Laboratorio de Anlisis Instrumental

Luis Ferney Gonzlez Bahamn

Feb-Jun-2016

VALORACIONES CIDOBASE CON DETECCIN

POTENCIOMTRICA DEL PUNTO FINAL

cido fosfrico
cido clorhdrico
Hidrxido de sodio

Soluciones amortiguadoras
estndares
Ftalato cido de potasio

1. OBJETIVOS
4. PROCEDIMIENTO
Cuantificar compuestos cido-bsicos a travs de la medicin
del potencial electroqumico entre dos electrodos.
Aplicar los conceptos fundamentales de potenciometra en la
determinacin de puntos finales en valoraciones cido-base.
Adquirir destreza en el manejo del potencimetro y del
electrodo de vidrio.

2. INTRODUCCIN
La concentracin de hidrones (actividad en trminos reales) de
una solucin acuosa puede determinarse midiendo la diferencia
del potencial electroqumico entre un electrodo indicador de
vidrio y uno de referencia. El electrodo de vidrio es altamente
selectivo a los hidrones y su respuesta est determinada por el
intercambio catinico en la superficie de la membrana, como se
muestra en el siguiente equilibrio:

Una valoracin potenciomtrica consiste en la medicin del

potencial de una celda electroqumica en funcin del volumen
de titulante adicionado. La celda electroqumica galvnica para
la determinacin de pH bsicamente consiste en un par de
electrodos (electrodo de trabajo o vidrio y electrodo de
referencia) sumergidos en la solucin a la cual se le quiere medir
el pH. En los instrumentos actuales ambos electrodos estn
acoplados en un solo dispositivo denominado electrodo mixto.
La representacin grfica de la variacin del pH respecto al
volumen de la solucin patrn (titulante) origina una curva
sigmoidea a partir de la cual es posible obtener el punto final de
la titulacin, necesario para la cuantificacin del analito. En las
valoraciones cido-base, la apariencia de la curva y
especialmente el potencial en el punto final depende de la
fortaleza de disociacin (Ka Kb) de la especie conjugada que se
haya generado y de su actividad (concentracin aparente).
3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
Potencimetro (2)
Electrodo mixto (2)
Agitador magntico (2)
Barra magntica cilndrica y pequea (2)
Bureta de 25.00 mL (2)
Pinza para bureta (2)
Vidrio reloj o Pesasales (1)
Goteros (2)

Soporte universal (2)

Esptula pequea (1)
Frasco lavador (1)
Matraz volumtrico de 100.00
mL (1), 50.00 mL (1)
Vaso 100 mL (4), 200 mL (1)
Pipeta volumtrica de 1.00
mL (1), 5.00 mL (2)
Auxiliar de pipeteo (2)

a) Sin tanta exactitud, prepare en agua 30 mL de HCl 10 mF y

30 mL de H3PO4 10 mF partiendo de soluciones concentradas, y
500 mL de NaOH 10 mF con el reactivo slido.
b) Calibre el potencimetro (pH-metro) segn instrucciones del
equipo y del profesor, lave al final el electrodo mixto con
suficiente agua destilada.
c) Estandarice la solucin de NaOH con ftalato cido de potasio
previamente secado (1 hora, 105 C). Pese exactamente el
patrn primario (cantidad suficiente para gastar cerca de 5 mL
del secundario) en un vaso de 100 mL, agregue cuidadosamente
agua destilada (15 - 20 mL) y un magneto, e introduzca el
electrodo de tal manera que el bulbo quede inmerso y que el
magneto no lo golpee.
d) Agite magnticamente y registre el pH inicial.
e) Mantenga agitacin suave y deje caer desde la bureta 0.40 mL
de titulante, registre el pH. Repita este procedimiento hasta antes
del punto final.
f) Al aproximarse al punto final se observa un cambio brusco en
el pH (recuerde que se busca una curva sigmoidea), en esta
regin adicione cantidades menores de titulante (0.20 mL) hasta
que el pH no sufra cambios grandes y en este punto adicione
alcuotas de 0.40 mL (unos 2 mL) registrando cada vez el pH.
g) Finalizada la valoracin lave suficientemente el electrodo y
sumrjalo en un vaso con agua destilada hasta la siguiente
titulacin.
h) Valore 5.00 mL de la solucin problema de HCl siguiendo las
pautas de los tems c) g).
i) Valore 5.00 mL de la solucin problema de H 3PO4 siguiendo
las pautas de los tems c) g). Recuerde que no se observa slo
un punto final.
j) Aplique el procedimiento anterior a una muestra comercial de
vinagre. Teniendo en cuenta que la etiqueta reporta cerca de 4 %
en CH3COOH, tome la alcuota necesaria para gastar
aproximadamente 5.00 mL del titulante.
5. CLCULOS Y RESULTADOS
a) Para cada valoracin haga un grfico de pH vs. volumen de
base aadido y a partir de estas grficas determine el punto final.

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En los casos en que este punto no sea evidente realice una

grfica de la aproximacin a la primera derivada. Emplee la
aproximacin a la segunda derivada si sigue siendo difcil
determinar dicho punto.

DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DE
CLORURO EN LECHE
1. OBJETIVOS

b) Determine la concentracin de los analitos en las muestras.

c) De la manera ms simple, a partir de las curvas de titulacin
obtenga los valores de pKa que haya lugar y comprelos con los
reportados en la literatura.
6. PREGUNTAS
El profesor de laboratorio asignar 2 o 3 preguntas relacionadas
con la prctica.
1) La valoracin de cidos muy dbiles es difcil de realizar con
el mtodo aqu descrito, sin embargo, el uso de reactivos
auxiliares puede aumentar en gran medida la exactitud del
anlisis. El cido brico (pKa = 9.2) se puede titular con una
base fuerte en presencia de un reactivo auxiliar orgnico que
posea al menos dos grupos hidroxilos, describa brevemente el
mecanismo de accin de un reactivo auxiliar en la titulacin del
cido brico.
2) Linealice la ecuacin de Henderson-Hasselbalch, grafique y
obtenga las pKa de las especies que trabajaron en la prctica.
Nota: Para cada caso usen slo los datos de una rplica.
3) A partir de la grfica de Gran cuantifique el analito en la
muestra problema y calcule la concentracin del estndar
secundario. Tambin obtenga las constantes de equilibrio de
disociacin (compare con los pKa TERICOS).
4) Deduzca matemticamente la ecuacin que se aplicara para
hacer la grfica de Gran en la valoracin de una base dbil.
Indique las ventajas y desventajas de este mtodo comparado
con el de la curva sigmoidea para determinar puntos finales.
5) Calcule las constantes de equilibrio (K) de TODAS las
reacciones de titulacin realizadas en la prctica.
Expliquen clara y concretamente tanto el denominado "error
cido" como el "error alcalino" que se suscitan con la utilizacin
del electrodo de vidrio qu parmetro estadstico afectan?
impact su anlisis?

Fortalecer los conceptos adquiridos sobre mediciones

potenciomtricas aplicadas a las valoraciones por precipitacin.
Cuantificar cloruro en muestras reales mediante titulaciones
argentomtricas y el uso de un electrodo ion selectivo.
Determinar experimentalmente el valor de la constante del
producto de solubilidad (Kps) del AgCl.
Adquirir destreza en el manejo y cuidado del electrodo de ion
selectivo de estado slido.

2. INTRODUCCIN
Los mtodos potenciomtricos estn basados en la medida de la
diferencia de potencial de una celda electroqumica constituida
por dos electrodos sumergidos en una solucin y un
potencimetro (un multmetro en el presente experimento) como
dispositivo de medida. El electrodo que responde de forma
directa o indirecta a la actividad del analito se denomina
indicador y el otro, cuyo potencial permanece prcticamente
constante, se denomina de referencia. Una correcta
determinacin del potencial electroqumico se debe realizar a
una corriente elctrica extremadamente baja, por lo cual el
potencimetro debe poseer una resistencia interna muy grande
respecto a la resistencia de los otros componentes de la celda.
En un electrodo indicador de primera especie, un metal
sumergido en una solucin que contiene sus iones, genera una
diferencia de potencial elctrico (E) en la interfase. La relacin
de este potencial con la actividad de la especie ( aMn+) se rige por
la ecuacin de Nernst:

para

Mn+ + ne M(s)

Un electrodo metlico (de segunda especie) puede dar respuesta

a la actividad de un anin, si este ltimo forma un precipitado o
un complejo estable con la especie oxidada del electrodo. Por
ejemplo, la plata puede servir como un electrodo de segunda
especie para haluro y pseudohaluro.
El potencial de celda medido es la diferencia entre los
potenciales (escritos como reduccin) del electrodo indicador y
del electrodo de referencia.
Ecelda = Eind Eref
Los mtodos potenciomtricos tambin se pueden aplicar de
forma directa para la determinacin de un ion o de una

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molcula, comparando el potencial del electrodo indicador

(electrodo selectivo) en la solucin problema frente al obtenido
cuando se sumerge en una o ms soluciones estndares del
analito. La buena selectividad del electrodo usado en la presente
prctica hace que no se requieran etapas previas de separacin.
3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
Multmetro (2)
Electrodo indicador de Ag
(2)
Electrodo de referencia,
Ag/AgCl (2)
Electrodo selectivo para
iones Cl (1)
Agitador magntico (2)
Barra magntica cilndrica y pequea (2)
Cables caimn banana (4)
Bureta de 25.00 mL (2)
Pinza para bureta (2)
Vidrio reloj o Pesasales (1)

Embudo con caa (2)

Soporte universal (2)
Esptula pequea (1)
Pipeta volumtrica de
0.50mL(1), 1.00mL(3),
10.00mL(1), 20.00mL(1),
25.00mL(1)
Pipeta graduada de 10.0mL(1)
Goteros (2)
Frasco lavador (1)
Auxiliar de pipeteo (2)
Vaso de 100 mL(5), 50 mL(5)
Matraz volumtrico de
25.00mL(1), 50.00mL(1),
100.00mL(2)

NaNO3 5 M
NaCl

HNO3
AgNO3

4. PROCEDIMIENTO
4.1 MTODO ARGENTOMTRICO
4.1.1

Estandarizacin de la solucin de AgNO3

a) Sin tanta exactitud, prepare 50 mL de una solucin de AgNO 3

0.1 F con agua desionizada y llene la bureta con sta. Al
finalizar la prctica guarde la solucin sobrante en un frasco
mbar proporcionado por el instructor.
b) En un vaso de 100 mL pese una cantidad de NaCl analtico
previamente secado por una hora a 110 C, suficiente para que
se consuma aproximadamente 4 mL de la solucin de AgNO 3.
Adicione al slido exactamente 20.00 mL de agua desionizada.
c) Agregue 4 gotas de HNO 3 concentrado y 0.50 mL de NaNO 3
5 M.
d) Si el electrodo de plata presenta xido, plalo con carbonato
de calcio o con una lija (No 150) y lvelo con agua destilada.
e) Arme el sistema de titulacin que se muestra en la Figura 1.
Deje el bulbo del electrodo de referencia sumergido evitando
que el magneto lo golpee. Posicione el multmetro en la escala
de voltios (2 V), en modo de corriente directa (DC o el smbolo
) y conecte los electrodos a las salidas COM y V.

Figura 1. Arreglo instrumental para valoraciones

argentomtricas
f) Agite magnticamente la solucin y registre el potencial
inicial.
g) Mantenga la agitacin, deje caer desde la bureta 0.40 mL de
solucin y registre el potencial. Contine la valoracin hasta
antes del punto final adicionando el mismo volumen. Despus
de cada adicin de AgNO 3 espere a que el potencial se estabilice
y registre su valor.
h) Al aproximarse al punto final observar un cambio brusco en
el potencial, en esta regin debe adicionar cantidades menores
de AgNO3 (0.20 mL). Despus del punto final el potencial es
casi constante, en este punto adicione cantidades de 0.40 mL de
AgNO3 (unos 2 mL) registrando cada vez el potencial.
i) Finalizada la valoracin lave el electrodo con abundante agua
destilada y sumrjalo en un vaso con agua destilada hasta la
siguiente titulacin.
4.1.2

Determinacin de cloruro en la muestra

a) Teniendo en cuenta que la leche tiene aproximadamente

0.09% de cloruro y que espera gastar de titulante cerca de 4 mL
para obtener el punto final, tome la masa pertinente de leche en
un vaso de precipitados de 100 mL.
b) Agregue 4 gotas de HNO3 concentrado, filtre a gravedad
(papel cuantitativo) recogiendo el filtrado en un vaso de
precipitados de 100 mL y lave el slido con agua desionizada.

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c) Agregue 0.50 mL de NaNO3 5 M. Contine el procedimiento

descrito en los tems d) al i) de la seccin 4.1.1 y, si es
necesario, adicione agua desionizada para que el bulbo quede
inmerso

6. PREGUNTAS

4.2 CUANTIFICACIN MEDIANTE ELECTRODO DE

ION SELECTIVO (E.I.S.)

1) Qu interferencias se podran presentar en las

determinaciones a travs del electrodo selectivo de cloruros?

a) Curva de calibracin: Con agua desionizada prepare 100.00

mL de una solucin a 1000 mg/L en Cl. Con esta solucin
prepare 5 soluciones (con agua desionizada) en un rango entre
80 y 800 mg/L de Cl en matraces de 25.00 mL.

2) Explique en qu consiste y el funcionamiento de un

nanoelectrodo selectivo de cido rico (ver referencia 1).

b) Transfiera cada solucin estndar a vasos de 50 mL y

adicione 0.50 mL de NaNO3 5 M y 4 gotas de HNO 3
concentrado. Haga lo mismo para 25.00 mL de la solucin de
1000 mg/L.
c) Prepare 25.00 mL de solucin midiendo en un vaso de 100
mL la masa suficiente de leche y enrasando con lavados (use
agua desionizada) del vaso de precipitados. Adicione los 25 mL
en un vaso seco de 100 mL, 0.50 mL de NaNO 3 5 M y 4 gotas
de HNO3 concentrado.
d) Conecte el electrodo de referencia y el electrodo selectivo al
multmetro (segn indicaciones del instructor) y sumrjalos a la
solucin estndar ms diluida, espere a que la seal se estabilice
entre 1 a 2 minutos y mida el potencial. Retire los electrodos,
lvelos con agua destilada, squelos e introdzcalos en la
siguiente solucin. Proceda de la misma manera con las dems
soluciones estndares y con la solucin de la muestra.
5. CLCULOS Y RESULTADOS
a) A partir de la curva de titulacin de la estandarizacin de Cl
(E vs. volumen de AgNO3), determine la molaridad del AgNO3 y
el valor de pKps del AgCl, este ltimo graficando los datos
experimentales pertinentes de la linealizacin de la ecuacin de
Nernst.
b) Para cada valoracin argentomtrica grafique el potencial (E)
vs. volumen aadido de AgNO 3. A partir de estas grficas
determine los puntos finales y obtenga la concentracin del
analito en cada muestra. En los casos en que el punto final no
sea evidente hacer una grfica de aproximacin a la primera
derivada (pH/V) vs. el volumen medio del titulante. Emplee
la aproximacin a la segunda derivada si sigue siendo difcil
determinar el punto final.

El profesor de laboratorio asignar 2 o 3 preguntas relacionadas

con la prctica.

3) Lea cuidadosamente la referencia 2 (incluyendo la

informacin de soporte) e indique por qu los potenciales de
celda iniciales en las titulaciones (Figuras 1A y 1B) son
diferentes. Explique por qu en esos experimentos no se utiliza
un electrodo de referencia convencional.
4) Explique clara y concretamente en qu consisten las
valoraciones
coulombimtricas a potencial controlado,
mencione sus ventajas y desventajas frente a las de
coulombimetra a corriente constante.
5) Calcule la concentracin molar TERICA de cloruro en un
electrodo de referencia de Ag/AgCl teniendo en cuenta el
potencial reportado en los textos.
6) Explique claramente en qu consiste el coeficiente de
selectividad de los electrodos selectivos y especifique su
respuesta al que us en la prctica.
7) Expliquen claramente los tipos de electrodos selectivos ms
utilizados en anlisis qumicos.
8) Expliquen clara y concretamente en qu consiste el electrodo
de Clark usado para medir oxgeno en sangre.
[1] Syed M. Usman Ali et al. Selective potentiometric
determination of uric acid with uricase immobilized on ZnO
nanowires. Sensors and Actuators B: Chemical, Volume 152,
Issue 2, 1 March 2011, Pages 241247.
[2] Berger M. Potentiometric Determination of Chloride in
Natural Waters: An Extended Analysis. Journal of Chemical
Education. 2012. 89, 812813.

c) Para la determinacin del contenido de Cl mediante el uso

del electrodo de ion electivo, realice la curva regular de
calibracin (potencial vs. logaritmo de la concentracin de Cl),
interpole y calcule la concentracin de Cl en las muestras.

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CUANTIFICACIN DE Fe (II) EN UN PRODUCTO

FARMACUTICO POR QUELATOMETRA CON
INDICADOR INSTRUMENTAL Y POR CURVA DE
CALIBRACIN REGULAR
1. OBJETIVOS
Adquirir destreza en el manejo de un espectrofotmetro (rango
visible) de haz simple y obtener el espectro de absorcin del
complejo Fe-(fenantrolina)3.
Cuantificar hierro en una muestra farmacutica por
espectrofotometra utilizando curva de calibracin por patrn
externo.
Cuantificar hierro en la muestra usando una curva de
valoracin complexomtrica de segmento lineal.

3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Espectrofotmetro de haz
simple (rango visible)
Agitador magntico (2)
Barra magntica cilndrica y pequea (2)
Bureta de 25.00 mL (2),
50.00 mL (1)
Pinza para bureta (3)
Soporte universal (3)
Esptula pequea (2)
Goteros (2)
Frasco lavador (1)
Cloruro de hidroxilamina
Acetato de sodio
Etanol

Auxiliar de pipeteo (2)

Vidrio reloj o Pesasales (2)
Pipeta volumtrica de
0.50mL(1), 1.00mL(1),
2.00mL(1), 3.00mL(1),
4.00mL(1), 5.00mL(1)
Probeta de 25mL(1)
Vaso de 100 mL(2)
Matraz volumtrico de
25.00mL(6), 50.00mL(2),
100.00mL(2), 200.00mL(2)
Solucin estndar
de Fe a 50 ppm
1-10 fenantrolina monohidrato

2. INTRODUCCIN
Cuando la radiacin electromagntica atraviesa una solucin que
contiene una sustancia capaz de absorberla, su potencia (P0)
disminuye y este comportamiento se rige por la ecuacin:
Expresin conocida como la Ley de Lambert-Beer, donde es
el coeficiente de absorcin caracterstico de la especie
absorbente el cual depende de la longitud de onda () y de la
naturaleza del medio, C es la concentracin de dicha especie y b
es la distancia que recorre la radiacin a travs de la solucin.
La transmitancia (T) se define como la razn P/P0 y la
absorbancia (A) est relacionada logartmicamente con ella, por
lo tanto:
Siendo b constante, en un intervalo estrecho de (radiacin
monocromtica), la relacin lineal permite inferir sobre la
concentracin y el nivel de absorcin () de la sustancia en una
solucin problema midiendo la A.
En complejos de metales de transicin, un cambio en la
distribucin electrnica entre el metal y un ligando da lugar a
bandas de transferencia de carga (TC de metal a ligando o de
ligando a metal) [1]. Las absorciones de TC en la regin UV/Vis
son particularmente intensas, con valores de del orden de 10 4
M1 cm1 o mayores. La intensidad del color se debe a que existe
una alta probabilidad de que esas transiciones ocurran.
Transiciones de este tipo se consideran como procesos redox
internos.
La quelatometra es un anlisis volumtrico en el que durante la
reaccin de titulacin se forma un complejo metlico muy
estable. La deteccin del punto final en este tipo de valoraciones
puede realizarse siguiendo la A de la solucin analtica a
determinada , la cual se elige dependiendo de las caractersticas
absorbentes del analito, del titulante y del complejo.

4. PROCEDIMIENTO
4.1 PREPARACIN DE SOLUCIONES
a)
Prepare 50.00 mL de una solucin de Fe a 2.0 ppm,
partiendo de una solucin de 50 ppm.
b)
Sin tanta exactitud prepare 15 mL de una solucin de
cloruro de hidroxilamina al 10% p/v.
c)
Sin tanta exactitud prepare 50 mL de una solucin de
acetato de sodio al 20% p/v.
d)
En un vaso de 100 mL pese 50 mg de monohidrato de
1-10 fenantrolina, adicione 1 mL de etanol, agregue 10 mL de
agua destilada tibia, deje enfriar y finalmente adicione 40 mL de
agua destilada.
Nota: No deseche las cantidades sobrantes de las 3 ltimas
soluciones, envselas en frascos previamente rotulados para que
sean usadas la prxima semana.
4.2 DE MXIMA ABSORCIN Y CURVA DE
CALIBRACIN
a)
A partir de las soluciones de Fe de 50 o de 2.0 ppm,
adicione los volmenes necesarios en matraces de 25.00 mL
para preparar 6 soluciones con concentraciones de Fe entre 0.24
y 6.0 ppm. A cada matraz adicione, en estricto orden, 1.00 mL
de solucin de cloruro de hidroxilamina, 3.00 mL de solucin de
1-10 fenantrolina y 4.00 mL de la solucin de acetato de sodio.
Enrase con agua destilada, agite para homogenizarlas y deje
reaccionar por 15 minutos. Prepare 25.00 mL de solucin
blanco.

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b)
Tomando una de las soluciones estndares preparada en
el tem inmediatamente anterior, realice un barrido espectral del
complejo metlico entre 400 y 600 nm registrando la medida de
A cada 20 nm (tome lecturas cada 2 nm en el intervalo de 500 a
520 nm). Recuerde establecer el 0.000 de A (o 100% de T) con
el blanco antes de tomar la lectura a cada .
c)
Ajuste el espectrofotmetro en la donde se obtuvo
mxima A y para cada una de las soluciones estndares mida la
A (o el % de T), estableciendo previamente el 0.000 de A (o
100% de T) con el blanco.

c)
Determine la concentracin de Fe en la muestra
problema, expresndola en mg de sulfato ferroso por mL.
d)
Con la pendiente de la curva de calibracin calcule el
del complejo (longitud de la celda 1 cm).
e)
A partir de las curvas de valoracin de segmento lineal
determine la concentracin del analito en la muestra problema.
6. PREGUNTAS

4.3 PREPARACIN DE LA MUESTRA

a)
Teniendo en cuenta que la etiqueta del jarabe de Fe
reporta que cada 4 mL contienen 195 mg de sulfato ferroso,
prepare 25.00 mL de una solucin cuya seal pueda interpolarse
convenientemente en la curva de calibracin, adicionando, en
estricto orden, las cantidades de los reactivos que se agregaron
a las soluciones patrones (4.2.a).
j: Obviamente Ud. debe verificar la informacin de la
etiqueta de la muestra antes de realizar la prctica y realizar los
cambios a que haya lugar.
b)
Mida la seal analtica de la solucin obtenida en el
paso anterior, como hizo en 4.2.c.
4.4 QUELATOMETRA
a)
Estandarizacin: Prepare 25.00 mL de una solucin
estndar de Fe a 4.0 ppm y adicione 20.00 mL de ella en un vaso
de 100 mL junto con 1.00 mL de solucin de cloruro de
hidroxilamina y 4.00 mL de solucin de acetato de sodio, agite
magnticamente. Prepare 25.00 mL de una solucin blanco.
Tanto a la solucin analtica como al blanco, adicione 100 L de
la solucin de fenantrolina, agite durante 6 min y mida la A a la
de trabajo. Contine de la misma manera la valoracin hasta
obtener una seal aproximadamente constante.
j: Una vez realizada cada lectura de la A, devuelva las
soluciones (analtica y blanco) al vaso respectivo.

El profesor de laboratorio asignar 2 o 3 preguntas relacionadas

con la prctica.
1) Explique clara y concretamente, la razn por la cual el
complejo producido en la prctica absorbe radiacin en ese
rango de longitudes de onda, teniendo en cuenta las transiciones
energticas.
2) Explique concisa y claramente el funcionamiento (los
componentes) de un nefelmetro, instrumento usado para el
monitoreo del material particulado atmosfrico.
3) Explique clara y concretamente, al menos un MTODO
ANALTICO usado para hacer ESPECIACIN de Cr en aguas
y que utilice una tcnica espectromtrica en el rango UV/Vis.
4) Explique clara y concretamente un MTODO ANALTICO
que se use para realizar la ESPECIACIN de Fe (Fe 2+, Fe3+) en
aguas y que involucre la espectrofotometra en el visible.
[1] Catherine Housecroft, Alan G. Sharpe. Inorganic
Chemistry. Harlow, Inglaterra: Pearson Prentice Hall, 2008. 897900.

b)
Anlisis de la muestra: Considerando la informacin
de la etiqueta (ver tem 4.3.a) prepare 25.00 mL de una solucin
acuosa que se encuentre aproximadamente a 4 ppm en Fe. De
esta solucin tome 20.00 mL y valore segn el procedimiento
especificado en 4.4.a.
5. CLCULOS Y RESULTADOS
a)
Grafique el espectro de absorcin del complejo Fe(Fenantrolina)3.
b)
Grafique la curva de calibracin (A vs. concentracin).
Aplique el mtodo de mnimos cuadrados y exprese la ecuacin
de la recta de manera correcta.

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DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DE LA
DQO EN AGUAS RESIDUALES RESIDENCIALES

Ftalato cido de potasio

cido sulfrico

Dicromato de potasio
Sulfato de plata
Sulfato mercrico

1. OBJETIVOS
4. PROCEDIMIENTO
Determinar la DQO en una muestra de agua residual.
Afianzar los conceptos adquiridos sobre espectrofotometra.
Adquirir destreza en la utilizacin del espectrofotmetro en el
rango visible.

4.1.1 Solucin catalizadora

Prepare en un vaso de 100 mL y sin tanta exactitud, 35 mL de
Ag2SO4 32 mF en cido sulfrico.

2. INTRODUCCIN
0okLa demanda qumica de oxgeno (DQO) es una estimacin
indirecta del material oxidable presente en el agua y se define en
trminos de mgO2/L, que corresponde a la cantidad de oxgeno
que consumira cada litro de la muestra [1]. La medicin de la
DQO es til para evaluar la calidad del agua y se aplica para
estimar la contaminacin orgnica en aguas superficiales (e.g.
ros y lagos) o aguas residuales.
La DQO se determina mediante el calentamiento de la muestra
en presencia de un exceso de oxidante fuerte (Cr 2O72 o MnO4)
en medio cido. Este tratamiento ocasiona la oxidacin de la
materia tanto orgnica como inorgnica, sin embargo, en la
mayora de los casos los componentes orgnicos predominan y
son los de mayor inters.
En el caso del dicromato, durante el proceso ste se reduce a
Cr3+, como se muestra en la siguiente ecuacin:
Debe catalizarse la oxidacin de algunas sustancias orgnicas
con Ag2SO4 y es necesario eliminar los cloruros ya que actan
como agentes reductores.
Una vez concluida la digestin existen dos alternativas, seguir el
dicromato remanente o el ion crmico formado, dependiendo si
se trata de un anlisis de DQO en rango alto o rango bajo. El
seguimiento
de
estas
especies
puede
realizarse
espectrofotomtricamente haciendo una curva de calibrado con
una sustancia reductora cuya DQO sea conocida, como el ftalato
cido de potasio.
3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
Espectrofotmetro de haz
simple (rango visible)
Placa digestora mltiple
de DQO
Tubos digestores de vidrio
de 16 x 1 cm (9)
Esptula pequea (1)
Goteros (2)
Frasco lavador (1)
Varilla de agitacin (1)
Escobilln (1)

4.1 PREPARACIN DE SOLUCIONES

Auxiliar de pipeteo (2)

Vidrio reloj o Pesasales (1)
Pipeta volumtrica de
1.00mL(1), 2.00mL(1),
3.00mL(1), 5.00mL(1),
10.00mL(1), 15.00mL(1)
Probeta de 25mL(1)
Vaso de 100 mL(4)
Matraz volumtrico de
25.00mL(3), 50.00mL(1)

4.1.2 Solucin digestora

Prepare sin tanta exactitud 16 mL de una solucin que contenga
K2Cr2O7 50 mF y HgSO4 0.11 F, para ello pese las cantidades
necesarias de K2Cr2O7 y HgSO4 en un vaso de 50 mL, adicinele
cuidadosamente 4 mL de agua destilada y 4 mL de H 2SO4
concentrado, homogenice con una varilla de agitacin, deje
enfriar y trasvase esta solucin a un vaso de 50 mL que tenga 8
mL de agua destilada.
Nota: No deseche las cantidades sobrantes de las soluciones
catalizadora y digestora, envselas en frascos previamente
rotulados para que sean usadas la prxima semana.
4.1.3 Curva de calibracin con ftalato cido de potasio
Prepare 50.00 mL de una solucin acuosa de KC 8H5O4 4.2 mF,
recuerde que el ftalato cido de potasio debe ser previamente
secado (1 hora, 105 C). Con esta solucin prepare, en matraces
de 25.00 mL, una curva de calibracin de 6 puntos entre 80 y
800 mgO2/L teniendo en cuenta la siguiente relacin:

6
4.2 DIGESTIN DE ESTNDARES Y MUESTRA
a) En los tubos digestores adicione 1.00 mL de la solucin
digestora, 3.00 mL de la solucin catalizadora y 3.00 mL del
estndar o la muestra o el blanco (agua destilada).
b) Tape cada tubo y agite cuidadosamente de forma manual.
c) Introduzca los tubos en la placa digestora caliente (150 2
o
C) y digiera durante 2 horas.
d) Retire los tubos de la placa digestora y deje enfriar durante
unos 10 min.
e) Agite manualmente las soluciones para homogenizar con el
agua condensada en las paredes del tubo.

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f) Deje en reposo para continuar con el enfriamiento y permitir

la sedimentacin de los slidos suspendidos.
4.3 MEDICIN ESPECTROFOTOMTRICA

[1] A.S.T.M. Standard Test Methods for Chemical Oxygen

Demand (Dichromate Oxygen Demand) of Water. 2012. ASTM
D1252 - 06.

a) Si no ha usado un espectrofotmetro solicite asesora al

instructor.

DETERMINACIN DE ETANOL EN UNA BEBIDA

ALCOHLICA POR REFRACTOMETRA

b) Mida la absorbancia de cada una de las soluciones obtenidas

en la digestin a 420 nm, ajustando el 0.000 de absorbancia con
agua destilada. Realice las mediciones de la curva iniciando con
el blanco y continuando con los estndares en orden creciente de
DQO. Realice un lavado de la celda con agua destilada entre
cada punto.
c) Para la medicin de la absorbancia de las muestras, lave con
agua destilada la celda y ajuste el 0.000 de absorbancia con agua
destilada.
j: Almacene los desechos en recipientes adecuados
debidamente rotulados y disponga aparte los restos de
soluciones de ftalato cido de potasio.
5. CLCULOS Y RESULTADOS

1. OBJETIVOS
Fortalecer las bases tericas del fenmeno de refraccin.
Determinar el nivel de alcohol etlico en una bebida alcohlica
por refractometra, mediante curvas de calibracin regular y de
adicin de estndar.
Verificar si existe evidencia significativa de efectos de matriz
en la determinacin con la curva de calibracin regular.
Adquirir destreza en la utilizacin del refractmetro.

2. INTRODUCCIN
La refraccin es el cambio en la direccin de propagacin de la
luz cuando sta pasa de un medio a otro, como se muestra en la
Figura 1:

a) Haga un grfico de Absorbancia vs. DQO de los estndares en

mgO2/L.
b) Mediante interpolacin y los factores de dilucin (si hubo)
determine la DQO en las muestras.
6. PREGUNTAS
El profesor de laboratorio asignar 2 o 3 preguntas relacionadas
con la prctica.
1) Explique concisa y claramente el funcionamiento (los
componentes) de un medidor de carbono (TOC, total organic
carbon) que usa deteccin infrarroja. Indique los tipos de
mediciones que en l pueden realizarse (IC, NPOC, etc.).
Muestre claramente la utilidad de estas mediciones en el rea
medioambiental (eso le servir para afinar su discusin).
2) Explique clara y concretamente en qu consiste la prueba
DBO5 (demanda biolgica de oxgeno) y cmo es el
funcionamiento del sensor usado en dicha prueba para medir O2
(oxmetro).
3) Explique de manera clara y concreta en qu consiste el
detector de esfera de integracin (integrating sphere) usado en
anlisis en el UV/VIS.

Figura1. Refraccin de la radiacin.

El ngulo de incidencia (1) est relacionado con el ngulo de
refraccin (2) a travs de la Ley de Snell:

sen1 2 1

sen 2 1 2

donde 1 y 2 corresponden a la velocidad de la luz en el medio

1 y el medio 2, respectivamente, y 1 y 2 los ndices de
refraccin en ambos medios.
El ndice de refraccin de un medio determinado es la relacin
entre la velocidad de la luz en el vaco (c) y la velocidad de la
luz en el medio ():

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Al realizar la medida de los ngulos en el vaco y considerando

que el ndice de refraccin del vaco es 1, se tiene:

2 vaco

sen1 vaco
sen 2

donde (2)vaco corresponde al ndice de refraccin del medio 2

respecto al vaco (medio 1), en trminos prcticos el ndice de
refraccin se mide respecto al aire:

2 aire

sen1 aire
sen 2

Al establecer un ngulo de incidencia de 90 (del haz de luz) se

puede hacer en forma directa la medicin del ndice de
refraccin del medio 2 (sen 1 = 1) simplemente midiendo el
ngulo del rayo refractado.

es funcin de la temperatura del material y de la longitud de

onda de la luz, generalmente se mide a 20 C y con = 589.3
nm (lnea D de sodio).
El ndice de refraccin de una solucin acuosa de etanol es
directamente proporcional a la concentracin de ste. Dicha
proporcionalidad es analticamente til para determinar la
cantidad de etanol presente en una muestra acuosa.
3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
Pipeta volumtrica de 0.50 mL(1),
1.00 mL(1), 2.00 mL(1), 3.00 mL(1),
4.00 mL(1), 5.00 mL(1), 10.00 mL(1)
y 15.00 mL(1)
Auxiliar de pipeteo (1)
Frasco lavador (1)

Refractmetro
Matraz volumtrico de
25.00 mL(13)
Picnmetro (1)
Gotero (1)
Escobilln (1)

Alcohol etlico estndar

4. PROCEDIMIENTO
4.1 CURVA DE CALIBRACIN POR PATRN EXTERNO
a) Registre la pureza del alcohol etlico estndar y mida su
densidad.
b) En 6 matraces de 25.00 mL prepare soluciones estndares de
etanol entre 1.5 y 15.0% (p/v) enrasando con agua destilada.
Considere para estos clculos un 96% de pureza y una densidad
de 0.8 g/mL (esta pureza y densidad deben confirmarse, tem a).

b) Segn el contenido de etanol que reporta la muestra

problema, tome la alcuota pertinente para preparar 25.00 mL de
una solucin cuya concentracin est cercana al centroide de la
curva de calibracin.
4.3 CURVA DE ADICIN ESTNDAR
Segn la etiqueta de la muestra problema, adicione la alcuota
que corresponda (ver tabla) en cada uno de 6 matraces de 25.00
mL. Posteriormente, agregue 0.00, 0.50, 1.00, 2.00, 3.00 y 4.00
mL de etanol estndar a cada matraz y enrase con agua
destilada.
% etanol (etiqueta)
Cantidad (mL)

~ 40
2

~ 30
3

~ 10
10

~5
15

4.4. MEDICIN DEL NDICE DE REFRACCIN

Por triplicado y alternndose la lectura con los miembros de su
grupo, mida el ndice de refraccin de cada una de las
soluciones preparadas y del agua destilada.
j: La medicin no se debe limitar a la simple observacin de
la escala, cada estudiante tiene que ubicar la imagen y registrar
su lectura.
5. CLCULOS Y RESULTADOS
a) Segn la dilucin realizada, la densidad experimental y la
pureza del etanol estndar, calcule la concentracin de etanol (%
p/v o g/mL) de cada solucin patrn y elabore en la misma
grfica las curvas de calibracin (ndice de refraccin promedio
vs. concentracin), tanto la de patrn externo como la de adicin
de estndar, mostrando para cada punto las barras de error.
Nota: Incluya el punto obtenido para el agua destilada en la
curva regular de calibracin y ubique el eje de la abscisa en este
valor.
b) Exprese de manera correcta las ecuaciones que definen cada
recta mediante el mtodo de mnimos cuadrados.
c) Determine la concentracin de etanol en la muestra problema
(% p/v) a travs de cada mtodo de calibracin. Tenga en cuenta
que al intercepto de la curva de adicin de estndar debe restarle
el ndice de refraccin del agua antes de hacer la extrapolacin.
d) Mediante la comparacin de pendientes, determine
estadsticamente si existe evidencia de efectos de matriz.
e) Calcule el LDC (limite de cuantificacin) del mtodo.

4.2 PREPARACIN DE LA MUESTRA

a) Si hay alto contenido de gas en la muestra, desgasifique una
porcin suficiente mediante agitacin (con ultrasonido o
agitador magntico) para el desarrollo de toda la prctica.

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DETERMINACIN DE SACAROSA EN AZCAR DE

MESA POR POLARIMETRA
1. OBJETIVOS
Afianzar los conocimientos sobre las propiedades de la luz
polarizada y su interaccin sobre algunas sustancias.
Determinar el porcentaje de sacarosa en una muestra de azcar
de mesa.
Determinar la rotacin especfica de la sacarosa mediante una
curva de calibracin.
Adquirir destreza en la utilizacin del polarmetro.
2. INTRODUCCIN
Las ondas electromagnticas estn compuestas por campos
elctricos y magnticos que oscilan (perpendicularmente entre
s) en un nmero infinito de planos en la direccin de
propagacin. Sin embargo, cuando la radiacin atraviesa ciertos
materiales, sus ciclos de oscilacin quedan restringidos a un solo
plano. Las substancias pticamente activas poseen la capacidad
de rotar el plano de la luz polarizada gracias a que son
disimtricas.
El enantimero (+) de la sacarosa desempea funciones vitales
en los sistemas biolgicos y, en solucin, la rotacin del plano
de la luz polarizada () es directamente proporcional a la
concentracin (C) y al camino ptico (b):
A determinada temperatura (t) y longitud de onda () se tiene la
constante de proporcionalidad denominada rotacin especfica,
la cual es una caracterstica nica de la sustancia:

El polarmetro es ampliamente empleado como un sacarmetro

en el anlisis del azcar. La mayora de las muestras de azcar
sin refinar contienen otras sustancias pticamente activas aparte
de la sacarosa, cuando se calienta la sacarosa con cido o con
una enzima invertasa, es invertida para formar una molcula de
glucosa y otra de fructosa. La rotacin especfica de la sacarosa
medida a 20 C y a 589.3 nm (lnea D del sodio) es de 66.5, al
hidrolizarse en medio cido, por ejemplo, produce cantidades
equivalentes de glucosa y fructosa con una inversin del ngulo
de rotacin. Como la fructosa posee una rotacin especfica de
93.0 y la glucosa de +52.5, la rotacin especfica de la
sacarosa hidrolizada vara hasta (93.0 + 52.5) / 2 = 20.2.
La proporcionalidad que evidencia la rotacin de la luz
polarizada con respecto a la concentracin en solucin de la
substancia pticamente activa, es utilizada analticamente para
determinar la cantidad de esta substancia en una muestra
problema.

3. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Polarmetro
Vaso de precipitados de 50 mL (7)
Matraz volumtrico de 25.00 mL (7)
Varilla de agitacin (1)

Gotero (1)
Escobilln (1)
Esptula (1)
Frasco lavador (1)

Sacarosa estndar
4. PROCEDIMIENTO
4.1 CURVA DE CALIBRACIN
En matraces de 25.00 mL prepare 6 soluciones estndares de
sacarosa en agua destilada, entre 4.0 y 20.0% (p/v). Cada masa
tomada del estndar djela en los vasos de precipitados y para
evitar la hidrlisis del analito, disuelva justo antes de realizar
cada lectura (enrase con aguas de lavado del vaso).
4.2 PREPARACIN DE LA MUESTRA
Segn el contenido de sacarosa que reporta la muestra de azcar
blanca, tome la alcuota pertinente para preparar 25.00 mL de
una solucin cuya concentracin est cercana al centroide de la
curva de calibracin. Disuelva justo antes de realizar la lectura
(enrase con aguas de lavado del vaso).
4.3 MEDICIN DEL NGULO DE ROTACIN
a) Limpie las ventanas de la celda con papel ptico y calibre el
polarmetro: llene la celda con agua destilada (evite burbujas) y
mueva el botn que hace girar el prisma analizador a derecha e
izquierda, observando por el telescopio hasta que un pequeo
movimiento haga que el campo de visin aparezca
homogneamente iluminado, en este punto lleve a cero (zero
set).
b) Por triplicado y alternndose la lectura con los miembros de
su grupo, mida los grados de rotacin de cada una de las
soluciones preparadas. Para tal efecto, purgue la celda con la
solucin que va a contener, descarte esta solucin de purga y
llene la celda asegurndose de no dejar burbujas de aire.
Mueva el botn que hace girar el prisma analizador a derecha e
izquierda, observando por el telescopio hasta que un pequeo
movimiento haga que el campo de visin aparezca
homogneamente iluminado, en este punto registre la lectura.
j: La medicin no se debe limitar a la simple observacin de
la escala, cada estudiante tiene que ubicar la imagen y registrar
su lectura.

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5. CLCULOS Y RESULTADOS
a) Segn la masa y la pureza de la sacarosa estndar, calcule la
concentracin (% p/v) de cada solucin patrn y elabore la
curva de calibracin (rotacin observada promedio vs.
concentracin), mostrando para cada punto las barras de error.
Exprese de manera correcta la ecuacin que define la recta.
b) Determine el porcentaje de sacarosa en la muestra.
c) Utilice la ecuacin de la recta para obtener la rotacin
especfica de la sacarosa ([]) y comprela con el valor
reportado en la literatura.
d) Calcule el lmite de cuantificacin (LDC) del mtodo.
6. PREGUNTAS
El profesor de laboratorio asignar 2 o 3 preguntas relacionadas
con la prctica.
1) Explique claramente cmo es el funcionamiento del
microscopio de fuerza atmica (AFM: atomic force microscopy)
utilizado para anlisis de superficies.
2) Explique clara y concretamente el fenmeno de interaccin
luz-materia que est involucrado en la rotacin de la luz
polarizada por una substancia pticamente activa. Nota: no basta
con decir que "se da porque es quiral" o "asimtrica", es
reconocer si es un proceso de absorcin, excitacin electrnica,
vibracional, cmo es eso?

3) Explique concisa y claramente el funcionamiento (los

componentes) de un equipo de difraccin de rayos x, utilizado
en cristalografa.
4) Explique de manera clara y concreta un mtodo analtico en
el que se cuantifique etanol en muestras biolgicas y que utilice
la tcnica Head-Space. Nota: Si incluye cromatografa no
explicar detalladamente esta tcnica, ya tendremos oportunidad
de ello despus.
5) Explique claramente los fenmenos fsicos por los cuales se
dan los procesos de "desviacin de la luz polalizada por parte de
una substancia como la sacarosa" y "la refraccin de la luz
cuando pasa de un medio a otro". (Ayuda: ojo que esta
informacin sale ms fcil de un texto de fsica, y no se le est
pidiendo que indique qu le pasa a la luz, ya se sabe que se
refracta, ya se sabe que se gira el plano de oscilacin, se pide es
que explique cmo se da esa interaccin radiacin-materia,
anlogamente a lo que se tiene en un proceso de "absorcin de
luz visible" en donde determinados fotones hacen que se exciten
ciertos electrones hasta unos niveles).
6) Explique clara y concretamente en qu consiste la
tcnica Differential Absorption LIDAR utilizada para el
monitoreo del ozono atmosfrico.
7) Expliquen de manera clara y concreta en qu consiste el
anlisis de compuestos quirales usando polarimetra con efecto
de Faraday.

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