You are on page 1of 5

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARING

ESPECIALIZAO EM BIOTECNOLOGIA
TURMA 5 2014
MARCADORES ISOENZIMTICOS E CITOGENTICOS
APLICADOS S POLULAES NATURAIS

Atividade de Marcadores isoenzimticos e citogenticos


aplicados s populaes naturais

DIEGO IGOR ALVES FERNANDES DE ARAJO


MAT. PG 69769

JOO PESSOA - PB
AGOSTO / 2015

Questes Ana Luiza valor 10


1) Observe as figuras abaixo e responda:
a) Qual o nmero diplide e haplide representado nesta metfase em
(a)? (0,5)
O nmero haploide n = 12 e o diplide 2n = 24.
b) Os cromossomos da metfase (b) foram submetidos a um processo
de bandeamento cromossmico. Qual o bandeamento realizado qual
a sua funo? (pesquise) (1,0)
O bandeamento observado no processo b o bandeamento G. Os
cromossomos so desproteinizados por ao da tripsina e,
posteriormente so corados com Giemsa (de onde deriva o nome
bandas G). Os cromossomos mostram um padro de bandas claras e
escuras, no qual as faixas escuras correspondem ao DNA rico em
bases AT e poucos genes ativos; as bandas G claras tm DNA rico em
bases GC e apresentam muitos genes ativos. Este processo
bastante importante, pois permite uma observao precisa dos
cromossomos, a deteco de delees, inverses e duplicaes no
material.

2) Observe o cariograma abaixo e responda:

a) O que representam as coloraes (bandas) mais escuras na regio do


centrmero de cada cromossomo? (1,0)
O bandeamento observado na figura acima do tipo C. Os
cromossomos so tratados com soluo de hidrxido de brio e
corados com Giemsa. Com este mtodo, so coradas regies
especficas em que o cromossomo apresenta DNA altamente
repetitivo, como nas regies dos centrmeros e em outras regies

cromossmicas (ex: brao longo do Y e telmeros), correspondendo


heterocromatina constitutiva, motivo de sua denominao.
b) Os pares cromossmicos possuem homologia completa? Justifique
sua resposta. (1,0)
No, existem diferenas quanto ao tamanho do par 1 e morfologia nos
pares 2, 3 e 5.

3) Se duas espcies apresentam o mesmo nmero diplide e frmula


cariotpica elas podem formar hbridos na natureza ou induzidos. Isto
ocorre em muitas espcies de peixes. Assim, considere a seguinte
situao: duas espcies, A e B se hibridizam na natureza; ambas
possuem 2n=54 cromossomos todos do tipo metacntricossubmetacntricos, mas diferem em alguns marcadores cromossmicos.
Contudo dois tipos de hbridos podem ser formados quanto morfologia
(colorao, por exemplo): um hbrido seria semelhante ao parental A e
outro semelhante ao parental B. Sugira quais seriam os possveis
marcadores que poderiam diferenciar os parentais e serem transmitidos
aos seus hbridos? (2,5)
A regio organizadora de nuclolo (NOR) a regio do
cromossomo na qual esto localizados os principais genes de rDNA que
so transcritos em uma molcula de RNA (45S) e posteriormente clivados
em molculas menores (18S; 5,8S; 28S). A relao entre o nuclolo e as
NORs so claras, uma vez que nos nuclolos, so transcritos e
processados os rRNAs necessrios para a produo de todas as
protenas das clulas.
Uma das principais investigaes das NORs com a impregnao
com nitrato de prata. Este mtodo bastante seletivo para marcaes em
ncleos interfsicos e em cromossomos meiticos e mitticos, alm de
ser um mtodo eficaz para a identificao dos stios de NORs nos
cromossomos.
Sendo assim, possvel determinar o marcador citogentico nos
parentais pela impregnao com nitrato de prata, sendo determinados os
pares que contm as NORs de cada parental e consequente material
passado para os hbridos.

4) O que so fuses cromossmicas e atravs de quais tcnicas


citogenticas podem ser detectadas no caritipo? (2,0)
Na gentica, o processo de fuso cromossmica corresponde a
uma
translocao
cromossmica
que

uma
anomalia
cromossmica causada pelo rearranjo de partes entre cromossomos nohomlogos. Ou seja, uma parte de um cromossomo pode ser fundido a
outro cromossomo no homlogo.
Isto

detectado
na
citogentica
ou
em
um caritipo das clulas afetadas. Existem dois tipos principais de
translocao cromossmica: a translocao recproca, tambm
conhecida como no-Robertsoniana e a translocao Robertsoniana.
Alm disso, as translocaes podem ser balanceadas (sem perda
ou acrscimo de material gentico) ou no-balanceadas (quando a troca
de material cromossmico desigual resultando em genes extras ou
ausentes).
As translocaes recprocas so geralmente uma troca de material
entre cromossomos no-homlogos. Elas so encontradas em cerca de 1
em cada 625 recm-nascidos humanos. Estas translocaes geralmente
no causam danos e podem ser encontradas durante um diagnstico prnatal. Entretanto, os portadores de translocaes recprocas balanceadas
possuem riscos aumentados de criarem gametas com translocaes
cromossmicas no-balanceadas causando abortos ou crianas com
anormalidades.
As translocaes robertsonianas envolvem rearranjo de dois
cromossomos acrocntricos que se fundem prximos da regio
do centrmero com perda de seus braos curtos. O caritipo resultante
em humanos possui somente 45 cromossomos j que dois cromossomos
se uniram com a fuso. As translocaes Robertsonianas j foram
observadas envolvendo todas combinaes de cromossomos
acrocntricos. A translocao mais comum em humanos envolvem os
cromossomos 13 e 14 e so observadas em cerca de 0,97 / 1000 recmnascidos. Assim como outras translocaes, os portadores de
translocaes Robertsonianas so fenotipicamente normais, mas existe
um risco de gametas no-balanceados que podem levar a abortos e uma
prole anormal.
As principais tcnicas empregadas para a deteco de
translocaes so o bandeamento dos cromossomos e a tcnica de FISH
(hibridizao fluorescente in situ).

5) O que significa a tcnica de FISH e porque se tornou metodologia


importante para a citogentica? (2,0).
A
hibridizao
fluorescente
in
situ,
conhecida
como FISH (do ingls: fluorescence in situ hybridization), uma
tcnica citogentica usada para detectar e localizar a presena ou a
ausncia de determinadas sequncias de DNA em cromossomos.
Desenvolvida na dcada de 1980, ela utiliza sondas fluorescentes que se
ligam somente s partes do cromossomo a que eles apresentem um
elevado grau de complementaridade de sequncia. A microscopia de
fluorescncia pode ser utilizada para descobrir em que a sonda
fluorescente ligado aos cromossomos. A tcnica muitas vezes usada
para encontrar caractersticas especficas no DNA para uso em
aconselhamento gentico, medicina e na identificao das espcies. A
FISH pode tambm ser usada para deteco e localizao de alvos
especficos de RNA em clulas circulantes, clulas tumorais ou amostras
de tecido. Neste contexto, pode ajudar a definir os padres espaotemporais de expresso gnica em clulas e tecidos.

You might also like