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UNIVERSIDAD TECNOLGICA DEL USUMACINTA

INGENIERI EN PROCESOS BIOTECNOLGICOS

NOMBRE Y NMERO DE LA UNIDAD


UNIDAD II ESPECTROFOTOMETRA
MATERIA
ANLISIS INSTRUMENTAL
CATEDRATICO
ING. GERARDO CHE PAREDES
RESULTADO DE APRENDIZAJE
DETERMINACIN DE BORO EN MUESTRAS DE SUELO
PRESENTA
CARLOS MANUEL DE JESS CUREO MENDOZA
JOS FRANCISCO DE LA CRUZ ZAPATA
SOFA AMISADA BENTEZ UCO
GUADALUPE ZETINA QUE
Educacin Tecnolgica con valores:
Una solucin pertinente.

Emiliano Zapata, Tabasco; a 04 de Noviembre del 2016

INTRODUCCIN

MATERIALES EQUIPO Y REACTIVOS

PROCEDIMIENTO

Curva de calibracin
Preparacin de reactivos
1. Solucin amortiguadora. Disolver 250g de acetato de amonio y 15 g de EDTA
disdica en 400 ml de agua destilada. Aadir lentamente 125 ml de cido actico
glacial.
2. Azometina-H. disolver 0.45 g de Azometina-H y 1 g de cido ascrbico en un
matraz aforado de 100 ml, aforar al volumen. Esta solucin guardarla en el
refrigerador y puede durar hasta 15 das sin alterarse.
3. Solucin estndar de boro. Disolver 0.114 g de cido brico en agua destilada y
aforar a 1 L.
4. Solucin extractora de cloruro de calcio 1 M. Disolver 110.98 g de cloruro de calcio
anhidro y aforar a un L.
5. Las soluciones mencionadas se preparan a un diferente volumen, como se
muestra en el apartado de clculos.
6. De la solucin estndar de boro a una concentracin de 1000 mg/ L se extraen 10
ml y se aforan a 100 ml con agua destilada (figura 1).
7. Se preparan las diluciones estndar de boro a una concentracin de: 2, 4, 6, 8 y
10 mg/L-1. para esto, se toman 2, 4, 6, 8, y 10 ml respectivamente de la nueva
solucin preparada de estndar que tiene 100 mg/L. Se depositan en matraces
que posteriormente se aforan a 100 ml. Estas diluciones se hacen por duplicado.
8. En los tubos falcon, se depositan 1 ml de cada dilucin preparada, y se aade 2 ml
de la solucin amortiguadora. Y 1 ml de la solucin de azometina h. Asimismo, se

preparan dos blancos para cada curva, con 1 ml de agua destilada y aadir las
soluciones.
9. Agitar los tubos bien tapados y dejar reposar una hora.
10. Realizar la lectura en el espectrofotmetro a 410nm.

Pretratamiento de la muestra
La preparacin de la muestra de suelo incluye el traslado, recepcin, registro,
secado, molienda, tamizado, homogeneizado, y el almacenamiento para su
conservacin.
1. La muestra se extrae del suelo cuidadosamente y una vez obtenida la muestra
en el campo, sta debe ser identificada con los siguientes datos: procedencia,
nombre del interesado, fecha, numero de muestras, profundidad de colecta,
relieve, cultivo, historial de fertilizacin, clave de registro, etc., as como las
determinaciones requeridas, segn el propsito del estudio.
2. Durante el traslado es necesario evitar el efecto de factores como la humedad
exterior, O2, CO2, luz, calor y otros materiales que puedan cambiar la naturaleza
de la muestra.
3. Se debe evitar manejar la muestra con materiales que puedan contaminarla,
como por ejemplo: recipientes que se oxiden, cintas adhesivas, etc.
4. Las muestras de suelo se secan al ambiente, extendiendo la muestra de suelo
sobre una superficie que no contamine.
5. La muestra se extiende a la sombra a una temperatura no mayor a 35C y una
humedad relativa entre 30 y 70%.
6. Para realizar la molienda, se retiran las rocas y el material orgnico visible.
7. El suelo molido se hace pasar por un tamiz con aberturas de dos mm de
dimetro (malla 10) de acero inoxidable.
8. Una vez tamizado el material se separa 1.5 kg de suelo, cantidad suficiente
para realizar las determinaciones qumicas y fsicas, segn sea requerido.
9. Para el homogeneizado se utilizan bolsas de plstico, haciendo girar la muestra
en todas direcciones.

10. Tamizada y debidamente homogeneizada la muestra de suelo se extrae la


submuestra que va a ser utilizada para cada una de las determinaciones
analticas. La submuestra extrada se pesa con balanza analtica.
11. Una vez que las determinaciones analticas han sido realizadas, las muestras
pueden almacenarse para posteriores comprobaciones u otros usos.

Determinacin de boro en la muestra


1. Pesar 15 g de suelo, y agregar esta cantidad en un matraz Erlenmeyer de 125
ml y aadirle 30 ml de la solucin extractora. Se hace por duplicado.
2. Se pone en la parrilla elctrica y se deja hervir durante 5 minutos.
3. Filtrar para obtener un extracto claro (figura 2).
4. Tomar 1 ml del extracto en un tubo falcon. Agregar 2 ml de la solucin
amortiguadora y 1 ml de la solucin de azometina-H.
5. Agitar y dejar reposar aproximadamente una hora.
6. Leer en el espectrofotmetro a 410 nm.

RESULTADOS:
Tabla de referencia A
Rango
Muy bajo
Bajo
Medio
Alto
Muy alto

Ppm
Menor de 0.39
0.39 0.79
0.80 1.29
1.30 2.10
Mayor de 2.10

El resultado obtenido en las muestras de suelo analizadas fue de:


Muestra 1:
Muestra 2:
La cantidad de suelo pesado fue de 15
Curva de calibracin
Concentracin
2 mg/L
4 mg/L
6 mg/L
8 mg/L
10 mg/L

Absorbancia
0.1192
0.2694
0.3731
0.4544
0.5241

Mediante estas tablas se graficaron las curvas de calibracin y se obtuvo el


coeficiente de correlacin respectivo.
Lecturas con la tcnica de espectrofotometra de Absorcin atmica

ID de la muestra

Conc. En mg/dl

Conc. Mg/kg

Referencia
norma

MC01
MC02
MC03
MC04
MC05

77.49
18.025
39.55
43.115
45.08

12.01

Muy alto

CLCULOS REALIZADOS
-1

Mg Kg B =

mg L1 de la soluci n X factor de diluci n


peso de la muestra (g)

Donde:
Factor de dilucin = 4 x 30
4 = Relacin de volumen donde se desarroll color
30 = ml de solucin extractora.
Se suman los dos resultados obtenidos en el equipo al leer las muestras de suelo:
-0.191 + -0.410 y se calcula el promedio: -0.3005
.
Para el valor del denominador en la frmula, corresponde al promedio del peso de
las muestras: 15.004gr + 15.00 gr = 30.004 gr = 15.002 gr
2
-1

Mg Kg B =

45.08 mg L1 X 4
15.0021( g)

= 12.019

El suelo analizado entonces, segn la tabla de referencia A, tiene un rango muy


bajo de concentracin de boro.
Preparacin de soluciones:
Solucin amortiguadora:
Acetato de Amonio
250 gr 400 ml
X
250 ml
X= 156.25 gramos
EDTA
15 gr. 400 ml
X
250 ml
X= 9.735 gr
cido actico glacial
125 gr 400 ml
X
250ml
X= 78.125 gr
Mediante esta frmula, es posible conocer el volumen exacto para preparar las
diluciones que fueron requeridas en la prctica de laboratorio:
C1V1= C2V2

1)

V 1=

C 2V 2
=
C1

mg
mg
)(100
)
L
L
=10 mL de estndar . A
1000 mg/mL

(100

partir

de

solucin una vez aforada, se prepararon las diluciones necesarias.

2)

V 1=

C 2V 2
=
C1
C 2V 2
=
C1

3)

V 1=

4)

C 2V 2
V 1=
=
C1

(2

(4

(6

mg
mg
)(100
)
L
L
=2 mL
100 mg/mL
mg
mg
)(100
)
L
L
=4 mL
100 mg/mL
mg
mg
)(100
)
L
L
=6 mL
100 mg/mL

sta

C 2V 2
=
C1

5)

V 1=

6)

C 2V 2
V 1=
=
C1

(8

mg
mg
)(100
)
L
L
=8 mL
100 mg/mL
mg
mg
)(100
)
L
L
=10 mL
100 mg/mL

(10

CONCLUSIN:
El boro es uno de los muchos elementos qumicos presentes en el suelo o tierra.
ste tiene un papel fundamental para el desarrollo de la planta, al intervenir en la
regulacin hormonal de sta y la conformacin de sus clulas, entre otras
funciones esenciales. Por lo tanto, si este micronutriente se encuentra a niveles
bajos, el crecimiento de los cultivos es limitado, mientras que las altas
concentraciones resultan txicas. Al cuantificar los niveles de boro en muestras de
suelo, es posible saber si la muestra en cuestin es apta para ser utilizada como
medio de plantacin o si es necesario utilizar abonos y fertilizantes que aporte este
micronutriente.

Los resultados obtenidos de las muestras de suelo, indicaron que la muestra tena
niveles de boro por debajo del lmite de deteccin del mtodo analtico, puesto que
la concentracin mnima que se tom como referencia al hacer la curva de
calibracin fue de 2 mg /L, por lo que se obtuvieron nmeros negativos. En este
caso, se reporta que el analito es no detectado.
En cuanto a la curva de calibracin realizada, se toman en cuenta que las
diluciones deben ser lo ms exacta posibles para minimizar el error que est
presente al intervenir el factor humano que realiza este procedimiento.

ANEXOS

Fig. 1. Extraccin de un volumen de 10 ml de estndar


de boro.

Fig. 2 Las muestras dee suelo se mezclan con solucin extractora, se dejan hervir
y se filtran.
BIBLIOGRAFA:
Anlisis Tcnicos, S.A. de C.V. Laboratorio Agrolab. GUIA DE REFERENCIA
PARA LA INTERPRETACION ANALISIS DE SUELOS AGROLA pg. 8 pp:15
Obtenido
de:
http://www.agrolab.com.mx/sitev002/sitev001/assets/interpretacion_fertsuel.pdf
Smart fertilizer management. (2016) EL ANLISIS QUMICO DEL SUELO EVALUAR LA DISPONIBILIDAD DE NUTRIENTES. Obtenido de:
http://www.smart-fertilizer.com/es/articles/soil-chemical-analysis
Cez Carrasco et al Biotecnia. Revista de Ciencias Biolgicas y de la Salud.
(2015) VALIDACIN DE UN MTODO ANALTICO PARA LA DETERMINACIN
DE FSFORO POR ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA-VISIBLE.
Volumen XVII, Nmero 1 pg. 32-39. Obtenido de:

http://www.biotecnia.uson.mx/revistas/articulos/28-6.pdf

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