Medio de cultivo

Consistencia

Posicin
enfriamiento
Horizontal
Horizontal
Inclinada
Inclinada

Liquido

Condiciones
de Mtodo de siembra
esterilizacin
121 C x 15 min
Picadura
121 C x 15 min
Picadura
121 C x 12 min
Cola de pescado
121 C x 15 min
Picadura y Cola de
pescado
121 C x 15 min
Picadura y Cola de
pescado
118 C x 15 min
Dilucin en el medio

MIO
SIM
LIA
AHK

Semislido
Semislido
Slido
Slido

Citrato de Simmons

Slido

Caldo RM-VP
Caldo KNO3

Liquido

121 C x 15 min

Dilucin en el medio

Horizontal

Caldo BRT
I. Dextrosa
II. Sacarosa
III. Lactosa

Liquido

118 C x 15 min

Dilucin en el medio

Horizontal

Liquido
Liquido

118 C x 15 min
118 C x 15 min

Dilucin en el medio
Dilucin en el medio

Horizontal
Horizontal

IV. Fructosa
Fenilalanina
Caldo UREA

Liquido
Slido
Liquido

118 C x 15 min
121 C x 15 min
108 C x 10 min

Dilucin en el medio
Cola de pescado
Dilucin en el medio

Horizontal
Inclinada
Horizontal

Inclinado
Horizontal

PROCEDIMIENTO #2

1) Pesar en un vaso de precipitado 1.69 g de citrato de Simmons y agregar 70

ml de agua destilada.

2) Pesar en un vaso de precipitado 3.64 g de AHK y agregar 70 ml de agua

destilada.

3) Hacer tapones de algodn.

Fig. 26 y 27, tubos con tapones de algodn.

de

4) Poner ambos vasos en una parrilla electica, colocar el magneto dentro del
vaso y esperar a que hierva.

Fig. 28 y 29, citrato de Simmons y AHK

5) Esperar a que tengan una temperatura media.

6) Vaciar el medio a cada tubo de ensayo.
7) Marcar cada tubo con el medio de cultivo.

Fig. 30 y 31, tubos marcados.

8) Esterilizar segn se indique.

Fig. 32, esterilizacin en autoclave.

9) Enfriar en las posiciones indicadas los medios de cultivo.

Fig. 33, regulacin de temperatura.

10) Esterilizar a flama el asa de platino, tomar una colonia microbiana y

sembrarla en cada uno de los tubos segn se indique.

Fig. 34, esterilizacin de asa de platino.

11) Incubar los medios.

Fig. 35 y 36, inoculacin de medios.

Identificacin de entereobacterias.

La mayor parte de las pruebas usadas para evaluar la actividad bioqumica o

metablica de bacterias (por medio de la cual puede hacerse una identificacin
final de especie), se lleva a cabo mediante el subcultivo del aislamiento primario
en una serie de medios diferenciales, cuyos resultados pueden interpretarse
despus de uno o dos das de incubacin.

Desde
<https://www.academia.edu/4858992/Atlas_de_pruebas_bioquimicas_para_identifi
car_bacterias>

FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS

La fermentacin es un proceso metablico de xido-reduccin que ocurre en un

medio ambiente anaerobio y, en lugar de oxgeno, un sustrato orgnico sirve como
el aceptor final de hidrgeno (electrones). En los sistemas de prueba
bacteriolgicos, este proceso se detecta observando cambios de color en
indicadores de pH a medida que se forman productos cidos.

Las bacterias que fermentan un hidrato de carbono son por lo general anaerobios
facultativos. Por medio del proceso de fermentacin un hidrato de carbono es
degradado y descompuesto en dos molculas de carbono (triosas) que son
nuevamente degradadas en un nmero de compuestos de 1,2, 3 y 4 carbonos.
Los productos finales varan con cada especie bacteriana y depende del sistema
enzimtico existente en la especie y las condiciones del medioambiente.

El ms importante ciclo fermentativo de la degradacin de la glucosa es el ciclo de

Embden - Meyerhof aun cuando ste tambin puede producirse por la derivacin
de pentosa o el ciclo de Entner - Duodoroff. Pueden utilizarse diversos hidratos de
carbono. La bacteria usada depende de las dificultades que se presenten para
identificar un organismo determinado.

Utilizando un indicador de pH con un determinado hidrato de carbono puede

determinarse si una bacteria ha degradado el mismo en varios productos
terminales, observando un cambio de color visible en el medio