un bacilo grama-positivo, frecuentemente responsable de infecciones post-quirrgicas en la
ciruga ortopdica (31, 34).
Una vez obtenida la capa de fosfato de calcio sobre el sustrato, que
normalmente est carbonatada, se realiza la inmersin en soluciones sobresaturadas de tobramicina a temperatura de 37 C y su pH fisiolgico.
En la inmersin se produce la co-precipitacin de tobramicina sobre las
capas de fosfato de calcio carbonatadas.
La tobramicina (C18H37N5O9 de peso molecular 467,5 g/mol) en forma de polvo se introduce en una solucin sobresaturada de fosfato de
calcio que contiene NaCl (146 mM), CaCl2 2H2O (0,05 mM), Na2HPO4
2H2O (2 mM) y NaHCO3 (1 mM). La solucin se tampona a pH = 7,4
con 50 ml de N-(2-hidroxietil)piperizina-N-(2-etano cido sulfnico)
(HEPES) y NaOH (2M).
Se pueden introducir cantidades de tobramicina desde 100 a 800 mg/l,
concentraciones ms elevadas no deben ser usadas ya que inhiben la formacin del recubrimiento. Al cabo de 48 horas pueden extraerse las piezas y despus de lavadas y secadas al aire deben ser almacenadas en un
refrigerador a 4 C.
192
LIBERACIN
FIGURA 13.
194
LIBERACIN
Las mximas incorporaciones fueron de 0,25 g/mg despus de inmersin con una concentracin de 1.000 mg/l durante 48 horas. Como
se puede observar, las cargas de antibitico en los recubrimientos de
fosfato de calcio obtenidos por plasma spray fueron diez veces menores
comparado con los obtenidos mediante co-precipitacin en los biomimticos. En la Figura 15 puede apreciarse la evolucin de concentracin de
antibitico en funcin de la concentracin de la solucin para la capa
recubierta mediante plasma-spray.
Se pudo apreciar que la incorporacin de antibitico no afecta a la
cristalinidad ni a la composicin qumica de los recubrimientos.
La liberacin de tobramicina en medio fisiolgico en funcin al tiempo de permanencia se representa en la Figura 16. Se observa que al principio hay una fuerte liberacin y despus llega a un estado de liberacin
estacionaria. Tambin se aprecia la influencia del pH, siendo mayor la
liberacin a pH fisiolgico que a pH ligeramente cido (pH fisiolgico en
el momento de colocacin del implante) aunque a tiempos de 200 minutos los dos llegan a liberar el mismo porcentaje de antibitico.
195
Concentracin de tobramicina
en la solucin (mg/l)
Zona de inhibicin
(mm) N = 2
100
1,5 0,1
250
3,5 0,3
750
4,5 0,3
Control positivo *
3,0 0,1
LIBERACIN
Tiempo de
Cantidad liberada
inmersin (h)
(g/g)
Zona de inhibicin
(mm)
1 mg/ml 24 h
No detectable
1 mg/ml 24 h
24
No detectable
No detectable
10 mg/ml 6 h
56
15,5
10 mg/ml 24 h
55
15,5
10 mg/ml 72 h
66
15,5
10 mg/ml 6 h
24
No detectable
10 mg/ml 24 h
24
No detectable
10 mg/ml 72 h
24
No detectable
LIBERACIN
completamente solubilizados en 150 minutos, mientras que los que presentaban protena presentaban una velocidad de 5 ppm/minuto y fue
completamente solubilizada en 250 minutos. Este hecho sugiere que
la protena se enlaza fuertemente con el Ca2+ dentro de la red cristalina,
pero de una manera que su liberacin es independiente del contenido de
protena. Quiz, la afinidad de iones Ca2+ por la albmina es tan grande
que todos los puntos posibles para realizar enlaces dentro de la red
cristalina estn saturados a bajas concentraciones de albmina.
Otro de los efectos de la incorporacin de la protena en las capas
de fosfato de calcio fueron las propiedades mecnicas y en especial los
ensayos de adherencia o de arrancamiento de la capa de fosfato respecto
al sustrato de titanio. La tensin de fallo en ausencia de protena fue de
0,33 N, mientras que con protena estas cargas de arrrancameinto fueron
mayores, desde 0,7 N para una concentracin de 0,01 g de protena/ml
a 1,75 Na 1.000 g de protena/ml.
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VII.
Matrices biocermica-polmero
DANIEL ARCOS NAVARRETE
1.
INTRODUCCIN
En el presente captulo se describe la utilizacin de matrices biocermica-polmero como sistema de liberacin controlada de frmacos,
fundamentalmente de sulfato de gentamicina, si bien muchos de los
conceptos pueden ser extrapolados a otros antibiticos y antiinflamatorios parcialmente solubles en medio acuoso.
Uno de los problemas ms importantes en ciruga dental y ortopdica es la alta incidencia de infecciones seas, as como la fuerte respuesta inflamatoria del organismo frente al implante. En mltiples ocasiones, estos hechos conducen a la prdida de funcin del implante y a
la septicemia, por lo que se hacen necesarias diversas tcnicas de tratamiento que incluyen la administracin sistmica de antibiticos y antiinflamatorios, limpieza quirrgica, drenajes y, en ocasiones, la retirada
del implante.
Un problema adicional que presentan las infecciones e inflamaciones seas es que la administracin sistmica de medicamentos requiere
de elevadas dosis para alcanzar niveles eficaces en hueso. Es por ello
por lo que la administracin de frmacos a nivel local y diferido en el
tiempo se presenta como una estrategia muy interesante para afrontar el
problema.
Las matrices biocermica-polmero presentan una doble funcin. En
primer lugar la liberacin controlada del frmaco y, en segundo lugar el
ser capaz de rellenar el defecto seo, ayudando a su vez a regenerar
el tejido. Si bien tanto el componente cermico (matriz discreta) como
el polimrico (matriz continua) intervienen en ambos aspectos, ser la
La administracin local de antibiticos en el tratamiento de infecciones seas se remonta a los tiempos de la primera guerra mundial. En
los aos 1919-1920, Alexander Fleming (1) observ que la administracin local de antispticos reduca de forma notable la presencia bacteriana, si bien fracasaba en la esterilizacin de aquellas heridas afectadas
por infecciones crnicas.
Las sulfonamidas fueron los primeros agentes antimicrobianos disponibles para uso clnico. En 1939, Jensen y col. (2) demostraron que
la aplicacin de cristales de sulfonamida conjuntamente con la limpieza
exhaustiva de las lesiones, hemostasis, sutura y posterior inmovilizacin, conduca a una notable reduccin de la tasa de infecciones en
heridas abiertas.
Sin embargo, el verdadero desarrollo de la administracin local de
antibiticos para prevenir y tratar infecciones seas vendra en los aos
setenta, en Alemania, con el aumento en el nmero de implantaciones
204
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
de prtesis totales. En este tipo de situaciones, la sepsis conduca a complicaciones de carcter muy grave.
En 1970 Buchholz y Engelbrecht (3) mostraron que la penicilina, eritromicina y gentamicina incorporada en el cemento utilizado para fijar las
prtesis totales de cadera, se difunda a los tejidos circundantes durante
meses, proporcionando de este modo concentraciones locales de antibitico eficaces durante periodos prolongados. En base al xito observado en
la reduccin de infecciones postoperatorias, sobrevino el inters en utilizar cementos impregnados con antibiticos en zonas afectadas por osteomielitis crnica. Klemm (4) dise cementos impregnados de gentamicina en forma de cuentas de polimetil metacrilato (PMMA) y las utiliz
para rellenar temporalmente los espacios muertos generados tras la limpieza del hueso infectado. De 128 pacientes de osteomielitis tratados con
las cuentas de PMMA con gentamicina, Klemm present un porcentaje
de curacin del 91,4%.
En la actualidad los cementos impregnados se utilizan para prevenir
infecciones en artroplastias en las que se requieren materiales con propiedades adhesivas. Las cuentas de PMMA son utilizadas de forma temporal (generalmente de semanas a meses) proporcionando concentraciones locales eficaces de antibitico y rellenando espacios muertos tras la
limpieza del hueso en pacientes con osteomielitis crnica o fracturas
complejas. Tras la formacin de tejido fibroso, las cuentas son retiradas
y se rellenan los huecos con un material adecuado de relleno seo.
El desarrollo de nuevos materiales se dirige fundamentalmente hacia
productos que permitan reducir complicaciones, as como el periodo de
estancia en el hospital, lo que conduce en numerosas ocasiones a un
incremento del coste del material o dispositivo mdico final.
Los materiales utilizados en los seres vivos deben ser biocompatibles independientemente de cul vaya a ser su aplicacin. La biocompatibilidad podra definirse como la capacidad de un material para poder
ser utilizado en una aplicacin especfica con una respuesta apropiada
del organismo receptor. As pues, un material ser tanto ms compatible
cuando sea capaz de cumplir mejor su funcin y produzca menos reacciones de rechazo por parte del organismo.
Para que un material pueda ser catalogado como biocompatible,
deben de tenerse en cuenta una serie de aspectos:
205
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
FIGURA 1.
puestos.
Las propiedades farmacolgicas del componente activo (concentracin mnima eficaz, etc.).
Las propiedades toxicolgicas.
Desde el punto de vista de cmo se incorpora el frmaco a la matriz
polimrica, los sistemas de liberacin se pueden dividir en dos grandes
grupos:
1.
Sistemas en los que el frmaco se encuentra anclado qumicamente a una matriz polimrica soporte.
2.
Los sistemas de liberacin controlada cermica-polmero estn caracterizados por el uso de matrices en las que el frmaco est distribuido homogneamente. En ellos, el control de la liberacin (por difusin)
est basado en la permeabilidad de la matriz polimrica, despus de ser
sometida a un proceso de absorcin en un medio hidratado. La cintica
de absorcin, y por lo tanto la velocidad de liberacin, dependen del
grado de hidratacin de la matriz polimrica, que puede estar constituida por:
Sistemas macromoleculares basados en polmeros no hidrosolubles.
Sistemas macromoleculares basados en polmeros no hidrosolubles, junto a polmeros hidrosolubles que dan la porosidad necesaria para la liberacin del frmaco.
Copolmeros biocompatibles constituidos de monmeros hidroflicos e hidrofbicos con la composicin adecuada para el control de
la velocidad de liberacin del frmaco.
En cualquiera de los casos, el soporte polimrico debe ser biocompatible, no txico y no cancergeno, y los productos de biodegradacin,
si los hubiera, solubles en fluidos fisiolgicos, no debiendo producir
reacciones alrgicas.
El papel del componente cermico ser principalmente dotar de
mejor biocompatibilidad al implante, as como de aportar bioactividad.
208
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
biocermica con objeto de dotar al sistema de bioactividad. En los siguientes apartados se describen diferentes sistemas compuestos biocermica-polmero explicando el papel que juega el componente polimrico
en funcin de su naturaleza hidroflica o hidrofbica, as como su biodegradabilidad. Por otra parte, estudiaremos tambin el papel que juega
la biocermica en la liberacin del frmaco y en la osteointegracin del
implante.
2.
Vidrios bioactivos
El descubrimiento de los vidrios bioactivos tuvo lugar hace ms de
treinta aos y desde entonces han surgido nuevas estrategias en la aplicacin de materiales artificiales para la reconstruccin y regeneracin
del tejido seo. Fue el Profesor Hench (11) el primero en introducir la
idea de un enlace fuerte entre un material sinttico y el tejido seo a
travs de reacciones qumicas sobre la superficie de los vidrios. Este
concepto se centr fundamentalmente en aquellos vidrios con base de
slice (SiO2) y modificadores de red como el xido de calcio (CaO) y el
xido de sodio (Na2O), as como en las reacciones que la superficie de
estos materiales sufre en contacto con los fluidos fisiolgicos. En la
actualidad este proceso est bien establecido y podemos resumirlo en las
siguientes etapas:
212
1.
Intercambio inico de Na+ y Ca2+ del vidrio con H3O+ del medio, con el consiguiente aumento del pH.
2.
3.
Policondensacin de grupos Si-OH que conducen a la formacin de una capa de gel de slice hidratada.
4.
5.
6.
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
7.
8.
9.
10.
11.
FIGURA 2. Mecanismo de formacin de una fase tipo apatita en vidrios Na2O- SiO2 o
CaO-SiO2 en el medio fisiolgico.
213
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
La preparacin de estos sistemas se basa en la polimerizacin radical del monmero MMA, en contacto con las diferentes fases slidas.
Para la preparacin de estos sistemas se mezclan microesferas slidas de
PMMA con el vidrio bioactivo y el frmaco. A esta mezcla slida se
incorpora el metilmetacrilato (MMA) lquido en una proporcin PMMA/
MMA de aproximadamente 1:2, aadindose a la mezcla un iniciador de
la reaccin (por ejemplo 0,5% de perxido de benzoilo) y un activador
como N,N dimetil formamida. La pasta resultante se debe homogeneizar
utilizando tcnicas de mezclado por ultrasonidos o mezclado al vaco
para eliminar burbujas de aire, y se incorpora en los moldes con la
forma deseada. Estas piezas no estn diseadas para la implantacin
inmediata, como en el caso de los cementos acrlicos, por lo que no es
necesario incorporar elevadas cantidades de iniciador y activador que
produzcan el fraguado del cemento en pocos minutos (condiciones necesarias durante la intervencin quirrgica). Esta rpida polimerizacin
trae consigo un fuerte proceso exotrmico durante el fraguado y un
aumento de temperatura, que puede ocasionar modificaciones en el frmaco. Sin embargo, reduciendo la cantidad de iniciador y activador, se
puede fraguar el cemento en condiciones mucho ms suaves que conllevan mayor tiempo de fraguado, por ejemplo, polimerizando a 60 C
durante 24 horas. De este modo se obtienen materiales en forma de
bloques para ser implantados a posteriori.
El antibitico utilizado debe ser eficaz contra las bacterias patgenas y debe estar disponible en forma de polvo, porque las disoluciones
de antibiticos no se mezclan bien con el cemento acrlico y no permiten
a ste endurecer correctamente. Asimismo, debe ser estable al calor
generado durante la reaccin de polimerizacin y, posteriormente, en los
tejidos corporales.
Liberacin del frmaco: Sulfato de gentamicina
La liberacin de un antibitico desde el PMMA presenta una cintica de tipo bifsico. Durante las primeras horas o das tras la implantacin, la mayor parte del antibitico se libera y la lenta elusin
del resto puede permanecer durante aos. El mecanismo de difusin del
frmaco puede ser de diferente naturaleza. En algunos casos se observa
que la liberacin de gentamicina desde piezas de PMMA se produce a
215
216
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
217
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
FIGURA 4. Micrografas obtenidas por microscopia electrnica de barrido antes y despus de sumergir en SBF sistemas compuestos vidrio-PMMA-gentamicina a diferentes
periodos.
Esta fase CHA no slo se forma en las caras exteriores del material, sino que en aquellas regiones donde haya macroporos accesibles
al fluido, tambin se formar dicha fase como se observa en la micrografa 4.f. Este comportamiento demuestra que la presencia de un
cemento acrlico como el PMMA no inhibe el comportamiento bioactivo del vidrio, de tal modo que podemos obtener una cesin controlada del frmaco desde un sistema que ayuda a la osteointegracin y
regeneracin del tejido seo.
219
2.2.
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
FIGURA 5.
FIGURA 6.
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
223
mente la capa de apatita crecida que puede actuar como una barrera que
dificulte la cesin del frmaco. Este hecho podra justificar que en este
tipo de implantes no se alcance a liberar en el 100% del frmaco en el
periodo de tiempo estudiado.
2.3.
En el caso de estos sistemas, la biocermica que se aade es hidroxiapatita (HA) y entre los cementos acrlicos ms estudiados en este
tipo de sistemas destacan el polimetil metacrilato (PMMA), el polietil
metacrilato (PEMA) e incluso mezclas de ambos polmeros (26, 27), si
bien el PMMA ha sido el cemento acrlico ms utilizado en ciruga ortopdica. Weightman (28) propuso en 1987 la utilizacin del PEMA al
observar que este ltimo presenta mayor ductilidad y resistencia a la
fractura.
Por otra parte, la incorporacin de HA como biocermica responde igualmente a la ventaja de dotar a estos sistemas de bioactividad.
La HA presenta un carcter bioactivo inferior al de los vidrios. Sin embargo son varios los estudios que demuestran otras ventajas respecto a
estos (29-31):
1. La incorporacin de HA no afecta al grado de polimerizacin
del cemento acrlico.
2. Acta como relleno rgido en los poros del cemento acrlico
generados durante la polimerizacin. La consecuencia es que incrementa el mdulo elstico del cemento y aumenta los valores de tenacidad a
la fractura. Este incremento de las propiedades mecnicas se cumple
para un intervalo de composiciones que depende del tipo de polmero
con el que se combine. As por ejemplo, el mximo de HA que se puede
aadir al PMMA antes de que se deterioren sus propiedades mecnicas
es del 15%, mientras que el PEMA puede admitir hasta un 40% en peso
de HA. Cantidades superiores producen un aumento de la porosidad y
del dimetro de los poros que producen una disminucin de la resistencia mecnica.
La HA estequiomtrica es un fosfato de calcio bsico de composicin Ca10(PO4)6(OH)2 y dentro del campo de los fosfatos de calcio es la
224
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
FIGURA 8.
226
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
la proporcin de gentamicina incluida en el sistema, as como para diferentes cantidades de HA. Estos autores han observado cinticas de liberacin similares a las descritas para sistemas anteriores, es decir, una rpida
liberacin del frmaco durante las diez primeras horas que va disminuyendo en velocidad en funcin de los tiempos de ensayo (Figura 9).
Para sistemas que incluyen cantidades de HA del 40% se ha observado que la cantidad de gentamicina no influye en la velocidad de liberacin (en el rango entre el 5-9%), mientras que cuando el sistema
contiene slo un 30% en HA, la velocidad de liberacin del frmaco se
ve favorecida para mayores concentraciones de gentamicina.
La presencia de HA incrementa la porosidad y hace al sistema ms
hidroflico (Figura 10). Esto trae como consecuencia que el fluido circundante penetre en el interior con mayor facilidad, favoreciendo la
cesin del frmaco.
FIGURA 10. Incremento en peso del sistema por absorcin del fluido circundante (SBF)
en funcin del tiempo. La serie A contiene un 40% de HA y la serie B un 30% de HA.
227
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
2.4.
Los sistemas compuestos de liberacin controlada fosfato triclcicoPMMA-PEMA son una variante sobre los sistemas descritos en el aparta229
MATRICES BIOCERMICA-POLMERO
FIGURA 13.
En el caso del dolor e inflamacin generado por implantes quirrgicos, el tratamiento necesita de altas dosis de fosfosal debido a su baja
231
(6)
(7)
232
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234
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(41)
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(44)
(45)
(46)
(47)
(48)
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235
VIII.
1.
INTRODUCCIN
En este captulo nos centraremos en el estudio de las posibles aplicaciones en sistemas del liberacin de frmacos de las cermicas consideradas inertes en su interaccin con organismos vivos. Dentro de este
grupo se han englobado, tradicionalmente (1), los xidos de aluminio
(Al2O3), zirconio (ZrO2) y titanio (TiO2), si bien en este ltimo caso no
slo no debera hablarse de inerte sino del trmino oseointegracin propuesto por Branemark (2) tras observar el comportamiento de los implantes de titanio en ntimo contacto con el tejido seo. Las biocermicas de -Al2O3 estn formadas por xido de aluminio puro, mientras que
las de zirconia contienen cantidades de otros xidos como el de ytrio,
calcio o magnesio para estabilizarlas parcialmente.
Los xidos de cermicas inertes presentan elevadas propiedades mecnicas y gran resistencia a la corrosin y al desgaste. Debido a que en
stos el metal se encuentra en su estado de oxidacin ms alto, estas cermicas son estables incluso en los entornos ms agresivos incluyendo el
medio biolgico. Ello, junto con la ausencia de toxicidad y una buena
biocompatibilidad en condiciones in vivo, hace que estas cermicas se
estn utilizando para la elaboracin de implantes, desde la primera propuesta de utilizacin de almina en 1932 hasta una aplicacin generalizada de las biocermicas inertes a partir de los aos setenta y ochenta (3).
Las principales aplicaciones biomdicas de las cermicas inertes son
la sustitucin de tejidos duros en situaciones donde hay que soportar
cargas, en superficies articulantes y la fijacin de implantes en Odontologa y Ciruga. Otras aplicaciones propuestas para estas cermicas casi
MATERIALES
Pt Po
x100 , a pH=7, en funcin del tiempo de inPt
mersin. El contenido en peso del componente cermico en los composites fue respectivamente 0 (LI), 15,8% (LII), 40,9% (LIII) y 56,1%
(LIV). Se observa que, segn aumenta el contenido en cermica disminuye el grado de hidratacin mximo que se alcanza. La Figura 2b
muestra fotografas de los materiales compuestos con el mayor y el
menor contenido en cermica antes y despus de ser sometidos al ensayo de hidratacin. El efecto no se debe nicamente al mayor o menor
contenido en componente polimrico, sino que la relacin resulta ms
compleja por las interacciones especficas entre la superficie del TiO2 y
los grupos carboxlicos de poli (cido acrlico). La Figura 2c muestra el
239
240
MATERIALES
Teniendo en cuenta el comportamiento descrito para estos materiales, se prepararon una serie de composites que incluan un pequeo
porcentaje (5%) de NaF y se estudi la cesin de los fluoruros al medio
y su influencia en el grado de hidratacin (7) (ver Figura 4).
El papel de la cermica radica en atenuar la masiva y brusca liberacin que tiene lugar en la muestra sin TiO2 y regular la liberacin de
los fluoruros de una manera progresiva hasta alcanzar valores cercanos
al 60%. La modificacin del pH del medio la solucin se tampon
a pH = 7 a las 850 horas de tratamiento para contrarrestar la bajada
del pH hasta 3,5 debido a la presencia de poli (cido acrlico) permite alcanzar el 90% de liberacin en el material con TiO2. Este hecho
puede atribuirse a la estructura ms abierta que presentan los materiales compuestos con cermica.
FIGURA 4. Tanto por ciento de liberacin de fluoruros en funcin del tiempo a partir de
materiales compuestos con y sin TiO2.
Sistema I
PMMA
PVP
IB
Serie A
27
45
19
Serie B
27
31
24
Serie C
64
27
Serie D
27
64
co VP-MMA
Sistema II
Serie A
27
37
27
Serie B
27
18,5
45,5
Serie C
52,5
38,5
MATERIALES
TABLA 2.
Serie A
Serie B
Serie C
Serie D
PMMA
PLLA
IB
27
32
32
25
29
29
17
25
41
17
25
17
41
17
27
64
25
58
17
59
32
54
29
17
243
FIGURA 6. Diagramas de DRX de los materiales compuestos con un 17% en peso de IB.
I: Ibuprofeno, P: PLLA y A = -Al2O3.
244
MATERIALES
MATERIALES
FIGURA 9. Micrografas electrnicas de barrido de -Al2O3 obtenida mediante (a) descomposicin de nitratos, y (b) el mtodo pirosol. (c) Muestra la liberacin de IB en mol% frente al tiempo de inmersin de los composites con un 17% en masa de IB.
3.
3.
3.
Por otra parte, la preparacin de partculas de un frmaco con requerimientos especficos de forma, tamao y propiedades fsicas y qumicas, resulta un tema de gran inters para la formulacin de productos
farmacuticos y en otras aplicaciones mdicas.
Las propiedades fsicas de estas partculas afectan a su disolucin,
velocidad de absorcin, biodisponibilidad, estabilidad, uniformidad y otras
propiedades. Generalmente, las partculas de frmaco orgnico ultrafinas
se han preparado por el mtodo clsico de procesos de molturacin en presencia o ausencia de humedad y estabilizantes. Sin embargo, estos procedimientos conducen generalmente a dispersiones con una elevada distribucin de tamaos y, adems, no producen partculas de las formas deseadas.
Recientemente, se ha demostrado que partculas coloidades de naproxn y
budenoxida pueden obtenerse en diferentes morfologas por tcnicas de
precipitacin. Sin embargo, ninguno de los mtodos empleados ha producido materiales monodispersos a tamao nanomtrico de inters para aplicaciones especficas. La fabricacin de nano- y microesferas para el almacenamiento y liberacin de sustancias con accin teraputica se puede
lograr utilizando procesos basados en surfactantes que implican un templado por emulsin, la evaporacin del disolvente o spray drying. Sin embargo, estas aproximaciones requieren condiciones muy estrictas para eliminar las plantillas inorgnicas antes de la encapsulacin del frmaco, ya que
muchos surfactantes son dainos para la salud humana.
247
MATERIALES
pectivamente. Estos slidos laminares han sido utilizados como catalizadores, soportes de catalizadores, intercambiadores de aniones, adsorbentes y aditivos. Por otra parte, alguno de estos compuestos (hidrotalcita de magnesio y aluminio) son biocompatibles y tienen aplicaciones
dentro del campo farmacutico como anticidos, ingredientes para frmacos de liberacin prolongada, estabilizantes de composiciones de sales
de aluminio y magnesio de compuestos antipirticos, analgsicos y drogas antiinflamatorias.
La insercin de aniones o compuestos aninicos entre las lminas
inorgnicas se puede lograr mediante dos rutas: una directa, en la que
el anin se inserta por auto ensamblaje o coprecipitacin, y otra indirecta, en la que se prepara, en primer lugar, el slido laminar anfitrin y,
a continuacin, se introduce el compuesto a intercalar.
Adems de esta familia de compuestos, se han empleado otros slidos laminares en la liberacin de sustancias o en la inmovilizacin de
enzimas: zeolitas, fosfato de zirconio o titanio, perovskitas, silicatos...
Una vez que hemos visto que este tipo de compuestos permiten
alojar sustancias con diferente tamao con mayor o menor grado de
interaccin con el soporte, nos debemos preguntar qu ventajas aporta
este ltimo que justifique su utilizacin:
En primer lugar debe mencionarse una mayor estabilidad, por
ejemplo, las vitaminas A, C y E son inestables en presencia
de luz, oxgeno o alta temperatura, lo que limita su utilizacin.
La insercin de las vitaminas dentro de estos compuestos facilita
su aplicacin y evita su temprana degradacin. Otro caso lo
constituyen las enzimas que inmovilizadas sobre determinados
soportes evitan su agregacin y degeneracin, aumenta su resistencia a agentes externos y permite su recuperacin y reutilizacin.
La liberacin de la sustancia encapsulada puede realizarse de
manera controlada, dependiendo de las condiciones del medio y
del grado de interaccin con el soporte o por disolucin intencionada en medio cido de las lminas, lo que permite recuperar
las biomolculas. Esta disolucin en medio cido puede suponer
un inconveniente en la administracin oral de este tipo de materiales compuestos, que se puede evitar (13) por recubrimiento
249
250
MATERIALES
Difenidramina
citarabine
indometacina
diclorofenaco
ADN, oligonucl.
As-myc
18
30
33
29
21
Lipasas
15
Tripsina
-galactosidasa
Penicilina G acrilasa
Hemoglobina
Hemoglobina,
miglobina
28
32
16
31
-naftalenoacetato
naproxeno
Ac. Folnico,
Metrotexato
ibuprofeno
Fenbuten
Fenbuten
26
20
22
c. Bifenilactico,
diclorofenac,
gemfibrocil,
ibuprofeno,
naproxeno, ac.
Propilpentanoico,
ac. tofenamico
19
25
14
17
27
251
FIGURA 10. Representacin de un hidrxido doble laminado antes y despus de introducir ciertas biomolculas (distancias interlaminares tomadas de las referencias 20 y 27).
Finalmente, debemos sealar algunas aplicaciones relacionadas indirectamente con la utilizacin de matrices inorgnicas para liberacin;
por ejemplo, su utilizacin para la separacin y aislamiento de distinto
tipo de sustancias por cromatografa (34). Debido a su estabilidad a pH
elevado, el soporte de almina es un prometedor sustituto de la slice
como adsorbente en adsorcin y en fase reversa de la cromatografa
lquida de alta resolucin (HPLC).
A lo largo del captulo nos hemos centrado en cermicas especficamente diseadas para la liberacin de sustancias en el cuerpo humano,
sin embargo hay aplicaciones que no requieren tantas exigencias de
compatibilidad con el organismo receptor o el tener que mantener los
niveles de frmaco dentro de una ventana teraputica durante un determinado perodo de tiempo. Un ejemplo lo constituye la liberacin de
sustancias en aplicaciones agrcolas, industriales... durante largos perodos de tiempo. En este sentido, Byrne et al. (35) estudiaron la liberacin
sostenida de frmacos a partir de cermicas porosas comerciales (Star252
MATERIALES
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MATERIALES
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(32)
(33)
(34)
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255
CAJA MADRID
Farmaindustria
Alcaliber, S. A.
Almirall Prodesfarma
Bristol-Myers Squibb, S. L.
Fundacin Aventis
Grupo Ferrer Internacional
Laboratorios Esteve
Laboratorios Lilly
Laboratorios Menarini
Laboratorios Rovi
Novartis Farmacutica
Tedec-Meiji Farma, S. A.