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Ciclo del nitrgeno

Generalidades
El nitrgeno es un gas incoloro, inodoro e inerte. Es el gas disuelto ms abundante
en la atmosfera y el ocano. Acerca del 79% del gas atmosfrico y del 48% de los
gases disueltos en el mar son nitrgeno. A pesar de ello, relativamente pocas
especies pueden convertir el nitrgeno atmosfrico en formas utilizables por los
organismos vivos, estas especies son un reducido grupo de eubacterias
(fototrficas y heterotrficas) y arqueobacterias. .
Como elemento biognico se encuentra incorporado en molculas orgnicas que
desempean funciones vitales para toda clula, es un componente crtico de las
protenas, la clorofila y cidos nucleicos. Como el carbn, el nitrgeno puede ser
encontrado en los cuerpos de los organismos, como un gas disuelto (N), y como
materia orgnica disuelta conocida como nitrgeno orgnico disuelto (NOD). Se
puede pensar que el nitrgeno podra estar abundantemente disponible en el
ocano, por el volumen. Pero la mayora de los organismos no pueden usar el
nitrgeno libre de la atmosfera y del ocano directamente. Primero debe estar
ligado con oxgeno o hidrogeno, o convertido, en formas qumicas asimilables por
organismos especializados, usualmente bacterias o cianobacterias. As, las
regiones ocenicas usualmente se encuentran limitadas de nitrgeno, el
crecimiento de plantas y organismos similares a las plantas frecuentemente son
frenados por la falta de nitrgeno disponible.
El ciclo del nitrgeno es mucho ms complejo que otros, ya que presenta diversos
cambios en el estado de oxidacin, su depsito no es de tipo sedimentario (es
gaseoso), sus sales son altamente solubles y slo es estable termodinmicamente
en sus formas de Nitrgeno molecular y nitratos en condiciones xicas y
amoniacal en condiciones anxicas.
Formas presentes en agua de mar y factores que lo modifican
El ciclo del nitrgeno es ciertamente complejo por la presencia de las diversas
formas qumicas del nitrgeno que ocurren en varios estados de valencia
dependiendo del potencial redox. Por otra parte, tenemos que ocurren ciertos
procesos microbianos.

Las formas disponibles para la absorcin del nitrgeno por los seres vivos son
amonio (NH) y nitrato (NO), un ion formado por la oxidacin del amonio y
nitrato (NO). El nitrato proviene de escurrimientos del suelo es una fuente
especialmente rica en este nutriente a menudo limitado, lo cual explica porque el
agua costera tiende a soportar mayores poblaciones de plancton que las aguas
ocenicas. Despus de ser asimiladas por organismos pequeos de plantas y
organismos similares a plantas, el nitrgeno es reciclado por los animales que las
consumen y despus excretan amonio y urea. Esas formas reducidas de nitrgeno
despus son oxidadas de nuevo a nitrato, a travs del nitrito, por bacterias
nitrificantes. En el ocano profundo la mayora del nitrgeno esta en forma de
nitrato. En los sedimentos anxicos y regiones del ocano bajas de oxgeno, las
bacterias denitrificantes utilizan el nitrato en la respiracin y lo convierten de nuevo
a nitrito y nitrgeno gaseoso, el cual se pierde en la atmosfera. La otra perdida
mayor ocurre cuando los organismos que contienen nitrgeno y residuos son
enterrados en los sedimentos ocenicos.
Los procesos de transformacin qumica que intervienen en el ciclo de nitrgeno
son varios: (1) fijacin (reduccin) de nitrgeno molecular a amoniaco, (2)
asimilacin de amoniaco, (3) nitrificacin, (4) reduccin disimilativa de nitrato
(denitrificacin), (5) reduccin asimilativa de nitrato y (6) amonificacin.
CICLO DEL NITROGENO

1. Fijacin (reduccin) de nitrgeno molecular a amoniaco.


Este proceso demanda una gran inversin de energa (18 - 24 ATP), dada la
estabilidad del triple enlace NN, la cual hace del nitrgeno gaseoso una molcula
extremadamente inerte. La reduccin del nitrgeno molecular a amoniaco es
catalizada por un complejo enzimtico conocido como nitrogenasa. Este complejo
cataltico consiste de dos unidades proteicas diferentes conocidas como:
dinitrogenasa y reductasa de denitrogenasa.
La reduccin biolgica de nitrgeno molecular es llevada a cabo nicamente por
microorganismos procariotas. Entre las bacterias, la actividad de fijacin de
nitrgeno se encuentra distribuida entre eubacterias y arquebacterias y entre
hetertrofos y auttrofos.

Factores que afectan la actividad de la nitrogenasa:


EL complejo de la nitrogenasa es inactivado por el oxgeno de forma irreversible.
Los microorganismos que fijan nitrgeno en ambientes aerbicos han desarrollado
diferentes adaptaciones metablicas y estructurales para poder llevar a cabo la
fijacin de nitrgeno en un ambiente oxidante.
Estos microorganismos aerbicos protegen la nitrogenasa mediante:
(1) la remocin de oxgeno por el proceso de respiracin (ej. En Azotobacter y
Klebsiella, se observan cadenas de transporte abreviadas que rinden menos ATP
por molcula de sustrato oxidado, generndose un aumento en el consumo de
oxgeno por molcula de sustrato oxidado; o mediante asociacin sinergstica con
bacterias heterotrficas aerobias, como es el caso de la relacin entre Anabaena y
Pseudomonas aeruginosa);
(2) la produccin de capas limosas ("slime layers") que retardan la difusin de
oxgeno a travs de la membrana plasmtica y
(3) la localizacin de la nitrogenasa en clulas especializadas (ej. desarrollo de
heteroquistes en cianobacterias).
La actividad del complejo de la nitrogenasa es tambin inhibida por la presencia
de formas reducidas de nitrgeno en el ambiente. La presencia de altas
concentraciones de amoniaco, nitrato, urea y ciertos aminocidos inhiben la
actividad de la nitrogenasa. El grado de inhibicin que causan los ltimos tres
depende de la facilidad con que un organismo en particular pueda convertirlos a
amoniaco.
Fijacin abitica del nitrgeno gaseoso:
La mayor parte de la fijacin del nitrgeno molecular es de naturaleza biolgica.
No obstante, en la atmsfera terrestre tambin se lleva a cabo la fijacin abitica
del nitrgeno molecular mediante electrificacin y reduccin fotoqumica. A
diferencia de la fijacin de origen biolgico, donde el amoniaco es el producto
principal, en la fijacin fotoqumica el nitrato es el producto principal. En este tipo
de fijacin de alta energa el nitrgeno y el oxgeno se combinan en la atmsfera
para formar nitrato. Este ltimo es arrastrado por la lluvia a la superficie terrestre y
a los cuerpos acuticos en forma de cido ntrico (H2NO3). El aporte de la fijacin
abitica de nitrgeno gaseoso a los depsitos de nitrgeno en agua y suelos, se
ha estimado en 8.9 Kg N/ha/ao, comparado con los 100 a 200 Kg N/ha/ao que
se derivan de la fijacin biolgica de nitrgeno.
2. Asimilacin de amoniaco.
Descripcin del proceso:
La asimilacin del amoniaco al protosplasma celular es mediada por varias
enzimas. Una de las enzimas ms utilizada en la asimilacin del amoniaco es la
dehidrogenasa de cido glutmico. Esta enzima cataliza la incorporacin reductiva
de amoniaco al cido acetoglutrico para formar cido glutmico. El grupo amino
que presenta el cidoglutmico puede ser transferido a otras molculas orgnicas
mediante transaminasas. De esta forma se originan otros aminocidos, purinas y

pirimidinas. La asimilacin de amoniaco a molculas orgnicas puede ser mediada


por otras dehidrogenasas de aminocidos y por la sintetasa de glutamina. Esta
ltima cataliza la adicin de amoniaco al cido glutmico para formar glutamina.
En una reaccin subsiguiente, la enzima sintetasa de cido glutmico cataliza el
transferimiento del grupo amida de la glutamina al cido acetoglutrico,
formndose dos molculas de cido glutmico.

3. Nitrificacin
El proceso de nitrificacin consiste en la oxidacin de amoniaco bajo condiciones
estrictamente aerbicas. En ambientes con un potencial redox alto, el amoniaco
puede ser oxidado a xidos de nitrgeno y a nitrato. No obstante, siendo el
amoniaco un compuesto estable, se requieren agentes oxidantes fuertes o
agentes catalticos para que se pueda efectuar su oxidacin. En la naturaleza
contamos con un grupo de bacterias aerobias estrictas que poseen los agentes
catalticos (ej. enzimas) apropiados para efectuar dicha reaccin de oxidacin.
Estas bacterias se conocen con el nombre de bacterias nitrificantes. La oxidacin
de amoniaco por estas bacterias se observa en suelos con buen drenaje, a un pH
neutral o en cuerpos de agua con un alto contenido de oxgeno disuelto y un pH
neutral. Condiciones de anoxia o una alta acidez inhiben la actividad cataltica de
estas bacterias.
El proceso de nitrificacin ocurre en dos etapas; comienza con la oxidacin del
amoniaco a nitritos, seguido de la oxidacin del nitrito a nitrato. En cada una de
estas etapas intervienen diferentes poblaciones de bacterias quimiolitotrficas. La
oxidacin
de
amoniaco
(NH3)
a
nitrito
(NO2-)
es mediada principalmente por bacterias del gnero Nitrosomonas, mientras que
en la oxidacin de nitrito (NO2-) a nitrato (NO3-) intervienen frecuentemente
bacterias el gnero Nitrobacter. No se conoce hasta el presente de ninguna

bacteria quimiolitotrfica que puede oxidar el amoniaco directamente a nitrato.


Aunque existen algunas bacterias quimioorganotrficas y algunos hongos que
pueden oxidar el amoniaco directamente a nitrato, la magnitud de dicha actividad
se considera de escasa importancia ecolgica.
Factores abiticos que afectan el proceso de nitrificacin:
Oxgeno
el proceso de nitrificacin es muy limitado o no existente en sedimentos anxicos,
tampoco requieren altas concentraciones de oxgeno disuelto para que se lleve a
cabo el proceso. El proceso de nitrificacin se puede registrar en ambientes
acuticos naturales con concentraciones de oxgeno disuelto mayores de 0.3
mg/L. Por debajo de esa concentracin, la razn de difusin del oxgeno a las
bacterias no es suficiente para sostener el proceso de nitrificacin. Para el
tratamiento de aguas de alcantarillado sanitario se recomienda mantener el
oxgeno disuelto en valores mnimos de 2 mg/L, logrndose economas
significativas en el procesamiento de aguas usadas al reducirse los costos de
aireacin de la mezcla de lodos.
Materia orgnica disuelta
La presencia de altas concentraciones de materia orgnica disuelta puede inhibir
de forma indirecta a las bacterias nitrificantes. Los hetertrofos aerobios y
anaerobios facultativos al oxidar la materia orgnica, compiten con las bacterias
nitrificantes por el oxgeno disuelto disponible. Los hetertrofos presentan en
trminos generales una mayor afinidad por el oxgeno que las bacterias
nitrificantes [Ks (O2) hetertrofos < Ks (O2) bacterias nitrificantes].
pH
El proceso de nitrificacin es afectado por el pH. Se han reportado diferentes
valores de pH ptimo para el proceso de nitrificacin; no obstante, se observa una
tendencia marcada a que segn disminuye el pH, la razn de nitrificacin tambin
disminuye. Generalmente el pH ptimo para este proceso oscila entre 8 y 9. Los
lmites de tolerancia mnimo y mximo oscilan entre 5.5 y 6.7 y entre 9.6 y 10.4,
respectivamente.
Metales

En la literatura se reportan
diferentes lmites de tolerancia al
pH,
para
el
proceso
de
nitrificacin. No obstante, se
observa una tendencia marcada a
una disminucin en la actividad de
nitrificacin segn disminuye el
pH.

Aun cuando metales tales como cobre, mercurio y cromio tienen un efecto
inhibitorio sobre cultivos puros de bacterias nitrificantes, dicho efecto se reduce
significativamente en escenarios naturales y plantas de tratamientos. Para que un
metal genere los mismos niveles inhibitorios reportados para cultivos puros de
bacterias nitrificantes, en las poblaciones de bacterias nitrificantes presentes en
sistemas de tratamiento de aguas usadas, se requiere aumentar su concentracin
entre 10 y 100 veces. Por otro lado, se ha reportado que concentraciones no
inhibitorias de cobre y mercurio cancelan el efecto de otros inhibidores de la
nitrificacin, como thiourea y mercaptobenzothiazole.
Temperatura
La razn de nitrificacin es afectada por la temperatura (Figura 6). La actividad
mxima de nitrificacin se registra a lo largo de un rango amplio de temperaturas,
que por lo general se extiende de 15 a 35C. Cuando la temperatura desciende de
los 15C, la razn de nitrificacin cae abruptamente, reducindose a un 50%
cuando la temperatura baja a 12C.

4. Denitrificacin

La denitrificacin es un proceso de respiracin anaerobia, donde el nitrato es


utilizado como aceptador alterno de electrones en lugar de oxgeno, reducindose

Hay algunas bacterias (ej. Clostridium)


que no reducen nitrato, pero que s
pueden reducir nitrito a amoniaco. Este
puede representar un mecanismo de
detoxificacin, dado que el nitrito puede
ser txico bajo condiciones acidas.

a xido ntrico (NO), xido nitroso (N2O) o nitrgeno molecular (N2) (Figura 7).
Dado que estos compuestos nitrogenados son gases poco solubles, los mismos
no se incorporan al material celular, sino que escapan a la atmsfera. Este
proceso, tambin conocido como trayecto disimilativo de nitrato, es llevado a cabo
exclusivamente por eubacterias. Los siguientes gneros bacterianos contienen
especies que demuestran la habilidad de llevar a cabo el proceso de
denitrificacin: Bacillus, Chromobacterium, Micrococcus, Pseudomonas, Spirillum,
Hypomicrobium, Achromobacter, Moraxella, Paracoccus, Alcaligenes y Aquifex.
Este ltimo gnero corresponde a bacterias hipertermoflicas y quimiolitotrficas
obligadas.
El retorno del nitrgeno a la atmsfera mediante el proceso de denitrificacin
completa el ciclo biogeoqumico del nitrgeno. Este proceso acarrea una prdida
de nitrgeno en ambientes naturales, por lo que resulta ser un proceso detrimental
para la actividad agrcola. Por otro lado, el proceso de denitrificacin es utilizado
bajo condiciones controladas en sistemas de tratamiento terciario de aguas
usadas, para reducir la concentracin de nitrgeno en los efluentes.
Factores abiticos que afectan el proceso de denitrificacin:
Oxgeno
La sntesis de las enzimas que participan en el proceso de denitrificacin es
reprimida por la presencia de oxgeno. El grado de represin del oxgeno vara de
una especie bacteriana a otra y vara con la concentracin de oxgeno. La
informacin acumulada hasta el presente indica que el oxgeno no afecta la
actividad de las reductasas, sino su sntesis. La aireacin de suelos a travs de las
prcticas de arado y volteo mecnico tienen como una de sus finalidades reducir

la actividad de las bacterias denitrificantes, reduciendo as la prdida de


fertilizantes nitrogenados.
pH
El pH del ambiente aparentemente afecta la naturaleza y concentracin del
producto final en el proceso de denitrificacin. En estudios realizados con una flora
bacteriana mixta se encontr que la reduccin de nitrato a xido nitroso es ms
abundante a valores de pH < 7.

Temperatura
El rango de temperaturas a los cuales se produce la denitrificacin es amplio,
segn lo revela el hecho de que se han aislado bacterias psicroflicas, mesoflicas
y termoflicas que llevan a cabo dicho proceso. No obstante, en cada uno estos
grupos observamos que la reduccin disimilativa de nitrato opera dentro de un
rango definido de temperaturas.
5. Amonificacin

El proceso de amonificacin consiste en la generacin de amoniaco como


producto principal en la descomposicin de materia orgnica nitrogenada (ej.
protenas, bases nitrogenadas, urea, etc.). Dicho proceso es llevado a cabo por
muchos microorganismos, as como tambin por plantas y animales. Enzimas
conocidas como deaminasas son las responsables del transferimiento del
nitrgeno de molculas orgnicas a otras molculas orgnicas. La descomposicin
de la materia orgnica nitrogenada se produce bajo condiciones aerobias y
anaerobias.

El ion amonio se absorbe fuertemente a material particulado y coloidal,


especialmente en cuerpos de agua alcalinos, que contienen altas concentraciones

de materia orgnica disuelta de naturaleza hmica. Aunque el NH4+ constituye


una buena fuente de nitrgeno para las plantas, muchas algas y macrfitas
localizadas en ambientes eutrficos crecen mucho mejor a expensas de nitrato,
aun cuando se requiere que el nitrato sea reducido posteriormente a amoniaco.
Esto se debe en gran medida a la toxicidad del NH OH producido a pH altos,
como son los valores de pH que se observan durante periodos de alta actividad
fotosinttica en ambientes eutrficos.

6. Amonificacin de nitrato (Trayecto asimilativo de nitrato)


El nitrato (NO3-) es asimilado cuando el mismo es reducido para utilizarse como
nutriente. Dicho proceso de reduccin es conocido como metabolismo asimilativo.
Es importante enfatizar que el metabolismo asimilativo de nitrato es muy diferente
al proceso de denitrificacin, donde el nitrato es utilizado como aceptador final de
electrones en un proceso dirigido a generar energa (respiracin anaerobia). Nos
referimos al proceso de denitrificacin como un trayecto disimilativo, mientras que
el proceso de amonificacin de nitrato es un trayecto asimilativo.
A diferencia del proceso de denitrificacin, que resulta en la prdida de nitrgeno
de ambientes naturales, la amonificacin de nitrato, tiene como producto principal
al amoniaco. Este es posteriormente incorporado al material celular mediante las
reacciones de asimilacin que presentamos en una seccin anterior. Las
reductasas de nitrato que intervienen en el trayecto asimilativo son protenas
solubles que no son afectadas por el oxgeno, mientras que su contraparte en el
trayecto disimilativo son protenas ligadas a la membrana citoplasmtica cuya
sntesis es reprimida por oxgeno. El trayecto asimilativo de nitrato es llevado a
cabo por plantas, hongos y algunas bacterias, mientras que la denitrificacin es un
proceso que llevan cabo slo bacterias. La amonificacin de nitrito que se observa
en el trayecto disimilativo es llevada a cabo por organismos fermentativos que
utilizan los electrones de la coenzima NADH para reducir nitrito en lugar de reducir
a un compuesto orgnico, por lo tanto, no es un caso de respiracin aerobia.

Entrada de nitrgeno a ambientes naturales:


Generalmente, la entrada de nitrgeno proveniente de fuentes atmosfricas a
cuerpos acuticos ha sido considerada menor a la aportacin proveniente de
escorrentas terrestres. No obstante, esa percepcin ha ido cambiando segn se
han magnificado los aportes de nitrgeno derivados de la contaminacin
atmosfrica. En algunas corrientes alpinas oligotrficas que transcurren a lo largo
de cuencas de granito, una fuente principal del nitrgeno lo son las diferentes
formas de precipitacin (lluvia, nieve, granizo) que se producen en l.
La cantidad de nitrgeno que aportan las diferentes formas de precipitacin vara
con las condiciones meteorolgicas, la localizacin del hbitat con respecto a las
fuentes de contaminacin industrial y el patrn de vientos imperantes. El nitrgeno
puede entrar a un ambiente natural de las siguientes formas: N2, HNO3, y NH4+
disueltos; como NH4+ adherido a materia particulada y como materia orgnica
disuelta o adherida a materia particulada.
Otras fuentes de entrada del nitrgeno a ambientes naturales lo son la fijacin
biolgica de nitrgeno, la cual discutimos anteriormente, y los aportes
provenientes de escorrentas terrestres y aguas subterrneas. Estos ltimos
cargan el nitrgeno proveniente de fuentes de contaminacin (efluentes
industriales y domsticos), fertilizantes nitrogenados y otros compuestos
nitrogenados (ej. pesticidas, excremento de animales) que son utilizados o se
generan en suelos dedicados a la agricultura y la ganadera.
Prdida de nitrgeno en ambientes naturales:
En adicin a la prdida de nitrgeno que acarrea el proceso de denitrificacin, se
pueden producir prdidas de nitrgeno en ambientes naturales como resultado de
los procesos de nitrificacin y amonificacin. En ambientes acuticos la
sedimentacin tambin genera una prdida de nitrgeno orgnico e inorgnico
para las formas de vida que viven en la columna de agua.
Contaminacin por nutrientes de las aguas costeras.
La contaminacin representada por los nutrientes nitrgeno y fosforo representa
actualmente la fuente de degradacin ms grande que experimentan las aguas

costeras a nivel mundial. Esta contaminacin resulta del exceso de las cargas de
nutrientes derivadas de los diversos procesos naturales y de las actividades
antropognicas que tienen lugar en las cuencas de drenaje asociadas a los
cuerpos de agua receptores. Una amplia gama de problemas se han observado en
las aguas costeras que van desde la mortandad de peces, fetidez, anoxias
recurrentes, hasta la destruccin total de los ecosistemas, que se han relacionado
directa o indirectamente con el excesivo aporte de nutrientes.

Daos provocados por la contaminacin de nutrientes


La fertilizacin de los ros, lagos, embalses y de las lagunas costeras con escasez
de nutrientes como nitrgeno promueve la productividad primaria de estos
ecosistemas (produccin de algas). Este excesivo incremento en la produccin de
materia orgnica inducido por los nutrientes es lo que se define como
eutrofizacin, un proceso-no estado trfico- que se traduce en un incremento en la
tasa de suministro de materia orgnica al ecosistema, y que est ligado con un
gran nmero de problemas en los sistemas acuticos. En la medida en que la
biomasa algal crece, luego que muere se descompone y produce as periodos de
disminucin del oxgeno (hipoxia y anoxia) con mltiples consecuencias.
Los cambios en la concentracin de nutrientes, luz y oxgeno disuelto como
resultado de la eutrofizacin afectan ms a algunas especies que a otras, y
pueden provocar cambios en la estructura del fitoplancton, zooplancton y las
comunidades que habitan los fondos (organismos bentnicos) disminuyendo
generalmente la diversidad biolgica.
Ejemplo. Los florecimientos de algas nocivas (FANs) tales como las mareas rojas
y cafs se vuelven ms frecuentes y extensivas, cuya toxicidad puede afectar a los
organismos acuticos y al hombre. La disminucin de oxgeno disuelto puede
provocar mortalidad de peces y crear <zonas muertas>. Tambin son importantes
algunos cambios poco perceptibles en la comunidad del plancton que al
combinarse con otros factores ecolgicos pueden provocar un bajo crecimiento y
reclutamiento de ciertas especies de peces de importancia comercial y asi reducir
la produccin pesquera.
La susceptibilidad al enriquecimiento de nutrientes no es esttica y puede
modificarse en respuesta a factores tales como el cambio climtico, o a
variaciones estacionales o a factores de otro tipo.
Importancia para los organismos
Los organismos marinos dependen de los compuestos qumicos del ocano y de
las caractersticas fsicas para sostener la vida. Cualquier aspecto del medio fsico
que afecta a los organismos vivos son llamados factores fsicos. Los factores

fsicos ms importantes para los organismos marinos son luz, temperatura,


nutrientes disueltos, salinidad, gases disueltos, pH y presin hidrosttica, estos
trabajan en conjunto para proveer el ambiente fsico para la vida ocenica.
Los organismos vivos requieren de nitrgeno para formar protenas y otros
bioqumicos importantes, pero la gran mayora no puede usar el nitrgeno
atmosfrico y ocenico directamente. Primero debe fijarse en formas qumicas que
pueden ser utilizadas por organismos especializados. Aunque algunas especies de
bacterias que viven en el fondo pueden fabricar nitratos del nitrgeno disuelto en
el agua del mar, la mayora de los compuestos del nitrgeno que necesitan los
organismos vivos deben ser reciclados entre los mismos organismos mediante la
cadena trfica.
Distribucin vertical y estacional en sistemas marinos y estuarinos (valores
tpicos, extremos y/o indicadores del estado del sistema).
El nitrgeno se encuentra en el mar principalmente en cinco estados de oxidacin:
-3 (NH4+, NH2), 0 (N2), +2 (N2O), +3(NO2-) y +5(NO3-). Con mucho, la especie
ms abundante de nitrgeno en el mar es N2, pero es esencialmente no reactivo.
El nitrgeno gaseoso (N2-) es encontrado en la mayora de las aguas ocenicas y
costeras muy cerca de los valores de saturacin. Las siguientes especies ms
abundantes, y una biolgicamente activa, es el ion de nitrato (NO3-). Los otros
iones inorgnicos bioactivos, nitrito (NO2-) y amonio (NH4+) son menos
abundantes en general pero son de importancia local. El gas amonio (NH3) esta
agrupado con NH4+; NH3 junto con el xido nitroso (N2O). El nitrgeno orgnico
usualmente es considerado para ser encontrado en forma amino (NH2-) y los
valores se indican tanto en forma disuelta y particulada en la tabla.

Normalmente, cuando se tiene en cuenta las condiciones qumicas en la mayora


del ambiente ocenico, el cuadro general se construye con poca idea de las
variaciones estacionales. Claramente, esto es un error parcial, ya que hay ciclos
estacionales de la productividad primaria en gran parte del ocano.
Por lo tanto si los fenmenos fsicos no han causado gran variabilidad durante un
periodo de 3 aos considerando, que las capas ms superficiales deben de
mostrar patrones estacionales in situ. Los valores de nitrato estn integrados en el
2
rango de 1 a 150 m y rango de 150 a 400 mando mg*atom Nm
en estos dos
intervalos de profundidad. Se ha demostrado previamente que 150 m es una
aproximacin razonable de la capa superficial de las imgenes de nutrientes
integrados en estas aguas, esto es el mximo de la capa superficial mixta
incluyendo la zona ftica. Promedios trimestrales de 3 aos se dan en la siguiente
tabla. Se muestra poca variacin estacional en la capa de la superficie. A
continuacin es la capa, un patrn estacional distinto se demuestra por debajo de
esta capa, un patrn estacional distinto se demuestra con el calentamiento del
agua de la superficie y la ocurrencia de la estratificacin, una acumulacin de
nitrato en estas aguas subsuperficiales extiende a travs del invierno, donde
alcanza un mximo y luego cae abruptamente con la rotacin de agua de

manantial. Hay una acumulacin de la primavera al invierno en el 150 a 400 m


equivalente al intervalo de 60 a 65% del valor de la primavera.

Determinacin de la concentracin en agua de mar


NMX-AA-154-SCFI-2011 ANLISIS DE AGUA DETERMINACIN DE
NITRGENO DE NITRITOS EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES,
RESIDUALES TRATADAS Y MARINAS MTODO DE PRUEBA
Introduccin
El nitrito considerado como una etapa intermedia en el ciclo del nitrgeno puede
estar presente en el agua como resultado de la descomposicin biolgica de
materiales proteicos. En aguas superficiales crudas, las huellas de nitritos indican
contaminacin. Tambin se puede producir el nitrito en las plantas de tratamiento o
en los sistemas de distribucin de agua, como resultado de la accin de bacterias
sobre el nitrgeno amoniacal.
Objetivo y campo de aplicacin
Esta norma mexicana es de aplicacin nacional y especifica un mtodo de prueba
espectrofotomtrico para la determinacin de nitrgeno de nitritos. El mtodo es
aplicable en aguas naturales, residuales, residuales tratadas incluyendo, el agua
de mar y efluentes en un intervalo de 0,01 mg/l a 1 mg/l de no 2.

Principio del mtodo


El compuesto diazonio formado por la diazotizacin de sulfanilamida con nitritos
en el agua bajo condiciones cidas es copulado con diclorhidrato n-(1-naftil)
etilendiamina para producir un color prpura-rojizo que se mide
espectrofotomtricamente a 540 nm 543 nm.
Equipo y materiales
Slo se mencionan los equipos y materiales que son de relevancia para el
presente mtodo.
Equipo
Espectrofotmetro disponible para utilizarse a una longitud de onda de 540
nm 543 nm equipado con celdas de 1 cm o mayor de paso ptico de luz.
5.1.2 Balanza analtica con precisin de 0,1 mg.
Materiales Todo el material volumtrico utilizado en este mtodo debe ser
clase A verificado.
Membrana filtrante de 0,45 m.
Filtros de fibra de vidrio con dimetro de poro de 0,7 m
Papel filtro de poro medio.
REACTIVOS Y PATRONES
Todos los productos qumicos usados en este mtodo deben ser grado reactivo, a
menos que se indique otro grado.
Agua, con las siguientes caractersticas: Conductividad mxima 5,0 S/cm a 25 o
C y pH de 5,0 a 8,0.
cido clorhdrico. (HCl) concentrado
Sulfanilamida
Diclorhidrato de N-(1-naftil) etilendiamina , NEDA
Acetato de sodio (CH3COONa.3H2O)
Nitrito de sodio (NaNO2 )
Disolucin de cido clorhdrico (HCl) 1:3 Diluir 10 mL de HCl y 30 mL de
agua
Reactivo de color-buffer:
A 250 mL de agua destilada aadir 105 mL de de cido clorhdrico concentrado
(6.1), 5,0 g de sulfanilamida y 0,5 g de diclorhidrato de N-(1-naftil) etilendiamina
Agitar hasta disolver. Aadir 136 g de acetato de sodio y agitar hasta disolver.
Diluir a 500 mL con agua destilada. Esta disolucin es estable por varias semanas
si se almacena en la oscuridad y en refrigeracin. Disolucin de referencia madre
de concentracin de masa (NO2 - )= 100 mg/L de NO2 - . Pesar 0,1493 g de
nitrito de sodio (NaNO2 ), (6.5) previamente desecado 24 h en un desecador y
disolver en agua y llevar a volumen de 1 L. Preservar con 2 mL de cloroformo por
litro. 1,0 mL = 0,10 mg de NO2- .

Disolucin de referencia madre de concentracin de masa (NO2 - )= 100 mg/L


de NO2 - Pesar 0,1493 g de nitrito de sodio (NaNO2 ), previamente desecado 24
h en un desecador y disolver en agua y llevar a volumen de 1 L.
Preservar con 2 mL de cloroformo por litro. 1,0 mL = 0,10 mg de NO2 - .
Recoleccin, preservacin y almacenamiento de muestras
Las muestras deben ser colectadas y conservadas en frascos de vidrio o
polietileno, en refrigeracin.
La medicin debe realizarse mximo 48 h posteriores a su recoleccin.
Procedimiento
Pretratamiento de la muestra
Si es necesario filtrar la muestra a travs de filtros de membrana de 0,45 m
segn aplique. Para evaluar el efecto del color y turbidez de la muestra, que no
haya desaparecido con la filtracin, debe prepararse un blanco de muestra. Este
debe prepararse de igual forma que la muestra pero adicionar 2 mL de la
disolucin de HCl 1:3 en lugar del reactivo de color-buffer , la absorbancia del
blanco de muestra se resta a la absorbancia de la muestra.
Si la muestra tiene un pH mayor a 10 o bien, una alcalinidad total superior a los
600 mg/L, ajuste a un pH de aproximadamente 6 con cido clorhdrico 1:3.
Porcin de muestra
Tomar 50 mL de muestra previamente tratada, cuando aplique, o una alcuota y
diluir a 50 mL en un matraz volumtrico.
Aadir 2 mL de reactivo de color -buffer para cada disolucin de referencia y
muestras; mezclar y permitir que el color se desarrolle en por lo menos 15 min. El
medio de la reaccin para la coloracin debe tener un pH entre 1,5 y 2,0 unidades
de pH, esta medicin puede realizarse con papel indicador.
Leer la absorbancia a 540 nm 543 nm.
Clculos
Calcular la concentracin de masa de (NO2 - ) expresada en mg/L de NO2 utilizando la siguiente ecuacin:

Donde:
b es la pendiente ;
a es la ordenada al origen;
a es la absorbancia del NO2 - a la longitud de onda y,
(NO2 - ) es la concentracin de masa de NO2 - , (expresada en mg/L de NO2 - ).

El resultado obtenido de la ecuacin refiere a mg/L de NO2 - y la norma requiere


reportar nitrgeno de nitrito como N, por lo tanto utilizar la siguiente ecuacin para
efectuar la conversin:

Interferencias
Se conocen muy pocas interferencias a concentraciones de nitritos menores a
1000 veces; sin embargo la presencia de oxidantes o reductores fuertes en las
muestras afectaran rpidamente las concentraciones de nitritos. Alta alcalinidad
(>600 mg/L) dar bajos resultados debido a un cambio en el pH.
Conclusiones
El ciclo del nitrgeno es muy importante para el ecosistema, ya que las bacterias
requieren de este para transformarlo y en este proceso obtener energa para su
metabolismo, a su vez el nitrgeno modificado ya sea en NH4+ o NO3-, es
absorbido por las plantas en el medio terrestre y en el medio marino por el
fitoplancton, de all todos los herbvoros son beneficiados con el contenido de
nitrgeno presente en la planta y estos a su vez son un reservorio para los
carnvoros; cuando los ciclos vitales de cada una de estas especies llega a su fin,
el nitrgeno que se encontraba en su sistema es devuelto al ambiente para
empezar de nuevo el ciclo.
Bibliografa
Garrison, T. 2007. Oceanography an invitation to marine science. 6Ed. Orange
Collegue, Thomson
Castillo, F. et al. 2005. Biotecnologa ambienal. Editorial Tbar. Madrid
Fuentes, F. y Massol-Dey, A. 2002. Manual de laboratorios ecologa de
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Arana, F. 1987. Ecologa para principiantes. Editorial Trillas.
Bianch, J. et al. 2001. El mundo de la ecologa. Editorial Ocano. Barcelona,
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