DISEO DE BIORREACTORES I

M Sc Ing NELSON HUGO RAMREZ SICHE

INDICE
I.

BIORREACTORES ........................................................................................................................... 2
1.1.

DEFINICIN. ............................................................................................................................ 4

1.2.

CLASIFICACIN: ..................................................................................................................... 4

1.2.1.

DE ACUERDO A SUS FASES: ......................................................................................... 4

1.2.2.

DE ACUERDO AL METABOLISMO (CLASIFICACIN BIOLGICA). ............................. 4

1.2.3.

DE ACUERDO A SU PROCESO DE OPERACIN:......................................................... 4

1.2.4.

DE ACUERDO A LA MEZCLA: ......................................................................................... 5

1.3.

ELECCIN DEL TIPO DE REACTOR: ..................................................................................... 5

1.4.

DISEO DE BIORREACTORES. ............................................................................................. 5

PRINCIPIOS EN EL DISEO DE BIORREACTORES. .................................................................... 6

DESVENTAJAS: .............................................................................................................................. 6
DESVENTAJAS: .............................................................................................................................. 6
VENTAJAS:...................................................................................................................................... 7
VENTAJAS:...................................................................................................................................... 7
DESVENTAJAS: .............................................................................................................................. 7
1.5.

CULTIVOS Y FERMENTACIONES. ......................................................................................... 8

1.6.

BIORREACTORES Y TIPOS DE CULTIVO ............................................................................. 9

A.

CLULAS Y MICROORGANISMOS ANAERBICOS.............................................................. 9

B.

CLULAS Y MICROORGANISMOS FACULTATIVOS. ............................................................ 9

C.

CLULAS Y MICROORGANISMOS AERBICOS............................................................... 9

1.7.

TIPOS DE CULTIVO QUE SE PUEDEN REALIZAR: ............................................................... 9

CULTIVOS MICROBIANOS ANAERBICOS FERMENTADOR BACTERIAL (CO2). ........... 9
CULTIVOS MICROBIANOS FACULTATIVOS FERMENTADOR BACTERIAL. .................... 9
CULTIVOS MICROBIANOS AERBICOS FERMENTADOR BACTERIAL (O2). ............... 10

CULTIVOS CELULARES AERBICOS Y FACULTATIVOS FERMENTADOR MICTICO

(CO2). ............................................................................................................................................. 10
CULTIVOS CELULARES AERBICOS ESTRICTOS FERMENTADOR CON AIREACIN
(O2)................................................................................................................................................. 10
CLULAS VEGETALES EN SUSPENSIN BIORREACTOR DE ELEVAMIENTO POR AIRE
(O2) EN RGIMEN TURBULENTO (Re 3000). ........................................................................... 10

PROTOPLASTOS VEGETALES BIORREACTOR DE LEVATAMIENTO POR AIRE (O2) EN

RGIMEN LAMINAR (Re 2300). ................................................................................................. 10
CLULAS ANIMALES BIORREACTOR DE LECHO FLUIDIZADO (O2). ............................ 11
CLULAS INMOBILIZADAS BIORREACTOR DE FIBRA HUECA (O2). ............................. 11
CLULAS EMPAQUETADAS BIORREACTOR DE LECHO EMPACADO (O2). ................. 11
CULTIVOS ENZIMTICOS REACTORES DE LECHO CATALTICO. ................................ 12
1.8.

MODO DE OPERACIN Y SISTEMAS DE CULTIVO........................................................... 12

1.8.1.

DISCONTINUO (batch). .................................................................................................. 12

1.8.2.

SEMICONTINUO (Fed batch). ..................................................................................... 12

1.8.3.

CONTINUO. .................................................................................................................... 12

1.9.

BALANCES Y ECUACIONES ................................................................................................. 13

1.9.1.

BALANCE GENERAL BIOMASA .................................................................................... 13

1.9.2.

BALANCE GENERAL POR COMPONENTE .................................................................. 13

1.9.3.

BALANCE GENERAL POR COMPONENTE PARA CADA MODO DE OPERACIN .... 14

1.9.4.

BALANCES INDIVIDUALES ........................................................................................... 15

BIBLIOGRAFA ............................................................................................................................. 177

BIORREACTORES
1.1.

DEFINICIN.
Es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente biolgicamente activo. En algunos casos, un
biorreactor es un recipiente en el que se lleva a cabo un proceso qumico que involucra organismos
o sustancias bioqumicamente activas derivadas de dichos organismos, se lleva a cabo una
reaccin catalizada por enzimas o clulas, libres o inmovilizadas. Este proceso puede ser aerbico
o anaerbico. Estos biorreactores son comnmente cilndricos, variando en tamao desde algunos
mililitros hasta metros cbicos y son usualmente fabricados en acero inoxidable.
El biorreactor busca mantener ciertas condiciones ambientales propias (pH, temperatura,
concentracin de oxgeno) al organismo o sustancia qumica que se cultiva.
En funcin de los flujos de entrada y salida, la operacin de un biorreactor puede ser de tres
puntos distintos:

1.2.

Lote (batch).
Lote alimentado (fed batch).
Continuo o quimiostato.

CLASIFICACIN:
1.2.1. DE ACUERDO A SUS FASES:
Homogneos.
Heterogneos.
1.2.2. DE ACUERDO AL METABOLISMO (CLASIFICACIN BIOLGICA).
Los sistemas biolgicos deben interaccionar con el ambiente externo para poder crecer y
desarrollarse, es por eso que los biorreactores se clasifican biolgicamente de acuerdo al
metabolismo procesal del sistema: ANAERBICO, FACULTATIVO, AERBICO.
Los bioprocesos de cultivo y las fermentaciones estn basados en el metabolismo celular
del cultivo. El metabolismo define los parmetros y caractersticas operativas biolgicas
de diseo y de operacin del biorreactor. Estas caractersticas son las que intervienen en
la parte biolgica del sistema y tienen que ver con el crecimiento, productividad y
rendimiento del cultivo; por lo que, definen la clasificacin biolgica, procesal del sistema
de cultivo.
1.2.3. DE ACUERDO A SU PROCESO DE OPERACIN:
Continuos.
Semicontinuo.
Discontinuos.

Esta es una clasificacin operativa y se aplica a cualquier reactor, sea qumico o biolgico
(biorreactor). En los reactores biolgicos el modo de operacin define el sistema de cultivo
que es el mismo y delimita la clasificacin procesal productiva del bioproceso (cultivo). Al
operar un biorreactor en una determinada categora (discontinuo, semicontinuo, continuo),
automticamente queda determinado el modo de cultivo del sistema y se definen los
parmetros y las caractersticas operativas y de diseo que intervienen en el proceso
productivo del sistema.
1.2.4. DE ACUERDO A LA MEZCLA:
Biorreactor discontinuo de mezcla completa.
Biorreactor continuo de mezcla completa.
Biorreactor continuo de flujo de pistn.
Biorreactor reactores de lecho fluidizado.
1.3.

1.4.

ELECCIN DEL TIPO DE REACTOR:

Control de PH y temperatura.
Exigencias de suministro o eliminacin de reactores gaseosos.
Presencia de partculas slidas deseadas o indeseadas en la alimentacin.
Estabilidad qumica y/o biolgica de sustratos y productos.
Sustitucin del catalizador.
Inhibicin por sustratos y/o productos.
Escala de operacin.
Destinos del producto.

DISEO DE BIORREACTORES.
Es una tarea de ingeniera bastante compleja, los organismos o clulas son capaces de realizar su
funcin deseada con gran eficiencia bajo condiciones ptimas. Las condiciones ambientales de un
biorreactor tales como flujo de gases (por ejemplo; oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono, etc.),
temperatura, pH, oxgeno disuelto y velocidad de agitacin o circulacin, deben ser
cuidadosamente monitoreadas y controladas.
La mayora de los fabricantes industriales de biorreactores usan recipientes, sensores,
controladores y un sistema de control interconectados para su funcionamiento en el sistema
biorreaccin.
La misma propagacin celular puede afectar la esterilidad y eficiencia del biorreactor,
especialmente en los intercambiadores de calor. Para evitar esto, el biorreactor debe ser fcilmente
limpiable y con acabados lo ms sanitario posible (de ah sus formas redondeadas).
Se requiere de un intercambiador de calor para mantener el bioproceso a temperatura constante.
La fermentacin biolgica es una fuente importante de calor, por lo que en la mayor parte de los
casos, los biorreactores requieren de agua de enfriamiento. Pueden ser refrigerados con una
chaqueta externa o, para recipientes sumamente grandes, con serpentines internos.
5

En un proceso aerobio, la transferencia ptima de oxgeno es tal vez la tarea ms difcil de lograr.
El oxgeno se disuelve poco en agua (y an menos en caldos fermentados) y es relativamente
escaso en el aire (20,8 %). La transferencia de oxgeno usualmente se facilita por la agitacin que
se requiere tambin para mezclar los nutrientes y mantener la fermentacin homognea. Sin
embargo, existen lmites para la velocidad de agitacin, debidos tanto al alto consumo de energa
(que es proporcional al cubo de la velocidad del motor) como al dao ocasionado a los organismos
debido a un esfuerzo de corte excesivo.
Los biorreactores industriales usualmente emplean bacterias u otros organismos simples que
pueden resistir la fuerza de agitacin. Tambin son fciles de mantener ya que requieren solo
soluciones simples de nutrientes y pueden crecer a grandes velocidades.
En los biorreactores utilizados para crecer clulas o tejidos, el diseo es significativamente distinto
al de los biorreactores industriales. Muchas clulas y tejidos, especialmente de mamfero,
requieren una superficie u otro soporte estructural para poder crecer y los ambientes agitados son
comnmente dainos para estos tipos de clulas y tejidos. Los organismos superiores tambin
requieren medios de cultivo ms complejos.

PRINCIPIOS EN EL DISEO DE BIORREACTORES.

A. BIORREACTOR DISCONTINUO DE MEZCLA COMPLETA.
Variacin de forma continua.
Constante a travs del reactor.
Empleo de enzimas solubles.
Volumen pequeo de produccin.
DESVENTAJAS:
Cambios en las condiciones de operacin.
Grado de mezcla en reactores a gran escala.
B. BIORREACTOR CONTINUO DE MEZCLA COMPLETA.
Composicin uniforme.
Verstiles y baratos.
Facilidad de control de PH, temperatura, etc.
DESVENTAJAS:
Gastos energticos elevados.
C. BIORREACTOR DE FLUJO EN PISTN.
Invariable a lo largo del tiempo.
Vara a travs del reactor.
Clulas o enzimas libres (inoculacin).
Clulas o enzimas inmovilizados.
6

VENTAJAS:
Ms eficaces que los de mezcla completa.
Simples y fciles de manejar y automatizar.
D.

BIORREACTOR DE LECHO FLUIDIZADO

Fluidizacin: winkler (1921).
De lecho fluido o turbulento.
Biocatalizador o en suspensin.
Flujo de sustrato.
VENTAJAS:
Buen control de pH, T, gas, etc.
Gran rea de interaccin.
Facilidad de hacer trabajo en continuo.
DESVENTAJAS:
Tcnica de trabajo cara.

EL DISEO en bioingeniera no es solo la aplicacin de conceptos bsicos y tericos que conlleven a

lograr un prototipo; para la realizacin integra de un modelo, otra gran parte, trata de la adaptacin
creativa y de la utilizacin del ingenio propio para lograr el objetivo de conjuntar el ambiente biolgico de
un cultivo vivo con el ambiente artificial de un dispositivo controlado; este es el resultado denominado
biorreactor o reactor biolgico. Un BIORREACTOR es por tanto un dispositivo biotecnolgico que
debe proveer internamente un ambiente controlado que garantice y maximice la produccin y el
crecimiento de un cultivo vivo; esa es la parte biolgica. Externamente el biorreactor es la
frontera que protege ese cultivo del ambiente externo: contaminado y no controlado. El
biorreactor debe por tanto suministrar los controles necesarios para que la operacin o proceso
(bioproceso) se lleve a cabo con economa, alto rendimiento (productividad) y en el menor
tiempo posible; esa es la parte tecnolgica.
El biorreactor es un sistema totalmente cerrado para la recepcin y tratamiento de las aguas residuales,
residuos agrcolas y de cualquier otro tipo de residuos orgnicos biodegradables, donde son convertidos
en abono biolgico formulado, libre de todo patgeno, y genera un gas, llamado biogs, el cual se
purifica hasta llevarlo a metano puro en la mayor proporcin posible para ser utilizado en cualquier
sistema de combustin, motores o cualquier otro tipo de equipo que opere con gas natural, incluyendo
los vehculos particulares convertidos a gas natural pues tiene un alto porcentaje de metano de no
menos del 91% y su composicin, poder calorfico, etc. Es casi idntico a la del gas natural, debido a
que se purifica hasta su punto ptimo.

1.5.

CULTIVOS Y FERMENTACIONES.
Lo primero que hay que entender en el diseo de reactores biolgicos es que contrario a los
qumicos, su cintica no est determinada exclusivamente por la velocidad de reaccin y las
variables que la determinan. Aunque se puede describir de manera similar a la qumica, la cintica
biolgica tambin depende de caractersticas intrnsecas del organismo o cultivo tales como
crecimiento y tasa de divisin celular, as como del tipo de operacin que se lleve a cabo.
Por eso, lo primero que se define en el diseo de un biorreactor es el propsito de utilizacin; es
decir, qu tipo de cultivo se va utilizar, el modo de operar y/o el proceso de cultivo.
El biorreactor sistema de cultivo debe cumplir con los siguientes objetivos:
a.
b.
c.
d.
e.
f.
g.
h.
i.
j.

Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen de cultivo.

Mantener constante y homognea la temperatura.
Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.
Prevenir la sedimentacin y la floculacin.
Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida por el cultivo.
Mantener el cultivo puro.
Mantener un ambiente asptico.
Maximizar el rendimiento y la produccin.
Minimizar el gasto y los costos de produccin.
Reducir al mximo el tiempo.

Una fermentacin es un proceso biolgico o bioproceso que consiste en la descomposicin de la

materia orgnica por microorganismos fermentadores (bacterias y hongos).
8

Un cultivo tambin es un bioproceso; pero generalmente se asocia a organismos o

microorganismos superiores (en orden jerrquico) a las bacterias; los cultivos son casi todos del
reino Eucariota.
1.6.

BIORREACTORES Y TIPOS DE CULTIVO

Los sistemas biolgicos que determinan el metabolismo celular de cultivo y el modo procesal
biolgico del sistema son:
A. CLULAS Y MICROORGANISMOS ANAERBICOS.
Bacterias en su gran mayora, son microorganismos de metabolismos degradativo (catablico);
generalmente unicelulares, estos microorganismos son autnomos y nutricionalmente
independientes ( auttrofos); sus clulas (cuerpos) no respiran (no utilizan la gluclisis para la
respiracin celular), en cambio, utilizan vas alternas, donde una molcula orgnica, producida
durante el proceso metablico (catabolismos), es utilizada como aceptor de electrones, en un
proceso bioqumico como respiracin oxidativa; esta molcula es reducida a producto orgnico
en un proceso comnmente denominado fermentacin.
B. CLULAS Y MICROORGANISMOS FACULTATIVOS.
Son ambivalentes, tienen la capacidad de vivir o sobrevivir entre ambientes: aerbico y
anaerbico; microorganismos de metabolismos mixto por lo que, pueden tanto degradar
(catabolismo) como construir (anabolismos) materia orgnica, a partir de diferentes sustratos
(materia prima), tanto orgnicos como inorgnicos. Pese a su versatilidad, sus mayores
representantes son microorganismos que presentan relaciones parsitas o simbiontes tales
como; hongos y levaduras, por lo que son muy extensos.
C. CLULAS Y MICROORGANISMOS AERBICOS.
Pertenecen en su mayora al reino Eucariota (pero tambin hay procariotas) son
microorganismos y clulas que respiran (utilizan la gluclisis como forma de respiracin
celular); por lo que su metabolismo es constructivo (anablico) y deben obtener sus nutrientes
de diferentes fuentes. Sus principales grupos estn representados por: bacterias y
microorganismos aerbicos, plantas y animales; cuyas clulas se pueden cultivar en
suspensiones celulares o bien, en diferentes arreglos artificiales o modificadas.

1.7.

TIPOS DE CULTIVO QUE SE PUEDEN REALIZAR:

CULTIVOS MICROBIANOS ANAERBICOS FERMENTADOR BACTERIAL (CO2).
Los microorganismos de metabolismos anaerbico son los ms simples de todos, tan solo
necesitan de un medio de cultivo adecuado, agitacin vigorosa y cierta cantidad de CO2 disuelto
para crecer y multiplicarse.

CULTIVOS MICROBIANOS FACULTATIVOS FERMENTADOR BACTERIAL.

Los microorganismos facultativos toleran la presencia de oxgeno en bajas concentraciones y
adems de un sustrato adecuado, slo requieren agitacin moderada y un medio de cultivo
para crecer y desarrollarse.
9

CULTIVOS MICROBIANOS AERBICOS FERMENTADOR BACTERIAL (O2).

Los microorganismos aerbicos necesariamente requieren la presencia de oxgeno disuelto
(OD) para sobrevivir; adems, agitacin moderada y un medio de cultivo rico en nutrientes para
poder crecer y desarrollarse.

CULTIVOS CELULARES AERBICOS Y FACULTATIVOS FERMENTADOR MICTICO

(CO2).
Los cultivos celulares se diferencian de los bacteriales (microbios) en que o son
microorganismos procariotas, son eucariotas. Son microorganismos aerbicos o facultativos
pertenecientes al reino fungi (hongos y levaduras), generalmente llamados micticos, requieren
de la presencia de CO2 disuelto en el medio como sustrato limitante de la velocidad de reaccin
y generan estructuras reproductivas muy particulares.

CULTIVOS CELULARES AERBICOS ESTRICTOS FERMENTADOR CON AIREACIN

(O2).
El cultivo de microorganismos celulares (no bacteriales) aerbicos estrictos requieren la
presencia de oxgeno disuelto en el medio de cultivo para el metabolismo celular; as como una
adecuada agitacin.

CLULAS VEGETALES EN SUSPENSIN BIORREACTOR DE ELEVAMIENTO POR AIRE

(O2) EN RGIMEN TURBULENTO (Re 3000).
Las clulas vegetales pueden ser cultivadas en suspensiones celulares: pequeos agregados
celulares que se suspenden en el medio de cultivo mediante agitacin. Dado que las clulas
vegetales, el diseo del biorreactor debe incorporar una lnea de aireacin (aire) para
suministrar oxgeno disuelto (OD) al medio de cultivo. El diseo debe contar con agitacin
vigorosa, pues los agregados celulares vegetales tienden a agruparse (clusters) y de alcanzar
gran tamao y peso, precipitaran. Por eso, la operacin de este tipo de biorreactores debe ser
en rgimen turbulento (Re 3000). Los biorreactores para clulas vegetales en suspensin
generalmente son diseados con un mecanismo de levantamiento por aire que combina una
agitacin vigorosa (turbulenta) con una adecuada aireacin (oxgeno disuelto) del medio de
cultivo.

PROTOPLASTOS VEGETALES BIORREACTOR DE LEVATAMIENTO POR AIRE (O2) EN

RGIMEN LAMINAR (Re 2300).
Los protoplastos son clulas vegetales desprovistas de su pared celular, esto se logra utilizando
enzimas proteolticas (proteasas y lipasas) que degradan la pared celular. Actualmente, el
cultivo de protoplastos no es muy comn, pero de realizarse, requiere de una cama de aire
(burbujas muy finas) que opere en rgimen laminar (Re 2300), para evitar que los esfuerzos
cortantes (esquileo) e hidrodinmicos (agitacin) generados en el medio de cultivo daen (lisis
celular) las clulas en suspensin. Tambin es indispensable que el medio de cultivo contenga
las proteasas y lipasas necesarias para evitar la regeneracin de la pared celular.

10

CLULAS ANIMALES BIORREACTOR DE LECHO FLUIDIZADO (O2).

Los cultivos de las clulas animales requieren de proximidad mutua y de un soporte slido
(anclaje) para interactuar (comunicacin clula clula) y poder metabolizar (producir); esto por
cuanto, las clulas animales, por lo general, no son independientes y deben estar unidas a un
sistema (por ejemplo heptico) para funcionar adecuadamente. Par suministrar esa proximidad
y el soporte necesario, los diseos de biorreactores para clulas animales deben aumentar la
densidad celular (concentrar) de las clulas en cultivo. Una forma de hacerlo es incorporar un
lecho fluidizado formado por cantidad de microesferas acarreadoras hechas de material
cermico poros inerte que, por su tamao (micromtrico) forman una interfase con el medio de
cultivo (fluido) que permite la transferencia de masa (nutrientes y OD), energa (calor) y
momentun (agitacin) entre el medio de cultivo y las clulas en cultivo; lo que es llamado lecho
fluidizado. Los cultivos celulares animales, por la delicada naturaleza de las membranas
plasmticas requieren adems de oxgeno disuelto (OD) en el medio de cultivo y de un rgimen
de agitacin laminar (Re 2300).

CLULAS INMOBILIZADAS BIORREACTOR DE FIBRA HUECA (O2).

La inmovilizacin celular es otra forma de lograr proximidad celular y aumentar la densidad
celular y la concentracin de metabolitos dentro de las clulas. La inmovilizacin es un mtodo
mucho ms eficiente y logra rendimientos muy superiores a los del lecho fluidizado. Pero, los
fenmenos de transferencia (masa, momentun y energa) se ven muy limitados por la
inmovilidad. Esto es especialmente crtico en cultivos de clulas de mamfero por cuanto la
clula no recibe la nutricin adecuada.
Los reactores de fibra hueca son los dispositivos ms utilizados para inmovilizar y concentrar
cultivos celulares animales. Su diseo consiste en una batera de fibras huecas y porosas en su
interior, colocadas en paralelo. Las clulas se concentran y aumenta la densidad celular, en los
intersticios de las fibras huecas. El medio de cultivo fluye en contrasentido desde el exterior del
reactor o a travs de una carcasa como si fuera un intercambiador de calor de doble tubo. Para
solventar el problema de la escasa transferencia de masa (nutrientes y OD) dentro de la fibra
hueca, un diseo novedoso es el tambor rotativo en el cual, el tambor externo rota sobre la
batera de fibras huecas, generando una circulacin constante de masa y de momentun,
aumentando las tazas de transferencia.

CLULAS EMPAQUETADAS BIORREACTOR DE LECHO EMPACADO (O2).

El empaquetamiento celular es una forma menos drstica de inmovilizacin; pues sta es
parcial. Tambin tiene el objetivo de aumentar la concentracin y la densidad celular; pero al no
estar enclaustradas las clulas, la transferencia de masa es mayor, aunque siempre limitada.
Un lecho empacado es una matriz de soporte slido que retiene las clulas, bien por geometra
(dentro de los intersticios o espacios huecos de la matriz), bien por afinidad (paso o adherencia
selectiva). Un biorreactor con este propsito debe contener un lecho de soporte slido,
sumergido en el medio de cultivo. La oxigenacin generalmente se realiza en el exterior del
lecho, a travs del medio de cultivo.

11

1.8.

CULTIVOS ENZIMTICOS REACTORES DE LECHO CATALTICO.

Los cultivos enzimticos se comportan en algunos aspectos como cultivos celulares y en otros
como reactivos qumicos. Debido a que un sustrato enzimtico es un cataltico de una reaccin
biolgica, la cintica de estos reactores puede simularse como la qumica, pero sin olvidar que
el compuesto es biolgico. Los sustratos enzimticos deben estar anclados a un lecho
semislido o a un semifluido (segn sea el caso) dependiendo de la naturaleza enzimtica del
sustrato; que por la naturaleza de la enzimas se conocen como lechos catalticos. Muchas
veces el medio de cultivo, adems de la enzima, requiere, para un sustrato determinado, su
respectivo precursor metablico llamado cofactor, ms algn componente especial que agilice
el proceso metablico.

MODO DE OPERACIN Y SISTEMAS DE CULTIVO.

El modo de operacin de un sistema de cultivo, es sinnimo del modo de operar del biorreactor o
fermentador. ste no solo influye en el diseo propio del reactor, tambin, en el modelo cintico de
crecimiento del cultivo y en el proceso de produccin.
Existen tres modos de cultivo aunados a tres modos bsicos de operacin:
1.8.1. DISCONTINUO (batch).
Por lotes o tandas, sin alimentacin (F); se coloca dentro del biorreactor la carga total de cada
proceso (tanda o lote) de cultivo o fermentacin y se deja que se lleve a cabo el proceso
productivo o la fermentacin por el tiempo que sea necesario; el cual se denomina tiempo de
retencin.
Las clulas se cultivan en biorreactor con una concentracin inicial, sin que esta sea alterada
por nutrientes adicionales o el lavado, por lo que el volumen permanece constante y slo las
condiciones ambientales del medio (PH, temperatura, velocidad de agitacin) son controladas
por el operador. Es proceso finaliza cuando todo el sustrato es consumido por la biomasa.
1.8.2. SEMICONTINUO (Fed batch).
Por lotes alimentados, con alimentacin de entrada (F1); se alimenta una lnea de entrada o
alimentacin (F1) para que el sistema de cultivo tenga un producto (biomasa) con mximo
crecimiento (exponencial) y aumente la productividad. Los nutrientes son alimentados al
biorreactor de forma semicontinua o continua, mientras que no hay efluente en el sistema. La
adicin intermitente del sustrato mejora la productividad de la fermentacin manteniendo baja la
concentracin del sustrato. Este proceso est restringido por la capacidad volumtrica del
reactor.
1.8.3. CONTINUO.
Por quimioestato, se alimenta una lnea de entrada F1 con nutrientes de manera continua y
se drena una salida F2 o lavado; de manera que los flujos o caudales de ambas lneas sean
iguales y la produccin sea continua.

12

1.9.

BALANCES Y ECUACIONES
La parte terica del diseo consiste en modelar; es decir, poner en ecuaciones el proceso
biolgico (bioproceso) que se lleva a cabo, para que, a partir de esas ecuaciones, dimensionar (dar
dimensiones) y simular el comportamiento terico de un modelo prototipo.
1.9.1. BALANCE GENERAL BIOMASA
Vel Acum = Vel Ent Vel Sal + Vel Form Vel Cons
=

VELOCIDAD
DE
ACUMULACIN

VELOCIDAD
DE
ENTRADA

VELOCIDAD
DE SALIDA

VELOCIDAD
DE
FORMACIN

VELOCIDAD
DE
CONSUMO

1.9.2. BALANCE GENERAL POR COMPONENTE

Una vez dado el balance general de biomasa, debe tomarse en cuenta que, en un sistema de
cultivo, existen muchos componentes: sustratos, productos, compuestos metablicos que
conforman el caldo de cultivo (medio interno); incluso la biomasa, se considera un componente
en s misma.
A partir del balance general, debe establecerse un balance general para cada componente
del cultivo o la biomasa.

( ) = . . +

Velocidad
de
Entrada

Velocidad de
Acumulacin

Velocidad
de Salida

Velocidad
de
Formacin

. Ec.1

Velocidad
de
Consumo

Donde:

( ) :

Velocidad de acumulacin del componente .

Volumen del cultivo (m).
Flujo o caudal de entrada (m/s).
Concentracin inicial del componente . (kg/m).
Flujo o caudal de salida (m/s).
Concentracin del componente . (kg/m).

: Velocidad de formacin del componente . (kg/ms).

: Velocidad de consumo del componente . (kg/ms).

13

Respecto a las velocidades de formacin y consumo:

Si se trata de un componente metablico, responden a la acumulacin (formacin) del
componente dentro de la clula y al consumo del metabolito por parte de la clula (consumo).
Si se trata de biomasa, formacin corresponde a la generacin de biomasa y el consumo al
consumo de biomasa durante el bioproceso; esto es, a la produccin metablica en el primer
caso y a la produccin o productividad en el segundo.
1.9.3. BALANCE GENERAL POR COMPONENTE PARA CADA MODO DE OPERACIN
La ecuacin de balance general por componente Ec. 1, por ser general, se define para una
operacin continua.
La condicin fundamental de toda operacin continua es:
En una operacin continua el flujo de entrada (F1) debe ser igual al flujo de salida (F2):
F1 = F2
Esta condicin se conoce como flujo en estado estacionario (FEE).
Para modelar el comportamiento de la biomasa del cultivo en el estado estacionario (EE)
adems de la condicin de flujo (FEE) debe haber equilibrio en la densidad o concentracin de
sta. Esto se conoce como quimioestsis o equilibrio quimioesttico y es por eso que a los
sistemas de cultivo continuo se les llama quimioestatos. Est condicin est dada por la
ecuacin:

Ec. 2.

Bajo la condicin de FEE y suponiendo que la densidad del cultivo y de la alimentacin son
iguales (Ec.2, quimioestsis)
la Ec.1 se reduce a la ecuacin de balance para una operacin continua en estado
estacionario.

= ( ) + ( ) .. Ec. 3.

De no existir el estado estacionario (EE) se produciran dentro del biorreactor dos condiciones
de flujo indeseables:
Si F1 > F2 se produce el rebalse o desborde del biorreactor, condicin que se da cuando el flujo
de entrada sobrepasa la capacidad del reactor.
Si F2 > F1 se produce el lavado o drenado de producto o biomasa, condicin que se da cuando
el flujo de salida sobrepasa la capacidad del reactor.
Cuando el modo de operacin es SEMICONTINUO (fed-batch) el caudal de salida F2 es nulo
(F2 = 0) por lo que, el volumen V aumentar con el tiempo en funcin del caudal de entrada:

Ec.4.
14

Y en el balance de materia se anula el trmino .

Resultando:
( )

= . + ( ) .. Ec.5.

Observe que el volumen que permanece dentro del operador diferencial es porque vara con el
tiempo (Ec.4), en tanto que el otro no lo hace (Ec.3).
Esa es la razn por la que una operacin semicontinua tiene duracin limitada en el tiempo (el
volumen no puede incrementarse ms all del volumen de trabajo o volumen til del
biorreactor). El tiempo que dura una operacin semicontinua se conoce como tiempo de
residencia (tr) y es el tiempo que dura el cultivo o bioproceso en un sistema semicontinuo.
Cuando el modo de operacin es DISCONTINUO (batch) ambos caudales son nulos
F1 = F2 = 0
Por lo que, el volumen es constante y se anulan los trminos . y . en la Ec.1.
Eso da como resultado:
( )

= Ec.6.

La duracin de un cultivo discontinuo (batch) es tambin, limitada en el tiempo, pero se

diferencia de la del cultivo semicontinuo (fed-batch) en que depende nicamente de las
condiciones iniciales del cultivo; esto por cuanto, no existe alimentacin (F1).
Una vez cargado el biorreactor e inoculado el medio de cultivo, la concentracin de la biomasa
aumenta gracias a los nutrientes, pero una vez que el sustrato que limita el crecimiento se haya
agotado, el crecimiento ya no es posible y finaliza el cultivo. Por este motivo, el tiempo que dura
el cultivo dentro de un biorreactor con un modo de operacin discontinuo se llama tiempo de
cultivo (tc).

1.9.4. BALANCES INDIVIDUALES

Los principales balances por componente en su forma individual son:

Balance de Biomasa:
d (VX) / dt = FiXi + VrgX FoXo VrcX

Velocidad de crecimiento celular

rgX = X

15

velocidad de muerte celular

rcX = kdX

Balance de Sustrato:
d (VS) / dt = FiSi FoSo VrcS
rcS = qSX / YX/S = X / YG + m X + qPX / YP

Balance de producto:
d (VP) / dt = FiPi FoPo VrgP
rgP = qP X

Balance de Oxgeno:
d (VCL) / dt = FiCLi FoCLo VrcO2 + VNiO2

Balance de Anhdrido Carbnico:

d(VCCO2) / dt = FiCCO2i FoCCO2o + VrgCO2 VNoCO2

NOMENCLATURA

V: Volumen del lquido en el biorreactor, L

t: Tiempo, h
y: Concentracin del componente y en el lquido dentro del biorreactor, g/L
X: Concentracin de biomasa en el lquido dentro del biorreactor, g/L
S: Concentracin de sustrato en el lquido dentro del biorreactor, g/L
P: Concentracin de producto en el lquido dentro del biorreactor, g/L
CL: Concentracin de oxgeno en el lquido dentro del biorreactor, g/L
C*: Concentracin de oxgeno en el lquido en equilibrio con el gas, g/L
CCO2: Concentracin de CO2 en el lquido dentro del biorreactor, g/L
F: Velocidad de flujo de lquido, L/h
Ni: Velocidad de transferencia de un componente del gas al lquido, g/Lh
No: Velocidad de transferencia de un componente del lquido al gas, g/Lh
rg: Velocidad de generacin, formacin o produccin, g/Lh
rc: Velocidad de consumo o utilizacin, g/Lh
: Velocidad especfica de crecimiento celular, h-1
qS: Velocidad especfica de consumo de sustrato, g/gh
qP: Velocidad especfica de formacin de producto, g/gh
m: Velocidad especfica de consumo de sustrato para mantenimiento celular, g/gh
16

Kd: Velocidad especfica de muerte o declinacin celular, h-1

YP: Coeficiente (estequiomtrico) de rendimiento de producto basado en el consumo de
sustrato consumido para formacin de producto, g/g
YP/S: Coeficiente de rendimiento de producto basado en el consumo total de sustrato,
g/g
YG: Coeficiente de rendimiento de biomasa basado en el consumo de sustrato para
crecimiento, g/g
YX/S: Coeficiente de rendimiento de biomasa basado en el consumo total de sustrato,
g/g
kLa: Coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno, h-1

SUBNDICES

i = Ingreso
o = Salida
S = Sustrato
P = Producto
O2 = Oxgeno
CO2 = Anhdrido carbnico

BIBLIOGRAFA

ARIAS, HOYOS Y OROZCO ( 2002). CULTIVO DE CLULAS VEGETALES EN

BIORREACTORES: UN SISTEMA POTENCIAL PARA LA PRODUCCIN DE
METABOLITOS. Rev.Fac.Nal.Agr.Medelln.Vol.55, No.1.p.1473-1495

SCRAGG, Alan (2002). BIOTECNOLOGA PARA INGENIEROS: SISTEMAS BIOLGICOS

EN PROCESOS TECNOLGICOS. Editorial Limusa. Mexico.

VAZQUEZ, OROZCO Y LEOBARDO (2007). MANUAL DE PRCTICAS: LABORATORIO

DE BIORREACTORES. Instituto Politcnico Nacional. Colombia.

WARD, Owen P. (1991). BIOTECNOLOGA DE LA FERMENTACIN: PRINCIPIOS,

PROCESOS Y PRODUCTOS. Editorial Acribia. Zaragoza Espaa.

17