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PCR
La PCR se basa en el uso de la DNA polimerasa para copiar un molde de
DNA en ciclos repetidos de replicacin. La polimerasa es guiada hasta la
secuencia a ser copiada por cortos oligonucletidos cebadores que son
hibridados al molde de DNA al comienzo y al final de la secuencia de
DNA deseada. Estos oligonucletidos los disea el investigador de modo
que proporcionan un cebador (primer) para la replicacin de DNA sobre
cada cadena de la doble cadena de DNA original. Existen varias
aplicaciones de PCR especialmente tiles. En primer lugar, la PCR es el
mtodo de eleccin para clonar fragmentos de DNA relativamente cortos
a partir de una clula. El molde original para la reaccin puede ser DNA o
RNA, de modo que la PCR puede emplearse para obtener una copia
genmica completa o una copia de cDNA del gen.
qPCR
RT- PCR
Reaccin en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa es una variante de
PCR, una tcnica de laboratorio comnmente usada en biologa molecular para
generar una gran cantidad de copias de ADN, proceso llamado "amplificacin". En
la RT-PCR, sin embargo, una hebra de ARN es retrotranscrita en ADN
complementario (ADNc) usando una enzima llamada transcriptasa inversa, y el
resultado, se amplifica en una PCR tradicional.
Anlisis de Transcriptoma
Los anlisis de transcriptoma sirven para evaluar la expresin de genes y
as poder llevar a cabo un anlisis comparativo. Esto se puede llevar a cabo
con un microarreglo.
El microarreglo consiste en una coleccin de molculas de DNA dispuestas
sobre un soporte slido como una matriz de filas y columnas. Lo que se
realiza es lo siguiente:
1.
2.
3.
4.
5.
6.