Bioqumica

Prcticas

Grado en Qumica
M Fernanda Molina Fossati

PRCTICA 1: Bioinformtica
nyhrrycrss rapnihtkkg qnmleilqdc fedqskasfl ddftesltss tqkkkanysq
ssskkcpesh skpvpvssrt geaslqasae pseaaggsvq anevhhgasd
eldlcvgspv vlldanvntl qkaaspagqk rvasvsrspv drqasnknis
1. A qu gen o protena corresponde la secuencia y de qu
especie se trata?
Centromere protein C1 [Mus musculus]
2. Cual es el nmero de acceso o identificacin de la misma?
AK137803.1
3. Cuntos nucletidos tiene el RNA mensajero para este gen?
1471 bp
4. Cuntos aminocidos tiene esta protena?
274 aa
5. Existe alguna publicacin cientfica donde se haya publicado
tal secuencia?
Si, ms de ocho.
6. Qu autores y laboratorio aislaron y caracterizaron este
gen?
Carninci,P. and Hayashizaki,Y.
7. Existen secuencias homlogas en distintas especies con alto
parecido?
Si, como por ejemplo: centromere protein C 1 [Cricetulus griseus],
centromere protein C 1, isoform CRA_b [Homo sapiens]
8. Cul es la ltima publicacin aparecida para esta protena o
gen?
El 6 de octubre de 2010
9. En qu cromosoma humano se localiza el gen para esta
secuencia?
En el cromosoma 4
10.
Cul es la funcin de este gen o protena?
Estructural

PRCTICA 2: Utilizacin general de material en el

laboratorio
II.

Utilizacin de espectrofotmetro

1. Anotar en una tabla los valores de absorbancia que

corresponden a la concentracin de sulfato de cobre en % en
cada tubo.
Concentracin (%)

Absorbancia

0,067

0,133

0,342

10

0,664

2. Representar mediante una grfica en ordenadas la

absorbancia frente al porcentaje de la solucin de SO 4Cu en
abscisa. Ajustar a una recta.

Grfica 1
0.7
0.6 R = 1
0.5
0.4
Absorbancia 0.3
0.2
0.1
0
0

10

12

Concentracin

III.

Utilizacin del pH metro

1. Anotar en una tabla los volmenes acumulados aadidos y los

valores de PH.
Volmenes (mL)
0
0,5
1
1,5

pH (NaCl)
6,85
8,25
9,65
9,90

pH(HCl)
6,70
2,67
3,26
3,00

2
3
4
14

10,15
10,80
11,74
12,68

2,82
2,54
2,38
1,64

24

12,80

1,39

2. Con los valores de los volmenes aadidos y las lecturas de

pH, elaborar una grfica en la que se represente la variacin
de pH frente al volumen aadido.
3. Sobre la curva calcular grficamente los valores de pKa1,
pKa2 y PI y anotarlos en la propia grfica.

IV.

Utilizacin de la microfuga

1. Por qu precipitan las protenas en presencia de la solucin

de sulfato amnico? Y en presencia de la acetona?
El sulfato amnico es uno de las sales ms utilizadas para la
precipitacin salina de protenas. Es muy soluble y el ion sulfato
permite alcanzar altas fuerzas inicas.
Las protenas en solucin son menos solubles cuando se aumenta la
fuerza inica y esto se logra adicionando sales solubles como el
sulfato de amonio.
La presencia de disolventes orgnicos como la acetona afecta
tambin a la solubilidad, porque disminuye la capacidad de los
disolventes acuosos para separar y solubilizar a los grupos cargados
de las protenas.
2. Por qu se disuelven posteriormente en el PBS?
El PBS (Phosphate Buffer Saline) es un suero salino tamponado en
fosfatos para reproducir lo mejor posible las condiciones fisiolgicas
de la sangre, por este motivo se disuelven muy bien las protenas.

PRCTICA 3: Reconocimiento de glcidos

I.

Mtodos cualitativos: Poder reductor de

azucares

1. Por qu la sacarosa no da positivo en la prueba de Fehling?

La prueba da negativo porque ambos grupos OH de los carbonos alfas
participan en el enlace o-glucosidico.

2. Por qu al tratar la sacarosa con ClH da positivo la prueba de

Fehling?
En presencia de HCl y con calor, la sacarosa se descompone en los dos
monosacridos que la forman: glucosa y fructosa.
3. Por qu el tratamiento con calor del almidn hace desaparecer
el azul intenso del lugol de una manera reversible y en cambio
el tratamiento con ClH lo hace desaparecer irreversiblemente?
El color azul del lugol se debe a un proceso fsico, al introducirse en las
hlices de la amilasa. Al calentarlo ir perdiendo el color hasta volverse
incoloro debido a que el calor desnaturaliza la estructura helicoidal.
Al calentar almidn en presencia de un cido se hidroliza formando
glucosa. Como el color azul depende de la estructura helicoidal de
amilasa y esta ha desaparecido, desaparece el color azul.

II.

Mtodos cuantitativos: Mtodo de Nelson-Somogyi

1. Anotar en una tabla los valores de la cantidad de mg de

glucosa y la absorbancia (A) correspondiente a cada tubo
(del n 1 al 5)