AMEBAS DE VIDA LIBRE

En el Filo Entamoebia estn las amebas intestinales, las cuales las estudiamos en el curso
pasado, ahora vamos a estudiar el otro grupo de amebas que son las AMEBAS DE VIDA
LIBRE, son protozoos cosmopolitas que habitan ambientes hmedos como el suelo y el
agua, como tambin el aire.
Durante la primera mitad del siglo XX, las amebas de vida libre eran conocidas como
"amebas del suelo", protozoos no patgenos, ubicuos en suelos y agua, utilizados como
modelos por los bilogos celulares.
En 1958, Culbertson demostr el potencial patgeno de Acanthamoeba spp., y en 1965
Fowler y Carter reportaron el primer caso de meningoencefalitis amebiana primaria
(MEAP) causado por Naegleria fowleri en Australia; posteriormente, en Checoslovaquia se
identific, de manera retrospectiva, un brote de 16 casos de MEAP adquirida en una
piscina calentada artificialmente (1962 - 1965).
En 1972 se hizo evidente que Acanthamoeba spp., produca enfermedad en el ser
humano; varios genotipos de Acanthamoeba (entre ellos, algunas especies conocidas,
tales como A. castellani, A. culbertsoni, A. healyi, A. polyphaga, A. rhysodes) son agentes
causales de encefalitis granulomatosa (en sujetos inmunocomprometidos, casi
exclusivamente) y queratitis en personas aparentemente sanas. Balamuthia mandrillaris,
aislada de un mandril por Visvesvara y cols, en 1990, fue reconocida como agente
etiolgico de encefalitis granulomatosa en pacientes inmunocomprometidos y ms
recientemente en personas inmunocompetentes, sobre todo en los extremos de la vida;
asimismo, se ha identificado en forma creciente en individuos de origen latinoamericano y
en pacientes receptores de transplantes.
Entre cientos de amebas de vida libre (AVL), Naegleria fowleri, especies de Acanthamoeba
y Balamuthia mandrillaris, son considerados organismos emergentes, de alta
patogenicidad, causantes de enfermedad a nivel de sistema nervioso central (SNC), con
una mortalidad >95%.
Balamuthia mandrillaris y Acanthamoeba spp. tambin pueden causar infecciones
granulomatosas diseminadas, que involucran a la piel, pulmones, senos nasales.
Sappinia pedata, antes S. diploidea, otra ameba de vida libre, se report como agente
etiolgico en un caso de encefalitis en 2001.

Desde hace algunos aos, se ha observado el papel de estas amebas como reservorios de
bacterias y virus patgenos.

Morfologa general
Las AVL presentan 2 formas: Trofozoto (vegetativa) y quiste (resistencia), con ncleo
vesicular, nucleolo prominente, vacuolas contrctil y digestivas, mitocondrias, retculo
endoplsmico. Los quistes de Naegleria y Acanthamoeba tienen 2 capas, con poros. En
Balamuthia mandrillaris se identifican 3 capas, sin poros.

Naegleria fowleri. Naegleria spp.

Es un gnero de protistas de la familia Vahlkampfiidae, en la clase Heterolobosea.
Actualmente se reconocen 8 tipos de N. fowleri, que se distinguen mediante pruebas de
secuenciacin de DNA. Naegleria spp. se alimentan de bacterias y son organismos
ameboflagelados, lo que significa que en determinadas condiciones desarrollan flagelos.
Distribucin geogrfica
Su distribucin es mundial, encontrndose frecuentemente en agua dulce como: lagos,
lagunas, estanques, piscinas y canales de riego. Es a partir de 1983 que ha adquirido
importancia mdica debido a los informes de casos en pases como Estados Unidos de
Norteamrica, Australia, Checoslovaquia, Blgica, India y Per.
Fases de desarrollo del parsito
Naegleria fowleri puede encontrarse en forma de trofozoito, quiste y organismo
flagelado.
El trofozoito es alargado, mide de 15 a 30 micrmetros de dimetro y carece de cromatina
perifrica. El cariosoma es grande y se observa rodeado de un halo; el citoplasma presenta
granulaciones irregulares en tamao. Los trofozotos tienen un uroide en un extremo, que
puede servir para acumular los productos de desecho, ectoplasma claro y endoplasma en
el que se aprecian vacuolas digestivas, contrctil, mitocondrias pleomrficas, grnulos.
Emiten seudpodos anteriores de movimiento rpido de extremo romo (lobpodos).

El quiste es esfrico y presenta una doble pared con dos a tres poros. Es la forma que
adopta Naegleria para sobrevivir en condiciones adversas, tiene pared lisa, operculada
(poros con tapones mucosos), es esfrico, con granulaciones escasas, ncleo y mide 8 - 12
m
El organismo flagelado es alargado y presenta dos flagelos, que emergen de su porcin
anterior. Los trofozotos flagelados son una forma transicional, ante cambios ambientales;
la flagelacin se realiza en laboratorio en agua destilada, solucin salina diluida o medio
de Page (2 flagelos, aunque es posible identificar un nmero mayor).

L: lobpodo, n: ncleo, nu: nucleolo, u:uroide

Ciclo de vida

Localizacin en el husped
Puede invadir la faringe, nasofaringe y sistema nervioso central.

Mecanismo de infeccin
La infeccin se produce al ponerse en contacto con la mucosa nasal, aguas contaminadas
con trofozoitos u organismos flagelados de Naegleria fowleri, los cuales invaden
rpidamente los bulbos olfatorios, cruzan la lmina cribosa del etmoides y llegan por esta
va al sistema nervioso central y meninges.
Manifestaciones clnicas
La menigoencefalitis amibiana primaria (MEAP) se presenta en personas con antecedentes
de haber nadado en lagunas, estanques o piscinas. Despus de 3 a 7 das de la infeccin se
presentan cefalea intensa de predominio frontal o bitemporal, fiebre de 38 a 40C,
anorexia, nusea, vmito en proyectil, fotofobia, ageusia (prdida o disminucin del
sentido del gusto) y parosmia (alteracin del sentido del olfato que provoca una falsa
percepcin de sensaciones olorosas), signos de irritacin menngea, confusin mental,

irritabilidad, intranquilidad y coma. La muerte sobreviene por edema pulmonar o paro

cardiorrespiratorio 72 horas despus de haberse iniciado los sntomas.
El inicio del cuadro clnico de la encefalitis amibiana primaria ocurre varias semanas o
meses despus del contacto con aguas estancadas.
Este cuadro afecta a sobre todo a nios, adolescentes y adultos jvenes aparentemente
sanos, generalmente con el antecedente de natacin o juego en fuentes de agua dulce
calentadas de manera natural o artificial (existen antecedentes de enfermedad por
inhalacin de agua durante el lavado facial en zonas donde las tuberas o los contenedores
se encuentran expuestos a una temperatura ambiental alta, contaminados, as como la
posibilidad de infeccin por inhalacin de polvo). Tambin se ha reportado la enfermedad
despus de irrigacin nasal con agua contaminada en adultos.
A pesar de que Naegleria es un hallazgo comn en cuerpos de agua dulce, calentada por
medios artificiales o por el sol, y de la alta exposicin de millones de personas, MEAP se
considera una enfermedad rara, si bien es cierto que se le ha encontrado recientemente,
causando enfermedad, en clima templado.
N. fowleri penetra va nasal placa cribiforme neuroepitelio olfatorio espacio
subaracnoideo parnquima cerebral.
Diagnstico
Los productos biolgicos en que se debern hacer los estudios correspondientes son el
lquido cefalorraqudeo (LCR), suero y material obtenido por biopsia.
El diagnstico se realiza por la observacin del agente etiolgico en examen directo de
LCR o frotis del mismo teidos con Giemsa o Wright, observndose el citoplasma de los
trofozoitos de color azul, y el ncleo, de rosado.

N. fowleri trofozotos en cerebro

Las tcnicas inmunolgicas ms adecuadas son la Inmunofluorescencia indirecta y ELISA.

Tratamiento
Si el diagnstico se realiza oportunamente, pueden emplearse tetraciclinas, ketoconazol y
anfotericina B.
Profilaxis
Debido a que estas amebas de vida libre pueden encontrarse en aguas estancadas, no se
debe nadar o introducirse en ellas por el peligro potencial que representan.

Acanthamoeba spp
Distribucin geogrfica
La acantamibiasis es producida por varias amebas de vida libre pertenecientes al gnero
Acanthamoeba. Su distribucin es mundial, se encuentran frecuentemente en cuerpos de
aguas dulces y marinas, as como en suelo, polvo, filtros de aire y ductos de enfriamiento.
Esta ameba ha sido aislada de crnea, cavidades nasal y de senos, odos, garganta, faringe,
pulmones, lesiones de piel, heces humanas. Tambin tiene importancia en veterinaria,
puesto que se ha encontrado en animales enfermos o muertos (vacas, perros, cerdos,
conejos, pichones, ovejas, reptiles, peces, pavos, tucanes, caballos y primates no
humanos). Se ha aislado y cultivado a partir de tejidos de seres humanos y animales. Su
importancia como patgeno para el ser humano se inicia en 1983, al informarse en
Estados Unidos de 20 casos de encefalitis amibiana granulomatosa (EAG). En 1985 se
notificaron casos de queratitis por Acanthamoeba en personas que usaban lentes de
contacto
Morfologa
Las amebas pertenecientes al gnero Acanthamoeba presentan forma de trofozoto y de
quiste.
Los trofozotos son pleomrficos, tienen una vacuola contrctil, seudpodos con
apariencia de espinas (acantpodos), ncleo contiene un cariosoma esfrico central
grande y denso rodeado de un halo nuclear claro. Su tamao oscila entre 15 - 50 m, de
acuerdo a la especie. El citoplasma es finamente granular.
Los quistes son esfricos, hexagonales o poligonales con doble pared, de aspecto
corrugado, la pared externa lisa (cuenta con protenas y lpidos) y la pared interna

poligonal, estelar o globular (con carbohidratos, entre ellos celulosa); presentan poros. El
ncleo tiene caractersticas semejantes a las de los trofozotos. Miden 10 - 25 m.
Se ha observado recientemente que Acanthamoeba spp., puede sufrir una rpida
diferenciacin, particularmente ante propilenglicol y soluciones oftlmicas que lo
contienen, transformndose en unas estructuras de bajo metabolismo, conocidas como
"seudoquistes", "cuerpos refrctiles", "cuerpos redondos", no mtiles, que constituyen un
riesgo adicional en la adquisicin de queratitis amibiana. Estos seudoquistes presentan
una nica capa, y revierten a la forma de trofozoto cuando las condiciones ambientes son
ms favorables.
Quiste de Acanthamoeba sp

Trofozoto de Acanthamoeba fagocitando Escherichia coli (bacteria) y quiste con su

pared caracterstica.

Ciclo de vida

Localizacin en el hospedero
Puede afectar la piel, pulmones, crnea y sistema nervioso central.
Mecanismo de infeccin
La infeccin se adquiere por la inhalacin de quistes que se establecen en pulmones o
por la presencia de trofozoitos y quistes en lesiones crnicas de la piel, boca, odo y
mucosas. A partir de estos sitios de infeccin primaria, los parsitos se diseminan por va
hematgena al sistema nervioso central, donde producen encefalitis amibiana
granulomatosa (EAG).
La entrada por ojos puede provocar queratitis.

Manifestaciones clnicas
El inicio del cuadro clnico de la encefalitis amibiana granulomatosa se presenta semanas
o meses despus de la infeccin, con cefalea, irritabilidad, confusin mental,
alucinaciones, vrtigo y somnolencia; pueden afectarse pares craneales y ocurrir
anisocoria, diplopia, afasia, ataxia y coma profundo. Algunos pacientes con encefalitis
amibiana granulomatosa desarrollan ndulos das antes de la aparicin de los signos y
sntomas.
La infeccin del SNC asociada a Acanthamoeba involucra en la mayor parte de los casos a
personas inmunocomprometidas, con HIV+/SIDA, quimioterapia, enfermedades crnicas,
debilitantes, diabetes, lupus sistmico, cncer, desnutricin y alcoholismo, Tuberculosis,
otras. Tambin influye el empleo excesivo de esteroides y antibiticos.

Cuadros clnicos:
Encefalitis amibiana granulomatosa (EAG)
Los principales datos clnicos de la encefalitis amibiana granulomatosa, son semejantes a
los presentados en meningitis de origen viral, bacteriano o tuberculoso, consisten en
cefalea, cambios conductuales, fiebre, hemiparesia, ataxia, afasia, rigidez de cuello (signos
de irritacin menngea), letargo, nusea, vmito, parlisis de nervios craneales, elevacin
en la presin intracraneal, convulsiones y muerte.
Con cierta frecuencia, sobre todo en pacientes debilitados inmunolgica o
fisiolgicamente, se presentan lesiones cutneas que suelen ser de curso prolongado,
pero una vez que existe invasin del SNC, el resultado fatal puede presentarse en el
transcurso de das/semanas.
Diagnstico
Biopsia, autopsia: identificacin, pre o postmortem, de trofozotos y quistes en tejidos;
tambin se han identificado trofozoitos en LCR. El hallazgo patolgico caracterstico
consiste en lesiones hemorrgicas, necrticas, multifocales y una reaccin granulomatosa.
Los granulomas pueden estar ausentes en sujetos con respuesta inmune celular
deprimida.
Es necesario el examen histolgico de lesiones en piel cuando se encuentren presentes.
Cultivo: Acanthamoeba crece en agar no nutritivo con E. coli

Se considera un "estndar de oro" la Inmunofluorescencia y la PCR (deteccin de DNA del

organismo en tejidos, LCR.
Imagenologa: Resonancia magntica y TAC se emplean para visualizar la localizacin y
extensin de las lesiones ("masa ocupativa", edema, hidrocefalia, otras).
Se adquiere usualmente a travs de la exposicin de la mucosa (nasal, respiratoria, oral en modelos murinos) o por piel ulcerada a partir de quistes o trofozotos en el medio
ambiente. Se considera que ingresa al sistema nervioso central por va hematgena o por
migracin a travs del neuroepitelio olfatorio. Se ha observado despus de un curso
insidioso de origen cutneo. El periodo de transicin de la forma cutnea a la encefalitis
oscila entre 30 das a 2 aos, con un promedio 5 - 8 meses. Las lesiones cutneas, nicas o
mltiples, pueden aparecer en rostro, tronco, miembros.
Es importante enfatizar que se ha identificado tanto en pacientes inmunocomprometidos
con encefalitis como en sujetos inmunocompetentes, despus del establecimiento de una
infeccin primaria en piel, pulmones, hgado.
Es necesario realizar diagnstico diferencial con encefalitis viral, meningitis bacteriana,
tuberculomas, neurocisticercosis, tumores y otras patologas que cursen como masa
ocupativa.
Tratamiento:
El tratamiento de EAG ocasionada por Acanthamoeba implica la utilizacin de
combinaciones antimicrobianas: azlicos (clotrimazol, miconazol ketoconazol, fluconazol,
itraconazol) isetionato de pentamidina, 5-fluorocitosina, claritromicina o rifampicina, y
sulfadiazina.

Queratitis amibiana
La queratitis por Acanthamoeba se caracteriza por ser una lesin crnica ulcerada de la
crnea que produce dolor ocular, disminucin de la agudeza visual, conjuntivitis, iritis y
uvetis, puede provocar prdida de la visin, y en casos graves, prdida del ojo.
Hallazgos recientes implican principalmente A. castellanii en ~ 94% de los casos como
agente etiolgico de la queratitis de origen amebiano.
La enfermedad se asocia en el 80% de los casos a uso de lentes de contacto (limpieza y/o
almacenamiento inadecuados) por sujetos sanos e inmunocomprometidos, a su empleo
durante deportes acuticos y a traumatismos corneales.

El dao corneal se atribuye, segn hallazgos recientes, de forma preponderante, a la

penetracin de las amebas a travs de las uniones celulares, fagocitosis, actividad de
proteasas, particularmente en el proceso de separacin de las clulas, fagocitosis, el
efecto mecnico de las mismas amebas.
Se puede observar:
Lesiones unilaterales, casi siempre.
Dolor, fotofobia, lagrimeo
Sensacin de cuerpo extrao
Conjuntivitis
Visin borrosa
Prdida de la visin
Diagnstico temprano:
Es fundamental, y se basa en el hallazgo de los infiltrados tempranos, antecedentes,
signos y sntomas, an antes de que aparezcan lceras. Se emplean:
Raspado de epitelio, para su observacin en fresco y con diferentes tinciones: Giemsa,
Tricrmica, PAS, Calcofluor white, este ltimo permite observar infiltrado inflamatorio,
quistes y trofozotos
En lesiones avanzadas, es necesario recurrir a la biopsia corneal.
Cultivo: En las placas de agar sin nutrientes inoculadas directamente se inocula un rea
de 0,5 mm x 0,5 mm aproximadamente; al recibir las placas en el laboratorio, se extrae de
la placa la zona inoculada y se invierte sobre una placa sembrada con E. coli. Las biopsias
epiteliales y estromales se homogeneizan parcialmente y se colocan directamente en
placas de agar sin nutrientes sembradas con E. coli. Todas las placas se incuban a 37C
durante 72 horas. Si no se produce crecimiento al cabo de 6 das, se cultiva la muestra a
temperatura ambiente, porque algunas cepas crecen mejor a temperaturas ms bajas. En
ocasiones, los cultivos tardan 3 semanas en crecer.
Microscopa confocal in vivo, es un examen no invasivo, que ofrece la visualizacin
inmediata de los quistes de Acanthamoeba y la inflamacin de los nervios en el estroma.

Acanthamoeba sp. Raspado de crnea. DPDx/CDC.

Acanthamoeba sp. Raspado de

crnea. CDC.

Acanthamoeba sp. Biopsia de crnea. CDC.

Balamuthia mandrillaris

Los trofozotos y quistes encontrados en cortes histopatolgicos son similares a los de

Acanthamoeba; sin embargo, con cierta frecuencia presentan 2 ncleos y ms de un
nucleolo. Este organismo se replica bien en cultivos celulares (rin de mono, fibroblastos
pulmonares humanos, clulas endoteliales de microvasculatura), ya que, a diferencia de
Naegleria y Acanthamoeba, no se alimenta de bacterias; su movimiento "aracnoideo"
constituye otra diferencia a considerar. Los trofozotos miden 15 - 60 m. Se desplazan
lentamente por medio de pseudpodos anchos y aplanados, que se denominan
lamelopodios (con forma de lmina)
El tamao de los quistes es 10 30 m, con una pared compuesta por tres capas, la
interior ondulada, la media, fibrilar, y la exterior delgada e irregular, con protrusiones.
Al igual que Acanthamoeba, B. mandrillaris tambin produce EAG.

Balamuthia mandrillaris. Trofozoto en tejido cerebral

Ciclo de vida

Factores de riesgo para infecciones de amebas de vida libre:

Balamuthia, Acanthamoeba, Naegleria.

Empleo de lentes de contacto, traumatismo corneal, deportes acuticos queratitis por

Acanthamoeba.
Inmunocompromiso y contacto con equipo mdico, dental, humidificadores, equipos de
aire acondicionado, agua, tierra contaminados EAG por Balamuthia y Acanthamoeba.
Tambin sujetos inmunocompetentes, principalmente nios y jovenes EAG por
Balamuthia mandrillaris.
Nado recreativo en agua dulce clida,, irrigacin nasal con agua contaminada MEAP
por Naegleria fowleri en nios y jvenes.

Amibas de vida libre. Caractersticas. T. Uribarren B.