ACIDOS NUCLEICOS

Autor: Mag. Doris Huerta Canales

Los organismos estn compuestos por una extraordinaria variedad de molculas. Una
bacteria tpica puede contener aproximadamente 2000 protenas, las clulas eucariontes
contienen unas 50000; adems, muchas otras molculas contribuyen a formar la diversidad de
organismos que se conocen. Esta gran cantidad de informacin se encuentra codificada en las
macromolculas denominadas ACIDOS NUCLEICOS.
El ncleo de la clula contiene toda la informacin necesaria para determinar la gama de
expresin proteica que se observa en los diferentes tipos celulares. Esta informacin se almacena
dentro de los cromosomas, en el DNA y ser la que defina el orden de los aminocidos en una
cadena polipeptdica. Las regiones que tienen informacin para las protenas se llaman genes, los
que estn compuestos por una secuencia lineal de nucletidos en el DNA y se encuentran en
regiones especficas de los cromosomas en el ncleo de la clula; no obstante el desciframiento
del cdigo del DNA en una secuencia de aminocidos no ocurre en el ncleo sino en el citoplasma
en unas organelas especiales, los ribosomas.
El DNA no proporciona directamente ni de inmediato la informacin para el ordenamiento
de los aminocidos y su polimerizacin en polipptidos, por lo tanto debe intervenir alguna
molcula intermedia para transferir la informacin del ncleo al citoplasma, esto sucede en todos
los organismos inclusive en los procariotes. La informacin codificada en el DNA es copiada, es
transcrita en el RNA, proceso denominado Transcripcin, que luego ser expresada o traducida en
molculas de protenas en un proceso denominado Traduccin o Sntesis de Protenas.
Los detalles de la estructura molecular del DNA pueden variar, sin embargo, todas son
polmeros de cuatro unidades monomricas denominadas nucletidos que contienen las purinas
A,G y las pirimidinas C,T unidas a una desoxiribosa fosfato, formando una estructura bsica de
doble hlice regular. La secuencia de bases constituye la informacin gentica y las variaciones en
la secuencia entre los diferentes individuos,
da lugar a la asombrosa complejidad de los
organismos. Las bases se enlazan por puentes de hidrgeno en pares complementarios, de modo
que la separacin de la doble cadena permite que la secuencia de bases se copie formando dos
hlices hijas, esencialmente idnticas al DNA progenitor; sta es la base de la Replicacin en los
sistemas biolgicos. Las enzimas que catalizan este proceso son las DNA polimerasas
participando otras protenas tambin.
Durante el tiempo de vida de un organismo su DNA est sujeto a daos provocados por
diversos agentes (fsicos, qumicos y biolgicos) y a mutaciones espontneas. Estas lesiones
pueden repararse mediante: sistemas a base de enzimas o provocar la muerte de la clula o
causar un cambio en el genoma que puede transferirse a la siguiente generacin. (es decir, una
mutacin).
La expresin de los genes en una clula determina la estructura y funcin de esa clula y
por tanto es decisiva para el normal crecimiento y desarrollo de los organismos vivos. Todas las
enfermedades de base gentica son el resultado de la expresin incorrecta de genes especficos.
Una mutacin en la regin codificadora de un gen, da como resultado la expresin de una
protena no funcional, mientras que una mutacin en una regin reguladora altera el control
transcripcional o traduccional de la expresin de dicha protena.
Es obvio que para tener un buen conocimiento de la enfermedad es necesario comprender
bien a fondo la estructura y funcin de los genes especficos y la manera que es controlada su
expresin.

El avance de la Biologa Molecular y la aparicin de nuevas tcnicas en los ltimos 20 aos

han ayudado enormemente a comprender los aspectos biomoleculares de la enfermedad en el
hombre.
Si queremos hacer un estudio de un gen humano relacionado con alguna deficiencia de
inters, debemos seguir una secuencia para analizarlo:

Aislamiento del gen vale decir la clonacin de un gen para una protena purificada.
Determinar cuantas copias existen de l en el genoma.
Localizacin del gen en el cromosoma.
Estudio detallado de cmo est ese gen regulado, mediante el anlisis del RNA y la expresin
de las protenas.

El conocimiento de la estructura y funcin del material gentico, el descubrimiento de las

enzimas de restriccin y de vectores de clonacin (plsmidos), fueron los pilares para el desarrollo
de las tcnicas de Biologa Molecular.
En la actualidad es posible secuenciar de manera rutinaria una protena purificada
utilizando un secuenciador automtico, as se determina la secuencia de aminocidos, se deduce
su RNA y a partir de sta ltima se deduce la secuencia del DNA. Una secuencia de DNA corta
(oligonucletidos) se puede sintetizar con facilidad para producir 100 pares de bases. Un
oligonucletido solo o un coctel de ellos puede etiquetarse con marcadores y entonces usarse
como sondas para aislar el gen que contiene estas secuencias de DNA, mediante la bsqueda en
bibliotecas de DNA complementario (DNAc) recombinante.
En forma alternativa, la disponibilidad de anticuerpos, inmunoglobulinas que reconocen
especficamente una protena de inters puede contribuir de manera directa a la clonacin del
DNAc que expresa esa protena.
Una de las ms importantes tcnicas disponibles para el anlisis de genes, es la
determinacin del rden preciso de los nucletidos dentro de un gen mediante la secuenciacin de
DNA, este es el primer paso en el estudio de un gen de inters.
Para localizar un gen en el cromosoma y estimar la cantidad de copias en el genoma por lo
general se usa tcnicas de hibridizacin. La estructura del gen es decir si tiene o no intrones y su
localizacin, puede determinarse utilizando el microscopio electrnico y haciendo estudios con
nucleasas.
Muchas enfermedades son una consecuencia de la expresin inadecuada o incorrecta
de genes especficos, por ello , un conocimiento del sitio y grado de expresin exactos de un gen
de inters suele ser importante para comprender las bases moleculares de la enfermedad. En
muchos casos, una vez clonado el gen es indispensable el anlisis de las regiones de control para
comprender su funcin.
La Reaccin en cadena de la Polimerasa (PCR) permite la amplificacin masiva de
secuencias de DNA especficas y se ha convertido en una poderosa herramienta del Bilogo
Molecular. Esta capacidad de amplificar una secuencia de DNA objetivo tiene muchas aplicaciones
en clnica, por ejm. Detectar DNA o RNA infrecuentes, como los cidos nucleicos virales o
bacterianos, para detectar mutaciones en transtornos genticos conocidos.