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FACULTAD DE BIOANLlSIS
CAMPUS XALAPA
TESIS
QUE PARA OBTENER EL TTULO EN:
F. B. MARTHASOLANO RICO
XALAPA, ENRQUEZ.,VER.
DICIEMBRE DE 2001
IN
D ICE
INTRODUCCiN
CAPTULO I GENERALIDADES
1.1 ANTECEDENTES
.4
1.3 JUSTIFICACiN
MICROBIOlGICA.
11
DE lOS ALlMENTOS
13
INDICADORES
14
CAPTULO 11INORMATIVIDAD
3.1 ANTECEDENTES
23
:
24
27
28
34
34
34
34
Y EXCLUSiN
35
.36
.37
,
46
ANEXOS
48
BIBLIOGRAFAS
91
INTRODUCCiN
graves, propiciados
entre otros aspectos, por los alimentos, y ya que aquejan principalmente a los
menores de edad, el presente estudio se inscribe en el rea de la microbiologia
sanitaria, y tiene como objeto conocer la calidad microbiolgica de las frmulas
lcteas que se preparan
patgenos
generadores
de infecciones
e intoxicaciones.
La
poblacin susceptible que los consume representa un blanco fcil a los agentes
infecciosos
pudiendo
y de la
Mexicanas
de Salud, diversos
Manuales
de la
totales,
Mesfilos
totales, S. Aureus y
se
CAPTULO I
GENERALIDADES
1.1 ANTECEDENTES
los Centros de
pueden contaminarse
por microorganismos
patgenos constituyendo
de servicio al pblico;
Sin embargo, la
falta de control sanitario por parte d la SSA. p'uede propiciar que en los lactarios
se establezcan
condiciones
favorables
para el desarrollo
de microorganismos
1.2 PLANTEAMIENTO
Ante lo expuesto anteriormente,
estudiar
la
preparacin
relacin
de
influencia:
y manipulacin
DEL PROBLEMA
con esta investigacin
condiciones
sanitarias
del
se pretende
proceso
de
de las
los lactantes
usuarios?
1.3 JUSTIFICACIN
En este estudio
se obtendr
informacin
que
Mexicanas
NOM-093-SSA1-1994,
NOM-120-SSA1-1994,
NOM-131-SSA1-
Investigar
la calidad
microbiolgica
de las superficies
inertes (mesa y
utensilios) .
preparada yagua).
CAPTULO
11
FUNDAMENTOS
MICROBIOlGICOS
decoliformes
microbiolgica
por medio de
c10stridium y presencia
de patgenos
como salmonella,
El tipo de microorganismos
microorganismos
depender
el
que
se
no
las
diferentes
interacciones, mismas que finalmente van a definir el valor comercial del alimento
o producto y a determinar si es o no apto para su consumo. Para detectar la
presencia
tcnicas
que se engloban
en los alimentos
se aplican
en el anlisis microbiolgico;
la
aplicacin de estos anlisis pueden tener diferentes objetivos. asi por ejemplo;
determinar
la causa de la descomposicin
identificaran
encontrar
el grupo
el alimento
o grupos
contaminado
de microorganismos
responsable
responsables;
o bien
de un brote de enfermedad
de alimentos
consumidos
por costarricenses.
realizado
en la
obtenidos
demostraron
una. importante
contaminacin
fecal
y la
mejoras en el procesamiento,
alimentos, asi
transporte
y almacenamiento
de los
de algunos
alimentos que se venden en las calles, desde enero de 1995 hasta junio de 1997.
Las investigaciones
contempladas
en este
estudio
fueron
la bsqueda
de
aureus y coliformes
totales. Las altas proporciones de muestras con resultados fuera de norma en los
conteos de coliformes totales (34.8 %) Y Staphylococcus aureus (4.8 %), adems
de la presencia de Salmonella spp. (3.5 %) en los alimentos investigados, reflejan
los elevados
productos
alimenticios.
Los resultados
de la vigilancia
de estos tipos de
indican que son insuficientes las medidas adoptadas para el control sanitario de
estos alimentos, lo cual puede ser mejorado con una adecuada utilizacin de la
educacin sanitaria y del sistema de anlisis de riesgos y puntos crticos de control
en las actividades de inspeccin sanitaria. Se analizaron los resultados de la
vigilancia de contaminantes biolgicos en 16 340 muestras de alimentos que se
venden en las calles de todas las provincias de Cuba, desde enero de 1995 hasta
junio de 1997, sobre la base de los resultados del Programa de Contaminantes
Quimicos
Biolgicos
en Alimentos
que
se
desarrolla
en el pas.
Las
seleccionados
presentaban
la caracteristica
epidemiolgico:
de
alto
riesgo
de carne, productos de
Los
parmetros
correspondientes
establece
de
a
referencia
la
Norma
una tolerancia
para
Cubana
de hasta
valorar
los
resultados
Contaminantes
100 UFC/g
fueron
Microbiolgicos
de organismos
los
que
coliformes
Con la cooperacin
tcnica de la Organizacin
Panamericana
de la
2,236 brotes de
ETA fueron informados por los pases entre 1995 y 1997 con un total de 68,868
casos y 173 muertes. En 1:140 brotes se pudieron identificar los agentes causales,
que fueron en 528 de ellos bacterias, (46.32%). Esos agentes causaron 25,527
casos (83%) en tanto que el 8% fueron causados por toxinas marinas, el 3.72%
por virus, el 2.90% por parsitos, el 2.23% por sustancias qumicas y el 0.12% por
toxinas vegetales. Entre los brotes causados por bacterias, Salmonella sp., fue
responsable por 195 (37%) de los brotes de origen bacteriano y Staphylococcus
aureus por 193 (36%). Los sitios de preparacin de alimentos fueron, en un 42%
viviendas, 22% comedores
institucionales,
7% restaurantes,
7% escuelas, 7%
ventas callejeras y 12% otros lugares. La informacin del SIRVE-ETA, sugiere que
las enfermedades transmitidas por los alimentos son un importante problema de
salud pblica en la Regin, que muchas de stas pueden ser prevenidas mediante
la aplicacin de tecnologas de conocida eficiencia en la preparacin de alimentos
y que el acopio de datos provenientes de sistemas de vigilancia es fundamental
para orientar las estrategias de los programas de prevencin y control de la ETA Y
para la aplicacin de enfoques como el Anlisis de Peligros y Puntos Crticos de
Control (HACCP)en los programas nacionales de control de alimentos. (15)
10
Definindose como:
"alimento alterado" .
2.2 Contaminacin
microbiolgica
en los alimentos.
infecciosas y parasitarias,
qumico.
tienen
Establecimientos,
11
contaminado
microorganismos
un alimento
patgenos,
o una materia
hormonas,
prima cuando
bacteriostticos,
contenga
plaguicidas
radioistopos;
modificaciones
salud y adulterado,
aqullas
cuando su naturaleza
ha sido objeto de
o composicin
o se encubran
defectos
no corresponda
de su proceso
a
de
Los microorganismos
estn
presentes
en el ambiente
natural del
hombre (agua, suelo, aire, etc.), en el propio hombre y en todos los seres vivos
(plantas y animales) de los que se alimenta.
De hecho, cualquier
producto alimenticio
transformado
o no que el
fsico-quimicas
del
alimento,
la contaminacin
puede
tener
12
2.3 Mecanismos
de contaminacin
de los alimentos.
hasta el de su consumo
los
como
tanto en
en quienes los
generar inconvenientes.
cuidadosa
en alimentos y
consecuencias
conocer las formas en que los grmenes llegan a ellos. Comenzaremos por definir
lo que son las fuentes de infeccin como los lugares donde se encuentran los
grmenes
contaminantes,
representados
principalmente
por: el hombre,
los
de
individuos
Existen
accesorios
considerados
como
factores
de contaminacin
13
los
bacterias;
tener
Cuando la madera, el
superficie
lisa y presentar
El Detergente:
contaminantes.
barre la suciedad
el uso de materiales
adecuadamente,
2.4 Microorganismos
Los mtodos
microorganismos
indicadores.
usados
patgenos
para
el aislamiento
en agua, alimentos,
y el
recuento
de los
irregular
en el producto.
An cuando
o tengan una
14
sensibles,
a condiciones
microorganismos
la llegada a la misma de
Estos grupos de
microorganismos
envasada,
recreativa,
Deben sobrevivir
resistente.
valor incrementado.
Enterobacterias.
15
Estreptococos fecales.
Enteroccos.
Clostridios sulfito-reductores
Los microorganismos
de mayor
importancia
se
enuncian a continuacin:
MESFILOS.
En el recuento de microorganismos
relativamente
son elevadas y la
COL/FORMES TOTALES.
Los coliformes,
Enterobacteriace.
incluyendo
E. coli,
son
miembros
de
la familia
gas en 48 horas a 35 C.
16
COL/FORMES FECALES
Estos coliformes
por la produccin
de cido
y gas en caldo
Las
constituyen
enterobacteriaceae
EC a temperaturas
a 44.5 Co a 45.5 C.
lactosa-positivos
grupo
coli-aefgenes
. 17
incluye
cepas
enteropatgenas
(EPEC),
enterotoxignicas
(ETEC).
urinarias,
En general.
niveles
altos
de
enterobacteriaceae
lactosa-positivas
STAPHYLOCOCCUS AUREUS.
de S. Sacharoyticos
abundantemente
que es anaerobio.
plano por lo que las clulas forman agrupaciones irregulares que parecen racimos
de uvas.
Los estafilococos
negativos,
son microorganismos
anaerobios facultativos,
son mes6filos
catalasa
positivos,
oxidasa
18
que confiere
amarilla
o naranja de
toxinas
de
este
microorganismo
son
neurotoxinas
ya
que
con frecuencia
y temperatura
subnormal
y a veces
diarrea y
acentuado
de
las
personas,
estn
presentes
en
abundancia
en
ueros
Las bacterias
calentando
de esta especie
se eliminan
con bastante
facilidad
19
SALMONELLA.
mviles,
reducen
La salmonellas
los
facultativos
sus flagelos
pertenecientes
son peritrequea;
son bacilos
a
la
familia
Gram
anaerobios
negativos,
facultativos;
aero-anaerobios
enterobacteriaceae
son
bacilos
Fermenta la glucosa
entricas
(fiebre
tifoideas
y paratifoidea),
enteritis
(gastroenteritis)
septicemias.
e o ms,
al abdomen es muy
al mismo
ruidos
hidroareos
, clicos de diferente
intensidad,
nuseas
y en
20
ocasiones vmito, generalmente no hay fiebre,' pero puede haber febrculas. Este
padecimiento
es autolimtante,
SEPTICEMIA.escalofros,
anorexia
hipotensin
y estado
Este microorganismo
por la manipulacin
Los
salmonella
principales
son:
vmitos,
sntomas
dolor
de
toda
abdominal
infeccin
y diarrea
gartrointestinal
que
suele
por
aparecer
abatimiento, debilidad
contracciones nerviosas y
Los sntomas pueden persistir durante dos a tres dias transcurridos los
cuales,
la enfermedad
aunque
a veces se puede
2\
CAPTULO
111
NORMATIVIDAD.
22
3.1.ANTECEDENTES
Esta leyes
un instrumento juridico
referencia legal a todas las decisiones que se llevan a cabo en el campo de control
sanitario de alimentos y salud en general.
Establecimientos,
de la poltica de proteccin
al consumidor,
son disposiciones
23
nacionales
que establecen
especificaciones
en un instrumento de orientacin
Las normas que sirvieron de apoyo a este estudio son las siguientes:
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
MTODO
MEXICANA
NOM-092-SSA1-1994,
PARA LA CUENTA
DE BACTERIAS
BIENES
AEROBIAS
y
EN
PLACA.
NORMA
OFICIAL
MEXICANA
NOM-093-SSA1-1994,
BIENES
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
MEXICANA
PROCEDIMIENTOS
y
DE
FIJOS.
NOM-109-SSA1-1994,
BIENES
24
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
MEXICANA
PREPARACiN
Y DILUCiN
NOM-110-SSA1-1994,
DE MUESTRAS
BIENES
DE ALIMENTOS
NORMA
OFICIAL
MEXICANA
SERVICIOS. DETERMINACiN
NOM-112-SSA1-1994,
DE BACTERIAS COLlFORMES.
BIENES
TCNICA DEL
NMERO MS PROBABLE.
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
MTODO
MEXICANA
PARA
LA
NOM-113-SSA1-1994,
CUENTA
DE
BIENES
MICROORGANISMOS
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
MTODO
MEXICANA
PARA LA
NOM-114-SSA1-1994,
DETERMINACiN
BIENES
DE SALMONELLA
y
EN
ALIMENTOS.
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
METODO
MEXICANA
NOM-115-SSA1-1994,
PARA LA DETRMINACION
BIENES
DE STAPHYLOCOCCUS
AUREUS EN ALIMENTOS.
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
PRCTICAS
MEXICANA
NOM-120-SSA 1-1994,
BIENES
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
ALIMENTOS
MEXICANA
NOM-131-SSA1-1994,
PARA LACTANTES
DISPOSICIONES Y ESPECIFICACIONES
Y NIOS
BIENES
DE CORTA
EDAD
SANITARIAS Y NUTRIMENTALES.
25
CAPTULO IV
CONTROL SANITARIO.
26
de salud contra
al consumo
de alimentos
La Secretara
de
Salud
(SS)
cuenta
con
de Bienes y Servicios
(DGCSS),
una
la
Subsecretara
de
Direccin General
de
dependencia
directamente
es la Ley General
El control
sanitario
incluye
acciones
de orientacin,
capacitacin,
27
se procesan
medicamentos,
pesticidas,
fertilizantes,
equipo
y material
mdico
alimentos
estn
expuestos
algunas
de ellas
la
accin
innumerables
bacterias,
inofensivas
ocasionarnos
contaminante
y otras capaces
es fundamental
de
de
para
Est
demostrada
la
relacin
existente
entre
una
inadecuada
de stos.
enfermedades
manipulador
Las medidas
ms ,eficaces
en
la prevencin
de estas
como vehculo
de transmisin,
por acciones
Se han establecido
medidas
de los grmenes
que pueden
estar presentes
en ellos. Para
en el manejo
personal,
organizacin
del
trabajo
incrementar
el
sentdo
de
28
HIGIENE PERSONAL.
Las personas que entran en contacto con los productos en el curso
de su trabajo,
asignrseles
debern someterse
y acreditar
un examen
mdico antes de
La preparacin
de los alimentos
debe
hacerse
con la menor
as el tiempo de exposicin
posibles contaminaciones.
Se evitar tocar los alimentos directamente con las manos. Para ello
habr que servirse de: pinzas, tenacillas, cucharas, tenedores, se recomienda el
uso de guantes desechables con la intencin de disminuir la difusin bacteriana.
etc.
cabellos,
sustancias
qumicas,
medicamentos
mucosidades,
o cualquier
otro
material extrao.
29
Todo el personal debe lavarse las manos hasta la altura de los codos
con agua y jabn antes de iniciar las labores y despus de interrumpirlas
siguiendo el procedimiento sealado a continuacin:
Poner particular atencin a las reas por debajo de las uas y entre los
dedos utilizando cepillo para su lavado.
Debe lavarse las manos con agua, jabn y desinfectante, secarse con
toallas desechables o aire caliente, antes de: comenzar labores, manipular vajilla
limpia y alimentos crudos, cocidos o desinfectados; despus de: ausentarse del
reade trabajo, manipular basura, sonarse la nariz o toser, rascarse, saludar de
mano, ir al bao, manipular dinero o alimentos crudos y tocar las perillas o puertas
de equipo sucio.
30
con un material
de
3\
En el caso de las superficies del equipo que contactan con los alimentos
siempre se puede disminuir el nmero de sus microorganismos
contaminantes de
forma que solamente queden algunos que no perjudiquen la calidad del producto
procesado.(26)
continuos,
y preparacin
no porosos
de
y se deben
mantener limpios, secos y sin roturas o grietas y con declive hacia las coladeras.
En el caso de que an existan pisos con losetas, deben lavarse y
cepillarse las juntas diariamente.
Las coladeras, canaletas y trampas de grasa deben estar limpias, con
rejillas, sin basura y estancamientos.
Las paredes deben ser de recubrimientos
techos
provoquen
goteos,
particularmente
en las reas
de
preparacin de alimentos.
El rea donde se manipulen
alimentos
32
CAPTULO V
DISEO METODOLGICO.
33
estudiado
sin
Toda la informacin
OESCRIPTIVO.-
Se detalla
el
rea
especifica
del
muestreo,
no
5.4 CRITERIOS
34
1.- Condiciones
inertes y de
superficies vivas que estn en contacto con los alimentos. Para obtener en forma
uniforme
fsicas de las
variables analizadas se utiliz como base el apndice informativo NOM-093-SSA 11994 (apndice C), en el cual se consideraron las preguntas correspondientes
en
2.-Condiciones
microbiolgicas
preparacin de la leche.
cuadrados),
ALIMENTO:
mtodo de hisopo, que se puede utilizar en superficies que sean regulares, lisas,
pulidas; consiste en frotar un aplicador de madera u otro material con algodn
(hisopo) estril, humedecido con la solucin diluyente en un rea determinada.
Esta tcnica fue proporcionada por la Secretara de Salud. (ver apndice D).
35
En leche preparada,
de
muestra.
para
examen
microbiolgico
de
superficies
utensilios
fueron analizadas
de acuerdo
a la normatividad
en alimentos
B)
Los
correspondientes
datos
referenciales
que
permitirn
realizar
los
clculos
en grficas y cuadros.
36
CAPTULO VI
RESULTADOS
37
CEDULA DE AUTOVERIFICACIN
CENDI
PREGUNTAS
NORMAL
SI
ASPECTOS GENERALES:
Area de receocin
Area Iimnia
Mesas Iimnias
Area seca v ventilada
Anaqueles y tarimas limpias y en
buen estado.
Los alimentos se colocan en
anaaueles
Maneio de alimentos con utensilios
Alimentos preparados estn
cubiertos
EL PERSONAL EVITA ...EN EL
REA:
Mascar
Escuoir
Toser
Estornudar
Se oresenta enfermo
AREA DE COCINA:
Estufas limnias
Mesas de trabaio limnias
Barras de servicio Iimoias
Mesas de trabaio desincrustadas
Barras de servicios desincrustadas
Lavado v desinfeccin de utensilios
Sunerficie de trabaio limoias
PISOS:
Limoios
Secos
Sin roturas
PAREDES:
Limnias
Lisas
En buen estado
De fcil lavado
Existencia de deDsitos oara basura
NO
DIF
SI
NO
PAPALOTE
SI
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
NO
X
X
X
X
38
SI
PREGUNTAS
PERSONAL
Apariencia pulcra
Uniforme completo
Uniforme limpio
Uniforme en buen estado
Ausencia de iovera
Cabello cubierto
Manos limpias
Uas cortadas, sin esmalte
PREGUNTAS
SI
NO
SI
X
X
SI
LA VADO DE MANOS:
Con agua y jabn
Se aplica tcnica de lavado
Antes de iniciar labores
Despus de manipular alimentos
Despus de cualauier interrupcin
Cuenta con anlisis microbiolgico
NO
NO
SI
NO
SI
X
X
NO
NO
X
X
39
de superficies inertes,
superficies vivas, leche en polvo, leche preparada yagua los resultados obtenidos
se plasman en las tablas 2 y 3, as como tambin las unidades en las que son
expresadas respectivamente
TABLA No. 1
I
\Vlhf,:B.B
Mesa
CoIl'o,.",
M linos
CoUform
48
12
31
15
I
15
12
32
23
10
TotII'" .0
PI
UFClcnl
Pana lote
Nonnal
DlF
Utensilios
Mff<\nJos
TOlolrll
UFClcm'
MOlInJo,
To1.l
UFClar.'
ToIal
Placo
UFClcnl
C<lllforrnt>
M filos
T0101 n Placo
UFClcm
Total
UFClcnI
\8
mm
TABLA No. 2
,,
lA
CoI_
NMP/
Ae.ua
UFCI
...... -"'"
m!.
Col'''''
n
....
CofiJO,..
NMP/
g
_ s_-..
L lJ 1M
-Nombre'
..
!N 'T (O 'iS
Leche en Polvo
C'(lIilOP
NMP!
g
...
lOO
mI.
NMP/
Papalote
120
Nonnal
DJF
O
O
O
O
139
O
O
100
lE
........
C<>ti.-
..n
""
UFC
NMP/
I g.
100
mI.
mi.
N
N
_.
......
....
-...
....
Leche PrcDarada
1'If'J6("
C<Iif
"'"
mI.
100
mI.
97
O
O
O
O
56
"'"
NMPI
l\tt'l6tllln
UFCI
10
'N
N
N
N
\74
2,030
40
.Grfica No. 1
41
uno
de 10sCENOIse
No. 3
.'",
uno
de los CENOI se encuentran dentro de los parmetros permisibles por la norma
vigente que se refiere 8.la cuenta de coliformes totales (NOM-Q92).
42
Grfica No. 4
los
valores obtenidos quedan dentro de los limites permisibles sin embargo en el
CENOI PAPALOTE reporta un valor
considerado como
presencia de
43
Grfica No. 6
En .esta
.grfica se visualiza
valores
normales de mesfilos
totales en
Grfica
No. .,
de mesfilostotales
PAPALOTE muestra
44
Grfica No. 8
Grfica No. 9
45
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados obtenidos en este estudio los valores
reportados de superficies inertes (mesa y utensilios) de los tres CENOI en estudio
no sobrepasan los valores normales permisibles por la SSA. Encontrndose que,
en el caso de las mesas aunque el material no es el adecuado stas se someten a
una limpieza exhaustiva antes de la preparacin del alimento. Y en lo que respecta
a los utensilios se someten a la higiene correspondiente
del
de los
CENOI
se
46
marcadas en la normatividad de la
SSA yen el caso del CENOI PAPALOTE no se cumple con dicha normatividad.
reas del servicio, a fin de evaluar los puntos crticos que deben ser sujetos a un
mayor control sanitario.
Implementar cursos de capacitacin sobre higiene y manipulacin de los
alimentos y verificar su aplicacin.
47
ANEXOS
APNDICE
NOM 092 ..
SERVICIOS.
PLACA.
Introduccin
Cuando se requiere investigar el contenido de microorganismos
viables
necesidades
temperatura
requerida
para
por
su crecimiento,
psicotrficos es
48
agua
purificada,
por la cuenta
de colonias
en un medio
slido,
incubado
aerbicamente.
1.2 Esta Norma Oficial Mexicana es de observancia obligatoria en el
Territorio Nacional para las personas fsicas o morales que requieran efectuar este
mtodo en productos nacionales y de importacin, para fines oficiales.
3. Definicin
Para fines de esta norma se entiende por:
Unidades Formadoras de Colonias (UFC), trmino que debe utilizarse
para reportar la cuenta de colonias .en placa, las cuales pueden surgir de una
clula o de un cmulo de clulas.
NOM
BIENES
093.
NORMA
y SERVICIOS.
PREPARACION
OFICIAL
PRACTICAS
MEXICANA
DE
HIGIENE
NOM-093-5SA1-1994,
Y SANIDAD
EN
LA
FIJOS
Introduccin
El control sanitario en la preparacin de alimentos que se ofrecen en
establecimientos
muestreo
proteccin
y verificacin
disposiciones
alimentos,
sanitarias
que se deben
mediante
cumplir
educacin,
si e5table:;i;niento
a la
de las
tanto en la preparacin
de
presentes durante su proceso; que permitan reducir aquellos factores que influyen
durante su preparacin en la transmisin de enfermedades por alimentos (ETA).
Esta norma tiene como propsito el de asegurar que todos los alimentos
que se preparen y ofrezcan en los establecimientos fijos lleguen al consumidor de
manera inocua.
49
deben
cumplirse
en la preparacin
de alimentos
que se ofrecen
en
preparacin de alimentos.
Para fines de esta norma se entiende por:
Alimentos
potencialmente
peligrosos,
de microorganismos
almacenamiento,
transporte,
preparacin
y servicio;
stos son:
presentes en
dependencias
fijos de servicios
y
anexos
de alimentos,
formalmente
construidos,
donde .se
50
las medidas
necesarias
que se realicen
de
los
alimentos,
el
conjunto
de
las
operaciones
preparacin, conservacin,
mezClado, acondicionamiento,
envasado,
y expendio o suministro al
pblico, de alimentos.
Signos de descongelamiento,
PEPS
(primeras
entradas-primeras
salidas),
serie
de
operaciones que consiste en rotular, etiquetar o marcar con cualquier otro mtodo
los alimentos con la fecha de ingreso al almacn y colocar la mercancia conforme
a dicha fecha, de tal manera que se asegure la rotacin de los mismos.
Superficies vivas, las reas del cuerpo humano que entran en contacto
con el equipo, utensilios y alimentos durante su preparacin y consumo.
Superficie limpia, aquella 'que se encuentra de forma visible libre de
cualquier sustancia o materia diferente al material intrnseco del que est hecha.
51
NOM-109-5SA1-1994
BIENES Y SERVICIOS,
PROCEDIMIENTOS
DE ALIMENTOS
PARA LA
PARA SU
ANLISIS MICROBIOLGICO .
. Introduccin.
En el anlisis microbiolgico de alimentos, la adecuada seleccin de la
muestra,
la toma correcta,
y su transporte
ala
la naturaleza de las
recoleccin
de
la
muestra
se
debe
efectuar
evitando
toda
fin
consideraciones
de
que
el
de conservacin
laboratorio
lo
tome
y transporte,
tiempo
en
consideracin.
comprendido
Las
entra la
microbiana
cambios
especialmente
pueden
sufrir
cualitativos
cuantitativos.
Esto
es
del muestreo y la conservacin para los alimentos perecederos. Ya que para fines
oficiales la ley general de salud seala claramente que despus de la notificacin
de los resultados del anlisis practicado, si existe alguna duda sobre la veracidad
de alguno de estos el particular puede impugnar dentro del plazo contemplado en
la misma ley, lo que da como consecuencia que la secretaria de salud analice la
muestra testigo en un laboratorio que esta seale en presencia de las partes
interesadas y el resultado obtenido sea el que en forma definitiva acredite si el
producto en cuentn rene o no los requisitos y especificaciones
sanitarias. Sin
52
en sus caracteristicas
transporte
y manejo
de muestras
de alimentos
para su anlisis
microbiolgico.
Esta norma oficial mexicana es de observancia obligatoria en el territorio
nacional para las personas fsicas y morales que se requieren efectuar este
procedimiento
para el anlisis
microbiolgicos
de alimentos
nacionales
y de
importacin.
NOM
BIENES
110.
NORMA
y SERVICIOS.
OFICIAL
PREPARACIN
MEXICANA
Y DILUCiN
NOM-110-SSA1-1994,
DE MUESTRAS
DE
apegarse
nicamente
cuando
sea
necesario.
La dilucin primaria" tiene por objeto obtener una distribucin
lo ms
53
de
diluciones
para
el
anlisis
microbiolgico
de
productos
alimenticios.
1.2 Esta Norma Oficial Mexicana es de observancia obligatoria en el
territorio nacional para las personas fsicas o morales que se dedican a efectuar
este mtodo en alimentos nacionales o de importacin, para fines oficiales.
2. Fundamento
Se basa en la preparacin de diluciones primarias. para obtener una
distribucin
presentes en la
porcin de muestra.
Definiciones
Para fines de esta norma se entiend por:
Dilucin
primaria;
es la solucin,
suspensin
o emulsin
obtenida
despus de pesar o medir una cantidad del producto bajo examen y mezclarla con
una cantidad de nueve veces en proporcin de diluyente.
Diluciones
obtenidas
decimales
adicionales,
al mezclar un determinado
las
suspensiones
o soluciones
volumen de nueve veces un diluyente y que por repeticin de esta operacin con
cada
dilucin
as preparada.
se obtiene
la serie
de diluciones
decimales
54
NOM
BIENES
112
NORMA
y SERVICIOS.
OFICIAL
MEXICANA
DETERMINACiN
NOM-112-SSA1-1994,
DE BACTERIAS
COLlFORMES.
Existe
poca evidencia
que
indique
que
estas
compuesto
bacterias
por
coliformes
problemas.
bacteria coliforme,
lactosa o lo hacen despus de 48 horas, por lo que no se les identifica por medio
de
esta
tcnica.
frecuentemente
Segundo,
la
capacidad
de
fermentar
la
lactosa
est
extracromosomales
son fcilmente
transferidos
entre
otras
bacterias
Gram
de colonias
Microorganismos
ms
probable.
(NOM-113-SSA 1-1994.
Mtodo
para
la Cuenta
de
tambin
llamada
tcnica
de dilucin
en tubo,
55
la eficiencia
de prcticas
sanitarias
Este
bacilos
Gram
negativos,
no esporulados,
aerobios
56
NOM113.
NORMA
OFICIAL
MEXICANA
NOM-113-5SA1-1994,
TOTALES EN PLACA.
Introduccin
El grupo de los microorganismos
utilizado
en la microbiologa
coliformes es el ms ampliamente
de los alimentos
como
indicador
de prcticas .
higinicas inadecuadas.
El uso de los coliformes como indicador sanitario puede aplicarse para:
La deteccin de prcticas sanitarias deficientes en el manejo y en la
fabricacin de los alimentos.
La evaluacin de la calidad microbiolgica de un producto, aunque su
presencia no necesariamente implica un riesgo sanitario.
Evaluacin
de la eficiencia
de prcticas
equipo.
La calidad sanitaria del agua y hielo utilizados en las diferentes reas
del procesamiento de alimentos.
La demostracin
realizarse
mediante
y la cuenta de microorganismos
coliformes,
puede
57
Definiciones
Para fines de esta Norma se entiende por:
Coliformes,
bacilos
Gram
negativos,
no esporulados,
aerobios
en las colonias
desarrolladas
rojo neutro
114.
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
MTODO
MEXICANA
PARA
LA
NOM-114-5SA1-1994,
DETERMINACiN
DE
SALMONELLA EN ALIMENTOS.
Introduccin
Los miembros del gnero Salmonella han sido muy estudiados como
patgenos cuando se encuentran presentes en los alimentos. El control de este
microorganismo, tanto por parte de las autoridades sanitarias, como en las plantas
procesadoras
de alimentos,
en alimentos.
aspectos
principales,
Las modificaciones
el primero
para su
es el debilitamiento
dos
diversos
alimentos
existen
diferentes
protocolos
para
el
de cultivo
selectivos
y diferenciales,
identificacin
bioqumica
58
microorganismos
de producto,
cuando las
microorganismo
Enterobacterias.
Bacilo gram
colonias
en medios
tpicas
caractersticas
patgeno
negativo,
selectivos
aerobio,
perteneciente
al
no esporulado
grupo
de
que forman
adems
las
NOM
BIENES
115.
NORMA
SERVICIOS.
STAPHYLOCOCCUS
OFICIAL
MTODO
MEXICANA
PARA
LA
NOM-115-5SA1-1994,
DETERMINACiN
DE
AUREUSEN ALIMENTOS.
Introduccin
El crecimiento
de Staphylococcus
aureus en alimentos
tiene gran
las
razones
para determinar
el Staphylococcus
aureus
en
alimentos estn:
59
alimentos
enterotoxignicos
ausencia
de
sujetos
.a
contaminacin
Staphylococcus
de flora competitiva
aureus
postproceso
representan
que normalmente
con
un riesgo
restringe
tipos
por la
el crecimiento
del
un
inadecuado
se vuelven ms peligrosos,
manejo
o son
mantenidos
si adems son
temperaturas
de
conservacin napropiadas.
Los alimentos perecederos tales como: carnes crudas y procesadas,
ensaladas,
productos
de
pastelera
productos
de
leche,
son
los
ms
la cuenta de Staphylococcus
nacionales o de importacin.
1.2 Esta Norma Oficial Mexicana es de observancia obligatoria en el
territorio nacional para las personas fisicas o morales que requieran efectuar este
mtodo en alimentos, para fines oficiales.
60
Definiciones
Para fines de esta norma se entiende por:
Staphylococcus aureus, microorganismo que se desarrolla en medios de
cultivo selectivo y diferencial, que es capaz de dar positiva la prueba de coagulasa
y termonucleasa.
NOM
BIENES
120.
NORMA
y SERVICIOS;
OFICIAL
PRCTICAS
MEXICANA
DE HIGIENE
NOM-120-SSA1-1994,
Y SANIDAD
PARA EL
Y ALCOHLICAS.
Introduccin
La aplicacin
proceso
de
alimentos,
significativamente
mismo
de prcticas
aditivos
el riesgo de intoxicaciones
contribuyendo
bebidas,
adecuadas
del producto,
de higiene y sanidad, en el
y
materias
primas,
reduce
a la poblacin consumidora,
al protegerlo
lo
contra contaminaciones
a evitar al
conservacin,
fabricacin,
almacenamiento,
mezclado,
distribucin,
61
3. Definiciones
Para fines de esta Norma se entiende por:
3.1 Agua potable, aquella cuyo uso y consumo no causa efectos nocivos
a la salud.
3.2 Alimentos potencialmente peligrosos, aquellos que en razn de su
composicin o sus caractersticas fsicas, qumicas o biolgicas pueden favorecer
el crecimiento
de microorganismos
almacenamiento,
transporte,
preparacin
para su conservacin,
las mercancas,
custodia, suministro,
futuro
procesamiento o venta.
3.4 Basura,
cualquier
material
cuya
calidad
o caractersticas,
no
fsicas,
qumicas
cruzada,
es la presencia
o biolgicas
indeseables
en un producto
procedentes
de
de otros
62
3.7 Contaminacin,
prima que contenga
plaguicidas,
se considera contaminado
microorganismos,
partculas
radiactivas,
hormonas,
materia
el producto o materia
sustancias
extraa,
bacteriostticas,
as como cualquier
otra
deterioro
ambiente.
del alimento,
63
sanitaria.
3.17 Fabricacin,
una
sustancia en otra, unir, incorporar, fundir en una sola cosa dos o ms sustancias,
productos u otras cosas de manera uniforme.
3.25 Microorganismos, organismos microscpicos tales como parsitos,
levaduras, hongos, bacterias, ricketlsias y virus.
3.26 Microorganismos
patgenos, microorganismos
capaces de causar
64
utilizadas para
prevenir, destruir, repeler o mitigar cualquier forma de vida que sea nociva para la
salud, los bienes del hombre o el ambiente.
3.31 Preparacin,
arreglar,
combinar,
Proceso,
elaboracin,
conjunto
fabricacin,
acondicionamiento,
envasado,
de
actividades
preparacin,
relativas. a
la obtencin,
conservacin,
mezclado,
transporte,
distribucin,
manipulacin.
de acuerdo a
65
3.36 Transporte,
accin
de conducir,
acarrear,
trasladar
personas,
para el personal
5.1 Personal
Toda persona que entre en contacto con materias primas, ingredientes,
material de empaque, producto en proceso y terminado, equipos y utensilios, debe
observar, segn corresponda a las actividades propias de su funcin y en razn al
riesgo sanitario que represente las indicaciones siguientes:
5.1.1 Los empleados deben presentarse aseados a trabajar.
5.1.2 Usar ropa limpia (incluyendo el calzado).
5.1.3 Lavarse las manos y desinfectarlas
despus de cada ausencia del mismo y en cualquier momento cuando las manos
puedan estar sucias o contaminadas, o cuando exista el riesgo de contaminacin
en las diversas operaciones del proceso de elaboracin.
5.1.4 Utilizar cubreboca.
5.1.5 Mantener las uas cortas, limpias y libres de barniz de uas.
5.1.6 Usar proteccin que cubra totalmente el cabello, la barba y el
bigote. Las redes, cofias, cubrebocas y otros aditamentos deben ser simples y sin
adornos.
5.1.7 En caso de usar mandiles y guantes se deben lavar y desinfectar,
entre una y otra manipulacin de producto.
5.1.8 Se prohbe fumar, mascar, comer, beber o escupir en las reas de
procesamiento y manejo de productos.
66
r
5.1.9 Prescindir de plumas, lapiceros, termmetros, sujetadores u otros
objetos desprendibles en los bolsillos superiores de la vestimenta en las reas de
produccin y manejo de productos.
5.1.10 No se deben usar joyas ni adornos: pinzas, aretes, anillos,
pulseras y relojes, collares u otros que puedan contaminar el producto. Solamente
se permite el uso de broches pequeos y pasadores para sujetar el cabello
cuando se usen debajo de una proteccin.
5.1.11 Las cortadas y heridas deben cubrirse apropiadamente
material
impermeable,
evitando
con un
encuentren en partes del cuerpo que estn en contacto directo con el producto y
que puedan propiciar contaminacin del mismo.
5.1.12 Evitar que personas con enfermedades contagiosas, laboren en
contacto directo con los productos.
5.1.13 Evitar estornudar y toser sobre el producto.5.1.14 Todo el personal que opere en las reas de produccin debe
entrenarse en las buenas prcticas de higiene y sanidad, as como conocer las
labores que le toca realizar.
NOM
131.
NORMA
OFICIAL
DISPOSICIONES
MEXICANA
NOM-131-5SA1-1995,
SANITARIAS
NUTRIMENTALES .
. Objetivo y campo de aplicacin
1.1
sanitarias
Esta
Norma
y nutrimentales
Oficial
Mexicana
establece
las
las frmulas
especificaciones
para lactantes
67
Bienes
servicios.
Leche
pasteurizada
de
vaca.
aerobias en placa.
NOM-1 09-SSA 1-1994 Bienes y servicios. Procedimientos
levaduras en alimentos.
NOM-112-SSA 1-1994 Bienes y servicios. Determinacin de bacterias coliformes
Tcnica del nmero ms probable.
NOM-114-SSA1-1994
Bienes
y servicios.
Mtodo
para la determinacin
de
Salmonella en alimentos.
68
NOM-115-SSA 1-1994
Bienes y servicios.
Mtodo
para la determinacin
de
probable.
Escherichia
(Presuntiva
Colf)
determinacin
de
Listeria
monocytogenes. *
NOM-130-SSA 1-1995 Bienes y servicios. Alimentos envasados en recipientes de
cierre
hermtico
especificaciones
sometidos
tratamiento
trmico.
Disposiciones
sanitarias. *
NOM-OOO-SSA1-1995 Bienes
y servicios.
Cereales
y sus
productos. Disposiciones
para alimentos,
aquellas
sustancias
que se adicionan
su estabilidad
o para su
conservacin.
69
elaborados
con cereales
adicionados
o no de otros ingredientes,
adicionados
bien, deshidratados
directamente,
jugo.
3.5 Buenas prcticas de fabricacin, conjunto de normas y actividades
relacionadas
entre s, destinadas
a garantizar
tengan y
viables de importancia en la
70
para lactantes a partir del sexto mes cuando son alimentados con
con
frmulas para lactantes o bien, cuando el peso del lactante sea mayor de 6 kg, as
como para nios de corta edad.
3.15 Inocuo, aquello que no hace o causa dao a la salud.
3.16 Lactantes, los nios no mayores de doce meses de edad.
3.17 Lmite mximo, cantidad establecida de aditivos, microorganismos,
materia
extraa,
plaguicidas,
biotoxinas,
residuos de medicamentos,
metales
7\
elementos
quimicos
que
analticos
utilizados en el
que
establece la norma.
3.22 Nios de corta edad, los mayores de doce meses y hasta cuarenta
y ocho meses de edad; incluye al lactante mayor: un ao a un ao once meses y
al preescolar: de dos a cuatro aos.
3.23
Proceso,
elaboracin,
acondicionamiento,
conjunto
fabricacin,
de
actividades
preparacin,
envasado,
manipulacin,
relativas
la obtencin,
conservacin,
mezclado,
transporte,
distribucin,
directamente,
los
72
APNDICE
TCNICAS DE LABORATORIO.
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
MTODO
MEXICANA
NOM-Q92-5SA1-1994,
PARA LA CUENTA
DE BACTERIAS
BIENES
AEROBIAS
y
EN
PLACA.
2. Fundamento
El fundamento
se puedan realizar
cmoda y libremente. Marcar las cajas en sus tapas con los datos pertinentes
previamente a su inoculacin y correr por duplicado.
Despus de inocular las diluciones de las muestras preparadas segn la
NOM-11 O-SSA1-1994, Preparacin y Dilucin de Muestras de Alimentos para su
Anlisis Microbiolgico,
de derecha a izquierda, 6 en el
73
cajas. no
OFICIAL
SERVICIOS. DETERMINACiN
MEXICANA
NOM-112~SA1-1994,
DE BACTERIAS COLlFORMES.
BIENES
TCNICA DEL
NMERO MS PROBABLE.
2. Fundamento
El mtodo se basa en que las bacterias coliformes, fermentan la lactosa
incubadas a 35.:1:1C durante 24 a 48 horas, resultando una produccin de cidos
y gas el cual se manifiesta en las campanas de fermentacin
74
Para alimentos.
Preparar suficiente. nmero de diluciones para asegurar que todos los
tubos correspondientes a la ltima dilucin rindan un resultado negativo.
Prueba presuntiva
Inoculacin. Tomar tres tubos de medio de enriquecimiento
concentracin.
de mayor
Usar una pipeta estril para transferir a cada uno de estos tubos
anterior,
usando
una
subsecuentes,
pipeta
continuar
diferente
para
como se indica en el
cada
dilucin.
Mezclar
:f:
horas.
Prueba confirmativa
De cada tubo que muestre formacin
:f:
Incubar a 35
:f:
75
NOM113.
NORMA
OFICIAL
MEXICANA
NOM-113;SSA1-1994,
TOTALES EN PLACA.
Fundamento
El mtodo permite determinar el nmero de microorganismos coliformes
presentes en una muestra, utilizando un medio selectivo (agar rojo violeta bilis) en
el que se desarrollan bacterias a 35C en aproximadamente
24 h, dando como
requiera sembrar, utilizando una pipeta estril diferente para cada dilucin.
Vertir de 15 a 20 mi del medio RVBA fundido y mantenido a 45 :t 1,OC
en bao de agua. En el caso de utilizar cajas de Petri de plstico se vierte de 10 a
15 mi del medio. Ei tiempo transcurrido entre la preparacin de la dilucin primaria
y el momento en que se vierte el medio de cultivo, no debe exceder de 20 minutos.
Mezclar. cuidadosamente el inculo con el medio con seis movimientos
de derecha a izquierda, seis movimientos en el sentido de las manecillas del reloj,
seis. movimientos en el sentido contrario al de las manecillas del reloj y seis de
atrs para adelante, sobre una superficie lisa y nivelada. Permitir que la mezcla
solidifique dejando las cajas Petri reposar sobre una superficie horizontal fra.
Preparar
con 15 mI de medio
para verificar
la
esterilidad.
76
solidificado en la caja,
de los resultados
caractersticas
en dos diluciones
Contar
de
las colonias
77
reportar el resultado
Informe de la prueba
Informar: UFC/g o mi en placa de agar rojo violeta bilis, incubados a
35C durante 24 :1: 2 h.
En caso de emplear diluciones
y no observar crecimiento,
informar
utilizando como referencia la dilucin ms baja utilizada, por ejemplo dilucin 10-1.
NORMA
SERVICIOS.
OFICIAL
MEXICANA
NOM-114-SSA1-1994,
BIENES
DE' SALMONELLA
y
EN
ALIMENTOS.
2. Fundamento
en alimentos,
78
Identificacin
bioqumica,
este
paso
permite
la identificacin
Serotipificacin,
es
una
tcnica
serolgica
que
permite
la
peristltico
(stomacher).
estril (generalmente
caldo
79
Procedimiento
especifico
para la preparacin
de muestra
segn el
producto
Huevo en polvo, claras de huevo en polvo, yema de huevo en polvo,
huevos
lquidos
pasteurizados
y congelados,
frmulas
infantiles
y mezclas
preparadas en polvo (harinas para hot cakes, galletas, donas, bisquets y pan).
De preferencia no descongelar la muestra. Sise
NORMA
OFICIAL
MEXICANA
NOM-115-SSA1-1994,
BIENES y SERVI.CIOS.
DE STAPHYLOCOCCUS
AUREUS EN
ALIMENTOS.
Fundamento
Este
mtodo
permite
hacer
una
estimacin
del
contenido
de
80
NOM-109-SSA1-1994
Procedimiento
para
la
Toma,
Manejo
Preparacin
de la muestra
La preparacin
de la muestra
se debe
realizar de acuerdo
a lo
81
Seleccionar
las coionias
cuadro para
Menos de 50 3
51a1005
101 a 150 o ms 7
Seleccionar el nmero de colonias y sembrar cada una en tubos con 0,5
mi de caldo de infusin cerebro-corazn.
Incubar a 35C durante 24 h.
Inocular en la misma forma cepas conocidas de Staphylococcus aureus
y Staphylococcus epidermidis como testigos positivo y negativo.
Despus del periodo de incubacin pasar con una pipeta de 1 mi, 0,3 mi
de cada cultivo a otro tubo de 10 mm x 75 mm y conservarlo para la prueba de
termonucleasa. El resto del cultivo se usa para la prueba de coagulasa.
Prueba de coagulasa
Agregar a los 0,2 mi del cultivo anterior, 0,2 mide
plasma de conejo
82
Calentar durante 15 min, 0,3 mi de cultivo en caldo de infusin cerebrocorazn en bao de agua hirviendo.
Pasar una gota de cada cultivo por medio de una pipeta Pasteur a un
orificio del medio, incluye testigo.
Incubar a 35C en cmara hmeda de 4 a 24 h.
La aparicin de un halo color rosa extendido de por lo menos 1 mm
alrededor de la perforacin se califica como positiva.
Clculo y expresin
de resultados
Clculo
Hacer el clculo del contenido
tomando
de microorganismos
totales,
en el producto
el nmero de colonias
o UFC/g
en muestras directas
83
84
APENOICE
C
CEDULA DE AUTOVERIFICACIN
CENOI
PREGUNTAS
NORMAL
SI
NO
OIF
SI
NO
PAPALOTE
SI
NO
ASPECTOS GENERALES:
Area de recepcin
Area limpia
Mesas limpias
Area seca y ventilada
Anaqueles y tarimas limpias y en
buen estado.
Los alimentos se colocan en
anaqueles
Manejo de alimentos con utensilios
Alimentos preparados estn
cubiertos
EL PERSONAL EVIT A ..EN EL
REA:
Mascar
Escupir
Toser
Estornudar
Se presenta enfermo
AREA DE COCINA:
Estufas limpias
Mesas de trabajo limpias
Barras de selVicio limpias
Mesas de trabajo desincrustadas
Barras de selVicios desincrustadas
Lavado y desinfeccin de utensilios
Superficie de trabajo limpias
PISOS:
Limpios
Secos
Sin roturas
PAREDES:
Limpias
Lisas
En buen estado
De fcil lavado
Existencia de depsitos para basura
85
SI
NO
SI
NO
SI
NO
SI
NO
SI
NO
SI
NO
PREGUNTAS
PERSONAL
Apariencia pulcra
Uniforme completo
Uniforme limpio
Uniforme en buen estado
Ausencia de iovera
Cabello cubierto
Manos limpias
Uas cortadas, sin esmalte
PREGUNTAS
LA VADO DE MANOS:
Con agua v iabn
Se aplica tcnica de lavado
Antes de iniciar labores
Despus de manipular alimentos
Despus de cualquier interrupcin
Cuenta con anlisis microbiolgico
86
APNDICE D
'PROCEDIMIENTO PARA EL EXAMEN MIBROBIOLOGICO
DE SUPEFICIES y
UTENSILIOS.
MATERIAL
con
tapn
de
rosca
conteniendo
10 mi
de
la solucin
solucin.
Hisopos estriles en sobres de papel manila.
Plantillas de papel alumnio de 12 cm por lado con un cuadro de 5 x 5 cm
recortado en el centro, esterilizadas dentro del papel manila.
Torundas de algodn estriles.
Pinzas de Pean.
, TOMA DE LA MUESTRA
A)Muestreo de superficies.
Si
amortiguadora
la superficie
est
seca
humedecer
el hisopo
en
la solucin
de
87
rotacin para quitar el exceso del lquido en caso contrario no es necesario hacer
esto.
Este
mtodo
tambin
puede
utilizarse
para
buscar
patgenos,
Tomar lamue5tra
88
C)Superficie de manos
ANALlSIS DE MUESTRAS.
89
Mezclar
con movimientos
rotatorios
en una superficie
lisa y bien
Mezclar
con movimientos
rotatorios
en una superficie
lisa y bien
A)Superficies.
clculo de las colonias por mI. multiplicar por el volumen empleado y dividirlo entre
cm2 de la superficie. Los resultados se expresan en UFC/cm2.
B)Utensilios de comedor.
Hacer el clculo de: nmero de colonias por mI. multiplicar el volumen
total de la solucin de muestreo y sacar promedio dividiendo entre el nmero de
utensilios muestreados para informar UFC/utensilios.
C)Superficie de manos.
por el volumen
90
BIBLIOGRAFA
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Y TECNOLOG(A
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93
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1.HTM
28.-WWW.SSA.GOB.MXlLABNSP/SALMONE.HTML
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30.-WWW.UMBRALXXI.COM/INTOX.HTM
31. -HTTP://QUETZAL.INNSZ.MXlALlMENTOS/MICRO.HTML
33.- WWW.BVS.SLD.CUlREVISTAS.COM.MX
94