Comunicacin Celular:

Receptores asociados a Protenas

G trimricas (GPCRs)
Receptores tirosina quinasa (RTK)

MECANISMOS DE ACCION EN LAS

PROTEINAS DE SEAL
muchas protenas de seal actan como Interruptores (Switches)
Moleculares

pasan de un estado inactivo a uno activo (o viceversa), hasta que

otra seal los regresa al estado original

existen 2 grandes tipos de Interruptores Moleculares:

protenas que unen GTP
protenas activadas o inactivadas por fosforilacin

SEALES CELULARES

seal
extracelular

receptor

seal(es) intracelular(es)

blanco(s)

GPCRs

RTKs

GPCRs =
G Protein Coupled
Receptors

GPCRs: Caractersticas principales

Los receptores acoplados a protenas G son protenas con 7

segmentos transmembrana
Se conocen tambin como receptores serpentina

Las protena G heterotrimricas transmiten las seales y se desactivan

a s mismas
La unin de ligando a los receptores 7TM conduce a la activacin de
las protenas G
Las protenas G activadas trasmiten las seales mediante su unin (activacin)
de otras protenas

La adenitato ciclasa produce AMP cclico, que estimula la fosforilacin de muchas

molculas diana mediante la activacin de la protena quinasa A
La fosfolipasa C (PLC) activa la cascada de los fosfoinotstidos
El ion calcio es un segundo mensajero universal

Las protenas G se desactivan de forma espontnea mediante la hidrlisis de

GTP

PROTEINAS QUE UNEN GTP

tienen actividad intrnseca de GTPasa

existen 2 tipos:
trimricas (protenas G)

son las que se acoplan a

receptores
asociadas a respuestas rpidas

pequeas o monomricas
participan en la regulacin del
trfico vesicular y en una serie de
otros procesos celulares
asociadas a respuestas que
modulan la actividad de genes
Sealizacin en protenas regulatorias que unen GTP

2002 by Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, and Peter Walter.

Protenas G trimricas:
Componentes Conservados en las vas
de Sealizacin Intracelular

lento

rpido

Participan en respuestas celulares a seales externas:

Cambios en actividad o funcin de enzimas
especficas y otras protenas que preexisten en las
clulas
Cambios en la cantidad de protenas especficas
producidas por una clula
Modificacin de factores de transcripcin
Estimulan o reprimen expresin de genes

Protenas G mecanismo de encendido y apagado

GTPase activating proteins

guanine nucleotide
exchange factors

moduladores

moduladores

regulators of G protein signalling

guanine nucleotide
dissociation inhibitors

Intercambio de GTP por GDP ocurre en la subunidad alfa

Protenas G mecanismo de encendido y apagado

GTPase activating proteins

guanine nucleotide
exchange factors

regulators of G protein signalling

guanine nucleotide
dissociation inhibitors

Moduladores: GEFs, GAPs, RGSs, GDIs

Intercambio de GTP por GDP ocurre en la subunidad alfa

regulators of G
protein
signalling

http://courses.washington.edu/conj/gprotein/trimericgp.htm

Figure 13.20 Major elements of signal transduction initiated by the seven-transmembrane-domain G-proteincouple-receptors.
Redrawn based on figure from Bockaert, J., and Pin, J-P. Molecular tinkering of G protein-coupled receptors: an evolutionary success. EMBO J.
18:1723, 1999.
Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 7e edited by Thomas M. Devlin 2011 John Wiley & Sons, Inc .

Figure 13.21 Major subclasses of heterotrimeric G proteins that are activated by G by the seventransmembrane domain G-protein-couple receptors.
Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 7e edited by Thomas M. Devlin 2011 John Wiley & Sons, Inc .

Figure 13.23 Receptor phosphorylation as a major mechanism for the desensitization/inactivation of Gprotein-coupled receptors.
Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 7e edited by Thomas M. Devlin 2011 John Wiley & Sons, Inc .

Figure 13.34 Cross-talk integration among the major intracellular signaling cascades regulated by different cell
surface receptors.
Redrawn based on figure from Alberts, B., et al. Molecular Biology of the Cell, 4th ed. New York: Garland Science, 2002.
Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 7e edited by Thomas M. Devlin 2011 John Wiley & Sons, Inc .

Sistemas de Receptores
Acoplados a Protenas G

Receptores acoplados a Protena G

7 segmentos transmembrana
topologa similar en todos los receptores

acoplados a protenas G trimricas

la protena efectora es una protena de membrana
regulacin por retroalimentacin y desensibilizacin de la va
todos los receptores acoplados a protenas G trimricas
tienen 7 segmentos transmembrana
No todos los receptores de 7 segmentos transmembrana estn
acoplados a protenas G

Receptores acoplados a Protena G

Tienen un papel muy importante en la sealizacin
nerviosa, endocrina y paracrina
La mayora de los sentidos (visin, olfato, gusto) estn
regulados por sealizacin mediada por receptores
acoplados a protenas G
Mediadores intracelulares:
Protenas G trimricas
Protenas modificadoras de la actividad del receptor (Receptor
Activity-Modifying Proteins, RAMPs)
Arrestinas
rho-GTPasas

Receptores acoplados a Protena G

Familias de Receptores
Estructura general conservada a travs de la evolucin,
muy grande y diversa en:
tipo de ligando
unin del ligando al receptor
acoplamiento a sistemas efectores
generacin de segundo mensajeros
Familias:
Clase A tipo rodopsina (19)
Clase B tipo secretina (34)
Clase C metabotrpico glutamato/feromona (8)
Receptores vomeronasales (V1R and V3R) (12)
Receptores de gusto T2R
http://www.gpcr.org/7tm/proteinfamily/;jsessionid=6f29255a8b41c21070cdee26c580
http://pdsp.med.unc.edu/ShaunCell/home.php

Protenas G diferentes son activadas por diferentes

receptores y regulan diferentes efectores

Sistemas de Receptores
Acoplados a Protenas G:
EJEMPLOS DE
FUNCIONAMIENTO

Accin de la toxina del clera

Figure 13.22 Activation and inactivation cycle of a heterotrimeric G protein.

Redrawn based on figure from Lodish, H., et al. Molecular Cell Biology, 4th ed. New York: Freeman, 2000.
Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 7e edited by Thomas M. Devlin 2011 John Wiley & Sons, Inc .

Accin de la Toxina del Clera

Cuadro clnico:
La infeccin con la bactaria Vibrio cholerae causa diarrea
lquida y muchsa por hasta 14 das, con prdidas de agua
equivalentes al volumen de sangre circulante. Esto causa
deshidratacin severa y desbalance de electrolitos.

[1] The B subunits, serving as landing pad, bind to

carbohydrates on GM1 ganglioside on the surface of the
eopithelial cells of the small intestine, enabline caveolarmediaed endosomal entry of toxin subunit A into the cell.
The reverse transport of subunit A from endosome into the
cell cytoplasm is followed by cleavage of the disulfide
bond linking the 2 fragments of peptide A (A1 and A2).
[2] The generated catalytic peptide A1 forms complex with
ADP ribosylation factors (ARF) which catalyzes the ADP
ribosylation of a G protein.
[3] Binding of NAD and GTP generates an activated G
protein which in turns bind to and stimulates adenylate
cyclase.
[4,5] The activated adenylate cyclase generates high
levels of intracellular cAMP from ATP.
[6-8] cAMP (Cyclic AMP) stimulates secretion of chloride
and bicarbonate, with associated sodium and water
secretion. Chloride and sodium resorption are also
inhibited.

Microbiology of Vibrio Cholera | Medchrome

Receptores acoplados a protenas G

que regulan canales inicos

Receptores acoplados a protenas G

que activan o inhiben la adenilil ciclasa

Receptores acoplados a protenas G

que activan fosfolipasa C

VISION
GUSTO
OLFATO

Receptores con actividad

de Tirosin Kinasa

PROTEINAS ACTIVADAS O INACTIVADAS

POR FOSFORILACION
quinasas: introducen 1 o ms
grupos fosfato

ATP
ADP

fosfatasas: hidrolizan los grupos

fosfato
se estima que aproximadamente 1/3
del total de protenas en una clula
eucariote se encuentran fosforiladas
en un instante determinado

2002 by Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, and Peter Walter.

PROTEINAS ACTIVADAS O INACTIVADAS

POR FOSFORILACION
muchas protenas de seal que se regulan por fosforilacin son ellas
mismas protena quinasas
la mayora de las protenas de seal que se regulan por fosforilacin se
encuentran organizadas en cascadas de fosforilacin
existen 2 tipos de quinasas:
serina/treonina quinasas
tirosina quinasas

algunas quinasas pueden tener ambas actividades (ej: LIM quinasa)

alrededor del 2% de los genes humanos codifican proteina quinasas
(varios cientos de protenas distintas)

Sealizacin por receptores que son

tirosina-kinasas
Cambios rpidos (corto plazo):
Generalmente reversibles
Cambios en actividad o funcin de enzimas
especficas y otras protenas que preexisten en las
clulas

Cambios lentos (largo plazo):

Resultado de cambios en la transcripcin de genes
Cambios en la cantidad de protenas especficas
producidas por una clula

RTKs: Principales caractersticas

RTKs generan cascadas de fosforilacin

Estas cascadas son primordiales en muchos procesos de transduccin de seales
Algunos RTKs son dmeros que se cierra en torno al ligando: Ej. Receptor de
insulina

La unin de insulina provoca la fosforilacin cruzada y la activacin del receptor de insulina

La sealizacin por insulina finaliza mediante la accin de las fosfatasas

En algunos RTKs la unin del ligando induce la dimerizacin del receptor: Ej.
receptor de EGF

El extremo carboxilo terminal del receptor de EGF se fosforila

La sealizacin mediante EGF conduce a la activacin de Ras, una protena G pequea
La protena Ras activada inicia una cascada de protenas quinasas
La sealizacin por EGF se termina mediante fosfatasas proteicas y la actividad GTPasa
intrnseca de Ras

Vas de Sealizacin que Controlan

la Actividad de los Genes

 Receptores de TGF- (a)

Receptores de citoquinas (b)
Activacin de la va JAK/STAT

Receptores tirosina quinasa (c)

Va de Ras/MAP quinasa
Fosfoinostidos

Receptores de 7 segmentos transmembrana (d)

AMPc / PKA / CREB
Arrestina / quinasas

Wnt (e)
Hedgehog (f)
Vas que involucran la degradacin de protenas
Activacin de NF-B (g)
Notch (h)

Receptores Tirosina Kinasa (RTKs)

Modulan diversos aspectos de la funcin
celular:

Divisin / proliferacin
Diferenciacin
Sobrevivencia
Metabolismo

Ligandos de RTKs
Hormonas de naturaleza peptdica o protica
Solubles o anfipticas (unidas a las membranas)

Factor de crecimiento nervioso (NGF)

Factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF)
Factor de crecimiento de fibroblastos (FGF)
Factor de crecimiento epidermal (EGF)
Insulina

Receptores Tirosina Kinasa (RTKs)

Activacin de la funcin kinasa

En el estado basal, no estimulado, la actividad
intrnseca de kinasa es muy baja
Cuando el receptor dimeriza o se une el ligando, se
produce una fosforilacin cruzada entre subunidades,
por la activacin de la funcin kinasa
Se genera un cambio conformacional que facilita la unin de:
ATP en algunos receptores (p.ej. receptor de insulina)
Otras protenas (p.ej. receptor de FGF)

Se facilita la fosforilacin adicional de residuos tirosina

Las tirosinas fosforiladas actan como dominios de unin para otras
protenas

Dominios modulares de unin en

la transmisin de seales
La transmisin de seales ocurre mediante
interacciones protena-protena y protena-lpido
A travs de dominios modulares de unin

Muchas protenas sealizadoras tienen ms de un

dominio modular
Esto permite ensamblaje de complejos funcionales de
sealizacin
Algunos dominios importantes: SH2, SH3, PTB

A hypothetical signaling pathway using modular binding domains. Signaling protein 1 contains three different binding domains, plus a catalytic
protein kinase domain. It moves to the plasma membrane when extracellular signals lead to the creation of various phosphorylated docking sites
on the cytosolic face of the membrane. Its SH2 domain binds to phosphorylated tyrosines on the receptor protein, and its PH domain binds to
phosphorylated inositol phospholipids in the inner leaflet of the lipid bilayer. Protein 1 then phosphorylates signaling protein 2 on tyrosines, which
allows protein 2 to bind to the PTB domain on protein 1 and to the SH2 domain on an adaptor protein. The adaptor protein then links protein 2 to
protein 3, causing the phosphorylation of protein 3 by protein 2. The adaptor protein shown consists of two binding domainsan SH2 domain, which
binds to a phosphotyrosine on protein 2, and an SH3 domain, which binds to a proline-rich motif on protein 3.

INTERACCION ENTRE PROTEINAS DE

SEAL: DOMINIOS MODULARES DE UNION
secuencias altamente conservadas presentes en las protenas de seal
unen motivos especficos de protenas o de lpidos

tipos de dominio en protenas:

SH2 (homologia a Src 2)

unen tirosinas fosforiladas

dominios de unin a fosfotirosina (PTB)

SH3 (homologia a Src 3)

unen secuencias ricas en prolina

PH (homologa a pleckstrina)
PDZ:

unen la cabeza polar de los fosfoinostidos

residuos hidrofbicos C terminal

presente en protenas de armazn, permite la unin de varias protenas a la vez

Generacin de Sitios de Unin

Fosforilacin de tirosinas de RTKs
genera sitios para unin de dominios PTB y SH2
sitios de unin reconocen secuencias de aminocidos especficas
SH2: secuencia C-terminal a la fosfotirosina
PTB: secuencia N-terminal a la fosfotirosina

Las protenas ancladas son a su vez fosforiladas

Figure 13.34 Cross-talk integration among the major intracellular signaling cascades regulated by different cell
surface receptors.
Redrawn based on figure from Alberts, B., et al. Molecular Biology of the Cell, 4th ed. New York: Garland Science, 2002.
Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 7e edited by Thomas M. Devlin 2011 John Wiley & Sons, Inc .

Regulacin de la actividad
de los RTKs

Control del nmero de RTKs

en la superficie celular

Mecanismos
Endocitosis inducida por el ligando del complejo
ligando-receptor:
La tasa de endocitosis aumenta en presencia del ligando

Segregacin del receptor o ligando internalizado

hacia el lisosoma para degradacin
Aproximadamente el 50% de los receptores endocitados
son degradados
Probablemente por ubiquitinacin

La respuesta de la clula al ligando disminuye

Desensibilizacin

Protena-Tirosina Fosfatasas
defosforilan Tyr
Algunas PTPasas son protenas integrales de membrana
Existen tambin muchas PTPasas solubles

Aspectos generales de las vas de

transduccin de seales
Muchos elementos de las diferentes vas de transduccin
de seales son comunes aunque con variaciones
Los defectos en las vas de transduccin de seales
pueden causar cncer y otras enfermedades
Los anticuerpos monoclonales se pueden utilizar para inhibir
las vas de transduccin de seales activadas en los tumores
Los inhibidores de protenas quinasas pueden ser frmacos
anticancerosos eficaces
El clera y la tosferina o tos convulsiva se deben a una
actividad alterada de las protenas G