FACULTAD DE INGENIERA

CURSO: BIOQUIMICA
PROFESORA: KEIDY CANCINO CHVEZ.

PRACTICA N 7
HIDRLISIS DE LAS GRASAS POR LA LIPASA PANCREATICA
I.

INTRODUCCIN

La lipasa pancretica es una enzima que acta sobre los triglicridos, los lpidos ms importantes de la
dieta, hidrolizndolos a diglicridos, monoglicridos y cidos grasos.
Su actividad se mide titulando con una base (NaOH 0.1N) los cidos grasos liberados. En consecuencia,
a mayor acidez, mayor gasto en titulacin y mayor actividad enzimtica. La accin de la enzima se ve
potenciada por las sales biliares, que transforman las grasas en pequeas micelas.
II. OBJETIVOS:
a) Evaluar la actividad de la lipasa pancretica por titulacin.
b) Evidenciar el efecto de las sales biliares.
III. MATERIALES:
Materiales:

Solucin al 2% de pancreatina (extracto de

6 matraces de 50 ml de capacidad.

enzimas pancreticas)

5 pipetas de 5 ml.

Tampn fosfato 0.2M de pH 8

NaOH 0.1 N

Aceite vegetal neutralizado

fenolftalena

Sales biliares al 1%

Bao Mara a 37C

IV. PROCEDIMIENTO
Disponer tres tubos de ensayo de la siguiente manera:
Tubo
I
II
III
ml de aceite neutro
2
2
0
ml de tampn fosfato 0.2 M de pH 8
0
2
2
ml de sales biliares
5
0
5
ml de agua destilada
2
2
1
Agitar fuertemente. Observar y tomar nota del aspecto de cada uno. Incubar en bao mara a 37C por
5 minutos

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PROFESORA: KEIDY CANCINO CHVEZ.

Tomando nota exacta del tiempo y con 5 minutos de intervalo, aadir a cada tubo 5 ml de solucin de
pancreatina, colocndolos inmediatamente en el bao mara para continuar la incubacin por 45
minutos.
Titular cada tubo con NaOH 0.1N (usar 2 gotas de fenolftaleina como indicador).

Expresar los resultados en mEq. de cido liberado por minuto por ml de pancreatina

V. CUESTIONARIO
1.

Qu producto de la accin de lipasa es el responsable del viraje de color de la fenolftalena?

2.

Qu frmula se utiliza para determinar la acidez en aceites?

VI. BIBLIOGRAFA

Stryer, L. (1990). Bioqumica. Ed. Revert, Barcelona.

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