Spectromtrie Optique

Spectromtrie = interaction matire / rayonnements lectromagntiques

Cest rayonnement peuvent tre de la lumire visible ou rayon x.
Spectres :
Analyse du rayonnement en fonction de :
- Son nergie E
- Sa frquence
- Sa longueur donde
- Son nombre donde N =1/
Les units :

Unit SI

Energie
E
Joule J

Valeur usuelle

eV*

Frquence

Hz = s-1

*1 eV = 1,6.10-19J

Longueur donde

m
m (10-6m)
nm (10-9m)
(10-10m)
= angstrom

Nombre donde
N
m-1
cm-1

LInterprtation des spectres nous donnent :

Etat nergtique des atomes et des molcules.
Distribution de population des atomes ou des molcules lintrieur des niveaux
nergtiques.
Nature des phnomnes impliqus par les passages dun niveau nergtique lautre.
Gomtrie des molcules et liaisons chimiques qui unissent les atomes de ces molcules.
Interaction de ces molcules avec leur environnement.
I.

Rayonnements impliqus types dinteraction

Spectromtrie optiques :
- Ultraviolets (UV)
- Visibles (VIS)
- Infrarouges (IR)

spectrophotomtrie

Domaines spectraux :
Pour les IR :
- : 300 0,8 m
- IR lointains (300 30 m)
- IR moyens (30 3 m)
- IR proches (3-0,8 m)
Pour le VIS :
- : 800 -400 nm
Pour les UV :
- : 400 170 nm (spectrophotomtrie usuelle)
- UV proches : (400 -250 nm)
- UV lointains : (250 -170 nm)
Ce sont des rayonnements dits : NON IONISANTS ( > 91,3 nm)

On exclue certain rayonnement lectromagntiques :

- nergie plus basse ( + grande) : onde radiolectriques et micro-ondes.
- Energie plus leve ( + petite) : rayonnements X , , et rayons comiques (ionisants)

Types dinteractions :
- Absorption, diffusion et mission
- Rflexion, diffraction et rfraction
Avec les VIS et UV lorsquil rentre en interaction avec la matire modification de larrangement
des e de valence : Absorption, Emission
Pour les IR linteraction modification de la position spatiale des atomes autour de leur position
dquilibre par vibration : Absorption, Diffusion
Du au fait de la nature ondulatoire des rayonnements
Certains aspects ne peuvent tre expliqus que par la nature corpusculaire.
Londe lumineuse peut tre assimile un ensemble de paquets dnergie : les photons qui se
dplacent dans la direction de propagation de londe.

h = constante de Planck

E = h = h.c/
(= h.c.N)
c = vitesse de la lumire.

Daprs cette formule on peut dire quau plus la frquence dune onde est lev au plus son
nergie est grande.
Cette quation unifie la dualit ondulatoire/ corpusculaire du photon
II.

Origine des spectres

Atomes isols : nergie ne dpend que de leur configuration lectronique

Lnergie dun e ne peut prendre que qq valeurs discrtes.
Ces valeurs discrtes sont appeles des niveaux dnergie selon le modle de Bohr.
Lorsque le passe dun niveau un autre :
- Niveau lev un niveau plus bas : mission dun photon et son nergie vaut la entre les
2 niveaux dnergies. La lumire mise ne peut prendre que des qq valeurs discrtes.
Exemple de latome dhydrogne :
La rsolution analytique de lquation de Erwin Schrdinger est possible (prix N physique 1933) :
H =E
H = oprateur hamiltionien
E = scalaire = nergie de llectron
Couples de solutions du type : i Ei
Ei : ngatifs et proportionnels 1/n
n = nombre quantique principal
En = -RH/n avec n = 1,2,3,...
RH = constante de Rydberg = (13,6 eV = 2,18.10-18)
Lnergie de le va prendre des valeurs discrtes :
Valeur de Ei :
n = 1 Ei = E1 = -RH = nergie de ltat fondamental (E0)
n= 2 Ei = E2 = -RH /4 ...
Lnergie de le le est quantifi et ne dpend que de la valeur de n.
Exemple dun atome excit : (n>1) : tat thermodynamiquement instable :
Retour de le dans son tat fondamental

 Libration dnergie E = En E1
E = (-RH/n) ( -RH)
E = RH (1-1/n)

E = h = RH (1-1/n)
= (RH/h) (1- 1/n)

Si n > 2 : llectron ne retourne pas ncessairement sur son tat fondamental, il peut voluer vers
un autre tat ionis de nombre quantique n < n.
Dans ce cas on peut aussi calculer la frquence du photon mis :
= (RH/h ) (( 1/n )-( 1/n))
N = (RH/ hc) ((1/n) (1/n))
N = RH ((1/n) ( 1/n)) : formule de BALMER
RH = constante de Rydberg a des dimensions de nombre donde (1,097.107 m-1)
Chaque valeur de n une srie de raies (photons) (raies spectrales ou transitions)
Lensemble des raies = spectre dmission de latome.
Lquation de Schrdinger nest valable que pour les hydrognes et autres hydrognodes (Hlium,
Lithium, Bryllium).
Absorption :
Inverse du mcanisme dmission.
Les photons ne peuvent tre absorbs que si lnergie du photon correspond exactement la
dnergie entre tat fondamental et tat excit.
h. = RH (1 - 1/n) spectre dabsorption.
Pour un atome donn, raies dmission = raies dabsorption (loi de Kirchhoff)
Phnomne de renversement des raies du sodium (exprience de Kirchhoff)
III.
Absorption des rayonnements lectromagntiques
A. Au niveau dun atome isol
Electron priphriques (de valence, optique), les moins lis rentre dans le phnomne
dabsorption.
Le photon pour tre absorb par latome doit avoir une nergie = dnergie entre 2 couches
lectroniques de latome.
Absorption par latome excitation de latome disparition du photon(absorb).
h. : dnergie entre 2 couches lectroniques priphriques de latome.
Excitation : le photon disparait, il est absorb.
Spectres de raies (discontinu, discret)
Chaque raie correspond une transition.
nb photon
absorb

N (m-1)
B. Au niveau molculaire
a) A ltat gazeux (isol)

On obtient un systme de bande

Chaque bande (pic) est caractris par paramtres :

- La position de la bande (nm) = max : si on se dplace vers des longueurs donde plus forte
on a un effet bathocrome. Si on se dplace vers des longueurs donde plus faible on a un
effet hypsochrome.
- Hauteur, intensit : si la hauteur on a un effet hyperchrome. Si la hauteur on a un
effet hypochrome
- Largeur mi-hauteur.
1) Lnergie molculaire
5 niveaux dnergie molculaire
- Translation (Etranslation, ET)
- Orientation (Eorientation, Eo)
Rotation (Erotation, Er) : provient de la rotation de la molcule autour de son centre de
gravit. Er
- Vibration (Evibration, Ev) : mvt oscillatoire (mcanique) Ev = Ev de toutes les liaisons de la
molc.
- lectronique (Eelectronique , Ee) Ee
Etotale Er+ Ev + Ee
Chacun de ces termes nergtiques est quantifi, et ne peut donc prendre quune suite de valeurs
discontinues, quun ensemble DISCRET de valeurs. Ces nergies ne peuvent varier que par des
sauts bien dfinis.
E
n2

n1
niveaux lectronique
=eV

niveaux vibrationnels
=eV/10

niveaux rotationnels
=eV/100

Bandes dabsorption constitues de raies : N = Ne +Nv+ Nr

Systme de bandes = bandes de rotation vibration superposes une transition lectronique
Energie, frquences, longueurs dondes, nombres dondes impliques (ordre de grandeur) :
E (eV)
N (cm-1)
Ee
1
10 000
Ev
0,1
1 000
Er
0,01
100
Energie molculaire correspond lnergie des rayonnements UV, VIS et IR UV, VIS et IR vont
donc pouvoir tre absorbs par des molcules isoles en regardant des transitions rotationnelles,
vibrationnelles ou lectronique.
2) Absorption des rayonnements IR

Pour simplifier :
IR proches : eV/10
IR lointains : eV/100
Transition vibrationnelles Ev et rotationnelles Er
Photon IR proches :
Spectres de VIBRATION-ROTATION car toute transition vibrationnelle est associ des transitions
rotationnelles (discontinus) constitus de :

BANDES associes chacune une variation de lnergie de vibration Ev

Raies qui correspondent aux variations de lnergie de rotation Er

Les photons IR lointains :

Energie = eV/100 = tats rotationnels dune molcule.
Spectre de ROTATION PURE constitu uniquement de RAIES
3) Absorption des Rayons UV et visibles
Energie : eV = nergie sparant deux niveaux lectroniques.
Transition lectroniques + transitions vibrationnelles et rotationnelles : Ee Ev + Er
Exemple :
Transition - *
Molcules non satures proche de 200 -220 nm
Transition n-*
Electron n non-liant
Transition *
Molcules satures < 200 nm
Spectre lectronique constitu de :
RAIES (<-> Er)
BANDES (<-> Ev) constitu de raies qui sont :
- De plus en plus rapproches (vers les grandes nergies)
- De plus en plus intenses jusqu une limite trs nette dite tte de bande .
SYSTEMES (ou SEQUENCES) de bandes <-> Ee

Ces spectres sont discontinue jusqu une certaines nergie qui est lnergie de dissociation de la
molcule.
Dissociation : rupture de la liaison interatomique de la molcule = scission Homolytique
Radicaux libres (lectrons non apparis) = PHOTOLYSE. Ce nest pas une ionisation.
A distinguer du processus du au rayonnement ionisant : RADIOLYSE
b) Absorption par des molcules ltat condens
Interaction mutuelle de la part des molcules voisines
Lorsque interactions :
Les raies dabsorption slargissent, deviennent jointives suite de raies trs proches formant une
bande continue.
Du fait des interactions :

la rotation des molcules cesse dtre libre oscillation

la frquence de vibration des molcules est modifie

Etudes des spectres dabsorption molculaires : intrt ++

structure et environnement des molcules
- position de la bande : nergie associe la transition implique
type de transition
Modifications influence du milieu environnant.
- Intensit de la bande (hauteur de la bande) nature du milieu
- Largeur mi-hauteur temprature, pression, nature du milieu.
Cas des molcules fortement polaires associations :
Modification des vibrations et rotation fonction de la concentration
Le spectre varie ++ avec la concentration.
Groupe chromophore : absorbent lectivement (spcialement) certaines comme les doubles
liaisons conjugues (noyau benznique)
Dterminer quel groupe atomique est due labsorption.
Ex : thymine absorbe prfrentiellement = 260 nm
Spectres dabsorption molculaire = instruments trs efficace danalyse chimique :
Ils permettent notamment de :
Dterminer des concentrations (effectuer des dosages)
Etudier linfluence du milieu
Analyser des modifications conformationnelles.
IV.
Emission des rayonnements lectromagntiques
A. Incandescence = rayonnement thermique
Energie excitatrice = Chaleur excitation atomes des molcules de la matire = incandescence
Tout corps chauff met des rayonnements lectromagntiques.
Transition lectronique en gnrale non concern.
Essentiellement des variations :
- nergie de vibration Ev
- De lnergie de rotation Er
Infrarouge et visible.
Chauffer un filament mtallique :
Selon la nature du filament et selon sa temprature, on obtient localisations spectrales.
Emission dans linfrarouge :
Filament de NERNST port environ 1700C (oxydes de zirconium, de thorium et dyttrium)
Filament en carbure de silicium port environ 2000 C
Emission dans le visible :
Filament de tungstne port 2000 C ( lampes incandescence )
Spectres dmission par incandescence :
nergie rayonne e = f (longueur donde mise).
Nombreuse interactions entre molc du solide spectre continu
- max longueur donde dmission maximale
- aire sous la courbe = nergie totale rayonne E
Loi de Stefan Boltzmann :

T lnergie totale rayonne E

Loi du dplacement de WIEN :
T max est dplac vers les courtes longueurs donde :
max.T = A A = 1er constante de Wien
SI T nergie de rayonnement mis.

Frquence et nergie de plus en plus leves

Rayonnements IR, plus mission dans le domaine du visible, rouge, puis orange, puis jaune
= lumire chaudes ).

Loi de Stefan :
Quand T E totale rayonne (S )
Loi de Wien :
Quand T max dcale vers les faibles .

Lorsque lon chauffe des atomes ou des molcules isoles (tat gazeux) spectres de
RAIES.

Photomtrie de Flamme :
- Emission par Incandescence
- Dosage des mtaux alcalins (sodium Na, Potassium K, Lithium Li)
On vaporise une solution dans une flamme excitation mission de photon mesure des
photons pour dterminer concentration.

B. Luminescence (lmission laser)

= mission de tout rayonnement lectromagntique VIS, UV ou IR qui nest pas dorigine purement
thermique.
Retour ltat fondamental datomes ou de molcules excits par une nergie autre que la
chaleur.
Rayonnements plus nergtiques que par incandescence :
Photons IR
Photon Visibles : dont les couleurs froides (vert, bleu, violet)
Photons UV
Mode de luminescence : Photo-, Electro-, Chimi- luminescence ...
a) Photoluminescence
Energie excitatrice = nergie lumineuse (photons)
- Fluorescence
- Phosphorescence
Diagramme de Jablonski : reprsente tat lectronique dune molcules et transition entre les
tats.

Pour la fluorescence la molcule va recevoir de lnergie sous forme de photon, la molcule

absorbe ce photon excitation, le gagne le niveau v2.
Rgle de KASHA : La molc ne peut regagner ltat fondamental qu partir du niveau de vibration
le plus bas de ltat excit.
mission partir de ltat de vibration 0 de ltat excit considr.
Cette relaxation vibrationnelle est un processus non radiatif (sans mission de photon). Lexcs
dnergie perdu se perd par collision avec dautres molcules.
A partir de v0 de S1 la molc regagne son tat fondamentale mission de photon de
fluorescence.
Fluorescence : h (mis) < h (absorbs)
Loi de stockes : >
= dplacement de Stockes
- Phnomne pratiquement instantan
- Multiplicit de spin conserv (on reste dans des tat singulet)

Phosphorescence :
= processus de fluorescence retarde car passage par un tat excit triplet.
Etat excit triplet : T1
Niveau dnergie infrieur au premier niveau excit singulet S1
Cest un tat pige car mtastable : dure de vie >> tat singulet
Processus :
Le passage entre tats de multiplicit S1 T1 est en principe interdit mais il peut tre
rendu possible par un couplage spin-orbite (interaction entre le spin dune particule et son
mvt).
S1 T1 : transition non radiative = conversion inter systme (transition non radiative entre
2 niveaux vibrationnels appartenant des tats lectroniques de multiplicit ).
La probabilit de passage inter systme dpend des tats singulet et triplet impliqus.
Diagramme de Jablonski :

Le photon absorb fait passer la molc sur v2 puis sur v0 pui sur T1 par la conversion inter systme,
puis aprs un retard dmission on a lmission de photon de phosphorescence pendant le retour
sur S0.
- On a une fluorescence RETARDEE
- h < h
b) Electroluminescence
Energie excitatrice = impulsion lectrique (ddp V)
Spectres dlectroluminescence.
lectroluminescence de lhydrogne
Structure simple : un e + un proton
- Les raies spectrales de lhydrogne
- premire interprtation thorique de la structure interne de latome (N.Bohr, 1913)
Ee UV, VISIBLE, IR.

Srie de raies de spectre dmission par lectroluminescence de lHydrogne :

1 srie de raies dans lultraviolet = srie de LYMAN, n 2 tat fondamental n=1
1 srie de raies dans le VISIBLE = srie de BALMER , n > 2 tat de niveau 2 n=2
3 sries dans lIR :
1 srie IR proche = srie de PASCHEN n=3
1 srie IR proche et moyen = srie de BRACKET n=4
1 srie IR Moyen = srie de PFUND n=5

Chaque srie de raies est affect dun indice

Raie H de la srie de Balmer = 2me raie en terme dnergie de la srie mise dans le visible.
c) Emission laser
nergie excitatrice :
Electricit (ELECTROluminescence)
Lumire (PHOTOluminescence)
CHIMI (CHIMIluminescence)
LASER = Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation Amplification de Lumire par
Emission Stimule de Radiation
A.Einstein 1917 : mission stimul
T. Maiman 1960 : 1er mission laser

Bonne Cohrence (capacit des ondes interfrer entre elles)

Bonne Puret chromatique (monochromaticit)
Bonne directivit (rayon //)
Bonne puissance

IR + VISIBLE + UV
metteur laser :
- Milieu actif
- Mcanisme de pompage
- Rsonateur optique
1. Notions de cohrence spatiale et temporelle
Cohrence : existence de relation de phase entre 2 photons possibilit de faire interfrer ces
photons.
Tous les photons sont indiscernables :
Mme nergie (, )
Mme phase
Mme direction
Cohrence spatiale : 2 rayonnements mis au mme instant par 2 atomes peuvent donner lieu
des interfrences.
Lie lhomognit du milieu metteur : + le milieu est homogne (gaz), meilleur est la cohrence
spatiale.
Cohrence temporelle : on peut faire interfrer 2 photons mis par un atome des instants .
Lies la largeur de la Bande Spectrale mise.
Dispersion de frquence :
Ensemble continu de frquences centr sur la frquence thorique 0
La raie est largie : 0

Cause de la dispersion de frquence :

- Effet Doppler
- Principe dincertitude dHeisenberg : incertitude fonction du temps de sjour de le sur le
niveau excit.

La cohrence temporelle de la lumire laser est donc lie son faible talement spectral, sa
mono chromaticit.
2. Lmission spontan/ stimule
h (3) = Ei E0
stimulant
Ei
h (1)

h (2)
stimul

h (2)

E0
Rsonance
mission spontane
Lumire incohrente

mission Stimule (photon non absorb)

lumire cohrente
Raction en chane, onde form va
rencontrer un autre atome stimul qui met un
autre photon en phase stimule et ainsi de suite.

Lmission spontane est dautant plus importante que la frquence de la lumire mise est leve
Plus la frquence mise par le systme est leve, moins lmission stimule est importante.
3. Linversion de population = pompage milieu actif
Il faut inverser le rapport normal des effectifs atomiques pour que la quasi-totalit des atomes
soient dans un tat excit = pompage = inversion de population.
Linversion de population ncessite un apport dnergie extrieure partir de milieu actif.

Une dcharge lectrique = pompage lectrique qui peut avoir lieu

Dans un gaz
Ou dans un semi-conducteur
mission de type lectroluminescence.

Des photons = pompage Photonique ou pompage optique

mission de type photoluminescence
Une raction chimique = pompage chimique
mission de type chimiluminescence
Lasers chimique : laser acide chlorhydrique HCl.
Linversion de population ne peut tre ralise quavec certains types de milieux = milieux actifs
qui doivent comporter
- Au moins trois niveaux dnergie
- Et au moins un tat dnergie excit mtastable

Le pompage va peupler le niveau mtastable Ei en passant par un niveau intermdiaire

suprieur Ei.

tape 1 : E0 Ei photons excitateur h = Ei E0

tape 2 : Ei Ei transition non radiative atomes majoritairement excits en Ei
tape 3 : Stimulation photon stimulants h = Ei E0
tape 4 : Ei E0 mission de photons stimuls h = Ei E0

Photons
nergie
Frquence
Longueur
donde

Excitateurs
Ei E0

>
>

Stimulants
Ei E0

<

=
=

Stimuls
Ei-E0

4. Le milieu (matriaux) actifs :

1)

2)
3)

Au moins trois niveaux dnergie

Niveau Ei large :
Temps de sjour des lectrons
1 er niveau dexcitation Ei fin :
Temps de sjour des e
Cohrence temporelle
Ei E0 UV, VIS ou IR (eV/100 eV)
Probabilit de transition Ei E0 leve.

5. Lamplification Cavit Rsonante / rsonateur Optique

Pour favoriser la raction en chane qui suit lmission stimule, on amplifie le processus laide
dune cavit rsonante ou rsonateur optique
= deux miroirs // entre lesquels est plac le milieu actif.

Le 1er photon stimul sont rflchis par les miroirs et vont se transformer en photon stimulant en
traversant un certain nombre de fois le milieu actif.

6. Les principaux types de lasers

On classe les lasers selon :
- Leur mode dmission
- La nature du milieu metteur
Mode dmission : continu, impulsionnelle, ou dclench.
Ces modes conditionnent 2 paramtres trs importants :
- LIRRADIANCE ou clairement nergtique = puissance de rayonnement dlivr par unit
de surface en W.m-2
- FLUENCE = irradiance dure dmission = nergie du rayonnement dlivr par unit de
surface en J.m-2.

Nature du milieu metteur : solide, semi-conducteurs, liquides, gaz :

Puissance
Cohrence
Longueur donde
Rendement nergtique

Rendement nergtique dun laser = nergie mise / nergie fournie lors du pompage.
Les lasers solides :
Cristal ou verre, enrobant un lment actif = terre rare ionique ex : nodyme, Nd
Laser rubis :
- lment actif = chrome Cr3+
+++ Laser YAG (grenat dyttrium-aluminium) dop au nodyme nD (nD-YAG)

Mode continu ou impulsionnelle, pompage optique

IR proche (YAG)
VISIBLE (rouge pour le laser rubis)
UV (YAG)
Puissance lev 109 W en mode impulsionnelle (le plus puissant)
Rendement nergtique en gnral trs faible
Cohrence (spatiale et temporelle) mdiocre.

Les lasers semi-conducteurs = diode laser

Semi-conducteurs dops : arsniure de galium (GaAS) dop laluminium
Pompage : lectricit dans une jonction P-N polarise en sens direct.
mission :
IR
VISIBLE (bleu violac pour le carbure de silicium SiC)
mission modulable, accordable (on peut faire varier la mise (en jouant sur T))
Cohrence en gnral mdiocre
Puissance gnralement faible : (W qq W en rgime continu)
Rendement lev
Source de pompage pour dautres types de laser.

Les lasers GAZ : gaz pur ou en mlange

Pompage lectrique ou optique : ( atomes neutres, gaz molculaire, gaz ionique,
Excimre)
Lasers atomes neutres :
Atomes neutres ltat gazeux :
Ex : laser hlium-non (He-Ne)
- Lhlium est excit par une dcharge lectrique puis excite les atomes de non par
collision : cest le non qui met la lumire laser.
mission principale ; VISIBLE (rouge 633 nm)
Lasers gaz molculaire :
Laser dioxyde de carbone (CO2)
Niveaux de vibration- rotation => mission IR
N2, H2, CO, N2O (protoxyde dazote = oxyde nitreux)
Lasers gaz ioniss :
Ions sous forme gazeuse : laser argon ionis (Ar)
Lasers excimre (excited dimer) :
A base dexciplexes = molcules composes de 2 atomes et stables uniquement ltat excit.
- Un gaz rare / argon Ar
- Un halogne/ fluor F : interaction des 2 exciplexe)
Aprs mission les molcules exciplexes disparaissent photon mis ne peuvent pas tre absorb
excellent rendement.
Les lasers gaz :
Cohrence +++ (temporelle et spatiale) trs directifs
Puissance modre
Rendement nergtique variable
Emission :
IR CO2 : IR moyen
Visible Argon : vert, bleu
UV excimre

QCM :
A. B. C. D. E.

Les lasers liquides ou colorants organiques (dye laser) :

Colorant organique en solution, stilbne, coumarine,rhodarime
Emission :
Tout le domaine du visible
UV
Lmission est modulable
7. Les effets biologiques des lasers
Repose sur la directivit et puissance de la lumire laser :
Lasers thrapeutiques : qq dizaines de watts, mais irradiance lev (grce une bonne cohrence).
Effets photomcanique
Effets photothermique
Effet photoablatif
Effet photochimique.
Les effets dpendent :
- De la nature du tissu cible
- Du type de laser :
Longueur donde mise
Dure de lmission, irradiance, fluence.

La dur dmission va de qq picoseconde (ps, 10-12s) (effet photomcanique) plusieurs

dizaines de min (effet photochimique)
Lirradiance peut tre de 1012 W.cm (effet photomcanique)
La fluence varie de 1 1000 J.cm

Effets photomcaniques :

- Effet lectromcanique : lasers Nd-YAG

On peut provoquer une ionisation qui aboutit la cration dun plasma qui cre un gradient de
pression qui induit la propagation dune onde de choc = effet du laser sur le tissus cible.
Appliqu principalement en ophtalmologie.
- Effet thermomcanique : laser colorant
Emission trs brve (chaleur na pas le temps de diffus) ce qui provoque un confinement
pression leve qui peut provoquer la rupture de la paroi de vaisseaux sanguins. On peut dtruire
des vaisseaux sanguins de faon slective : photothermolyse slective.
Effets photothermiques : Nd-YAG, Argon ionis, CO2
Ce sont des effets trs localis qui proviennent de labsorption de la lumire laser par les tissus.
La chaleur va diffuser et selon la T on va observer : Hyperthermie coagulation volatilisation.
Sur constituants :
Pour 60C :
- Dsorganisation des membranes
- Dnaturation de certaines protines
Pour 100 C :
- Vaporisation du liquide interstitiel
- volatilisation des constituants tissulaires
- destruction de larchitecture du tissu

Au niveau des tissus :

Hyperthermie : 41 44C (qq min)
Mort retarde par atteinte des processus enzymatiques (effet peu utilis)
Coagulation : 50 90C (qq s)
Dessiccation, rtractation des tissus par dnaturation des protines (collagne), avec
limination des tissus cicatrisation.
Utilis pour dtruire des tumeurs, ou pour interrompre le flux sanguin dans certains vaisseaux.
Volatilisation : > 100 C (s s/10) : laser CO2 (+ Nd-YAG)
Perte de substance immdiate (les constituants tissulaire sont volatiliss) zone de ncrose de
coagulation effet hmostatique.
Utilis pour dtruire des tumeurs, ou pour des incisions sans saignement.
Effet photoablatif ou photodcomposition ablative :
= ablation pure dun matriel sans lsion thermique : photolyse.
Lasers mettant dans lUV :
- Laser excimre ArF ou XeCL
- Laser Nd-YAG quadrupl
Utilis en ophtalmologie (chirurgie rfractive de la corne)
Effet photochimique ou photothrapie dynamique
Photochimie = tude de laction de la lumire sur les ractions chimiques
Leffet photochimique = activation lumineuse spcifique dun photosensibilisant (substance
favorisant les effets de la lumire sut lorganisme).
On sensibilise une lsion par administration dun photosensibilisant puis on la dtruit avec de la
lumire laser, celle-ci doit tre de faible nergie donc lev et doit tre prfrentiellement
absorb par le photon sensibilisant (groupement chromophores). La lumire excite le photon
sensibilisant qui passe par un tat triplet et soit il donne une :
- Raction directe par raction doxydorduction : espce radicalaires (radicaux
peroxydes)
- Raction indirecte par transfert dnergie loxygne tissulaire oxygne singulet ce qui
le rend fortement toxique.
Ces 2 ractions conduisent la mort de la : ncrose (cytotoxicit)
V.
Mthode spectroscopiques
A. Absorption UV-VISIBLE- INFRAROUGE
a) Spectrophotomtrie
Son usage principal est :
- Quantitatif : DOSAGE
- Qualitatif : IDENTIFICATION (chromophores, molcules) : influence du milieu, modification
conformationnelles ...
Loi de Bouguer Lambert :
Lorsquune lumire monochromatique dintensit initiale I0 travers un milieu homogne, lintensit
de la lumire mergente I dcrot exponentiellement lorsque lpaisseur l du matriau absorbant
.
I = I0 e- a l
a = coefficient dabsorption caractristique du milieu et de la longueur donde du rayonnement
absorb.

En solution :
Loi de Beer : I = I0 exp (- .c.l)
: coefficient dabsorption = coefficient dextinction caractristique de la substance pour une
longueur donde donne.
l = paisseur de solution traverse = paisseur de la cuve de mesure = trajet optique
c= concentration de la solution
Loi de Beer-Lambert : log I0/I = .c.l
l en centimtre
c = concentration massique(C) en g.L1 ou concentration molaire (CM) en mol.L1 (CM = C/M)
:
Coefficient dextinction spcifique si concentration massique : m-1.kg-1.L ou cm-1.g-1.L
Coefficient dextinction molaire M si concentration en mole.L-1 : m-1.mol-1.L ou cm-1.mol-1.L
ou cm-1.M-1
Densit optique (DO) : EXTINCTION, ABSORBANCE (A)
D.O , D,DO
DO = log I0/I
Loi de Beer - Lambert : DO = .c.l
- Sans dimension (pas dunit)
- Dpend de la longueur donde

Transmission T (transmittance) :

Opacit Op :

T = I/I0

Op= 1/T = I0/I

DO = log Op = - log T
Proprit :
Les DO sont additives : la DO dun mlange de n espces absorbantes est la des absorbances
individuelles.
Validit de la loi de Beer Lambert :
- Lumire monochromatique
- Liquide transparent
- Concentration faibles ( mg.L-1 g.L-1)
Droite dtalonnage ou de calibration : DO = f (c)
Pointiller : exprimentale
En ligne droite : mesure
Linarit jusqu une concentration de 0 ,05 molaire
donc la loi de Beer-Lambert nest valable que jusqu 0,05 mol.

Spectrophotomtre :

Source de lumire :
Lampe halogne (visible)
Lampe hydrogne (UV)
Monochromateur
Cuves de mesure :
Verre ou plexiglas (visible)
Quartz (UV)
Dtecteur

En pratique on peut avoir une absorption de photon par une autre substance que la substance
tudi, 2 possibilits :
- Faire une premire mesure sur le solvant seul : DO1
- Faire une deuxime mesure sur la solution : DO2
DOsolut = DO2 (solution) DO1 (solvant)
Les appareils multifaisceaux permettent de faire ceci de faon automatique.
DO est report sur la droite dtalonnage et nous donne la concentration.
DO on connait de faon trs prcise on trouve la concentration avec la relation
c = DO / .l
La pente de la droite = .l
b) Oxymtrie de pouls
Mesure non invasive de la saturation de lhmoglobine en oxygne, SpO2 (p pour pulsatile, pulse)
But : sapprocher de la SaO2, saturation artrielle en O2
SpO2 = approximation valide de la SaO2
SaO2 : modle invasive ncessitant un prlvement de sang artriel :
SaO2 = (HbO2 / (HbO2 + Hb)) 100
Hb = hmoglobine rduite ou dsoxyhmoglobine
HbO2 = oxygmoglobine.
SpO2 distinguer Hb et HbO2 et distinguer sang artriel et sang veineux
2 principes :
- Spectrophotomtrie dabsorption
- Photoplthysmographie
1er principe : la spectrophotomtrie dabsorption
Estimation en temps rel, en continu, et sparment de la teneur du sang en Hb et HbO2
car absorption lumineuse pour ces 2 composs. (au niveau de la lumire visible rouge et
IR proche)
Spectre dabsorption Hb ( ... )
Spectre dabsorption HbO2 ( )
Dans le domaine visible et IR proche
Entre 500 et 800 nm labsorption de Hb > HbO2
Entre 800 et IR proche labsorption de Hb< HbO2

Appareille = oxymtre de pouls, saturomtre, moniteur SpO2

2me principe : la photoplthysmographie permet de reconnaitre la pulsatilit du signal (origine

artrielle du signal).
Mesure des variations de volume dun organe ou dune partie du corps en fonction du volume de
sang quil lirrigue.
- Flux continu non pulsatile (diastole)
- Flux pulsatile (systole)

Labsorption des photons est

- Constante durant la diastole = composante non pulsatile DC
- Prsente un pic durant la systole = composante pulsatile AC
Le photorcepteur mesure en permanence labsorption des 2 lumires mises ratio R :
R = ( ACrouge /DCrouge ) / (ACIR/DCIR)
ACrouge = absorption de la lumire rouge par la composante (pulsatile) AC
DCrouge = absorption de la lumire rouge par la composante (non-pulsatile) DC
ACIR = absorption de la lumire IR par la composante (pulsatile) AC
DCIR = absorption de la lumire IR par la composante (non-pulsatile) DC
R est empiriquement calibr sur des valeurs de SaO2 pour aboutir une valeur de SpO2 (%)
Ex : R=1 82 % SpO2
Mthode de mesure de SaO2 : carboxymtre : technique invasive.
Appareillage = carboxymtre, CO-oxymtre (spectrophotomtre)
Selon la loi de Beer Lambert , dosage de :
- Loxyhmoglobine HbO2
- Lhmoglobine rduite Hb
- La carboxy hmoglobine HbCO
- La mthmoglobine MetHb
Courbe de plthysmographie :
Ondulation rapide et synchrone de lactivit cardiaque.

Limites de loxymtrie de pouls :

Toute substance prsente dans le sang qui absorbe les longueur donde que Hb et HbO2 provoque
des interfrences :
Prsence :
Hmoglobine anormale : la valeur de SpO2 est (surstim)
- Carboxyhmoglobine HbCO : intoxication au monoxyde de carbone
- Mthmoglobine MetHb : ingestion de produit oxydant (mdicament)

Colorants : la valeur de SpO2 est (sous stimation)

Vert dindocyanine (ICG)
Bleu de mthylne (utilis dans le traitement de mthmoglobine lev)

Mouvement spontans du patient

Interfrence lectromagntique :
Bistouris lectriques
Lumire ambiant excessive ...

Qcm :
1. En mdecine, on utilise les lasers essentiellement pour leurs effets photomcanique (F
effet photo thermique)
2. Dan la loi de beer lambert le trajet optique sexprime oligatoirement en cm (V)
3. Au niveau du site de mesure dun oxymtre de pouls seule labsorption du sang veineux est
variable(F artriel)
4. La prsence dune hmoglobine anormale telle que la carbohmoglobine ou la
mthmogolobine conduit une surestimation de la SpO2 (V)
5.