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PROCARIOTAS II

Microbiologa industrial

IV.- CIANOBACTERIAS
Las Cianobacterias (griego kyans, "azul"), son eubacterias gram (-), que
realizan fotosntesis oxignica. (Flores, 2008)
Pueden encontrarse en mares, ros, lagos, desiertos, suelos o aguas termales
Se piensa que habitan la tierra desde hace 3.500 millones de aos, y son
responsables del cambio de una atmsfera reductora a oxignica.
Durante mucho tiempo se designaron como, algas verde-azules, debido a su clor y
su capacidad de fotosintesis, pero en realidad son procariotas.
Los fsiles ms antiguos conocidos son los de estromatolitos, que son
comunidades microbianas de cianobacterias

Estrematolitos

4.1.- MORFOLOGA
Las clulas miden unas micras de
dimetro, pero son ms grandes que la
mayora de otras bacterias.
El citoplasma suele presentar
carboxisomas (corpsculos que contienen
la enzima RuBisCO, que realiza la fijacin
del CO2), grnulos de glucgeno, grnulos
de cianoficina (polipptidos, que
principalmente contienen cido asprtico y
arginina), grnulos de polifosfato,
vesculas gasferas y tilacoides, donde
reside el aparato molecular de la
fotosntesis.
Suelen tener color verde- azulado que les
confieren las ficocianinas.

Morfologia
Generalmente son unicelulares
cocoides, a veces estn agregadas
en una capsula mucilaginosa, o
formando filamentos.
Las clulas filamentosas forman un
conjunto llamado tricoma
Tienen una gran capacidad de
almacenamiento de nutrientes.
La principal reserva son grnulos de
cianoficina.
Los cuerpos de polifosfato o
grnulos de volutina, almacenan
fosfato.

Morfologa.
Entre las clulas de un filamento hay comunicacin, y puede producirse algn
grado de especializacin de funciones, como heterocistes y ascinetos.
Los heterocistes son clulas ms grandes intercaladas en los filamentos, que
contienen la maquinaria de fijacin del nitrgeno, que es incompatible con la
fotosntesis.
Los acinetos; son clulas ms grandes que las clulas vegetativas, y con una
pared ms gruesa; poseen un citoplasma granuloso debido a la acumulacin de
cianoficina como sustancia de reserva. Tienen un metabolismo reducido y soportan
condiciones de vida desfavorables. (Llimona, 1985)

Intercambios metablicos entre las clulas vegetativas y heterocistos .

Fd. Ferredoxina.
PSI: fotosistema I
glu: glutamato
gln: glutamina
KG:
cetoglutarato

4.2.- CARACTERSTICAS METABLICAS


Son fijadoras de carbono y nitrgeno.
Fijacin del carbono.
Son auttrofas oxignicas, con dos centros de reaccin: el fotosistema I (PSI) y el
fotosistema II (PSII). Presentan como pigmentos fotosintticos a la clorofila a y d,
como pigmentos accesorios, ficobilinas (ficocianina y ficoeritrina) en la membrana
de los tilacoides.
Algunas cianobacterias viven heterotrficamente, o con un metabolismo mixto.
Fijacin de nitrgeno.
Pueden tomar el N2 del aire, y reducirlo a amonio (NH4+), mientras que otros
auttrofos como plantas no pueden fijar el N2, y deben tomar nitrato (NO3-).
La enzima nitrogenasa que fija el nitrgeno, es inhibida por el oxgeno, y es
incompatible con la fotosntesis, por ello, algunas cianobacterias, realizan
fotosntesis durante el da y fijacin de nitrgeno por la noche.
Otras especies, solucionan el problema mediante los heterocistes, clulas sin
fotosistema II, donde no hay desprendimiento de oxgeno y la nitrogenasa no
puede ser inhibida.

4.3.- CLASIFICACION
La taxonoma de las cianobacterias est en
revisin.
El Manual Bergey divide a las
cianobacterias en cinco grupos
morfolgicos:
- Unicelulares con divisin por fisin binaria;
- Unicelulares con divisin por fisin
mltiple;
- Filamentosas (compuestas por un tricoma)
con heterocistes y acinetos;
- Filamentosas sin formar heterocistes;
- Filamentosas ramificadas.
Principales gneros: Spirulina, Lyngbia,
Oscillatoria, Anabaena, Aphanizomenum,
nostoc, Microcystis.

Anabaena
Anabaena es una cianobacteria, tan
antigua como la vida en la Tierra. Puede
vivir en ambientes extremos desde heladas
intensas hasta temperaturas mayores a
70C.
Filamentosa con heterocistes, y acinetos.
Con frecuencia, pueden establecer
relaciones de simbiosis con plantas
acuticas, como el pequeo helecho Azolla,
o el arroz. En este caso, la cianobacteria
proporciona a las plantas compuestos
nitrogenados tiles para fabricar protenas,
mientras que recibe de ella los azcares que
los vegetales fabrican en la fotosntesis.
Puede producir saxitoxinas.

Filamento

de Anabaena
con un heterociste

Lyngbia
Filamentosa,

con vaina definida, vive


en el mar o en agua dulce, y forman la
base de la cadena alimentaria
ocenica.
Lyngbya forman largos filamentos
dentro de una funda rgida de
muclago.
Sus filamentos se rompen y cada
clula forma un nuevo filamento.
Algunos Lyngbya causan dermatitis
en humanos.

Lyngbia sp.

Microcystis
Microcystis tienen clulas
pequeas, que se organizan
generalmente en colonias, que
pueden verse a simple vista.
La coloracin de la protoplastos
es un azul-verde claro.
Microcystis aeruginosa puede
formar toxinas microcistina.
M. aeruginosa tambin puede
producir hidroxitolueno butilado
(BHT), un aditivo alimentario
antioxidante.

Merismopedia
Celulas

ovoides o de forma
esfrica y se disponen en filas y
pisos, formando colonias
rectangulares unidas por una
matriz mucilaginosa.
Se encuentran en series rectilneas
constituyendo placas
rectangulares.
Se encuentran en agua dulce y
salada.
Merismopedia tenuissima produce
la toxina microcistina, que parece
inhibir el desarrollo de algunas
algas que pudieran competir con
ella.

Nostoc
Filamentosa

heterosista, con
envolturas mucilaginosas firmes
y anchas, amarillas, marrones, o
de color negro.
Una protena, CV-N (cyanovirinN), aislada de unos cultivos
de Nostoc
ellipsosporum inactiva "in vitro"
de forma irreversible los cultivos
de virus responsables de
la immunodeficiencia humana.

Oscillatoria
Filamentosa,

y tiene vaina
apenas perceptible
Gnero comn en ambientes
de agua dulce, incluyendo
aguas termales.
Deriva su nombre de su
lento, movimiento de
oscilacin rtmica, que se cree
que resulta de una secrecin
de muclago que empuja el
filamento lejos de la direccin
de excrecin.
Se reproduce por
fragmentacin

Rivularia
Filamentosa

heterosista.
Desarrolla colonias sobre las
rocas, madera, algas u otros
sustratos
No forman nunca acinetos.
Reproduccin por
fragmentacin.
Se encuentra en colonias y los
tricomas estn dispuestos
radialmente dentro de una
colonia, con cada tricoma total o
parcialmente rodeada por una
lmina gelatinosa.

Spirulina
Es

una cianobacteria
filamentosa, pluricelular.
Se les encuentra en aguas
dulces y salobres.
Los filamentos pueden
deslizarse.
La espirulina ha servido
como recurso alimenticio a lo
largo de la historia del
hombre, existen indicios de
que en la cultura azteca ya se
consuma
A partir del siglo XX se
empieza a difundir su
consumo.

Aphanizomenon
Aphanizomenon es
heterocista.
Especies Aphanizomenon
pueden producir toxinas
como; cilindrospermopsina,
anatoxina y saxitoxina.
(EPA, 2015)

Cylindrospermopsis
Pueden producir acinetos,
con variacin en la
morfologa
Algunas cepas son capaces
de producir toxinas como:
cilindrospermopsina,
anatoxina-a y saxitoxina
C. raciborskii puede
producir
naturalmente hidroxitolueno
butilado. (Babu y Wu, 2008)

4.4. FACTORES QUE FAVORECEN SU DESARROLLO


Las floraciones, son eventos de multiplicacin descontrolada de cianobacterias
en sistemas acuticos, tambin conocidas como blooms.
Los principales factores son:
Temperatura.-(20-25)C
PH .-(6-9)PH
Estancamiento del agua. El alto tiempo de permanencia del agua, favorece el
dominio de las cianobacterias en la comunidad fitoplanctnica.
Intensidad de luz alta
Fosforo 0.01mg/Lt
Nitrgeno inorgnico soluble: nitritos (0.1 mg/L), nitratos (0.1 mg/L)
La aridez debido a suelos sin vegetacin, que provocan turbidez. Esto interfiere
con la actividad fotosinttica de algas que mueren y sedimentan, dejando un
nicho que es colonizado por las cianobacterias. (De Leon, Uruguay)

Los bloom, ocurren


naturalmente, pero son
mas frecuentes en aguas
que han eutrofizacin por
nutrientes, por fuentes
puntuales, como las
descargas cloacales
municipales, o de fuentes
no puntuales como la
agricultura.
Se han encontrado
floraciones de 120 mg/L y
mas aun (Bonilla et al,
2013)
Los bloom son
perjudiciales y pueden ser
toxicos.

4.5. TCNICAS PARA DETERMINAR CIANOBACTERIAS.


Los SST son indicadores indirectos de la presencia de cianobacterias.
Presenta alta concentracin de clorofila- (32,2 g/L)
El olor puede indicar la presencia de metabolitos de las cianobacterias.
Se puede identificar a las especies por microscopia, apoyados con la
valoracin de la toxicidad mediante bioensayos.
Cuantificacin de la biomasa: Se utilizan tcnicas convencionales como
clorofila-a, recuento microscpico, peso seco, Carbono orgnico particulado,
o ATP/Carbono orgnico.
Bioensayos en organismos acuticos: Se utilizan los gneros Daphnia o
Artemia, dependiendo del medio de origen de la muestra. Tambin se han
desarrollado bioensayos en peces y ranas. (Roset et al, 2001)

Normatividad y criterios de calidad de agua para cianobacterias.

4.6. PROBLEMAS EN PLANTAS POTABILIZADORAS


Cuando se produce un bloom de cianobacterias, hay efectos adversos
especficos de cada cianobacteria, en los procesos de tratamiento, como:
Las cianobacterias mas frecuentes pertenecen a los gneros Anabaena y
Microcystis, que producen varias toxinas (microcistinas, anabasinas, etc.)
potencialmente toxicas.
Anabaena

Alta demanda de coagulante, Incidentes de


olor y sabor

Oscillatoria

Disfuncin en la sedimentacin

Aphanizomenon y
Anabaena

Taponamiento de filtros, ablandamiento de


agua

Todos los tipos de


cianobacterias

Incremento de concentracin de materia


orgnica disuelta y la demanda de cloro

Las cianobacterias mas frecuentes pertenecen a los gneros Anabaena y


Microcystis, que producen varias toxinas (microcistinas, anabasinas, etc.)
potencialmente toxicas.

Problemas en una Planta Potabilizadora


Proceso de potabilizacin.

Las cianotoxinas se encuentran usualmente contenidas dentro de las clulas o unidas a


ellas, y solo un pequeo porcentaje esta disuelto en el agua, a menos que estas se
hayan liberado por el envejecimiento del florecimiento o el tratamiento con alguicidas
haya causado la ruptura celular.

Remocin de sistemas de tratamiento de agua potable.


Procesos fsicos: Algunos tratamientos pueden remover las clulas de
cianobacterias, pero no las cianotoxinas disueltas.
a) coagulacin: Se usa el sulfato de aluminio. Las cianobacterias pueden
coagular, la coagulacin con clulas esfricas es menos eficiente que con
clulas filamentosas.
b) Flotacin con aire disuelto (Fad): es ms eficiente que la sedimentacin,
en aguas con un gran contenido de cianobacterias.
c) filtracin: La filtracin lenta remueve mejor las cianobacterias que la filtracin
rpida.
d) proceso de membranas: eficientes para remover cianobacterias usando
micro filtracin y ultrafiltracin.

Procesos qumicos
La oxidacin: Pude causar la lisis celular en procesos de:
Pre-cloracion: Consiste en aadir cloro a la entrada de la planta de tratamiento.
Hay liberacin de txicos, compuestos que causan olor y sabor.
Pre-ozonacion: En un tren de tratamiento se puede remover 96,9 %.

4.6.- PRINCIPALES METABOLITOS


SECUNDARIOS

Son de importancia industrial, los siguientes:


Cianotoxinas.
Antibiticos.
Lpidos.
Antivirales
Antitumorales
Usos en alimentacin.

4.6.1.- Cianotoxinas
La produccin de cianotoxinas se hace importante slo cuando hay una
explosin demogrfica (floracin).
Al menos unas 80 especies de cianobacterias, son productoras de toxinas, pero,
los gneros ms frecuentemente implicados en floraciones son Microcystis,
Anabaena y Aphanizomenon.
Una misma especie puede tener cepas productoras y no productoras de toxinas.
Los factores ambientales pueden inducir cambios en la toxicidad o en la
concentracin de toxinas (por unidad de biomasa), pero usualmente el factor no
es mayor a 3 o 4.
En la mayora de los estudios, el contenido de toxina fue mayor a temperaturas
entre 18 C y 25 C, y disminuye con temperaturas mas bajas (10 C) o muy
altas (30 C). (Garcia Susana)
La liberacin de las toxinas al agua circundante parece ocurrir mas durante la
senescencia, muerte y lisis de las clulas, y no por excrecin continua. (Garcia,
Susana)
Una vez que se registra la intoxicacin por cianotoxinas no hay antdoto para
neutralizar sus efectos. Por tal motivo, hay que evitar el contacto de la poblacin
con las toxinas. (De Leon )

4.6.1.1. Clasificacin:
Segn el efecto txico: Hepatotoxinas, neurotoxinas, citotoxinas,
dermatotoxinas y toxinas irritantes (lipopolisacridos).
Segn la estructura molecular: Pptidos cclicos, alcaloides y
lipopolisacridos (LPS). (Lanzerot, 2007)

Hay otros grupo de metabolitos considerados indeseables en la industria del


agua de bebida, que son compuestos con olor a tierra o barro, especialmente
geosmina GEO y 2-methyl isoborneol (2-MIB), para los cuales el umbral de
deteccin de olor es menor a 10 ng/l.
No son cianotoxinas, pero los problemas de sabor y olor pueden ser utilizados
como una seal de peligro para desencadenar investigaciones ulteriores que
develen si la ocurrencia de cianobacterias podra resultar en la presencia de
cianotoxinas.
Es importante resaltar que no se aplica la regla inversa: la falta de olor y sabor
no significa que las cianobacterias estn ausentes.

a.- Segn la estructura molecular.


a.1.- Alcaloides.
En general, son sustancias txicas
formadas por compuestos heterocclicos
nitrogenados, de bajo peso molecular.
Las cianobacterias pueden producir
alcaloides neurotxicos, citotxicos y
dermatotxicos (Lanzarot, 2007)

Alcaloides neurotxicos, como:


la Anatoxinas y Saxitoxinas.

Alcaloides citotxicos.
La cylindrospermopsina es un alcaloide cclico de guanidina, que es producida
por Cylindrospermopsis raciborskii, Umezakia natans, Aphanizomenon
ovalisporum, Rhaphidiopsis curvata, y Anabaena bergii.
Produce dao heptico.
Se sospecha que est relacionada con lesiones mutagnicas y actividad
carcinogentica.

Alcaloides dermatotxicos.
Como las lyngbyatoxinas y aplysiatoxinas, que causan severas dermatitis de
contacto con la piel.
Las lyngbyatoxinas tambin son promotores de tumores y activadores de la
proteinquinasa C y, tras su ingestin, provocan severas inflamaciones
orales y gastrointestinales que dan lugar a diarreas y fiebre.

Las cianobacterias bnticas Lyngbya, Oscillatoria y Schizothrix pueden


producir toxinas dermatotoxicas

a.1.- Pptidos cclicos


Como las microcistinas y nodularinas, molculas de gran peso molecular, con siete y
cinco aminocidos, respectivamente, y los dos aminocidos terminales, forman un
compuesto cclico.

Las microcistinas son compuestos txicos para: plantas, bacterias, y animales.


Estn formadas por siete aminocidos con una cadena lateral de aminocidos especfica,
dos de ellos son proteingenos mientras que los otros cinco; como la ADDA (3-amino-9metoxi-10-fenil-2,6,8-trimetil-deca-4,6-cido dienoico), no lo son.
Los mamferos, y plantas se ven afectados porque el aminocido ADDA se une
covalentemente al residuo de cistena de las enzimas fosfatasa en su centro cataltico,
inhibindola.

Las microcistinas se han


identificado en cianobacterias de
los gneros Anabaena, Microcystis,
Oscillatoria (Planktothrix), Nostoc,
Anabaenopsis y Hapalosiphon
(Lanzerot, 2007)

Nodularinas
Las nodularinas son toxinas con idntica accin y estructura muy similar.
En las nodularinas han sido solamente localizadas en la Nodularia
Spumigena (Lanzerot, 2007)

a.3.- Lipopolisacridos (LPS)


Se encuentran generalmente en el
exterior de las membranas celulares
de cianobacterias, donde forman
complejos con protenas y fosfolpidos.
Pueden provocar irritaciones y
respuestas alrgicas en los tejidos
animales.
Los LPS de las cianobacterias son
menos potentes que los de otras
bacterias Gram negativas patgenas
como la salmonella.
La estructura de estos
lipopolisacridos consiste en una
hexosa, y un lpido, normalmente un
cido graso. El cido graso de la
molcula de LPS suele ser el
responsable de la irritacin de piel y de
la respuesta alrgica en mamferos.

b.- Clasificacin por dao txico.


Neurotoxinas: Como la anatoxina, son toxinas alcaloides, usualmente de peso
molecular bajo (<1000 g/mol).
Hepatotoxinas: como microcistina. Su peso molecular oscila entre 800-1,100
g/mol, son solubles en agua. Inhiben las enzimas fosfatasas que causan cambios
en la integridad membranal y en el transporte, adems, son promotores de tumores
y causan daos mayores en el hgado.
Citotoxinas: Como la cilindrospermopsina; un alcaloide con PM= 415 g/mol.
Inhiben la sntesis de protenas y causan dao necrtico en los mamferos (hgado,
pulmones, intestinos y riones).
Irritantes y toxinas gastrointestinales: Son lipopolisacridos, irritantes
gastrointestinales, y pueden producir vmito y gastroenteritis.
Dermatotoxinas: Son alcaloides de PM, (400 a 670 g/mol). Pueden causar
dermatitis por contacto con cianobacterias como: Anabaena, Lyngbya, Planktothrix
agardhii, etc. (Lanzarot, 2007)

4.6.1.2.- Normatividad de agua para cianotoxinas


Las dos cianotoxinas ms
reguladas son: la
microcistina en 5 pases y
por dos organizaciones
(OMS) y la
cilindrospermopsina, en 2
pases y una organizacin.
A partir de la informacin
disponible, la Organizacin
Mundial de la Salud calcul
un Valor Gua Provisional
para microcistina-LR en
agua de bebida de 1 g/L.
(Garca)
Japn es el nico pas que
establece concentraciones
mximas equivalentes a 10
ng/L, para 2-MIB y GEO.

Problemas asociados a la presencia de cianotoxinas

La
cianobacteria
Microcystis
y
su
cianotoxina
(microcistina),
se
sealan con mayor
frecuencia, debido a
que junto con la
nodularina son las
ms estables.

4.6.1.3.- Tcnicas para determinar cianotoxinas


a)Cromatograficas: Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (HPLC)
b)Biolgicas: bioensayos bacteriales
c)Bioqumicas (enzimaticos): la inhibicin de la enzima fosfatasa (PPhase) y
la inhibicin de la enzima acetilcolinesterasa (AChE).
d)Inmunolgicas: el ms comn es el de la enzima ligada a un ensayo
inmunosorbente (ELISA, acrnimo del ingls Enzyme-Linked ImmunoSorbent
Assay: ensayo por inmunoadsorcin ligado a enzimas) es una tcnica
de inmunoensayo en la cual un antgeno inmovilizado se detecta mediante
un anticuerpo enlazado a una enzima capaz de generar un producto
detectable, como cambio de color o algn otro tipo (Roset et al, 2001)

4.6.1.4.- Mtodos para la remocin de metabolitos


a)Coagulacin: es un proceso poco eficiente para la eliminacin de cianotoxinas en
donde se aplica sulfato de aluminio, con eficiencias de eliminacin del 20 % en
neurotoxinas y de 0 a 39% para la microcistina.
b)Filtracin: Aplicando un tren de tratamiento de coagulacin- sedimentacin filtracin,
se logra remocin del 50-60% de microcistina.
En filtracin lenta, se logra remocin del 80% de microcistina

c). Procesos de membranas: el ms efectivo, es la osmosis inversa, con


eficiencia del 96.5% para microcistina y nodularina
d). Adsorcin: Con carbn activado en polvo de madera se logra una
eficiencia en la remocin 82-85% de microcistina y nodularina.
En saxitoxinas se logra remocin de hasta el 98%.

Procesos qumicos
d) Oxidacin. El cloro puede ser eficiente para remover microcistina y
nodularina, con cloro residual libre de 0.5 mg/L, despus de 30 minutos de
tiempo de contacto y un pH mayor a ocho.
La oxidacin con cloro es muy rpida y remueve ms del 99% de
cilindrospermopsina, para pH de 6-9.
e) Procesos avanzados: se utilizan procesos combinados con el fin de
aumentar la eficiencia de los procesos solitarios:
Perxido de hidrogeno con ozono (0.1-0.2g/L) logrando una remocin del
100%
Perxido de hidrogeno con radiacin UV logrando una remocin de 90%
Fenton (Fe2+ + H2O2) a altas concentracin de nitrgeno y tiempos de trabajo
elevados se logra un 60% de remocin de microcistina
Fotofenton (Fe2+ + H2O2 + UV) este proceso es mas eficiente logrando una
remocin de 84% en 25 minutos y del 100 % en 30 minutos (Mercado 2007)

4.6.2.- Antibiticos
Las cianobacterias pueden producir metabolitos secundarios que actan
como antibiticos.
Las propiedades antibiticas de los metabolitos secundarios de las
cianobacterias, no estn completamente entendidas, sin embargo, se ha
observado que tienen actividad antimicrobiana que involucra diferentes
microorganismos tanto procariotas como eucariotas.
Las bacterias Gram (+), Gram (-), protozoarios, microalgas y otras
cianobacterias son sensibles a extractos obtenidos de cianobacterias. (Torres
Ario, 2003)

4.6.3.- Produccin de biodiesel


El bio-diesel es un combustible que consiste en un ester monoalqulico, obtenido
de aceites orgnicos, por transesterificacin.
La reaccin qumica es:
CH2OCOR (Triglicrido) + 3 CH3OH (Metanol) --- C3H8O3 (Glicerina) + 3
COOCH3R (Metil Ester-Biodiesel)
Los principales sustratos empleados para producir biodiesel son aceites
vegetales extrados de plantas oleaginosas, cuyo costo representa cerca del 70%
del costo total de produccin.
Una alternativa de cultivo es usar aguas residuales, donde pueden desarrollarse
aprovechando los nutrientes del efluente. Adicionalmente contribuyen en el
proceso de depuracin.
La cianobacteria, Arthrospira maxima, es eficiente en la remocin de nutrientes y
tiene capacidad para acumular lpidos, hasta un 13.8 % de su peso. (Sacristan de
Alva et al. 2013)
Las cianobacterias pueden aplicarse en zonas no aptas para los cultivos
tradicionales y alcanzan tasas de crecimiento altas (0.5 a 1.2 d-1).

4.6.4.- Usos en alimentacin.

Hay gneros como Spirulina, que se pueden consumir debido a su alto contenido de
protenas y caroteno, que es utilizado como antioxidante.
Cultivo de spirulina.
Existen varias formas de cultivo, desde los ms simples (en estanques, o sistemas
Raceway) hasta los ms avanzados (foto biorreactores).
Los sistemas raceway, es un circuito de canales con profundidad de 15 a 50 cm., por
donde circula el cultivo y mezclado con una rueda de paletas que homogeniza los
nutrientes y los microorganismos. El flujo es guiado alrededor del sistema por deflectores
(baffles) dispuestos en los canales.
Se construyen de hormign o tierra y recubiertos con
plstico blanco que mejora la captacin luminosa.
El sistema de rueda opera 24h, para evitar la
sedimentacin del cultivo. La productividad se ve
afectada por la contaminacin de otras especies de
algas no deseadas o de microorganismos
contaminantes.
En las instalaciones ms complejas, los cultivos estn
cubiertos por materiales transparentes.

Se suministra agua pura y nutrientes, como:


minerales, nitrgeno, potasio, hierro,
magnesio, calcio, cinc y manganeso,
evitando contaminacin por sustancias
extraas.
Se suministra CO2 de manera artificial:
Haciendo burbujear el CO2, o incorporando
bicarbonato de sodio.
La spirulina (250 micras), se separa por
filtracion o por centrifugado.
Las clulas an contienen un 80 % de agua
en su interior.
El mtodo ms utilizado para deshidratar es
el secado por pulverizacin: el lodo se
pulveriza en pequesimas gotas y mientras
cae se somete a una corriente de aire a 60
C para evaporar el agua.
El producto seco, es procesado como
polvo, granulado, cpsulas, comprimidos.

V.- ARQUEAS
Las Archaea o arqueas, (del griego arkhaa: antiguo) son procariotas al igual
que las bacterias (sin ncleo, ni orgnulos membranosos internos).
Por su forma, en el pasado fueron clasificadas como bacterias y debido a que
creia que era el linaje mas antiguo de la tienrra, reciban el nombre
de arqueobacterias, pero esta clasificacin ya no se utiliza. (Krieg, 2005)
Las arqueas poseen genes y varias rutas metablicas que son ms cercanas
a las de los eucariotas, en especial en las enzimas implicadas en la
transcripcin y la traduccin.

5.1. CLASIFICACIN ACTUAL


Se han propuesto 6 filum: (Takuro, 2011)
Crenarchaeota o Eocyta: Generalmente son hipertermfilos, acidfilos,
reductores y/u oxidantes del azufre.
Euryarchaeota: Es el grupo ms variado, cuatro clases son metangenas, tres
son termoacidfilas y dos hiperhalfilas. Abundan en ambientes marinos.
Korarchaeota: Son escasas y se encuentran en fuentes termales.
Nanoarchaeota: Hipertermfilos o acidfilos muy pequeos ( unos 300 nm).
Thaumarchaeota: Son quimiolitoauttrofos nitrificantes de ambientes marinos y
terrestres.
Aigarchaeota: De caractersticas intermedias entre mesfilos e hipertermfilos.
Algunos opinan que la relacin entre los eucariotas y Crenarchaeota estn ms
cerca que las relaciones entre los filum arqueanos; Euryarchaeota y
Crenarchaeota, y por otro lado, existe la presencia de genes de tipo arquea en
ciertas bacterias, como Thermotoga maritima. (Nelson et al, 1999)

Relaciones con los eucariotas


La relacin evolutiva entre las arqueas y eucariotas no estn claras.
La hiptesis principal es que el antepasado de los eucariontes divergi muy
temprano de las Arquea, y que los eucariotas se originaron por la fusin de
una arquea y eubacterias; esto explicara varias similitudes genticas, pero le
resulta difcil explicar la estructura celular. (Lake, 1998)

5.2. DIFERENCIAS CON BACTERIAS


Las arqueas tienen medidas de 0,1 m a ms de 15 m y pueden tener
diversas formas, como: esferas, barras, espirales y placas.
Algunas especies forman agregados celulares filamentosos de hasta 200 m
de longitud.
En su estructura general, las arqueas se parecen a las bacterias Gram (+),
pues la mayora tienen solo una membrana plasmtica y pared celular.

PRINCIPALES DIFERENCIAS.
- composicin de la pared celular
- composicin de la membrana
- metabolismo

5.2.1. La pared celular


En la mayora de arqueas, la
pared celular no contiene
peptidoglucano, sino
pseudopeptidoglicano.

Molcula de
pseudopeptidoglucano (Los
parntesis indican que puede o
no estar presente).

5.2.2. Diferencias en la membrana


Las membranas arqueanas difieren mucho de las que tienen bacterias y eukariotas.
Estos organismos, tienen membranas celulares compuestas de fosfolpidos, que tienen
una parte polar que se une al agua, y una parte no polar hidrfoba. Ambas partes unidas
por glicerol.
Los fosfolpidos de membranas arqueanas son nicos en cuatro cosas:
1. - Los lpidos arqueanos estn unidos con glicerol mediante enlaces ter, y no ster
como en bacterias. Estos enlaces tienen mas resistencia qumica que los enlaces ster,
lo que podra contribuir a la capacidad de algunas arqueas de sobrevivir a temperaturas
extremas o en ambientes muy cidos o alcalinos.

Ester bacteria

ter archea

2.- En los lpidos arqueanos, el grupo glicerol puede existir en dos formas
enantiomeras, L y D. Esto sugiere que las arqueas utilizan enzimas diferentes
a las de bacterias y eucariotas, para sintetizar sus fosfolpidos.

3.- Los lpidos arqueanos poseen largas cadenas isoprenoides, con mltiples
ramas laterales y, a veces, incluso anillos de ciclopropano o ciclohexano, en
contraste con los cidos grasos de cadenas rectas sin ramificaciones ni anillos,
de los dems organismos. Estas cadenas ramificadas podran ayudar a evitar
que las membranas arqueobacterianas tengan fugas a altas temperaturas.

4.- En algunas arqueas, la bicapa lipdica es sustituida por una sola


monocapa, en la que se fusionan las colas de dos molculas fosfolipdicas
independientes en una nica molcula con dos cabezas polares
Esta fusin podra hacer su membrana ms rgida y ms apta para resistir
ambientes severos.

5.2.3.- Metabolismo
Las arqueas poseen gran variedad de rutas metablicas, y utilizan diversas
fuentes de energa.
Hay arqueas organotrofas, otras son litotrofas y obtienen la energa del azufre, o
el amonaco, otras son fottrofas, y otras autotrofas.
Las arqueas organotrofas utilizan la ruta de Entner-Doudoroff, y un ciclo de Krebs
completo o parcial.

5.2.4.- Auttrofas

Arqueas que utilizan el CO2 como fuente de carbono, fijan el carbono, a travs de
una forma modificada del ciclo de Calvin, por la ruta metablica conocida como
ciclo del 3-hidroxipropionato/4-hidroxibutirato.
Las Crenarchaeota tambin utilizan el ciclo de Krebs inverso y las
Euryarchaeota tambin utilizan la ruta reductora acetil-CoA. En estos organismos,
la fijacin del carbono se logra gracias a fuentes inorgnicas de energa, y no por
la luz solar.
No se conocen arqueas que puedan llevar a cabo la fotosntesis

Ciclo del 3-hidroxipropionato/4-hidroxibutirato

Ciclo de Krebs inverso

5.2.5.- Fototrofas
Las halobacterias, son arqueas
fototrofas que
tienen bacteriorodopsina, en vez de
clorofila para absorber energa de la
luz.
Las reacciones fotosintticas con la
bacteriorodopsina, generan
un gradiente de protones a lo largo de
la membrana celular, que es
posteriormente convertida en ATP por
la ATP sintasa.
Las halobacterias son incapaces
de fijar carbono a partir del dixido de
carbono.

5.2.6.- Metangenas:
Como Methanococcus, que intervienen en la
fase final de la descomposicin anaerobia de la
materia orgnica, y generan metano. (ONU,
2001)
La sntesis de metano sucede a partir de unos
10 sustratos, como: CO2, CO, formiatos,
metanos, acetatos, etc.
La formacin de metano a partir de H2+ CO2 ,
es una respiracin anaerbica, donde el CO2,
es el aceptor de electrones.
4H2 + CO2 CH4 + 2H2O
Este proceso usa coenzimas nicos, como la
coenzima M o el metanofurano.
Sucede en ausencia del sistema convencional
de transporte de electrones con citocromos y
quinonas.

5.3.- HBITATS
Las arqueas existen en una gran variedad de hbitats, y podran representar
hasta un 20% del total de biomasa terrestre.
Gran cantidad de arqueas son extremfilas, algunas arqueas sobreviven a
altas temperaturas, a menudo por encima de 100 C, como en los giseres.
Otros viven en hbitats muy fros, y otros en aguas altamente salinas, cidas
o alcalinas.
Tambin, hay arqueas mesfilas que viven en las alcantarillas, los ocanos y
el suelo.
No se conocen arqueas patgenas o parsitas, pero suelen ser mutualistas
o comensales. (Castillo-Carvajal y Barragan- Huerta, 2011)

5.3.1. Extremfilas
Las arqueas extremfilas, son miembros de cuatro grupos fisiolgicos
principales; halfilos, termfilos, alcalfilos y acidfilos.
Estos grupos no son excluyentes, ya que algunas arqueas pertenecen a
varios de estos grupos.

5.3.1.1.- Halfitas extremas.


Se caracterizan por vivir en ambientes de elevada salinidad, como: salinas o lagos
salados. Son Gram negativas, poseen pared celular compuesta de polisacridos a base de
glucosa, cido glucurnico, galactosamina, acetato y abundantes residuos de sulfato. Son
quimioorgantrofas. Ejemplo Halobacterium salinarum, y Halococcus morhuae.
Los halfilos enfrentan el estrs osmtico manteniendo altas concentraciones
intracelulares de sal y sintetizando solutos compatibles (no interfieren con el metabolismo
celular) que balancean su presin osmtica. (Gonzlez-Hernndez y Pea, 2002)
Halobacterium salinarum, concentra cloruro de potasio en su interior para evitar la
deshidratacin. (Ramirez et al, 2006)

Aprovechamiento industrial
Los compuestos osmoprotectores son de inters a nivel industrial, por su poder
estabilizador y protector de enzimas, cidos nucleicos, membranas e incluso
clulas enteras, contra la congelacin, la desecacin, la desnaturalizacin por
calor y la alta salinidad.
Produccin de Enzimas
Hay inters en la aplicacin de las enzimas de halfitos.
Las bacterias halfilas moderadas crecen ptimamente en un rango de
salinidad de 0.5 a 2.5 M; y producen enzimas hidrolticas extracelulares como:
amilasas, proteasas, lipasas, nucleasas y estearasas. Estas enzimas son
aprovechables, en la formulacin de detergentes, elaboracin de productos
dietticos, procesamiento de cuero, papel y alimentos crnicos, biodegradacin
de residuos txicos, etc. (Snchez-Porro et al., 2003).
Las hidrolasas de halfilos se usan en la industria farmacutica para la
elaboracin de; antibiticos y hormonas. Tambin en la produccin de pesticidas,
y en el tratamiento de derrames de petrleo. Hay isomerasas termoestables que
permiten manipular mas eficientemente el DNA. (Castillo Carvajal y BarraganHuerta 2011)

Produccin de Biopolmeros.
Los halfilos, pueden producir diversos biopolmeros como: exopolisacridos,
biosurfactantes, y bioplsticos.
Los exopolisacridos sulfatados, pueden modular la proliferacin de algunas
clulas tumorales y bloquea la entrada de virus en clulas hospederas.
Otros exopolisacridos de bacterias halfilas, tienen capacidad de captar
metales pesados, y actividad viscozante i/o emulgente. Otros pueden ser fuentes
de oligosacridos ricos en fucosa (desoxialdohexosa), presentando potenciales
aplicaciones en cosmtica y medicina (Mata-Gmez, 2006).
El exopolmero poli(-D-cido glutmico) (PGA) puede ser usado como un
espesante, humectante, material de liberacin sostenida, o portador de
medicamentos, en la industria farmacutica o alimentaria (Castillo Carvajal y
Barragan-Huerta 2011).
Los biosurfactantes mejoran la remediacin de suelo y agua contaminados con
hidrocarburos, incrementando la solubilidad y promoviendo la degradacin.
Las bacterias halfilas tambin producen bioplsticos, los polihidroxialcanoatos
(PHA), que se acumulan intracelularmente.

En Biotecnologa Alimentaria.
Los microorganismos halfilos se usan, en la produccin de suplementos
alimenticios y colorantes para alimentos; en la produccin de cidos grasos
poliinsaturados de cadena larga.
Sus -carotenos son usados en la industria de alimentos como colorantes
naturales, como precursores de la vitamina A, como aditivos en cosmticos, y
preparaciones mulitivitamnicas. (Castillo Carvajal y Barragan-Huerta 2011).
Uso en biorremediacion.
Las condiciones salinas en los suelos, interfiere en el crecimiento de las plantas.
La recuperacin de los suelos sdicos se ha hecho principalmente cambiando el
sodio por calcio, pero esta opcin es costosa.
Algunas halfilas son capaces de capturar sodio y pueden ser utilizadas en la
bioremediacin de suelos salinos (Snchez-Leal y Arguello- Arias, 2006).
Se han aislado bacterias halfilas capaces de degradar compuestos orgnicos
halogenados como tricloroetileno, lindano, DDT y 2,4-D (cido 2,4diclorofenoxiactico: es un herbicida sistmico hormonal auxnico, usado en el
control de malezas de hoja ancha) (Snchez-Leal y Arguello- Arias, (2006)

5.3.1.2.- Termfilas.
Son microorganismos que crecen a temperaturas mayores a 65C, y son
hipertermfilos si crecen entre 80 113C, siempre que exista agua en estado
lquido, como en las profundidades ocenicas. (Snchez Fernndez)
Su supervivencia, requiere la produccin de enzimas termoestables. Sus
enzimas amilasas, se usan en industria alimentaria, y de detergentes, pero la
mas importante son las enzimas ADN polimerasas, para la aplicacin de la
tcnica de PCR. (Ramrez et al 2006)
La mayor parte de los termfilos de esta divisin son sulfuro dependientes y se
presentan como sulfuro reductores anaerbicos y sulfuro oxidantes aerobios
(menos termfilos).
Sulfolobus acidocaldarius, crece a partir de 85C en fuentes termales cidas o
suelos superficiales (pH de 1 a 5).
Pyrolobus fumarii, puede crecer hasta los 113C. (Ramirez et al, 2006)

5.3.1.3. Alcalofilos
Son organismos que viven en ambientes con pH mayor a 9. 9. Se encuentran en lagos
sdicos y suelos muy carbonatados, son tambin halfilos.
Los alcalfilos necesitan aislar el interior de la clula del medio alcalino exterior ya que
algunas molculas, como ARN, se rompen a pH superior a 8, y mantienen la acidificacin
citoslica por medios pasivos y activos.
Acidificacin pasiva. las paredes celulares contienen un polmero con residuos cidos,
como; galacturnico, glucnico, glutmico, asprtico, y fosfrico, que forman una matriz
acida que protege la membrana impidiendo la entrada de iones hidrxido, y permitiendo
la absorcin de iones de sodio e H +. Sin embargo, este mecanismo no es suficiente para
mantener el pH interno, 2-2.3 unidades por debajo de la ms alta externa.
El mtodo activo sucede a travs de antiporters Na+/H+. En este modelo, los iones
H+ se pasan primero a travs de una cadena respiratoria de transporte de
electrones. Este pasaje de protones establece un gradiente de protones que impulsa
antiporters, que intercambia el Na+ intracelular con H+, lo que conduce a una
acumulacin de protones internos netos. Esta acumulacin de protones baja el pH
citoslico.
Asi, el gradiente de Na+, suministra la energa, y se genera una fuerza motriz de
protones responsable de la sntesis de ATP.
En la industria de detergentes se emplean enzimas alcalfilas, que son producidas a
partir de cepas de Bacillus alcalfilos. (Ramirez et al, 2006)

5.3.1.4. Acidfilos
Se consideran acidfilos aquellos organismos que viven en medios con pH
menor de 5.9
Algunas arqueas viven en condiciones muy cidas o alcalinas, como
Picrophilus torridus, que crece a un pH 0, lo que equivale a prosperar en cido
sulfrico con una concentracin de 1,2 molar.
Estos ambientes cidos surgen naturalmente de actividades geoqumicas, como
la produccin de gases sulfurosos de emanaciones volcnicas.
Para soportar el pH bajo, los acidfilos emplean mecanismos como: una
superficie de membrana cargada positivamente, una alta capacidad reguladora
interna, y sistemas nicos del transporte. (Ramrez et al, 2006)

Aplicaciones
La acidez y la solubilidad del
metal que producen las
acidfilas como Thiobacillus
sulfolobus, son tiles en
minera, donde ayudan a
solubilizar los minerales
sulfurosos insolubles.
Asi, Sulfolobus oxidan
compuestos de azufre
liberndolo de las rocas, y
produciendo cido
sulfrico como producto
residual.

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