FERMENTACION

RESUMEN

La practica de laboratorio se desarrollo en dos fases; La primera se caracteriza ser la

conversion de la glucosa en pirutato, en la que se procede utilizando solucion de
glucosa y suspencion de levadura en dos condiciones (alcalina y acida).Esta prueba
requirio 1 hora.La segunda trata de la deteccion del piruvato en la que se toman los
tubos de ensayo con las sustancias utilizadas en el primer proceso y se agrega una
sustancia que permite, por medio de la reaccion expresada en el cambio de la
coloracion, detectar la cantidad de piruvato.

PROCEDIMIENTO
FASE 1: Conversion de la glucosa en piruvato.

FASE 2: Deteccion del piruvato.

DISCUSION DE LOS RESULTADOS

FASE 1: CONVERSION DE LA GLUCOSA EN PIRUVATO

Al crear la solucion de glucosa y levadura ligeramente alcalina o acida en el tubo A y B
respectivamente, y al incubarlos durante una hora a 37C se observo que las
soluciones seguian siendo transparentes sin ningun otro cambio. Se llevaron los tubos
a la incubadora para proporcionarles el medio en el
que se efectuaran las
reacciones referentes al proceso de la glucolisis. Posteriormente se agitaron las
sustancias contenidas en los tubos y se nivelo el volumen de sustancia para que fuera
igual en en los dos sacando unos mililitros y depositandolos en otros tubos de ensayo.
El proceso que se lleva a cabo en esta practica se llama fermentacion. Este se efectua
partiendo de la glucolisis que consiste en una serie de reacciones en la que se
involucran varios intermediarios. La reaccion completa de una molecula de glucosa
produce dos moleculas de piruvato, dos moleculas de ATP y dos moleculas de NADH.
Este ultimo es un cofactor que se encuantra en cantidades cataliticas ( es necesario
reoxidarlo para que no se suspenda el proceso), y es utilizado por la cadena respiratoria
para la obtencion del ATP produciendo de esta forma NAD+.
La glucolisis proporciona una cantidad de piruvato que puede tomar dos rutas
metabolicas anaerobias, eso depende del tipo de celulas que intervengan. Para este
caso de la practica de laboratorio, se utilizaron soluciones alcalina y acida de levadura
respectiamente las cuales a causa de su pH determinaron la cantidad de productos que
se obtuvieron. En este caso se presenta un proceso de fermentacion el cual se
caracteriza por ser una reaccion de obtencion de energia en ausencia de oxigeno en el
que el reactivo inicial es la glucosa y se obtienen como productos una cantidad de
piruvato y otra cantidad de etanol que se deriva de la reaccion del acido piruvico
reducido a acetaldehido y que finalmente produce este alcohol.

La fermentacion alcoholica se caracteriza por que el acido piruvico formado por la

glucolisis se convierte de manera anaerobia en etanol. En este caso se libera dioxido
de carbono y se oxida el NADH reduciendoce a acetaldehido.la fermentacion lactica por
su parte es un proceso al que recurren celulas como la musculares la cuales presentan
deficiencia en la obtencion del oxigeno. Otras celulas como los globulos rojos tambien
recurren a la obtencion de energia por este medio ya que no poseen mitocondrias que
relicen el proceso de respiracion y obtencionde oxigeno. En esta reaccion el NADH se
oxida y el cido pirvico se reduce transformndose en cido lctico.
En cual caso espera que se haya acumulado el piruvato? por que? A causa de
que en esta fase no se ha agregado un reactivo a las soluciones para determinar la
cantidad de piruvato acumulado en cada tubo, se deduce que la mayor cantidad se
encuentra en el tubo A ya que este contiene la solucion alcalina de levadura y el
piruvato tiende a concentrarse.Para poder conseguir la acumulacion del acido piruvico y
poderlo detectar, la fermentacion se lleva a cabo en condiciones ligeramente alcalinas
para inactivar la enzima piruvato descarboxilaza. (En la fase 2 se explica con mayor
detalle este proceso).

En la FASE 2. DETECCION DEL PIRUVATO, se utilizaron los tubos de ensayo A y B

con las respectivas sustancias que se trabajaron en la primera fase. Seguidamente se
adiciono 1ml de 2,4-dinitrofenilhidrazina mezclandose fuertemente. Posteriormente se
aadio a cada tubo un 1ml de NaOH y se observo una coloracion naranja en cada tubo
seguida de turbidez y una presipitacion que se dio minutos mas tarde cuando esto se
encontraban en reposo. En el tubo A que contenia la levadura en condiciones acidas
se precipito el piruvato que poseia un color naranja oscuro quedando el etanol en gran
proporcion con un color naranja muy tenue. En el tubo B que contenia la levadura en
condicion basica o alcalina el el piruvato se precipito en mayor cantidad, presentado un
color naranja oscuro y el etanol se presento en la superficie en una candidad menor en
conparacion a la primer sustancia con una coloracion naranja muy tenue.En este

proceso es claro que la identificacion de la acumulacion de piruvaro se hace por medio

de una prueba cualitatica de color.
Las observaciones anteriores se deben a que los intermediarios metabolicos como el
piruvato se encuentran presentes en bajas concentraciones, po lo tanto para demostrar
su existencia como intermediarios en el proceso metabolico es necesario que se impida
que sean transformados en otro compuestos. Este procedimiento se realiza por medio
del bloqueo de la enzima que cataliza la conversion del compuesto por medio de
inhividores como el pH. Tambien se pueden cambiar las condiciones fisiologicas para
que la enzima fuencione a baja velocidad con referencia a su actividad maxima usando
un agente que atrape el intermediario y que forme un compuesto que no pueda
metabolizarse.
La enzima piruvato descarboxilasa no es activa en soluciones
ligeramente alcalinas como la de la levadura que se agrego en el tubo A de esta
manera el piruvato se acumula y su presencia se demuestra por la reaccion de la
2,4dinitrofenilhidrazina.

OTRA RUTA FERMENTATIVA.

Donde hay mayor produccion de ATP: durante la produccion de lactato o
durante la de etanol y CO2?
En las dos rutas metabolicas de la fermentacion se producen 2 moleculas de ATP.
Lo se observa en las reacciones globales de la refentacion alcoholica y lactica
respectivamente:

En estas la molecula de glucosa reacciona y como resultado se obtienen los

productos entre los en que encuantran las moleulas de ATP presentandose un
rendimiento neto.
Que papel desempea el NAD+ y el NADH durante las fermentaciones lactica
y alcoholica?
En el proceso de conversion de lactato interviene el NADH como una coenzima la
cual es un cofactor organico no proteico, termoestable que unida a una enzima
consforma su forma cataliticamente activa. De igual forma se presenta en la
fermentacion alcoholica.
El NAD+ se reduce a NADH cuando acepta dos electrones agotandose la energia.
Cundo el NADH libera sus electrones se recupera el NAD+, que de nuevo puede
actuar como coenzima.

El NAD+ se regenera para producir NADH utilizado en la glucolisis.

DISCUSION DE GRAFICOS

GRAFICO 1 :
Este grafico explica las 10 reacciones que utiliza la glucolisis
para porduccion de piruvato, las cuales se agrupan en dos fases: Fase1 de
gasto energetico de de hexosas, se caracteriza por ser degradativa, no es oxidativa y
tampoco se produce ATP, por el contrario se consumen dos moleculas de ATP por cada
glucosa. La fase2 de obtencion de energia o fase de las triosas es una etapa oxidativa
en la que se oxida el NAD+ que se transforma en NADH, formandose de esta manera
cuatro moleculas de ATP por transferencia de grupos fosfato al ADP.
GRAFICO 2: Reaccion global de la glucolisis en la que se muestra como 1 molecula de
glucosa en presencia de 2 moleculas de ADP (10 reacciones enzimaticas), 2 moleculas
de NAD+ y 2 moleculas de Pi produce 2 moleculas de piruvato, 2 moleculas de ATP, 2
moleculas de NADH, 2 H+ y 2 moleculas de H2O.
GRAFICO 3: Reaccion del piruvato en el proceso de fermentacion lactica en el que el
piruvato en presencia del NADH y H+ por medio de la enzima lactato deshidrogenasa
produce lactato y NAD+. En esta reaccion el NADH se oxida y el cido pirvico se
reduce transformndose en cido lctico.
GRAFICO 4:Este grafico muestra la reaccion de fermentacion alcoholica a partir del
piruvato producido en la glucolisis. En este proceso 1 molecula de glucosa en
presencia de 2 ADP y 2 moleculas de PI produce 2 moleculas de etanol, 2 moleculas de
CO2 y 2 ATP. Este proceso se desarrolla en medio acido.

CONCLUSIONES

La fermentacion alcoholica es un proceso necesario en la obtencion del etanol

para la fabricacion de vino y otras bebidas alcoholicas. El CO2 que se obtiene
como pruducto en es util en la industria del pan ya que permite que la masa se
expanda.

Mientras mayores sean las condiciones anaerobias. Mayor ser la calidad

de la fermentacin.

La fermentacin de los lquidos azucarados produce alcohol. El grano de

la cebada se fermenta en presencia de levadura y se crea cerveza.

La fermentacin es propia solamente de los microorganismos y de

algunas levaduras.

Se produce la fermentacin en la mayora de las clulas de los animales,

excepto en las neuronas que mueren rpidamente si no pueden realizar la
respiracin celular.

La fermentacin son poco rentables si se compara con la respiracin

aerobia, ya que a partir de una molcula de glucosa solo se obtienen 2
molculas de ATP, mientras que en la respiracin se producen 36.

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