UNIDAD III: CONTROL DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS

La desinfeccin de instrumentos y superficies de trabajo en el laboratorio donde se manipulan

muestras biolgicas constituye la forma ms adecuada para evitar posibles contaminaciones.
Esto se consigue con el uso correcto de desinfectantes. Para el empleo de estos productos es
necesario conocer los riesgos ligados a su utilizacin y seguir las indicaciones del fabricante.
Cuando se utilizan productos qumicos, tambin se deben utilizar equipos de proteccin
adecuados, como guantes, gafas o mascarillas, el lugar debe estar lo suficientemente ventilado, ya
que algunos productos pueden desprender gases perjudiciales para la salud.
Fundamental es tener en cuenta que no hay que mezclar nunca los productos, ya que se pueden
producir explosiones, reacciones violentas, desprendimiento de gases, vapores txicos, o
incendios.
Las razones principales para controlar los microorganismos se resumen as:

1. Prevenir la transmisin de una infeccin y/o enfermedad

2. Prevenir la contaminacin o la proliferacin de microorganismos perjudiciales

(patgenos)

3. Prevenir el deterioro o la destruccin de materiales por los microorganismos

Los microorganismos se eliminan, inhiben o matan por medio de agentes fsicos, o agentes
qumicos.

MANTENIMIENTO, LIMPIEZA Y DESINFECCION

Los establecimientos y el equipo deben mantenerse en adecuado estado de conservacin para
facilitar todos los procedimientos de limpieza y desinfeccin y para que el equipo cumpla la
funcin propuesta, especialmente las etapas esenciales de seguridad y prevencin de
contaminacin por agentes fsicos, qumicos o biolgicos.
La limpieza puede realizarse con el uso individual o combinacion de mtodos fsicos (como calor,
restregado, flujo turbulento, limpieza al vaco u otros mtodos que eviten el uso de agua) y
mtodos qumicos que utilicen detergentes alcalinos o cidos.
Los cepillos y esponjas (mtodos fsicos para retirar la suciedad) pueden ser muy eficaces si se
eligen de forma adecuada. De ser necesario aplicar ms presin para remover las suciedades
difciles, las cerdas de los cepillos pueden doblarse, reduciendo significativamente la eficiencia.

Cuando se necesitan limpieza y desinfeccin, generalmente esto incluye:

Limpieza a seco
Enjuague previo (rpido)
Aplicacin de detergente (puede incluir restregado)
Enjuague posterior
Aplicacin de desinfectante

CONTROL DE EFICIENCIA
Debe supervisarse peridicamente el sistema de limpieza y desinfeccin para verificar su
eficiencia, por medio de inspecciones previas o de anlisis microbiolgicos del medio ambiente y
de las superficies.
Puede evaluarse peridicamente la eficiencia de la limpieza y desinfeccin de las superficies
utilizando placas de contacto que contengan medios de cultivo para crecimiento bacteriano. Esos
procedimientos son muy simples, no exigen ningn equipo o entrenamiento especial.
DEFINICIN DE TRMINOS
q ESTERILIZACIN: Es el proceso de destruir todas las formas de vida microbiana.
q DESINFECTANTE: Es un agente, por lo regular qumico, capaz de matar las formas en
desarrollo, pero no necesariamente las esporas resistentes de microorganismos
patgenos.
q ANTISPTICO: Toda sustancia que se opone a la sepsis o impide el desarrollo o accin de
los microorganismos, ya sea por destruirlos o inhibir su crecimiento y actividad.
Generalmente se refiere a sustancias aplicadas al cuerpo.
q SANEAMIENTO: Consiste en reducir la poblacin microbiana a niveles no peligrosos por
medio de un agente, segn los requerimientos de salud pblica. Por lo regular, es un
agente qumico que mata 99.9% de las bacterias en crecimiento.
q Agentes esterilizantes son aquellos que producen la inactivacin total de todas las formas
de vida microbiana (o sea, su "muerte" o prdida irreversible de su viabilidad).
q Agentes desinfectantes (o germicidas) son agentes (sobre todo qumicos) antimicrobianos
capaces de matar los microorganismos patgenos (infecciosos) de un material. Pueden (y
en muchos casos suelen) presentar efectos txicos sobre tejidos vivos, por lo que se
suelen emplear slo sobre materiales inertes.
q Agentes antispticos son sustancias qumicas antimicrobianas que se oponen a la sepsis o
putrefaccin de materiales vivos. Se trata de desinfectantes con baja actividad txica hacia
los tejidos vivos donde se aplican.

q Quimioterpicos son compuestos qumicos con actividad microbicida o microbiosttica,

con una toxicidad suficientemente baja como para permitir su administracin a un
organismo superior, en cuyos fluidos corporales y tejidos permanece estable un cierto
tiempo a concentraciones tales que los hace eficaces como antimicrobianos dentro del
organismo.
CURVA Y VELOCIDAD DE MUERTE BACTERIANA
En la figura 21-1 se muestra la curva de mortalidad de las esporas de Bacillus anthracis expuestas a
una solucin de fenol al 5%.

El nmero de sobrevivientes se representa grficamente frente al tiempo. Sin embargo, la curva A

es aritmtica y la B logartmica.
En ambas curvas se observa que alguna porcin de la poblacin bacteriana muere durante una
unidad de tiempo determinada, pero la grfica logartmica tambin revela que la proporcin de
muertes es constante.
Los resultados que se ven en la figura 21-1 se obtienen slo si todas las condiciones se mantienen
uniformes, incluso la edad y el estado fisiolgico de esos microorganismos. Si las clulas de esa
poblacin varan en edad o estado fisiolgico del desarrollo, presentarn diferencias de
susceptibilidad al agente.

En consecuencia, los puntos que corresponderan a los sobrevivientes no caern en una lnea
recta; as pues, la forma e inclinacin de la curva de muerte est afectada por la especie de
microorganismo y por la homogeneidad de las clulas consideradas.
CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACCIN ANTIMICROBIANA
Muchas de sus caractersticas biolgicas influyen en la proporcin en que son muertos o
inactivados por diversos agentes.
TEMPERATURA
Un aumento de la temperatura con otro agente, que puede ser qumico, apresura la destruccin
de los microorganismos.
As, una cantidad pequea del agente qumico a una temperatura elevada lograr el mismo
resultado que una cantidad mayor del mismo agente a temperatura ms baja.
CLASES DE MICROORGANISMOS
Las especies de microorganismos difieren en su susceptibilidad a los agentes qumicos y fsicos.
Las clulas vegetativas en desarrollo, de las especies que forman esporas, son mucho ms
susceptibles que las esporas; en cambio, stas(esporas) son muy resistentes, son las formas
orgnicas ms resistentes pues son capaces de sobrevivir en condiciones fsicas o qumicas muy
adversas.
ESTADO FISIOLGICO DE LAS BACTERIAS
El estado fisiolgico de los organismos influye en la susceptibilidad a los agentes antimicrobianos.
Las clulas jvenes, por tener intenso metabolismo, son ms vulnerables que las viejas, de menor
actividad metablica en el caso de un agente que cause dao por interferir en esa funcin, este
tipo de agente no afectar las clulas que no estn en desarrollo.
Otras diferencias en cuanto a la resistencia se explican por cambios en la membrana celular
porque el envejecimiento afecta la permeabilidad de sta.
AMBIENTE
Las propiedades fsicas y qumicas del medio o de las sustancias que contiene el medio en que
viven los microorganismos, tienen gran influencia en la velocidad y eficacia de la destruccin
microbiana. Por ejemplo, el calor es ms eficaz en un medio cido que en uno alcalino.
La consistencia del material, acuoso o viscoso, influye marcadamente en la penetracin del
agente; las concentraciones altas de carbohidratos aumentan por lo regular la resistencia trmica
de los organismos.

 PRESENCIA DE MATERIALES EXTRAOS

La existencia de materia orgnica en el material a tratar (p. ej., sangre, suero, pus) afecta
negativamente a la potencia de los desinfectantes de tipo oxidante (como los hipocloritos) y de
tipo desnaturalizante de protenas, hasta el punto que pueden llegar a hacerlos inactivos en
cuanto a su poder desinfectante y/o esterilizante.
Los principales mecanismos por los que se pierde actividad son:
q Adsorcin (o sea, absorcin superficial) del desinfectante a coloides de protenas;
q Formacin de complejos inertes o poco activos;
Unin de grupos activos del desinfectante a protenas extraas
POTENCIA DEL DESINFECTANTE
La determinacin de la actividad desinfectante de un determinado agente es necesaria para
conocer su posible eficacia.
El mtodo primario que se viene empleando desde hace muchos aos es comparar la potencia del
compuesto a ensayar con la de un desinfectante-tipo o estndar, que por motivos histricos es el
fenol.
Coeficiente fenol o coeficiente fenlico: consiste en la siguiente relacin

Mxima dilucin del desinfectante que mata a un microorganismo en 10 min, pero no en 5

min.

TIPOS DE DESINFECTANTES
CLASIFICACION
Se suelen clasificar de acuerdo con su mecanismo de accin:
A) AGENTES QUE DAAN LA MEMBRANA
1) Detergentes
a) catinicos
b) aninicos
c) no inicos
2) Compuestos fenlicos
a) fenol
b) cresoles
c) difenilos halogenados
d) alquilsteres del para-hidroxibenzoico
e) aceites esenciales de plantas

3) Alcoholes
a) etanol
b) Isopropanol
B) AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEINAS
1) cidos y bases fuertes
2) cidos orgnicos no disociables
C) AGENTES MODIFICADORES DE GRUPOS FUNCIONALES
1) Metales pesados
a) mercuriales
b) compuestos de plata
c) compuestos de cobre
2) Agentes oxidantes

3) Colorantes
4) Agentes alquilantes

a) halgenos
b) agua oxigenada
c) permanganato potsico
d) cido peractico
a) derivados de la anilina
b) derivados de la acridina (flavinas)
a) formaldehido
b) glutaraldehido
c) xido de etileno
d) -propionil-lactona

TIPOS

AGENTES QUE DAAN LA MEMBRANA CELULAR

Los solventes orgnicos (fenoles, alcoholes) y los desinfectantes tensioactivos (detergentes) daan
la integridad estructural de la membrana (es decir, la disposicin ordenada de lpidos y protenas),
de modo que interfieren con su funcin, ejerciendo un efecto neto de interferencia con procesos
de transporte y metabolismo energtico; salida de pequeas molculas de la clula.

 Detergentes (desinfectantes tensioactivos o surfactantes):

Los detergentes sintticos, al igual que los jabones, contienen una porcin hidrofbica
(normalmente una larga cadena lipfila) y una porcin hidrfila (un grupo polar), lo cual les
permite formar micelas en solucin acuosa, as como formar capas que cubren y solubilizan
molculas hidrfobas.
Segn sea la porcin hidrfila, los detergentes se pueden clasificar en:

detergentes inicos

detergentes no inicos

Detergentes catinicos: son los detergentes ms potentes en cuanto a su actividad

desinfectante, siendo activos contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. Los
principales son los llamados compuestos de amonio cuaternario

Usos, ventajas e inconvenientes: Tienen baja toxicidad, por lo que se pueden emplear como
desinfectantes y antispticos de la piel. Se emplean igualmente en la desinfeccin de material de
industrias alimentarias. Su actividad se ve neutralizada por jabones y fosfolpidos, precipitando en
su presencia.

Fenoles: son rpidamente bactericidas a bajas concentraciones, causando:

Daos a membranas, con prdida de constituyentes citoplsmicos

Inactivacin irreversible de oxidasas y deshidrogenasas de membrana

Desnaturalizacin de protenas.

Tienen baja solubilidad en agua, por lo que se emplean en frmulas que incluyen agentes
emulsificadores (jabones) que, adems, aumentan su actividad.
Fenol: El fenol o cido carblico, histricamente uno de los primeros desinfectantes en usarse,
slo se emplea en la actualidad como patrn para ensayar el poder desinfectante de otros
compuestos. A partir del fenol se pueden lograr desinfectantes con mayor actividad antibacteriana
y con menor toxicidad sustituyendo hidrgenos del anillo bencnico por radicales alqulicos o por
halgenos.
Cresoles: son los alquil-fenoles. El radical alqulico puede estar en posicin orto, meta o
para, dando respectivamente el orto-cresol, el meta-cresol y el para-cresol. Normalmente
se emplea la mezcla de los tres, denominada tricresol.

Se obtienen por destilacin del alquiltrn de carbn, y se emplean como emulsiones de jabn
verde. Se usan como desinfectantes de material de desecho bacteriolgico y como desinfectantes
de la piel.

Difenilos halogenados
El hexaclorofeno (hexacloro-orto-difenilmetano) es bacteriosttico a bajas
concentraciones (sobre todo contra cocos Gram-positivos), incluso incorporado en
jabones, pasta de dientes y cosmticos.
Ciertos aceites esenciales de origen vegetal
Desde la antigedad, y de modo emprico, se vienen usando algunos aceites esenciales de plantas
aromticas como conservantes y antispticos, ya que como se ha podido comprobar, contienen
varios compuestos fenlicos:

El timol (de Thymus, los tomillos)

El eugenol se emplea en odontologa como antisptico

Alcoholes: los alcoholes desorganizan las bicapas lipdicas penetrando en la regin

hidrocarbonada de los lpidos. No afectan a las endosporas, por lo que no son
esterilizantes. Su accin desinfectante mejora conforme aumenta la longitud de la cadena
aliftica de los alcoholes, hasta aquellos con 8 a 10 tomos de carbono (C8-C10), ya que los
alcoholes de cadenas ms largas de C10 tienen una baja solubilidad en agua.
Etanol
Isopropanol

AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEINAS

Acidos y lcalis fuertes: son activamente bactericidas, debido a sus grupos H+ y OHdisociados, respectivamente.

En principio, su actividad es proporcional al grado de disociacin, pero algunos hidrxidos son ms

potentes de lo sugerido por su mero grado de disociacin, debido a la accin txica directa que
puede ejercer el catin metlico.
Existen ciertas especies bacterianas que resisten relativamente bien la accin de bases fuertes

 cidos orgnicos
Los cidos orgnicos, que son poco disociables, ejercen su efecto en cuanto molculas intactas (sin
disociar), que penetran a la clula.
El cido benzoico y el cido srbico se usan ampliamente como conservantes alimentarios.
Ciertos cidos (como el actico, lctico, propinico) aparecen en alimentos fermentados,
actuando como conservantes naturales.
Estos mismos, as como el ctrico se pueden aadir a otros tipos de alimentos, para prolongar el
periodo de posible almacenamiento de los productos.
AGENTES MODIFICANTES DE GRUPOS FUNCIONALES DE PROTEINAS Y DE CIDOS NUCLEICOS
Como ya vimos en la clasificacin de agentes desinfectantes, dentro de este grupo se distinguen a
su vez:

Metales pesados
Agentes oxidantes
Tinturas de colorantes
Agentes alquilantes

Metales pesados
Las sales solubles de Hg, As, Ag, Cu, etc, "envenenan" la actividad enzimtica formando
mercptidos con los grupos -SH de la cistena. Tambin interaccionan con -NH2, -COOH y radicales
fosfato. Los ms efectivos son los derivados del mercurio y de la plata (actan a menos de 1 ppm).

Mercuriales
Cloruro de mercurio
Compuestos orgnicos de mercurio
Sales de fenilmercurio
Compuestos de plata
Nitrato de plata
Coloides orgnicos de plata
Cremas de nitrato de plata y sulfodiazina de plata
Sales y compuestos de cobre

Agentes oxidantes
Los efectos de los agentes oxidantes que se presentan a continuacin son la inactivacin de
protenas enzimticas (convitiendo los radicales-SH en disulfuros -S-S-). Adems, los ms potentes
tambin atacan radicales amino, el grupo indol (presente en el triptfano), y la tirosina.

Halgenos
Yodo: Tintura de Iodo, Iodforos

Cloro. El cloro fue uno de los primeros antispticos en usarse (antes de conocerse su
mecanismo, e incluso antes de que se supiera el autntico papel de los microorganismos
en las enfermedades infecciosas).

El cloro se presenta bajo las formas de Cl2 (gaseoso), hipocloritos y cloraminas. El efecto
desinfectante se debe a la liberacin de cloro libre (Cl2); a su vez, el Cl2 reacciona con el agua para
dar cido hipocloroso, que a pH cido o neutro es un oxidante fuerte
Cl2 + H2O ---------> ClOH + H+ + Cl(ClO)2Ca + H2O ----> Ca++ + H2O + 2 ClO(ClO)2Ca + 2H2O ---> Ca(OH)2 + 2 ClOH

Cloro gaseoso
Soluciones de hipocloritos
Agua oxigenada

Tinturas de colorantes bsicos

Algunos colorantes derivados de la destilacin del alquitrn de carbn, sobre todo los
trifenilmetanos y las acridinas, no slo tien las bacterias (recurdense las prcticas), sino que
tambin actan como antibacterianos, incluso a pequeas concentraciones. Los colorantes bsicos
son los ms efectivos.
En general, su mecanismo depende de su afinidad hacia los grupos fosfato (cidos) presentes en
las nucleoprotenas.
Encuentran su uso como antispticos de lesiones dermatolgicas, infecciones de la piel y pequeas
heridas. Su principal inconveniente es que muchos de ellos se inactivan en presencia de suero y
otras protenas.

MODO DE ACCIN DE LOS AGENTES ANTIMICROBIANOS

DAO A LA PARED CELULAR
Las paredes de algunas bacterias grampositivas son atacadas por la enzima lisozima que se
encuentra en las lgrimas, leucocitos, secreciones mucosas y otras fuentes naturales.
Las enzimas producidas por varias especies bacterianas son capaces de degradar la estructura de
la pared celular de otras especies. A la desintegracin de la pared celular sigue la lisis.

 ALTERACIN DE LA PERMEABILIDAD CELULAR

La membrana citoplsmica preserva la integridad de los constituyentes celulares y tiene a su cargo
el transporte selectivo de nutrientes al interior de la clula. Del dao a esta membrana resulta una
inhibicin del desarrollo o la muerte celular.
La actividad antimicrobiana de los compuestos fenlicos, detergentes sintticos, jabones y
compuestos cuaternarios de amonio se atribuye a sus efectos sobre la permeabilidad celular. Estas
sustancias anulan la permeabilidad selectiva de la membrana, permitiendo la salida de los
constituyentes celulares.
ALTERACIN DE LAS MOLCULAS DE PROTEINA Y DE CIDOS NUCLEICOS
La viabilidad de una clula est vinculada con el mantenimiento de las molculas de protenas
y cidos nucleicos en su estado natural. Toda situacin o sustancia que altere este estado, es decir,
que lo desnaturalice, daa irreparablemente a la clula.
Las altas temperaturas o fuertes concentraciones de algunos agentes qumicos causan la
coagulacin irreversible (desnaturalizacin) de estos constituyentes protoplasmticos vitales.
INHIBICIN DE LA ACCIN ENZIMTICA
Cada una de los cientos de enzimas que hay en una clula es un blanco potencial para un
inhibidor.
La disminucin de las reacciones que suministran energa son particularmente dainas; muchos
agentes afectan enzimas que son vas clave, como el sistema glucoltico, el ciclo del cido
tricarboxlico de Krebs y el sistema del citocromo.
Los agentes oxidantes fuertes, como los halgenos y el perxido de hidrgeno, llegan a daar
tanto a los constituyentes celulares que stos ya no pueden efectuar sus funciones metablicas
normales.
CONTROL DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS
ANTIMETABOLITOS
En algunos casos de inhibicin, la lesin inicial es una interferencia con una biosntesis
especfica. Un ejemplo clsico es el bloqueo de la sntesis del cido flico por sulfanilamida.

INHIBICIN DE LA SNTESIS DE CIDOS NUCLEICOS

Existen sustancias qumicas sintticas y otras naturales que son inhibidores poderosos de la
sntesis de RNA y de DNA. Hay dos categoras de sustancias que inhiben la sntesis del cido
nucleico:

a) Compuestos que interfieren con la formacin de los bloques estructurales de los cidos
nucleicos, los nucletidos purina y pirimidina.
b) Compuestos que interfieren con la polimerizacin de los nucletidos en cido nucleico, El
papel vital del DNA y del RNA en los procesos normales de la vida de la clula seala que
toda interferencia con su formacin y su funcin ha de daar gravemente a la clula
CALOR.
El fuego y el agua en ebullicin se han utilizado para esterilizar y desinfectar desde la poca de los
griegos, siendo el calor an uno de los mtodos ms comunes para destruir microorganismos. Se
puede aplicar hmedo o seco.
Una exposicin a agua en ebullicin durante 10 minutos es suficiente para destruir clulas
vegetativas y esporas de eucariotas.
Lamentablemente, la temperatura de ebullicin (100C) no es suficiente para destruir endosporas
bacterianas que pueden sobrevivir durante horas en ebullicin.

AGENTES FISICOS
La esterilizacin con vapor se realiza en un autoclave, aparato similar a una olla a presin. Se
hierve agua para producir vapor, que pasa a travs de un cubierta al interior de la cmara del
autoclave.
Se expulsa el aire que inicialmente se encuentra en la cmara hasta que sta queda llena de vapor
saturado y se cierran las salidas.
El vapor saturado y caliente contina entrando en la cmara hasta que se alcanza la temperatura
y presin deseadas, normalmente, 121 C y 6.8 kg de presin.
A esta temperatura, el vapor saturado puede destruir en 10-12 minutos todas la clulas
vegetativas y endosporas presentes en un volumen pequeo de muestra. El tratamiento se
contina durante 15 minutos para conseguir un margen de seguridad.
Despus del tratamiento en el autoclave, se rompe aspticamente la ampolla y el cultivo se incuba
durante varios das.

Si la bacteria indicadora no crece en el medio, se infiere que los materiales han quedado
esterilizados. A veces se introduce tambin en el autoclave una cinta especial con la palabra estril
escrita, o una tira de papel indicador que cambia de color despus de un tratamiento suficiente
con calor. Si la palabra aparece en la cinta o si el color cambia despus del tratamiento, se supone
que el material est estril.
BAJAS TEMPERATURAS
Aunque hasta ahora se estn discutiendo los sistemas para la destruccin de microorganismos, a
menudo, la tcnica de control ms conveniente es inhibir su multiplicacin mediante el empleo de
la refrigeracin o congelacin.
Este enfoque es particularmente importante en microbiologa de los alimentos. Una de las causas
por la que, en general, los microorganismos no se multiplican a las temperaturas de congelacin
(p. ej., -20C) es la ausencia de agua lquida libre.
Incluso, a estas temperaturas algunos microorganismos son destruidos por los cristales de hielo
que rompern sus membranas, aunque no destruir todos. La refrigeracin reduce enormemente
el crecimiento microbiano pero no lo detiene completamente.
FILTRACIN
La filtracin es un mtodo excelente para reducir, incluso esterilizar, la poblacin microbiana en
soluciones termosensibles. Ms que destruir directamente los microorganismos contaminantes, el
filtro simplemente los retira. Existen dos tipos de filtros:
q Los filtros de profundidad consisten en materiales fibrosos o granulosos que forman una
capa gruesa rellena de canales retorcidos de un dimetro pequeo.
q Los filtros de membrana han sustituido a los de profundidad en muchas aplicaciones.
Estos filtros circulares son membranas porosas, con un grosor de aproximadamente 0.1
mm, de acetato de celulosa, nitrato de celulosa, policarbonato, fluoruro de polivinilo u
otros materiales

RADIACIN:
En general, la luz es perjudicial para los microorganismos que carecen de clorofila o cualquier otro
pigmento que les permita utilizar la energa de las radiaciones en proceso de fotosntesis.
Las radiaciones de longitud de onda corta invisibles son generalmente ms germicidas que la luz
invisible. Los efectos germicidas de la luz visible y de las infrarrojas invisibles se deben al calor.
ELECTRICIDAD:
El paso de una corriente alterna a travs de un lquido donde hay microorganismos en suspensin
produce cambios fsicos y qumicos que pueden ser antispticos e incluso desinfectantes.
Cuando una corriente elctrica pasa a travs de una sustancia, se produce calor, cuanto mayor sea
la resistencia y ms alto el amperaje, ms calor se genera.
La produccin de calor es el principal cambio fsico ocasionado por la corriente y el principal
causante de sus efectos letales.

 AGITACIN Y ULTRASONIDOS.
El efecto de cada uno de estos agentes es desintegrar las clulas de los microorganismos.
No constituyen medios especialmente eficaces para matar los microorganismos, pero en ciertas
condiciones pueden emplearse para este propsito.
AGENTES QUIMICOS
Principales factores que deben considerarse cuando se utiliza un agente qumico para inhibir o
matar a los microorganismos:
1. Clase de microorganismo.
2. Nmero de microorganismos.
3. Edad e historial previo de los microorganismos.
4. Tejidos o sustancias en que se encuentran los microorganismos.
5. Propiedades venenosas del agente qumico.
6. Tiempo que dispone el agente qumico para actuar y concentracin que puede ser
empleada.
7. Influencia de la temperatura sobre el agente qumico y el tejido o sustancia en cuestin.
Tipos de desinfectantes y usos en el laboratorio
Existe un espectro aproximado de sensibilidad de los microorganismos a los desinfectantes. Los
ms sensibles son las bacterias vegetativas, los hongos y los virus que contienen lpidos.
Las mycobacterias y los virus que no contienen lpidos son menos sensibles y las esporas son por lo
general resistentes.
En la eleccin de los desinfectantes, deben tenerse en cuenta algunas consideraciones a cerca de
su toxicidad y de los efectos perjudiciales que pueden tener sobre la piel, ojos y vas respiratorias.
AGENTES QUIMICOS
ALCOHOLES
Alcohol y mezclas de alcoholes
FENOLES
IONES DE METALES PESADOS
HIPOCLORITOS.
ALDEHDOS
IODFOROS
JABONES Y OTROS DETERGENTES

En la prctica, los jabones actan principalmente produciendo la separacin mecnica de los

microorganismos de la piel, utensilios diversos, pavimentos, vestidos, etc. Tambin tienen cierta
accin antisptica debida a uno o ms de los siguientes efectos:
1. Reduccin de la tensin superficial.
2. Produccin de una reaccin alcalina.
3. Liberacin de cidos grasos antispticos.
4. Accin del alcohol u otros antispticos mezclados con el jabn.
La accin de los jabones aumenta cuando se usa agua caliente.
Compuestos de amonio cuaternario
Son detergentes catinicos eficaces contra bacterias vegetativas y algunos hongos, aunque no
contra las mycobacterias o esporos
GASES ETERILIZANTES
AGENTE QUIMIOTERPICOS

TRATAMIENTO Y ELIMINACIN DE LOS MATERIALES INFECTADOS

Recipientes para material infectado desechado
Debe haber en el laboratorio cuatro tipos importantes de recipientes para productos infectados
desechados:
(1) Cestos o bolsas de un solo uso para recibir cultivos y muestras;
(2) Vasijas de un solo uso para recibir portaobjetos, pipetas Pasteur y pequeos artculos a
desechar;
(3) Pipeteros para pipetas graduadas (recuperables); y
(4) Bolsas de plstico para materiales combustibles tales como cajas para muestras y envoltorios
que puedan estar contaminados.
v Cestos y bolsas de un solo uso
Los cestos de un solo uso tendrn fondos macizos para que no goteen; en caso contrario se
diseminar material contaminado.

v Vasijas de desechos
Las vasijas o tarros de desechos con desinfectante que se sitan en la bancada del laboratorio y
dentro de los cuales se sumergen los portaobjetos, pipetas Pasteur y otros desechos usados,
tienen una larga historia de olvidos y abusos.
v Eleccin del recipiente
Los recipientes viejos de mermelada y de caf instantneo no son adecuados. Estos recipientes se
rompen con facilidad y los vidrios rotos son un riesgo innecesario en un laboratorio, especialmente
si estn contaminados.
v Vaciado regular
Ningn material debe dejarse en el desinfectante de la vasija de desecho durante ms de 24 horas,
ya que en caso contrario se desarrollarn las bacterias supervivientes.
v Pipeteros
Las vasijas para las pipetas recuperables deben estar hechas de polipropileno o de goma. Son de
mayor seguridad que el vidrio.
v Bolsas de plstico para materiales combustibles
Estas bolsas se hallan en todos los hospitales y tienen colores codificados

MTODOS DE TRATAMIENTO Y ELIMINACIN

Existen tres mtodos prcticos para el tratamiento de los materiales de laboratorio desechados y
de los desechos contaminados:
(1) la esterilizacin por autoclave
(2) la incineracin
(3) la desinfeccin qumica
La desinfeccin sola es aconsejable nicamente para las pipetas graduadas recuperables.
v Organizacin del tratamiento
Los diseos de una cocina para tratar los materiales de laboratorio desechados debe incluir
autoclaves, un triturador, una unidad de eliminacin de basura conectada por tubera de plomo al
alcantarillado pblico, fregaderos hondos, mquinas para lavar material de vidrio, estufas de
desecacin, estufas de esterilizacin y grandes bancadas.

v Material de vidrio contaminado

Despus de esterilizarlos al autoclave, los medios de cultivo pueden verterse o extraerse y los
tubos, frascos, etc., se lavan a mano o mecnicamente con un detergente adecuado.
v Vasijas de desecho
Despus de dejarlas toda la noche para permitir que acte el desinfectante, debe verterse
cuidadosamente el contenido de las vasijas a travs de un colador de polipropileno.
v Pipetas reutilizables
Tras sumergirlas totalmente en desinfectante y detergente durante toda la noche, deben retirarse
las pipetas con las manos enguantadas.
v Incineracin
Los problemas con este mtodo de eliminacin son asegurarse de que los desechos llegan
realmente al incinerador y que son totalmente esterilizados, es decir, que nada queda sin
esterilizar, ya sea como material incombustibles fabricados de polipropileno, o que escape por la
chimenea.