El crecimiento microbiano se pude considerar como el aumento ordenado de
todos los constituyentes qumicos de un organismo, lo cual, para los organismos unicelulares, conduce a un aumento del nmero de individuos en la poblacin. Se puede considerar el crecimiento al nivel de individuos dentro de una poblacin (ciclo celular) o el crecimiento de poblaciones celulares (ciclo de crecimiento). El crecimiento de las poblaciones celulares se puede subdividir en sistemas cerrados, como el cultivo intermitente y en sistemas abiertos, como el cultivo alimentado por lotes y el cultivo continuo. Para determinar el nmero total de clulas de un cultivo, el mtodo de eleccin es el recuento microscpico directo. Para clulas de levadura, puede emplearse un hemocitmetro. Es necesaria una ampliacin de 100X a 400X para visualizar la cmara de recuento y las clulas en suspensin. Para clulas bacterianas se usa frecuentemente una cmara de Petroof-Hauser o una de Neubauer y una ampliacin de 1000X a causa del pequeo tamao de las bacterias. El recuento microscpico directo tiene la ventaja de que permite observar directamente la morfologa de las clulas estudiadas. Las morfologas aberrantes o atpicas podran indicar unas condiciones inapropiadas de crecimiento o la presencia de un genotipo o fenotipo alterados. El mtodo ms usado para medir el crecimiento microbiano es secar volmenes conocidos de cultivo celular lentamente hasta obtener un peso constante. Cuando se trata de clulas que sedimentan rpidamente, como las levaduras, esto usualmente implica centrifugacin de muestras del cultivo en tubos de centrfuga pre-pesados. Para clulas bacterianas difciles de concentrar por centrifugacin, las muestras de cultivo se filtran a travs de membranas hidroflicas con un tamao de poro de 0,2 m. Otro mtodo muy utilizado es la determinacin de biomasa por densidad ptica. Se aprovecha la proporcionalidad de la densidad ptica a la masa celular, cuando no se tienen en el medio de fermentacin otros slidos en suspensin. Este mtodo se basa en la Ley de Beer y Lamberty; en este caso, se asume que la absorcin del rayo incidente es proporcional a la concentracin de clulas presentes.
Objetivos General Desarrollar la habilidad para medicin la biomasa microbiana que interviene en los bioprocesos. Especficos
Aplicar la tcnica de recuento en cmara de Neubauer y de medicin de
biomasa por densidad ptica. Correlacionar los datos de Neubauer y densidad ptica con la biomasa del microorganismo en estudio. Comparar con otros mtodos utilizados para la medicin de la biomasa microbiana.