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Informe de Laboratorio No 03
ENSAYOS DE ECOTOXICIDAD CON SEMILLAS DE LECHUGA LACTUCA
SATIVA L EMPRESA CUARTS LTDA.
Aprendices
GINA LIZZETH MORENO CORDERO
ELIANA MILENA SANCHEZ JUISA
MAYRA ALEJANDRA SOTO TABIMBA
Instructor
SONIA MARCELA BUITRAGO MORALES
Marzo 2015
MARCO TEORICO
Introduccin..........................................................................................................2
Objetivos...............................................................................................................3
Objetivo General.................................................................................................3
Objetivos Especficos........................................................................................3
Procedimiento.......................................................................................................4
3.1 Preparacin de la solucin cido brico al 2,5% p/v................................4
3.2.2 Calculos......................................................................................................7
Solucio acido borico al 2.5 % p/v......................................................................8
3.3 Lectura de resultados..................................................................................8
4. Resultados........................................................................................................9
4.1.2 control negativo.........................................................................................9
4.1.2 control positivo..........................................................................................9
4.1.3 Dilucin 0.3%...........................................................................................10
4.1. dilucin 10 %..............................................................................................11
4.1.3 Dilucin 30%............................................................................................12
5. Anlisis de resultados.....................................................................................13
Conclusiones......................................................................................................13
Anexos................................................................................................................14
Anexo A Anlisis Fisicoqumico de agua residual industria curtiembres14
Bibliografa..........................................................................................................15
Introduccin
Se tom una muestra de agua en el proceso de pelambre de la empresa Cuarts
Ltda. Para realizar un bioensayo de ecotoxicidad con semillas de lechuga
Lactuca sativa L, a fin de determinar el grado de afectacin que puede producir
los vertimientos de la organizacin sobre una especie vegetal en su entorno
natural.
La lechuga Lactuca sativa L es una es una planta herbcea propia de las
regiones semitempladas que se cultiva con fines alimenticios, tiene unas
condiciones ptimas de crecimiento, a una temperatura entre -6C y 30C, pH
entre 6 - 7, humedad del 60 - 80%. Se utilizan semillas de lechuga para el
montaje del ensayo debido a que en el perodo de germinacin y los primeros
das de desarrollo de la plntula ocurren numerosos procesos fisiolgicos en los
que la presencia de una sustancia txica puede interferir alterando la
supervivencia y el desarrollo normal de la planta, lo cual facilita medir los efectos
morfolgicos sobre el crecimiento e inhibicin de la misma. (Feliz Perez GarciaUniversidad politecnica de madrid)
Los bioensayos de eco toxicidad se realizan con la finalidad de conocer los
efectos txicos de sustancias qumicas puras o complejas, sobre organismos
vivos, y las concentraciones a las cuales se pueden ver una mortalidad del 50%
de una poblacin. (Maria Cecilia Sombrero y Alicia Ronco, 2008)
Objetivos
Objetivo General
Objetivos Especficos
Procedimiento
Se prepara la
ser de un 99 a 100%.
Fuente: autores
Fuente: autores
3.2.1 Montaje de la prueba
En el montaje de la prueba se realiz un control positivo con cido brico, para
tener una inhibicin de la germinacin, y un control negativo con solo agua
destilada para el crecimiento normal de la poblacin una inhibicin total
Fuente: autores
3.2.2 Clculos
100 ml
100 ml
Porcentajes de germinacin
A continuacin se muestran
% de germinacin
Control negativo
59
3
Control positivo
Porcentaje de inhibicin
X 100
= 19.6 %
% de germinacin =
=0
Dilucin 0.1%
X 100
% de germinacin
33
Dilucin 0.1 %
X 100
= 11%
= 56.1%
19.6
% de inhibicin
Dilucin 0.1%
100- 56.1
X100
Dilucin 0.3%
X 100
= 43.9%
Dilucin 0.3%
59
X100
% de germinacin
=19.6%
3
Dilucin 0.3 % sobre muestra de referencia
% de
19.6
germinacin
19.6
X100
= 100%
Dilucin 0.3 %
% de inhibicin No se obtiene ya que l % de germinacin es
de 100%
Dilucin 10 %
X 100
% de germinacin
Dilucin 10%
57
X 100
= 19.0%
= 97%
19.6
% de inhibicin
Dilucin 30%
Dilucin 10%
100- 97
X100
= 3%
% de germinacin
Dilucin 30%
50
X100
=16,6
Dilucin 30%
% de inhibicin
100 84.6
X100
Dilucin 30% sobre muestra de referencia
% de germinacin
16,6
X 100
= 16.4
= 84.6
19,6
Dilucin 100
X 100
% de germinacin
Dilucin 100%
1
X 100
= 0.33%
3
Dilucin 100% sobre muestra e referencia
% de germinacin
0.33
X100
= 1.70%
19.6
% de inhibicin
Dilucin 100%
100- 1.70
X100
= 98.3
Fuente: autores
4. Resultados
Terminado el tiempo de exposicin se procedi a cuantificar los efectos sobre
las plntulas, a continuacin se presentan los resultados obtenidos
Porcentaje de germinacin
Control
Nmero de semillas
negativo
Replica 1
Replica 2
Replica 3
Total
germinadas
20
20
19
59
Hipoctilo 1
3,5 cm
2,5 cm
2,5 cm
Radcula 1
7 cm
5 cm
3,2 cm
Control positivo
Replica 1
Replica 2
Replica 3
Total
Nmero de semillas
Nmero de
germinadas
semillas no
0
0
0
0
germinadas
20
20
20
60
Nmero de
Nmero de
0.1 %
semillas
Replica 1
Replica 2
Replica 3
Total
semillas no
germinadas
13
20
0
33
germinadas
7
0
20
27
Radcula
7 cm
0 cm
5 cm
Hipocotilo
3,5 cm
0 cm
3 cm
Nmero de
Nmero de
semillas
semillas no
germinadas
19
20
20
59
germinadas
1
0
0
1
Radcula
4.4 cm
3.5 cm
5.5 cm
Hipocotilo
4 cm
3 cm
4 cm
4.1. Dilucin 10 %
Porcentaje de germinacin.
Dilucin 10%
Replica 1
Replica 2
Replica 3
Total
Nmero de
Nmero de
semillas
semillas no
germinadas
19
19
19
57
germinadas
1
1
1
3
Caja
Replica 1
Replica 2
Replica 3
Radcula 1
2.5
5
6
Hipoctilo 1
2.5
3
2.5
Replica 1
Replica 2
Replica 3
Total
Nmero de
Nmero de
semillas
semillas no
germinadas
germinadas
18
15
17
50
2
5
3
8
Dilucin 30%
Replica 1
Replica 2
Replica 3
Hipocolito 1
5 cm
4,5 cm
5 cm
Radcula 1
1,5 cm
1,5 cm
1,5 cm
Dilucin 100%
En esta dilucin la cual es la ms concentrada hubo un % de germinacin del 0%
y % de inhibicin del 100%
Dilucin
Replica 1
Replica 2
Replica 3
Nmero de
Nmero de semillas
semillas
no germinadas
germinadas
1
0
0
19
20
20
Tabla de resultados
Concentracin Calculo
Calculo 2
de la muestra 1
100%
30%
10%
0,30%
0,10%
1/3
50/3
57/3
59/3
33/3
0,33%/19,6*100
16,67%/19,6%100
19%/19,6%100
19,6%/19,6%100
11%/19,6100
Resultado
Resultado
semillas
semillas no
germinadas
1,70
85,03
97
100
56,12
germinadas
98,3
14,47
3
0
43,88
germinadas,
enrollamiento
del
hipocolito
en
algunos
casos,
5. Anlisis de resultados
El control negativo es usado como punto de referencia para el crecimiento
adecuado de las semillas, segn el protocolo para ensayos de toxicidad con
lechuga Lactuca Sativa L, el porcentaje de germinacin debe ser superior al
95%. (Patricia Ramirez Romero - Ania Mendoza Cant, 2008). En el ensayo
realizado se obtuvo un porcentaje de germinacin del 98.33%, esto es debido a
que las semillas, estuvieron en su medio ptimo de crecimiento como lo es el
sustrato hmedo, temperatura, disponibilidad de oxgeno y oscuridad para el
crecimiento de la raz. (Casanova, 2013)
En el control positivo se obtuvo una inhibicin del 100% las semillas, estas
presentan mayor sensibilidad en su etapa de germinacin, donde empiezan los
procesos metablicos para su transformacin en plntula, en esta etapa se da
la absorcin de nutrientes y agua. Cuando estn en una solucin de cido brico
este inhibe su crecimiento debido a que es un compuesto qumico, ligeramente
cido que es usado como antisptico. Los antispticos son sustancias
antimicrobianas, que inhiben el desarrollo de microorganismos por medio de
desnaturalizacin de protenas (es un cambio estructural de las protenas o
cidos nucleicos, donde pierden su estructura nativa, y de esta forma su ptimo
funcionamiento), rotura de membrana celular, eliminacin de grupos sulfhdricos
y oxidacin. Lo que indica que las semillas son un buen indicador de toxicidad en
una muestra. (Maria Cecilia Sombrero y Alicia Ronco)
En la concentracin del 1% de la muestra se obtuvo un resultado del 56.12% de
semillas
de
sustancias
toxicas
(UNIVERSIDAD
POLITECNICA
DE
VALENCIA, 2003).
Conclusiones
Anexos
Parmetro
Mtodo
Resultado
Lmites
permisibles
4.5-9
PH
4500 H
9.5
Conductividad
2510
10 siemens
OD
SAAM
4500-O
5540-C
4.03 ppm
0.44 mg/l
10 mg/l
Cr (V)
3500-Cr
155 mg/l
0.1 mg/l
Grasas y aceites
5520
155 mg/l
100 mg/l
Sol. Sedimentadles
2540 D
3 mg/l
2 mg/l
Sol. Disueltos
2540 D
400 mg/l
600 mg/l
1191 mg/l
800 mg/l
2400 mg/l
1500 mg/l
1000 mg/l
800 mg/l
Sol. Totales
DQO
DBO
Fuentes: autores.
5220
Bibliografa