UNIVERSIDAD NACIONAL DE

SAN CRISTBAL DE

HUAMANGA
FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y METALURGIA
ESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA

ASIGNATURA: QU-342 ANALISIS INSTRUMENTAL

PRCTICA N2
ELABORACION DE CURVAS DE CALIBRACION ESPECTROSCOPICA Y SU
APLICACIN ANALITICA

PROFESOR DE TEORA:

M.Sc. GARCIA BLSQUEZ, Jorge S.

PROFESOR DE PRCTICA: M.Sc. GARCIA BLSQUEZ, Jorge S.

ALUMNA

:
TINEO CANALES, Katia Yesica

FECHA DE ENTREGA: 07/09/16

FECHA DE EJECUCIN: 01/09/16

DA DE PRCTICA: mircoles

HORA: 8am-11am

AYACUCHO PER
2016

DETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DE ACIDO CARMINICO

EN MUESTRAS DE COCHINILLA

I
OBJETIVOS:
Aprender el manejo, funcionamiento y cuidados del espectrofotmetro.
Determinar la cantidad de cido crnico en muestras de cochinilla y carmin.
Determinar el porcentaje de humedad de la muestra utilizada
II

REVISION BIBLIOGRAFICA
ESPECTROFOTOMETRIA

La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las

investigaciones biolgicas. El espectrofotmetro es un instrumento que permite
comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una
cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma
sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que parece ser
completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro
visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del infrarrojo.
La absorcin de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la
estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa
radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida.
El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de onda de
la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas
longitudes de onda no absorbida.
MTODOS FOTOMTRICOS DE ANLISIS
1. NATURALEZA DE LA RADIACIN ELECTROMAGNTICA
La Radiacin Electromagntica es una forma de Energa radiante que se propaga en
forma de ondas. En este fenmeno ondulatorio se define:

a) Longitud de onda (l): es la distancia entre dos mximos de un ciclo completo del
movimiento ondulatorio. Se expresa, segn el S.I. en nanmetros (nm) y sus
equivalencias son: 1nm = 1mm =10 A0 = 10-9 m.
b) Frecuencia (n): es el nmero de ciclos por segundo. Es inversa a la longitud de
onda. Su frmula es: n = c/l, y se mide en ciclos por segundo o hertzios.
c) Fotones: la luz est formada por fotones, y estos son paquetes discontinuos de
E. La E de un fotn depende de la frecuencia y de la longitud de onda, segn la
siguiente expresin:
E = h x n = h x c/n (h = Cte. de Planck = 6,62.10-27erg/seg.).
La Energa Electromagntica se mide el Ergios. La relacin entre la longitud de
onda y la Energa es inversa, por lo tanto a menor longitud de onda mayor
Energa y viceversa.
d) Espectro Electromagntico: cubre un amplio intervalo de E radiante, desde los
rayos g de longitud de onda corta hasta las ondas de radio, de longitud de onda
larga. Se divide en varias regiones, las ms interesantes para nosotros son:
Regin Ultravioleta: l = 10-380 nm
Regin Visible: l = 380-780 nm
Regin Infrarroja: l = 780-30.000 nm
En la Regin Visible, la luz se descompone en colores. La luz blanca contiene
todo el espectro de longitudes de onda. Si interacciona con una molcula puede
ser dispersada o absorbida
2. FENMENOS DE INTERACCIN ENTRE LUZ Y MATERIA
1. FENMENO DE ABSORCIN
Cuando una partcula que se encuentra en estado de reposo o estado fundamental
interacciona con un haz de luz, absorbe E y se transforma en una partcula en estado
excitado. La molcula absorbe la E de la onda y aumenta su energa, y ese aumento de
energa es igual a la E de la Radiacin Electromagntica absorbida (E = h.n). La
partcula en estado excitado tiende a volver de forma espontnea a su estado de
reposo desprendiendo la E absorbida en forma de calor.
Espectro de Absorcin. Cada especie absorbente, que recibe el nombre de
cromgeno, tiene un determinado espectro de absorcin. El espectro de absorcin es
un grfico donde se representa en ordenadas la Absorbancia y en abcisas la longitud
de onda. La medida de la cantidad de luz absorbida por una solucin es el fundamento
de la espectrofotometra de absorcin.
Por eso es importante trabajar a la longitud de onda a la que la sustancia estudiada
absorbe la mayor cantidad de luz (a mayor cantidad de luz, mayor cantidad de
sustancia).
B.FENMENO DE EMISIN

Algunos compuestos, tras ser excitados por la luz, vuelven al estado fundamental
produciendo la emisin de energa radiante. En este caso, lo que se mide es la energa
emitida y, en este fenmeno se basa la fotometra de llama o la fluorescencia.

III

MATERIALES

Espectrofotmetro
Balanza analtica
Estufa elctrica
Cocinilla o plancha elctrica
Vasos precipitados de 250ml y 150 ml
Fiolas de 10 ml y 1000 ml
Lunas de reloj
Esptula
Mortero
Embudos simples
Papel de filtro de porosidad fina p whatman N02
Pipeta graduada
Probeta graduada
IV
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Preparacin de la solucin problema
Tomar aproximadamente 5g de muestra de cochinilla deshidratada y pulverizar
en un mortero.
Tomar otra porcin de 5g de la muestra pulverizada y determinar la humedad
en una estufa elctrica a una temperatura de 60 -70c
Pesar 0.1g de muestra molida y colocar en un vaso Erlenmeyer de 250ml y
agregar 30ml de HCl 2N.
Tapar el vaso Erlenmeyer con una luna de reloj y llevar a ebullicin por 10 15
minutos hasta que la extraccin se haya completado. Enfriar la mezcla hasta
temperatura ambiente.
La mezcla resultante pasar a una fiola de 1000 ml y enrasar con agua destilada.
Homogeneizar.
Filtrar la solucin con papel de porosidad fina y eliminar los primeros 200 ml
del filtrado.
Separar 3 fracciones de filtrado de aproximadamente 50 ml y destinar para el
anlisis.
Preparacin de la solucin blanco o referencia
Se utiliz solamente agua destilada
Procedimiento instrumental del espectrofotmetro

 conectar el instrumento a la lnea de tensin de 220V y encender con la tecla de

interrupcin.
Dejar el estabilizar el equipo por 15 minutos aproximadamente.
Ajustar la longitud de onda a 495 nm.
Colocar en el comportamiento de muestra, la cubeta contenido la solucin
blanco y llevar a absorbancia igual a 0 o 100% de transmitancia.
Remover la cubeta conteniendo la solucin blanco e insertar la cubeta
conteniendo la solucin problema y leer la absorbancia respectiva. Proceder de
igual manera para las diferentes muestras.

Muestra de carmn
Seleccin de la cochinilla

Soluciones a analizar
Calentamiento a ebullicin

CLCULOS,DATOS Y RESULTADOS EXPERIMENTALES

Clculos para preparar la solucin HCl 2N

Vc=

VdPmCc
%p

Datos para HCl :

=1.19 g/ml
%p=0.375

=1

meq
mol

Pm=36.43 g /mol
Reemplazando:
Vc=

0.1 L36.43 g/mol2 meq/ L

=
1.19 g
16.5mL
0.371 meq/mol
ml

Calculo de porcentaje % de cido carmnico (AC)

Cm=

CpAm
Ap

Dnde:
Cm= concentracin de la muestra (ppm)
Cp= concentracin del patrn= 100ppm

Am= absorbancia de la muestra.

Ap= absorbancia del patrn: 1,39

%AC=

mAC
100
m

MUESTRA 1

=495
Cm=

AP=1.39

Am=0.4535

mm=0.0958

0.4535
x 100=32.6259 mg/ L
1.39
mg
x 0.5 L x 1 g
L
=0.01631 g
1000 mg

32.6259
mAC=

%Ac=

0.01631 g
x 100=17.03
0.0958 g

MUESTRA 2

=495
Cm=

AP=1.39

0.2735
x 100=19.6762 mg/ L
1.39

mg
x 0.5 L x 1 g
L
=9.8381 x 103 g
1000mg

19.6762
mAC=

%Ac=

Am=0.2735 mm=0.0533

9.8381 x 103 g
x 100=18.45
0.0533 g

 MUESTRA 3 GLOBENATURAL AL 54% DE CARMIN

=495
Cm=

AP=1.39

Am=0.701

mm=0.0556

0.701
x 100=50.4317 mg/ L
1.39
mg
x 0.5 L x 1 g
L
=0.0252 g
1000 mg

50.4317
mAC=

%Ac=

0.0252 g
x 100=45.32
0.0556 g

1. CUADRO DE RESUMEN
RESULTADOS EXPERIMENTALES
MUESTRA

A
masa de la
ABSORBANCI muestra en
A
gramos

concentracin

Masa del

Porcentaje

de la muestra

cido

del cido

(Cm ) mg/L

carmnico en g carmnico %

1 cochinilla
UNSCH
2 cochinilla

0.4535

0.0958

32.6259

0.01631

17.03

UNSCH
3

0.2735

0.0533

19.6762

9.8381x10-3

18.45

0.701

0.0556

50.4317

0.0252

45.32

GLOBENATURAL

2. QUE VENTAJAS Y DESVENTAJAS PRESENTA EL METODO DE

ANALISIS UTILIZADO?
Ventajas

Desventajas

 Preparacin mnima de muestra.

Alto precio del equipo

Alta sensibilidad

Lmparas especiales

Precisin

Celdas muy sensibles

Anlisis rpido
Verstil
Fcil de usar
El espectrofotmetro es digital y
facilita la lectura exacta.

3. QUE OTROS MTODOS DE ANLISIS

CUANTIFICAR EL ACIDO CARMINICO EN
COCHINILLA?

CONOCE PARA
MUESTRAS DE

A. EXTRACTO COLORANTE CON CARBONATO DE SODIO:

Equipo y reactivos:

125 mL de agua desmineralizada

0.125 g de carbonato de sodio
125 mL de alcohol etlico a 80
3.12 g de cochinilla
A la solucin acuosa de carbonato de sodio, se le aade la cochinilla; se calienta a
ebullicin por 15 minutos, dejar en reposo, decantar el lquido y filtrar. A la
solucin se agrega alcohol etlico, se deja en reposo por una semana, se decanta el
lquido y se filtra.
B. MTODO JAPONS:
Equipo y reactivos:

En

93.75 mL de agua desmineralizada

0.06 g de cido tartrico.
0.2 g de gelatina
3.12 g de cochinilla molida
Tamiz de malla No. 20
una autoclave se calientan a 150C y 16 lb. De presin durante 10 minutos, 93.75

mL de agua desmineralizada, 0.06 g de cido tartrico, 0.2 g de gelatina, 3.12 g de

cochinilla molida y tamizada con malla No. 20 y a 8% de humedad. Se deja reposar,

se filtra y luego la solucin obtenida se destila hasta obtener un extracto

concentrado con un alto porcentaje de cido carmnico.
C. MTODOS DE EXTRACCIN DE CIDO CARMNICO EN CRISTALES:
Los mtodos para extraccin de cido carmnico se basan en su oncentracin y
cristalizacin a partir de un complejo metlico precipitado de una extraccin
acuosa de la cochinilla. Algunos mtodos descritos son: I. Mtodo Japons, II.
Mtodo Alemn (Nony y Bouman, 1983).

4. FORMULAR
LA
ESTRUCTURA
MOLECULAR
DEL
ACIDO
CARMINICO Y DEL CARMIN. MENCIONAR LAS APLICACIONES
INDUSTRIALS DE ESTOS COMPUESTOS. SEALAR LAS
PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS DEL ACIDO CARMINICO.

cido carmnico: El cido carmnico es un cido orto-fenoxi-carboxlico de carcter

hidroflico. Este presenta una coloracin roja la cual puede variar hasta prpura
cuando el pH aumenta (Salaverry-Garca, 1998). El cido carmnico es de frmula
C22H20O13, se cristaliza en prismas rojos, no tiene punto de fusin y se
descompone a 120C. El grupo carboxlico COOH y los cuatro grupos OH
fenlicos, de las posiciones C-3, C-5, C-6 y C-8 desprotonables, contribuyen a los
cambios de color y pH del cido carmnico; anaranjado a pH = 3.0, rojo a pH = 5.5
y prpura a pH = 7.0.

USOS:
El carmn es un producto verstil de gran valor para muchas industrias.
Industria Farmacutica: Carmn en polvo o solucin empleado en la preparacin de
grageas y tabletas. En solucin alcalina se emplea en pasta dentrfica, enjuages
bucales, etc.
Industria Cosmtica: Se emplea en lpices labiales, polvos faciales, lpices para los
ojos, etc. Desde el punto de vista de calidad la industria cosmtica es lo ms exigente,
slo acepta Carmn de alta pureza que coincida en tonalidad con sus patrones de
calidad y color. Nosotros fabricamos los tipos de Carmn adaptados a las necesidades
de cada usuario.

Industria Alimentaria: El consumidor de embutidos est acostumbrado a utilizar

productos de cierta tonalidad de rojo. El fabricante emplea carmn para colorear sus
embutidos cuando utiliza carne de cerdo y para teir las tripas. Cuando el embutido es
hervido por el consumidor se utiliza Carmn en polvo. En Francia se le agrega en forma
de sal colorante.
Con carmn se colorean las bebidas alcohlicas (tipo Campari), bebidas no alcohlicas,
jaleas, mermeladas, helados, yogurt, cereales, sopas en polvo, etc. En general cualquier
producto que deba tener una tonalidad rojo fresa.
Propiedades Qumicas del cido carmnico
a)

Con los metales pesados forma sales insolubles llamados carminatos:

b) Se oxida con agua oxigenada, en presencia de Sulfato de cobalto como

catalizador y en medio alcalino produciendo el cido: 8 metil, z-6 Dihidroxi, 1,4
Naftoquinon, 3-5 Dicarboxilico. Polvo amarillo e Giroscpico.

c) Se oxida con Permanganato de Potasio en medio de Acido Sulfurico para dar el

cido 8 metil, 2-3-6, Trihidroxi, 1-4 Naftoquinon, 5 carboxlico denominado
comnmente carzarina, que cristaliza en agujas de color rojo granate.

d)

Realizada la oxidacin con cido Ntrico, se obtiene el cido Nitrococsico.

e) El bromo y el Yodo lo atacan rpidamente dando diferentes productos el alfa

Bromo carmn y el beta Bromo carmn.

a) Es de carcter dextrgiro.
b) Cambia de color del rojo al violeta en un rango de pH de 4,8 6,2, lo que
fundamente su aplicacin como indicador.

OBSERVACIONES

VI

En la muestra 1 y 2 que fueron tomadas del campus de la universidad

nacional san Cristbal de Huamanga se obtuvieron 17.03 % y 18.45%
respectivamente estos resultados fueron razonables debido a que la
cochinilla, no eran de buena calidad, una cochinilla de buena calidad llega
a tener % de 20.
El porcentaje de la muestra de globenatural en la etiqueta era de 54%
en nuestra cuantificacin de este obtuvimos 45.32 % ,este puede ser
motivo de diversas razones:
Uso de instrumentos de laboratorio mal adecuado
Pesada de muestra inexacta.
Calibracin de equipo.
CONCLUSIONES

Conclusiones:

Se aprendi el manejo, funcionamiento y cuidados del

espectrofotmetro.
Determinamos la cantidad de cido carminico en la muestra de cochinilla
y una muestra de globenatural.

VII.BIBLIOGRAFIA
1) ESPECTROFOTOMETRIA
DISPONIBLE EN:
http://perso.wanadoo.es/sergioram1/espectrofotometria.htm

2) EQUIPOS DESVENTAJAS Y VENTAJAS

DISPONIBLE EN:
http://proyectodecalibracion.blogspot.pe/2011/12/ventajas-y-desventajas-en-losequipos.html

3)

EVALUACIN DE SEIS MTODOS PARA LA EXTRACCIN DE CIDO

CARMNICO OBTENIDA A PARTIR DE COCHINILLA (DACTYLOPIUS
COCCUS COSTA) SEGN CONDICIONES DE LABORATORIO DE LA
FACULTAD DE AGRONOMA DE LA UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE
GUATEMALA.
DISPONIBLE EN:
http://biblioteca.usac.edu.gt/EPS/01/01_2467.pdf

4) CARMN Y ACIDO CARMINICO

DISPONIBLE EN:

http://www.bristhar.com.ve/carmin.html