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En la naturaleza, los microorganismos se encuentran formando poblaciones mixtas con otros tipos de
microorganismos. Los cultivos de estas mezclas se llaman por ello cultivos mixtos. Sin embargo, el
conocimiento de los microorganismos se consigue mediante el estudio de cepas aisladas, cultivadas en el
laboratorio en cultivos puros (o axnicos). En ocasiones el estudio molecular conduce a la
caracterizacin de los microorganismos, an en poblaciones mixtas. Sin embargo la identificacin
bacteriana y la caracterizacin completa solo es posible tras el aislamiento de la bacteria y la obtencin de
cultivos puros. Por ello el primer problema al estudiar una bacteria es su aislamiento del resto de los
microorganismos presentes (enn una muestra patolgica, de agua, de suelo, de alimentos, etc.). Una vez
que se ha logrado el aislamiento es posible obtener la bacteria de inters en cultivo puro .
Aislamiento
Se trata de obtener el cultivo de un solo tipo microbiano en un medio de cultivo, por ejemplo en un tubo
inclinado de agar nutritivo. Para ello, se obtiene una pequea cantidad de masa bacteriana de una colonia
separada en el aislamiento. Con ella se inocula un nuevo medio de cultivo haciendo estras muy juntas. La
incubacin en condiciones adecuadas proporcionar un cultivo puro. Puede repetirse el proceso con cada
tipo de colonia. Se obtendr una coleccin de cultivos puros, separados, de los microorganismos que
coexistan en la muestra original.
Es aconsejable hacer un segundo aislamiento antes de proceder a la obtencin del cultivo puro. Si todas
las colonias de la segunda placa resultan idnticas, puede usarse una de ellas para establecer el cultivo
puro. Obtenido el cultivo puro es conveniente comprobar su pureza mediante una tincin de Gram. Los
cultivos puros de microorganismos son mantenidos en el laboratorio por resiembras (pase de un medio
de cultivo a otro) sucesivas. Una de las copias puede ser liofilizada para su conservacin.
Tecnicas y metodos de
aislamiento y seleccin
de microorganismos
Publicado en septiembre 26, 2012
que
en
l
el
efectuar
rea
este
de
procedimiento,
trabajo,
existen
es
necesario
muchos
otros
condiciones
tales
como
la
temperatura,
aireacin,
la
un
microorganismo
significa
promover
intencionalmente
el
Cuando
ste
contiene
una
sola
especie
de
en
el
laboratorio
para
realizar
diversos
ensayos
referentes
a:
no
introducir
microorganismos
empleados
en
la
transferencia
de
muestras
microbianas:
Los utensilios utilizados para la transferencia de muestras son los
siguientes:
Hisopo, pipeta (para uso microbiolgico sonterminales y la parte superior o
boquilla debe estar protegida con filtro de algodn), pipeta pasteur, cable
de Kolle o portasa con alambre de platino dispuesto en forma de: aguja,
asa, esptula y/o gancho.
En la transferencia de microorganismos se emplean agujas, asas de
inoculacin, hisopos, pipetas o pipetaspasteur que debern esterilizarse
previamente. La utilizacin de estos dispositivos, as como de los diferentes
medios de cultivo tienen aplicaciones especficas. Por ejemplo:
Los medios lquidos se preparan en tubos o matraces que se cubren con
tapones de algodn o tapones especiales. Un cultivo lquido puede ser
transferido mediante un asa microbiolgica, un hisopo, pipeta o pipeta
pasteur; el inculo se deposita dentro del caldo o medio lquido. En este tipo
de cultivos los microorganismos presentan un desarrollo particular que se
manifiesta en la superficie o a travs de todo el lquido. Una de las ventajas
que presenta este tipo de cultivo se refiere a laposibilidad de agitarlos
acelerando la velocidad de microorganismos anaerobios, por otra parte, en
este tipo de cultivos, las poblaciones se encuentran suspendidas y e fcil
homogenizarlas, lo que permite estandarizar laconcentracin del inculo. La
desventaja que presentan, es que en ellos e difcil detectar contaminacin a
simple vista.
Los medios semislidos se preparan en tubos, se inoculan con aguja de
siembra (asa recta) o pipeta pasteur; en este ltimo caso es necesario
calentar el medio y cuando se encuentra en estado lquido y a una
temperatura
de
aproximadamente
42C
se
agrega
el
inculo,
se
del
agar
con
mucha
suavidad;
en
estos
medios,
los
que
varan
con
el
tipo
de
microorganismo
incubar
en
temperaturaambiente.
la
En
gaveta
general
las
cajn
del
incubadoras
laboratorio,
microbiolgicas
grupo
se
adapta
las
dos
condiciones
se
le
otros
organismos,
ya
sea
como
parsitos,
comensales
se
hacen
estras
sobre
la
superficie
de
un
medio
varias
veces
se
logra
separar
clulas
individuales.
(gas
natural).
Wolfe
quera
conocer
de
qu
manera M.