Universidad

Veracruzana
Fac. De Ciencias
Qumicas

Produccin
Industrial de cido
Ctrico

Catedrtico: Dr. Oswaldo Guzmn

Lpez

Carla Sujey Pineda Delgado

Ingeniera en Biotecnologa

Produccin Industrial de cido ctrico

NDICE

INTRODUCCIN.......................................................................................................2
LAS CEPAS; SELECCIN Y MEJORA.....................................................................3
INCULO...................................................................................................................3
Cultivo Del Microorganismo...................................................................................3
Primer Inculo........................................................................................................3
Pre-Fermentador #1...............................................................................................4
Pre-Fermentador #2...............................................................................................4
PRODUCCIN..........................................................................................................5
Fermentacin..........................................................................................................6
SEPARACIN............................................................................................................7
PURIFICACIN.........................................................................................................8
CONCLUSIN...........................................................................................................9

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Produccin Industrial de cido ctrico

INTRODUCCIN
El cido ctrico ha sido conocido como una sustancia natural de las plantas desde
finales del siglo XIX, y desde 1893 los cientficos saben que es producido por
hongos filamentosos. En 1923 se inici la primera fermentacin prctica para la
produccin de este cido orgnico utilizando microorganismos que crecan sobre
la superficie de los cultivos. En la actualidad el uso de hongos para la elaboracin
de importantes productos comerciales ha aumentado rpidamente en los ltimos
tiempos, instaurando un marco en el cual el cido ctrico se ha posicionado como
el mayor cido orgnico producido por fermentacin con Aspergillus niger, a la vez
que es ampliamente usado en la industria de alimentos, bebidas, farmacutica,
qumica entre otras.
Los microorganismos capaces de producir y acumular cido ctrico son las
especies de los gneros Aspergillus, Citromyces, Penicillium, Monilia, Candida y
Pichia, aunque para la produccin comercial slo se utilizan mutantes de
Aspergillus niger. Comparados con las cepas de Penicillium, los Aspergillus
producen ms cido por unidad de tiempo, debido a que presentan baja actividad
de las enzimas isocitrato deshidrogenasa y aconitasa hidratasa, y una alta
actividad de citrato sintetasa. Las anteriores constituyen ventajas importantes si se
toma en cuenta que adems la formacin de productos laterales no deseados
como cido oxlico, cido isoctrico y cido glucnico puede ser fcilmente
suprimida en estos mutantes.
La produccin industrial del cido ctrico surgi como resultado de
experimentacin sistemtica y exhaustiva desde los trabajos pioneros de James
Currie en 1917 (Papagianni y col. 2007). Sin embargo, no es sino hasta pocas
ms recientes que los avances en fisiologa microbiana permiten lograr un mayor
entendimiento de la relacin entre medio ambiente y acumulacin de cido ctrico
(Lpez y col 2006). La obtencin del cido ctrico est fuertemente influenciada
por la composicin del medio, especialmente en los procesos de fermentacin
sumergida. Se ha demostrado que los factores que afectan principalmente a la
fermentacin ctrica son el tipo y la concentracin de la limitacin de fuente de
carbono, nitrgeno y fosfato, pH, aire, la concentracin de oligoelementos, y la
morfologa del microorganismo productor. Ciertos nutrientes tienen que
presentarse en exceso (tales como azcares y protenas), otros en los niveles
limitantes (aquellos que contengan fosfato) y otros por debajo de los valores
umbral bien establecidos (por ejemplo trazas de metales, particularmente de
manganeso) (Kumar y col. 2008).
El cido ctrico es usado principalmente en la industria de la alimentacin para la
elaboracin de bebidas y otros productos, tambin como saborizante y
conservante, aunque tiene otras muchas propiedades por las que es utilizado en
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Produccin Industrial de cido ctrico

esta industria. El cido ctrico tambin es utilizado en la industria farmacutica,

textil, cosmtica, agrcola y de detergentes.
LAS CEPAS; SELECCIN Y MEJORA
La tcnica ms utilizada para mejorar las cepas productoras de cido ctrico ha
sido mediante la induccin de mutaciones en las cepas parentales utilizando
mutgenos. Entre los agentes mutgenos fsicos, g-radiacin y radiacin
UV. Para obtener cepas hiper-productores, con frecuencia el tratamiento UV se
podra combinar con algunos mutgenos qumicos, por ejemplo, aziridina, Nnitroso-N-metilurea o etilo metano-sulfonato (Musilkova et al., 1983). Mediante
el uso de una tcnica de seleccin adecuado en un medio de modelo con
fuentes de carbono no especficos, una cepa produce grandes cantidades de
cido ctrico a partir de sustratos inusuales puede obtenerse a partir de los
mutantes producidos.

INCULO
Aunque puede no ser considerado como una materia prima, se va a considerar al
inculo como tal ya que se introduce antes de la fermentacin y es indispensable
para la formacin de producto. La correcta preparacin del inculo es esencial
para obtener unos buenos resultados en la fermentacin posterior. El inculo de
los fermentadores se preparar, en un principio, con Aspergillus niger del tipo
ATTC 11414. Como se explicar ms adelante, el volumen ideal de inculo para la
produccin de cido ctrico es de 1% del volumen de trabajo del fermentador
donde se inocula, este volumen de inculo debe contener entre 5,5 y 25 millones
de esporas por litro.
Cultivo Del Microorganismo
Para la produccin del inculo se utilizar el hongo Aspergillus niger ATTC 11414,
que ser encargado a la ATTC (American Type Culture Collection). El
microorganismo llega conservado en un medio compuesto por melaza esterilizada
con un contenido en sacarosa del 10% y un pH de 5,8. Este cultivo de origen se
siembra y reproduce dos veces por semana con el fin de obtener un stock de
microorganismo, este stock ha de conservarse en una cmara frigorfica a 5C.
Primer Inculo
Seguidamente se va a preparar el inculo del primer pre-fermentador, para ello se
utilizar un matraz obturado con algodn en el que se prepara un medio de cultivo
con la siguiente composicin:
50 g de glucosa.
2g de KH2PO4.
1g de MgSO47H2O.
8 g de pepsina.

2 g de extracto de levadura.
20 g de agar.
100 ml de agua destilada.

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Tanto medio de cultivo como matraces han de ser esterilizados en autoclave a

121C durante 15 minutos. El matraz una vez preparado y con el microorganismo
dentro se deja durante 18 horas en un agitador para proporcionar una buena
aireacin.
Pre-Fermentador #1
En esta fase un fermentador de 20 L de capacidad ser inoculado con el contenido
del matraz anterior. Antes de que comience esta etapa es necesario preparar
previamente el pre-fermentador con el siguiente medio de cultivo:
16 L de melazas diluidas (20% en peso de sacarosa), esterilizadas y
desmineralizadas (por columna de intercambio inico). Se pueden obtener de un
fermentador tras la esterilizacin.
800 mg de NH4Cl.
540 mg de KH2PO4.
360 mg de MgSO47H2O.
180 mg de FeSO47H2O.
180 mg de ZnCl2.
180 mg de CuSO45H2O.
Como se puede observar, no se suministra solamente la fuente de carbono, sino
tambin cierta cantidad de metales traza que son esenciales para el adecuado
crecimiento del microorganismo.

Pre-Fermentador #2
El producto del pre-fermentador anterior de 20 L servir como inculo de otro prefermentador de 600 L. Segn este dato, el pre-fermentador de 600 L ser cargado
con un inculo de ms del 3%; aunque esto es perjudicial para la produccin de
cido ctrico, no lo es para el crecimiento de la biomasa pues, segn estudios
consultados, a mayor volumen de inculo ms crecimiento se obtiene.
El medio de cultivo que se utilizar en este pre-fermentador ser el siguiente:
480 L de melazas diluidas (20% en peso de sacarosa), esterilizadas y
desmineralizadas (por columna de intercambio inico).
24 g de NH4Cl.
14,40 g de KH2PO4.
9,60 g de MgSO47H2O.
4,80 g de FeSO47H2O.
4,80 g de ZnCl2.
4,80 g de CuSO45H2O.
El tiempo de fermentacin, en este caso, estar comprendido entre 2 y 3 das, el
tiempo exacto deber de afinarse una vez en marcha la planta. La concentracin
de clulas viables tras el tiempo de crecimiento deber estar entre los 5,5 y 25

millones de esporas por litro. Una vez acabada esta pre-fermentacin ya est
preparado el inculo de uno de los fermentadores principales; este inculo
obtenido esta en cantidad ideal para que en el fermentador industrial se produzca
la mxima cantidad de cido ctrico.
PRODUCCIN

En primer lugar, tendrn lugar una serie de etapas previas cuyo fin es acondicionar
las materias primas principales de la fermentacin: el agua y las melazas.
Antes de ser cargada en el fermentador, el agua se hace pasar por un lecho de
desmineralizacin que retirar los iones disueltos presentes. En cuanto a la
melaza, abandonar el depsito donde se almacena llegando a un filtro de tambor
rotatorio a vaco, donde se separarn todos los slidos que pudiera contener.
Posteriormente tambin se retiran los iones disueltos presentes en la melaza
mediante un lecho desmineralizador.
La carga de fermentador se completa con la adicin de ciertos nutrientes
suplementarios, tras lo cual, se produce la esterilizacin. Se introduce vapor por
medio del sistema de aireacin del fermentador procedente de la caldera. El vapor
aumentar la temperatura del medio hasta los 100C y mantendr esta
temperatura durante el tiempo necesario para eliminar todo microorganismo que
pueda competir por el sustrato.
Una vez terminado el proceso de esterilizacin, comenzar a circular agua por el
serpentn refrigerante y el sistema de agitacin del fermentador entrar en
funcionamiento, todo ello encaminado a disminuir la temperatura del medio hasta
la temperatura idnea de fermentacin. Una vez alcanzada la temperatura de
fermentacin, se introduce el inculo; este momento marca el final de los procesos
de preparacin de la materia prima y el inicio del proceso fermentativo.
Una vez producida la inoculacin, el microorganismo comenzar a crecer en el
medio, consumiendo la sacarosa y fabricando cido ctrico. El medio fermentativo
estar agitado y aireado. La aireacin es producida por un sistema de soplantes
que introducen el aire exterior, unos filtros que lo limpian de impurezas y
microorganismos y una tubera que lo conduce hasta el fermentador, por donde es
introducido a travs del sistema de palas de agitacin. En esta fase, el serpentn

de refrigeracin del fermentador deber estar en marcha ya que el proceso es

exotrmico y se debe mantener la temperatura idnea.
La fermentacin va a ser la etapa ms duradera de todo el proceso que tiene lugar
en la planta, aproximadamente 6 das. Durante el proceso fermentativo se
controlarn distintas variables (temperatura, pH, etc.), para que transcurra de
manera correcta y se produzca la mayor cantidad posible de cido ctrico. Ser un
proceso de tipo discontinuo.
Tras el tiempo estipulado, el fermentador se descarga. El producto obtenido, el
licor post-fermentativo, contiene cido ctrico, agua y una serie de impurezas. Este
licor se conduce por tubera hacia la siguiente etapa del proceso.
Fermentacin
El fermentador es la unidad clave del proceso ya que es donde se va a producir el
cido ctrico a partir del crecimiento controlado de Aspergillus niger. En esta
unidad van a influir numerosos factores: temperatura, agitacin, concentracin de
oxigeno, nutrientes y pH son las ms importantes.
El fermentador ser llenado con las melazas, agua y nutrientes para
posteriormente introducir el inculo. El inculo provendr de otro fermentador de
menor capacidad en el que se habr desarrollado un cultivo crecido previamente
en laboratorio. Es imprescindible inocular el microorganismo ya adaptado al medio
y eliminar en lo posible el tiempo de latencia.
Se ha optado por el uso de fermentadores discontinuos que, aunque tienen una
menor produccin, tienen menor coste que los continuos y al estar su uso ms
implantado, se tiene una mayor experiencia en su manejo.
A la hora de adquirir un fermentador hay que tener en cuenta que posea un
sistema adecuado de aireacin y agitacin para un ptimo crecimiento celular.
Tambin es importante tener un control de temperatura y pH al ser estos
parmetros cruciales para el proceso. Para que no se den acumulaciones de
microorganismos y facilitar su limpieza, ha de tener paredes internas totalmente
lisas, adems debe poder funcionar aspticamente durante el ciclo de produccin.
Tambin ha de buscarse un equipo con cierta versatilidad que permita hacer
variaciones del proceso; debe de ser lo ms sencillo de manejar y operar posible.
Ha de tener una geometra similar a los otros de la planta de manera que se
puedan hacer escalamientos y extrapolaciones.
Otros puntos a tener en cuenta son el coste de la unidad y sus posibles averas
para prever en lo posible reparaciones y repuestos.

SEPARACIN

Esta fase comienza con la llegada del licor post-fermentativo al filtro rotatorio a
vaco con precapa, cuya funcin es separar el micelio (microorganismo muerto).
La torta slida que forma el micelio ser enviada por medio de cinta transportadora
hacia un depsito donde ser almacenada. El lquido filtrado, compuesto por el
licor post-fermentativo sin micelio, se transporta mediante tubera hacia el tanque
de lechada.
En el tanque de lechada, el lquido que se va filtrando en la etapa anterior se ir
mezclando con una lechada ya preparada. Se produce una reaccin qumica que
transforma el cido ctrico, presente en el licor post-fermentativo, en citrato clcico,
el cual es slido y precipita. Para que esta reaccin se produzca adecuadamente
es necesario un sistema de agitacin que promueva la mezcla de sustancias y un
serpentn refrigerante, ya que la reaccin producida es exotrmica. La reaccin de
lechada se realizar en discontinuo.
Una vez acabado el proceso de lechada, la masa dentro del reactor se calienta
hasta una temperatura cercana a la de ebullicin. Esta funcin la realizar un
vapor condensante que se har circular por el interior del serpentn del reactor.
Una vez calentado el licor, ser enviado por tubera hacia un nuevo filtro de tambor
rotatorio al vaco. Este equipo separar el citrato clcico en forma de torta y lo
enviar mediante cinta transportadora hacia el reactor de descomposicin del
citrato. El lquido filtrado (licor post-fermentativo sin cido ctrico) es mandado por
tubera hacia un depsito para su almacenaje.
En el reactor de craqueo, la torta de citrato clcico se ir mezclando con una
disolucin de cido sulfrico, producindose una reaccin qumica que forma yeso

(el cual es slido y precipita) y deja libre en disolucin el cido ctrico. En este
reactor es fundamental una buena agitacin para mezclar bien la torta slida con
el cido sulfrico, tambin existir un serpentn de refrigeracin que eliminar el
calor producido durante la reaccin. Como en el caso de la lechada, la reaccin
ser de tipo batch o discontinuo.
Tras el craqueo del citrato clcico, la masa reaccionante se conduce mediante
tubera a un filtro de banda de vaco que separar el sulfato clcico o yeso del
lquido que contiene el cido ctrico. El yeso se transporta mediante cinta hacia un
depsito para su almacenaje, mientras que el lquido filtrado ser conducido por
tubera hasta un sistema combinado de desmineralizacin y carbn activado que
eliminar ciertas impurezas que an arrastra el producto.

PURIFICACIN

La fase de purificacin comienza cuando la disolucin de cido ctrico abandona la

columna de intercambio inico y carbn activado y es conducida hacia el siguiente
equipo, que es un evaporador de doble efecto de pelcula descendente. En este
proceso la disolucin de cido ctrico perder agua mediante la accin de un calor
cedido por un vapor condensante, quedando lo suficientemente concentrada como
para poder entrar en el siguiente proceso.
En esta fase todos los procesos actuarn en continuo en contraposicin a la fase
de separacin y de produccin en la que haba unidades que trabajaban en
discontinuo.
La corriente que sale del evaporador se introduce en un equipo de cristalizacin
de tipo MMSPR-DTB. En el interior del aparato se crear sobresaturacin por
vaco, lo que provocar la nucleacin y la formacin de cristales slidos de cido
ctrico. Estos cristales, acompaados por el resto del licor que no ha cristalizado,
abandonarn el cristalizador camino de la siguiente etapa.
El magma procedente del aparato de cristalizacin ser conducido hasta una
centrfuga continua de canasta que separar los cristales recin formados de
producto del licor y sus impurezas, abandonando el equipo prcticamente seco.

La corriente cristalina es conducida, mediante cintra transportadora, aun secador

de lecho fluidizado donde los cristales de cido ctrico pierden el agua restante,
quedando totalmente secos. En esta etapa se le darn las caractersticas finales al
producto.
Por ltimo, la corriente de producto llegar a una maquina pesadora-ensacadora
donde el cido ctrico anhidro ser introducido en sacos de 25 kg sellados
hermticamente. Los sacos sern transportados mediante transpaletas hacia la
zona de almacenaje donde esperarn su transporte para su posterior venta.
CONCLUSIN
La gran demanda a nivel mundial del cido ctrico, para cualquier aplicacin en los
distintos sectores asegura su importancia y la continuidad en la investigacin de
mtodos para su obtencin, los cuales sean econmicos y reproducibles, as
mismo el uso y las aplicaciones.
En general, el cido ctrico y sus sales, presenta hoy en da innumerables
aplicaciones y usos y aplicaciones. Siendo entonces un importante componente en
los productos ya sea en la investigacin, la industria alimentaria, farmacutica,
agroindustrial, industrial, cosmticos entre otras.