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Introduccin

El crecimiento microbiano se pude considerar como el aumento ordenado de


todos los constituyentes qumicos de un organismo, lo cual, para los
organismos unicelulares, conduce a un aumento del nmero de individuos en la
poblacin.
Se puede considerar el crecimiento al nivel de individuos dentro de una
poblacin (ciclo celular) o el crecimiento de poblaciones celulares (ciclo de
crecimiento). El crecimiento de las poblaciones celulares se puede subdividir en
sistemas cerrados, como el cultivo intermitente y en sistemas abiertos, como el
cultivo alimentado por lotes y el cultivo continuo.
Para determinar el nmero total de clulas de un cultivo, el mtodo de eleccin
es el recuento microscpico directo. Para clulas de levadura, puede emplearse
un hemocitmetro. Es necesaria una ampliacin de 100X a 400X para visualizar
la cmara de recuento y las clulas en suspensin. Para clulas bacterianas se
usa frecuentemente una cmara de Petroof-Hauser o una de Neubauer y una
ampliacin de 1000X a causa del pequeo tamao de las bacterias. El
recuento microscpico directo tiene la ventaja de que permite observar
directamente la morfologa de las clulas estudiadas. Las morfologas
aberrantes o atpicas podran indicar unas condiciones inapropiadas de
crecimiento o la presencia de un genotipo o fenotipo alterados.
El mtodo ms usado para medir el crecimiento microbiano es secar
volmenes conocidos de cultivo celular lentamente hasta obtener un peso
constante. Cuando se trata de clulas que sedimentan rpidamente, como las
levaduras, esto usualmente implica centrifugacin de muestras del cultivo en
tubos de centrfuga pre-pesados. Para clulas bacterianas difciles de
concentrar por centrifugacin, las muestras de cultivo se filtran a travs de
membranas hidroflicas con un tamao de poro de 0,2 m.
Otro mtodo muy utilizado es la determinacin de biomasa por densidad
ptica. Se aprovecha la proporcionalidad de la densidad ptica a la masa
celular, cuando no se tienen en el medio de fermentacin otros slidos en
suspensin. Este mtodo se basa en la Ley de Beer y Lamberty; en este caso,
se asume que la absorcin del rayo incidente es proporcional a la
concentracin de clulas presentes.

Objetivos
General
Desarrollar la habilidad para medicin la biomasa microbiana que interviene en
los bioprocesos.
Especficos

Aplicar la tcnica de recuento en cmara de Neubauer y de medicin de


biomasa por densidad ptica.
Correlacionar los datos de Neubauer y densidad ptica con la biomasa del
microorganismo en estudio.
Comparar con otros mtodos utilizados para la medicin de la biomasa
microbiana.

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