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FACULTAD DE MEDICINA
ASIGNATURA DE MICROBIOLOGIA
GUIA DE PRACTICA PRACTICA N 10: DETERMINACIN DE ANTIESTREPTOLISINAS O
I.
INTRODUCCIN
El ttulo de Antiestreptolisina O, es un examen de sangre para la
betahemolticos del tipo A. Esta bacteria produce una enzima llamada estreptolisina O, que puede destruir los hemates y el
cuerpo reacciona contra ella produciendo anticuerpos especficos antiestreptolisina O. La medicin de estos anticuerpos es
lo que refleja el anlisis de antiestreptolisinas O, ASO ASLO.
Este examen se solicita o realiza cuando se sospecha o se tiene sntomas de una infeccin previa por estreptococos del
grupo A.
El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente en casi todas las personas en ttulos bajos, debido a que las
infecciones estreptoccicas son comunes. Sin embargo, la presencia de ttulos altos de antiestreptolisinas O ASLO,
indican una infeccin reciente por la bacteria Estreptococo betahemolticos del tipo A,
como amigdalitis, glomerulonefritis, escarlatina, sepsis puerperal, erisipela.
La elevacin de ASLO aparece a la semana de la infeccin por el estreptococo, los valores ms elevados se dan en la
tercera semana de la infeccin y es cuando pueden aparecer las enfermedades secundarias a esta infeccin
(glomerulonefritis, una fiebre reumtica, una endocarditis bacteriana o una escarlatina) pero no son especficos de ninguna
de ellas.
El ASLO pueden mantenerse elevado a los 6 meses en el 30% de los casos.
II. COMPETENCIAS:
1
FUNDAMENTO:
Los anticuerpos antiestreptolisinas O se detectan en suero por su reaccin con la estreptolisina O adsorbida sobre
soporte inerte de latex.
Los anticuerpos antiestreptolisina reaccionan con la estreptolisina produciendo una aglutinacin visible macroscpicamente.
MATERIAL Y PROCEDIMIENTOS:
1. Reactivo de latex: suspensin de partculas de latex recubiertas con estreptolisinas O
2. Como muestra suero del paciente a examinar
3. Placa de vidrio
4. goteros
5. Tubos
6. Cronmetro
7. palillos mezcladores
PROCEDIMIENTO:
-
Poner una gota de reactivo de latex (50 ul) en la superficie delimitada de la placa
Mezclar con palillo descartable (uno para cada muestra) hasta obtener una suspensin uniforme
En caso de positividad, hacer diluciones 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 1:20 y ensayar cada dilucin segn el diagnstico
Cualitativo
RESULTADOS:
Niveles normales de antiestreptolisinas O (ASLO)
en adultos
Menores de 50 Unidades/ml
Un examen positivo significa que el paciente recientemente tuvo una infeccin por estreptococos, incluso si no
tuvo ningn sntoma. El examen ASO puede seguir siendo positivo (lo que algunas veces se llama detectable)
durante 2 a 4 meses despus de que el paciente result infectado por primera vez.
INTERPRETACION:
-
METODO CUANTITATIVO
Suero
NaCl 0.9%
Ag
Ttulo
Procedimiento
Realizar 1ra dilucion:
100 ul
100 ul
1 gota + 1 gota
1/2
100 ul
1 gota + 1 gota
1/4
100 ul
1 gota + 1 gota
1/8
100 ul
1 gota + 1 gota
1/16
100 ul
1 gota + 1 gota
1/32
100 ul
1 gota + 1gota
1/64
Fundamento
Puede utilizarse la antiestreptolisina O (ASLO) para diagnosticar una infeccin de garganta?
Siempre que se diagnostica una infeccin estreptoccica debe solicitarse ASLO?
PRCTICA N 11:
I.
INTRODUCCIN
Los Lactobacillus sp. son bacilos Gram positivos anaerobios facultativos, denominados as debido a que la mayora de
sus miembros convierte la lactosa y otros monosacridos en cido lctico. Normalmente son benignas e incluso necesarias,
forman parte de la flora normal, estn presentes en el tracto gastrointestinal, colonizan la vagina constituyndose en el
principal componente de la flora bacteriana normal (Bacilos de Dderlein).
El bacilo de Dderlein acta en la defensa del husped, principalmente mediante dos mecanismos. Uno de ellos consiste
en la transformacin de glucgeno producido por las clulas del epitelio de la mucosa de la vagina a cido lctico por
fermentacin lctica, lo cual le confiere un pH variable en los diferentes ciclos de la vida de la mujer. De tal forma se puede
observar cmo la funcin depuradora de la vagina est disminuida en la infancia y en la vejez. Sin embargo, en la edad frtil
aumenta con la actividad hormonal cclica estrgeno-gestgeno. El pH vaginal en esta etapa es cido, lo que le confiere
una accin bactericida, excepto para el propio bacilo de Dderlein gracias a su resistencia a la acidez.
El segundo mecanismo es la transformacin de oxgeno en H 2O2, el cual dificulta la reproduccin de bacterias carentes de
la enzima catalasa y provoca un efecto negativo a Gardnerella vaginalis y Neisseria gonorrhoeae, entre otros.
Si por alguna razn existiere una disminucin o aumento excesivo de bacilos de Dderlein, se producira una alteracin en
el ecosistema vaginal. La riqueza de las clulas epiteliales de la mucosa vaginal, la produccin del glucgeno y su
liberacin por la citlisis se deben al equilibrio entre estrgeno y progestgeno. Con una baja produccin hormonal existe
poco desarrollo epitelial, poco glucgeno, ausencia de citlisis, ausencia de bacilos de Dderlein y elevado pH, lo cual
favorece la aparicin de infecciones. En el caso contrario, ante una presencia exagerada de bacilos de Dderlein, baja
excesivamente el pH, lo cual facilita la instauracin de hongos
II.
COMPETENCIAS
Obtener muestras de secrecin vaginal. Tomar no menos de 5 muestras y realizar una coloracin de Gram.
Observar la morfologa
Realizar observaciones de lminas montadas
100X
V. CONCLUSIONES.
VI. CUESTIONARIO.
1.- Cul es la particularidad ms saltante que observa usted en estos grmenes?
2.- Qu significacin tiene la presencia de Lactobacillus en tracto intestinal y en vagina?
INTRODUCCIN
El ntrax o carbunco, en su forma natural es una enfermedad de animales herbvoros domsticos o salvajes que expulsan
bacilos al desangrarse. Al exponerse al aire, las formas vegetativas esporulan y las esporas pueden mantenerse viables en
el suelo durante ao. Los seres humanos y los carnvoros son huspedes accidentales causando una zoonosis que afecta
tanto a humanos como a animales fue la primera enfermedad infecciosa en la que se demostr que una bacteria, Bacillus
anthracis, era el agente causal, El nombre de la especie, anthracis, proviene del griego anthrakis que significa "carbn", y
se refiere al carbunco cutneo, patologa ms comn producida por esta bacteria, en el cual se forma una gran lesin negra
en la piel. El carbunco; segn la va de infeccin se clasifica en tres tipos: carbunco cutneo, pulmonar y digestivo.
Las bacterias penetran a travs de heridas (carbunco cutneo), va oral (carbunco gastrointestinal) o por inhalacin
(carbunco inhalatorio), y ste ltimo es el ms grave. Una vez dentro del husped, las bacterias se difunden y se multiplican
en los ganglios linfticos hasta que alcanzan el torrente sanguneo
El Bacillus anthracis es una de las bacterias patgenas de mayor tamao, son bacilos gram positivo, aerobio, inmvil,
capsulado y presenta una endospora redondeada, central, que no deforma la clula y se forma slo en aerobiosis, no in
vivo. El proceso de esporulacin se realiza siempre fuera del animal infectado, en medios de cultivo forman cadenas largas
de extremos cncavos y algo hinchados, de aspecto comparado con una caa de pescar de bamb grueso.
La cpsula es producida por cepas virulentas de Bacillus anthracis y pueden observarse en frotis de animales inoculados o
incubados en anaerobiosis .
II.
COMPETENCIAS
Conocer los procedimientos de aislamiento e identificacin de las principales especies del gnero Bacillus sp.
Observa e identifica el comportamiento de las bacterias que pertenecen al gnero Bacillus
Mecheros
Gradillas
PROCEDIMIENTO
Examen directo:
Con las muestras obtenidas, realizar los extendidos y colorearlos con GRAM
Observar que el germen se presenta en el producto patolgico como un bacilo Gram positivo de 5 a 10 micras de
largo por 1 a 3 micras de ancho. Capsulado. No esporulado. Inmvil. Puede encontrarse elementos aislados o
dispuestos en cortas cadenas. Un elemento de inters son los extremos cortados en escuadra.
Inocular la muestra en una placa con agar para microorganismos anaerobios y en placas con agar sangre, sembrar
central, oval no deformante). Bacillus sp, sin embargo pierde la capsula con prontitud en medios de cultivo.
En medio liquido: Desarrollo sin turbidez con abundante sedimento, que en el fondo semeja un pedazo de algodn
sumergido
Inocular la muestra en medio SIM, sembrar por picadura e incubar por 18 horas a 35 C en atmsfera normal
En medio SIM sembrada por picadura, observar prolongaciones que toman a la lnea de puntura como eje; el conjunto
sume la apariencia de un pino invertido.
IV. CONCLUSIONES.
V. CUESTIONARIO.
a
INTRODUCCIN
Clostridium tetani es un bacilo gram positivo,[] formador de esporas, y anaerobio. Se encuentra en la naturaleza como
esporas en el suelo o como parsito en tracto gastrointestinal de animales, es causante de intoxicacin grave en los
humanos, provoca la enfermedad del ttanos, generalizado: ttanos ceflico, ttanos de las heridas y ttanos neonatal.
Durante el crecimiento vegetativo del organismo, no sobrevive en presencia de oxgeno, es sensible al calor y posee un
flagelo que le provee motilidad. A medida que la bacteria madura, desarrolla una endospora terminal, que le da al
microorganismo su apariencia caracterstica como palillo de tambor.
II.
COMPETENCIAS
Conocer los procedimientos de aislamiento e identificacin de las principales especies del gnero Clostridium
Observa e identifica el comportamiento de las bacterias que pertenecen al gnero Clostridium
Emplear medios o ambientes anaerbicos. La presencia de esporas, permite por otro lado calentar la muestra hasta
limites en que desaparecen las formas vegetativas y en general, los grmenes no esporulados.
Mtodo de Kitasato:
Incubar a 37C.
Tambin son empleado los medios lquidos a base de thioglicolato de sodio y los que, como el que llevan trocitos de
rganos o carne molida, que al consumir el oxgeno del medio, crean un ambiente de anaerobiosis.
Esquema de la prctica:
a Observar lminas coloreadas del germen esporulado.
b
Observar cultivos del germen en agar para anaerobios, Agar Sangre, Thioglicolato. Hacer coloraciones a partir
de dichos cultivos.
CUESTIONARIO
a Qu efecto producira la ingestin de un cultivo virulento de Cl. tetani?
Qu valor tendra un examen directo y en cultivo negativo para Cl. tetani, en un paciente con un cuadro clnico tpico de
ttanos?