UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE BIOLOGA , XALAPA.

E.E ANLISIS QUMICO

PRCTICA 3 DETERMINACION CUANTITATIVA DE PROTENAS POR EL

MTODO BIURET

MARIA DEL CARMEN RAMREZ BENTEZ

ALUMNA : ROJAS MEZA ROSA ANTONIA

SECCIN 3

INTRODUCCIN

Qu se entiende por curva de calibracin?

Se trata de una curva de referenciaconstruidaconcantidadesconocidasdeuna
sustancia (por ejemplo la albmina srica bovina) que se utiliza para determinar
la cantidad de esta sustancia (protenas) presente en una muestra incgnita.

Las protenas son elementos vitales para los organismos, encontrndose en

plantas yanimalesenunaproporcinelevada.Hayunagranvariedaddeprotenas
y cada una desempea unafuncinbiolgicaespecficaquepuedeserdereserva,
de sostn, transporte, estructural, etc. Qumicamente las protenas estn
constituidas por combinaciones complejas de carbono, hidrgeno, oxgeno,
nitrgeno y otros elementos en menor proporcin como son azufre cobre y
fsforo.

Tambin se puede identificar protenas mediante el uso de sustancias que al

ponerse en contacto con ellas, producen una coloracin especfica, tal es elcaso
de la Reaccin de Biuret.

La reaccin debe su nombre al Biuret, una molcula formada a partir de dos de

urea (H2N-CO-NH-CO-NH2), que es la ms sencilla que da positivaestareaccin
la presencia de protenas. El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solucin
acuosa alcalina (de NaOH o KOH). La reaccin se basa en la formacin de una
compuestodecolorvioleta,debidoalaformacindeuncomplejodecoordinacin
entre iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que
forman parte de los enlaces peptdicos presentando un mximo de absorcin a
540 nm.

OBJETIVO

En esta prctica el alumno obtendr el conocimiento de cmo manejar un

espectrofotmetro , cmo manipular las celda , como limpiarlas , que es un biuret
el alumno conocer la mquina en el laboratorio que se encarga del bao maria
con movimiento y el tiempo necesario para que los tubos de ensaye estn listos .
tambin practicar su tcnica de pipeteo .
el alumno ser capaz de realizar una recta en formaascendente,paraasmedir
la absorbancia de cada una de las celdas con la solucin de los tubos de ensaye .
MATERIAL Y MTODO

8 tubos de ensaye de 20 ml
1 pipeta de 1ml
2 pipetas de 2ml
3 pipetas de 5 ml
1 gradilla
5 vasos precipitados de 100 ml
2 vasos precipitados de 150 ml
1 espectrofotmetros
4 celdas
agua desionizada

FOTOS DE LA PRCTICA

OBSERVACIONES

vi los 8 tubos de ensaye con distintas tonalidades , desde un morado intenso

hasta un morado claro , vi como trabajaba en espectrofotmetro , vi sus colores
, escuche el sonido que haca al cambiar de celda para saber su absorbancia.
pude notar el pequeo remolino que se haca a la hora de mezclar los tubos , y
senta como pegaba mi dedo en ellos , pens que si les pegaba con mucha fuerza
los romperia pero nada de eso .
escuche el sonido que haca cuando estaba en bao maria , note su temperatura ,
cuando estuvieron listos los tubos despus de 15 minutos en bao maria sentir
su temperatura .

RESULTADO

al finalizar la prctica , obtuvimos los siguientes resultados :

tubo 1 solo se utilizo para calibrar

tubo 2: 0.099 de absorbancia
tubo 3: 0.197 de absorbancia
tubo 4 :0.279 de absorbancia
tubo 5: 0.374 de absorbancia
tubo 6: 0.445 de absorbancia
tubo 7: 0.479 de absorbancia
tubo 8 0.486 de absorbancia
gracias a que pipeteamos correctamente nos sali bien los resultados de
absorbancia , ya que pudimos notar que algunos equipos les sali mal su
resultados de absorbancia , no formaban una curva en ascendencia.

CONCLUSIN
al finalizar esta prctica , el alumno ser capaz de manejar el
espectrofotmetro por s solo al igual que el bao maria con movimiento .
el pipetear correctamente sabemos que en prcticas futuras .
ahora ya conoce que es un biuret y una albmina.
se aplican estas tcnicas a futuras prcticas para as obtener un trabajo de
calidad .

DISCUSIN
al ver los resultados de otros equipos , por ejemplo en el tubo 4 deabsorbancia
obtuvieron 0.325 y en el 5to tubo .0290 , ese resultado est mal , en vez deir
de forma ascendente va variando , nos podemos dar cuenta claramente que su
pipeteo est mal ,