6.

FACTORES
AMBIENTALES

Factores ambientales que inciden en

el crecimiento microbiano
Temperatura
pH
Presin
Concentracin de sales
Actividad de agua (aw)
Oxgeno
Estos factores ambientales afectan:
La velocidad de reacciones celulares
El metabolismo
Los requerimientos nutricionales
La composicin de la BM

Temperatura
Cada microorganismo tiene 3 temperaturas cardinales:
cardinales
Mnima descenso de la fluidez de la membrana: debajo de
esta T no hay crecimiento
ptima Ocurre la mxima tasa de crecimiento y reacciones
enzimticas
Reacciones y actividades
enzimticas ocurren a su
mxima velocidad

Tasa de crecimiento

Mxima tasa de
crecimiento: dao de
comp. celulares cesa
la actividad a >T no
hay crecimiento

Velocidades crecientes en
reacciones y actividades
enzimticas

ptimo

Mnimo

Mximo

Temperatura
Congelamiento de la membrana;
el proceso de transporte es tan
lento que no hay crecimiento

Desnaturalizacin de protenas;
colapso de la membrana
celular; lisis trmica

Temperatura:: clasificacin (Top)

Temperatura
Con base en su temperatura ptima de crecimiento, los organismos
se clasifican en 4 grupos:
grupos
Termfilos: 60C (42
42 80
80C )

Mesfilos: 39C (15

15 - 45
45C)

Hipertermfilos: 90C (T
T > 80
80C)

Tasa de crecimiento

Psicrfilos: 13C (<< 0

0C 20
20C)

Termfilos
Mesfilos

Hipertermfilos

Psicrfilos

Temperatura (C)

Temperatura:: mecanismos de adaptacin

Temperatura
Psicrfilos (Top < 20C):
Tamao celular reducido (pequeos)
Enzimas con Top pueden desnaturalizarse a Tamb
MC: contenido de AG insaturados evita que se cristalice
Ejemplo: Mycrococcus cryophilus (bacteria) Top 10C

Termfilos (Top > 60C):

Biomolculas termoestables: protenas, cidos nucleicos, lpidos
Cambios en aa de protenas mayor estabilidad a T
MC: contenido de AG saturados de cadena larga ramificados
Los lpidos de la MC se congelan a Tamb no hay transporte
Ejemplo: Thermus aquaticus (Taq polimerasa) Top ~70C; Pyrolobus
fumarii (arquea) Top ~106C

pH:: fundamentos y clasificacin

pH
pH: funcin logartmica 1 unidad de pH implica el cambio en
10 unidades en la [H+] pH = log [H+]
Ec. de Henderson-Hasselbalch

Cada organismo tiene un rango de pH dentro del cual puede

crecer y tiene un pH ptimo
Con base en el rango de pH de crecimiento, los organismos se
clasifican en:
Acidfilos
Neutrfilos
Alcalfilos

Tasa de crecimiento

pH:: clasificacin
pH
Acidfilos

Neutrfilos Alcalfilos
mol/L de:
H+
OH-

cido
Acidfilos
extremos

pH citoplsmico

Acidfilos

Neutrfilos

Neutralidad

Alcalfilos

Organismos que viven en pH

extremos:

Alcalfilos
extremos

Si pHint<5
<5: muerte
destruccin de biomolculas

Bsico

Mantienen el citoplasma a pH ~ 7

pH:: mecanismos de adaptacin

pH
Alcalfilos (pHop 9):
Bombeo de H+ externos al citoplasma pHint ~ 8 pHext
MC impermeable a iones -OH
PC con carga superficial (-)
Ejemplos: Thiobacillus thiooxidans (bacteria) pHop ~ 2.5; Sulfolobus
acidocaldarius (bacteria) pHop ~ 2-3

Acidfilos (pHop 2-3):

Bombeo de H+ internos hacia el exterior pHint ~ 6.5 pHext ~ 2
MC estable a la acidez transportadores que dependen de H+
capacidad interna de amortiguamiento
Cargas superficiales (+)
Ejemplo: Natronoarchaeum (arquea) pHop ~ 8-9

Presin atmosfrica:
atmosfrica: clasificacin
Con base en la presin ptima,
ptima los organismos
se clasifican en 3 grupos:
grupos
1 MPa = 9.9 Atm

Piezosensibles (Patm 1 atm)

Barotolerantes o

Piezotolerantes ( 600 atm)

o Barfilos

Molculas en los lpidos de

MC empacadas ms
apretadas en la fluidez
proporcin de AG
insaturados

Tasa de crecimiento

Piezfilos (P ptima: 500 atm)

mecanismos de adaptacin:

Barosensibles o

197

395

592

790

987

Atm

Presin osmtica:
osmtica: clasificacin
Organismos que viven en ambientes con P osmtica osmfilos
Con base en su [NaCl
NaCl]]* ptima de crecimiento 4 grupos:
grupos
No halfilos ( 0.1 M: 0.6%)
Halotolerantes (0.6 M: 1 6%) crecen mejor sin NaCl
Halfilos (1.25 M: 6 15%) necesitan NaCl
Tasa de crecimiento

Halotolerante

Halfilos extremos
(> 4 M: 15 30%)
arqueas

Halfilo

Halfilo extremo

No halfilo

0M

Concentracin de NaCl

* Soluto encontrado de forma natural

5M
(29%)

Presin osmtica:
osmtica: mecanismos de adap
adap..
Halfilos
MC diferencias en composicin y propiedades
osmolaridad intracelular ( [sal]) KCl
Enzimas tolerantes (y dependientes) de sales
Acumulacin de comps. de PM en el citoplasma osmoprotectores:
Estabilizan y protegen enzimas
Proteccin de c. nucleicos y MP
Protegen vs. congelacin, desecacin y desnaturalizacin
(calor y [sal])

* Osmoflia generalmente se usa para

organismos que crecen con [azcar]
* Los organismos halfilos son osmfilos

Actividad de agua (a
(aw)
aw relacin entre la presin de vapor de un sustrato (P) y la
presin de vapor* del agua pura (P0), a la misma T:

aw indica la cantidad de agua disponible (p. ej.):

Agua pura todas las molculas estn disponibles: aw
Sol. saturada de NaCl una parte importante de las molculas de
agua participa en la solvatacin de los iones de la sal disuelta: aw

Si la cantidad de solutos en el medio (osmolaridad

osmolaridad) aw:
[solutos] osmolaridad aw
* Presin (a una T dada) en la que la fase lquida y el vapor se
encuentran en equilibrio dinmico (= presin de saturacin)

aw: clasificacin
Organismos que viven en ambientes secos: aw xerfilos
Xerotolerantes
Xerofilos (aw < 0.85)

Si un microorganismo se encuentra en un sustrato con aw menor

a la necesaria su crecimiento se detiene
La mayora de los
microorganismos
necesita aw
para crecer:

aw

Propiedad de gran
importancia en la
industria alimentaria

Material

Microorganismos

1.000

Agua pura

Spirillum

0.995

Sangre humana

Streptococcus, E. coli

0.980

Agua de mar

Pseudomonas, Vibrio

0.900

Jamn

Cocos Gram (+)

0.800

Mermelada

Hongos filamentosos

0.700

Cereales, frutos secos

Hongos xerfilos

0.600

Depsitos de sal

Algunas arqueas

aw: mecanismos de adaptacin

Xerfilos mecanismos que ayudan a combatir la desecacin:
Acumulacin de osmoprotectores* en el citoplasma potencial
hdrico*: proteccin de membranas y protenas
Produccin de polisacridos extracelulares que retienen H2O

MC con permeabilidad
restringida sales fuera/
solutos orgnicos dentro

Tasa de crecimiento

Diferenciacin
Crecen mejor en [sal]
donde la mayora de
los microorg. se inhibe
No
halfilos
Osmotolerantes
Halotolerantes

E. coli

S. aureus

Osmfilos
Halfilos extremos

Halococcus, (arquea)

* Pequeas molculas muy solubles aa y alcoholes

* Tendencia del agua a moverse de un rea de [ ] a una de [ ]

Requerimientos de O2: clasificacin

Con base en sus requerimientos de O2, los orgs. se clasifican en:
Aerobios crecen
en presencia de O2
O2

Anaerobios crecen
en ausencia de O2
Aceptor final de

Estrictos El O2 es el aceptor
Estrictos.
final de para la captacin de
energa qumica
Microaerfilos Requieren [O2]
Microaerfilos.
menores a la atmosfrica (2 10% y no 20%)

O2

Estrictos. El O2 es txico: no
tienen CAT, POX y SOD no
pueden eliminar ERO (Clostridium)
Facultativos. Metab. energtico
aerobio/anaerobio depende
del ambiente y disponibilidad de
aceptores de (E.coli/S.cerevisiae)
Aerotolerantes (aerodricos
aerodricos).
Metab. energtico anaerobio
anaerobio,
toleran el O2 por que tienen SOD
(bacterias lcticas)

Requerimientos de O2: mecanismos

La relacin de los organismos con el O2 depende de la presencia
de enzimas que eliminan especies reactivas de oxgeno (ERO):
1O

Singulete de oxgeno
(molcula de alta energa)

O2-

H2 O2

Radical
superxido

Perxido de
hidrgeno

Enzimas que destruyen los radicales txicos de oxgeno:

Superxido-dismutasa (SOD) O2- + O2- + 2H+ 2 H2O2 + O2
Peroxidasas (POX)

H2O2 + AA* 2 H2O + DHA

Catalasa (CAT)

2 H2O2 O2 + 2 H2O
Efectos de las ERO en las clulas:
Daos al ADN
Oxidacin de cidos grasos en lpidos
Oxidacin de aa en protenas
Inactivacin de enzimas por oxidacin de cofactores

* AA: sustrato reducido

DHA: sustrato oxidado

O2: efecto en el crecimiento

Aerobios
obligados

MicroMicro
aerfilos

Anaerobios
facultativos

Anaerobios
obligados

AeroAero
tolerantes

Crecim. aerobio:
solo donde hay
[O2]

Crecim. aerobio:
solo donde hay
[O2]

Crecim. aerobio/
anaerobio
> crecim. en
presencia de O2

Crecim. anaerobio: solo donde

no hay O2

Crecim.
uniforme: el O2
no tiene efecto

Alta

[O2]
Baja

Utilizan O2

[O2] normales
[ERO] letales

Utilizan O2

No toleran O2

Toleran O2

SOD+
CAT+

SOD+
CAT nivel

SOD+
CAT+

SODCAT-

SOD+
CAT-

6. FACTORES
AMBIENTALES
Ejemplos de extremfilos

Extremfilo: organismo que se desarrolla en ambientes extremos

Fsicos (temperatura, radiacin, presin)
Geoqumicos (desecacin, salinidad, pH, ERO, potencial redox)
Glaciar Perito Moreno,
Argentina

Salina en Guerrero Negro,

Mxico

Lago alcalino Ascotan,

Chile

Proceso industrial

Psicrfilos

Termfilos

T < 15C

T 60 80C
T > 80C

Halfilos

Xerfilos

[NaCl] >
3.5%

aw < 0.85

Alcalfilos

Acidfilos

pH > 9

pH < 5

Biomolcula/
Biomolcula/
Mecanismo

Giseres del Tatio,

Chile

Desierto de Atacama,
Chile

Laguna cida,
Costa Rica

Ventajas

Organismo

a-amilasa

estabilidad

Bacillus stearothermophilus

Xilanasas

cantidad de
blanqueador

Termfilos

Procesado de alimentos,
pan, cerveza, detergentes

Proteasas

Estable a Ts

Termfilos

Maduracin de quesos,
produccin de leche

Proteasas
neutras

Estable a Ts

Psicrfilos

Biorremediacin

Surfactantes,
limpieza de derrames

Eficientes en
Ts

Psicrfilos

Degradacin de polmeros
en detergentes

Proteasas, amilasas,
lipasas

Detergentes
mejorados

Psicrfilos

Degradacin de polmeros
en detergentes

Celulasas, proteasas,
amilasas, lipasas

Estables a
pH

Alcalfilos

Desulfuracin de carbn

Oxidacin de azufre

Productos farmacuticos

Glicerol, solutos
compatibles

Surfactantes para
farmacuticos

Membranas

Hidrlisis de almidn:
dextrinas y jarabe de maz
Blanqueo de papel

Acidfilos
Produccin a
$

Halfilos
(Dunaliella)
Halfilos