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FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS

PARASITOLOGA
GUA DE PRCTICA
HELMINTOS

Lombrices

Tenias

Diastoma

Esquistosoma

ALUMNO:..
PROFESOR: DIA-GRUPO:

PER
2015-II

PROPIEDAD INTELECTUAL: Departamento Acadmico de Ciencias Bsicas-USMP

PRCTICA 1
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
I. INTRODUCCIN
La bioseguridad es un conjunto de medidas probadamente eficaces para evitar la
adquisicin accidental de infecciones con patgenos contenidos en las muestras, as
como los riesgos relacionados con la exposicin a agentes qumicos, fsicos y/o
mecnicos a los que est expuesto el personal en los laboratorios.
Slo si las personas que trabajan en los laboratorios conocen las normas de
bioseguridad y las aplican, pueden determinar su propia seguridad, la de sus compaeros
y de la colectividad. El personal de laboratorio debe cumplir con las normas de
bioseguridad y los directivos de la institucin deben cumplir con brindar las facilidades
para que stas sean aplicadas.
Conocer las principales normas para proteger la salud de las personas que
puedan estar expuestas a riesgos relacionados con la exposicin a agentes biolgicos,
qumicos, fsicos, y otros en los laboratorios de ensayos, biomdicos y clnicos.
II. AGENTES DE RIESGO
El personal de laboratorio diariamente realiza muchas actividades que pueden
causar enfermedad o dao en l o en las personas que trabajen en ambientes cercanos,
e incluso en sus familiares y la comunidad. Estas enfermedades pueden ser causadas
por:
- Agentes biolgicos, transmitidos por ingestin, inhalacin, inoculacin y por contacto
directo a travs de piel o mucosas.
- Agentes fsicos y mecnicos, como las temperaturas extremas, radiaciones ionizantes,
contactos elctricos o conexiones defectuosas y vidrios resquebrajados de recipientes
daados o tubos rotos.
- Agentes qumicos que pueden ser corrosivos, txicos, carcinognicos, inflamables,
explosivos.
III. PRINCIPIOS BSICOS DE BIOSEGURIDAD
El trmino contencin se utiliza para describir mtodos seguros para manejar
materiales infecciosos en el ambiente de laboratorio donde son manipulados o
conservados.
El objetivo de la contencin es reducir o eliminar la exposicin de quienes trabajan
en laboratorios u otras personas y del medio ambiente externo a agentes potencialmente
peligrosos.
IV.NIVELES DE CONTENCIN
El elemento ms importante de la contencin es el cumplimiento estricto de las
prcticas y tcnicas microbiolgicas estndar de procesamiento de las muestras de
laboratorio. Cuando las prcticas de laboratorios no son suficientes para controlar los
riesgos asociados a un agente o a un procedimiento de laboratorio particular, es
necesario aplicar medidas adicionales.
Estas medidas adicionales corresponden a los equipos de seguridad diseados
para la proteccin del personal y prcticas de manejo adecuadas (barrera primaria), un
diseo de la instalacin y caractersticas de la infraestructura de los locales (barrera
secundaria). Estos niveles estn definidos de la siguiente manera:

Contencin Primaria:
Constituyen la primera lnea de defensa cuando se manipulan materiales
biolgicos, qumicos y/o fsicos.
Las barreras de contencin primaria son:
- Equipos de proteccin personal (EPP).
- Tcnicas de laboratorio estndar y normas de higiene personal.
- Inmunizacin (vacunacin).
- Esterilizacin y desinfeccin de instrumentales y superficies.
Es la proteccin del personal y del medio ambiente inmediato contra la exposicin a
agentes infecciosos y/o productos qumicos de riesgo. Es provista por una buena tcnica
microbiolgica y el uso apropiado del equipo de seguridad. El uso de vacunas aumenta el
nivel de proteccin personal.

Contencin secundaria:
Se refiere al diseo y construccin de un laboratorio, lo que en seguridad biolgica
se conoce como contencin o barrera secundaria, contribuye a la proteccin del personal
de laboratorio, personas que se localizan fuera del laboratorio y protege a las personas
de la comunidad frente a posibles escapes accidentales de agentes infecciosos.
Los modos de transmisin en el laboratorio pueden ser insidiosos y algunas veces
complicados, debido a que los vehculos y rutas de transmisin difieren de los modos
clsicos. El personal de Laboratorio esta frecuentemente expuesto a niveles muy altos de
los agentes infectantes, por lo que los periodos de incubacin pueden ser mas cortos que
los del mismo tipo de infeccin provocada por una exposicin corriente.
TIPOS DE LABORATORIO CON RELACIN AL NIVEL DE BIOSEGURIDAD (NBS)
NBS 1:
El personal de laboratorio cuenta con una capacitacin especfica acerca de los
procedimientos realizados en el laboratorio y es supervisado por una persona con
capacitacin general en microbiologa o una ciencia relacionada. Adecuado para agentes
biolgicos del grupo 1.
NBS 2:
Se aplican normas similares al NBS 1 y es adecuado para trabajos que involucran
agentes biolgicos de riesgo 2 con potencial moderado para el personal y el medio
ambiente.
NBS 3:
Es aplicable a las instalaciones clnicas, de diagnstico, enseanza, investigacin
o produccin en las que se llevan a cabo trabajos con agentes biolgicos del grupo 3 que
pueden producir una enfermedad grave o potencialmente como resultado de la
exposicin por va de inhalacin.
NBS 4:
Debe aplicarse para trabajar con agentes peligrosos y exticos que poseen un
riesgo individual alto de producir infecciones de laboratorio transmitidas por aerosoles y
enfermedades mortales. El laboratorio de nivel de bioseguridad 4 tiene caractersticas
especiales de ingeniera y diseo para evitar la diseminacin de los microorganismos en
el medio ambiente. Este NBS permite manipular agentes biolgicos del grupo 4.

CLASIFICACIN DE LOS MICROORGANISMOS POR GRUPO DE RIESGO


Agente biolgico del grupo 1
Es poco probable que cause una enfermedad en el hombre. Es decir, los que no
producen enfermedad en el ser humano y de susceptibilidad conocida y estable a los
antimicrobianos. Ejemplo: E. coli K12, Saccharomyces cerevisiae, microorganismos que
se utilizan en la industria de la alimentacin para la elaboracin de quesos, embutidos,
entre otros.
Agente biolgico del grupo 2
Puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los
trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo
generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Como algunos que, perteneciendo a la
propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patologa infecciosa humana de
gravedad moderada o limitada. Ejemplo: Staphylococcus epidermidis, Salmonella sp,
entre otros. Parsitos: los estados infecciosos de los parsitos han causado infeccin por
ingestin, penetracin por la piel o mucosas o inyeccin accidental. Las preparaciones
que se saben libres de los estados infectivos no requieren de este nivel de contencin.
Ejemplo: Trypanosoma cruzy, Cryptosporidium, Necator, Strongyloides, Taenia solium.
Agente biolgico del grupo 3
Puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro
para los trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo frente
a l generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Implican patologa grave, de difcil y
largo tratamiento, que pueden curar con secuelas y ocasionalmente producir la muerte. El
mayor y ms frecuente peligro que entraan stos es la infeccin adquirida a travs de
aerosoles y por fluidos biolgicos. Ejemplo: M. tuberculosis, Brucella sp, Coxiella burneti,
Influenza A N1H1, entre otros.
El laboratorio debe tener caractersticas de diseo e ingeniera especiales. Sin
embargo, se reconoce que algunas instalaciones existentes pueden no presentar todas
las caractersticas recomendadas para el nivel de bioseguridad 3 (por ejemplo, zona de
acceso con doble puerta y penetraciones selladas).
En esta circunstancia, se puede lograr un nivel de seguridad aceptable para la
prctica de procedimientos de rutina. La decisin de implementar esta modificacin a las
recomendaciones del nivel de bioseguridad 3 debe solamente tomarla el coordinador o
jefe del laboratorio.
Agente biolgico del grupo 4
Aquel que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para
los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin
que exista generalmente frente a l profilaxis o tratamiento eficaz.
Normalmente son microorganismos de dosis infectiva baja y altamente contagioso.
Ejemplo: Arenavirus como el que produce la fiebre de Lassa, Machupo, Ebola,
Hantavirus y el VIH.

PRECAUCIONES DE TRABAJO

Las puertas del laboratorio debern estar cerradas y el acceso al mismo deber
estar restringido mientras se lleven a cabo trabajos con materiales biolgicos. La
puerta deber portar emblemas que digan: "Prohibido pasar, Peligro biolgico".
El laboratorio deber ser mantenido limpio, ordenado y libre de materiales
extraos.
No se permitir comer, beber, fumar y/o almacenar comidas as como el uso de
cualquier otro tem personal (Ej. cosmticos, cigarrillos) dentro del rea de trabajo.
Usar bata, chaqueta o uniforme dentro del laboratorio. Esta ropa protectora
deber ser quitada inmediatamente antes de abandonar el rea de trabajo.
Antes de iniciar la tarea diaria asegrese que la piel de sus manos no presente
cortes, raspones y otras lastimaduras, en caso que as sea cubrir la herida de
manera conveniente antes de colocarse los guantes.
Usar guantes de ltex de buena calidad para todo manejo de material biolgico o
donde exista aunque sea de manera potencial el riesgo de exposicin a sangre o
fluidos corporales. Cambiar los guantes de ltex toda vez que hayan sido
contaminados, lavarse las manos y ponerse guantes limpios. Una vez usados los
guantes de ltex debern ser colocados dentro del recipiente con solucin
decontaminante.
No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas.
No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los guantes
puestos.
El uso de agujas, jeringas y cualquier otro instrumento similar deber ser
restringido a su uso indispensable. Las agujas y otros elementos punzantes
debern ser descartados en un recipiente resistente y destinado a tal fin.
Todas las muestras deben ser tratadas como altamente infecciosas para evitar
posibles contagios.
Los procedimientos debern ser realizados de manera tal que sea nula la creacin
de aerosoles, gotas, salpicaduras, etc.
Bajo ninguna circunstancia se pipetear sustancia alguna con la boca, para ello se
usarn pipeteadores automticos.
Las superficies del rea de trabajo debern ser decontaminadas cuando se
termine la tarea diaria. Usando para tal efecto una solucin de hipoclorito de sodio
en concentracin adecuada.
El recipiente para decontaminar especimenes deber contar con tapa de
seguridad para todo traslado fuera del lugar de trabajo. En ese caso el exterior del
recipiente deber ser mantenido libre de toda contaminacin con sangre usando
solucin decontaminante.
El desecho de los fluidos orgnicos puede efectuarse por las caeras habituales
una vez que estos hayan sido convenientemente decontaminados.
Lavar las manos con jabn (lquido o slido suspendido) y agua inmediatamente
despus que el trabajo haya sido terminado. Si los guantes de ltex estn
deteriorados, lavar las manos con agua y jabn despus de quitarlos.
Informe inmediatamente a su superior de cualquier accidente ocasionado con
elementos del laboratorio.

PRCTICA 2
MTODOS DE DIAGNSTICO PARASITOLGICO
I. INTRODUCCIN
Puesto que el diagnstico de la parasitosis intestinal depende del hallazgo de
huevos o larvas de helmintos y quistes o trofozotos de protozoos en heces, la coleccin y
el manejo adecuado de las muestras son indispensables para la bsqueda e
identificacin de los parsitos en el laboratorio.
Son factores que interfieren en el examen, la ingestin de medicamentos previa a
la coleccin y las muestras viejas o conservadas en forma inadecuada. La cantidad de
heces para un examen rutinario es del tamao de una nuez o de cinco a seis cucharadas.
Las muestras se depositan en un recipiente de boca ancha, con tapa hermtica y limpia,
no debe contaminarse con agua, orina o cualquier otro material extrao; no debe
obtenerse de la taza del ba, ni del suelo. En lactantes, la muestra se obtiene mediante
la cucharilla recta.
Las muestras deben ser etiquetadas con el nombre del paciente, hora de
coleccin y fecha. Generalmente se recomienda examinar tres muestras en serie y en
das sucesivos. Las heces blandas, diarreicas y lquidas, deben examinarse dentro de las
primeras horas de haber sido colectadas, si esto no es posible, las heces deben
depositarse en una solucin conservadora. Ej.: Formol 10%, alcohol polivinilico (PVA),
merthiolate yodo (MIF) o fenol-alcohol-formol (PAF). Las heces formadas pueden ser
examinadas durante el mismo da de su coleccin. Si no es posible pueden ser
refrigeradas durante 24 horas o conservadas (una parte de material fecal por tres de la
solucin conservadora).
DIAGNSTICO
1. Examen directo
Principalmente se busca en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas
de parsitos de tamao microscpico sean estos trofozotos, quistes de protozoos:
Entamoeba histolytica, Giardia intestinalis, Balantidium coli, etc.; as como larvas
(Strongyloides stercoralis), o huevos de helmintos: Ascaris lumbricoides, Trichuris
trichiura, Hymenolepis nana, Taenia sp., Fasciola hepatica, etc.).
Elementos normales: En un examen microscpico suelen encontrarse como
elementos normales estructuras reconocibles y otras no, fruto de la ingestin de
alimentos. Las ms frecuentes son: Fibras vegetales, Cristales de oxalato de
calcio,Granos de almidn, esporas de hongos, fosfato amnicomagnesio, granos de
polen, fibras musculares lisas, fibras musculares estriadas, cristales de cidos grasos,
grasa neutra, abundantes bacteria.
II. MATERIALES

Muestras de heces frescas/fijadas en formol 10%


Lmina portaobjeto y laminilla cubreobjeto.
Mondadientes
Guantes y mascarillas
Suero fisiolgico (SF) 0.85%
Lugol
Papel lente
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol)
Microscopio de luz

Procedimiento
1. Recolecte la muestra de heces en un envase limpio y tpela. Asegrese de no mezclar
papel higinico u orina con la muestra.
2. Transporte la muestra hasta el laboratorio a temperatura ambiente.
3. Coloque una gota de salina en una lmina portaobjeto.
4. Aada una cantidad pequea de muestra de heces utilizando un aplicador de madera y
mzclela con la solucin salina. Proceda igual agregando lugol.
5. Site un cubreobjetos sobre la muestra y examine bajo el microscopio (10X 40X).
6. Evalu la muestra y determine si hay parsitos presentes. El diagnstico definitivo se
logra demostrando la presencia de parsitos. En algunas ocasiones es necesario hacer
exmenes repetidos en das consecutivos antes de establecer que la muestra est
negativa.
Esquema:

SF

Movilidad
(Trofozotos)

Lugol

Tincin
Vacuolas
Ncleos

2. Mtodos de concentracin
Este mtodo permite concentrar quistes de protozoarios, larvas y huevos de
helmintos contenidos en las heces, para obtener una mayor cantidad de parsitos
mediante centrifugacin, sedimentacin, o flotacin. Las ms usadas son Sedimentacin
espontnea, Ritchie, Willis, Faust, entre otras.
A. Mtodos de Flotacin
Tcnica de Willis
Este mtodo se basa en la propiedad que tiene algunos quistes de protozoarios y
huevos de helmintos de flotar en la superficie de una solucin saturada de cloruro de
sodio debido a su menor densidad.
Material

Muestra de heces fresca.


Tubo de ensayo y gradillas
Lmina portaobjeto y cubreobjeto.
Guantes y mascarillas
Solucin saturada de Cloruro de sodio (NaCl)
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
Lugol.

Microscopio de luz.
Procedimiento
Colocar en un tubo de prueba uno o dos gramos de heces. Aadir 4 ml de
solucin saturada de NaCl. Emulsionar con una bagueta y completar con la misma
solucin el tubo hasta que en el borde se forme un menisco, djelo reposar durante 20
minutos.
Se toma la muestra cubriendo el tubo con un cubreobjeto, en el se adhieren los
protozoarios. Hacer una observacin microscpica de la muestra en una lmina con
lugol.
B. Mtodo de centrifugacin y flotacin
Tcnica de Faust modificada
Se basa en que los quistes y/o huevos de los parsitos flotan en la superficie por
ser de menor densidad que el sulfato de zinc a 33,3%, cuya densidad es 1.180. Es til
para la bsqueda de quistes y/o huevos de parsitos y excepcionalmente se observan
larvas. Se recomienda controlar la densidad del sulfato de zinc y usar agua filtrada para el
lavado previo de la muestra.
Materiales
Tubo de ensayo 13 x 100 mm
Gradillas
Sulfato de Zinc USP 33,3 g
Agua destilada tibia 100 ml
Muestra de heces frescas
Guantes y mascarillas
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
Lugol
Microscopio de luz
Procedimiento
Preparar una suspensin fecal en un tubo de prueba, completar el volumen a 10
ml con agua destilada.
Centrifugar a 2500 RPM durante un minuto y decantar el sobrenadante; repetir el
procedimiento anterior tres veces (hasta que el sobrenadante este claro).
Agregar la solucin de sulfato de zinc 2 ml, mezclar bien y completar con la misma
solucin.
Centrifugar a 2500 RPM.
Luego con un asa de platino tomar una o dos asadas del material flotante
(superficie) y colocarlo una lmina portaobjeto.
Agregar una gota de lugol y cubrir la preparacin con una laminilla cubreobjeto
Observar al microscopio.

Pelcula
superficial

Sulfato de Zinc

Sedimento
de
C. Mtodo
parsitos

de concentracin: Ritchie

Se basa en la concentracin de quistes y huevos por sedimentacin mediante la


centrifugacin, con ayuda de formol (fijador) y ter (disuelve las grasas de las heces) para
separar y visualizar los elementos parasitarios.
Procedimiento:
Se mezcla 1 g de heces con 8 ml. de solucin salina en un tubo. Homogenizar.
Centrifugar a 2000 RPM (revoluciones por minuto) por 2-3 minutos y decantar
(repetir 2 veces, hasta que el sobrenadante este claro).
Decantar el sobrenadante y agregar al sedimento 6 ml. de formol al 10%.
Homogenizar. Reposar 5 minutos.
Luego se agrega 3 ml. de ter sulfrico y se agita con cuidado (usar un tapn).
Centrifugar 3 min. a 3000 RPM.
Se rompe la capa de detritus y se decanta.
Se toma una gota del sedimento y se prepara el examen directo con lugol.

ter
Restos Lpidos
disueltos(detritus)
Formalina

Sedimento
Parsitos

D. Tcnica de Graham
Se usa para la bsqueda de huevos de Enterobius vermicularis y consiste en
aplicar el lado adhesivo de un pedazo de cinta sobre el rea peri anal, despegar el mismo
y volver a pegarlo sobre la lmina portaobjeto.
En el laboratorio, se desprende la cinta engomada del frotis peri anal por un
extremo, se agrega solucin de tolueno, hidrxido de sodio 2% o solucin salina,
aplicando 1 2 gotas de la sustancia elegida que clarificar la muestra y que permitir
una mejor observacin de los huevos y/o adultos de E. vermicularis. Es necesario
observar la lmina en su totalidad. Observar al microscopio, huevos de otros helmintos,
principalmente huevos de Taenia sp., Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura entre otros.

3. MTODOS DIAGNSTICOS DE HEMO E HISTOPARSITOS


Despus de las heces, la sangre es la muestra ms estudiada. La presencia de
parsitos puede no ser constante. Los mtodos estndar ms empleados son:
Extensin fina y preparacin de gota gruesa. Otras posibilidades: Extensin en fresco,
Movilidad (Trypanosomas). El objetivo es familiarizar al estudiante con las diferentes
tcnicas de deteccin directa para el diagnstico de hemo e histo-parsitos.
MTODOS DE EXAMENES PARA INVESTIGACIN DE PARSITOS HEMTICOS
Para estos exmenes se utiliza sangre extrada del pulpejo del dedo o de la vena
en este caso se debe utilizar con anticoagulante y las preparaciones pueden ser hechas
en extensin o frotis en gota gruesa.
Frotis
Se prepara de modo que las clulas sanguneas se dispongan planas sobre la
superficie del vidrio.
Se pretende que las clulas no se amontonen, que su espesor no supere una
clula.
Todos los elementos quedan un poco aplanados ( tamao).
Las protenas sricas (incluyendo la hemoglobina) deben fijarse previamente
Estas preparaciones son muy tiles para estudiar detalles de hemates y parsitos
sanguneos.
Principal limitacin: Escasa cantidad de sangre estudiada.
Gota gruesa

Contiene entre 6-20 veces ms cantidad de sangre que la extensin.


Se extiende sobre un rea de aproximadamente 15 x 12 mm.
No se fija antes de la tincin.
Se somete a un tratamiento de deshemoglobinizacin.
La rotura de los hemates y la prdida de su hemoglobina permite la observacin
microscpica de otras estructuras, incluyendo parsitos.
Resulta til para diagnstico rpido de parasitemias leves.
No es muy adecuado para estudios morfolgicos finos.

Importante:

Portaobjetos limpios y bien desengrasados.


Sangre fresca.
Puncin dedo.
Puncin lbulo de la oreja.
Puncin venosa Realizacin inmediata.
Realizacin extensin.
Secado al aire Eventualmente estufa 37 C.
Fijacin (previa a tincin) o no.

Coloracin de frotis con colorante Wright

- Cubra el frotis con el colorante.


- Djelo actuar 1 o 2 minutos (El alcohol metlico que es el disolvente del colorante acta
como fijador)
- Luego agregue una gota de agua taponada y sin que se derrame mezcle bien soplando
suavemente, deje reposar de 5 a 7 minutos,
- Lavar con chorro dbil de agua corriente y djese secar.
- Observar con objetivo de inmersin y aceite de inmersin.
Coloracin de gota gruesa
- Para colorear con Wright, la preparacin debe ser previamente hemolizada, para lo cual
a la preparacin ya seca, se le agrega agua y se deja un tiempo hasta que toda la
hemoglobina de los glbulos pase al agua.
- Verter el agua suavemente y dejar secar.
- Colorear en la forma indicada para el frotis.
- Si se usa el colorante Giemsa, se sumerge el portaobjeto en el colorante, sin hemlisis
previa, luego del tiempo necesario (variable segn el colorante) se lava con cuidado y se
deja secar.
ESQUEMAS (PRCTICA 2)

PRCTICA 3
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE
PROTOZOARIOS Y HELMINTOS
I. INTRODUCCIN
Los parsitos intestinales se identifican rutinariamente por sus caractersticas
morfolgicas en los anlisis de laboratorio de la materia fecal, conocidos como
examen coprolgico, mediante observacin microscpica en montajes hmedos con
solucin salina o con solucin de lugol como colorante.
Tambin se pueden hacer extendidos para realizar posteriormente coloraciones
permanentes, como la coloracin de hematoxilina frrica o la coloracin tricrmica de
Gomori, los cuales facilitan la identificacin al revelar detalles estructurales no
detectables en los montajes hmedos.
En algunos casos se pueden tomar biopsias intestinales para identificar la
patolgia producida por el parsito y observarlo en el tejido, en este caso se puede
utilizar la coloracin de hematoxilina-eosina, que aunque no es una coloracin
especifica para parsitos permite detectar algunos detalles del parsito buscado.
Los protozoos intestinales se presentan generalmente bajo tres formas de vida:

El trofozoito o forma vegetativa, que generalmente es el que produce la patologa.

El quiste o forma de resistencia que desarrolla el parsito para poder sobrevivir en


condiciones adversas.

El prequiste que es una forma intermedia.

Todos los protozoos que se transmiten por va oro-fecal presentan formas


qusticas, mientras los que se transmiten por contacto ntimo o por vectores,
generalmente no presentan esta forma de resistencia.
En el intestino humano se pueden encontrar protozoos patgenos y protozoos
comensales, la aparicin de estos ltimos puede deberse a varios factores como son
las condiciones de salubridad e higiene y factores inmunolgicos; su aparicin, aunque
no amerita tratamientos para su erradicacin, puede dar una idea de estas condiciones
en los pacientes, por lo tanto en los anlisis de laboratorio generalmente se informa su
presencia.
II. MATERIAL

Heces frescas/fijadas en formol 10%


Lminas coloreadas con hematoxilina frrica, tricromica de Gomori de frotis de
heces
Pipetas, baguetas, guantes, mascarilla

Suero fisiolgico 0.85% y lugol


Aceite de inmersin, lminas portaobjeto y laminillas cubreobjeto
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
Microscopio de luz
Papel lente

III. CARACTERSTICAS DE ALGUNOS PARSITOS INTESTINALES


Conocer microscpicamente las caractersticas morfolgicas de los principales
parsitos del intestino humano en extendidos de materia fecal en montaje hmedo.

Quiste de Entamoeba coli


Quiste de Endolimax nana
Quiste de Iodamoeba butschlii
Quiste de Chilomastix mesnili
Quiste de Giardia intestinalis
Quiste de Blastocystis hominis
Huevo de Fasciola hepatica
Huevo de Taenia sp.
Huevo de Hymenolepis nana
Huevo de Ascaris lumbricoides
Huevo de Trichuris trichiura
Huevo de Enterobius vermicularis
Huevo de Ancylostoma duodenale y/o Necator americanus (uncinarias)
Huevo de Diphyllobothrium sp.
Larva de Strongyloides stercoralis

Observacin a 100X y 400X de aumento (Figura 1 y 2).

Entamoeba coli: en los quistes, de mayor tamao de 10 a 35 micras (m) de


dimetro con ms de cinco ncleos y presencia, en ocasiones de barras
cromidiales finas como astillas en el citoplasma. En las preparaciones teidas con
lugol se suele apreciar vacuolas yodfilas.
Endolimax nana: El quiste oval o redondeado de 8-10 m de tamao,
generalmente, presenta cuatro ncleos. La preparacin teida con lugol permite
observar los ncleos como puntos ms brillantes.
Iodamoeba butschlii: El trofozoto mide de 8 a 20 micras y el quiste de 5 a 14 m.
En las preparaciones teidas con hematoxilina frrica o Gomorri-Trichrome se
observa una vacuola vaca en el citoplasma y el ncleo presenta una cariosoma
grande que emite fibrillas hacia la membrana nuclear. En la preparacin teida
con lugol, la vacuola se aprecia teida (color marrn) debido a su contenido de
glicgeno (vacuola yodfila).
Giardia intestinalis: El quiste es ovalado y mide de 10 a 12 m en su dimetro
mayor, en las preparaciones teidas con lugol, tiene una membrana qustica doble
y se distinguen de dos a cuatro ncleos, el axostilo y en ocasiones los cuerpos
parabasales.

Chilomastix mesnili: El quiste tiene forma redondeada con una prominencia que lo
asemeja a un limn y mide de 6 a 10 m, presenta doble membrana y en su
interior se observa los elementos descritos en el trofozoto.
Blastocystis hominis: Mide alrededor de 8-10 m. Presenta gran vacuola central
que ocupa el 50 a 95% de las clulas y restringe el citoplasma a un espacio
perifrico que contiene los ncleos en nmero de 2 a 5.
Ascaris lumbricoides: Huevo: forma ovalada con cubierta mamelonada. Identificar
huevo: Frtil, infrtil, decorticado.
Trichuris trichiura: Huevo: de forma elptica, de color parduzco cuya dimensin
alcanza de 40 a 50 m en su dimetro mayor. Presentan una envoltura gruesa y
con tapones en ambos polos.
Enterobius vermicularis: Huevos: distinga la forma plana-convexa a cada lado y el
tamao que alcanza de 50 a 60 m de largo por 20 a 30 m de ancho; en el
interior reconozca la larva.
UNCINARIOSIS: Infeccin intestinal producida por los nematodos Ancylostoma
duodenale y Necator americanus, conocidos como anquilostomoideos; se
localizan en el intestino delgado del hombre sobre todo en el yeyuno.
a. El trmino uncinaria se refiere a la curvatura del extremo anterior a manera
de gancho, con cpsula bucal con dientes (Ancylostoma) o placas
cortantes (Necator).
b. Ancylostoma duodenale y Necator americanus: Huevo: de uncinarias de
forma oval, con cscara delgada y traslcida y con blastmeros; miden de
60 a 70 m por 30 a 40 m.
Taenia sp: Huevo: de forma esfrica, de 35 a 40 m de tamao, con una cscara
gruesa y radiada conteniendo un embrin hexacanto u oncsfera en este distinga
los ganchos.
Diphyllobotrium sp: Huevo: de forma ovalada y distinga en ellos la cubierta
gruesa y lisa y en uno de sus polos el oprculo. Los huevos de D. pacificum
miden 50-60 x 36-40m, ms pequeas que D. latum (59-75 x 42-45m).
Hymenolepis nana : Huevo: de 30 a 40 m de dimetro, que se caracteriza por
presentar corteza gruesa, transparente, membranas, provista de dos mamelones
polares de donde nacen tres pares de filamentos, contiene un embrin hexacanto
con ganchos dispuestos en paralelo.
Fasciola heptica: Huevo de 120 a 150 m, de forma ovalada, con cubierta gruesa
y en uno de sus polos el oprculo.
Strongyloides stercolaris: Larva rabditoide: OBSERVE en preparados de heces
larvas de 200 m de longitud; en la parte anterior localice cpsula bucal corta y un
esfago con un bulbo posterior.
ESQUEMAS (PRCTICA 3)

PRCTICA 4
IDENTIFICACIN DE AMEBAS INTESTINALES
I. INTRODUCCIN
Las amebas son organismos eucariontes unicelulares. Presentan locomocin por
seudpodos. Su ciclo biolgico incluye dos fases: trofozoto (forma mvil y vegetativa) y
quiste (forma inmvil y de resistencia). Su reproduccin es por fisin binaria y mltiple. La
forma infectante es el quiste mientras que las formas diagnsticas son tanto quistes como
trofozotos. La va de infeccin de estas parasitosis es la oral y el mecanismo de
transmisin es la ingestin de alimentos contaminados con quistes. Amebas del gnero
Entamoeba son las que pueden parasitar el lumen intestinal del hombre: Entamoeba
histolytica, Entamoeba dispar, Entamoeba polecki, Entamoeba coli y Entamoeba
hartmanni. De estas solo E. histolytica es reconocida como patgena (Figura 3).
AMEBA PATGENA
Entamoeba histolytica
Caractersticas morfolgicas
Presenta dos formas evolutivas: Trofozoto: viven en el intestino grueso del ser
humano pudiendo invadir y atravesar la mucosa intestinal. Mide de 15 a 30 m. El
trofozoto ameboideo con membrana citoplasmtica, un citoplasma dividido en una parte
externa hialina y transparente casi sin granulaciones (ectoplasma) y otra interna muy
granulada con orgnulos celulares (endoplasma). El ncleo es esfrico y con cromatina
muy pequea en el centro (puntiforme), llamado cariosoma. Adems presenta cromatina
adherida a la cara interna de la membrana nuclear, distribuida en forma ms o menos
homognea. Quiste: forma de resistencia, se eliminan al exterior con las heces. El quiste
maduro tetranucleado es la forma infectante y mide de 10 a 20 m de dimetro. Los
estadios de prequiste con 1-2 ncleos con las caractersticas nucleares descritas en la
forma vegetativa y cuerpos cromidiales con extremos romos.
Diagnstico parasitolgico
Examen microscpico de muestra de heces, para demostrar la presencia de
trofozotos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solucin salina, lugol o
coloracin (tricrmica de Gomori o hematoxilina frrica) o su demostracin en biopsia de
la mucosa intestinal o heptica.
AMEBAS NO PATGENAS
Entamoeba coli
Caractersticas morfolgicas
Se ubica en el ciego y colon y su incidencia es muy alta. Trofozoto de 15-50 m.
Rango usual 20-25 m. Coloreado con hematoxilina frrica: citoplasma granular

indiferenciado. Bacterias en las vacuolas alimenticias. Diagnstico: ncleo con


aglomeraciones irregulares de cromatina perifrica, con cariosoma grande y de
posicin excntrica. Quiste: De 10-35 m. Rango usual de 12-15 m.
Redondeados u ovales con doble envoltura. Ocho ncleos como mximo, visibles
fcilmente. En los quistes inmaduros se observan los cuerpos cromidiales en
forma de aguja y haces de extremos irregulares. Vacuolas de glicgeno e color
caoba al teirse con lugol.

Diagnstico parasitolgico
Examen microscpico de muestra de heces, para demostrar la presencia de
trofozotos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solucin salina, lugol o
coloracin (tricrmica de Gomori o hematoxilina frrica).
Iodamoeba butschlii
Caractersticas morfolgicas
Ubicada en el intestino grueso del hombre. Quiste: mide de 5-20 m, presenta una
vacuola de glucgeno, de bordes irregulares. Posee un ncleo nico relegado a
una posicin lateral por la vacuola caracterizada por carecer de cromatina
perifrica con cariosoma grande central de bordes irregulares.
Diagnstico parasitolgico
Examen microscpico de muestra de heces, para demostrar la presencia de
quistes mediante el examen directo de la muestra en solucin salina, lugol o coloracin
(tricrmica de Gomori o hematoxilina frrica).
Endolimax nana
Caractersticas morfolgicas
Es la ameba ms pequea del intestino. Quiste: Mide de 5-14 m. Presenta cuatro
ncleos sin cromatina perifrica y con un gran cariosoma ubicado hacia un lado
del ncleo.
Diagnstico parasitolgico
Examen microscpico de muestra de heces, para demostrar la presencia de
quistes mediante el examen directo de la muestra en solucin salina, lugol o coloracin
(tricrmica de Gomori o hematoxilina frrica).
Blastocystis hominis
Caractersticas morfolgicas
Es un protozoario que habita el intestino del hombre y de otros animales.
Asociado a sintomatologa gastrointestinal inespecfica. Posee pseudpodos de
locomocin y de alimentacin; se multiplica por fisin binaria, endodiogenia,
esquizogonia. Presenta tres formas morfolgicas diferentes: vacuolar, granular y
ameboide.
Diagnstico parasitolgico
Mide alrededor de 8-10 m. Presenta gran vacuola central que ocupa el 50 a 95%
de las clulas y restringe el citoplasma a un espacio perifrico que contiene los
ncleos en nmero de 2 a 5.

II. MATERIAL

Muestras de heces fijadas en formol 10% con quistes de amebas


Laminas portaobjeto
Laminillas cubreobjeto
Lugol
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
Guantes y mascarillas
Lminas coloreadas con hematoxilina frrica o tricrmica: Entamoeba histolytica
(quiste y trofozoto), Entamoeba coli, (quiste y trofozoto), Iodamoeba butschlii,
(quiste y trofozoto), Endolimax nana, (quiste y trofozoto), Blastocystis hominis
(quiste).
Aceite de inmersin
Papel lente
Microscopio de luz

ESQUEMAS (PRCTICA 4)

AMEBAS DE VIDA LIBRE


I. INTRODUCCIN
Las amebas de vida libre (AVL) se encuentran ampliamente distribuidas en la
naturaleza. Se han detectado amebas de vida libre en redes pblicas de agua, albercas,
estanques, lagos, ros, aguas termales, lodos, suelos desnudos y encharcados, canales
artificiales, aguas de desecho industrial, redes de agua potable, agua embotellada,
unidades dentales, de dilisis, fisioterapia, y aire acondicionado, as como en materia
fecal de diversos animales. Algunas especies pueden encontrarse en aguas saladas.
Adicionalmente, Naegleria y Acanthamoeba han sido aisladas en tracto respiratorio de
sujetos con y sin datos de infeccin a ese nivel. Es importante decir que estas Amebas
son capaces de vivir de dos formas: como parsitos y como organismos de vida libre, a
raz de esto se denominan amebas anfizoicas.
Las AVL son capaces de producir
enfermedades en el hombre como la meningoencefalitis amebiana aguda o primaria
(Naegleria fowleri) y la meningoencefalitis amebiana crnica o granulomatosa
(Acanthamoeba castellani y Balamuthia mandrilaris. (Figura 4).
Acanthamoeba castellani y Balamuthia mandrilaris
Caractersticas morfolgicas
Acanthamoeba castellani se caracteriza por presentar dos formas morfolgicas
diferentes: el trofozoto y el quiste.
Los trofozotos son pleomrficos, de 15-45 m de dimetro. En el citoplasma se
distinguen un ncleo central y abundantes vacuolas. El carcter distintivo de los
trofozotos es la presencia de seudpodos puntiagudos llamados acantopodios.
Los quistes miden 10-15 m de longitud. Se caracterizan por poseer un solo
ncleo y una pared doble, en donde la capa externa es de forma irregular y la
interna es poligonal. Tambin se observa la presencia de poros llamados ostiolos.
Balamuthia mandrilaris se caracteriza por presentar dos formas morfolgicas
diferentes: el trofozoto y el quiste. Los trofozotos son pleomrficos, de 12-60 m
de dimetro. En el citoplasma se distinguen de 1-2 ncleos cada uno con 2-3
cuerpos nucleares. Los quistes son esfricos y miden 12-30 m de longitud. Se
caracterizan por poseer un solo ncleo y una pared triple.
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los trofozotos o quistes es la base del
diagnstico. Los exmenes histopatolgicos de biopsias de cerebro piel o crnea
son recomendados.
Tambin se recomienda el diagnstico por imgenes (tomografa axial
computarizada, resonancia magntica).
Se puede cultivar las amebas en un medio con baja concentracin de nutrientes
en el cual se ha sembrado previamente bacterias coniformes (Medio xenico).

Los exmenes de lquido cefalorraqudeo o los extendidos coloreados con la


tincin de Wright o Giemsa no se recomiendan pues son poco sensibles.
Se han desarrollado tcnicas moleculares para ayudar a identificar cepas o
especies de Acanthamoeba, pero su aplicacin prctica es limitada. La presencia
de quistes en el tejido cerebral permite diferenciar las infecciones por
Acanthamoeba y Balamuthia de la infeccin por Naegleria, que no forma quistes
en el tejido humano.

Naegleria fowleri
Caractersticas morfolgicas
Naegleria se caracteriza por presentar tres formas morfolgicas diferentes: el
trofozoto, la forma flagelada y el quiste.
Los trofozotos son pleomrficos, de 10-25 m de longitud. En el citoplasma se
distinguen un ncleo central y abundantes vacuolas. El carcter distintivo de los
trofozotos es la presencia de seudpodos redondeados llamados lobopodios.
Bajo ciertas condiciones del medio, principalmente por la concentracin de iones,
los trofozotos pueden adoptar una forma biflagelada.
Los quistes son esfricos y miden 7-14 m de dimetro. Se caracterizan por
poseer un solo ncleo y una pared delgada sin la presencia de poros.

El mecanismo de transmisin se lleva a cabo en aquellos individuos que toman


baos de aguas contaminadas con estas amebas: lagos, piscinas, embalses,
corrientes termales, manantiales. Estas amebas en algunos casos pueden
penetrar a travs de la lmina cribosa del etmoides, pudiendo alcanzar el cerebro
y las meninges causando graves cuadros de necrosis e inflamacin.
Observaciones experimentales inducen a pensar que la infeccin por Naegleria se
contrae por penetracin de los microorganismos a travs de la nariz o a travs del
neuroepitelio olfatorio
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los trofozotos es la base del diagnstico. Se
recomienda realizar exmenes de lquido cefalorraqudeo (LCR) o extendidos
coloreados con la tincin de Wright o Giemsa.
Si la muestra de LCR resulta negativa, se puede recurrir a exmenes
histopatolgicos de biopsias cerebrales o diagnstico por imgenes (tomografa
axial computarizada).
Se puede cultivar las amebas en un medio con una baja concentracin de
nutrientes en el cual se ha sembrado previamente bacterias coliformes.
Las tcnicas serolgicas tiene poco valor diagnostico pues la respuesta inmune
demora en aparecer. Se ha probado la tcnica de inmunoensayo enzimtico
(ELISA) y la inmunofluorescencia indirecta (IFI).
II. MATERIAL
Lminas coloreadas con hematoxilina frrica o tricrmica
Acanthamoeba castellani, Balamuthia mandrilaris, Naegleria fowleri
Aceite de inmersin
Papel lente

de

Gomori:

Microscopio de luz

ESQUEMAS

PRCTICA 5
IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS Y CILIADOS
INTESTINALES
I. INTRODUCCIN
Parsitos caracterizados por poseer flagelos en su forma de trofozoto, los cuales
les sirven para la locomocin. Desde el punto de vista clnico, podemos dividirlos segn la
localizacin anatmica donde se suelen encontrar en flagelados intestinales, genitales,
hemticos y tisulares. Entre los flagelados intestinales la especie ms importante es
Giardia intestinalis, parsito que se localiza en el duodeno y que se multiplica por divisin
longitudinal. En los nios provoca cuadros diarreicos, aunque a veces pueden encontrase
en heces sin estar asociado a patologa alguna. Otras especies de flagelados intestinales
menos frecuentes son: Trichomonas hominis, Chilomastix mesnilii (Figura 5).
Los ciliados son protozoarios que se caracterizan por la forma de cilios para su
locomocin, adems tienen como caracteres de valor diagnstico dos ncleos, citostoma
y citopigio. La transmisin de los ciliados ocurre por ingestin de quistes en alimentos o
agua contaminada con residuos fecales. Cuando se ingieren los quistes, estos pasan al
tracto intestinal inferior, se desenquistan e inician su multiplicacin como trofozotos que
se alimentan.
La forma infectante es el quiste mientras que las formas diagnsticas son tanto
quistes como trofozotos. La va de infeccin de estas parasitosis es la oral y el
mecanismo de transmisin es la ingestin de alimentos contaminados con quistes.
A. IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS INTESTINALES
Giardia intestinalis
Caractersticas morfolgicas
Se localiza en el duodeno, tiene un estadio de trofozoto y otro de quiste. El
trofozoto mide 10-20 m. Es periforme de simetra bilateral con dos ncleos ovales y
cuatro pares de flagelos, dos axstilos y dos cuerpos parabasales y un disco suctorio. El
quiste mide 8-19 m (promedio 10-14 m). Son ovoides que contienen 4 ncleos
pequeos, restos de flagelos y cuerpo parabasal, el citoplasma esta claramente separado
de la pared qustica.
Diagnstico parasitolgico
Hallazgo de trofozotos o quistes en las heces. En las lminas coloreadas estudie
las caractersticas de ambos estadios.
Chilomastix mesnilli

Flagelado intestinal no patgeno. El trofozoto, periforme de 6-20 m, tiene un


ncleo, citoplasma grande, forma ancha que se extiende hasta la mitad del cuerpo. El
quiste, mide 6-24 m con apariencia de limn contiene un solo ncleo.
Diagnstico parasitolgico
En las muestras de heces formoladas observe quistes. En las lminas coloreadas
estudie las caractersticas del trofozoto y quiste.

B. IDENTIFICACIN DE CILIADOS
Balantidium coli
Caractersticas morfolgicas
El nico ciliado que infecta al hombre. Parasita el intestino grueso. El trofozoto es de
forma ovoide y tiene de tamao promedio de 70 x45 m, y puede alcanzar un tamao de
150-200 micras, en su extremo anterior esta el citostoma y en el posterior el citopigio.
Tiene un ncleo grande reniforme que es el macro ncleo, uno ms pequeo y vacuolas
contrctiles. Los cilios que son los rganos de locomocin estn implantados en la
membrana celular. El quiste tiene pared qustica gruesa transparente y es casi esfrico
con un dimetro promedio de 55 m (50-70 m), tiene un macro ncleo reniforme y un
micro ncleo.
Diagnstico parasitolgico
La balantidiosis requiere de un diagnstico clnico diferencial con otros agentes
infecciosos que producen colitis o disentera. Principalmente entamoebosis, disentera
bacilar y colitis ulcerativa. El diagnstico de laboratorio se realiza por el examen de
heces, al observarse los trofozotos mviles al examen directo, en heces diarreicas, o los
quistes en heces no diarreicas.
II. MATERIAL

Heces frescas/formol 10%


Lminas coloreadas con hematoxilina frrica o tricrmica de Gomori: Giardia
duodenalis (quiste y trofozoto), Chilomastix mesnilli (quiste y trofozoto),
Balantidium coli (quiste y trofozoto).
Pipetas, baguetas, suero fisiolgico y lugol.
Aceite de inmersin, lminas y laminillas.
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
Microscopio de luz.
Papel lente.

ESQUEMAS (PRCTICA 5)

PRCTICA 6
IDENTIFICACIN DE ESPOROZOARIOS INTESTINALES Y
TISULARES
I. INTRODUCCIN
Son protozoarios del Phylum Apicomplexa pues con microscopa electrnica se
visualiza una estructura denominada complejo apical (conoide, anillo polar, roptrias,
microtbulos). Tienen ciclos complejos (monoxenos, heteroxenos), donde intervienen
diversas etapas evolutivas sexuadas y asexuadas: esporozotos, merozotos, gametos
que forman el ooquiste o cigote. En su mayora son agentes oportunistas porque para
ejercer su accin patgena requieren condiciones favorecedoras en el hospedero.
Los protozoarios apicomplexa que tienen importancia en parasitologa humana son
coccidios y comprenden principalmente organismos de los gneros Cryptosporidium,
Cyclospora, Cystoisospora, Sarcocystis y Toxoplasma. Los primeros tres primeros
gneros estn involucrados, en parasitosis intestinales y los dos ltimos en parasitosis
tisulares
En los coccidios intestinales la forma diagnostica es el ooquiste. En el caso
particular de Cryptosporidium es el ooquiste maduro esporulado que se elimina con las
heces del hospedador, ya es infectivo. La va de infeccin de estas parasitosis es la oral
y el mecanismo de transmisin es la ingestin de alimentos contaminados
Toxoplasma gondii es un esporozoario intestinal del gato, siendo el hospedero definitivo,
mientras que el hombre y otro animales son hospederos intermediarios. El diagnstico en
humanos es bsicamente serolgico.
Cryptosporidium spp
Caractersticas morfolgicas
Coccidio intestinal con ciclo complejo que se completa en un nico husped
(monoxeno). Distintas especies y distintos genotipos: C. parvum: genotipo en 1 humanos,
genotipo 2 en rumiantes y genotipo 3 en caninos. Otros: C. felis, C. meleagridis, C
hominis.
Se localiza en el epitelio intestinal con localizacin de las etapas reproductivas
dentro de una vacuola parasitfora: intracelular pero extracitoplasmtica. La va de
transmisin es por ooquistes de pared delgada (autoinfeccin) y los ooquistes de pared
gruesa (heteroinfeccin). Ooquistes: Pequeos de 4 6 m de dimetro, ovoides o
esfricos, altamente refringentes, con cuatro paredes exteriores lisas. Pueden observarse
4 esporozoitos inermes dentro de los ooquistes maduros (no se presenta esporoquistes).
Puede infectar todo el tracto digestivo y tambin otros epitelios. Altera la
arquitectura del epitelio intestinal (vacuola parasitfora). Ocasiona atrofia de las
vellosidades, aumento de las criptas e infiltracin de la lmina propia. Interfiere con la
absorcin de fluidos y nutrientes lo que conduce a provocar diarrea coleriforme que
puede comprometer la vida por desequilibrios hidroelectrolticos. Diarrea aguda
autolimitada en inmunocompetentes. Diarrea crnica severa en inmunodeprimidos

Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los ooquistes es la base del diagnstico. Se
recomienda realizar exmenes seriados de heces y mtodos de concentracin
(tcnicas de Ritchie y Sheather). Los ooquistes se pueden observar en un
extendido teido con coloracin cido-resistente (mtodo de Kinyoun o ZielhNeelsen modificado) y/o Auramina/rodamina
Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por biopsia
intestinal o utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos con la
ayuda de las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA) o
inmunofluorescencia indirecta con anticuerpos monoclonales (IFI).

Cyclospora cayetanensis
Caractersticas morfolgicas

Los ooquistes de Cyclospora se caracterizan por presentar una forma esfrica y


miden entre 8-10 m de dimetro. Cada ooquiste contiene dos esporoquistes que
desarrollan dos esporozotos cada uno. Se eliminan en las heces de forma
inmadura no esporulado

Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los ooquistes es la base del diagnstico. Se
recomienda realizar exmenes seriados de heces y mtodos de concentracin
(tcnicas de Ritchie y Sheather).
Los ooquistes se pueden observar en un extendido teido con coloracin cidoresistente (mtodo de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado). Con luz ultravioleta
presentan autofluorescencia.
Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por biopsia
intestinal o utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos con la
ayuda de las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA) o
inmunofluorescencia indirecta (IFI).
Tambin puede efectuarse una reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) para
C. cayetanensis, mtodo que puede aplicarse tanto a muestras de materia fecal
como de aguas contaminadas con el parsito
Cystoisospora belli
Tambin puede efectuarse una reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) para
C. cayetanensis, mtodo que puede aplicarse tanto a muestras de materia fecal
como de aguas contaminadas con el parsitoCaractersticas morfolgicas
Los ooquistes de Cystoisospora se caracterizan por presentar una forma ovalada
y mide entre 20- 30 m de largo por 10-20 m de ancho.
Cada ooquiste contiene dos esporoquistes de membrana doble que desarrollan
cuatro esporozotos cada uno. En las heces recin emitidas los ooquistes
inmaduros de C. belli son ovalados y generalmente, contienen uno o dos
esporoblastos inmaduros. El ooquiste maduro, que a su vez incluye dos
esporoquistes con cuatro esporozotos cada uno, aunque se desarrolla en el
medio externo, puede ocasionalmente observarse en las heces si no se
conservan con una solucin adecuada, siendo la forma infecciosa para el hombre.

Diagnstico parasitolgico

La demostracin microscpica de los ooquistes es la base del diagnstico. Se


recomienda realizar exmenes seriados de heces y mtodos de concentracin
(tcnicas de Faust y Sheather). Es caracterstica la presencia de los cristales de
Charcot Leyden, que se generan por la destruccin de los eosinfilos.
Los ooquistes se pueden observar en un extendido teido con coloracin cidoresistente (mtodo de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado). Con luz ultravioleta
presentan autofluorescencia.
Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos en aspirados
duodenales y en muestras de biopsia de intestino delgado. Los ooquistes de C.
belli se observan en los aspirados duodenales, mientras que en las muestras de
biopsia pueden identificarse distintas fases de desarrollo del parsito mediante
tinciones histolgicas, o bien observarse lesiones caractersticas. Los principales
cambios microscpios son la atrofia de las vellosidades y la hiperplasia de las
criptas, pudiendo existir gran nmero de eosinfilos en la lmina propia, junto con
clulas plasmticas, linfocitos y leucocitos polimorfonucleares.
Tambien puede utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos
con la ayuda de las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA) o
inmunofluorescencia indirecta (IFI).

Toxoplasma gondii
Caractersticas morfolgicas
El ooquiste tiene una forma esfrica y mide entre 10-12 m de dimetro. Cada
ooquiste contiene dos esporoquistes que desarrollan cuatro esporozotos cada
uno.
Los taquizotos tienen aspecto semilunar o en arco y miden entre 4-6 m de
largo por 2-4 m de ancho.
Los quistes tisulares son redondeados y poseen una membrana propia, miden
entre 20-200 m de dimetro.
Diagnstico parasitolgico
El criterio clnico es la base del diagnstico. La observacin microscpica del
parasito es difcil. La demostracin de taquizotos (pero no de quistes) en la retina
o en los lquidos orgnicos establece un diagnstico definitivo de toxoplasmosis
activa.. El aislamiento de toxoplasma en la sangre, lquidos orgnicos o tejidos es
indicador de una infeccin aguda (En muy raras situaciones).
Tambin se puede intentar su aislamiento mediante inoculacin experimental en
ratones o en cultivos celulares fundamentalmente fibroblastos humanos o por
inoculacin en animales de experimentacin siendo la inoculacin intraperitoneal
en ratn el mtodo ms empleado
Se pueden buscar los parsitos por biopsia intestinal o utilizarse el diagnstico
indirecto para detectar anticuerpos con la ayuda de la reaccin de Sabin &
Feldman (RSF) o las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA),
inmunofluorescencia indirecta (IFI) o hemoaglutinacin indirecta (HAI).
Actualmente se recomienda el uso de tcnicas moleculares (como la reaccin en
cadena de la polimerasa PCR) para muestras de sangre, LCR, mdula sea y
biopsias.
Sarcocystis sp.
Caractersticas morfolgicas
Es un parsito unicelular que se encuentra en los msculos y otros tejidos de los
mamferos, aves y reptiles. Un sarcoquiste mide en promedio 70 m, pero su tamao

flucta entre 30 y 130 m. Se le ha encontrado en todo el mundo infectando diversas


especies. Es una zoonosis, entre los animales que infecta se pueden incluir ovejas,
caballos, cerdos, perros, gatos, conejos, ratones, pollos, venados, patos, focas, humanos.
Existen varias especies, nombradas de acuerdo al hospedero en donde se encuentran,
por ejemplo: S. rileyi (pato), S. cuniculi (conejo), S. tenella (oveja) y S. miescheriana
(cerdo). Produce la enfermedad conocida como sarcocystosis. Las principales especies
que infectan humanos son S. hominis y S. suishominis. Los humanos pueden infectarse
por ingestin de carne infectada con sarcoquistes.
Diagnstico parasitolgico
Anlisis de heces donde se observan los ooquistes esporulados. Observacin de
los quistes en los hospederos intermediarios por medio de biopsias de tejido (con gran
cantidad de Bradizoitos (Los merozoitos son formas de replicacin por divisin binaria, el
bradizoito es la forma lenta). La sarcocistosis extraintestinal puede detectarse mediante
anticuerpos anti-Sarcocystis a travs de las pruebas serolgicas, entre ellas la ELISA,
HAI, dot-ELISA e IFI.
Microsporidios. Se denomina a un grupo de protozoos parsitos intracelulares obligados
formadores de esporas, que a pesar de ser eucariotas, carecen de mitocondrias y otros
organelos. Ampliamente distribuidos en la naturaleza, causan enfermedad tanto en
animales como en humanos Estn situados taxonmicamente en el phylum Microsporidia
(2) y hasta el momento, han sido descritas casi 1,000 especies pertenecientes a ms de
100 gneros (3). Sin embargo, nicamente especies de ocho gneros (Brachiola,
Encephalitozoon [Septata], Enterocytozoon, Microsporidium, Nosema, Pleistophora,
Trachipleistophora y Vittaforma) han sido asociadas a enfermedades en el hombre,
producidas
principalmente
por
cuatro especies:
Enterocytozoon
bieneusi,
Encephalitozoon intestinalis, Encephalitozoon cuniculi, y Encephalitozoon hellem
Caractersticas morfolgicas:
El tamao promedio de sus esporas (forma infectante) vara entre 1.2 a 2 m de largo
por 0,7-1.5 m de ancho

Enterocytozoon bienusi, es el principal microsporidio patgeno del hombre. Infecta


los enterocitos del intestino delgado, principalmente en pacientes
inmunocomprometidos. Su desarrollo se produce directamente en el citoplasma
de la clula hospedadora sin formar vacuola parasitfora. Su tbulo polar presenta
de 5-7 vueltas.
Encephalitozoon intestinales, infecta los enterocitos del intestino delgado,
principalmente en pacientes inmunocomprometidos. Su desarrollo se produce en
el interior de una vacuola parasitfora. Su tbulo polar presenta de 4-7 vueltas.
Encephalitozoon hellem, produce en vacuolas parasitforas en el interior de las
clulas de su hospedador y forma esporas redondeadas. Su tbulo polar presenta
de 6-8 vueltas.
Encephalitozoon cuniculi, produce en vacuolas parasitforas en el interior de las
clulas de su hospedador y forma esporas. Su tbulo polar presenta de 4-5
vueltas.
Nosema connori, no produce vacuola parasitfora y forma esporas ovales. Su
tbulo polar presenta de 10-11 vueltas.
Vittaforma corneae, no produce vacuola parasitfora y forma esporas cilndricas
Su tbulo polar presenta de 5-6 vueltas.
Pleistophora sp. Forma vacuolas parasitforas y sus esporas son de aspecto oval,
Su tbulo polar tiene 10-11 vueltas.

Diagnstico

La demostracin microscpica de las esporas es la base del diagnstico. Las


esporas se pueden detectar en material de biopsia o mediante el examen de
heces, esputo, aspirado duodenal, LCR y orina.
Se pueden observar utilizando extendidos teidos con la coloracin de Gram (son
grampositivos), la coloracin cido-resistente (mtodo de Zielh-Neelsen), la de
Giemsa o la de Schiff. La coloracin de Weber basada en cromotropos ha
demostrado ser til.
Se puede utilizar pruebas serolgicas como la inmunofluorescencia indirecta (IFI)
o moleculares como la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), pero an no
han demostrado ser fiables para el diagnstico de rutina. Tambin se han logrado
cultivar en lneas celulares como las de rin de mono (MK) o de pulmn fetal
humano (FLH).

II. MATERIAL

Heces frescas formoladas positivas a coccidios


Laminas coloreadas mtodo Kinyoun modificado: Cryptosporidium
Cyclospora cayetanensis, Cystoisospora belli.
Lmina coloreada con Giemsa: Toxoplasma gondii
Lmina coloreada con hematoxilina- eosina: Sarcocystis sp.
Lmina coloreada con Gram cromotrope: Microsporidium
Pipetas, baguetas, suero fisiolgico y lugol.
Aceite de inmersin, lminas y laminillas.
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
Microscopio de luz, papel lente

ESQUEMAS (PRCTICA 6)

spp.,

PRCTICA 7
IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS HEMTICOS,
TISULARES Y DEL APARATO GENITOURINARIO
I. INTRODUCCIN
Los flagelados parsitos sanguneos tienen como hospedador intermediario a un
vector. Se reproducen por fisin binaria longitudinal. Leishmania en su ciclo biolgico
adopta la forma de amastigote (con un flagelo intracelular) y de promastigote (con flagelo
libre pero sin membrana ondulante). Trypanosoma cruzi en su ciclo biolgico adopta la
forma de amastigote, epimastigote (con flagelo libre y una corta membrana ondulante) y
tripomastigote (con flagelo libre y membrana ondulante completa - forma infectante). La
forma infectante en el caso de Leishmania es el promastigote metacclico y en el caso de
Trypanosoma es el tripomastigote metacclico (deyecciones del vector) La va de
infeccin de estas parasitosis es la cutnea. El mecanismo de transmisin es la picadura
del vector (Leishmania). Las formas habituales de transmisin de Trypanosoma cruzi son
aquellas conectadas directamente al vector, a la transfusin de sangre, a la va congnita
y, ms recientemente, las que ocurren va oral, por la ingestin de alimentos
contaminados. Mecanismos menos comunes envuelven accidentes de laboratorio,
manejo de animales infectados, trasplante de rganos.
Los flagelados urogenitales (Trichomonas) carecen de forma qustica. La va de
infeccin de esta parasitosis es la sexual y el mecanismo de transmisin es el contacto
sexual y los fomites.
Leishmania spp.
Caractersticas morfolgicas
Los amastigotes de Leishmania son formas intracelulares. Se caracterizan por
presentar una forma ovoide y miden entre 2-5 m de dimetro (Figura 6).
Cada amastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo posterior (con
cariosoma central) adems de un cinetoplasto anterior al ncleo y restos de
flagelo.
El cinetoplasto tiene forma de bastoncillo y esta conformado por ADN. Es una
estructura que contiene al cuerpo parabasal y un blefaroplasto puntiforme de
donde se origina el flagelo.
El carcter particular de los amastigotes es la ausencia de membrana ondulante y
la presencia de un flagelo intracelular que no se aprecia en las observaciones
microscpicas.
En el vector, el parsito adopta una forma llamada promastigote, que se
caracteriza por su forma alargada y medir entre 14-20 m de longitud.
Cada promastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo central, un
cinetoplasto anterior al ncleo y un flagelo.
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los amastigotes es la base del diagnstico. Se
debe buscar el parsito en muestras de tejidos.
Se recomienda realizar exmenes directos de extendidos de las lesiones
mediante raspado con bistur utilizando coloraciones de Giemsa o Leishman.
Si la muestra resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por biopsia de
tejidos o se les puede cultivar en medio de Novy, McNeal y Nicolle (NNN) e
inocularlos en animales de laboratorio.

Las tcnicas serolgicas tiles para el diagnstico indirecto son la tcnica de


intradermoreaccin (prueba de Montenegro), el inmunoensayo enzimtico (ELISA)
e la inmunofluorescencia indirecta (IFI).

Trypanosoma cruzi
Caractersticas morfolgicas
Los tripomastigotes de Trypanosoma se caracterizan por presentar una forma
fusiforme alargada y ser aplanados lateralmente. Miden entre 10-25 m de
longitud (Figura 7).
Cada tripomastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo central (con
cariosoma central) adems de un cinetoplasto subterminal posterior al ncleo y un
flagelo (1/3 de la longitud total del parsito).
El carcter particular de los tripomastigotes es la presencia de una membrana
ondulante bordeada por el flagelo que se inicia en el cinetoplasto y sale por el
extremo anterior. No se reproducen.
Los amastigotes se caracterizan por presentar una forma redondeada y miden
entre 2-4 m de dimetro.
Cada amastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo central, un
cinetoplasto anterior al ncleo y un flagelo intracitoplasmtico.
En el vector, el parsito adopta una forma llamada epimastigote que se
caracteriza por su forma alargada y por medir entre 18-20 m de longitud.
Cada epimastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo central adems
de una membrana ondulante corta (1/2 de la longitud total del parsito), un
cinetoplasto anterior al ncleo y un flagelo libre.

Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los tripomastigotes es la base del diagnstico.
Se debe buscar el parsito en muestras de sangre o tejidos.
Se recomienda realizar exmenes directos de extendidos sanguneos y tcnicas
de gota gruesa con coloraciones de Giemsa o Wright.
Tambin se pueden utilizar mtodos de concentracin (tcnica de Strout) y se les
puede cultivar en medio de Novy, McNeal y Nicolle (NNN) e inocularlos en
animales de laboratorio.
Las tcnicas como el xenodiagnstico y el hemocultivo, se utilizan con fines
epidemiolgicos.
Las tcnicas serolgicas tiles para el diagnstico indirecto son la tcnica de
fijacin de complemento (prueba de Guerreiro-Machado), el inmunoensayo
enzimtico (ELISA), la hemoaglutinacin indirecta (HAI) y la inmunofluorescencia
indirecta (IFI).
La determinacin de zimodemas (perfiles isoenzimticos) es til en la
identificacin especfica de los parsitos.

CLASE INSECTA: ORDEN DPTERA


Identificacin de insectos vectores de leishmaniosis: Lutzomyia sp.
CLASE INSECTA: ORDEN HEMIPTERA.

Identificacin de insectos vectores de tripanosomiasis americana: Triatominos:


Rhodnius robustus, Triatoma infestans, Pastrongylus herreri (Figura 8).

Trichomonas vaginalis

Adulto de Triatoma infestans

Caractersticas morfolgicas
Los trofozotos se caracterizan por presentar una forma piriforme y miden entre
10-30 m de largo por 5-12 m de ancho.
Cada trofozoto se caracteriza por la presencia de un ncleo (con cariosoma
subcentral y cromatina uniformemente distribuida) adems de un citostoma
(abertura oral), blefaroplastos, axostilo y cuerpos parabasales.
El carcter particular de los trofozotos es la presencia de dos pares de flagelos
anteriores libres y un quinto a lo largo de la membrana ondulante que ocupa 2/3
anteriores del cuerpo.
No presenta formas qustica.
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los trofozotos es la base del diagnstico. Se
recomienda realizar exmenes directos de muestras frescas de secrecin vaginal,
secrecin uretral u orina.
Son caractersticos los movimientos de rotacin de los parsitos.
Tambin se pueden observar los trofozotos en un extendido teido con coloracin
Giemsa o Papanicolau y se pueden cultivar en medio de Diamond (crecen
despus de 5-7 das).
Si la muestra resulta negativa, se pueden buscar los parsitos en secrecin
prosttica o utilizarse el diagnstico indirecto con la ayuda de las tcnicas de
inmunoensayo enzimtico (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta (IFI).

II. MATERIAL

Lminas coloreadas con Giemsa: Leishmania spp. ( amastigotes y promastigotes)


Trypanosoma cruzi (amastigotes, epimastigotes y trypomastigotes metacclicos)
Lmina coloreada con Giemsa: Trichomonas vaginalis
Corte histolgico (H-E) con nidos de amastigotes de Trypanosoma cruzy
Impronta con amastigotes de Leishmania spp.(Giemsa)
Aceite de inmersin, lminas y laminillas.
Microscopio de luz
Papel lente

ESQUEMAS (PRCTICA 7)

PRCTICA 8
IDENTIFICACIN DE ESPOROZOARIOS HEMTICOS
I. INTRODUCCIN
Son coccidios parsitos sanguneos. Tienen como hospedador definitivo a un
vector. Su ciclo biolgico incluye estadios asexuales (trofozotos, esquizontes y
merozotos) y sexuales (macrogametocitos, microgametocitos, ooquistes y esporozotos).
Plasmodium vivax es selectivo y solo invade eritrocitos jvenes, observndose
agrandados. Plasmodium falciparum no es selectivo e invade eritrocitos en cualquier fase
de desarrollo, pudiendo mltiples esporozoitos infectar un solo eritrocito, no aumentando
su tamao. La forma infectante es el esporozoto y las formas diagnsticas se observan
en la sangre perifrica, las cuales van a depender de la especie de Plasmodium Ejm
trofozotos y gametocitos en el caso de P. falciparum. La va de infeccin de esta
parasitosis es la cutnea y el mecanismo de transmisin es la picadura del vector (inyecta
esporozoitos).
El eritrocito parasitado por P. vivax presenta granulaciones de Schffner, P.
falciparum presenta granulaciones de Maurer y P. malariae presenta granulaciones de
Ziemann. Actualmente tambin se reconoce a Plasmodium knowlesi como potencial
causante de malaria en humanos.
Plasmodium spp.
Caractersticas morfolgicas generales
En el hombre se pueden observar estadios de trofozoto, esquizonte y gametocito,
que tienen valor diagnstico.
El trofozoto, tiene un aspecto de anillo y mide entre 20-30 m de dimetro.
El esquizonte tiene un aspecto globular y da origen a los merozotos. Estos son
esfricos y miden entre 2-4 m de dimetro y dan lugar a nuevos trofozotos.
Los gametocitos varan en forma y tamao. En Plasmodium vivax y P.malariae
son redondeados y miden 8-10 m ocupando todo el eritrocito mientras que en
Plasmodium falciparum tiene forma de media luna y miden 12-14 m.
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los estadios esquizognicos (trofozotos,
esquizontes y gametocitos) es la base del diagnstico. Se recomienda realizar
extendidos sanguneos y mtodos de concentracin (tcnica de gota gruesa).
Los estadios esquizognicos se pueden observar en un extendido teido con
coloracin de Giemsa, Wright o Leishman.
Tambin se puede utilizar pruebas serolgicas como el inmunoensayo enzimtico
(ELISA), la inmunofluorescencia directa (IFD) o la hemoaglutinacin indirecta
(HAI), aunque no son de gran ayuda en el diagnstico. En la actualidad se usan
las pruebas moleculares como la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), la
cual es de gran ayuda en la deteccin de infecciones mixtas.
CLASE INSECTA: ORDEN DPTERA
Identificacin de insectos vectores de malaria: Anopheles pseudopunctipenis, A.
albimanus.
II. MATERIAL

Lminas coloreadas con Giemsa para observar los diferentes estadios de:
Plasmodium vivax: Trofozoto joven, Trofozoto mediano y adultos. Esquzonte

joven, Esquzonte maduro, Macrogametocito, Microgametocito. Plasmodium


falciparum: Trofozoto joven, Gametocitos.
Aceite de inmersin
Microscopio de luz
Papel lente

Diferencias morfolgicas de Plasmodium humanos en sangre perifrica (Figura 9)

ESPECIES

P. vivax

P .falciparum

P. malariae

Trofozoto joven

Anular ocupa 1/3 Anular ocupa 1/6 del Anular o en banda


del hemate rara hemate a menudo ocupa 1/3 del hemate
vez hay 2
varios en un hemate muy raro ms de una.

Trofozoto Adulto

Forma
irregular
ameboidea, se ve
en
sangre
perifrica, pigmento
marrn amarillento
fino.

Forma
ameboidea Forma en banda se
pequea. No se ve ve
en
sangre
en sangre perifrica. perifrica, pigmentos
en grnulos grandes.
Citoplasma
compacto, pigmento
oscuro.

Esquizonte joven

Grande amenoide
cromatina
fragmentada,
pigmento fino

Tamao
medio, Pequeo
cromatina
cromatina
fragmentada, pigmento
fragmentada, no se grueso.
ve
en
sangre
perifrica

Esquizonte maduro

Grande doble hilera Pequeos, slo en Forma de roceta o


de merozotos de sangre visceral 18 a margarita con 6 a 12
18 a 24.
32 merozotos
merozotos.

Microgametocito

Grandes, esfricos,
cromatina
difusa,
Abundante
pigmento malrico y
granulaciones
(amarillo)

Media
luna, Similar a P. vivax, pero
cromatina nica laxa, ms pequeos.
Pigmento
malrico
oscuro.

Macrogametocito

Esfrico, cromatina
compacta,
Abundante
pigmento malrico y
granulaciones
(amarillo)

Media
luna, Similar a P. vivax pero
cromatina compacta, pequeo,
pigmento
Pigmento
malrico grueso diseminado.
oscuro.

Presencia de formas Todas las formas Gametocitos


y Todas
las
formas
en sangre circulante dependiendo
del Trofozotos Jvenes como suceden en
momento en que
P.vivax.
tome la sangre en
relacin en relacin
con el ciclo febril.

ESQUEMAS (PRCTICA 8)

PRCTICA 9
IDENTIFICACIN DE TREMTODES
I. INTRODUCCIN
Los trematodos son gusanos hermafroditas, de simetra bilateral,
dorsoventralmente aplanados y no segmentados (con excepcin de Schistosoma que
presenta sexos separados y cuerpo cilndrico). Su cuerpo no se divide en regiones y
presenta dos ventosas, una oral y otra ventral (acetbulo). Presenta aparato digestivo
incompleto y fecundacin interna. Su ciclo biolgico incluye varios estadios; por ejemplo
para F. heptica: huevo, larva (miracidio, esporoquiste, redia, cercaria y metacercaria) y
adulto.
En los tremtodos (Fasciola y Paragonimus) la forma infectante es la metacercaria
mientras que la forma diagnstica es el huevecillo no embrionado. La va de infeccin de
estas parasitosis es la oral y el mecanismo de transmisin es la ingestin de alimentos
contaminados con metacercarias. Para Schistosoma la forma infectante es la cercara o
furcocercaria..
Fasciola hepatica
Caractersticas morfolgicas
Fasciola es un gusano plano en forma de hoja de laurel y de color parduzco, que
mide entre 2-4 cm. por 1-2 cm (Figura 10).
Se caracterizan porque en su regin anterior se distingue la ventosa oral mientras
que un tercio por detrs se encuentra la ventosa ventral o acetbulo.
Los huevos son de forma elptica y color amarillento, miden 120-150 m por 60100 m; tiene cscara delgada y son operculados (Figura 11).
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los huevecillos es la base del diagnstico. Se
recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de
concentracin (tcnica de Faust o de Baerman).
Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos en bilis por
aspirado duodenal, estudios radiolgicos o biopsias hepticas.
Tambin puede utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos.
Doble difusin arco 2 (DD-2), inmunoensayo enzimtico (ELISA),
hemoaglutinacin indirecta (HAI) e inmunofluorescencia indirecta (IFI). Las
tcnicas moleculares no se han utilizado por el momento.
Paragonimus peruvianus
Caractersticas morfolgicas
Paragonimus es un gusano plano de forma ovalada y de color rojizo, que mide
entre 8-15 mm por 4-5 mm (Figura 12).
Se caracterizan porque la ventosa oral es subterminal y de mayor dimetro que la
ventosa ventral o acetbulo que se encuentra por debajo de ella.
Los huevos son de forma ovalada y color marrn rojizo, miden 80-90 m por 5060 m; tiene cscara delgada y son operculados.
Las metacercarias se caracterizan por carecer de envoltura qustica y miden 1.47
m por 0,67 m.

Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los huevecillos es la base del diagnstico. Se
recomienda realizar exmenes de esputo colectado por 24 horas y tratado con
hidrxido de sodio.
Si la muestra de esputo resulta negativa, se pueden buscar los parsitos en heces
o aspirados gstricos, exmenes radiogrficos o bipsias pulmonares.
Tambin puede utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos
con la ayuda de las tcnicas de intradermorreaccin, inmunoensayo enzimtico
(ELISA), inmunofluorescencia indirecta (IFI) y hemoaglutinacin indirecta (HAI).
Las tcnicas moleculares no se han utilizado por el momento.
Schistosoma mansoni
Caractersticas morfolgicas
El gnero Schistosoma posee gran cantidad de especies, parsitas de mamferos
silvestres y domsticos, incluido el hombre. Al menos tres especies parasitan al hombre:
Schistosoma mansoni, Schistosoma japonicum y Schistosoma haematobium (Figura 13).
S. mansoni (trematodo sanguneo de Manson) se localiza en la mayor parte de
frica; tambin se encuentra en el continente americano, introducido con los esclavos
africanos infectados. Los adultos viven en las venas mesentricas del intestino grueso de
muchos mamferos, tanto silvestres como domsticos, incluido el hombre (hospedador
definitivo).
S. japonicum (trematodo sanguneo oriental) se encuentra en el continente
asitico. El adulto vive en las venas mesentricas del intestino delgado y a veces en las
venas del sistema porta del hombre y otros mamferos (hospedador definitivo).
S. haematobium (trematodo sanguneo de la vejiga) se distribuye por gran parte
de frica y por ciertas zonas de Asia. Los adultos viven en las venas que rodean la vejiga
urinaria (venas vesicales) del hombre y otros primates (hospedador definitivo).
El ciclo vital es similar en todas las especies. Los huevos, ya embrionados,
eclosionan en el agua; surge un miracidio que penetra activamente en un caracol
acutico (hospedador intermediario) (Biomphalaria spp. para S. mansoni, Oncomelania
spp. para S. japonicum y Bulinus spp. para S. haematobium), donde se transforma en
esporoquiste, que origina esporoquistes hijos, de donde surgen cercarias (no se
producen redias). Las cercarias salen del caracol y penetran activamente, a travs de la
piel, en su hospedador definitivo cuando se sumerge en aguas con caracoles infectados.
Durante la entrada en el hospedador definitivo, la cercaria pierde la cola y se
transforma en esquistosmula, que se dirigir al sistema heptico, donde evolucionar
hasta adulto, para posteriormente dirigirse a su hbitat especfico.
Una de las caractersticas de las esquistosomiasis es la produccin de
granulomas alrededor de los huevos que quedan entre los tejidos del hospedador cuando
se desplazan tratando de salir a la luz intestinal o a la vejiga urinaria.
Diagnstico parasitolgico
La hembra, larga y delgada, se encuentra parcialmente introducida en el canal
ginecforo del macho. Los machos son gruesos de 615 mm de longitud y 1,5 mm de
dimetro; poseen 37 testculos y el tegumento puede estar ornamentado con tubrculos
espinosos ricos de glucgeno. Las hembras son delgadas, de tegumento liso y poseen un
slo ovario, situado en el tercio anterior del cuerpo; el tero es corto. Huevo de S.
mansoni es grande (120170x4050 m), sin oprculo y con una espina lateral. Sale con
las heces del hospedero ya embrionado (contiene una larva miracidio).

II. MATERIAL

Muestras de heces fromoladas con huevos de Fasciola y Paragonimus


Metacercaria de Fasciola hepatica
Miracidium de Fasciola hepatica
Adultos de Fasciola hepatica (material preservado)
Adulto de Fasciola hepatica coloreado con carmn
Hospedero intermediario: Lymnaea columella caracol
Metacercaria de Pargonimus peruvianus
1er H.I.: Aroapyrgus sp. caracol
2do. H.I. Hypolobocera chilensis - cangrejo
Adulto de Paragonimus peruvianus coloreado con carmn
Adultos de Schistosoma mansoni
Huevo de Schistosoma mansoni
Corte histolgico con huevo de Schistosoma mansoni
Microscopio de luz
Papel lente

ESQUEMAS (PRCTICA 9)

PRCTICA 10-11
IDENTIFICACIN DE CSTODES INTESTINALES Y
TISULARES
I. INTRODUCCIN
Los cestodos son gusanos hermafroditas, de simetra bilateral, dorsoventralmente
aplanados y segmentados. Su cuerpo se divide en tres regiones, Cabeza o esclex, el
cuello y el estrbilo. Carecen de aparato digestivo. Su ciclo biolgico incluye estadios de
huevo, larva (cisticerco, cisticercoide, procercoide, plerocercoide e hidtide) y gusano
adulto. El esclex lleva los rganos de fijacin (ganchos, ventosas, botrias) y el estrbilo
est formado por un conjunto de segmentos llamados progltidos (inmaduros, maduros y
grvidos). Los gusanos adultos ocupan el tubo digestivo de los vertebrados y sus larvas
se encuentran en los tejidos de vertebrados e invertebrados.
Taenia solium
Forma infectante: la ingesta de la larva cisticerco (Cysticercus cellulosae),
presente en el msculo de porcino, ocasiona en el hombre teniasis intestinal. La
ingesta de huevos de T. solium ocasiona cisticercosis.
Huevos: 31 x 43 m, esfricos o sub-esfricos, con cscara gruesa y estras
radiales prominentes. Oncsfera embrionada con tres pares de ganchos
(Embrin hexacanto) dentro del embriforo, que es la forma diagnstica del
gnero Taenia.
Progltido: Mas largos que anchos. Los segmentos grvidos tienen un tallo
uterino central con 7 10 ramas laterales.
Esclex: Cuatro ventosas caractersticas del gnero, con un rostelo armado de
doble corona de ganchos quitinosos (Figura 14).
Taenia saginata
Forma infectante: la ingesta de la larva cisticerco (Cysticercus bovis) presente en
el msculo de vacuno, ocasiona en el hombre teniasis intestinal.
Huevos: semejantes a T. solium.
Progltido: Mas largos que anchos. Los segmentos grvidos tienen un tallo
uterino central con 15 20 ramas laterales a cada lado. Son mviles cuando
estn recin eliminados.
Esclex: Cuatro ventosas caractersticas del gnero, con una corona inerme,
desprovista de rostelo sin ganchos. Mide 2 mm de dimetro (Figura 14).
NOTA: El hombre es el nico ser que puede alojar en su intestino delgado a la Taenia
solium y la Taenia saguinata. Ambos producen huevos que salen junto con las heces y
pueden contaminar el agua y los alimentos, que al ser consumidos por el hombre les
puede ocasionar la Cisticercosis (solamente los huevos de T. solium), enfermedad
que afecta al cerebro, msculos o el ojo.
El hombre al consumir carne de cerdo o vacuno infectado con el estadio larvario
(cisticercos) adquiere nuevamente el parasito (teniasis)

Echinococcus granulosus
El hospedero definitivo es el Perro (se infecta al ingerir vsceras con quiste
hidatdico), los hospederos intermediarios son el humano, bovinos, vacunos,
porcinos (se infectan al ingerir huevos).
Huevo:
Semejantes a los de Taenia spp. Con cubierta radiada y embrin
hexacanto
Gusano adulto: 3 6 mm. Cuello corto y delgado de 1 mm. Estrbilo consta de 3
4 progltidos, con poros genitales regularmente alternos; el ltimo segmento
mide aproximadamente la mitad del largo total del parsito. Anatoma interna
semejante a la de las tenias (Figura 15).
Esclex: Pequeo, globular, 300 m de dimetro, Posee cuatro ventosas y un
rostelo armado con doble corona de ganchos (25 30 ganchos).
Quiste hidatdico o hidtide (Larva):
Hidtide: Tiene forma ms o menos esfrica, pudiendo alcanzar hasta 10 cm. de
dimetro. Esta constituida por una membrana que consta de dos capas: Externa
o cutcula (1 mm de espesor) e interna, germinativa o prolifera (25 mm de
espesor); esta ultima da lugar a la formacin de esclices, vesculas proliferas e
hijas; presenta un contenido formado por un liquido estril incoloro o amarillo
claro y un sedimento denominado arenilla hidatdica constituido por
ganchillos, esclices y vesculas que se desprenden de la capa germinativa.
Diphyllobothrium pacificum
Forma infectante: Larva plerocercoide en la carne de pescado de agua salada.
Huevos: 50-60 x 36-40 m, ovales o elpticos. Se observa un oprculo en uno de
los extremos con un pequeo botn terminal en el otro. La cscara es delgada y
lisa.
Progltido: Ms largos que anchos. Poro genital y poro uterino de posicin
central. Un tero en la parte media o central del progltido, con aspecto de roseta.
Testculos y glndulas vitelgenas.
Esclex: Forma de corazn, con una hendidura longitudinal poco profunda
(botrias), rodeada en ambos lados por pliegues semejantes o labios.
Hymenolepis nana
Forma infectante: Huevo (Ciclo directo)
Huevo: 40 x 60 m, ovales o subesfricas. La cscara se compone de dos
membranas, la externa es relativamente delgada y tiene una superficie lisa; la
interna tiene dos polos opuesto de los que nacen 4 8 filamentos polares, que se
extienden entre las dos membranas (caractersticas diferenciales de H. diminuta
que carece de filamentos polares). Dentro de la membrana interna se encuentra la
oncsfera con tres pares de ganchos (huevo hexacanto)
Gusano adulto: Rara vez se encuentra en muestras fecales, donde puede
confundirse con hilos delgados de moco. Mide menos de 40 mm de largo y tiene
progltidos imprecisos. Mas anchos que largos, y un pequeo esclex con cuatro
ventosas y un rostelo saliente con un anillo de 20 30 ganchos.
Hymenolepis diminuta (accidental en el hombre)

Forma infectante: Larva cisticercoide presente en varias especies de pulgas,


cucarachas y gorgojos, que son inadvertidamente ingeridas por el hombre (Ciclo
Indirecto).
Huevo: 70 - 85 m de longitud, 60 80 m de ancho, redondos o vales. Tiene
apariencia semejante a los huevos de H. nana. No posee filamentos polares.
Gusano adulto: Rara vez se encuentra en muestras fecales. Los progltidos no
son precisos. El esclex es pequeo y esfrico, tiene cuatro ventosas esfricas
profundas y un rostelo redondeado sin ganchos.

Dipylidium caninum (accidental en el hombre)


Forma infectante: Larva cisticercoide que desarrollan en la cavidad corporal de
las pulgas del perro o el gato, que son inadvertidamente ingeridas por el hombre
(Ciclo Indirecto).
Huevo: En general se observa paquetes de huevos, que son sacos que
contienen 5 15 huevos esfricos (Cpsula ovgera). Cada huevo mide 35 x 40
m, son esfricos y encierran una oncosfera interna con seis ganchos delicados.
Progltido: Mas largos que anchos, con forma de barril, con un doble juego de
estructuras reproductoras que tienen dos poros genitales para cada segmento,
uno a cada lado (otras especies de Taenia sp. tienen solo un poro genital).
Esclex: Rostelo cnico u ovoide con 30 150 ganchos pequeos, semejantes a
espinas, dispuestas en varias hileras. El rostro puede retraerse en una depresin
en la porcin superior del esclex (Figura 16).
II. MATERIAL

Heces formoladas con huevos de Taenia sp., Diphyllobothrium sp, Hymenolepis


nana.
Lminas y laminillas.
Esclex coloreado con carmn de: Taenia solium, Taenia saginata,
Diphyllobothrium pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta,
Dipylidium caninum.
Progltidos grvidos de Taenia solium, Taenia saginata, Diphyllobothrium
pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Dipylidium caninum,
coloreados con carmn.
Adulto de Echinococcus granulosus, coloreado con carmn.
Arenilla hidatdica coloreada con H-E.
Cpsula ovgera de Dipylidium caninum coloreado con carmn.
Corte histolgico de Cisticercus celullosae (H-E) y quiste hidatdico.
Material preservado en formol 10% de especmenes adultos de: Taenia solium,
Taenia saginata, Diphyllobothrium pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis
diminuta, Dipylidium caninum, quiste hidatdico.
Pipetas, baguetas, lugol.
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
Aceite de inmersin.
Microscopio de luz.

ESQUEMAS (PRCTICA 10-11)

ESQUEMAS (PRCTICA 10-11)

PRCTICA 12- 13
IDENTIFICACIN DE NEMTODOS INTESTINALES
I. INTRODUCCIN
Los nematodos son gusanos de sexos separados, de simetra bilateral, cilndricos
y vermiformes. Su cuerpo no se divide en regiones. En su extremo anterior algunas
especies poseen papilas, ganchos, placas o dientes. Presentan aparato digestivo
completo. Su ciclo biolgico incluye estadios de huevo, larva que despus de cuatro
mudas dan lugar al adulto. Su fecundacin es interna. Presentan dimorfismo sexual y la
gran mayora son ovparos aunque tambin pueden ser vivparos (Trichinella) u
ovovivparos (Strongyloides).
En los nemtodos intestinales (Ascaris, Trichuris y Enterobius) la forma infectante
es el huevo larvado (Figura 17) y la forma diagnostica es la observacin de huevos o del
adulto. En otro grupo de nematodos (Ancylostoma, Necator y Strongyloides) la forma
infectante es la larva filariforme mientras que la forma diagnstica es la larva rabditiforme
(Strongyloides) y huevos (Uncinarias). La va de infeccin de la mayora de los
nemtodos es la oral y el mecanismo de transmisin es la ingestin de agua o alimentos
contaminados con el estadio infectante del parasito.
Ascaris lumbricoides
Caractersticas morfolgicas
Son nemtodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios
provistos de papilas sensoriales. Presentan una longevidad aproximada de 1-2 aos.
Huevos:
a. Tamao: Alrededor de 45 a 75 m de longitud por 35 a 50 m de dimetro.
b. Forma: Redondos u ovoides, color amarillo oscuro.
c. Membrana envolvente: Una externa festoneada, una media y otra interna lisa. Cuando
los huevos son infecundos estn deformados y tienen un aspecto vacuolar.
Especmenes
a. Tamao: las hembras miden 20 a 35 cm. de largo y los machos 10 a 15 cm. De
longitud, rara vez sobrepasan los 30 cm. y se caracterizan por la presencia de un par de
espculas copulatorias.
b. Cuerpo: De color rosado al ser expulsado, Las caractersticas de identificacin tiles
son rayas longitudinales blancas sobre ambos lados del cuerpo y la falta de segmentos
musculares.
c. Extremidad anterior: La boca presenta 3 labios (uno dorsal y dos ventral laterales)
d. Extremidad posterior: En la hembra es recto y cnico con ano sub-terminal. En el
macho enrollada, cloaca ano genital con 2 espculas copulatorias.
e. Vulva: en el cinturn genital, estrechez que es transversal al cuerpo (localizacin: tercio
anterior).
Diagnstico parasitolgico

La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico. Se


recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de
concentracin (tcnica de Faust o de Ritchie).
Se puede estimar la intensidad de la infeccin (nmero de huevos por gramo de
heces) utilizando las tcnicas de Stoll o Kato-Katz.
Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por aspirado
duodenal o se pueden realizar estudios radiolgicos.
Trichuris trichiura
Caractersticas morfolgicas
Son nemtodos que se caracterizan por presentar una boca sin labios provista de
un estilete bucal. Presentan una longevidad aproximada de 6-8 aos.
Presentan forma de ltigo, con el tercio anterior ms delgado. Las hembras
miden entre 3-5 cm. mientras que los machos miden entre 3- 4,5 cm. y se
caracterizan por la presencia de una espcula copulatoria.
Los huevos tienen forma de barril en cuyos extremos se distinguen un par de
tapones polares (albuminoides), miden 50-55 m por 22-23 m y tienen cscara
gruesa. Necesitan de 10-14 das a 20-30 C para completar su desarrollo.
Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 3-7 mil huevos diarios. Presentan
una viabilidad aproximada de 1 ao.
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico. Se
recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de
concentracin (tcnica de Faust o de Ritchie).
Se puede estimar la intensidad de la infeccin (nmero de huevos por gramo de
heces) utilizando las tcnicas de Stoll o Kato-Katz.
Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por aspirado
duodenal o se pueden realizar estudios radiolgicos. Las tcnicas serolgicas y
moleculares no son de mucha utilidad.
Enterobius vermicularis
Caractersticas morfolgicas
Son nemtodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios
provistos de papilas sensoriales y una par de aletas cervicales. Presentan una
longevidad aproximada de 2-3 meses.
Las hembras miden entre 8-12 mm mientras que los machos miden entre 3-5 mm
y se caracterizan por la presencia de un par de espculas copulatorias.
Los huevos son de forma oval, miden 50-60 m por 20-30 m y tienen cscara
delgada.
Necesitan de 4-6 horas a 20-30 C para completar su desarrollo.
Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 10 mil huevos durante su vida.
Presentan una viabilidad aproximada de 30-50 das.
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico. Los
exmenes seriados de heces y los mtodos de concentracin son de poca
utilidad.
Se deben buscar los parsitos utilizando la tcnica de Graham (cinta engomada)
por cinco das sucesivos. Tambin se puede recurrir al uso de hisopados anales.
Las tcnicas serolgicas y moleculares no son de mucha utilidad.
Toxocara canis/ Toxocara felis

Caractersticas morfolgicas
Son nemtodos, su hbitat es el intestino delgado. El hospedero definitivo es el
perro y gato, hospedero accidental el hombre.
El adulto macho puede medir hasta 10 cm. y la hembra hasta 12 cm.
Producen la larva migrans visceral, sndrome clnico que resulta de la invasin de
vsceras humanas por larvas de nemtodos, cuyos adultos son por lo general
parsitos de animales inferiores
Forma infectante huevos embrionados
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico en el
hospedero definitivo.
En el humano se puede diagnosticar por tcnicas serolgicas: ELISA, Western
Blot
Ancylostoma duodenale y Necator americanus
Caractersticas morfolgicas
Ancylostoma es un nemtodo que se caracteriza por presentar una cpsula
bucal con dos pares de dientes. Presentan una longevidad aproximada de 6-8
aos.
Las hembras miden entre 10-13 mm, los machos miden entre 8-11 mm y se
caracterizan por la presencia de un par de espculas copulatorias y una bolsa
copulatriz.
Los huevos son de forma ovoide, miden 56-60 m y tienen cscara delgada.
Necesitan de 1-2 das a 20-30 C para completar su desarrollo.
Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 20-30 mil huevos diarios. No se
conocen datos acerca de su viabilidad.
Necator es un nemtodo que se caracteriza por presentar una cpsula bucal con
un par de placas cortantes. Presentan una longevidad aproximada de 4-5 aos.
Las hembras miden entre 9-11 mm, los machos miden entre 7-9 mm y se
caracterizan por la presencia de un par de espculas copulatorias y una bolsa
copulatriz.
Los huevos son de forma ovoide, miden 64-76 m y tienen cscara delgada.
Necesitan de 1-2 das a 20-30 C para completar su desarrollo.
Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 6-11 mil huevos diarios. No se
conocen datos acerca de su viabilidad.
Las larvas rabditiformes son de forma alargada y miden 250-350 m de longitud.
Se caracterizan por la presencia de un bulbo esofgico. Las larvas filariformes
son de forma alargada y miden 600-700 m de longitud. Se caracterizan por la
ausencia del bulbo esofgico. Tienen una viabilidad de 6-9 semanas.
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico. Se
recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de
concentracin (tcnica de Faust o de Ritchie).
Se puede estimar la intensidad de la infeccin (nmero de huevos por gramo de
heces) utilizando las tcnicas de Stoll o Kato-Katz.
Para identificar y diferenciar las larvas rabditiformes se requiere de su cultivo a
travs de la tcnica de Harada-Mori.

Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por aspirado
duodenal o se pueden realizar estudios radiolgicos. Las tcnicas serolgicas y
moleculares no son de mucha utilidad.

Strongyloides stercoralis
Caractersticas morfolgicas
Son nematodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios
provistos de papilas sensoriales. No se conocen datos acerca de su longevidad.
Las hembras miden entre 2,1-2,7 mm. No se ha logrado hallar a los machos, por
lo que se considera que la hembra se reproduce por partenognesis.
Los huevos son de forma oval, miden 55-60 m por 28-32 m y tienen cscara
delgada (normalmente NO se eliminan con las heces). Necesitan de 12 horas a
20-30 C para completar su desarrollo.
Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 15-50 huevecillos diarios. No se
conocen datos acerca de su viabilidad.
Las larvas rabditiformes (Forma diagnstica) son alargadas y miden 180-380
m de longitud. Se caracterizan por la presencia de un bulbo esofgico. Las
larvas filariformes (Forma infectante) son alargadas y miden 500-700 m de
longitud. Se caracterizan por la ausencia del bulbo esofgico. Tienen una
viabilidad de 45-50 das.
Diagnstico parasitolgico
La demostracin microscpica de larvas rabditiformes es la base del
diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar
mtodos de concentracin (tcnica de Ritchie o de Baermann).
Para identificar y diferenciar las larvas rabditiformes se requiere de su cultivo a
travs de la tcnica de Harada-Mori.
Tambin puede utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos
con la ayuda de la tcnica de inmunoensayo enzimtico (ELISA). Las tcnicas
moleculares no son de mucha utilidad.
Trichinella spiralis
Caractersticas morfolgicas:
El adulto de este gusano parasita el intestino delgado del hombre, cerdo y otros
mamferos. Mide de 2-5 mm. El hbitat de la larva es el msculo esqueltico.
Hospedero accidental es el Hombre.
La forma infectante son las larvas contenidas en carnes mal cocidas.
Los machos miden hasta 1.5 mm y las hembras hasta 3 mm
Diagnstico parasitolgico
Clnicamente es necesario hacer el diagnstico diferencial con otros sndromes
Infecciosos que produzcan sntomas generales y mialgias.
Las pruebas de mayor sensibilidad y especificidad son ELISA y hemaglutinacin
indirecta.
II. MATERIAL

Heces formoladas con huevos de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura,


Uncinarias, Enterobius vermicularis
Adultos de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, Uncinarias, Enterobius
vermicularis.
Cpsula bucal Ancylostoma duodenalis y Necator americanus
Bursa copulatriz de ejemplar macho de Uncinarias
Heces formoladas con larvas rabditoides de Strongyloides stercoralis
Heces formoladas con huevos de Toxocara canis
Lmina coloreada con Trichinella spiralis
Corte histolgico de Ascaris lumbricoides y Enterobius vermicularis (H-E)
Lminas y laminillas, Pipetas, baguetas, suero fisiolgico y lugol.
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol)
Aceite de inmersin.
Microscopio de luz.

ESQUEMAS (PRCTICA 12-13)

ESQUEMAS (PRCTICA 12-13)

PRCTICA 14-15
IDENTIFICACIN MORFOLGICA DE ARTRPODOS
I. INTRODUCCIN
El Phylum Artrpodo comprende el mayor nmero de especies del Reino Animal,
caracterizadas por tener bsicamente un exoesqueleto quitinoso, cuerpo y apndices
segmentados. A este Phylum pertenecen los ectoparsitos.
Los artrpodos presentan una cabeza, trax y abdomen. La anatoma interna de
los artrpodos es un espacio lleno de hemolinfa, llamado hemocele. Los artrpodos
juegan el papel de vectores en la transmisin de enfermedades. El vector es el portador
viviente, por diseminacin o inoculacin o ambas a la vez del agente causal de la
enfermedad.
II. CLASE INSECTA
Comprende a todos los insectos. Cuerpo dividido en tres regiones: cabeza, trax y
abdomen.

Cabeza: sus apndices principales son un par de antenas, los ojos compuestos y
los ojos simples u ocelos, las piezas bucales.

Trax: formado por tres segmentos, cada uno con un par de patas y dos pares de
alas.

Abdomen: se compone por un nmero variable de segmentos, el 8vo y 9no.


Llevan los rganos sexuales externos usados para la copula en el macho el
oviscato o pieza para poner huevos en las hembras.

Los insectos respiran por traqueas que llevan aire a los tejidos por medio de unas
traqueolas finamente ramificadas.
A. ORDEN SIPHONAPTERA
Caractersticas morfolgicas
Las pulgas son insectos hematfagos que presentan el cuerpo aplanado
lateralmente, carecen de alas, un cuerpo recubierto de una gruesa capa de quitina, con
un color marrn oscuro. Son holometbolos. Cabeza: estrecha y cuneiforme. Las antenas
son cortas y gruesas. Los ojos ausentes con frecuencia presentan 2 ocelos. Aparato bucal
picador-chupador. Con un peine o ctenidios (peine genal o pronotal). Algunas especies no
presentan. Trax: presenta tres segmentos, cada uno con un estigma y un par de patas.
Abdomen: presenta 10 segmentos, 8 con un par de espirculos. En un espcimen
hembra vea la espermateca situada en el 7mo esternito de forma variable, segn las

especies. Observe en la parte posterior, una placa porosa con numerosas cerda llamada
Pygidium, es una estructura sensorial. La genitalia del macho es ms compleja (Figura
17).
Mide de 1 a 7 mm de largo. Tunga penetrans es la ms pequea (1 mm). Los
machos son ms pequeos que las hembras. Son transmisores de enfermedades
infecciosas. Otras especies; Xenopsylla cheopis (ratas), Ctenocephalides canis (perro),
Pulex irritans (humano) (Figura 18).
Diagnstico parasitolgico
Con ayuda de pinzas se deben desprender las pulgas del hospedador y
preservarlo en alcohol de 96 para su identificacin.
Xenopsylla cheopis: carecen de ctenidias. Cerda ocular delante del ojo.
Mesopleura dividida. Pulex irritans: carecen de ctenidias, Cerda ocular
debajo del ojo. Mesopleura entera. Tunga penetrans: no presenta peines.
Su cabeza es angular. (Figura 19).
Ctenocephalides canis: ctenidias genales y pronotales. Cabeza corta y
alta. Primer diente genal es corto.
Ctenocephalides felis: cabeza baja y alargada. Primer y segundo diente
genal tienen la misma altura. (Figura 20).
B. ORDEN ANOPLURA
Caractersticas morfolgicas
Los piojos son insectos que miden 2 y 4 mm de longitud, siendo las hembras de
mayor tamao que los machos. Tienen el cuerpo achatado en sentido dorsoventral, el
color grisceo, son hemimetabolos, eminentemente hematfagos especficos. Son
transmisores de enfermedades infecciosas.
Cabeza: Ojos simples laterales. Piezas bucales retrctales tipo sucto picador.
Trax: Pro, meso y metatrax. Phthirus pubis no presenta la caracterstica constriccin
torcica-abdominal que si esta presente en Pediculus. Estigma respiratorio torcico. Tres
pares de patas: coxa, trocnter, fmur, tibia, la cual presenta un apndice terminal, el
tarso de un solo segmento que termina en una garra opuesta a la tibia, funcionando como
una pinza que facilita su adherencia a pelos y ropa. Abdomen: Con 8 segmentos visibles
y 6 pares de estigmas respiratorios. Diferencie hembra y machos con extremidad
abdominal bilocada, en el macho redondeada y se observa la espcula. Los huevos
llamados liendres son blancos, ovoides, de 0.8 mm y presentan en el polo libre un
oprculo mamelonado. Especies representativas: Pediculus humanus variedad capitis,
Pediculus humanus variedad corporis, Phthirus pubis (piojo cangrejo, ladilla) (Figura
21).
Diagnstico parasitolgico
Para remover piojos es utilizando peines especiales para desprenderlos del
hospedador. Preservarlo en alcohol de 96 para su identificacin.
III. CLASE ARACNIDA
Formado por artrpodos que poseen 4 pares de patas, cabeza y trax estn
unidos formando el cefalotrax, carecen de alas y antenas. La taxonoma de los acarina
es compleja y no esta aun resuelta. De manera tradicional, los acarina han sido
considerados un orden de la clase arcnidos, orden Acarina o Acari, pero en la mayora
de estudios recientes, los acarina se consideran una subclase que puede dividirse en 3
superrdenes que incluyen diversos rdenes.
Sarcoptes scabiei

Caractersticas morfolgicas
Presenta cefalotrax y abdomen unido, sin segmentacin externa. De forma oval,
aplanado dorso ventralmente, no tiene ojos y en su tegumento blando y delgado se
dibujan lneas ondulantes paralelas y presentan cerdas o pelos salientes. En su parte
anterior sobresale el captulo o aparato bucal semejando una falsa cabeza. En su cara
dorsal presenta espinas y pelos dirigidos hacia atrs que determinan que el parsito no
pueda retroceder en su caminar. La cara ventral soporta cuatro pares de patas.
Tanto en hembras como en machos los dos pares anteriores presentan ventosa y
uas, las dos posteriores terminas en cerdas, salvo el cuarto par del macho que tambin
presenta ventosas. La hembra mide de 330 a 450 m de largo y el macho de 200 a 240
m. Es un organismo aerobio, intercambia gases a travs del exoesqueleto. Su aparato
bucal posee fuertes quelceros que le permiten masticar el estrato crneo y alimentarse
de estas clulas (Figura 22).
Diagnstico parasitolgico
Debe sospecharse ante una dermatosis muy pruriginosa. La visualizacin de
surcos de 5 a 20 mm de longitud, es diagnstica, pero a menudo la dificultan las
polimorfas lesiones superpuestas. Puede facilitarse mediante su tincin con azul de
metileno. En caso de duda, el examen microscpico del material obtenido por raspado de
surcos intactos es confirmatorio.
Demodex
Caractersticas morfolgicas
Los Demodex son caros microscpicos implicados en el desarrollo de varias
enfermedades oculares y drmicas. Atendiendo a su localizacin Demodex folliculorum
se localiza en el folculo piloso y Demodex brevis en las glndulas sebceas.
Es un caro de la familia Demodicidae. Presenta un cuerpo fusionado,
pudindose diferenciar dos partes, el gnatosoma o parte anterior donde se localizan las
piezas bucales, y el idiosoma que se corresponde con la porcin posterior del cuerpo.
Esta se divide en podosoma (4 pares de patas cortas) y opistosoma la cual presenta una
estriacin transversal caracterstica. El tamao es de 250-300 m, siendo la hembra de
mayor tamao que el macho (Figura 23).Los huevos de Demodex poseen una morfologa
en punta de flecha.
Diagnstico parasitolgico
Para su diagnstico se han de arrancar unas 8-10 pestaas del parpado afecto, o
extraer la materia grasa de los folculos por compresin del borde palpebral y sebceo de
la piel, colocarlos sobre un portaobjeto, con una gota de xilol en el segundo caso y
observarlos al microscopio, 100 X, 400 X.
Garrapatas
Caractersticas morfolgicas
Ectoparsitos que se alimentan de sangre de sus hospederos. Son las formas
gigantes de los caros, en ayunas pueden ser pequeas sin embrago cuando se
encuentran repletas de sangre succionada, alcanza un mayor tamao.
Las garrapatas se diferencian de los dems Acari por poseer en el dorso de la
primera pata un visible poro sensorial, conocido como rganos de Halle, y la mayora
presenta un prominente hipostoma dentado. Las garrapatas estn en dos familias: los
argsidos (Argasidae, garrapatas blandas, hipostoma cubierto) y los ixdidos (Ixodidae,
garrapatas duras, hipostoma libre).

Los adultos miden entre 2 y 30 mm de largo, dependiendo de la especie, y del


grado de ingesta de sangre en su alimentacin (Figura 24).
Garrapatas blandas: Argas persicus, Otobuis megnini
Garrapatas duras: Ixodes ricinus, Boophilus microplus, Rhipicephalus sanguimeus

Diagnstico parasitolgico
Para remover garrapatas es utilizando pinzas finas de acero y tirar firmemente
para desprenderla del hospedador. Preservarlo en alcohol de 96 para su identificacin.
El diagnstico de las especies de garrapatas depender de varios factores, como lugar
de colecta, hospedador, nombre vulgar del parsito, por lo que se recomienda solicitar
asesoramiento de expertos en el tema para estos casos.
Araas
Caractersticas morfolgicas
Loxoceles laeta: Araa casera. Tamao: 8-15 mm
Cefalotrax: Ligeramente aplanado dorso ventralmente, con un surco longitudinal.
De color marrn claro. Quelcero, formados por dos segmentos: uno basal y otro distal en
forma de garra encorvada, con un orificio subterminal, para la salida del veneno.
Pedipalpos, de la misma estructura que una pata, en los machos se modifican y
constituyen rganos de cpula. Seis ojos y su disposicin en tres filas. Cuatro pares de
patas: coxa, trocnter, fmur, patella, tibia y tarso. Abdomen: De forma ovoide, de color
grisceo, con pelos. En la parte posterior y ventral, observe una hilera de seis estructuras
por donde salen los hilos secretados por las glndulas de seda.
Accidente por loxocelismo
El veneno de L. laeta posee un fuerte poder citotxico y proteoltico, causa severa
alteracin de los endotelios vasculares, hemolisis y puede matar a un ser humano.
Caractersticas morfolgicas
Latrodectus mactans: Viuda negra o Lucacha. Tamao: Adultos 1.5 cm. Todo el
cuerpo aterciopelado.
Cefalotrax: Quelcero, Pedipalpos, Ocho ojos y su disposicin en dos hileras
horizontales. Cuatro pares de patas: coxa, trocnter, fmur, patella, tibia y tarso.
Abdomen En especmenes vivos, se observa, en la parte ventral una mancha de color
rojizo, reloj de arena.
Accidente latrodctico
El veneno de Latrodectus posee potente accin neurotxica, no causa lesin local
cutnea y, clsicamente, hay dolor intenso, contracturas musculares, sudoracin,
salivacin y puede llevar a la parlisis respiratoria y la muerte.
II. MATERIAL DE PRCTICA
Lminas montadas de Xenopsylla cheopis, Pulex irritans, Ctenocephalides
canis/felis, Tunga penetrans.
Lminas montadas de Pediculus humanus, Phthirus pubis, Huevos o liendres de
piojos.
Lminas montadas de Sarcoptes scabiei, Garrapatas.

Adulto de Loxoceles laeta


Adulto Latrodectus mactans
Papel lente. Microscopio de luz.
Miasis
Caractersticas
Es la infestacin de animales vertebrados y humanos por larvas de dpteros
(moscas). Las larvas se alimentan de los tejidos vivos o muertos del hospedero.
Especficas: Larvas biontfagas
Cochliomya hominivorax
Dermatobia hominis
Oestrus ovis
Semiespecficas: Larvas necrobiontfaga
Sarcophaga haemorrhoidalis
No especifica: Accidentales
Musca domestica.
Diagnstico parasitolgico
Ante la sospecha de la infestacin por larvas de mosca (personas o animales)
observar con una lupa, que la larva ingresa y sale parcialmente de las lesiones de la piel
o de algn rgano afectado. Las larvas pueden ser extradas en forma mecnica o
quirrgica para que no continen daando los tejidos. Larvas de moscas extradas de
pacientes conservadas en alcohol de 70% para su posterior identificacin.
MATERIAL DE PRCTICA
Larvas de moscas: Cochliomyia hominivorax y Dermatobia hominis.
Estereoscopio.
ESQUEMAS (PRCTICA 14-15)

ESQUEMAS (PRCTICA 14-15)

APNDICE

Trofozoito

Prequiste

Quiste
tetranu

Trofozoito

Quiste

Quiste
Trofozoito

Prequiste

Trofozoito

Trofozoito
Trofozoito

Quiste

Trofozoito

Quiste

Quiste
Quiste

Quiste

Ooquiste
Figura 1. Morfologa de protozoarios parsitos

Figura 2. Morfologa huevos de helmintos

Figura 3. Amebas intestinales

Figura 4. Amebas de vida libre

Figura 5. Flagelados intestinales

Figura 6. Leishmania (amastigote)

Figura 7. Trypanosoma

Figura 8. Cabezas de Panstrongylus, Triatoma y Rhodnius

Figura 9. Diferencias morfolgicas de Plasmodium en sangre perifrica

Figura 10. Esquema de Fasciola hepatica

Figura 11. Huevo de Trematodos

Figura 12. Esquema de Paragonimus sp

Figura 13. Esquema de Schistosoma sp.

Figura 14. Esquema de Taenia solium, Taenia saginata y Taenia asiatica

Figura 15. Esquema de Echinococcus granulosus

Figura 16. Esquema de Dipylidium caninum.


A. Capsula ovigera B. Esclex C. Progltido maduro D. Progltido grvido

Figura 17. Huevos de helmintos

Figura 18. Esquema general de la Pulga

Espermateca

Figura 19. 1. Pulex irritans 2. Xenopsilla


3. Tunga pentrans

Figura 20. Ctenocephalides felis.


Vista lateral de la cabeza

Figura 21. Esquema de Piojos


A. Pediculus humanus B. Phthirus pubis

Queliceros
Palpos

Gnatosoma

Estigma
Cerdas
Idiosoma
Patas

Figura 22. Esquema de Sarcoptes scabiei

Figura 23. Esquema de Demodex

Figura 24. Esquema de Garrapata

GLOSARIO

AGENTE INFECCIOSO: Organismo (bacteriano, rickettsioso, viral, mictico,


protozoario o helmntico) capaz de producir una infeccin o una enfermedad
infecciosa.

ARTROPODOS: Invertebrado con patas articuladas y esqueleto quitinoso.

AXOSTILO: Estructura rgida de posicin axial que constituye el sostn de


algunos protozoos flagelados.

BOTRIUM: Surco longitudinal que sirve como elemento de fijacin en el esclex


de cestodos pseudofilideos. Plural: botria.

COMENSALISMO: Relacin simbitica en la cual una especie, el comensal, vive a


expensas de otra especie, el hospedero, sin ocasionarle ningn dao.

CRUSTCEO: Artrpodo con 5 pares de patas.

CTENIDIO: Peine caracterstico de la cabeza y porcin anterior del trax en las


pulgas.

CONTACTO: Individuo (humano o animal) que ha estado en asociacin con un


individuo infectado, teniendo la oportunidad de adquirir la infeccin.

CONTAGIO: Transferencia directa del agente infeccioso desde la fuente de


infeccin al nuevo husped.

ECTOPARSITO: Parsito que vive en la superficie externa del hospedero.

EMBRIOFORO: Cubierta que rodea a la oncsfera de los platelmintos.

ENDOPARSITO: Parsito que vive en el interior del hospedero.

ENFERMEDAD: Conjunto de fenmenos que se producen en un organismo a


consecuencia de la accin de una causa patgena, reaccionando contra ella.

ESCLEX: rgano de fijacin o "cabeza" de un cestodo.

ESTRBILA: Conjunto de progltidos de un cestodo.

EXUVIA: Muda resultante de las ecdisis.

ENDEMIA: Prevalencia elevada y mantenida de una enfermedad humana


determinada dentro de un rea geogrfica.

EPIDEMIA: Produccin, en una comunidad o regin, de casos similares en un


determinado perodo, en nmero claramente superior a la frecuencia habitual y
derivados de una fuente comn o por diseminacin.

EPIZOOTIA: Lo mismo que epidemia, pero referido a animales.

INESPECIFICIDAD. Porcentaje de casos en que la reaccin resulta falsamente


positiva.

ESPOROZOO: Protozoo parsito que se reproduce por esporogonia.

ESPOROZOTO: Elemento resultante de la esporogonia de los esporozoos.

ESQUIZOGONIA: Ciclo de reproduccin asexuada de los esporozoos.

ESQUIZONTE: Elemento resultante del ciclo esquizognico.

ESTROBILA: Conjunto total de progltidos que constituyen el cuerpo de un


cestodo.

FOMITE: Objeto (agua, aire, toalla, etc.) que contiene elementos infectantes y
pasivamente puede ser vehculo mecnico en su transmisin indirecta.

FORMA INFECTANTE: Fase del parsito capaz de infectar el husped.

GAMETOGONIA: proceso de reproduccin sexuada de los esporozoos.

HBITAT: Lugar donde en forma natural vive un ser biolgico.

HUSPED DEFINITIVO: Hospedero en el cual el parsito alcanza su madurez


sexual.

HUSPED INTERMEDIARIO: Hospedero en el cual el parsito desarrolla parte de


su ciclo evolutivo, sin alcanzar su madurez sexual.

IMAGO: Artrpodo adulto. Se usa especialmente en el caso de insectos.

INFECCIN: Entrada y desarrollo o multiplicacin de un agente infeccioso en el


organismo de una persona o animal.

INFESTACIN: Alojamiento, desarrollo y reproduccin de artrpodos en la


superficie del cuerpo, pelos, ropas objetos e incluso ambientes. Se emplea
tambin en el caso de roedores.

INSECTO: Artrpodo con 3 pares de patas.

INCIDENCIA: Nmero de casos nuevos de una enfermedad que se presentan


durante un perodo determinado, en relacin con la poblacin donde ocurren.
Generalmente se expresa en forma de tasa.

INSECTICIDA: Sustancia qumica, natural o sinttica, utilizada en el exterminio de


artrpodos. Se puede aplicar en forma de polvo, lquido, pulverizado, o aerosol.

LARVA: Forma inmadura en el ciclo evolutivo de helmintos y artrpodos.

MEROZOITO: Clula resultante del proceso de esquizogonia o divisin mltiple


que presentan algunos protozoos.

METAZOO: Animal Pluricelular.

MORBILIDAD: Relacin entre el nmero de afectados de una enfermedad


determinada y la poblacin total de una zona.

MORTALIDAD: Relacin entre el nmero de muertos por todas las causas y la


poblacin total de una zona.

MUDA: (ECDISIS): Vaina o tegumento que envuelve a artrpodos y a algunos


gusanos (nematodos) y que en las etapas juveniles, de crecimiento, se desprende
dando lugar a una nueva envoltura que puede desprenderse a su vez o ser
definitiva.

MUTUALISMO: Tipo de simbiosis en la cual se benefician recprocamente


hospedero y simbionte.

MIASIS: Parasitacin de rganos o tejidos humanos o animales por larvas de


mosca.

NINFA: Estadios juveniles tanto de insectos con metamorfosis incompleta como


de caros y garrapatas.

ONCSFERA: Larva con seis ganchitos que emerge de los huevos de los
eucestodos. Tambin se llama hexacanto.

OOQUISTE: Forma qustica que contiene el cigoto resultante de la esporogonia


en los Apicomplexa y los cuales pueden estar cubiertos por una envoltura
translcida (Cystoisospora) o estar desnudos (Plasmodium).

PARSITO ACCIDENTAL: Parsito que se encuentra en un husped no habitual.

PARSITO FACULTATIVO: Es aquel que desarrolla algunos protozoarios y


hongos que viven sobre materias orgnicas en descomposicin, pero en
ocasiones parasitan sobre heridas, ulceraciones, etc.

PARSITO OBLIGADO: Es aquel que necesariamente en alguna etapa o


permanentemente ejerce su accin parasitaria.

PARSITO PERIODICO: Parsito que cumple parte de su ciclo en el ambiente y


en el husped.

PARSITO PERMANENTE: Parsito que vive toda su existencia en o sobre su


hospedero.

PARSITO TEMPORAL: Parsito que intermitentemente depende de un


hospedero para subsistir y luego lo abandona.

PERIODO PREPATENTE: Etapa de la infeccin parasitaria comprendida desde el


momento de la infeccin hasta la aparicin de la sintomatologa o la presencia del
parsito.

PROGLTIDO: Segmento de la estrbilo de los cestodos, la cual contiene los


rganos reproductores masculinos y femeninos.

PERIODO DE INCUBACIN: Intervalo que transcurre entre la infeccin de un


sujeto susceptible (persona o animal) y el momento que presenta las primeras
manifestaciones de la respectiva enfermedad.

PUPA: Etapa en la metamorfosis de los dpteros, caracterizada por la existencia


de un pupario en cuyo interior se producen importantes cambios que culminan con
la formacin del imago o insecto adulto.

QUISTE: Forma inmvil de resistencia y de multiplicacin, envuelta por una doble


membrana formada por los protozoos.

SP: Trmino usado cuando se diagnstica el gnero de un parsito y no se puede


identificar la especie.

SUSCEPTIBLE: Persona o animal que carece de resistencia contra un agente


patgeno y que en consecuencia puede contraer la enfermedad si se expone a la
infeccin por dicho agente.

TROFOZOITO: Forma vegetativa activa y que se alimenta, entre los protozoos.

VECTOR: organismo animal, generalmente artrpodo, que puede transportar


activamente un agente desde la fuente infectante hasta un susceptible.

VECTOR MECNICO: Es el vector que lleva en el exterior de su cuerpo o en


interior agentes patgenos.

VIA DE INFECCIN: Sitio (s) a travs de los cuales se introduce el agente


etiolgico en el organismo del husped.

XENO: Husped.

ZOONOSIS: Infeccin que se transmite en forma natural entre el hombre y


animales vertebrados y viceversa.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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REVISTAS
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Atlas de la Sociedad de Biologia de Rio de Janeiro. Rio de Janeiro. Brazil
Boletin Chileno de Parasitologia. Santiago. Chile
Revista Peruana da Biologa. Lima, Per.
Revista Peruana de Medicina Tropical de la UNMSM. Lima. Per

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