ESTABLECIMIENTO DEL PROTOCOLO DE MICROPROPAGACIN DE

HORTENSIA (Hydrangea macrophylla) A PARTIR DE SEGMENTOS NODALES,

COMO UNA ESTRATEGIA DE PRODUCCIN A GRAN ESCALA, PARA SU
UTILIZACIN ORNAMENTAL EN LOS ESPACIOS PBLICOS DEL DISTRITO
METROPOLITANO DE QUITO
Wilson Patricio Orozco Freire
RESUMEN
El objetivo de este estudio fue establecer un protocolo ptimo de micropropagacin de
hortensia a partir de segmentos nodales como una estrategia para la produccin a gran
escala de la especie. En la etapa de desinfeccin se probaron varias concentraciones
de antibiticos en un medio de cultivo MS (0.08 mg. L-1, 0.12 mg. L-1, 0.16 mg. L-1, 0.2
mg. L-1, 0.3 mg. L-1, 0.4 mg. L-1, 0.5 mg. L-1). En el ensayo de establecimiento se
examinaron dos tipos de medio de cultivo, un MS y MS/2, en ambos se adicionaron
diferentes cantidades del regulador de crecimiento BAP (0 mg. L-1, 0.25 mg. L-1, 0.5
mg. L-1, 0.75 mg. L-1, 1 mg. L-1, 1.25 mg. L-1). Por otro lado, en la propagacin se
utiliz MSVG/2 suplementado con BAP y KIN en ocho concentraciones (0 mg. L-1, 0.5
mg. L-1, 1 mg. L-1, 1.5 mg. L-1, 2 mg. L-1, 3 mg. L-1, 4 mg. L-1, 6 mg. L-1). El
enraizamiento se llev a cabo en los medios MS y MS/2, con 0.2 g. L-1 de carbn
activado, suplementado con varias concentraciones de AIB (0 mg.L-1, 0.5 mg. L-1, 1
mg. L-1, 1.5 mg. L-1, 2 mg. L-1, 3 mg. L-1). La desinfeccin de los explantes con 0.12
mg. L.1 de kanamicina y estreptomicina, redujo la contaminacin a un 10%, mientras
que el mejor establecimiento se logr al utilizar 0.5 mg. L-1 de BAP en MS/2. En la etapa
de propagacin el mayor nmero de brotes se obtuvo con la adicin de 4 mg. L-1 de
BAP.
Finalmente, se indujo el enraizamiento en los explantes sin el suplemento de AIB en el
medio. Los resultados reportados constataron la viabilidad del establecimiento in vitro
de hortensia.
Palabras clave: explantes, medios de cultivos

ABSTRACT
The objective of this project was to establish an optimum hydrangea micropropagation
protocol from nodal segments as a strategy for this species on large scale production. In
the disinfection phase several antibiotic concentrations were tested in a MS mdium
(0.08 mg.L-1, 0.12 mg.L-1, 0.16 mg.L-1, 0.2 mg.L-1, 0.3 mg.L-1, 0.4 mg.L-1,
0.5 mg.L-1). In the establishment essay two culture mediums were examined,

MS and MS/2, with the addition of different quantities of BAP growth regulator (0 mg.L1, 0.25 mg.L-1, 0.5 mg.L-1, 0.75 mg.L-1, 1 mg.L-1, 1.25 mg.L-1). Furthermore, in the
propagation MSVG/2 was used, supplemented

with BAP and KIN, in

eight

concentrations (0 mg.L-1, 0.5 mg.L-1, 1 mg.L-1, 1.5 mg.L-1, 2 mg.L-1, 3 mg.L-1, 4 mg.L1, 6 mg.L-1). The rooting was conducted in MS and MS/2 mediums, with 0.2 g.L-1
activated charcoal, supplemented with several IBA concentrations (0 mg.L-1, 0.5 mg.L1, 1 mg.L-1, 1.5 mg.L-1, 2 mg.L-1, 3 mg.L-1). The explants disinfection with 0.12
mg.L-1 kanamycin and streptomycin decreased the contamination to 10%, while the
best establishment was achieved when using 0.5 mg.L-1 BAP in MS/2. In the
propagation phase the highest number of buds was obtained with the addition of 4 mg.L1 BAP. Finally, the explants rooting were induced without IBA in the medium. Reported
results confirmed the hydrangea in vitro establishment viability.

Palabras clave: explants, mdium

INTRODUCCION

El proceso de urbanizacin es un fenmeno

Desde finales del siglo XIX y hasta la primera

guerra mundial, comenzando ya el siglo XX, se
produce un cambio gigantesco en la historia del
hombre y su evolucin debido

al

inicio

del

irreversible. La economa de los pases en vas

de desarrollo se basa en el producto interno
bruto

que

generan

las ciudades, que es

alrededor del 60 al 80% (Fernndez, 1996).

fenmeno de urbanizacin y la primera etapa de

Se estima que para el ao 2025, ms de las tres

la revolucin industrial, provocando que se d un

quintas partes de la poblacin mundial vivir en

crecimiento desmesurado de las ciudades y de su

zonas urbanas y el porcentaje de urbanismo

nmero de habitantes, que como consecuencia de

llegar a un 84% con 5.200 millones de personas

sus

(Gmez, 2005).

actividades

econmicas,

agrcolas,

de

transporte, de vivienda, comunicacin, etc., han

ido restando cada vez ms espacio verde a las
poblaciones, predominando intereses diferentes
sobre el cuidado ambiental y la salud de las
personas (Ochoa, 1999).

verdes la OMS realiz un estudio y asever que el

rea verde ptima para que una ciudad mantenga
un equilibrio ambiental

es

de

15

m2

por

habitante, adems recomend como mnimo 9

Segn la Organizacin Mundial de la Salud

(OMS), uno de los mayores problemas que vive
actualmente la humanidad

Debido a esta prdida inminente de los espacios

es el

crecimiento

inmoderado de las metrpolis y de sus poblados

especialmente en zonas urbanas.

m2 por habitante (El Universo, 2011).

En la actualidad el Distrito Metropolitano de
Quito (DMQ) no ha sido la excepcin, ha tenido
un aumento poblacional de 4 veces en los ltimos

30 aos y en poco ms de un siglo su superficie

urbanismo

se ha incrementado 40 veces (Fernndez, 1996).

ampliacin de vas, intercambiadores, reduccin

Se ha registrado una tasa de crecimiento del 2,2%

desde el ao 2001, llegando a tener 2.239.191
habitantes hasta el ao 2010. De acuerdo a una

se

enfoque

en

la

creacin

del ancho de veredas, destino de parques y reas

verdes como estacionamientos para carros (Len
& Naranjo, 2005).

proyeccin realizada por el Instituto Nacional de

La extincin de zonas verdes genera muchas

Estadsticas y Censos (INEC) la poblacin para el

problemticas tanto a nivel local como a nivel

ao 2022 ser de 2.763.882 personas (Estvez,

nacional e internacional, influyendo no solo en

2010).

las

De la misma manera, en el ao de 1986, el

territorio poblado de Quito ocupaba alrededor de
7.060 hectreas, mientras que en el ao 2010
lleg a ocupar alrededor de 23.846

hectreas.

Este crecimiento poblacional acompaado del

fenmeno

de urbanizacin ha provocado que

cada ao se resten alrededor de 730 hectreas

de cobertura vegetal nativa por otros usos del

condiciones ambientales, al contribuir con

problemas como el efecto invernadero y el

calentamiento global, sino que tambin tienen
impacto

sobre

los

aspectos

sociolgicos,

polticos, ecolgicos, culturales, tcnicos, adems

de daos sobre la salud de la gente. Muchos ms
son los inconvenientes que puede acarrear la falta
de reas verdes, sin embargo los citados son los
ms importantes.

suelo, siendo los ms importantes la vivienda,

Para la reforestacin y ornamentacin del DMQ, el

industria,

municipio cuenta con la existencia de viveros,

viabilidad,

recreacin,

agricultura,

entre otros. (Diario La Hora, 2011).

donde se producen por mtodos convencionales,

La Direccin Metropolitana de Parques y Jardines

en el ao 2008 afirm que la relacin de espacios
verdes por cada individuo era muy baja, a pesar
de la presencia de los parques metropolitanos del
norte y del sur, siendo alrededor de 15 m2 por
habitante. Tambin constataron la existencia de
zonas puntuales con escasez de superficies
verdes, como por ejemplo, el sur de Quito donde
hay reas sin rboles, sin arbustos y sin plantas
(Diario La Hora, 2008).

como siembra de semillas y cultivo de estacas

alrededor de 300.000 plantas por ao, cantidad
que no abastece la demanda. Por este motivo se
vio la necesidad de implementar otras maneras de
produccin de plntulas, tomando las tcnicas
biotecnolgicas y especficamente las del cultivo
de tejidos como una alternativa (El Comercio,
2009).
MATERIALES Y METODOS
Material

vegetal:

Se

inducida por la falta de cuidado ambiental por

seleccionaron

parte de los quiteos, al arrojar basura a las

cercanos al pice, posteriormente se separaron

laderas y quebradas, destruir plantas, cortar los

las hojas dejando una porcin de peciolo para

rboles e incendiar los bosques (Burbano &

proteger a la yema axilar, seguida se realizaron

Herdoza, 2009).

ms cortes para dividir la rama en unidades

metrpoli, ha provocado que la

visin

de

hortensia

brotes

adventicios

los

de

los

La prdida de espacios verdes tambin ha sido

Adems la presencia masiva de automviles en la

jvenes

tomaron

segmentos

nodales

se
ms

nodales de un tamao alrededor de 2 a 3 cm (Fig.

2.3).

Resultados
Los resultados obtenidos de las pruebas con los
antibiticos fueron evaluados mediante un diseo
completamente al azar (DCA), por medio del cual
se determin la concentracin de kanamicina y
estreptomicina adecuada para el control de
microorganismos en el medio. Las variables
dependientes evaluadas en esta etapa fueron la
Medio de cultivo
Seguidamente
desinfeccin

contaminacin, necrosis y viabilidad de los

como

complemento

planteada,

para

la

explantes en el medio de cultivo mientras que la

controlar

la

variable

contaminacin endgena reportada en ensayos

preliminares,

en

condiciones

estriles

se

independiente

correspondi

la

concentracin de antibiticos que se adicion.

Diseo del experimento

sembraron a los explantes en un medio de cultivo

diferentes

Los tratamientos que el DCA arroj fueron 7

concentraciones de mezclas de antibiticos

correspondiente a las 7 concentraciones de

(kanamicina-estreptomicina) (0.08 mg.L-1, 0.12

antibiticos ensayados por cada uno (0.08 mg.

mg.L-1, 0.16 mg.L-1, 0.2 mg.L-1, 0.3 mg.L-1, 0.4

1, 0.12 mg1., 0.16 mg. 1, 0.03 mg. 1, 0.04

mg.L-1, 0.5 mg.L-1). El medio contena las

mg 1, 0.05 mg 1, mostrado en la tabla 2.1 por

vitaminas de MS (Phytotechnology), 30 g.L-1 de

cada tratamiento se realizaron diez repeticiones.

sacarosa y 4 g.L-1 de phytagel (Sigma). Con la

Tabla 2.1 Tratamientos planteados para el DCA de la

etapa
de
desinfeccin
del
cultivo
in vitro de Hydrangea macrophylla.

MS,

suplementado

con

ayuda de un potencimetro (Jenway), se ajust el

pH del medio a 5.8 0.02 antes de aadir el
gelificante. El medio de cultivo fue esterilizado

TRATAMIENTOS

durante 20 min a 121 C en una autoclave

horizontal (Tuttnauer 2540 M).
Etapas de desinfeccin de los explantes para
el establecimiento in vitro
A

continuacin,

dentro

de

una

bajo

condiciones

cmara

de

KANAMICINA

ESTREPTOMICINA

T1

0.08

0.08

T2

0.12

0.12

T3

0.16

0.16

T4

0.2

0.2

T5

0.3

0.3

T6

0.4
0.5

0.4
0.5

T7

aspticas

flujo laminar

ANTIBIOTICOS (. )1

Variables

(Streamline) y usando instrumentos estriles, se

procedi a sumergir a los explantes en etanol al

Las

variables

70% durante un minuto. Luego de eliminar el

de la fase de desinfeccin correspondieron al

alcohol se aplic Clorox al 40% (hipoclorito de

porcentaje

sodio al 2%) durante 10 min. Por ltimo se lavaron

contaminadas, necrosadas y viables. El mejor

a los explantes 3 veces con agua destilada estril

tratamiento fue seleccionado en base al mayor

de

de

respuesta

unidades

para

el

DCA

experimentales

nmero de explantes viables que pasaron a la

siguiente fase. Estas variables fueron evaluadas

mediante observacin a los 7, 14, 21 y 28 das

Los datos generados de estos ensayos se

despus de la siembra de los explantes.

analizaron mediante un diseo de bloques

Etapas del establecimiento de in vitro de los

explantes de hortensia

completamente

azar (DBCA),

por medio

del cual se determin la concentracin de BAP

y

Para la etapa de establecimiento se tuvo que

al

el

medio

de

cultivo

ptimo

para

el

establecimiento de los explantes.

volver a repetir todos los procesos anteriores,

aplicando el mejor mtodo de desinfeccin
obtenido gracias al anlisis previo. En esta fase
los explantes desinfectados fueron sembrados
en condiciones estriles en dos tipos de medio de
cultivo, un MS convencional y un MS a la mitad de
su concentracin (MS/2), como se muestra en la
figura 2.5 A. En ambos medios se adicionaron el

Las variables dependientes correspondieron a la

longitud de vstago formado a partir de la yema
axilar y a la contaminacin y sobrevivencia de los
mismos en el medio de cultivo, mientras que la
variable

independiente

correspondi

la

concentracin de BAP agregado en el medio de

cultivo.

RCV BAP (0 mg.L-1, 0.25 mg.L-1, 0.5 mg.L-1, 0.75

Se utilizaron 6 concentraciones de BAP para cada

mg.L-1, 1 mg.L-1, 1.25 mg.L-1). Los medios fueron

medio de cultivo planteado (0 mg.L-1, 0.25 mg.L-

suplementados con vitaminas de MS, 0.12 mg.L.1

1, 0.5 mg.L-1, 0.75 mg.L-1, 1 mg.L-1, 1.25 mg.L-

de kanamicina, 0.12 mg.L.1 de estreptomicina, 30

1), generando un total de 12 tratamientos (Tabla

g.L-1 de sacarosa y 4 g.L-1 de phytagel.

2.2). Se realizaron 10 repeticiones por cada uno.

Con la ayuda de un potencimetro, se ajust el pH

Tabla 2.2 Tratamientos planteados para el DBCA en

medio MS y MS/2 de la etapa de establecimiento del
cultivo in vitro de Hydrangea macrophylla.

del medio a 5.8 0.02 antes de aadir el phytagel.

El medio de cultivo fue esterilizado durante 20 min

TRATAMIENTOS

a 121 C en una autoclave horizontal. Los

antibiticos filtrados fueron aadidos luego de
autoclavar el medio de cultivo bajo condiciones
aspticas en una cmara de flujo laminar.
El material vegetal se incub en una sala cuya
temperatura se mantuvo en 25 C con un

MS

MS/2

T1
T2
T3
T4
T5
T6

T7
T8
T9
T10
T11
T12

BAP (mg.L )
0
0.25
0.5
0.75
1
1.25

fotoperiodo de 12 h luz y 12 h de oscuridad.

Las concentraciones planteadas para el RCV BAP
fueron propuestas en base al anlisis de ensayos
anteriores. Se eligi el rango en el cual se
observ mejores resultados.

Etapas de la propagacin clonal de Hydrangea

macrophylla

Con

la

ayuda

del

estudio

previo

de

establecimiento, se logr determinar cul era el

En la fase de introduccin es importante analizar

medio de cultivo y la concentracin de BAP ms

los cambios que provoca la adicin de citoquininas

adecuada, con los que se lograba producir

ya que estas son las que ayudan a que se induzca

plntulas de mejores caractersticas. De esta

la brotacin de la yema axilar presente en el

manera se estableci una cantidad necesaria de

segmento nodal (Roca & Mroginsky, 1993).

explantes, para llevar a cabo el estudio de la

siguiente fase, la de propagacin.

Los brotes fueron cortados y preparados para su

siembra (figura 2.6 A), en un medio de cultivo MS
con vitaminas de gamborg a la mitad de su
concentracin (MSVG/2),

suplementado

con

diferentes cantidades de citoquininas, BAP y KIN

(0 mg.L-1, 0.5 mg.L-1, 1 mg.L-1, 1.5 mg.L-1, 2
mg.L-1, 3 mg.L-1, 4 mg.L-1, 6 mg.L-1). Los medios
fueron

enriquecidos

con

0.12

mg.L.1

de

kanamicina, 0.12 mg.L.1 de estreptomicina, 30

Resultados de la contaminacin, viabilidad y

necrosis

g.L-1 de sacarosa, 4 g.L-1 de phytagel, 1.66 mg.L1 de AG3 y 0.2 g.L-1 de carbn activado. Con la

Como se puede observar en la tabla 3.1, los

ayuda de un potencimetro, se ajust el pH del

porcentajes

medio a 5.8 0.02 antes de aadir el phytagel. El

necrosis fueron muy variables, obtenindose el

medio de cultivo fue esterilizado durante 20 min a

mayor porcentaje de viabilidad, del 90%, en el T2

121

Los

(0.12 mg.L-1), mientras que el menor se logr en

antibiticos filtrados fueron aadidos luego de

el T6 (0.4 mg.L-1) con un 30%. Con respecto a

autoclavear

bajo

la variable contaminacin el T6 (0.4 mg.L-1)

condiciones aspticas en una cmara de flujo

report el mayor porcentaje (70%), y el T2 (0.12

laminar.

mg.L-1) por otro lado mostr estar libre de

en

una

el

autoclave

medio

horizontal.

de

cultivo

de

viabilidad, contaminacin y

contaminacin. Por ltimo, la tabla indic que no

El material vegetal se incub en una sala cuya
temperatura se mantuvo en 25 C con un
fotoperiodo de 12 h luz y 12 h de oscuridad (figura

existe un alto ndice de prevalencia de la variable

necrosis en todos los tratamientos, solo el 2 y el 5
obtuvieron un 10% de necrosis.

2.6 B)
Tabla 3.1 Porcentajes de necrosis, contaminacin y

El medio MSVG/2, los RCV y sus concentraciones

viabilidad, correspondientes a cada tratamiento con

utilizadas, se plantearon debido a resultados

antibiticos en medio MS, de la etapa de desinfeccin.

obtenidos en anlisis anteriores, con los cuales se

mostr tenan mayor
propagacin

de

influencia

Hydrangea

en

Tratamiento

la

Necrosi Contaminaci Viabilida

Kanamic
Estreptomicin s (%)
n (%)
d (%)
ina -1
a -1 (mg.L )
(mg.L)

corroborados

tambin en los estudios propuestos por Dahab

(2007).
Ensayos preliminares
En la primera prueba de diagnstico realizada en
base a una desinfeccin muy leve, se pudo
constatar que el ensayo present un 100% de
contaminacin, razn por la cual se comenz a
probar con concentraciones de desinfectantes
mucho ms altas. Se logr la eliminacin de los
patgenos exgenos sin embargo se presenci
una infeccin de tipo endgena (figura 3.1).

T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7

0.08
0.12
0.16
0.2
0.3
0.4
0.5

0.08
0.12
0.16
0.2
0.3
0.4
0.5

0
10
0
0
10
0
0

30
0
30
20
40
70
20

70
90
70
80
50
30
80

Porcentaje de contaminacin bacteriana y

El resumen de los porcentajes del tipo de

fngica

contaminacin se muestra en la figura 3.4.

Tabla 3.2 Porcentajes de contaminacin de tipo

fngica y bacteriana en cada uno de los
tratamientos de desinfeccin.

Tratamiento

Contaminacin
-1

-1

Kanamicina Estreptomicin

Hongo Bacteria
(%)

(%)

(mg.L )

a (mg.L )

T1

0.08

0.08

66.67

33.33

T2

0.12

0.12

T3

0.16

0.16

100

T4

0.2

0.2

100

T5

0.3

0.3

75

25

explantes descartados, ya no por tratamiento, de

T6

0.4

0.4

100

los tipos de contaminacin vamos a corroborar

T7

0.5

0.5

50

50

Figura 3.4 Porcentajes de contaminacin bacteriana y

fngica de cada uno de los tratamientos planteados en
la fase de desinfeccin.

Si se realiza un anlisis global del total de

que existe ms la presencia de contaminacin

de tipo fngica (85.71%), que de tipo bacteriana
(14.28%), como se puede denotar en la tabla 3.3

Como se presume en la tabla, el tipo de

contaminacin

que

se

present

en

mayor

porcentaje fue de tipo fngica, la cual se encontr

en casi todos los tratamientos, con excepcin de
T2 (0.12 mg. L-1)
Los tratamientos con mayor contaminacin por

y la figura 3.5.
Tabla

3.3 Porcentajes globales de contaminacin

fngica y bacteriana del total de explantes descartados

de la etapa de desinfeccin.

Descartados
100

Hongo
85.71

Bacteria
14.29

hongos, con el 100% de prevalencia fueron el

T3 (0.16 mg.L-1), T4 (0.2 mg.L-1) y T6 (0.4 mg.L-

Discusin

1), seguido por el T5 (0.3 mg.L-1) con el 75% y el

T1 (0.08 mg.L-1) con el 66.67%.

En ensayos preliminares se observ que al

realizar

El tratamiento que mostr menor contaminacin

fngica fue el T7 (0.5 mg.L-1) con el 50% de
aparicin, junto con el T2 (0.12 mg.L-1) que no
tuvo la presencia de hongos.
En el caso de la contaminacin bacteriana la
incidencia fue muy baja en todos los tratamientos,
el T7 (0.5 mg.L-1) mostr un 50%, el T1 (0.08
mg.L-1) un 33.33% y el T5 (0.3 mg.L-1) un 25%.

el

cultivo

in

vitro

de Hydrangea

macrophylla surgi la presencia de contaminacin

tanto exgena originaria de la superficie de los
explantes como endgena procedente del interior
de los tejidos de la planta.
El xito de las tcnicas en cultivo de tejidos se
basa en gran medida en el control y la prevencin
de la contaminacin. Los contaminantes ms
frecuentes son los hongos filamentosos, las

bacterias y las levaduras; muchos de ellos no

3. La contaminacin que se present en mayor

provocan daos a las plantas en campo y sin

proporcin fue de tipo fngica, obteniendo un

embargo se convierten en patgenos in vitro. El

porcentaje global de 85.71%.

mayor problema es que compiten con las vitro

plantas por los nutrientes del medio y les
inducen daos directos o indirectos por la
colonizacin de sus tejidos o la expulsin al medio
de cultivo de metabolitos txicos (Prez, 1998).

propuesto

una

serie

del medio de cultivo MS/2 ms 0.5 mg.L-1 de BAP

demostr tener la mayor eficiencia, reportando
una media de crecimiento de los explantes de 1.88
cm.

Para prevenir o eliminar la contaminacin se

han

4. En la etapa de establecimiento, la combinacin

de alternativas

diferentes que comprenden desde el incremento

de las medidas de asepsia, tratamiento de las
plantas donantes, hasta la siembra de las
plntulas en un medio de cultivo adicionado con

5. En la fase de multiplicacin, el medio de cultivo

MSVG/2 adicionado con 4 mg.L.1 de BAP gener
la mayor cantidad de nmero de brotes (24
brotes), adems report un ndice de propagacin
de 2.67 propgulos por explante y un porcentaje
de induccin del 80%.

productos antimicrobianos de origen sinttico o

6. La KIN en la etapa de propagacin indujo la

natural (Prez, 1998).

brotacin a concentraciones altas, mientras que el

La

contaminacin

superficial

se la elimin

gracias al uso de desinfectantes usualmente

utilizados para el cultivo de tejidos, sustancias que
a la vez no pudieron actuar en contra de la

BAP actu a concentraciones ms bajas, por lo

tanto, el uso del KIN para multiplicar esta especie
no fue apropiado y generara altos costos de
produccin.

infeccin endgena, razn por la cual en esta fase

el diseo experimental se bas en encontrar una

7. El tratamiento que indujo la formacin de races

concentracin de kanamicina y estreptomicina

en mayor proporcin fue en el que se utiliz el

necesarias para alcanzar el establecimiento in

medio de cultivo MS/2 sin el suplemento de auxina

vitro de esta especie.

AIB (0 mg.L-1), nicamente bast la adicin de 0.2

g.L-1 de carbn activado. Se logr obtener un

Conclusiones

porcentaje de plntulas enraizadas de 87.5%.

1. En la fase de desinfeccin, el mayor porcentaje

de viabilidad fue observado en el T2, en el que se
utiliz

0.12

estreptomicina,

mg.L-1

de

alcanzando

kanamicina
un

90%

y
de

8. Los costos de la etapa de enraizamiento fueron

mucho menores, debido a que no se us ningn
tipo de regulador de crecimiento, lo que benefici
en general a todo el proceso de micropropagacin.

sobrevivencia y con respecto a la variable

contaminacin demostr no tener incidencia,

LITERATURA CITADA

efectuando un control adecuado.

Alvarez, R., Cabrera, M., & Sosa, N. (2009).

2. No existi un alto ndice de la variable

Manchas foliares de la hortensia (Hydrangea

necrosis en todos los tratamientos ensayados

Sp.)

en la etapa de desinfeccin.

Recuperado

en

el

nordeste
el

de

la

Argentina.

2012,

http://www.unne.edu.ar/Web/cyt/cyt/agrarias/a042.pdf

de

Anderson, N., Weiland, J., Pharis, J., Gagn, W.,

http://ciac2ecuador.blogspot.com/2010/propagaci

Janiga, E., & Rosenow, M. (2009).

on-vegetal_06.html

Comparative forcing of Hydrangea macrophylla

Codarin, S., Galopin, G., & Chasseriaux, G.

Bailer

(2006). Effect of air humidity on the growth and

as

florists

hydrangea. Scientia

Horticulturae, 122, 221-226.

morphology

Armitage, P., & Berry, G. (1997). Estadstica para

of

Hydrangea

macrophylla

L.

Scientia Horticulturae, 108, 303309.

la investigacin biomdica. Madrid: Harcourt

Dahab,

Brace.Burbano, D., & Herdoza,

Hydrangea macrophylla Thunb. Arab J. Biotech,

N.

(2009).

La

biodiversidad

Metropolitano de Quito,

del

un

explorar. Recuperado el

Distrito

tesoro por
2012,

T.

(2007).

In

vitro propagation

of

10, 161-178.
Denuncias verdes. (2008). La importancia de

de

los

rboles.

Recuperado

el

2012,

de

http://www.quitoambiente.com/downloads.pdf

http://masespaciosverdes.blogspot.com

Cabrera, M., Alvarez, R., Cundom, M., &

Diario La Hora. (2008). Quito tendr un milln de

Gutirrez, S. (2009). Enfermedades que afectan

plantas de laboratorio. Recuperado el 2012, de

http://www.lahora.com.ec/index.php/noticias/show

Hydrangea

macrophylla

en

Corrientes,

Argentina. Corrientes: UNNE.

.html

Carvalho, A. (2010). Plantas y sabidura popular

Diario La Hora. (2011). Quito pierde espacio

del Parque Natural de Montesinho: un estudio

verde.

etnobotnico en Portugal. Madrid: CSIC.

http://www.lahora.com.ec/index.php/noticias/show

Cassells, A., & Tahmatsidou, V. (1996). The

Recuperado

el

2012,

de

/11012178.html

influence of local plant growth conditions on non-

Durn,

fastidious bacterial contamination of meristem-tips

Hydrangeaceae. Veracruz: Instituto de ecologa,

of Hydrangea cultured in vitro. Plant Cell, Tissue

A. C. Universidad de California.

and Organ Culture, 47, 15-26.

C.

(1999).

Flora

de

Veracruz.

El Comercio. (2009). 25 plantas nativas se

Cerbah, M., Mortreau, E., Brown, S., Siljak, S.,

estudian en Quito. Recuperado el 2012, de

Bertrand, H., & Lambert, C. (2001).

http://www.elcomercio.com/noticias/plantas-

Genome size variation and species relationships in

nativas-estudian-Quito_0_80392186.html

the genus Hydrangea. Theor Appl Genet, 103,

El Universo. (2011). Dficit de reas verdes

4551.

persiste, pese a que se suman proyectos.

Chawla,

H.

(2004).

Introduction

to

Plant

Recuperado

el

2012,

de

http://www.eluniverso.com/2011/07/09/1/1445/def

Biotechnology. Enfield: Science Publishers.

icit-areas-verdes-persiste-pese-sumanCIAC. (2008). Proyecto CIAC. Quito: Gerencia de

proyectos.html

Parques y Jardnes.
Empresa Pblica Metropolitana de Movilidad y
CIAC. (2010). Centro de investigacin ambiental

Obras Pblicas. (2011). Empresarios y municipio

de

se unen por un Quito verde. Recuperado

Cununyac.

Recuperado

el

2012,

de

el

2012,

de

http://www.noticiasquito.gob.ec/Noticias/news

Jrgensen, P., Neil, D., & Len, S. (1999).

Catalogue of the vascular plants of Ecuador. San

Esquivel, A., & Escalant, J. (1994). Conceptos

Luis: Missouri Botanical Garden Press.

bsicos del cultivo de tejidos vegetales. Turriaiba:

Kesumawati,

CATIE.

Hosokawa, M., & Yazawa, S. (2006).

Estvez, E. (2010). Poblacin y proyeccin del

Correlation of

Distrito Metropolitano de Quito.

Hydrangea macrophylla with green- flowering

Recuperado

el

2012,

de

E.,

Kimata,

T.,

Uemachi,

T.,

phytoplasma concentration in

stability. Scientia Horticulturae, 108, 74-48.

http://sthv.quito.gob.ec/images/indicadores/2010.

Kitamura, Y., Hosokawa, M., Uemachi, T., &

pdf

Yazawa, S. (2009). Selection of ABC genes for

Fernndez, M. (1996). Degradacin ambiental,

riesgos

urbanos

desastres. Recuperado el

2012,

de

http://www.desenredando.org/public/libros/1996
Galopin, G., Codarin, S., Viemont, J., & Morel, P.
(2008). Architectural development of inflorescence
in

Hydrangea

macrophylla

cv.

Hermann

E.

(1999).

Institute

of

food

Hydrangea

and

macrophylla.

agricultural

hydrangea floral organs induced by phytoplasma

infection. Scientia Horticulturae, 122, 603609.
Len, X., & Naranjo, A. (2005). Es el espacio
pblico cada vez ms privado? Recuperado el
2012,

de

http://bibliotecavirtual.clacso.org.ar/ar/libros/ecua
dor.pdf

Dienemann. HortScience, 43, 361365.

Gilman,

candidate genes of morphological changes in

sciences-

University of Florida, 1-3.

Levitus, G., Echenique, V., Rubinstein, C.,

Hopp, E., & Mroginski, L. (2010).
Biotecnologa y mejoramiento vegetal II. Buenos

Gmez, F. (2005). Las zonas verdes como calidad

Aires: INTA.

de vida en las ciudades. Recuperado el 2012, de

Liu,

http://burgosciudad21.org/adftp/zonasverdes.pdf

Jongsma,

Hagan, A., & Mullen, J. (2001). Diseases of

Hydrangea.

Recuperado

el

2012,

de

F.,

Huang,
M.,

L.,

Li,

L.,

Reinhoud,

& Wang,

C.

(2011).

P.,

Shoot

organogenesis in leaf explants of Hydrangea

macrophylla Hyd1 and assessing genetic stability
of regenerants using ISSR markers. Plant Cell Tiss

http://www.aces.edu/pubs/docs/A/ANR

Organ Cult, 104, 111117.

1212/ANR-1212.pdf
Harling, G., & Andersson, L. (1992). Flora of

Marin, A., Boudabous, M., Lorente, P., Garca, E.,

Andreu, P., & Arbeloa, A. (2010). Saneamiento in

Ecuador. Sweden: University of Guteborg.

vitro de 'Douce de Djerba', una variedad de

ITIS, I.T.(2012). Catalogue of life. Recuperado el
2012,

manzano micropropagada.

de

http://www.catalogueoflife.org/col/details/species/i
d/7055669
Jha, T., & Ghosh, B. (2005). Plant tissue culture.
Basic and applied. Hyderabad: Universities Press.

ITEA-Informacin Tcnica Econmica Agraria,

106, 303-307.
Mmbaga, M., Kim, M., Mackasmiel, L., & Li, Y.
(2012). Evaluation of Hydrangea macrophylla for

resistance to leaf-spot diseases. Journal of

(Thunb.) Ser and Allium cepa Linn. against some

phytopathology, 160, 8897.

pathogenic fungi. Plant Archives, 11, 37-41.

Nordlia, E., Strmb, M., & Torrea, S. (2011).

Salvador, P. (2009). La planificacin verde en las

Temperature

ciudades. Arquitectura del paisaje, 123, 12-20.

and

morphology

and

greenhouse

grown

photoperiod
flowering

control

time

Hydrangea

in

of
two

macrophylla

cultivars. Scientia Horticulturae, 127, 372377.

Ochoa,

J.

instrumento

(1999).
para

el

microclimtico.

Barcelona: UPC.

de plantas por biotecnologa. Santa Clara, Cuba:

Instituto de biotecnologa de las plantas.

superiores. Madrid: Mundi-Prensa.

Ramos, J. (1996). El papel del sistema de
espacios verdes en la multifuncionalidad del
paisaje urbano. Aplicacin al rea meytropolitana
Recuperado

el

2012,

de

http://www.apgeo.pt/files/docs/CD_X_Coloquio_Ib
erico_Geografia/pdfs/029.pdf
Razdan, N. (2003). Introduction to plant tissue
culture. Enfield: Science Publishers.
Rinehart, T., Schefer, B., & Reed, S. (2006).
Genetic

diversity

estimates

for

the

genus

Hydrangea and development of a molecular key

based on SSR. J. Amer. Soc. Hort. Sci. 131, 787
797.
Roca, W., & Mroginsky, L. (1993). Cultivo de
tejidos

en

la

Smith, K., Chenault, J., & Tilt, K. (2010).

agricultura.

Recuperado

el

2012,

de

www.aces.com.
Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007).
Introduccin a la microbiologa. Buenos Aires:

Pierik, R. (1990). Cultivo in vitro de las plantas

Sevilla.

sepals. Biometals, 24, 10051015.

Hydrangeas.

Prez, J. (1998). Propagacin y mejora gentica

de

K., & Cain, J. (2011). Role of aluminum in redto-blue color changes in Hydrangea macrophylla

La vehetacin como
control

Schreiber, H., Jones, A., Lariviere, C., Mayhew,

Fundamentos

aplicaciones. Cali: CIAT.

Ros, S. (2006). La empresa de jardinera y
paisajismo. Madrid: Mundi Prensa.
Sagar, A., Joshi, M., & Srivastava, B. (2011). Study
of antifungal activity of Hydrangea macrophylla

Mdica Panamericana.