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Prefacio
En el ao 2007, la OIEA inici un proyecto sobre la Aplicacin de tcnicas nucleares
en la solucin de problemas especficos del manejo integrado de las zonas costeras en el
Caribe, RLA/7/012. El objetivo del proyecto es desarrollar y mejorar las capacidades para
reducir la degradacin, por causas antrpicas y humanas, de los ecosistemas costeros de la
regin del Gran Caribe utilizando tcnicas nucleares en apoyo de la gestin integrada de la
zona costera. Este proyecto est alineado con los objetivos del OIEA en medio ambiente, en
particular facilitando el uso sostenible de los recursos naturales donde los istopos pueden
mejorar el conocimiento de sistemas naturales o no que permita, por ejemplo, la prediccin de
tendencias futuras globales a partir del pasado y la evaluacin global de recursos. En el
proyecto participan Cuba, Costa Rica, Colombia, Repblica Dominicana, Guatemala, Hait,
Honduras, Jamaica, Mxico, Nicaragua, Panam y Venezuela, con el apoyo de Espaa y
Francia, y en colaboracin con UNEP.
Una de las metodologas principales de este proyecto es la utilizacin de sedimentos
costeros fechados con 210Pb como registros de cambios ambientales, incluyendo la
contaminacin. Como parte de la estrategia del proyecto, se decidi que una de las primeras
actividades a realizar fuera la elaboracin de una gua prctica para el muestreo preparacin
de ncleos sedimentarios para la reconstruccin histrica de la contaminacin en zonas
costeras.
Esta gua ha sido elaborada por y para cientficos en la regin, con el objetivo de
introducir las tcnicas fundamentales, homogeneizar las actividades llevadas a cabo en cada
pas y planificar el trabajo a realizar en los diferentes laboratorios. Para ello, el OIEA
organiz en primer lugar un Taller en Cuman, Venezuela, con la colaboracin del Instituto
de Oceanografa y la Universidad de Oriente, del 14 al 18 de Mayo de 2007, donde 13
expertos regionales discutieron las estrategias mejor adaptadas a la realidad regin y
elaboraron una primera versin del manual. ste fue discutido y mejorado durante un Curso
Regional desarrollado en el Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos, Cuba, entre el 10
y el 21 de Septiembre de 2007, donde participaron un total de 18 estudiantes
latinoamericanos.
Desde el primer momento, esta gua fue diseada como un documento vivo, que se
adapta a las realidades del proyecto y a las dificultades encontradas. An en el momento de
cerrar esta edicin se han introducido nuevas modificaciones. Si bien algunos aspectos
concretos de la gua no son aplicables directamente a otras regiones, s que lo puede ser su
estructura y filosofa. No debera ser difcil adaptarla a las necesidades de otros proyectos
nacionales o regionales.
El OIEA est muy agradecido a los expertos que han contribuido a la elaboracin de la
Gua. Los editores de este libro son Ana Carolina Ruiz-Fernndez (Mxico) y Joan-Albert
Sanchez-Cabeza (OIEA). La lista de autores que han contribuido a su redaccin se encuentra
al final de este documento. Deseamos agradecer al Instituo de Oceanografa (Universidad de
Oriente, Venezuela) y al Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos (Cuba) por la
organizacin de los eventos que han permitido disear y desarrollar esta gua.
Esta gua fue producida a travs del proyecto de cooperacin tcnica del OIEA
Aplicacin de tcnicas nucleares en la solucin de problemas especficos del manejo
integrado de las zonas costeras en el Caribe RLA/7/012, con la Sra. Jane Gerardo Abaya, del
Departamento de Cooperacin Tcnica, como Oficial de Gestin del Programa y el Sr. JoanAlbert Sanchez-Cabeza del Departamento de Ciencias y Aplicaciones Nucleares,
Laboratorios del Medio Marino, como Oficial Tcnico.
3
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NDICE
Pgina
Introduccin.......9
1. Objetivo general.........10
2. Diseo del muestreo...........................................................................................................10
2.1. Metas
2.2. Seleccin de los sitios de muestreo
2.2.1. Informacin bsica para el muestreo
2.2.2. Caractersticas del sitio de muestreo
2.3. Recomendaciones generales durante el muestreo
3. Sedimentos superficiales........12
3.1. Muestreo
3.2. Anlisis de humedad y prdidas por ignicin
3.3. Preparacin de muestras para anlisis subsecuentes
4. Cores sedimentarios....15
4.1. Estrategia de muestreo de cores
4.2. Limpieza de material para el muestreo de cores
4.2.1. Equipo de muestreo
4.2.2. Material para metales pesados
4.2.3. Material para contaminantes orgnicos
4.3. Parmetros in situ
4.4. Manejo de cores en el campo
4.4.1. Inspeccin del core
4.4.2. Cuidados durante el muestreo
4.5. Manejo de cores en el laboratorio
4.5.1. Corte del core
4.6. Procesamiento por tipo de core
4.6.1. Core I: radionclidos, metales y parmetros geoqumicos
4.6.2. Core II: contaminantes orgnicos
4.6.3. Core III: testigo
4.7. Conservacin de las muestras
5. Registros de muestreo.........21
5.1. Planilla de recoleccin de sedimentos superficiales
5.2. Planilla de recoleccin de cores sedimentarios
5.3. Planilla de caracterizacin de cores sedimentarios
6. Codificacin de muestras........22
6.1. Sedimentos superficiales
6.2. Cdigos para cores sedimentarios en el campo
6.3. Cdigos del intervalo del core sedimentario
6.4. Cdigos de las alcuotas de sedimento para anlisis
7. Geocronologa con 210Pb.....24
7.1. Criterio de evaluacin de cores para fechado con 210Pb
7.2. Seleccin del core para anlisis de 210Pb
7.3. Estrategia de anlisis con 210Pb
7.4. Cores alterados
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INTRODUCCIN
Los sedimentos son el resultado de la acumulacin de diversos tipos de constituyentes, tanto
derivados del transporte continental como de origen biognico generados in situ. Debido a su
contenido de materia orgnica y de material arcilloso, pueden ser excelentes acarreadores y
acumuladores de elementos tanto naturales como de origen antropognico, tales como los
metales pesados o compuestos orgnicos persistentes (por ejemplo, hidrocarburos
poliaromticos y plaguicidas).
En reas en las que los sedimentos acumulados no han sufrido bioperturbacin, mezclado
fsico o episodios de erosin, la columna sedimentaria se constituye en un registro integral de
las tendencias temporales de los cambios ocurridos en los cuerpos de agua a lo largo del
tiempo, que contiene valiosa informacin histrica sobre las caractersticas del ambiente en el
momento de su formacin y de las modificaciones temporales resultado de las actividades
antropognicas [1]. Por lo anterior, la columna sedimentaria es un compartimiento natural
muy til para la reconstruccin de eventos ambientales en el pasado y tales registros pueden
proveer datos especficos acerca de los flujos antropognicos de los contaminantes
procedentes del desarrollo urbano e industrial [2,3].
El 210Pb (T= 22.3 y) es un radionclido natural que se utiliza para fechar sedimentos
depositados durante los ltimos 100-150 aos [4]. Este mtodo es comnmente usado en
asociacin con 137Cs, un radionclido artificial cuya distribucin global en los sedimentos
tiene su origen en las pruebas atmicas que se realizaron alrededor del mundo, mayormente a
finales de la dcada de los aos 50 e inicio de los 60.
La presente gua pone especial nfasis en los mtodos de muestreo que permiten sentar las
bases para un fechado pertinente, tomando en cuenta el anlisis de parmetros geoqumicos y
sedimentolgicos complementarios (tales como humedad, porosidad, tamao de grano y
contenido de carbono orgnico e inorgnico) que pueden ayudar a mejorar la comprensin
tanto de las variaciones temporales en las tasas de acumulacin sedimentaria como de las
concentraciones de contaminantes en los sitios de estudio.
Se incluyen los cuidados necesarios para asegurar la calidad de los datos analticos de las
concentraciones de contaminantes y presenta los mtodos ms comunes de normalizacin de
las concentraciones de tales contaminantes, con el objeto de facilitar la compresin de su
variabilidad natural y, por tanto, la evaluacin del grado de contaminacin.
1. OBJETIVO GENERAL
Reconstruir la historia de la contaminacin por metales pesados (como Ag, As, Cd, Co, Cr,
Cu, Hg, Ni, Pb, Se, Sn, V, Zn) y compuestos orgnicos (hidrocarburos poliaromticos y
plaguicidas), a partir del estudio de cores sedimentarios recolectados en la zona costera del
Gran Caribe, fechados con el mtodo de 210Pb.
Cuantificar la variacin temporal de los flujos (g cm-2 y-1) de los contaminantes de inters
en cada una de las reas de muestreo.
Una vez se ha decidido cul es el rea de inters, para la seleccin de los sitios de recoleccin
de los cores sedimentarios se requiere contar con tanta informacin bsica como sea posible,
incluyendo:
10
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)
i)
fotos areas/satelitales
mapa batimtrico
registro de dragados
hidrodinmica de la zona
inventario de focos de contaminacin
cuencas hidrogrficas de influencia
mapa de distribucin de tamao de grano
mapas de contaminacin superficial
datos de calidad del agua e informacin sobre las poblaciones bentnicas.
11
SEDIMENTOS SUPERFICIALES
Antes de ser utilizada, la draga deber lavarse para retirar cualquier rastro de sedimento de
muestreos previos; as como deber enjuagarse cada vez que se use, con agua del sitio de
muestreo.
Los contenedores y utensilios de plstico que sern utilizados para manipular muestras
destinadas al anlisis de metales deben ser lavados secuencialmente en HCl (2N) y
HNO3(2N), enjuagados con agua destilada y secados al aire, protegidos de fuentes de
contaminacin.
Fig. 1:
Con el fin de evitar la confusin y prdida de material en los diferentes pasos del proceso
del estudio, las muestras debern ser cuidadosamente identificadas y etiquetadas de
conformidad con las instrucciones provistas en la seccin 6. Se deber asegurar que las
etiquetas estn marcadas firmemente en el exterior de la bolsa que contiene la muestra; y
de preferencia, se deber colocar una segunda bolsa plstica que evite que la etiqueta sea
borrada.
3.2. Anlisis de humedad y prdidas por ignicin
Los sedimentos debern ser analizados por humedad y prdidas por ignicin (PPI).
Para el anlisis de humedad (%) las muestras se secarn a una temperatura de 45C en estufa
y se registrar el peso seco. Se deber pesar en balanza granataria con una precisin mnima
de 0.001 g. Se recomienda verificar el peso de la muestra seca hasta encontrar un valor
constante, es decir, hasta que las diferencias entre pesadas sea <1%). El porcentaje de
humedad de la muestra se calcula utilizando la frmula siguiente:
Humedad (%) =
(Peso fresco
Peso sec o )
x 100
Peso fresco
Las muestras se disgregarn a mano para separar las alcuotas necesarias para los anlisis
subsecuentes (Tabla 1).
Para el anlisis de prdidas por ignicin (PPI, %) se pesarn 0.5 g de sedimento seco un crisol
de porcelana, en una balanza granataria, con una precisin mnima de 0.001 g. La muestra se
calcinar en una mufla a 550C durante 4 horas (tomar el tiempo una vez que la temperatura
deseada ha sido alcanzada y estabilizada). La muestra se dejar enfriar hasta 80-100C y se
transferir a un desecador, donde se dejar enfriar a temperatura ambiente antes de volver a
pesarse. Las PPI se calculan como sigue:
PPI (%) =
(Peso inicial
Peso calcinado )
x 100
Peso inicial
Los laboratorios debern garantizar que el anlisis de las muestras sea reproducible y para
ello es importante tener en consideracin los diversos factores que afectan el anlisis de PPI;
por ejemplo, la posicin de la muestra en el interior de la mufla. Se recomienda que las
muestras se introduzcan hacia el fondo de la mufla, ya que las muestras colocadas cerca de la
puerta del equipo estarn sujetas a una menor temperatura que aquellas al fondo; asimismo,
debe asegurarse que las muestras estn bien distribuidas en los crisoles y evitar que estos sean
demasiado pequeos.
13
Una vez realizados los anlisis de humedad y de PPI, el resto de la muestra se separar en
bolsas de plstico, de tamao adecuado a la cantidad de muestra requerida para los anlisis
subsecuentes (distribucin de tamao de grano y metales) de conformidad con la Tabla 2,
donde se muestran las cantidades mnimas y ptimas necesarias para cada anlisis. Se hace
notar que la cantidad mnima ha sido pensada para aquellas muestras de sedimento de las que,
debido a un alto contenido de humedad, no se cuente con las cantidades ptimas de sedimento
para cada anlisis.
14
4.
CORES SEDIMENTARIOS
Una vez recopilada la informacin documental generada por estudios previos en la zona
(secciones 2.2.1. y 2.2.2.) se podrn elegir los sitios mas convenientes para la recoleccin de
los cores sedimentarios. A continuacin se listan las indicaciones seguidas para el muestreo
en el proyecto RLA/7/012:
Nmero y localizacin de estaciones: se escogieron 3 estaciones de muestreo por rea de
inters.
Para la recoleccin de las muestras se utiliz un nucleador de gravedad tipo UWITEC, que
permite recolectar 3 cores de manera simultanea, aunque en caso necesario, tambin
permite la recoleccin de cores de forma individual.
Toda la informacin relativa al muestreo de cores sedimentarios, incluyendo localizacin y
caractersticas del sitio de muestreo deber ser cuidadosamente registradas en la planilla de
recoleccin de cores de sedimentos (seccin 5.2.).
Core
II
III
Anlisis a realizar
Contaminantes orgnicos
Testigo
Antes de ser utilizados, los nucleadores sern lavados para retirar cualquier rastro de
sedimento de muestreos previos y sern enjuagados cada vez con agua del sitio de muestreo.
4.2.2. Material para metales pesados
Antes de ser utilizados, los contenedores y utensilios de plstico que sern utilizados para
manipular muestras destinadas al anlisis de metales deben ser lavados secuencialmente en
HCl (2N) y HNO3(2N), enjuagados con agua destilada (o milliQ) y secados al aire, protegidos
de fuentes de contaminacin.
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Los contenedores y utensilios de vidrio que sern utilizados para manipular muestras
destinadas al anlisis de contaminantes orgnicos deben ser lavados con agua y jabn antes de
usarse.
4.3. Parmetros in situ
(b)
En caso de que algn core presente una superficie inclinada o alguna indicacin de mezcla, se
recomienda desecharlo y reintentar la recoleccin.
4.4.2. Cuidados durante el muestreo
Se tomar una fotografa tcnica en la que el core est acompaado de una escala mtrica
de referencia. Si no es posible hacerlo en el campo, se tomar en el laboratorio tan pronto
sea posible.
Se recomienda dejar reposar los cores en el laboratorio (en el sitio en que ser procesado) al
menos 24 h, para asegurar la sedimentacin de partculas en suspensin en la superficie
acuosa del core.
Se eliminar la mayor cantidad posible del agua sobrenadante, usando una manguera flexible
de plstico transparente (dimetro menor a 1 cm) teniendo cuidado de no resuspender la capa
superficial. El agua sobrenadante remanente ser recolectada con ayuda de una pipeta
automtica y se adicionar, despus de una evaporacin parcial (volumen mximo de 10 ml),
a la primera seccin cortada del core.
Si no se ha realizado en el campo, se tomar una fotografa tcnica en la que el core est
acompaado de una escala mtrica de referencia.
4.5.1. Corte del core
Los cores se cortarn utilizando el instrumento de corte de acero inoxidable provisto junto
con los nucleadores de gravedad (por ejemplo UWITEC o similar). Se deber tener cuidado
de descontaminar los instrumentos de corte entre muestras por medio de un enjuague con
agua destilada. Las muestras debern colocarse en bolsas de plstico que debern ser
codificadas de conformidad con la seccin 6.3. de este manual.
Con el objetivo de obtener una buena resolucin en el anlisis geocronolgicos, los cores se
cortarn en secciones de 1 cm de espesor. Considerando que la tasa de sedimentacin en una
zona costera es de 0.25 a 1.0 cm ao-1 y asumiendo una tasa promedio de 0.5 cm ao-1, en 50
cm esperaramos contar con sedimentos acumulados durante 100 aos.
Tomando en cuenta que el tubo del nucleador UWITEC tiene un dimetro de 9 cm, una capa
de 1 cm de espesor tendra aproximadamente 95 g de sedimento hmedo (20.25 cm2 x 3.1416
x 1 cm x 1.5 g cm-3).
Es importante tener en consideracin que la extrusin del core sedimentario provoca friccin
del sedimento al interior del tubo muestreador y que, debido a la cohesividad de algunos
sedimentos (sobre todo aquellos altamente lodosos), van quedando residuos de sedimento
adheridos a las paredes interiores del tubo muestreador, con lo cual es posible contaminar las
muestras mas profundas con restos de las muestras mas superficiales. Por lo anterior, para
eliminar el riesgo de contaminacin generado por el contacto con el tubo muestreador, se
sugiere que siempre que sea posible, se utilice un anillo de material inocuo (metlico, de
plstico o un vaso de vidrio, dependiendo del anlisis que se vaya a efectuar posteriormente)
con un dimetro un poco mas pequeo que el tubo muestreador, para cortar la porcin mas
externa (una circunferencia de al menos 0.5 cm de espesor) de cada seccin cortada.
Se recomienda el uso de guantes de ltex (de preferencia sin talco) para manipular las
muestras, as como utilizar nicamente material de plstico para el manejo de las submuestras
de metales pesados. Asimismo, slo deber utilizarse instrumentos de vidrio, acero inoxidable
y papel aluminio, para el manejo de las muestras que sern destinadas al anlisis de
contaminantes orgnicos.
Una vez iniciado el corte de cada submuestra, se debern registrar inmediatamente las
caractersticas del sedimento, utilizando la planilla de caracterizacin de los cores (seccin
5.3.). De ser posible, se recomienda realizar fotografas de cada corte.
17
Se recomienda separar los macrorestos presentes en los intervalos del core, tales como trozos
de madera, pedazos de rocas y conchas, utilizando una pinza: (a) de plstico, en el caso del
core I; o (b) de metal, para el sedimento que ser analizado por compuestos orgnicos del
core II. Los macrorestos se almacenarn en bolsas de nylon y se registrar la profundidad a la
que fueron encontrados en la Planilla de caracterizacin de los cores (Anexo 1). En el caso de
conchas de organismos, se recomienda identificar la especie correspondiente.
4.6. Procesamiento por tipo de core
Utilizando una esptula plstica colocar las muestras frescas en bolsas de plstico de peso
conocido (tarados). Pesar la muestra hmeda en una balanza con una precisin mnima de
0.001 g.
(Peso fresco
Peso sec o )
x 100
Peso fresco
Una vez secas, las muestras deben ser disgregadas en la propia bolsa ayudndose de la mano
de un mortero, ya que el secado en estufa tiende a formar rocas que no se pueden deshacer
fcilmente. Este tratamiento debe servir nicamente para permitir separar las alcuotas para
(a) anlisis de tamao de grano; y (b) el resto de los anlisis.
Para el anlisis de prdidas por ignicin (PPI) se utilizar una alcuota de sedimento seco de
peso conocido (~0.5 g) de cada seccin del core, que ser pesada en una balanza con
precisin mnima de 0.001g. La muestra ser calcinada en un crisol de porcelana, a 550C
durante 4 horas. La muestra se dejar enfriar hasta 80-100C y se transferir a un desecador,
donde se dejar enfriar a temperatura ambiente antes de volver a pesarse. El porcentaje de PPI
se calcula como sigue:
PPI (%) =
(Peso inicial
Peso calcinado)
x 100
Peso inicial
18
Anlisis
Mtodo
Cdigo
Mnimo (g)
Optimo (g)
%
%
%
%
Bq kg-1
Bq kg-1
%
HAPs
Plaguicidas
Mercurio
mg kg-1
mg kg-1
mg kg-1
Temperatura agua
Salinidad del agua
Oxgeno disuelto
Estufa (45 C)
Mufla (550 C)
Analizador elemental
Fluorescencia rayos-X
Gama espectrometra
Alfa espectrometra
Dispersin lser
HUM
PPI
C-N
XRF
GAM
ALF
GRA
0.5
1.0
4.0
20
0.5
1.0
GC-FID, GC-MS
GC-ECD
AMA
HAP
PLA
AMA
5
5
0.5
10
10
2.0
Anlisis opcionales
C
Sonda
Sonda
-1
mg L Sonda
T
S
OD
Total
0.5
1.5
5.0
25
1.0
2.0
Las alcuotas para los anlisis subsecuentes sern colocadas en bolsas de plstico, de tamao
adecuado a la cantidad de muestra requerida para cada anlisis, de conformidad con la Tabla
2, donde se muestran las cantidades mnimas y ptimas necesarias.
Se hace notar que la cantidad mnima ha sido pensada para los intervalos del core
sedimentario en los cuales, debido a un alto contenido de humedad, no se cuente con las
cantidades ptimas de sedimento para cada anlisis. No obstante, se hace hincapi en que es
importante separar la cantidad ptima siempre que sea posible.
4.6.2. Core II: contaminantes orgnicos
Debido a que el contacto de los sedimentos con plstico podra provocar una contaminacin
por ftalatos (compuestos que se utilizan para dar flexibilidad a muchos plsticos como el
PVC), el sedimento que se usar para analizar los contaminantes orgnicos, ser manipulado
nicamente con instrumentos de vidrio o metlicos. Se recomienda evitar que los sedimentos
tengan contacto con las paredes del tubo muestreador, por consiguiente, la muestra
correspondiente ser obtenida del centro del core, separando el exterior con la ayuda de un
aro de tefln o vidrio (podra utilizarse un vaso de dimetro menor al nucleador).
La muestra fresca ser colocada en recipientes (o recortes) de papel de aluminio prepesados
(tarados). Se registrar el peso hmedo; se secarn en estufa (a una temperatura mxima de
19
45C) hasta peso constante y se calcular el contenido de humedad (ver seccin 4.6.1.). Una
vez secas, las muestras se disgregarn en mortero de porcelana para su distribucin.
El core III (testigo) se conservar cortado y seco para ser utilizado en caso de necesidad de
anlisis adicionales no considerados anteriormente.
Este core ser procesado simultneamente para ser analizado tanto por metales como por
compuestos orgnicos; por tanto, las muestras de cada seccin sern divididas en 2 alcuotas:
(a) una para el anlisis de componentes orgnicos obtenida de la fraccin central del core,
utilizando un vaso de vidrio; y (b) la otra, colectando el sedimento remanente para el anlisis
de metales, utilizando los utensilios de plstico. Ambas debern ser apropiadamente
codificadas (ver seccin 6.3.).
Es importante que una vez que las muestras secas destinadas al anlisis de metales pesados se
conserven en un desecador para evitar que vuelvan a tomar humedad del ambiente durante el
tiempo de espera para ser analizadas. Los laboratorios debern asegurarse que las muestras
estn secas y, en caso contrario, se deber volver a secar el material antes de proceder a
cualquier anlisis.
Las muestras de sedimentos para el anlisis de compuestos orgnicos debern ser conservadas
en refrigeracin (a 4C) hasta su anlisis. En los laboratorios, las muestras debern ser
igualmente conservadas en refrigeracin hasta su extraccin; los extractos de las muestras
sern mantenidos a 4C hasta su anlisis instrumental; luego de lo cual deben ser tambin
almacenados en oscuridad a -20C. Se recomienda guardar congelados los extractos restantes
del anlisis de las muestras, as como los sedimentos sobrantes, hasta el final del estudio.
20
5.
REGISTROS DE MUESTREO
Con la finalidad de poseer informacin bsica del lugar y condiciones del sitio de muestreo
para el momento de la recoleccin, se debe completar manualmente la Planilla de recoleccin
correspondiente.
5.1. Planilla de recoleccin de sedimentos superficiales
Se debern registrar las caractersticas de los sedimentos tales como olor, textura aparente de
la muestra, color (de conformidad con la tabla Munsell) y presencia de macrorestos utilizando
la planilla correspondiente que se encuentra en el Anexo 1. En esta planilla tambin, debern
incluirse los pesos hmedo, seco y calcinado, que permitirn calcular los contenidos de
humedad y el porcentaje de prdidas por ignicin de cada muestra.
21
6.
CODIFICACIN DE MUESTRAS
A fin de que haya una identificacin unvoca de las muestras superficiales es necesario
asignar un cdigo a cada una de las muestras recolectadas. Por ejemplo, en el caso del
proyecto RLA/7/012 las muestras de sedimentos superficiales se etiquetaron como sigue:
Cdigo del Proyecto, Cdigo del Pas, Fecha (dd/mm/aa), Estacin (nmero arbigo), de
conformidad al ejemplo que se muestra:
cdigo del pas
estacin
RLA7012VEN121107-1
cdigo del
proyecto
fecha
(ddmmaa)
En el mismo ejemplo, los cores fueron etiquetados de la siguiente manera: Cdigo del
Proyecto, Cdigo del Pas (presentados en la seccin 6.1.), Fecha (dd/mm/aa), Estacin
(letra), #Core (en nmero romano) de conformidad al ejemplo que se muestra a continuacin:
cdigo del pas
estacin
RLA7012VEN121107AI
cdigo del
proyecto
fecha
(ddmmaa)
core
cdigo de pas
RLA7012VEN121107AI0-1
cdigo de
proyecto
fecha
(ddmmaa)
core
Este cdigo ser registrado en la Planilla de caracterizacin de los cores (ver Anexo 1).
22
Una vez pesadas las muestras secas sern divididas de conformidad a los anlisis que sern
realizados. Las alcuotas de sedimento de cada seccin del core deben codificarse de la
siguiente manera: al cdigo del intervalo del core se le aadir un cdigo que identificar el
tipo de anlisis al que ser destinada, de conformidad con la Tabla 2. A continuacin se
presenta un ejemplo, considerando una muestra superficial (intervalo 0-1 cm) destinada al
anlisis de espectrometra gama (GAM) del proyecto RLA7/012:
intervalo
estacin de corte
cdigo de pas
RLA7012VEN121107AI0-1GAM
AM
cdigo de
proyecto
fecha
(ddmmaa)
core
anlisis
Con la finalidad de evitar la prdida de alguna etiqueta por desprendimiento o dao causado
por la humedad o contacto con el sedimento, se recomienda que las etiquetas se coloquen
entre dos bolsas en cuyo interior se conservar la submuestra.
23
7.
Los datos de PPI son una buena aproximacin de las concentraciones de la materia orgnica
de los sedimentos [5] y el perfil de PPI respecto a la profundidad permitir estimar de manera
gruesa, si las concentraciones de la materia orgnica presentan la tendencia tpica de
decaimiento exponencial, resultado de la descomposicin por accin bacteriana [6]. Los
perfiles tpicos de degradacin de la materia orgnica normalmente slo pueden ser
observados en una columna sedimentaria mnimamente alterada, as que un perfil de
concentraciones de PPI que muestre esta tendencia, indicara la ausencia de mezcla en el core
sedimentario, y por lo tanto, buenas posibilidades de proveer un fechado confiable con el
mtodo de 210Pb.
Se recomienda que la seleccin del core que ser utilizado para el fechado con 210Pb est
basada en los datos de prdidas por ignicin (PPI) del core I de cada estacin de muestreo.
7.2. Seleccin del core para anlisis de 210Pb
Bajo la suposicin descrita en la seccin anterior, el anlisis de 210Pb con fines de fechado
ser realizado en el core I de la estacin de muestreo cuyo perfil de PPI presente la mejor
aproximacin a un decaimiento exponencial con la profundidad.
7.3. Estrategia de anlisis de 210Pb
Se recomienda realizar inicialmente una malla de prueba que incluya anlisis a cada 5 cm de
profundidad del core sedimentario (es decir, en un core de 50 cm de profundidad, se
analizarn 10 muestras). Estos datos permitirn realizar una evaluacin preliminar de las
tendencias del perfil de 210Pb respecto a la profundidad, con lo cual se determinar la
factibilidad de obtener un fechado confiable a partir de ese core. El perfil de 210Pb obtenido
debera mostrar tendencias comparables a la desintegracin exponencial, en cuyo caso se
analizar la totalidad de los intervalos en los cuales exista 210Pb en exceso.
Slo se debern realizar los anlisis geoqumicos y de contaminantes, cuando se haya
confirmado la pertinencia del perfil de 210Pb para obtener un fechado confiable.
24
Sitio de muestreo
Core I
Core II
Core III
Corte, secado
Corte, secado
Corte, secado
NO
Archivo de Sedimentos
PPI
SI
NO
Anlisis
exploratorio
de 210Pb
SI
Plaguicidas
HAPs
Hg
Gama
C, N
Granulometra
Metales
25
8. ENSAYOS A DESARROLLAR
Se utiliza para calcular la porosidad y la densidad in situ del sedimento, con lo cual se estima
la masa acumulada en cada seccin del core (til para compensar los efectos de la
compactacin en los perfiles de 210Pb y los contaminantes). Las muestras hmedas y secas
debern ser pesadas en balanza con precisin mnima de 0.001 g y se recomienda verificar
que la diferencia entre pesadas sea menor a 1% para poder considerarse como peso constante.
8.1.2. Prdidas por ignicin (PPI)
Provee una estimacin del contenido de materia orgnica en los sedimentos. Aunque se sabe
que normalmente sobreestima los valores de materia orgnica debido a la prdida de agua
estructural en minerales arcillosos, es una tcnica simple y barata que permite conocer
rpidamente los perfiles de concentracin de materia orgnica.
8.1.3. Distribucin de tamao de grano
Permite conocer el contenido porcentual de las tres fracciones principales de tamao de grano
(arenas, limos y arcillas) y es til tanto para explicar desde los valores atpicos de 210Pb en
caso de perfiles anmalos (diferentes al decaimiento exponencial) como para normalizar los
valores de metales pesados. En el Anexo 3 se presentan las recomendaciones para la
preparacin de las muestras para el anlisis del tamao de grano.
8.1.4. Composicin elemental
Este anlisis nos permite conocer las concentraciones de elementos indicadores de procesos
diagenticos en la columna sedimentaria (Fe, Mn), del aporte de material terrgeno a los
sedimentos (Al, Ti) y de metales contaminantes tales como As, Cd, Hg, Cu, V, Pb y Zn.
8.1.5. C, N, TIC y TOC
26
8.1.6. 210Pb
Es uno de los trazadores radiactivos utilizados para obtener la geocronologa de los cores
sedimentarios. En el proyecto RLA7/012 el 210Pb se estim por espectrometra alfa, a travs
de la determinacin de 210Po (asumiendo equilibrio radiactivo entre ellos). En el Anexo 3 se
presenta un mtodo [7].
8.1.7. 226Ra y 137Cs por espectrometra gama
Los anlisis de HAPs se pueden realizar por el mtodo de cromatografa de gases (GC-FID o
GC-MS) dependiendo de las capacidades de cada laboratorio.
8.1.10. Plaguicidas (hidrocarburos organoclorados)
Los anlisis de plaguicidas pueden ser realizados por cromatografa de gases (GC-ECD).
8.2. Anlisis opcionales
Estas mediciones sirven para caracterizar el ambiente en la zona de inters. Sus valores se
determinan utilizando una sonda multiparamtrica.
8.2.2. Oxgeno disuelto
27
28
[1]
[2]
[3]
[4]
[5]
[6]
[7]
[8]
REFERENCIAS
DEAN, W. E., Jr. 1974. Determination of carbonate and organic matter in calcareous
sediments and sedimentary rocks by loss on ignition: comparison with other
methods. Journal of Sedimentary Petrology 44:242-248.
BERNER R. A., 1980. Early diagenesis: A theoretical approach. Princeton Series in
Geochemistry, Princeton University Press, Princeton, N.J., 241 pp.
FLYNN, W.W., 1968. The determination of low levels of polonium-210 in
environmental materials. Analytical Chimica Acta 43: 221-227.
29
ANEXO 1
30
Latituda
Longituda
Prof (m)a
Hora
Temp
Salinidad
pH
OD
Marea
Viento
Informacin imprescindible. Nota: favor de adjuntar un mapa con coordenadas de las estaciones de muestreo.
31
Salinidad
pH
Superficie
Fondo
Cdigo del Core
Longitud (cm)
Oxgeno disuelto
(mg.L-1)
Responsable de recoleccin
Observaciones:_________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________
____________________________________
32
Color
Olor
Textura
Macrorestos
PesoHm (g)
PesoSeco (g)
PPIi (g)
PPIf (g)
Observaciones:_________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________
33
ANEXO 2
34
Cada laboratorio participante har una breve descripcin de los mtodos de anlisis utilizados,
incluyendo la siguiente informacin:
a) Preparacin de la muestra: Describir brevemente el tratamiento que se le realiza a la muestra
antes del ensayo, por ejemplo: secado, molienda, tamizado, etc.
b) Descripcin del mtodo de ensayo: Descripcin del mtodo que incluya al menos los equipos
principales utilizados, los mtodos de calibracin y la referencia del mtodo estndar
utilizado.
d) Incertidumbre: Breve descripcin del mtodo utilizado para el clculo de las incertidumbres y
las fuentes consideradas.
3. Presentacin de resultados
Elemento/Radionclido/Mineral/Compuesto/Parmetro
Actividad/Concentracin/UNIDAD
Pueden reportarse varios elementos en un mismo informe que provengan del mismo ensayo; ejemplo:
radionclidos por gama-espectrometra, elementos por FR-X, etc.
Las unidades en las que se informan los resultados deben ser claramente establecidas en el encabezado
de cada columna (de conformidad con el anexo A).
4. Cdigos de identificacin de las muestras
Cada informe de ensayo deber conservar el cdigo de procedencia del corer incluyendo el anlisis
(ver instrucciones de codificacin del manual). Ejemplo: RLA7012CUB060208BI-XRF.
35
INFORME DE RESULTADOS
DE CARBONO TOTAL, CARBONO INORGNICO Y NITRGENO TOTAL
Madrid, Espaa, 1 de octubre de 2008
Laboratorio asignado: Divisin de Qumica del CIEMAT
Tcnica utilizada: anlisis por combustin y analizador especfico de carbono orgnico total
Responsables de los anlisis:
Da. Perla Griselle Mellado Vazquez, becaria del OIEA
Da. Cristina Garca Diego, tcnico del Laboratorio de Anlisis Inico y Elemental
Dr. Alberto Jos Quejido Cabezas, Jefe de la Divisin de Qumica
DESCRIPCIN DEL MTODO
Preparacin de las muestras.
Las muestras recibidas en la Divisin de Qumica del CIEMAT fueron tradas directamente
por parte del becario del Proyecto, Da. Perla Griselle Mellado Vzquez, siendo las
cantidades enviadas suficientes para la medida de los parmetros a determinar. Las muestras
no tenan un grado de molienda suficiente para la preparacin directa para anlisis elemental,
por lo que se tuvo de procesar de nuevo el material enviado. La muestra se termin de
homogeneizar y se pulveriz a un tamao de grano de unas 63 m, con un mortero de gata.
Descripcin del mtodo de anlisis
El carbono total (Ctot) y nitrgeno total (Ntot) se determinaron con un analizador elemental
LECO TRUSPEC. Se pesan por duplicado, del orden de 100 a 150 mg de la muestra
previamente secada, molida y homogeneizada, dentro de un contenedor de Sn, en una balanza
analtica. El contenedor se cierra hermticamente y se coloca en el muestreador automtico,
desde donde se introduce en el horno de combustin. En este horno se mantiene durante 2 a 3
minutos en varias etapas, en presencia de distintos contenidos de O2 en la corriente del gas
portado (perfil de combustin) para asegurar su completa oxidacin. Los gases generados en
todo este tiempo son recogidos en un contenedor de 4.5 litros y una vez mezclados, una
alcuota pequea de los mismos fluye a los detectores dnde son determinados el CO2
mediante un detector de infrarrojo y el N2, previo paso de los gases por el tubo de reduccin
de Cu, por el de conductividad trmica.
Para establecer las curvas de calibrado, se utilizan dos patrones certificados, con diferentes
contenidos de C y N, para cubrir un amplio intervalo de calibracin: un patrn de Suelo (Soil
LECO / 502-062 / Lote 1012) con contenidos de N 0.130 0.018 (k=2) % y de C 1.30 0.04
(k=2) % y el Patrn Suelo (Soil LECO / 502-309 / Lote 1002), N 0.80 0.02 (k=2) % y C
10.14 0.10 (k=2) %. Se pesan dentro del contenedor de Sn diferentes cantidades, del orden
de 50, 100 y 150 mg de estos materiales de referencia certificados y se introducen en el
36
analizador de modo similar a las muestras. Al representar la seal obtenida en los detectores
frente a los mg absolutos de C y N presentes en los patrones, se obtienen las curvas de
calibrado para el N y el C.
Previamente se introducen varias muestras como blancos, habitualmente una cpsula de Sn
vaca y el rea media obtenida se resta automticamente para estos elementos, tanto de la
seal obtenida para los patrones como de las muestras.
Una vez finalizado el anlisis, se establece el valor medio del blanco y se obtienen las curvas
de calibrado a partir de los resultados de los patrones. La curva de calibrado del N se ajusta a
una calibracin lineal de primer grado y la del C se realiza un ajuste cuadrtico. El contenido
de C y N de las muestras se recalcula a partir de las nuevas curvas de calibrado obtenidas.
1.2.2 Anlisis de carbono inorgnico total
Se analizan al menos los dos patrones por duplicado y un par de blancos cada 10 muestras. A
lo largo del periodo de anlisis se efectuaron un total de 25 medidas de cada uno de los
patrones
Se han medido los materiales de referencia certificados Soil LECO / 502-062 / Lote 1012 y
Soil LECO / 502-309 / Lote 1002. Los resultados obtenidos son los siguientes:
Soil LECO / 502-062 / Lote 1012
Elemento Obtenido Incertidumbre
1.315
0.078
Ctot (%)
0.1317
0.0044
Ntot (%)
Certificado
1.30
0.130
Incertidumbre
0.02
0.009
Dif (%)
1.2
1.3
Certificado
10.14
0.80
Incertidumbre
0.05
0.01
Dif (%)
-0.64
-1.8
37
tomadas de las muestras son diferentes, por lo que los resultados medidos se han
transformado en porcentaje real sobre la muestra de la seccin.
Adicionalmente, se han comparado las incertidumbres obtenidas para las muestras, con las
incertidumbres obtenidas en las medidas de los materiales de referencia, mediante la
aplicacin de pruebas F, observndose generalmente una incertidumbre comparable entre
ambos tipos de materiales, si bien es superior en las muestras que poseen un contenido muy
bajo de N total.
Referencia
RLA7012MEX010508AIII0-1
RLA7012MEX010508AIII1-2
RLA7012MEX010508AIII2-3
RLA7012MEX010508AIII3-4
RLA7012MEX010508AIII4-5
RLA7012MEX010508AIII5-6
RLA7012MEX010508AIII6-7
RLA7012MEX010508AIII7-8
RLA7012MEX010508AIII8-9
RLA7012MEX010508AIII9-10
RLA7012MEX010508AIII10-11
RLA7012MEX010508AIII11-12
RLA7012MEX010508AIII12-13
RLA7012MEX010508AIII13-14
RLA7012MEX010508AIII14-15
RLA7012MEX010508AIII15-16
RLA7012MEX010508AIII16-17
RLA7012MEX010508AIII17-18
RLA7012MEX010508AIII18-19
RLA7012MEX010508AIII19-20
RLA7012MEX010508AIII20-21
RLA7012MEX010508AIII21-22
RLA7012MEX010508AIII22-23
RLA7012MEX010508AIII23-24
RLA7012MEX010508AIII24-25
RLA7012MEX010508AIII25-26
UC
0.02
0.06
0.00
0.01
0.01
0.01
0.02
0.03
0.04
0.04
0.08
0.06
0.08
0.00
0.02
0.06
0.04
0.03
0.02
0.06
0.01
0.01
0.06
0.05
0.04
0.01
Ctot (%)
RSD (%)
1.19
3.54
0.00
0.90
0.47
0.42
1.25
1.82
2.40
3.14
5.62
4.71
7.04
0.00
2.05
5.34
4.12
2.95
2.27
6.40
0.84
0.83
6.22
5.47
3.86
1.46
Ntot (%)
UN
RSD (%)
0.021
14.09
0.007
5.24
0.007
5.66
0.021
13.69
0.014
8.84
0.000
0.00
0.007
4.56
0.007
4.88
0.007
5.66
0.007
7.44
0.007
7.44
0.007
7.44
0.015
21.37
0.023
31.87
0.017
24.96
0.010
16.46
0.004
5.48
-------------------
38
3.33
0.10
RESULTADOS
Carbono total (Ctot) y nitrgeno total (Ntot)
Ntot (%)
Ctot (%)
Conc
UC
Conc
UN
RLA7012MEX010508AIII0-1
1.785
0.021
0.146
0.021
RLA7012MEX010508AIII1-2
1.600
0.057
0.135
0.007
RLA7012MEX010508AIII2-3
1.520
0.000
0.125
0.007
RLA7012MEX010508AIII3-4
1.570
0.014
0.155
0.021
RLA7012MEX010508AIII4-5
1.505
0.007
0.160
0.014
RLA7012MEX010508AIII5-6
1.695
0.007
0.140
0.000
RLA7012MEX010508AIII6-7
1.695
0.021
0.155
0.007
RLA7012MEX010508AIII7-8
1.550
0.028
0.145
0.007
RLA7012MEX010508AIII8-9
1.475
0.035
0.125
0.007
RLA7012MEX010508AIII9-10
1.125
0.035
0.095
0.007
RLA7012MEX010508AIII10-11
1.385
0.078
0.095
0.007
RLA7012MEX010508AIII11-12
1.200
0.057
0.095
0.007
RLA7012MEX010508AIII12-13
1.105
0.078
0.070
0.015
RLA7012MEX010508AIII13-14
1.110
0.000
0.071
0.023
RLA7012MEX010508AIII14-15
1.035
0.021
0.068
0.017
RLA7012MEX010508AIII15-16
1.060
0.057
0.059
0.010
RLA7012MEX010508AIII16-17
1.030
0.042
0.065
0.004
RLA7012MEX010508AIII17-18
0.960
0.028
<0.05
RLA7012MEX010508AIII18-19
0.935
0.021
<0.05
RLA7012MEX010508AIII19-20
0.995
0.064
<0.05
RLA7012MEX010508AIII20-21
0.845
0.007
<0.05
RLA7012MEX010508AIII21-22
0.855
0.007
<0.05
RLA7012MEX010508AIII22-23
0.910
0.057
<0.05
RLA7012MEX010508AIII23-24
0.905
0.049
<0.05
RLA7012MEX010508AIII24-25
0.915
0.035
<0.05
RLA7012MEX010508AIII25-26
0.970
0.014
<0.05
UC, UN= Incertidumbre de las mediciones de Ctot y Ntot, respectivamente.
Referencia
RLA7012MEX010508AIII0-1
RLA7012MEX010508AIII5-6
RLA7012MEX010508AIII10-11
RLA7012MEX010508AIII15-16
RLA7012MEX010508AIII20-21
RLA7012MEX010508AIII25-26
Carbono inorgnico
Conc (%)
UTIC
0.398
0.002
<0.30
<0.30
0.469
0.001
0.625
0.016
0.746
0.003
39
Carbono orgnico
Conc (%)
UTOC
1.388
0.021
1.695
0.007
1.385
0.078
0.591
0.057
0.220
0.017
0.224
0.014
ANEXO 3
40
4. Secar el sedimento en la estufa a una temperatura mxima de 45C, el tiempo que sea
necesario hasta llegar a peso constante. Se ha decidido utilizar esta temperatura para
evitar la prdida por volatilizacin de compuestos tales como Hg y contaminantes
orgnicos. El peso constante se alcanza cuando la diferencia entre pesadas de una sola
muestra es menor a 1%.
5. Retirar la muestra de la estufa y colocarla en un desecador hasta que est a
temperatura ambiente.
6. Pesar y anotar el peso del sedimento seco + bolsa.
41
Crisoles de porcelana
Mufla con capacidad de calentamiento a 550 C (temperatura constante)
Balanza analtica
2. Procedimiento:
Secar los crisoles de porcelana durante al menos 8 h en una estufa a 105 C. Dejarlos enfriar
en desecador y registrar el peso hasta que se hallen a temperatura ambiente.
PPI550 = (PSIinicPSF550)/PSIinic)*100
Donde PPI550 representa las prdidas por ignicin a 550C (en porcentaje), PSIinic representa
el peso seco de la muestra antes de la combustin y PPI550 el peso de la muestra despus de
la combustin a 550C (ambos pesos en gramos).
Dean, W. E. Jr., 1974. Determination of carbonate and organic matter in calcareous sediments and
sedimentary rocks by loss on ignition: Comparison with other methods. J. Sed. Petrol. 44:242248.
Heiri, O., Lotter A. F., Lemcke G., 2001. Loss on ignition as a method for estimating organic and
carbonate content in sediments: reproducibility and comparability of results. Journal of
Paleolimnology 25: 101110, 2001.
Nelson, D.W.,Sommers, L.E., 1982. Total carbon, organic carbon, and organic matter, in A.L. Page,
R.H. Miller, and D.R. Keeney, Eds., Methods of Soil Analysis (Part 2, 2nd Ed.), pp. 539-579.
American Society of Agronomy, Monograph 9.
42
43
11. Agregar aproximadamente 200 mg cido ascrbico (o hasta que la solucin se torne
incolora)
12. Colocar un disco de plata en el fondo del vaso de precipitado con la cara pulida hacia
arriba y colocar el vaso de precipitados en un agitador orbital, a temperatura ambiente,
durante 8 horas.
13. Sacar el disco de plata del vaso de precipitado, enjuagar con H2O desionizada;
posteriormente con alcohol metlico y dejar secar.
14. Una vez que el disco est seco, guardar en una cajita de plstico o cartn (Nota: un sobre
de papel o una bolsita de plstico funcionan de igual forma) anotando claramente la clave
de identificacin de la muestra.
15. Poner el disco de plata en el detector alfa y esperar a que ambos istopos (trazador de
209
Po y 210Po de la muestra) alcancen al menos 400 cuentas (equivalentes a 5% de
incertidumbre de conteo).
16. El disco de plata (2 cm de dimetro, 0.25 cm de espesor) debe limpiarse previamente con
solucin limpia-plata para eliminar rastros de oxidacin. Estos discos normalmente tienen
una cara pulida y otra sin pulir; si ste es el caso, se recomienda tener cuidado de
identificar la cara pulida y pintar la cara no pulida con pintura acrlica en spray, con lo
cual se evitar el depsito de los istopos de Po en la cara que no estar expuesta a los
detectores. Dejar secar la pintura al menos 2 h antes de usar los discos.
44
MIPSA
Cd: L-SA-132
MANUAL DE INSTRUCCIONES Y PROCEDIMIENTOS
CENTRO DE ESTUDIOS AMBIENTALES DE
Rev: 04
CIENFUEGOS-CUBA
Pg: 45 de 139
PROCEDIMIENTO PARA ESPECTROMETRIA GAMMA
ELABOR:
HECTOR CARTAS AGUILA
REVIS:
ELIECER MACHIN
RODRIGUEZ
APROB:
CARLOS ALONSO
HERNANDEZ
EMISIN:
REVISIN:
1. Objetivos
1.1.- Establecer los requisitos y el orden de trabajo para realizar el ensayo Espectrometra
Gamma.
2. Alcance
2.1.- Es aplicable a las mediciones gamma espectromtricas realizadas en sistemas con
detector semiconductor HPGe.
3. Referencias
Knoll. G.F Radiation Detection and Measurement. John Wiley & Son. New York. 1979.
Technical Report 295. Measurements of Radionuclides in Food and the Environment. OIEA.
Vienna. 1989.
Sistems Application Studies, PSD No.17, ORTEC. The Minimum Detectable Activity
Concept.
ANSI N42.14-1991. Calibration and Use of Germanium Spectrometer for the Measurement
of Gamma-Ray Emission Rates of Radionuclides.
Analysis of gamma spectra. Forschungszentrum Karlsruhe. Fortbildungszentrum fur
Technik und Umwelt.
Actividad Especfica: Es la actividad normalizada por los valores de las magnitudes propias
de la muestra ensayada y el proceso de muestreo.
45
Area: Regin del pico por encima de la frontera superior del Pedestal que contiene los conteos
correspondientes a los cuantos gamma del radionclido en la muestra.
Eficiencia Absoluta de Pico: Nmero de conteos registrados bajo el pico de absorcin total de
energa entre el nmero total de cuantos gamma con esa energa emitidos por la muestra
durante el tiempo de medicin. Depende de la geometra de medicin. Ver 3.1.
Espectro: Funcin discreta que relaciona el nmero de conteos y el nmero del canal
atendiendo a la energa que los cuantos gamma depositan en el detector.
Geometra de Medicin: Es la configuracin espacial que ocurre en el conjunto muestradetector, donde ejercen gran influencia en los resultados de las mediciones: la forma del
envase donde est contenida la muestra y la posicin del mismo con respecto al detector.
Existen diversas geometras de medicin.
Integral: Regin del pico que contiene los conteos del fondo ms los conteos del radionclido
en la muestra; Integral = Area + Pedestal.
Lmite Crtico: se define como aquel valor de tasa de conteo neta el cual debe ser excedido
antes de plantearse que la muestra contiene algn material radiactivo medible superior al
fondo. Ver 3.3.
Nivel "Less Than": con, l se describe la cantidad de material radiactivo que pudiera estar
presente aunque ste no sea detectado; se define como la tasa de conteo neta mxima que una
muestra pudiera tener; es un concepto basado en la tasa de conteo neta que se mide, siendo
sta menor que el lmite crtico. Ver 3.3.
Lmite de Deteccin: se define como la cantidad ms pequea de material radiactivo que
puede ser detectada con algn grado de confianza especificado. Ver 3.3.
Lmite de Determinacin: se define como la menor tasa de conteo neta, la cual puede ser
detectada con una incertidumbre relativa especificada.
Pedestal: Regin del pico delimitada por sus fronteras en la zona que contiene los conteos del
fondo.
Tasa de Conteo: Nmero de conteos registrados en determinada zona del espectro dividido
por el tiempo durante el cual se registraron.
5. Complementarios
5.1.- Metodologa para el clculo del rea del fotopico y estimacin del tiempo de medicin.
5.2.- Frmulas para el clculo de la actividad especfica segn el tipo de muestra.
6. Responsabilidades
Desarrollo
7.1. Introduccin:
energticas de sus cuantos gamma caractersticos. Una vez registrada la informacin de cada
radionclido, estando el sistema calibrado, podemos determinar la actividad de los mismos.
7.2.1.Monitoree y registre en el registro primario los parmetros ambientales, los cuales deben
estar en el intervalo siguiente: Temperatura: [18,26]C y Humedad Relativa: [48,60]%.
7.2.2.Chequeo de los parmetros de Control.
7.2.2.1. Consiste en la comprobacin peridica del valor de los parmetros del detector que
pueden variar por alguna causa. Se comprueban el valor de la eficiencia del detector para
determinada energa y determinada geometra y el valor del nmero de conteos del fondo para
determinado intervalo energtico.
7.2.2.2. Coloque un patrn adecuado en el lugar medicin, ajuste la posicin del pico en el
canal que le corresponde, colecte el espectro y calcule el rea del pico garantizando una
incertidumbre relativa menor que 5%. Utilice la metodologa explicada en el Anexo 1 o algn
programa procesador de espectros previamente validado, por ejemplo Silena e Interwinner y
finalmente calcule la eficiencia absoluta de pico segn la siguiente frmula:
Rt - Rf
=-----------Ap P
donde
Rt: es la tasa de conteo del radionclido del patrn ms el fondo.
Rf: es la tasa de conteo del radionclido en el fondo.
Ap: es la actividad del patrn
P: es probabilidad de emisin de los cuantos gamma segn el esquema de desintegracin del radionclido.
Nota: actualice la actividad del patrn el da de la medicin teniendo en cuenta que ocurri la desintegracin del
radionclido en el intervalo de tiempo transcurrido desde la fecha de referencia hasta el da de la medicin.
Utilice la siguiente frmula:
Ap = Ao exp(-0.693 t/T)
47
7.2.2.4. Si del anlisis del grfico de control concluye que la eficiencia est controlada,
tiene un requisito a su favor para realizar el ensayo, si est fuera de control no realice el
ensayo, chequee los parmetros ambientales, el voltaje de trabajo del detector y la geometra
de medicin o analice el funcionamiento de todos los elementos del sistema para detectar
aquel que contribuye a la no aptitud.
7.2.2.5. Colecte el espectro de fondo durante 2000s y determine la Integral para el intervalo
(300 - 1400) Kev.
7.2.2.6. Acte como en 7.2.2.3 pero con el valor de tasa de conteos correspondiente a la
Integral determinada.
7.2.2.7. Si el fondo est controlado tiene el segundo requisito a su favor para realizar el
ensayo.
7.2.2.11. El requisito fundamental para ejecutar el siguiente paso del ensayo es que los dos
parmetros a la vez estn controlados.
7.2.3.
7.2.3.3. Si al inspeccionar la muestra entregada cumple con los requisitos, acptela firmando
en el Registro de Entrega de Muestras y Modelos de la persona que lo entrega; si no est de
acuerdo con la entrega, rechcela y las causas como una no conformidad.
7.2.3.4. Una vez chequeados los parmetros de control y cerciorado del correcto
funcionamiento del sistema espectromtrico, acte de la siguiente forma:
7.2.3.5. Cubra la muestra con un material fino para evitar la contaminacin accidental del
detector, colquela en el lugar de medicin y colecte su espectro.
7.2.3.6. Debe tener en cuenta que:
-
Las muestras selladas para medir Ra-226 y Th-232 en condiciones de equilibrio con
sus especies hijas deben esperar al menos 20 das para ser medidas.
48
7.2.3.7.Salve los espectros colectados con el mismo cdigo de la muestra y consrvelos como
evidencia del ensayo.
7.2.4. Procesamiento del espectro.
7.2.4.4.1. Determine el rea y la incertidumbre relativa de los picos por donde se propone a
efectuar el clculo de actividades. Vea Anexo 1.
7.2.4.4.2. Con los datos anteriores calcule la tasa de conteo neta Rs para cada pico por la
siguiente frmula:
Rs = Rt Rb
y su incertidumbre
u(Rs)=[u2(Rt)+u2(Rb)]
donde
Rt: tasa de conteo total debido a la presencia del radionclido en la muestra y en el fondo.
Rb: tasa de conteo debido a la presencia del radionclido en el fondo.
u(Rs): incertidumbre en la tasa de conteo neta.
49
Tb
Tb
Lc = k [ ------ ( 1 + -------- ) ]
donde
k= 1.65 es el factor de confianza para las pruebas de una cola correspondiente al 95%.
7.2.4.4.4. Si se cumple 0<Rs<=Lc calcule el valor less than Lt segn:
Lt = Rs + k u(Rs)
7.2.4.4.5. Los valores anteriores corresponden a valores de tasa de conteo, los mismos se
transforman en actividad absoluta dividiendo por la probabilidad de salida gamma P y la
eficiencia y en actividad especfica normalizando adems, por las caractersticas propias de
la muestra y el proceso de muestreo segn las frmulas del Anexo 2. La actividad absoluta A
correspondiente a una tasa de conteo neta mayor que el lmite crtico se calcula segn:
Rs
50
donde:
-------------------------------1-exp[-0.693(tmuest./T )]
-------------------------------1-exp[-0.693(tmed./T )]
a) Si la tasa de conteo neta es mayor que el lmite crtico; reporte la actividad especfica
correspondiente y su incertidumbre.
b) Si la tasa de conteos neta es menor o igual que el lmite crtico y mayor que cero;
reporte que el valor de la actividad especfica es menor que la actividad especfica
correspondiente al valor "less than".
52
c) Si la tasa de conteos neta es menor que el lmite crtico y menor o igual que cero;
reporte que el valor de la actividad especfica es menor que la actividad especfica
correspondiente al lmite crtico.
7.2.5.2. Para cuestiones prcticas de informacin calcule el lmite de deteccin segn:
Ld = k2/T + 2Lc
y el lmite de determinacin segn:
f
4T Rb(T+Tb)
2
q
2
q Tb
Detergente: 5g
HCl: 50-80 g
7.2.6.2. Mezcla 2.
-
Detergente: 3g
HCl: 35-100 ml
Metodologa para el clculo del rea del fotopico y estimacin del tiempo de medicin.
1. Clculo del rea o nmero de conteos en el fotopico.
Este clculo es manual, se conoce la distribucin de los conteos por canales, todo pico posee
tres caractersticas bsicas: la Integral(Nt), el Pedestal o Back(Nb) y el Area o Conteos
Netos(N). Estas magnitudes se determinan como sigue:
N = Nt - Nb
b1
Nt = Ni
i=a2
a2-1
b2
Nb = ( Ni + Ni )
i=a1
i =b1+1
(b1-a2+1)
----------------(a2-a1+b2-b1)
donde Ni son los conteos en el canal i y a1, a2, b1, b2 son los nmeros de los canales
respectivos o valores de energa asociados. Vea el siguiente esquema:
Conteos
2.
a1
a2
b1
b2
Canales
54
b1-a1+1
u(N) = [ Nt + Nb (-----------------)] ,
a2-a1+b2-b1
El tiempo de medicin para lograr una incertidumbre relativa establecida a priori en el clculo
de la actividad especfica se estima por la siguiente frmula:
Rt
T = -------------------------------------------------------------2
donde:
i =1
T: Tiempo de medicin
Rt: Tasa de conteo total(muestra ms fondo); la misma se estima previamente durante un
tiempo de medicin corto.
u(Ae)/Ae: incertidumbre relativa en el clculo de la actividad especfica; la misma se toma del
modelo acompaante.
u( )/ :incertidumbre relativa en la determinacin de la eficiencia.
u(Xi)/Xi( i =1...n):incertidumbres relativas de la n magnitudes caractersticas de la muestra y el
proceso de muestreo.
Rb: Tasa de conteo del fondo.
u(Rb):incertidumbre de la tasa de conteo del fondo.
5.2. Frmulas para el clculo de la actividad especfica segn el tipo de muestra.
En todos los casos se parte de la actividad absoluta o simplemente actividad(A) expresada en
Becquerels.
1.
a)
56
57
Cdigo:
Edicin:
En Vigor:
Pgina: 1-3
tamao de grano
1.- OBJETO
Acondicionamiento de las muestras de sedimento marino en estado seco para realizar anlisis
granulomtrico por el mtodo de dispersin de rayo lser.
2.- MBITO DE APLICACIN
Este procedimiento puede ser utilizado para preparar las muestras de sedimento del proyecto
RLA7012, que han sido secadas a 45 C, para realizar anlisis granulomtricos.
3.- DOCUMENTACIN DE REFERENCIA
Procedimiento Standard para la preparacin de las muestras para el anlisis granulomtrico.
4.- DESCRIPCIN
Este procedimiento describe y regula los pasos a seguir para el tratamiento de muestras de sedimento
marino que han sido secadas a 45C para realizar el anlisis granulomtrico.
4.1.- Pesar aproximadamente 0.5 gramos de sedimento seco en un vaso de precipitado limpio y seco,
previamente etiquetado y tarado, utilizando una balanza de tres dgitos (0.001 g).
4.2.- Humedecer la muestra con aproximadamente 15 ml de agua a temperatura ambiente.
4.3.- Colocar el vaso en un bao de ultrasonido. Aplicar ultrasonidos en intervalos de 15 minutos por
cada hora, durante 5 horas.
4.4.- Dejar reposar la muestra y retirar el agua sobrante con una pipeta Pasteur.
58
59
Esta determinacin se realiza utilizando el mdulo de Anlisis de Muestras Slidas SSM5000 (Shimadzu), mediante una pre-acidificacin con cido fosfrico en un horno a 200 C.
El CO2 producido se transporta en corriente de aire y se mide en el analizador de infrarrojos
no dispersivo NDIR de alta sensibilidad del TOC-V. Se sigue el procedimiento de anlisis
descrito en la norma Europea UNE-EN 13137:2002. Para la cuantificacin se emple una
lnea de calibracin a partir de CaCO3 (R2=0.9991).
Este valor se calcula por diferencia a partir de los resultados obtenidos de Ctot y TIC segn la
norma UNE reseada anteriormente
60
PON-MA-01
Elaborado por: Emilio Pea T.
Revisin: 1.1
Vigente desde: 2008-05-25
Autorizado por:
Vctor Martnez H.
Jefe de rea Tcnica, Aseguramiento y Control de la
Calidad. 10. 03. 2009
A. Seccin de procedimiento.
1. Alcance y aplicacin
1.4 Generalmente, el nivel de mercurio en suelo es menos de 0.2 mg/kg de peso seco
(ppm). Cuando el nivel de mercurio total en suelo es encontrado que excede pocos
mg/kg (ppm), existe un riesgo de que el mercurio migrar del suelo hacia otros
sectores ambientales. En estos casos, la contaminacin de mercurio en sistemas
acuticos de los alrededores debe ser investigada.
2. Resumen del mtodo
2.1
3.1 Usar reactivos de alta pureza, libres de mercurio para obtener resultados fiables.
3.2 Mas adelante en este mismo procedimiento se describe el mtodo de cuarteo con fin de
homogenizar, esto aplicado solo para muestras de suelo, en este caso podra haber
prdidas de mercurio por friccin, as que se recomienda tener mucho cuidado.
3.3 Posible prdida de mercurio por evaporacin al captar la muestra desde el punto de
muestreo si no se preserva a bajas temperaturas al instante, ms aun cuando se
realizan los muestreos cercanos al medio da.
3.4 Los reactivos deben de ser revisados previo al anlisis, ya que sus propiedades pueden
cambiar por el tiempo de almacenamiento.
Sedimentos
4.1.1 Para ros los puntos de muestreo permiten una fcil coleccin de sedimentos
escogidos a intervalos de 50-200 m. Corriente abajo desde el punto de
descarga del agua residual industrial o drenaje de la ciudad, por otra parte es
deseable que se designen al menos dos puntos corriente arriba para colectar
sedimento como control. Los sitios de coleccin para las muestras
de sedimentos son usualmente especificados para ambos, orillas y centro
del ro. Si el ro es ancho, incrementar el nmero de puntos de muestreo.
4.1.2 Para reas de lagos, humedales y ocanos, centrar radialmente los puntos de
muestra sobre el punto de partida o boca del ro y llevar un plano de rejilla
segn sea necesario.
4.1.3
4.1.4
62
4.2 Suelos
4.2.1
4.2.2
5.1 Para realizar este anlisis es necesario usar gabacha, guantes y anteojos de proteccin.
5.2 Tener mucho cuidado ya que se trabaja continuamente con H2SO4, HNO3, HCl y
HClO4 tambin con la manipulacin de KMnO4 puesto que mancha por su efecto
oxidante, si esto ocurriera enjuagar con una solucin de Hidroxilamina previamente
preparada y posteriormente con abundante agua del grifo. En caso de exposicin de
cidos en la piel, enjuagar con abundante agua del grifo, si es ingerido buscar
atencin medica pertinente, en caso de exposicin de los vapores apartarse
completamente del lugar de exposicin y buscar un lugar ambientado con aire fresco.
5.3
5.4
Tener sumo cuidado cuando se manipulen las muestras ya que pueden provenir
de posibles sitios contaminados de alta concentracin, asimismo con los
Materiales de Referencia Certificados (CRM por sus siglas en ingles). En caso de
exposicin en la piel enjuagar con abundante agua del grifo, si es injerido buscar
atencin mdica pertinente.
Nota: Deje siempre limpio su puesto de trabajo. Asegrese de guardar todos los reactivos que
haya utilizado en el anlisis.
6. Reactivos.
63
8.1.1 Para el caso de las muestras de suelo, se debe aplicar el mtodo del cuarteo,
mencionado anteriormente, pero primero se debe hacer pasar la muestra de
suelo por un cedazo de malla para hacerla apta para el anlisis. Debido a que
las muestras son tomadas en forma de rejilla, hablando de un total de 5
muestras por sitio correspondiente a un punto central y la de los cuatro puntos
cardinales, estas tendrn que ser homogenizadas y luego mezcladas para
obtener una nica muestra final representativa de ese sitio, y esto se hace por
medio del mtodo en mencin.
8.1.3 Una vez obtenida dicha consistencia se esparce la muestra sobre todo el rea de
la bandeja de una forma homognea y se divide en cruz por en medio de la
bandeja con esptula para obtener cuatro partes casi iguales las que se
mezclaran en forma de equis para obtener dos partes casi iguales y por ltimo
se mezclan estas dos partes restantes.
8.1.4 Repetir el paso 8.1.3 unas 8 a 12 veces.
8.1.5 Luego de haber cuarteado los 5 puntos se mezclan pesos iguales (pueden ser
20-25 gramos) de cada uno de los puntos se aplica de nuevo el cuarteo segn
64
8.1.3.
9.2
9.3
El equipo debe encontrarse en condiciones tales que los valores de lnea base
sean Io mas bajos posibles. Abs (Height) < 0.005.esto se logra alternando botes
de cuarzo conteniendo HNO3 5 % (recin preparado) con botecitos vacos hasta
asegurar un valor apropiado de la lnea base.
Antes de empezar a calibrar, la lmpara de Hg. debe de estar en unas condiciones
ptimas de estabilidad, para ello es conveniente encender el equipo a primera hora de
la maana y dejar que la lmpara se caliente al menos durante unas 2 horas.
Preparar los estndares el mismo da de la calibracin. Estos han de ser preparados
por diluciones sucesivas a partir de una disolucin estndar certificada de 1000 mg/L
de Hg. Como disolvente se emplear el blanco de HNO3 5% v/v , a no ser que se
requiera otro para alguna aplicacin especifica. El orden normal de dilucin con los
volmenes relativos ser:
65
Inicio de la calibracin:
9.3.1 Medir blancos sucesivos hasta obtener valores de fondo apropiados (Abs <
0.005).
9.3.2 Medir al menos 3 replicas de cada estndar.
9.3.4 Observar la dispersin de los resultados tras las medidas de las replicas. Si hay
66
uno o varias replicas que se alejan entre si, aadir una cuarta o quinta replica a
fin de estimar el valor medio de Absorbancia para el estndar medido.
9.3.8 Al terminar todas las replicas de los estndares de una de las curvas (baja o alta
concentracin) establecer el criterio de aceptacin de resultados, estimando si es
conveniente repetir algn estndar, en funcin de la proporcionalidad de
las absorbancia de las mismas.
9.3.9 NUNCA ACEPTAR UNA CURVA CON R2 < 0,99X.
10.1 Para comenzar el anlisis, primero asegrese que la curva de calibracin este cargada.
Active la hoja "DMA-80 Calibration" y escoja la curva que utilizar.
10.2 Regrese a la tabla "Methods".
10.3 Use un mtodo pregrabado o cree uno nuevo. En la lnea "Method Name" asgnele un
nombre al mtodo. Cambie los parmetros del mtodo si es necesario y grbelos.
10.4 En la tabla "Program" cambie los parmetros de trabajo del instrumento para cada
muestra, tales como secado, descomposicin y tiempo de espera, si es necesario. El
tiempo de secado vara con el volumen de la muestra o con el porcentaje de agua en
la muestra y tienen que ser calculado usando la siguiente ecuacin:
10.6 Para muestras con alto contenido orgnico: Tiempo de secado 30 a 90 seg
67
Por ejemplo, el carbn requiere 300 sec (Para otras vea el libro de aplicacin de este
manual).
10.12 Despus de que todas las muestras han sido cargadas en la bandeja (en el caso de
modo automtico) y los datos son introducidos en el "DMA-80 Measurement",
abra la tabla de resultados del "DMA-80 Measurement /Data" y presione Start.
10.13 A medida que la muestra es analizada, comenzar a aparecer en la tabla "Result" la
absorbancia bajo la columna "Height", la cantidad de Hg. en la muestra en la
columna "Hg (ng)", y la concentracin de Hg. en la "C (g/kg)"
10.14 Una vez que el equipo est en condiciones de operacin pesar por triplicado la cantidad
de muestra adecuada. El peso de muestra se decide en funcin del rango de
concentracin, cuanto mayor sea la concentracin mayor el efecto de memoria.
10.15 Para suelos y sedimentos comenzar con 10 mg, si la seal de absorbancia es muy baja
y la reproducibilidad baja incrementar a 25 mg, si es idntica a la anterior entonces
probar de 50 a 100 mg.
10.16 Todas las rplicas deben de ser pesadas por el mismo operador, Tratando de que la
muestra quede extendida en todo el botecito sin terminar de extenderla con la
esptula. Si al pesar el peso no es exacto, no extraer muestra sino anotar la cantidad
pesada.
10.17 Seleccione en el software del equipo el mtodo que se va a aplicar a las muestras o
cree un nuevo mtodo.
10.18 Cree un nuevo archivo de muestras para grabar los datos de las muestras que se van a
leer. Seleccione entre modo sencillo o automtico.
RAMPA
30 s
30 s
30 s
68
PLATEAU
30 s
90 s
120 s
Si 1a< 2a = 3a Aceptar 2a
12. Tiempo y temperatura de combustin
12.1 Cuanto mayor el tiempo, mayor es la segundad de que todo el Hg ha sido atomizado,
pero mas elementos diferentes pueden acompaar al Hg con el consecuente deterioro
del catalizador y la amalgama.
12.2 Temperatura por Defecto: 650 C
12.3 En principio es adecuada para sedimentos y otras matrices excepto aquellas con un
porcentaje muy elevado de Hg asociado a silicatos. En estas matrices elevar la
temperatura de combustin,
12.4 Si no se puede atomizar todo el Hg porque queda parte ocluido en silicatos, entonces
hay que efectuar una digestin hmeda de la muestra con HF, luego proceder a la
eliminacin de HF con H3BO3 o HCIO4 (No recomendable).
12.6 A la hora de medir una muestra con muy baja concentracin podemos utilizar la
opcin de preconcentracin que nos permite el software smbolo }+
13.2 Cerciorarse siempre de imprimir una hoja de resultados para archivo y hacer un
respaldo electrnico en la carpeta. Resultado de Anlisis de Mercurio Total DMA-80
en la computadora ubicada en la oficina del Laboratorio de Mercurio Ambiental
69
1.2
2. Control de la precisin.
Las muestras siempre se analizan en lotes de al menos 5 replicas y los resultados son aceptados
cuando el coeficiente de variacin sea menor del 10%. Si no se logra obtener estos
porcentajes se recomienda repetir el anlisis.
3. Porcentaje de recobro.
Realice un anlisis de una muestra con agregado (Muestra con agr.) de de acuerdo a la
concentracin obtenida de las muestras analizadas.
4. Estndar de control.
5.1 Determine el lmite de deteccin (LD) del mtodo segn lo descrito en el PROC-MA-01
del Manual de Procedimientos Operativos del Control de Calidad del laboratorio
(MPOACCL).
7. Cartas de control.
7.1 Elabore y mantenga al da las cartas de la Muestra Control, segn lo descrito en el PROCMA-02 del MPOACCL.
C. REFERENCIAS
EPA method 7473. Mercury in solids and solutions by thermal decomposition, amalgamation,
70
and
atomic
absorption
spectrophotometry
en http://www.epa.gov/sw-846/pdfs/7473.pdf
71
Figura 1
72
Materiales de laboratorio
Todo material de vidrio de laboratorio debe ser lavado con agua y jabn/detergente de
laboratorio, secado con acetona y secuencialmente enjuagado una vez con acetona, dos con
hexano, y dos con diclorometano; estos ltimos enjuagues con disolventes calidad
plaguicidas. Alternativamente, el material no volumtrico, se puede dejar secar destapado y
una vez seco, tapar con papel de aluminio y quemar en mufla a 440C por 4 horas. Dejar
enfriar y guardar en un lugar protegido, sin remover el papel de aluminio hasta el momento de
su utilizacin.
Los siguientes materiales de laboratorio son necesarios para el anlisis de contaminantes
orgnicos en muestras de sedimentos:
73
Calibre la balanza antes de su uso de acuerdo a las instrucciones del fabricante e indicaciones del
cuaderno de calibracin del laboratorio. Registre la fecha de calibracin, pesa utilizada e iniciales del
operador.
Tare la balanza vaca hasta que el indicador de peso lea 0,000 g.
Coloque un vial o vaso de precipitados de 10 mL y registre el peso del mismo (Peso del Vial).
Revuelva cuidadosamente, con una esptula de acero inoxidable previamente lavada con disolventes,
la muestra ya homogenizada de sedimento y pese, sin volver a tarar la balanza, aproximadamente 1 g
de muestra dentro del vial (Vial+Muestra hmeda)
Prepare las muestras destinadas al control de calidad (blanco, muestra duplicada, muestra enriquecida
y material de referencia) de la misma manera que las dems muestras. En el caso del blanco, el Peso
74
Clculos
Registre cualquier caracterstica de las muestras que le llame la atencin mientras trabaja (e.g., olor,
color, trozos de vegetacin, conchas, etc.). Todo componente extrao (e.g., trozos de vegetacin,
conchas, organismos) no deberan incluirse en la muestra a secar.
Una vez finalizadas todas las muestras, coloque los viales con las muestras hmedas dentro de una
bandeja de laboratorio y coloque en estufa con circulacin de aire a 63-65C por 24 horas.
Pasadas las 24 horas, retire con cuidado y proteccin adecuada, la bandeja de la estufa y coloque en
desecador. Permita que los viales se equilibren con la temperatura del laboratorio por 30 minutos.
Calibre la balanza antes de su uso de acuerdo a las instrucciones del fabricante e indicaciones del
cuaderno de calibracin del laboratorio. Registre la fecha de calibracin, pesa utilizada e iniciales del
operador.
Tare la balanza vaca hasta que el indicador de peso lea 0,000 g.
Coloque uno de los viales y registre el peso del mismo (Vial+Muestra seca #1).
Finalizados todos los viales, regrese la bandeja a la estufa a 63-65C por 2 horas.
Despus de las 2 horas, retire la bandeja de la estufa con cuidado y proteccin adecuada la bandeja de
la estufa y coloque en desecador. Permita que los viales se equilibren con la temperatura del
laboratorio por 30 minutos.
Calibre la balanza antes de su uso de acuerdo a las instrucciones del fabricante e indicaciones del
cuaderno de calibracin del laboratorio. Registre la fecha de calibracin, pesa utilizada e iniciales del
operador.
Tare la balanza vaca hasta que el indicador de peso lea 0,000 g.
Coloque uno de los viales y registre el peso del mismo (Vial+Muestra seca #2).
Si la diferencia entre las dos ltimas lecturas es menor o igual a 0,02 g, calcule el porcentaje de peso
seco utilizando la segunda lectura.
Si la diferencia es mayor a 0,02 g regrese la muestra a la estufa por 2 horas y repita el pesado como se
indic.
Determine la Diferencia Porcentual Relativa (DPR) entre los pesos secos calculados para la muestra
original y muestra duplicada. La DPR debera estar entre los rangos especificados por el laboratorio
como aceptables, generalmente 25%. Si la DPR es mayor a 25% vuelva a pesar ambas muestras
para corroborar los pesos y/o revise los clculos. Si despus de recalcular los pesos secos, la DPR
continua siendo mayor a 25% es posible que la muestra no este homogenizada correctamente.
Notifique a su supervisor antes de proseguir.
Para el blanco, la diferencia absoluta de los pesos del vial antes y despus del secado debera ser igual
o menor a 0,02 g.
75
Extraccin de la muestra
Una vez armado el extractor Soxhlet, cada muestra y muestras correspondientes al control de
calidad son sembradas con los estndares de recuperacin correspondientes y, aquellas
seleccionadas a ser enriquecidas, con la disolucin conocida de analitos. El extractor Soxhlet
es colocado sobre una fuente de calentamiento con un ciclo de extraccin cada 5-6 minutos
(e.g. 10-12 ciclos por hora) por un mnimo de 8 horas u 80 ciclos.
Terminada la extraccin, se adosa una columna tipo Snyder de tres bolas al baln de 500 mL
y el extracto es concentrado a 10-15 mL sobre bao de agua a 60-65C. Alternativamente, la
concentracin del extracto puede realizarse en rotoevaporador cuidando de que la temperatura
del bao de agua no sobrepase los 35C y evitando la contaminacin cruzada entre muestras.
Si el extracto contiene algo de la muestra que ha pasado o material particulado, ste debe ser
filtrado utilizando un embudo de vidrio que contenga sulfato de sodio sobre un tapn de lana
de vidrio calcinada antes de su concentracin. El extracto concentrado a 10-15 mL es
transferido a un tubo de concentracin de 25 mL. El baln de 500 mL es enjuagado 2 3
veces con diclorometano y los enjuagues transferidos al tubo de concentracin. Se agrega un
ncleo de ebullicin, el extracto es concentrado y el disolvente cambiado por hexano (por el
agregado sucesivo de pequeas porciones de hexano) sobre bao de agua a 60-65C bajo una
suave corriente de nitrgeno. Volumen final del extracto antes de la limpieza en columna de
cromatografa debe ser de aproximadamente 2 ml en hexano.
Extraccin de la muestra Paso a paso
Pese con exactitud a la segunda cifra decimal, la cantidad de sedimento a extraer. Es importante que no
incluya en la pesada componentes extraos al sedimento (e.g., trozos de vegetacin, conchas,
organismos).
Las disoluciones de estndares de recuperacin e internos se preparan pesando las cantidades apropiadas de los compuestos
puros, transferidos cuantitativamente a un matraz volumtrico, y diluyendo con hexano o disolvente similar no clorado. Las
disoluciones de estndares de recuperacin e internos son de uso individual y deben prepararse y almacenarse como tal.
Las disoluciones de estndares de recuperacin e internos deben ser preparadas de manera tal que la adicin de 0,100 mL a
la muestra, antes de su extraccin y antes de su anlisis instrumental, respectivamente, resulte en concentraciones finales
comprendidas entre el nivel ms bajo y el ms alto de la curva de calibracin cuando el volumen final del extracto es
ajustado a aproximadamente 1 mL. Todos los analitos de inters presentes en la muestra son cuantificados en base a un
estndar de recuperacin y la recuperacin de este en base a un estndar interno. Por este motivo, si se esperan
concentraciones muy altas o muy bajas de los compuestos de inters en las muestras, las cantidades agregadas de
estndares de recuperacin, internos y los volmenes finales de los extractos deben ser ajustados convenientemente.
76
En general, se espera tener un mnimo de 80 ciclos. Si los ciclos son ms demorados se puede
mantener la extraccin por ms horas. En esta situacin, se debe tener cuidado de tener suficiente
volumen de diclorometano en el baln para realizar el ciclo y una reserva para evitar perdidas por
recalentamiento o secado. Agregar disolvente al baln como sea necesario durante la extraccin.
Una vez finalizada la extraccin, deje enfriar el extractor Soxhlet hasta que paren los ciclos y retire el
condensador.
Agregue unos 4-5 ncleos de ebullicin frescos al baln, conecte una columna de destilacin tipo
Snyder de tres bolas y coloque el baln en un bao de agua a 60-65C para concentrar el volumen a
10-15 mL. Alternativamente, el extracto puede ser concentrado en un rotoevaporador cuidando que la
temperatura del bao de agua no sobrepase los 35C. Evite la contaminacin cruzada entre muestras.
Sin retirar del bao, agregue al tubo de concentracin 10 mL de hexano y lleve nuevamente a 1 mL
bajo una corriente suave de nitrgeno. Repita este paso tantas veces como sea necesario hasta
reemplazar todo el diclorometano por hexano, lo cual se evidencia por la ausencia de ebullicin en el
lquido.
activado. En este punto, la columna est lista para recibir el extracto concentrado de la
muestra.
Preparacin de la columna
Retire el sulfato de sodio, almina y slica gel de la estufa y colquelos en un desecador para enfriar
a temperatura ambiente (ver Extraccin y purificacin, Materiales de laboratorio, Reactivos).
Retire la arena lavada y calcinada de la estufa y coloque sobre la mesa para enfriar a temperatura
ambiente
Nota: al retirar materiales de la estufa use siempre guantes de proteccin o pinzas largas adecuadas
para manejar objetos pesados. Los recipientes de arena, slica y almina pueden pesar hasta 1 Kg. y
estn calientes. Asegrese de que todos los recipientes estn cubiertos con papel aluminio.
Calibre la balanza antes de su uso de acuerdo a las instrucciones del fabricante e indicaciones del
cuaderno de calibracin del laboratorio. Registre la fecha de calibracin, pesa utilizada e iniciales
del operador.
Coloque un baln de 1000 mL con boca esmerilada y embudo sobre la balanza y tare el peso hasta
que el mismo lea 0,000 g
Agregue almina dentro del baln y pese. El peso total de la almina debera ser igual a 10 g x n
muestras. Generalmente se pesa una cantidad extra (i.e., 10-15 g) en caso de accidentes o de
necesitar ms al construir las columnas. Registre este peso.
Vuelva a tarar el baln con la almina hasta que el mismo lea 0,000 g y desactive parcialmente el
adsorbente con el agregado de 1% (peso en peso) de agua libre de contaminantes orgnicos al baln.
Nota: la cantidad de agua es calculada al multiplicar el peso total de almina en el baln x 0,01. Por
ejemplo, si el peso total de almina en el baln es de 171,2 g, se debe agregar 171,2 g x 0,01 =
1,712 1,7 g de agua. Es conveniente no agregar toda el agua en el mismo lugar para evitar la
formacin de grumos.
Coloque otro baln de 1000 mL con boca esmerilada y embudo sobre la balanza y tare el peso hasta
que el mismo lea 0,000 g
Agregue slica dentro del baln y pese. El peso total de la slica debera ser igual a 20 g x n
muestras. Generalmente se pesa una cantidad extra (i.e., 20-25 g) en caso de accidentes o de
necesitar ms al construir las columnas. Registre este peso.
Vuelva a tarar el baln con la slica gel hasta que el mismo lea 0,000 g y desactive parcialmente el
adsorbente con el agregado de 5% (peso en peso) de agua libre de contaminantes orgnicos al baln.
Nota: la cantidad de agua es calculada al multiplicar el peso total de almina en el baln x 0,05. Por
ejemplo, si el peso total de almina en el baln es de 363,1 g, se debe agregar 363,1 g x 0,05 =
18,15 18,2 g de agua. Es conveniente no agregar toda el agua en el mismo lugar para evitar la
formacin de grumos.
Tape los dos balones y agite bruscamente al inicio, para romper grupos que se pudieran haber
formados, y ms suavemente cada 5-10 minutos por una hora para equilibrar la humedad.
78
Nota: el cobre activado sirve para remover el azufre que pueda interferir durante el anlisis de los
extractos por cromatografa de gases y detector de captura electrnica (plaguicidas clorados).
Coloque un embudo de vidrio con el vstago tapado con lana de vidrio sobre otro vaso de
precipitados de 500 mL y transfiera, cuidadosamente y bajo campana, el cobre con el cido.
Lave el cobre activado con abundante agua libre de contaminantes orgnicos hasta remover todo el
cido. La mezcla de cido y agua de lavado debe ser neutralizada con bicarbonato de sodio y
desechada de acuerdo a las normas del laboratorio.
Enjuague el cobre lavado con 3 4 porciones de 20 mL de metanol seguido de 3 4 porciones de
20 mL de diclorometano y de 3 4 porciones de 20 mL de hexano, desechando los disolventes de
acuerdo a las normas del laboratorio.
Almacene el cobre activado bajo hexano en un vaso de precipitados cubierto y debidamente
identificado. Es importante activar el cobre al momento de utilizar ya que con el tiempo pierde
afectividad o se desactiva totalmente.
Preparacin de la columna
Asegure las columnas cromatogrficas (30 cm x 13 mm con llave de tefln y reservorio de 250 mL)
a sus soportes dentro de la campana. El total de columnas debe ser el mismo que el nmero de
extractos a limpiar.
Coloque un recipiente de 250 mL bajo la columna para recoger los disolventes de desecho.
Abra la llave y, utilizando una botella de lavado, enjuague las columnas 3 veces con
aproximadamente 10 mL de metanol cada vez seguido de 3 enjuagues con aproximadamente 10 mL
de diclorometano cada vez.
Enjuague los extremos de una pinza y de una tijera con diclorometano y corte una porcin de lana
de vidrio calcinada suficiente para cubrir el fondo de la columna. Con una varilla de vidrio,
enjuagada con diclorometano, empuje la lana de vidrio hacia el fondo de la columna.
Cierre la llave y llene la porcin de la columna cromatogrficas con diclorometano.
Coloque un embudo sobre la columna y agregue un 1 cm de arena lavada dentro de cada columna
utilizando una esptula de acero inoxidable enjuagada con diclorometano.
Coloque un vaso de precipitados de 50 mL sobre una balanza calibrada y tare su peso.
79
Agregue 2 cm de sulfato de sodio anhidro o arena lavada sobre la slica. Si es necesario enjuague el
reservorio con pequeas porciones de diclorometano para asegurar la transferencia completa de
sulfato de sodio anhidro o arena a la columna.
Agregue, con cuidado para evitar alterar la superficie de la columna, 1-2 cm de cobre activado para
la remocin de azufre).
Abra la llave de la columna para que eluya el diclorometano hasta alcanzar la superficie de cobre
activado, recogiendo los desechos en recipientes adecuados.
Agregue 50 mL de pentano y eluya hasta alcanzar la superficie de cobre activado.
Reemplace el recipiente de desechos con un baln de 250 mL. Cada baln deber estar debidamente
identificado con el cdigo de la muestra y batera de anlisis.
Transfiera los extractos de los tubos de concentracin a las columnas utilizando pipetas Pasteur
descartables. Los extractos de las muestras estn, a este punto, concentrados en aproximadamente 2
mL en hexano.
Abra la llave de la columna y permita que el extracto se introduzca dentro de la columna. Cierre la
llave.
Enjuague el tubo de concentracin con 1 ml del disolvente de elucin (1:1 diclorometano:pentano) y
agregue el lavado a la columna utilizando la misma pipeta Pasteur por muestra.
Abra la llave de la columna y permita que el primer lavado se introduzca dentro de la columna.
Cierre la llave.
Repita los dos pasos anteriores con dos enjuagues adicionales del tubo de concentracin usando la
mezcla de elucin y permitiendo que el lavado se introduzca completamente dentro de la columna
antes del agregado siguiente.
Luego de la transferencia completa de los extractos a las columnas y de sus respectivos enjuagues,
agregue, con cuidado para no disturbar la superficie de la columna y evitar as la resuspensin de la
muestra, 200 mL de la mezcla diclorometano:pentano utilizando un cilindro graduado.
Abra la llave y eluya la muestra a una velocidad de unos 2 mL por minuto, ajustando la llave como
sea necesario
Una vez que ha eludo el volumen total de la mezcla de diclorometano:pentano, cierre la llave.
Retire y cubra el baln. Retire las columnas de cromatografa y deseche apropiadamente la slica y
almina utilizadas.
Los extractos limpios de las muestras estn listos para ser concentrados para su anlisis
instrumental.
Agregue unos 4-5 ncleos de ebullicin al baln, conecte una columna de destilacin tipo Snyder de
tres bolas y coloque el baln en un bao de agua a 60-65C para concentrar el volumen a 10-15 mL.
Alternativamente, el extracto puede ser concentrado en un rotoevaporador cuidando que la
80
temperatura del bao de agua no sobrepase los 35C. Evite la contaminacin cruzada entre
muestras.
Agregue hexano, o permita evaporar espontneamente el exceso de solvente bajo campana, para
ajustar a aproximadamente 1 mL y proceda con el anlisis instrumental.
Anlisis Instrumental
Los conceptos que se discuten en las secciones siguientes son generalidades que aplican tanto
al anlisis de hidrocarburos alifticos y totales por cromatografa de gases asociada a un
detector de ionizacin de llama, como a la determinacin de plaguicidas clorados por
cromatografa de gases asociada a un detector de captura electrnica, o a la determinacin de
hidrocarburos aromticos policclicos mediante cromatografa de gases asociada a un detector
de espectrometra de masas. La nica excepcin es el control de la degradacin de plaguicidas
clorados en el puerto de inyeccin.
Lmites de deteccin
Los lmites de deteccin del mtodo para los anlisis rutinarios deben ser determinados antes
de comenzar los anlisis siguiendo las indicaciones proporcionadas en el Federal Register
(1984), resumidas en el cuadro siguiente, o similar. En su defecto se pueden utilizar las
concentraciones de la disolucin de calibracin ms baja usada en los anlisis, ajustada por el
peso de muestra extrada.
Definicin y procedimientos para la determinacin de los lmites de deteccin del mtodo
Definicin
El lmite de deteccin del mtodo (LDM) se define como la concentracin mnima de una substancia que
puede ser medida y reportada con una certeza del 99% de que la concentracin determinada es distinta de
cero. El LDM debe ser determinado a partir del anlisis de una matriz especfica que contiene el analito.
Aplicacin
Este mtodo esta designado para ser aplicado a una variedad de muestras que van desde el blanco del mtodo
a distintas matrices. El LDM para un mtodo analtico bien definido puede variar de acuerdo al tipo de
muestra y es esencial que todos los pasos analticos detallados en el mtodo analtico sean incluidos al
determinar el LDM.
Procedimiento
1.
2.
Estime el limite de deteccin del mtodo como el valor de la concentracin que corresponde a una
relacin seal:ruido del instrumento de 3 a 5
Previo a la determinacin del LDM, analice la muestra para determinar la concentracin nativa del
81
Si la concentracin determinada est comprendida entre dos a cinco veces el lmite de deteccin
estimado, proceda con el estudio como se indica a continuacin.
Una vez determinada la concentracin nativa del analito, analice un mnimo de siete alcuotas
(enriquezca adecuadamente si en la muestra no se detect el analito bajo estudio, o analice sin
agregados si la concentracin del analito resulto dentro de los lmites recomendados) y procese de
acuerdo al mtodo analtico. Incluya un blanco de mtodo en la batera analtica.
Si esta determinacin confirma que la concentracin del analito est dentro del rango
recomendado, prosiga con los clculos
Si esta determinacin indica que la concentracin del analito est por fuera del rango
recomendado, obtenga una nueva muestra y repita los pasos 2-3.
1
S =
X i2
(n - 1) i =1
donde:
5.
i =1
X i / n
s = S2
Xi, i=1 a n son los resultados analticos finales obtenidos de las alcuotas analizadas
es la suma de los valores X de i=1 a n
donde:
t(n-1, 1-=0.99) = valor t del test de Student apropiado para un nivel de confianza de 99% y un
desvo estndar con n-1 grados de libertad
6.
El intervalo de confianza del 95% para el LDM calculado en el punto 5 se calcula de acuerdo a las
siguientes ecuaciones derivadas de la distribucin Chi-cuadrado para los grados de libertad.
Alternativamente se puede pueden utilizar las concentraciones de la disolucin de calibracin ms baja usada
en los anlisis, ajustada por el peso de muestra extrada, para estimar los limites de deteccin. Por ejemplo,
LDM estimado =
C min 5 ng/mL
=
= 0,5 ng/g
PM 10 g/mL
82
donde:
Los controles de calidad requeridos para el anlisis cuantitativo de los compuestos de inters
estn resumidos en Tabla 1 y discutidos en detalle a continuacin. Estos criterios pueden ser
modificados por el encargado del laboratorio segn lo considere necesario.
Calibracin inicial del instrumental
La calibracin de todo instrumento debe realizarse antes de correr las muestras. En el caso del
anlisis de plaguicidas clorados es preferente realizar la curva de calibracin con un mnimo
de cuatro niveles utilizando una ecuacin cuadrtica o exponencial para compensar por el
limitado rango de linealidad del detector de captura electrnica. La calibracin es considerada
aceptable si presenta un coeficiente de correlacin (r) 0,9950 (i.e., R2 0,9900) para todos
los analitos presentes en las disoluciones. Si este criterio no se satisface para un analito en
particular y el mismo se encuentra presente en las muestras, la calibracin debe realizarse
nuevamente seguida del anlisis de las muestras. En el anlisis de hidrocarburos alifticos y
totales o hidrocarburos aromticos policclicos mediante un detector de ionizacin de llama o
de masas, respectivamente, muchos ms estables y de respuesta lineal comparados con el
detector de captura electrnica, es posible realizar, adems de las calibraciones anteriores, una
calibracin basada en los factores de respuesta relativos obtenidos de las disoluciones de
calibracin para demostrar la linealidad del detector utilizado.
Verificacin del mantenimiento de la calibracin inicial
La calibracin inicial del instrumental puede durar das o semanas pero su validad debe
controlarse al cada vez que se comienza una batera analtica y cada 12 horas, como mximo,
mediante la inyeccin de una disolucin con concentraciones comprendidas dentro del rango
de calibracin.
83
Blanco de instrumento
Control de degradacin en el
sistema
(anlisis de plaguicidas)
Recobre de estndares de
recuperacin
Blanco de laboratorio
Muestra duplicada
Blanco de laboratorio
enriquecido
Blanco de laboratorio
enriquecido en duplicado
Muestra enriquecida
Muestra enriquecida en
duplicado
Material de referencia
certificado
Criterio de Control de
Calidad
Frecuencia
Mnimo de 4 disoluciones de
calibracin con un desvo porcentual
relativo de los factores de respuesta
igual o menor a 15%
Mnimo de 4 disoluciones de
calibracin con un coeficiente de
correlacin >0,990
La degradacin de compuestos ms
lbiles no debe ser mayor al 15%
Recuperacin entre 40 a 120% de
todos los estndares de recuperacin
No ms de dos analitos detectados
en concentraciones >3 veces el
lmite de deteccin del mtodo
Diferencia porcentual relativa <30%
para todos los analitos de inters que
resulten >10 veces el lmite de
deteccin del mtodo
Recuperacin entre 40 a 120% para
el 80% de los analitos de inters
Diferencia porcentual relativa <30%
para todos los analitos de inters
Recuperacin entre 40 a 120% para
el 80% de los analitos de inters
Diferencia porcentual relativa <30%
para todos los analitos de inters
Recuperacin de los analitos de
inters, presentes en
concentraciones >10 veces el lmite
de deteccin del mtodo, dentro del
rango certificado
84
Secuencia analtica
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
Secuencia Analtica
I.D.
W1000
W1001
W1002
W1003
W1004
W1005
Q3645
Q3646
Q3647
Q3648
Q3649
Q3650
K1518
W1006
K1519
K1522
K1523
K1525
K1526
K1527
K1540
K1541
W1007
K1542
K1543
K1544
K1545
K1546
K1547
K1548
W1008
Clase
Disolvente
Disolucin de Calibracin 1
Disolucin de Calibracin 2
Disolucin de Calibracin 4
Disolucin de Calibracin 5
Disolucin de Calibracin 3 (control)
Blanco
Blanco enriquecido
Muestra duplicada
Muestra enriquecida
Muestra enriquecida en duplicado
Material de referencia certificado
Muestra 1
Disolucin de Calibracin 3 (control)
Muestra 2
Muestra 3
Muestra 4
Muestra 5
Muestra 6
Muestra 7
Muestra 8
Muestra 9
Cal 3 (control)
Muestra 10
Muestra 11
Muestra 12
Muestra 13
Muestra 14
Muestra 15
Muestra 16
Disolucin de Calibracin 3 (control)
Note que en este ejemplo se utilizan cuatro niveles de calibracin, dejndose el nivel
intermedio (i.e., Calibracin 3) como disolucin independiente para controlar la validez y
mantenimiento de la calibracin inicial durante la corrida analtica.
Identificacin cualitativa de los compuestos de inters
85
Todas las muestras, incluyendo aquellas introducidas por el laboratorio y destinadas al control
de calidad, son sembradas con las cantidades adecuadas de los estndares de recuperacin
apropiados para el anlisis correspondiente. Estos estndares son utilizados para determinar la
concentracin de los analitos de inters y para evaluar el comportamiento del mtodo. Esto se
hace utilizando como referencia a uno o ms estndares internos. Distintos anlisis pueden
requerir diferentes estndares de recuperacin e internos y los lmites de recuperacin
aceptables para estndares de recuperacin son definidos durante el desarrollo del mtodo.
86
Muestra duplicada
87
88
Los porcentajes de recobro de los estndares de recuperacin en los extractos de muestras son
estimados comparando la respuesta relativa del estndar de recuperacin en la muestra con la
obtenida de las disoluciones de calibracin. El laboratorio deber tomar las acciones
correctivas apropiadas cada vez que la recuperacin de los estndares de recuperacin estn
fuera del rango buscado (ver: Control de calidad analtica, Recobre de estndares de
recuperacin). En general, se considera aceptable una recuperacin comprendida entre 40120% calculada como:
Rec. de Estndares (% ) =
donde:
A reM A eiC
*
*100
A eiM A reC
(1)
Rec. de Estndares (% ) =
donde:
CreM
CeiM
C reC
CeiC
89
(2)
(C C )
md
Diferencia Porcentual Relativa (DPR) = mo
* 100
C mo + C md
donde:
Cmo
Cmd
(3)
Una buena recuperacin de los analitos agregados a las muestras enriquecidas, o duplicacin
de concentraciones certificadas en materiales de referencia, son indicativos de una buena
tcnica de laboratorio. El porcentaje de recuperacin de los distintos analitos sembrados en
muestras enriquecidas es calculada utilizando la ecuacin:
(C * M me Cmo * M mo )
Porcentaje de recuperacin = me
*100
A ad
donde:
(4)
90
Introduccin
Aldrin
alpha-clordano
Dieldrin
4,4'-DDD
4,4'-DDE
4,4'-DDT
Endrin
Endosulfan I
Endosulfan II
Endosulfan sulfato
Endrin aldehido
Endrin cetona
alpha-HCH
Plaguicidas clorados
adicionales
Gamma-clordano
Cis-nonacloro
Trans-nonacloro
2,4'-DDD
beta-HCH
delta-HCH
gamma-HCH (Lindano)
Heptacloro
Heptacloro epxido
Metoxicloro
2,4'-DDE
2,4'-DDT
Equipamiento y materiales
Como se ha mencionado, las muestras dedicadas al control de calidad (e.g., blanco, muestra
en duplicado, muestra enriquecida, y material de referencia) y muestras que componen el lote
analtico son analizadas como una sola secuencia analtica con las disoluciones de calibracin
o de control de la calibracin (ver Control de calidad analtica, Calibracin inicial del
instrumental y Verificacin del mantenimiento de la calibracin inicial). Antes de comenzar
la secuencia analtica, se debe inyectar 1 2 L de hexano (ver: Control de calidad, Blanco
del instrumento) seguido de similar volumen de la disolucin de control de la degradacin
(ver: Control de calidad, Control de la degradacin en el sistema), para comprobar que el
sistema est libre de contaminantes y no se observa degradacin de los compuestos ms
lbiles en el puerto de inyeccin. El anlisis de las muestras se hace inyectando de 1 a 4 L de
los extractos.
Es importante destacar que las muestras dedicadas al control de calidad dentro de un lote
analtico deben ser evaluadas en conjunto ya que el incumplimiento de los criterios
preestablecidos en una de esas muestras no significa necesariamente el rechazo de todas las
muestras en esa extraccin.
Control de degradacin
La disolucin utilizada para comprobar que el sistema no presenta sitios activos que puedan
degradar a los analitos ms lbiles contiene compuestos como el DDT y Aldrin, conocidos
por su fcil degradacin en el puerto de inyeccin bajo ciertas condiciones (ver: Control de
calidad, Control de la degradacin en el sistema). Esta disolucin se prepara pesando las
cantidades apropiadas de los compuestos puros, transferidos cuantitativamente a un matraz
volumtrico, y diluyendo con hexano o disolvente similar no clorado para lograr
concentraciones similares a las intermedias de la curva de calibracin. Esta disolucin debe
contener, en su forma final y lista para utilizar, las cantidades adecuadas de estndares de
recuperacin e internos.
Control de degradacin Paso a paso
El DDT y endrin pueden ser fcilmente degradado en el puerto de inyeccin del cromatgrafo si el
mismo, o el principio de la columna, estn sucios. Esta suciedad resulta de la acumulacin de residuos
de alto punto de ebullicin de muestras analizadas previamente.
Inyecte 2 L de esta disolucin y analice utilizando el mtodo que va a utilizar para el anlisis de los
extractos de las muestras.
Registre la presencia y cantidades de los productos de degradacin del 4,4-DDT (4,4-DDE y 4,4DDD) y endrin (endrin cetona y endrin aldehido).
92
(rea
de
endrin
+
rea
de
endrin
cetona
+
rea
de
endrin
aldehido)
Si la degradacin de cualquiera de los dos analitos es superior al 15% se necesita corregir el problema
antes de proceder con la calibracin y anlisis de los extractos de las muestras.
Figura 2.
93
donde:
(5)
x
= cantidad del analito de inters en ng
b0, b1, y b2 = coeficientes de la ecuacin cuadrtica. Si la ecuacin es forzada por
cero, entonces b0 = 0
Y
= rea modificada del analito de inters definido como:
A
Y = a
A re
* C re
(6)
donde:
Ecuacin exponencial
Como una alternativa a la ecuacin cuadrtica, se puede utilizar una ecuacin exponencial de
la forma:
donde:
Y = A XB
Y
X
A
B
=
=
=
=
(7)
Calibracin inicial
La calibracin inicial debe controlarse cada 10-12 muestras o cada 12 horas como mximo
mediante la inyeccin de una disolucin preparada para tal fin o reinyeccin de uno de los
niveles intermedios de las disoluciones de calibracin. Se considera que la calibracin inicial
es an aceptable si las concentraciones determinadas para esta disolucin no difieren ms que
un 25% del valor nominal.
Determinacin cuantitativa de los analitos de inters
b1 + b12 4 b2 (b0 Y )
2 b2
(8)
En el caso de utilizar una ecuacin de calibracin tipo exponencial (7), la misma se puede
expresar como:
A
Ca
= A a
C re
Are
donde:
Ca
Cre
Aa
Are
=
=
=
=
(9)
donde:
A
B
Aa
Are
=
=
=
=
A M
= A a * re
Mt
Are
B
pendiente de la ecuacin
coeficiente exponencial
rea del analito que se mide
rea del estndar de recuperacin utilizado
95
(10)
Mre
Mt
Las concentraciones de los analitos de inters se basan en los factores de respuestas de esos
compuestos en las disoluciones de calibracin. En general, los sistemas cromatogrficos
modernos poseen programas de computadoras que permiten realizar estos clculos de manera
casi automtica. No obstante es importante entender los conceptos que se utilizan en estos
clculos para poder reproducir, en forma manual y como un control de calidad adicional,
algunos de los resultados producidos por el software. Es prudente confirmar las
concentraciones calculadas con clculos independientes. Varias concentraciones
seleccionadas al azar deben ser confirmadas utilizando, por ejemplo, la ecuacin 8 10 segn
sea el tipo de calibracin realizada, en una hoja de clculo comercial (Excel o similar) y
comparadas con los valores reportados. Ambas concentraciones deben coincidir exactamente
excepto por errores de redondeo.
Ejemplo de clculos de concentraciones
La siguiente informacin es recopilada del libro del laboratorio y del impreso del anlisis utilizando el software
del cromatgrafo de gases. Para generalizar el ejemplo, se omiten los nombres del analito, estndar de
recuperacin y estndar interno.
Cdigo de la muestra: ................................................................ F99999
Peso de la muestra: .................................................................... 5.211 g
Masa de estndar de recuperacin adicionado:.......................... 90.8 ng
Volumen final: ........................................................................... 1.0 mL
concentracin de estndar de recuperacin (Cre) ....................... 0,0000908 g mL-1
Coeficientes de la curva de calibracin:
b0 = 0.0000
b1 = 0.4814
b2 = -205.9000
rea del estndar de recuperacin (Asu): ................................... 228.95
rea del analito A (Aa)........................................................... 24.211
Valor calculado por el software.............................................. 3.863 ng g-1
Utilizando la ecuacin:
x=
donde:
b1 + b12 4 b 2 (b 0 Y)
(3)
2 b2
A
Y = a
A re
* C re
(2)
24.211
-1
-1
Y =
* 0,0000908 g L = 0,000009602 g L
228.95
[Analito A ] =
[Analito A ] =
2 * (205,9)
= 0,000020119 g L1
La diferencia porcentual relativa entre la concentracin obtenida mediante el uso del software del cromatgrafo
96
de gas y el calor obtenido manualmente deben coincidir exactamente excepto por errores de redondeo.
(3,863 ng g -1 3,861 ng g -1 )
Diferencia Porcentual Relativa =
* 100 = 0,05%
-1
-1
3,863
ng
g
+
3,861
ng
g
Dilucin de un extracto
Antes de hacer la dilucin, asegrese que el volumen del extracto original es exactamente 1 mL,
ignorando la cantidad inyectada en el cromatgrafo (i.e., 1 2 L).
Dependiendo de la dilucin requerida, tome el volumen adecuado y exacto del extracto original y
colquelo en un nuevo vial. Por ejemplo, si la muestra necesita ser diluida 10 veces, tome
exactamente 0,100 mL los que se diluirn a aproximadamente 1 mL (ver Tabla a continuacin).
Siembre con 0,100 mL de la disolucin de standards de recuperacin.
Dilucin
Requerida
Volumen de
extracto original
Volumen de disolucin
de estndares de
recuperacin
Volumen de
disolvente(2)
Volumen
final(2)
5 veces
0,200 mL
0,100 mL
~ 0,700 mL
~ 1 mL
10 veces
0,100 mL
0,100 mL
~ 0,800 mL
~ 1 mL
20 veces
0,050 mL(1)
0,100 mL
~ 0,850 mL
~ 1 mL
50 veces
0,020 mL(1)
0,100 mL
~ 0,880 mL
~ 1 mL
100 veces
0,010 mL(1)
0,100 mL
~ 0,890 mL
~ 1 mL
500 veces
0,002 mL(1)
0,100 mL
~ 0,898 mL
~ 1 mL
(1)
es aconsejable realizar una dilucin intermedia.
(2)
al utilizar los estndares de recuperacin para determinar la concentracin de los analitos de
inters se produce una compensacin interna y no es necesario llevar a volumen exacto.
97
Existen varios pasos simples que pueden ayudar a mantener el buen funcionamiento del
cromatgrafo de gas y su detector de captura electrnica. A saber:
Documentacin
Al momento de recibir las muestras para su anlisis instrumental, el analista debe tambin
recibir, en un folder debidamente identificado, copias de las hojas del laboratorio que
corresponda al lote analtico y en donde se documenta el proceso de las muestras incluyendo
los problemas encontrados, accidentes ocurridos y/o comentarios relevantes (e.g., posibilidad
de doble adicin de estndares de recuperacin, perdidas de muestra por derrames,
evaporacin del extracto a sequedad, etc.). De existir, tambin se debe incluir en el folder la
documentacin de iniciacin o pedido de anlisis donde se identifica la persona responsable
del proyecto que pueda responder ante cualquier duda (e.g., tipo de anlisis a realizar,
cantidad de muestra a extraer, volumen de estndares de recuperacin e internos a sembrar y
reporte final de las concentraciones).
Al realizar el anlisis instrumental, el analista debe agregar a este folder copia de la secuencia
analtica, informacin sobre el blanco del instrumento, disolucin de control de la
degradacin, calibracin del instrumento, impresiones de los cromatogramas y sus anlisis y
copia del reporte finalizado. Este reporte final deber incluir, adems de los resultados de las
muestras analizadas, informacin sobre las muestras de control de calidad (blanco de
98
Las concentraciones son generalmente reportadas, con tres decimales, como ng g-1 peso seco.
99
Introduccin
Los alcanos normales, de C10 a C35, pristano y fitano, son cuantitativamente determinados
mediante la tcnica de cromatografa de gases asociada a un detector de ionizacin de llama
(GC/FID, por sus siglas en ingls). Esta tcnica es muy sensible y capaz de determinar estos
compuestos contaminantes a niveles trazas (e.g., ng g-1 o pg g-1). El mtodo que se describe es
aplicable a extractos de muestras de sedimentos luego de la limpieza apropiada.
Los hidrocarburos alifticos de inters para este estudio se limitan a:
Hidrocarburos
Alifaticos
n-Decano (n-C10)
n-Undecano (n-C11)
n-Dodecano (n-C12)
n-Tridecano n-(C13)
n-Tetradecano (n-C14)
n-Pentadecano (n-C15)
n-Hexadecano (n-C16)
n-Heptadecano (n-C17)
n-Octadecano (n-C18)
n-Nonadecano (n-C19)
n-Eicosano (n-C20)
n-Heneicosano (n-C21)
n-Docosano (n-C22)
n-Tricosano (n-C23)
n-Tetracosano (n-C24)
n-Pentacosano (n-C25)
n-Hexacosano (n-C26)
n-Heptacosano (n-C27)
n-Octacosano (n-C28)
n-Nonacosano (n-C29)
n-Triacontano (n-C30)
n-Hentriacontano (n-C31)
n-Dotriacontano (n-C32)
n-Tritriacontano (n-C33)
n-Tetratriacontano (n-C34)
n-Pentatriacontano (n-C35)
Pristano
Fitano
Equipamiento y materiales
Como se ha mencionado, las muestras dedicadas al control de calidad (e.g., blanco, muestra
en duplicado, muestra enriquecida, y material de referencia) y muestras que componen el lote
analtico son analizadas como una sola secuencia analtica con las disoluciones de calibracin
o de control de la calibracin (ver Control de calidad analtica, Calibracin inicial del
instrumental y Verificacin del mantenimiento de la calibracin inicial). Antes de comenzar
la secuencia analtica, se debe inyectar 1 2 L de hexano (ver: Control de calidad, Blanco
del instrumento) para comprobar que el sistema est libre de contaminantes. El anlisis de las
muestras se hace inyectando de 1 a 4 L de los extractos.
Es importante destacar que las muestras dedicadas al control de calidad dentro de un lote
analtico deben ser evaluadas en conjunto ya que el incumplimiento de los criterios
preestablecidos en una de esas muestras no significa necesariamente el rechazo de todas las
muestras en esa extraccin.
Identificacin cualitativa de los analitos de inters
101
Figura 3.
FRR =
donde:
FFR
Aa
Are
Ca
Csu
=
=
=
=
=
Aa
Ca
A su
C su
A C
FRR = a re
A re C a
102
(11)
Calibracin inicial
La calibracin inicial debe controlarse cada 10-12 muestras o cada 12 horas como mximo
mediante la inyeccin de una disolucin preparada para tal fin o reinyeccin de uno de los
niveles intermedios de las disoluciones de calibracin. Se considera que la calibracin inicial
es an aceptable si las concentraciones determinadas para esta disolucin no difieren ms que
un 25% del valor nominal.
Determinacin cuantitativa de los analitos de inters
FFR
n
j=1
(12)
donde:
FRR
= factor de respuesta relativo promedio
n
= total de disoluciones de calibracin
j
= numero de disolucin
Para el clculo de concentraciones, basado en estos factores de respuestas relativos:
A a C re
C =
A FRR M
t
re
donde:
C
Aa
Cre
Are
FRR
Mt
=
=
=
=
=
=
103
(13)
A c M re
MCNR =
A
FRR
M
t
re
donde:
MCNR
Ac
Mre
Are
FRR
Mt
(14)
A tc M re
[HcT] =
A
FRR
M
t
re
donde:
[HcT]
Atc
Mre
Are
FRR
Mt
(15)
104
Figura 4.
105
Existen varios pasos simples que pueden ayudar a mantener el buen funcionamiento del
cromatgrafo de gas y su detector de ionizacin de llama. A saber:
Documentacin
La documentacin que debe recibir el laboratorio junto a los extractos de las muestras a
analizar, as como la documentacin que el analista debe agregar a la carpeta correspondiente
se discute en la seccin correspondiente al anlisis de plaguicidas clorados (ver
Documentacin).
Reporte de concentraciones
Las concentraciones son generalmente reportadas, con tres decimales, como ng g-1 peso seco.
106
Introduccin
Acenafteno
Acenaftileno
Antraceno
Benzo[a]antraceno
Benzo[a]pireno
Benzo[e]pireno
Benzo[b]fluoranteno
Benzo[k]fluoranteno
Benzo[g,h,i]perileno
Bifenilo
Criseno
Dibenzo[a,h]antraceno
Dibenzotiofeno
Fenantreno
Fluoranteno
Fluoreno
Indeno[1,2,3c,d]pireno
Naftaleno
Perileno
Pireno
1-metil Naftaleno
2-metil Naftaleno
2,6-dimetil Naftaleno
2,3,5-trimetil Naftaleno1-metil
Fenantreno
Equipamiento y materiales
Cromatgrafo de gases asociado a un detector de espectrometra de masas
Como se ha mencionado, las muestras dedicadas al control de calidad (e.g., blanco, muestra
en duplicado, muestra enriquecida, y material de referencia) y muestras que componen el lote
analtico son analizadas como una sola secuencia analtica con las disoluciones de calibracin
o de control de la calibracin (ver Control de calidad analtica, Calibracin inicial del
instrumental y Verificacin del mantenimiento de la calibracin inicial). Antes de comenzar
la secuencia analtica, se debe correr un blanco del instrumento para comprobar que el sistema
est libre de contaminantes. El anlisis de las muestras se hace inyectando de 1 a 4 L de los
extractos.
Es importante destacar que las muestras dedicadas al control de calidad dentro de un lote
analtico deben ser evaluadas en conjunto ya que el incumplimiento de los criterios
preestablecidos en una de esas muestras no significa necesariamente el rechazo de todas las
muestras en esa extraccin.
Identificacin cualitativa de los analitos de inters
108
109
In de
Cuantificacion
136
128
142
142
156
170
154
152
164
154
176
166
184
188
178
192
178
202
202
228
240
228
252
252
252
264
252
252
276
278
276
In de
Confirmacin
134
127
141
141
141
155
153
153
162
153
174
165
152
184
176
191
176
101
101
226
236
226
253
253
253
260
253
253
277
279
277
15
15
80
80
75
95
35
15
95
100
85
95
15
15
20
55
20
15
15
20
30
30
30
30
30
20
30
20
25
25
25
FRR =
donde:
FFR
Aa
Ca
A su
C su
A C
FRR = a re
A re C a
(16)
Aa
Are
Ca
Csu
Calibracin inicial
La calibracin inicial debe controlarse cada 10-12 muestras o cada 12 horas como mximo
mediante la inyeccin de una disolucin preparada para tal fin o reinyeccin de uno de los
niveles intermedios de las disoluciones de calibracin. Se considera que la calibracin inicial
es an aceptable si las concentraciones determinadas para esta disolucin no difieren ms que
un 25% del valor nominal.
Determinacin cuantitativa de los analitos de inters
FFR
n
j=1
(17)
donde:
FRR
= factor de respuesta relativo promedio
n
= total de disoluciones de calibracin
j
= numero de disolucin
Para el clculo de concentraciones, basado en estos factores de respuestas relativos:
A a C re
C =
A FRR M
t
re
donde:
C
Aa
Cre
Are
FRR
Mt
=
=
=
=
111
(18)
Existen varios pasos simples que pueden ayudar a mantener el buen funcionamiento del
cromatgrafo de gas y su espectrmetro de masas. Para el buen mantenimiento del
cromatgrafo de gases se debe:
Enjuagar la jeringa con el disolvente apropiado despus de cada inyeccin. Esto puede
hacerse manualmente o mediante el uso del inyector automtico.
Cambiarse el tanque del gas de arrastre (helio) antes de que est vaco para evitar
suciedad que pueda incrementar el ruido de base o contaminar columna y/o detector. En
general, es preferible cambiar el tanque cuando la presin en el mismo cae por debajo de
las 500 psi.
112
Limpiar la fuente, incluyendo el reemplazo del filamento de emisin, cada vez que sea
necesario.
La documentacin que debe recibir el laboratorio junto a los extractos de las muestras a
analizar, as como la documentacin que el analista debe agregar a la carpeta correspondiente
se discute en la seccin correspondiente al anlisis de plaguicidas clorados (ver
Documentacin).
Reporte de concentraciones
Las concentraciones son generalmente reportadas, con tres decimales, como ng g-1 peso seco.
4.9.4. Preparacin de las disoluciones de siembra (estndares de recuperacin, internos
y enriquecimiento)
Los estndares internos se agregan a todos los extractos a analizar y de control de calidad
(e.g., blanco, muestra duplicada, blanco enriquecido, muestra enriquecida, muestra
enriquecida en duplicado, material de referencia) antes de su anlisis por cromatografa. El
uso de estndares interno permite conocer la magnitud de las prdidas sufridas durante el
procesamiento de la batera de muestras en el laboratorio y es independiente del volumen final
del extracto y volumen del mismo inyectado en el cromatgrafo.
113
114
PLAGUICIDAS CLORADOS
4,4-dibromooctafluorobifenilo
2,2,4,5,6-pentaclorobifenilo (PCB 103)
2,2,3,3,4,5,5,6-octaclorobifenilo (PCB 198)
CAS#
Concentracin
CAS#
Concentracin
CAS#
Concentracin
010386-84-2
060145-21-3
068194-17-2
200,01,0 g/mL
200,01,0 g/mL
200,01,0 g/mL
2,4,5,6-tetracloro-m-xileno (TCMX)
010386-84-2
NA
Aldrin
Alpha-clordano
Gamma-clordano
Dieldrin
Endusulfan I
Endosulfan II
Endosulfan sulfato
Endrin
Endrin aldehido
Alpha-HCH
Beta-HCH
Delta-HCH
Gamma-HCH
Heptacloro
Heptacloro epxido
Metoxicloro
Cis-nonaclor
Trans-nonacloro
2,4-DDD
2,4-DDE
2,4-DDT
4,4-DDD
4,4-DDE
4,4-DDT
Endrin cetona
000309-00-2
005103-71-9
005103-74-2
000060-57-1
000959-98-8
033213-65-9
001031-07-8
00072-20-8
007421-93-4
000319-84-6
000319-85-7
000319-86-8
000058-89-9
000076-44-8
001024-57-3
00072-43-5
005103-73-1
039765-80-5
000053-19-0
003424-82-6
000789-02-6
000072-54-8
000072-55-9
000050-29-3
053494-70-5
115
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
Volumen de disolucin
de analitos
Volumen de disolucin
Volumen de disolucin
Volumen de
de estndares de
de estndar interno
solvente
recuperacin
(Slido)
CUS-9736
CUS-9738
(2000 g/mL)
(200 g/mL)
(200 g/mL)
0,050 mL (a)
1,000 mL (b)
0,500 mL (c)
6,450 mL
0,200 mL (a)
1,000 mL (b)
0,500 mL (c)
6,300 mL
4,000 mL (a)
0,050 mL
5,000 mL (c)
90,700 mL
0,800 mL (a)
1,000 mL (b)
0,500 mL (c)
5,700 mL
2,000 mL (a)
1,000 mL (b)
0,500 mL (c)
4,500 mL
Requiere dilucin previa de 1:200 (e.g., 0,050 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Requiere dilucin previa de 1:200 (e.g., 0,050 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Requiere dilucin previa de 1:1000 (e.g., 0,010 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Volumen
Final
10,000 mL
10,000 mL
100,000 mL
10,000 mL
10,000 mL
Note que la solucin de calibracin a nivel 3 se prepara en mayor volumen para ser utilizada
cada vez que se requiera controlar la calibracin del cromatgrafo. Las concentraciones
resultantes para los analitos, estndares de recuperacin y estndar interno, en cada solucin
de calibracin, son las que se indican a continuacin:
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5
Concentracin de cada
analito
(ng/mL)
5
20
40
80
200
Concentracin de cada
estndar de recuperacin
(ng/mL)
100
100
100
100
100
Concentracin del
estndar interno
(ng/mL)
100
100
100
100
100
116
Estndares de recuperacin
[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 200 g/mL * 1000 ng/mL * 0,250 mL = 1000 ng/mL
1 g/mL 50 mL
Uso
1 mL
Estndar interno
[Estndar Interno] (ng/mL) = 2000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,025 mL = 1000 ng/mL
1 g/mL 50 mL
Uso
1 mL
Analitos
Uso
117
1 mL
n-Dodecano-d26
n-Eicosano-d42
n-Tetracosano-d50
CAS#
Concentracin
CAS#
Concentracin
1000 g/mL
1000 g/mL
1000 g/mL
n-Hexadecano-d34
1000 g/mL
CAS#
n-Decano
n-Undecano
n-Dodecano
n-Tridecano
n-Tetradecano
n-Pentadecano
n-Hexadecano
n-Heptadecano
n-Octadecano
n-Nonadecano
n-Eicosano
n-Heneicosano
n-Docosano
n-Tricosano
n-Tetracosano
n-Pentacosano
n-Hexacosano
n-Heptacosano
n-Octacosano
n-Nonacosano
n-Triacontano
n-Hentriacontano
n-Dotriacontano
n-Tritriacontano
n-Tetratriacontano
n-Pentatriacontano
Pristano
Fitano
000124-18-5
001120-21-4
000112-40-3
000629-50-5
000629-59-4
000629-62-9
000544-76-3
000629-78-7
000593-45-3
000629-92-5
000112-95-8
000629-94-7
000629-97-0
000638-67-5
000646-31-1
000629-99-2
000630-01-3
000593-49-7
000630-02-4
000630-03-5
000638-68-6
000630-04-6
000544-85-4
000630-05-7
014167-59-0
000630-07-9
001921-70-6
000638-36-8
118
Concentracin
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
Disoluciones de Calibracin
Soluciones
de
Calibracin
Volumen de disolucin
de analitos
Volumen de
solvente
Volumen
Final
(200 g/mL)
(1000 g/mL)
Nivel 1
1,000 mL (a)
0,500 mL (b)
8,500 mL
10,000 mL
Nivel 2
5,000 mL (a)
0,500 mL (b)
4,500 mL
10,000 mL
Nivel 3
0,625 mL
1,250 mL (b)
23,125 mL
25,000 mL
Nivel 4
0,750 mL
0,500 mL (b)
8,500 mL
10,000 mL
Nivel 5
2,000 mL
0,500 mL (b)
7,000 mL
10,000 mL
(a) Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
(b) Requiere dilucin previa de 1:25 de cada una de las soluciones en un mismo matraz (e.g., 0,200 mL de cada disolucin llevados
exactamente a 5 mL).
Note que la solucin de calibracin a nivel 3 se prepara en mayor volumen para ser utilizada
cada vez que se requiera controlar la calibracin del cromatgrafo. Las concentraciones
resultantes para los analitos, estndares de recuperacin y estndar interno, en cada solucin
de calibracin, son las que se indican a continuacin:
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5
Concentracin de cada
analito
(ng/mL)
200
1000
5000
15000
40000
Concentracin de cada
estndar de recuperacin
(ng/mL)
2000
2000
2000
2000
2000
Concentracin del
estndar interno
(ng/mL)
2000
2000
2000
2000
2000
119
Estndares de recuperacin
[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,500 mL = 20000 ng/mL
1 g/mL 25 mL
Uso
1 mL
Estndar interno
[Estndar Interno] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,500 mL = 20000 ng/mL
1 g/mL 25 mL
Uso
1 mL
Analitos
5 mL
Uso
120
1 mL
HIDROCARBUROS AROMTICOS
d8-Naftaleno
d10-Acenafteno
d10-Fenantreno
d12-Criseno
CAS#
Concentracin
CAS#
Concentracin
001146-65-2
015067-26-2
001517-22-2
001719-03-5
10025 g/mL
10005 g/mL
10005 g/mL
10005 g/mL
d10-Fluoreno
d12-Benz(a)pireno
081103-79-9
063466-71-7
10005 g/mL
10005 g/mL
CAS#
Acenafteno
Acenaftileno
Antraceno
Benzo[a]antraceno
Benzo[a]pireno
Benzo[b]fluoranteno
Benzo[e]pireno
Benzo[g,h,i]perileno
Benzo[k]fluoranteno
Bifenilo
Criseno
Dibenzo[a,h]antraceno
Dibenzotiofeno
Fluoranteno
Fluoreno
Indeno[1,2,3-c,d]pireno
Naftaleno
1-metil Naftaleno
2-metil Naftaleno
2,6 dimetil Naftaleno
1,6,7 trimetil Naftaleno
Perileno
Fenantreno
1 metil Fenantreno
Pireno
000083-32-9
000208-96-8
000120-12-7
000056-55-3
000050-32-8
000205-99-2
000192-97-2
000191-24-2
000207-08-9
000092-52-4
000218-01-9
000053-70-3
000132-65-0
000206-44-0
000086-73-7
000193-39-5
000091-20-3
000090-12-0
000091-57-6
000581-42-0
002245-38-7
000198-55-0
000085-01-8
000832-69-9
000129-00-0
121
Concentracin
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
Disoluciones de Calibracin
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5
(a)
(b)
Volumen de disolucin
de analitos
Volumen de disolucin
Volumen de disolucin
Volumen de
de estndares de
de estndares internos
solvente
recuperacin
CUS-9735
CUS-9737
CUS-9739
(2000 g/mL)
(1000 g/mL)
(1000 g/mL)
(mL)
0,100 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
96,900 mL
0,500 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
96,500 mL
1,250 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
95,750 mL
2,500 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
94,500 mL
5,000 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
92,000 mL
Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Volumen
Final
(mL)
100,000 mL
100,000 mL
100,000 mL
100,000 mL
100,000 mL
Concentracin de cada
analito
(ng/mL)
20
100
250
500
1000
Concentracin de cada
estndar de recuperacin
(ng/mL)
100
100
100
100
100
Concentracin de cada
estndar interno
(ng/mL)
100
100
100
100
100
122
Estndares de recuperacin
[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,100 mL = 1000 ng/mL
1 g/mL 100 mL
Uso
Estndares internos
1 mL
[Estndar Interno] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,100 mL = 1000 ng/mL
1 g/mL 100 mL
Uso
1 mL
Analitos
Uso
123
1 mL
Disoluciones de Calibracin
Soluciones de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5
(a)
(b)
Volumen de disolucin
de analitos
Volumen de disolucin
Volumen de disolucin
Volumen de
de estndares de
de estndares internos
solvente
recuperacin
CUS-9735
CUS-9737
CUS-9739
(2000 g/mL)
(1000 g/mL)
(1000 g/mL)
(mL)
0,100 mL (a)
2,000 mL (b)
2,000 mL (b)
7,900 mL
0,500 mL (a)
2,000 mL (b)
2,000 mL (b)
7,500 mL
0,250 mL
0,200 mL
0,200 mL
99,350 mL
0,100 mL
2,000 mL (b)
2,000 mL (b)
7,900 mL
0,250 mL
2,000 mL (b)
2,000 mL (b)
7,750 mL
Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Volumen
Final
(mL)
10,000 mL
10,000 mL
100,000 mL
10,000 mL
10,000 mL
Note que la solucin de calibracin a nivel 3 se prepara en mayor volumen para ser utilizada
cada vez que se requiera controlar la calibracin del cromatgrafo. Las concentraciones
resultantes para los analitos, estndares re recuperacin y estndares internos, en cada
solucin de calibracin, son las que se indican a continuacin:
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5
Concentracin de cada
analito
(ng/mL)
200
1000
5000
20000
50000
Concentracin de cada
estndar de recuperacin
(ng/mL)
2000
2000
2000
2000
2000
Concentracin de cada
estndar internos
(ng/mL)
2000
2000
2000
2000
2000
124
Estndares de recuperacin
[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,500 mL = 20000 ng/mL
1 g/mL 25 mL
Uso
1 mL
Estndares internos
[Estndar Interno] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,500 mL = 20000 ng/mL
1 g/mL 25 mL
Uso:
1 mL
Analitos
Uso
125
1 mL
Esta seccin ejemplifica la obtencin de las curvas de calibracin y uso de las ecuaciones de
clculos. A modo de ejemplo comparativo se muestran los procedimientos a seguir con el
agregado de estndares de recuperacin y cuatro niveles de calibracin (en este caso, el nivel
medio se utiliza como disolucin independiente para controlar la calibracin).
Independientemente del mtodo utilizado para realizar la calibracin del cromatgrafo de
gases, la informacin resultar de la forma:
126
Disolucin de
Calibracin-Nivel 1
Disolucin de
Calibracin-Nivel 2
Disolucin de
Calibracin-Nivel 4
Disolucin de
Calibracin-Nivel 5
rea Analito X
rea Relativa =
rea Est. Rec.
Conc. Analito X
Conc. Relativa =
(5200/1800) = 2,8889
(2392/2049) = 1,1674
(442/1469) = 0,3009
(124/1625) = 0,0763
Curva de Calibracin
Concentraciones Relativas
2.500
2.000
1.500
1.000
0.500
2
0.000
0.000
R = 1.0000
0.500
1.000
1.500
2.000
2.500
3.000
Areas Relativas
Y = Concentracin Relativa
Y = A XB
X = rea Relativa
En este ejemplo, los valores de ajuste de curva A y B son 0,6811 y 1,016, respectivamente,
con un R2 de 1,0000.
127
[Analito] (ng mL )
[Est. Subrogado] (ng mL
-1
-1
(1)
)B
(2)
rea Analito
= A *
rea Est. Subrogado
(3)
rea Analito
Volumen (mL)
= A *
Masa Est. Subrogado (ng)
rea Est. Subrogado
Volumen (mL)
(4)
Volumen (mL)
Volumen (mL)
(5)
rea Analito
Volumen (mL)
= A*
*
(mL)
Volumen
Volumen (mL)
(6)
Volumen (mL)
[Analito] (ng g
-1
[Analito] (ng g
-1
peso seco)
*
= A *
*
rea
Est.
Subrogado
Peso
Muestra
(g)
Peso
Seco
(%)
(7)
(8)
Ejemplos de clculos
Muestra de
Peso de muestra
Porcentaje de peso seco
Estndar de recuperacin agregado
[Estndar de recuperacin]
Volumen final del extracto
Estndar interno agregado
[Estndar interno]
=
=
=
=
=
=
=
=
sedimento
10,82 gramos de peso hmedo
12,9%
0,100 mL
1000 ng mL-1
~ 1 mL
0,100 mL
1000 ng mL-1
128
Analito X
.
E.I.
E.S.
.
rea =
3200
2285
4046
[Analito] (ng g
-1
peso seco) = A *
*
Reemplazando en la ecuacin:
[Analito] (ng g
-1
peso seco)
4046
= 0,6811*
2285
1,016
En aquellas muestras donde se presupone una baja concentracin de los analitos de inters, se
puede concentrar el volumen final del extracto anterior a un volumen menor (por ejemplo a
aproximadamente 0,5 mL) para aumentar la seal del cromatgrafo de los mismos. En este
caso se debe ajustar adecuadamente (e.g., disminuir a la mitad) el agregado de estndares de
recuperacin e internos para obtener una respuesta similar a la observada para estos
estndares en los cromatogramas de calibracin y facilitar as una rpida comparacin visual
de la recuperacin, calidad de la inyeccin, etc.:
Ejemplo B:
Muestra de
Peso de muestra
Porcentaje de peso seco
Estndar de recuperacin agregado
[Estndar de recuperacin]
Volumen final del extracto
Estndar interno agregado
[Estndar interno]
=
=
=
=
=
=
=
=
sedimento
10,82 gramos de peso hmedo
12,9%
0,050 mL
1000 ng mL-1
~0,500 mL
0,050 mL
1000 ng mL-1
129
Analito X
E.I.
rea =
[Analito] (ng g
-1
peso seco)
3260
E.S
2340
8012
= 0,6811*
2340
1,016
8012
50 (ng) 100
*
*
= 85,20 ng g -1 peso seco
10,82 (g) 12,9
Disolucin de Calibracin-Nivel 1
Disolucin de Calibracin-Nivel 2
Disolucin de Calibracin-Nivel 4
Disolucin de Calibracin-Nivel 5
Promedio
Ejemplo A (vol. = 1,0 mL)
Ejemplo B (vol. = 0,5 mL)
rea
Estndar Interno
(E.I.)
2500
2933
2104
2304
3200
3260
130
rea
Estndar de
Recuperacin (E.R.)
1800
2049
1469
1625
2285
2340
Razn
(rea E.R./rea E.I)
0,7200
0,6986
0,6981
0,7053
0,7055
0,7141
0,7178
0,7141
* 100 = 101.21%
0,7055
(Ejemplo A)
0,7178
* 100 = 101,74%
0,7055
(Ejemplo B)
En general, el reporte final debe expresar estas concentraciones, con tres decimales despus
de la coma, en ng g-1 peso seco. Los calificadores que comnmente se utilizan para
caracterizar los datos son:
Tabla 3.
Calificador
ND
No detectado
NA
No aplicable
Interferencia
Q
B
d
EC
=
=
Dilucin
El laboratorio debe poseer un sistema de acciones correctivas que se active ante toda situacin
que afecta la calidad de los datos y no se cumplan los objetivos de precisin y exactitud
detallados en Tabla 4.
131
Tabla 4.
Parmetros de calidad
de los datos
Estndares de recuperacin
Exactitud
Blanco enriquecido
Muestra enriquecida
Precisin
Muestras Duplicadas
Blanco enriquecido en duplicado
Muestra enriquecida en duplicado
Frecuencia
En cada muestra
5 % de las muestras en
la batera analtica
(1:20) (a, b)
5 % de las muestras en
la batera analtica
(1:20) (a, b)
Las planillas siguientes son ejemplos de reporte. Note que la informacin que se presenta en
estas planillas (e.g., encabezado y concentraciones que se mencionan) es totalmente ficticia y
slo sirve a los propsitos de ilustrar el reporte que se propone. La primera pgina muestra las
concentraciones de los analitos de estudio para cuatro muestras y sus calificadores
correspondientes. La segunda pgina muestra las concentraciones detectadas en el blanco de
laboratorio y compara la muestra original con su duplicado, incluyendo informacin sobre la
desviacin porcentual relativa entre las concentraciones de ambas. Aquellos analitos que
presentan una diferencia mayor al 25%, por ejemplo el 4,4-DDE, son calificados con una
Q por encontrarse fuera de los lmites deseados. La tercera pgina, da informacin sobre las
concentraciones encontradas en la muestra original y las recuperaciones de los analitos
adicionados a la muestra enriquecida y su duplicado asi como el desvo porcentual relativo
entre las recuperaciones de ambas muestras enriquecidas.
REFERENCIAS
Federal Register (1984). Definition and procedures for the determination of the Method
Detection Limits, 40 CFR (Code of Federal Regulations), Part 136, Appendix B rev. 1.11.
132
M i+
Ali
+
M bckg
Al
bckg
til para determinar si el enriquecimiento por metales en las capas superiores del core
sedimentario depende de la formacin de oxi-hidrxidos de Fe y Mn.
La materia orgnica es uno de los constituyentes mas importantes de los sedimentos debido
a su alta reactividad con componentes orgnicos e inorgnicos, incluyendo el 210Pb y los
contaminantes metlicos; por tanto, la variacin en el contenido de materia orgnica en los
estratos de los cores sedimentarios, puede crear cambios aparentes en los perfiles de 210Pb y
los contaminantes, an cuando el suministro de estos no haya cambiado. La determinacin del
carbono orgnico (Corg) en los sedimentos puede ser til para estimar el contenido de materia
orgnica en los sedimentos y suele utilizar para corregir las concentraciones de 210Pb y los
contaminantes de inters, al calcular las concentraciones libres de materia orgnica como
sigue:
[M+, 210Pb] x (100-%Corg)/100)
Por otro lado, el contenido de Cinorg es generalmente considerado como un diluyente de las
concentraciones de contaminantes como los metales en los sedimentos, por lo cual es
importante evaluar si la aparente disminucin en las tendencias de estos contaminantes se
debe a una disminucin del aporte al sedimento o si se debe en realidad a un incremento en
las concentraciones de Cinorg.
Referencias
UNEP/IOC/IAEA, 1995. Manual for the geochemical analysis of marine Sediments and
suspended particulate matter. Reference methods for Marine Pollution Studies No. 63. United
Nations Environment Programme. 74 pp.
Loring D.H, Rantala R.T.T., 1992, Manual for the geochemical analyses of marine sediments
and suspended particulate matter. Earth-Science Reviews, 32: 235-283.
134
Indicador
Rol
Textura
Tamao de grano
<2000 m
Arenas
2000-63 m
Lodos
<63 m
Arcillas
<2 m
Si
Al
Fe
Sc
Cs
Li
Carbono orgnico
las
Usualmente
metales*
acumulador
de
Qumico
Aluminio silicatos, pero usado para Trazador qumico de aluminocompensar variaciones en tamao de silicatos,
particularmente
en
grano de alumino-silicatos finos minerales arcillosos
(limos y arcillas) ricos en metales
Lodos y arcillas ricos en metales Trazador
para
ricos en minerales de Fe (oxi- arcillosos ricos en Fe
hidxidos)
Sc estructural en arcillas
Cs estructural
feldespastos
en
arcillas
Frecuentemente acumulador de
metales como Hg y Cd
135
minerales
Argentina
Jos Sericano
Cuba
Carlos Manuel Alonso Hernndez
Misael Daz Asencio
Jess Manuel Beltrn Gonzlez
Venezuela
William Senior Galindo
Milena Gonzlez
Fabiola Lpez Monroy
Arstides Mrquez
Ivis Fermin Mieres
Maj Britt Mostue de Crescente
Armando Jos Ramrez Rojas
Espaa
Alberto Quejido
Francia
Jean Michel Fernndez
OIEA-MEL
Joan-Albert Sanchez-Cabeza
Oficial Tcnico del Proyecto RLA7012
Mxico
Ana Carolina Ruiz Fernndez
COMIT CIENTIFICO ASESOR
Argentina
Jos Luis Sericano
Geochemical & Environmental Research
Group (GERG)
Texas A&M University
Mxico
Ana Carolina Ruiz Fernndez
Universidad Nacional Autnoma de
Mxico, UNAM
Instituto de Ciencias del Mar y Limnolog,
(ICMyL)
Cuba
Carlos Alonso Hernndez
Centro de Estudios Ambientales de
Cienfuegos (CEAC)
OIEA
Jane Gerardo-Abaya
Departamento de Cooperacin Tcnica
Espaa
Alberto Quejido Cabezas
Centro de Investigaciones Energticas,
Medioambientales y Tecnolgicas
(CIEMAT)
Joan-Albert Sanchez-Cabeza
Departmento de Ciencias y Aplicaciones
Nucleares
Laboratorios del Ambiente Marino
136
Colombia
Sr. Jess Garay
Instituto de Investigaciones Marinas y
Costeras (INVEMAR)
Costa Rica
Sr. Alfredo Donald Grant
Junta de Administracin Portuaria y.
Desarrollo Econmica de la Vertiente
Atlntica (JAPDEVA)
Jamaica
Sra. Sheries Simpson
National Environment and Planning
Agency
Projects Planning & Monitoring Branchr
Mxico
Sra. Ana Carolina Ruiz Fernndez
Universidad Nacional Autnoma de
Mxico (UNAM)
Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa
(ICML)
Nicaragua
Sr. Vctor Martnez
Centro de Investigacin de los Recursos
Acuticos de Nicaragua (CIRA),
Universidad Nacional Autnoma de
Nicaragua (UNAN).
de
Republica Dominicana
Sr. Ramn Antonio Delanoy
Universidad Autnoma de Santo Domingo
Panam
Sr. Alexis Pea
Autoridad de Recursos Acuticos de
Panam
Guatemala
Sr. Nicols Solares
OBIMAR. Empresa Portuaria Quetzal
Hait
Sr. Exil Lucienna
Ministerio del Ambiente
137