PRCTICA N 3

TITULACIN DE AMINOCIDOS. Septiembre 14 de 2016

Espinosa Torres Ana Paula; Cd: 164987; anapaula_espinosa97@hotmail.com
Rincn Glvez Ana Isabel; Cd:164943; anaisabelrincongalvez@gmail.com
RESULTADOS Y ANLISIS
La curva de titulacin es una representacin grfica usada para identificar la variacin del
pH en aminocidos. Para este caso fue realizada la titulacin de la glicina, que es un
aminocido no esencial de carcter no polar y que a diferencia de los dems aminocidos
no posee un carbono quiral.(1) La titulacin fue efectuada agregando volmenes (mililitros)
de NaOH 0.1 M a un beaker de 50mL, que contena 25 mL del aminocido estudiado, 5 mL
de formaldehdo y una gota de fenolftalena. A medida que se fueron aadiendo los mililitros
de NaOH el nivel de pH fue aumentando, tal como puede ser observado en la tabla 1.

Los
aminocidos
se
encuentran
ionizados
en
soluciones
acuosas de manera
que
pueden
actuar como cidos o
bases, la glicina inicialmente present un pH de 2.4 (cido), al agregar los 5 mL de
formaldehdo su pH baj, convirtindose 2,2, que al agregar la gota de fenolftalena subi a
2.5. La presencia de formaldehdo garantiza exactitud a la titulacin debido a que este
reacciona con el grupo amino del aminocido sustituyendo a uno de los hidrgenos para
formar derivados mono o dimetilados, que el grupo amino bloqueado y el aminocido pierde
su carcter anftero.(2) (Figura 1)

Figura 1.
Por otro lado, fue utilizada la fenolftalena como indicador, la cual tiene la facultad de
presentar cambio en la coloracin en el momento que el pH de la solucin evaluada se
encuentre en un intervalo entre 8,0 y 9.8. En este caso la coloracin rosa fue presentada al
agregar los 6 mL de NaOH en un pH de 8.9. Este cambio en la coloracin indica el punto de
equivalencia, que ocurre cuando cantidad de sustancia NaOH aadida es
estequiomtricamente igual a la cantidad presente en el aminocido (glicina) y el punto final
que es cuando finaliza la valoracin. (3)
A partir de la informacin ilustrada en la tabla 1 se traz la curva de titulacin con la cual se
denota la medida de pKa de los grupos ionizables ubicados en el punto medio de la zona
buffer, la cual es determinada en un intervalo de +-1 en las unidades de pH. El aminocido
empleado tiene pK1 y pK2 corresponde al grupo -amino y -carboxilo que contiene la
base estructural de todo aminocido, cuando se protonan o desprotonan en funcin del pH
del medio. El grupo -carboxilo se desprotona a un pH 2.3 (momento en el que el grupo amino sigue protonado). Enseguida, el grupo -amino se desprotona a un pH 9.6 Los
puntos de la curva de titulacin en los cuales no se manifiesta un cambio de pH as la
concentracin de la base aplicada haya aumentado indican los valores de pKa y es donde
se presenta mayor capacidad amortiguadora.(4)
Se obtuvo un valor experimental de pK1 y pK2 de 2.7 y 10.6 respectivamente, los cuales
estn un poco distantes de los valores reales aportados por la bibliografa consultada que
son 2.3 para pK1 y 9.6 para pK2. Esto puede darse por errores presentados por parte de
las personas que efectuaron la titulacin, por diferencias en la exactitud de los instrumentos
de medicin.(5)
As mismo, en la curva de titulacin ilustrada se puede indicar el punto isoelctrico, valor de
pH en el que la carga neta del aminocido es cero. En consecuencia, al agregar una
sustancia bsica ocurre un cambio brusco en el pH, pues no hay capacidad amortiguadora
(6). ste se encuentra en medio de pK1 y pk2, se puede calcular a partir de la curva de
titulacin o empleando la siguiente ecuacin: pI= (pK1+ pK2)/2.(7) Aplicando la acuacin a
los valores experimentales el punto isoelctrico es 6.7. Sin embargo, el valor consultado se
encuentra en un pH de 5.97.(7)

Como se mencion anteriormente los aminocidos se encuentran protonados en medio

acuoso, gracias los dos grupos que lo conforman este se puede ionizar, es decir que
presenta propiedades anfotricas; puede aceptar y donar protones (H+). En primera
instancia, se evidencia una solucin de pH bajo, donde la glicina est totalmente protonada;
con carga positiva -COO- como -COOH y -NH2 como - NH3+. En segunda instancia, la
solucin es neutra pues el aminocido se encuentra como ion dipolar, al tener un pH de 2.3
(pK1) el carboxilo se disocia (-COO-) y el amino sigue protonado (-NH3+), una carga
positiva y una carga negativa respectivamente, tambin se conoce por el nombre de
zwitteriones. Finalmente en tercera instancia, a pH bsico de 9.6 (pK2) el carboxilo continua
disociado (-COO-) y el amino pierde el protn (-NH2). Por lo tanto, la glicina se carga
negativamente. (7)
Figura 2.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.
1. Voet, D. and Voet, J. Biochemistry. Hoboken, NJ: J. Wiley & Sons.2004. Pag
76-77.
2. Yez Avila, R. Manual de prcticas de bioqumica. Instituto Politcnico
Nacional. 2011. Pag 102.
3. Clavijo Daz, A. Fundamentos de qumica analtica. Bogot: Universidad
Nacional de Colombia. 2002. Pag 517.
4. scnd
5. Salve, M. Bioqumica. Colombia: McGraw-Hill Interamericana. 2002. Pag 1617
6. Quesada, S.. Manual de experimentos de laboratorio para bioqumica. 2016.
Google Books.
7. Fornaguera, J. and Gmez, G. Bioqumica: la Ciencia de la Vida.Editorial
Universidad Estatal A Distancia.].(2016)Pag 40-43