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Anlisis Microbiolgico
Mtodos de determinacin de
microorganismos
Siembra en profundidad.
Siembra por extensin.
Mtodos del nmero ms probable
(NMP).
Mtodo por filtracin.
Impedancia
Biologa molecular
RECUENTO DE MICROORGANISMOS
TOTALES Y VIVOS
10 ml
1 ml de naranja de acridina o
0,2 ml del kit Baclight live/dead
5 min en la oscuridad
filtrar
Bacterias vivas:
Bacterias muertas:
Microscopio de
epifluorescencia
MICROORGANISMOS
TOTALES Y VIVOS
RECUENTO DE BACTERIAS
AEROBIAS MESOFILAS
1 mL
AGAR R2A
INCUBAR A 22 C POR 5 DAS
AGAR PCA
INCUBAR A 37 C POR 2 DAS
PETRIFILM
1 ml c/u
PETRIFILM
INCUBAR A 37 C POR 2 DAS
RECUENTO DE BACTERIAS
HETERTROFAS
50 mL
AGAR R2A
INCUBAR A 22 C POR 5 DAS
AGAR PCA
INCUBAR A 37 C POR 2 DAS
RECUENTO DE COLIFORMES
TOTALES Y FECALES
250 mL
AGAR CHAPMAN-LACTOSATRIFENIL-TETRAZOLIO
INCUBAR A 30 C POR 24 - 48 h
AGAR CHAPMAN-LACTOSATRIFENIL-TETRAZOLIO
INCUBAR A 44,5 C POR 24 - 48 h
RECUENTO DE COLIFORMES
TOTALES Y FECALES
1 ml c/u
PETRIFILM
1 ml c/u
PETRIFILM
INCUBAR A 44 C POR 2 DAS
1 ml
1 ml
SE REALIZA EL RECUENTO
DE TUBOS CON PRESENCIA
DE GAS
0,1 ml
SE REALIZA EL RECUENTO
DE TUBOS CON PRESENCIA
DE GAS y SE BUSCA EL
NMP EN LA TABLA
1 ml
1 ml
SE REALIZA EL RECUENTO
DE TUBOS CON PRESENCIA
DE GAS
0,1 ml
Caldo E.C
SE REALIZA EL RECUENTO
DE TUBOS CON PRESENCIA
DE GAS y SE BUSCA EL
NMP EN LA TABLA
RECUENTO DE ENTEROCOCOS
250 ML
INCUBAR A 37 C
POR 48 HORAS
COLONIAS MARRONES
O NEGRAS (+)
INCUBAR A 44 C
POR 2 HORAS
CONFIRMAR
COLONIAS
RECUENTO DE ENTEROCOCOS
POR EL METODO DEL NUMERO MAS PROBABLE
(NMP)
1 ml
1 ml
SE REALIZA EL RECUENTO
DE TUBOS CON PRESENCIA
DE TURBIDEZ O
PRECIPITADO
RECUENTO DE ENTEROCOCOS
PRUEBA CONFIRMATORIA
0,1 ml
SE REALIZA EL RECUENTO
DE TUBOS CON PRESENCIA
DE PRECIPITADO AZUL
RECUENTO DE ESPORAS DE
CLOSTRIDIUM SULFITO-REDUCTORES
CALENTAR
A 80 C
POR 10
MINUTOS
INCUBAR A 37 C
POR 72 HORAS
10 ml c/u
INCUBAR A 45 C
POR 48 HORAS
(+)
AGAR SULFITO DE HIERRO
A DOBLE CONCENTRACIN
DETECCIN DE AEROMONAS
250 mL
AGAR ALMIDN-AMPICILINA
INCUBAR A 37 C POR 24 - 48 h
AGAR ALMIDN-AMPICILINA
INCUBAR A 37 C POR 24 - 48 h
INVESTIGACIN DE Campylobacter
250 mL
AISLAR E IDENTIFICAR
INCUBAR A 42 C
POR 12 HORAS. MICROAEROFILIA
AGAR PRESTON
INCUBAR A 42 C POR 48 HORAS. MICROAEROFILIA
INVESTIGACIN DE Legionella
pneumophila
100 mL
AISLAR
E
IDENTIFICAR
Incubar a 37 C
por 15 das
(filtro)
Tratamiento
cido
Agar BCYE-
Tratamiento
trmico
Lavar con 2 ml
de agua estril
INVESTIGACIN DE Pseudomonas
aeruginosa
250 mL
AISLAR
E
IDENTIFICAR
AGAR CETRIMIDA
INCUBAR A 42 C
POR 24 HORAS
INVESTIGACIN DE Staphylococcus
aureus
muestra
AISLAR E IDENTIFICAR
1 ml de la muestra
INVESTIGACIN DE Staphylococcus
aureus
250 mL
AISLAR E IDENTIFICAR
INCUBAR A 37 C
POR 24 HORAS
INVESTIGACIN DE Salmonella
250 mL
INCUBAR A 37C
POR 24 HORAS
CALDO CASEINA- SOJA
selenito
AISLAR E IDENTIFICAR
Incubar a 37 C
por 24 horas
Agar bilis
verde brillante
Agar
SS
Agar
bismuto
sulfito
FILTRAR
10 ml
AGAR SABOURAUD
IDENTIFICACIN
1 ml c/u
Penicillium spp.
Aspergillus spp.
Cladosporium spp.
Chrysosporium spp.
Curvularia spp.
Cladosporium spp.
Microscopio de contraste
de fase. Objetivo 40 x
Fusarium spp.
Acremonium spp.
RECUENTO DE
MICROORGANISMOS HALFILOS
MODERADOS
10 ml
INCUBAR A 30 C
POR 10 DAS
AGAR HALFILO
100 ml
AISLAR E
IDENTIFICAR
INVESTIGACIN DE ALGAS Y
CIANOBACTERIAS
100 mL
INCUBAR A 24 C
POR 30 DAS CON
ILUMINACIN
OBSERVAR E
IDENTIFICAR
CIANOBACTERIAS Y ALGAS
Synechocystis spp
Chlorococcum spp
Microscopio de contraste
de fase y de fluorescencia.
Objetivo 40 x
TAPETES Y BIOFILMES
5m
5m
patogenicidad
16S
Ligation
rDNA
amplicons
Transformation
Total DNA:
Sequencing
Analysis
Insert
PCR
(Giuseppe dAuria)
Microbiota autctona de
aguas minerales
16S rRNA
RFLP
Observaciones de cultivo
Observaciones microscpicas
Evaluacin bioqumica
Evaluacin fisiolgica
Agua purificada
Agua altamente purificada
Agua para inyectables
Limites microbiolgicos
Agua purificada
Pirogenos
Prueba del LAL
Test de coagulacin
a 37 C por 1 hora
Serie de diluciones
reactivo LAL
(Lymulus amebocite
lysate)
Test Pyrosate,
Combrex y Pirgeno
Ufc/ml
Clarificador
Cloracin
Sedimentacin
Canales de
sedimentacin
Almacenamiento
Cmara de
mezcla del
floculante
Cmara de
floculacin
Distribucin
Bibliografa
OMS (2004). Gua
para la calidad del
agua potable. OMS
WHO (2005). Good
manufacturing
practices. Serie
(Report 39)
USP (2007).
Pharmacopeia.
European
Pharmacopeia. 6th
edition, 2007