Bioqumica Pesquera Prctica #1 Sistemas buffer Introduccin

Introduccin: Los amortiguadores (tambin llamados disoluciones amortiguadoras, sistemas tampn

o buffers) son aquellas disoluciones cuya concentracin de protones apenas vara al aadir cidos o
bases fuertes. La capacidad amortiguadora es la medida de efectividad para resistir los cambios de pH
con la adicin de cido o base Mantener el pH constante es vital para el correcto desarrollo de las
reacciones qumicas y bioqumicas, ya sea para el funcionamiento adecuado de las enzimas en el sistema
digestivo o los glbulos rojos en el torrente sanguneo; que tienen lugar tanto en los seres vivos como, a
nivel experimental en el laboratorio.
Metodologa (expuesta en la gua)
Preparar 50 mL de cada una de las dos soluciones indicadas, a partir de los reactivos dispuestos en la
mesa central (segn indicacin de la profesora), realizando los clculos pertinentes
1 .V=0,1.50 cido=5ml 1. V=0,1.50 Hidrxido=5ml
2 1.V=0,05.50 cido=2,5ml 1. V=0,05.50
Hidrxido=2,5ml
3 1.V=0,1.50 cido=5ml 1. V=0,1.50 Hidrxido=5ml

4 1.V=0,2.50 cido=10ml 1. V=0,2.50

Hidrxido=10ml
5 1.V=0,1.50 cido=5ml 1. V=0,1.50 Hidrxido=5ml
6F 1.V=0,2.50 cido=10ml 1. V=0,2.50 Hidrxido

Resultados:
GRUPO

ACIDO

ph

HIDROXIDO

ph

MEZCLA

ph

Ac.Acetico
0.1 M

2.77

NaOH
0.1 M

12.34

15 ml NaOH +
30 ml Ac.Acetico

4.43

4ml

2.6 ml

HCl 0.05 M

1.5

11.83

1.6

Ac.Lactico
0.1 M

2.64

15 ml NaOH +
30 ml HCl
15 ml NaOH +
30 ml Ac.Lactico

2.4

NaOH
0.05 M
NaOH
0.1 M

3.65

2.4

1.7

Ac.Acetico
0.2 M

3.15

KOH
0.2 M

13.73

15 ml KOH + 30
ml Ac.Acetico

4.38

5.7

5.5

HCl 0.1 M

1.7

KOH
0.1 M

12.4

15 ml KOH + 30
ml HCl

2.05

3.4

-5.5

Ac.Lactico
0.2 M

2.83

KOH
0.2 M

12.81

15 ml KOH + 30
ml Ac.Lactico

3.71

5.1

2.3

12.38

TITULACION
NaOH(0.1M)
HCl(0.1M)

RESULTADOS TEORICOS
Para la mesa 1:
Hallando el ph del cido Actico = CH3COOH (0.1 M)

Siendo un cido dbil , que no se disocia por completo K a : 1.75 x 10-5

REACTIVOS
PRODUCTOS
CH3COOH CH3COO- + H +
INICIAL:
0.1 M
FINAL :
0.1-X
X
Remplazamos:
[CH3COO][H +]
()()
= 1.75 x 10 5 =
=
=
(0.1
CH3COOH
)
= 1.3110 3
ph = -log [1.31x10-3] =2.88
EL NaOH es una base fuerte , por lo tanto se disocia completamente
NaOH (0.1 M)
NaOH Na+ + OH
p [OH-] = 1
p [OH] + p H = 14 ph = 13
Para la mezcla:
La reaccin que se lleva a cabo disminuye la concentracin de cido actico y aumenta la
concentracin de acetato de sodio:
# Moles para CH3COOH 0.03 0.1 = 310 3 1M)
# Moles para NaOH 0.015 0.1 = 1.510 3 1M)
REACTIVOS
PRODUCTOS

CH3COOH
INICIAL: 3x10-3
FINAL : -1.5x10-3
1.5x10-3

NaOH
1.5x10-3
- 1.5x10-3
0

Na+CH3COO- + H20
0
+ 1.5x10-3
1.5x10-3

En esta etapa ya se tiene un amortiguador compuesto por cido actico y acetato =

1.75 x 10 5
[CH3COOH] (1.5010 3)(1.7510 5)
+=
=
= 1.7510 5
CH3COO
1.5 10 3
= log( 1.7510 5) = 4.76
Para la mesa 2:

El HCl es un cido fuerte , por lo tanto se disocia por completo :

HCL (0.05 M) HCl Cl + H + p [H +]= -log [0.05 M] = 1.30
EL NaOH es una base fuerte , por lo tanto se disocia completamente
NaOH (0.05 M)
NaOH Na+ + OH
p [OH-] = 1.30
p [OH] + p H = 14 ph = 12.7
Para la mezcla :
# Moles iniciales para HCL 0.03 0.05 = 1.510 3
# Moles iniciales para NaOH0.015 0.05 = 7.510 4
El volumen total de la disolucin es 45 ml. As, la cantidad de HCl restante despus de la
neutralizacin parcial es (1.510 3 7.510 4 ) = 7.510 4
7.5104
Despus, la concentracin de los iones H+ en 45 ml
=0.016 M = pH =-log [0.021 M] =
0.045
1.78

Para la mesa 3:

Hallando el ph del cido Lctico = CH3CHOHCOOH (0.1 M)

Siendo un cido dbil, que no se disocia por completo Ka: 1.38 x 10-4
REACTIVOS
PRODUCTOS
CH3CHOHCOOH CH3CHOHCOO- + H +
INICIAL:
0.1 M
FINAL : 0.1-X
X
X
Remplazamos:
= 1.38 x 10 4 =

[CH3CHOHCOO][H +]
CH3CHOHCOOH

()()

= (0.1) = = 3.65 10 3

ph del cido Lctico = -log [3.65 10 3 ] = 2.44

NaOH = ph = 13

Para la mezcla :
La reaccin que se lleva a cabo disminuye la concentracin de cido lctico y aumenta la
concentracin de lactato de sodio:
# Moles para CH3CHOHCOOH 0.03 0.1 = 310 3 1M)
# Moles para NaOH 0.015 0.1 = 1.510 3 1M)
CH3CHOHCOOH + NaOH NaCH3CHOHCOO- + H20
INICIAL (mol): 3x10-3
1.5x10-3
0
FINAL (mol) : -1.5x10-3
- 1.5x10-3
+1.5x10-3
1.5x10-3
0
+ 1.5x10-3

En esta etapa ya se tiene un amortiguador compuesto por cido lctico y lactato = 1.38 x10 -4
+=

[ CH3CHOHCOOH ] (1.5010 3)(1.38 x10 4)

=
= 1.3810 4
CH3CHOHCOO
1.5x10 3
= log( 1.3810 4) = 3.86

Para la mesa 4

Hallando el ph del cido Actico = CH3COOH (0.2 M) Ka : 1.75 x 10-5

REACTIVOS
PRODUCTOS
CH3COOH CH3COO- + H +
INICIAL:
0.2 M
FINAL :
0.2-X
X
X
Remplazamos:
[CH3COO][H +]
()()
= 1.75 x 10 5 =
=
=
(0.2 )
CH3COOH
= 1.86 10 3

ph del cido Actico = -log [1.31x10-3] =2.73

EL KOH es una base fuerte , por lo tanto se disocia completamente

KOH (0.2 M) KOH K+ + OH p [OH-] = 0.7
p [OH] + p H = 14 ph = 13.3
Para la mezcla
# Moles para CH3COOH 0.03 0.2 = 610 3 1M)
# Moles para KOH 0.015 0.2 = 310 3 1M)
REACTIVOS
PRODUCTOS
CH3COOH
+ KOH Na+CH3COO- + H20
INICIAL:
6x10-3
3x10-3
0
FINAL : -3x10-3
- 3x10-3
+ 3x10-3
3x10-3
0
3x10-3
En esta etapa ya se tiene un amortiguador compuesto por cido actico y acetato de potasio
= 1.75 x 10 5
[CH3COOH] (310 3)(1.7510 5)
+=
=
= 1.7510 5
CH3COO
310 3
= log( 1.7510 5) = 4.76

Para la mesa 5

Para el cido fuerte:HCl (0.1 M) p [H +]= -log [0.1 M] = 1

Para la base fuerte:KOH (0.1 M) p [OH-] = 1 p [OH] + p H = 14 ph = 13
Para la mezcla :
# Moles iniciales para HCL 0.03 0.1 = 310 3
# Moles iniciales para NaOH 0.015 0.1 = 1.510 3
El volumen total de la disolucin es 45 ml. As, la cantidad de HCl restante despus de la
neutralizacin parcial es (310 3 1.510 3) = 1.510 3
1.5103
Despus, la concentracin de los iones H+ en 45 ml
=0.03 M = pH =-log [0.03] = 1.48
0.045

Para la mesa 6:

Hallando el ph del cido Lctico = CH3CHOHCOOH (0.2M) Ka: 1.38 x 10-4

REACTIVOS
PRODUCTOS
CH3CHOHCOOH CH3CHOHCOO- + H +
INICIAL:
0.2 M
FINAL : 0.2-X
X
X
Remplazamos:
[CH3CHOHCOO][H +]
()()
= 1.38 x 10 4 =
= (0.2) = = 5.1910 3
CH3CHOHCOOH

ph del acido lctico = -log [5.1910 3 ] = 2.28

Para la base fuerte: KOH (0.2 M) p [OH-] = 0.7 p [OH] + p H = 14 ph = 13.3
Para la mezcla :
La reaccin que se lleva a cabo disminuye la concentracin de cido lctico y aumenta la
concentracin de lactato de sodio:
# Moles para CH3CHOHCOOH 0.03 0.2 = 610 3 1M)
# Moles para KOH 0.015 0.2 = 310 3 1M)
REACTIVOS
PRODUCTOS
CH3CHOHCOOH + NaOH NaCH3CHOHCOO- + H20
INICIAL (mol): 6x10-3
3x10-3
0
FINAL (mol) : -3x10-3
- 3 x10-3
+3 x10-3
3x10-3
0
+ 3x10-3
En esta etapa ya se tiene un amortiguador compuesto por cido lctico y lactato = 1.38 x10
-4
[ CH3CHOHCOOH ] (310 3)(1.38 x10 4)
+=
=
= 1.3810 4
CH3CHOHCOO
3x10 3
= log( 1.3810 4) = 4.76
Interpretacin de Resultados:

El ph experimental para el cido y la base hallados con el potencimetro se asemeja al terico, puede
variar por un error sistemtico por parte del operario que realizaba el experimento.

Para la mezcla del cido Actico 0.1 M, si aadimos una base fuerte (NaOH), los iones
OH- consumen rpidamente los H+ del sistema para formar agua, con lo que el equilibrio de
disociacin del cido se desplaza hacia la derecha para restaurar la concentracin inicial de
protones. En otras palabras, la adicin de una base provoca la transformacin de una parte del

cido actico libre en acetato. Se denota la capacidad amortiguadora es mxima cuando el

cociente sal/cido es cercana al 1, En este caso las concentraciones tericas de la sal y el cido
son iguales, lo que afirmara esto. (GONZLEZ MAAS, (S.F))
Lo mismo sucede con el cido actico 0.2 M en la que su ph y su pka =4.76 terico son iguales,
debido a sus mismas concentraciones, lo que nos demuestra que se cumple la ecuacin de
Henderson Hassel-Bach. Al titular la mezcla 1 y la mezcla 4 se obtiene un mayor gasto del
NaOH que el HCl, ya que el ph de la mezcla es ms acida que bsica, adems el rango de ph
de la fenolftalena es de 8.2 (incoloro) a 10 (magenta) por lo que tiende a consumir ms lcali
para virar y obtener un punto de equilibrio. (Raymond, 9 edicion)

En el caso del cido lctico 0.1 y 0.2 M sucede lo mismo , que su ph y ka = 3.86 (terico)
, as que debe tener la mxima eficiencia para resistir los cambios bruscos de ph.
En los ph experimentales de las mezclas 3 (ph =3.65) y 6 (ph =3.71) al realizar la titulacin,
tambin sucede que consume ms lcalis que acido, este se debe al rango de viraje del
indicador de naranja de metilo (rojo)3.1 y 4,4 (naranja amarillo) ya que los pHs de la ambas
mezclas son ms acidas , lo que genera un menor gasto del cido . (Raymond, 9 edicion)
Para el HCl con NaOH y KOH, la sal que se forma en ambos casos son de carcter cido (2.40
y 2.05 respectivamente ),y en la titulacin solo se aadiria una base para obtener un punto de
equilibrio con la fenolftalena , mas no con el naranja de metilo ,(3.1-4.4) ya que se encuentra
fuera de su rango de viraje , por lo tanto el gasto el 0 mL

ARTICULO CIENTIFICO: (PUBMED)

Las reacciones biocatalticas a menudo requieren el suministro de energa qumica y grupos fosfato en
forma de trifosfato de adenosina (ATP). Enzimas auxiliares se pueden utilizar para convertir un
subproducto de reaccin-difosfato de adenosina (ADP) -back a ATP. Mediante el empleo de
espectrometra de masas en tiempo real (rTMS), se puede obtener una idea de inter-conversiones de los
reactivos en sistemas de reaccin multi-enzima y optimizar las condiciones de reaccin. En este estudio,
los rastros temporales de iones correspondientes a monofosfato de adenosina (AMP), ADP y ATP
proporcionan informacin vital que podra ser utilizado para ajustar las actividades de las enzimas ''
tamponantes. Utilizando los resultados rTMS como una retroalimentacin, sino que tambin caracteriza
un buffer de energa bienzymatic que permite la recuperacin de ATP en los casos en los que se hidroliza
directamente a AMP en la principal reaccin enzimtica. Esta observacin apoya la conclusin de que la
optimizacin de los procedimientos de reciclado de energa qumica es crtico para la economa de
reaccin biocintica.
Conclusin:
Se verifico experimental y tericamente los diferentes cambios que sufren los buffers sometidos a
diferentes sustancias acidas o bsicas, as como las variaciones de pH mediante indicadores a travs de
la titulacin.

Referencias electrnicas:
GONZLEZ MAAS, J. ((S.F)). CURSO DE BIOMOLECULAS. Obtenido de
http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/buffer.htm
Raymond, C. (9 edicion). Quimica. Mc Graw Hill. Pag 715 -720

Mass spectrometry-guided refinement of chemical energy buffers.Chen TR, Urban PL.

Proc Math Phys Eng Sci. 2016 Jun;472(2190):20150812