UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

FACULTAD DE RECURSOS NATURALES RENOVABLES

DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS DE LOS RECURSOS NATURALES RENOVABLES

ENSAYO DE PUREZA DE SEMILLAS DE ESPECIES FORESTALES

EJECUTOR (ES) : TERRONES MURGA, RENZO

DOCENTE : Ing. M.Sc. CASIANO AGUIRRE ESCALANE

LUGAR DE EJECUCION : Laboratorio de Certificacin de Semillas Forestales

TINGO MARA, OCTUBRE 2016

 I. INTRODUCCIN

Para manipular las semillas forestales en necesario tener algn conocimiento

sobre su biologa. Adems, requiere conocer condiciones en que recolectan,
procesan, almacena y tratan. La Semilla es el nico medio de reproduccin,
conserva periodos largos los recursos genticos (potencialmente tiles y
amenazadas, en peligro de extincin) Proceden de fenotipos superiores o
individuos genticamente mejorados Para: (plantaciones, celulosa, energa,
alimentacin, resinas, etc.) Una semilla es una unidad reproductiva que se
desarrolla partir de un vulo, por lo general una vez fecundado este. Por eso es
muy importante el anlisis de pureza de las semillas de especies forestales que
se lleva a cabo en el laboratorio de certificacin de semillas forestales, debido a
que nos dar un conocimiento sobre cual es estado fsico de las semillas y las
cualidades positivas o negativas para su preservacin y/o germinacin en vivero
para lego llevarlas a campo definitivo. Este conocimiento sobre seleccin,
manejo, pruebas de ensayo y conservacin de las semillas nos aseguran
resultados favorables en los proyectos de reforestacin.

Objetivos especficos

- Determinar la Pureza Varietal

- Calcular el Contenido de Humedad

- Calcular desviacin tpica, coeficiente de variacin, peso de mil semillas,

nmero de semillas por (g y kg) de semilla pura.
 II. REVISIN DE LITERATURA

2.1. SELECCIN, MANEJO, PRUEBAS DEENSAYO YCONSERVACIN

DE LAS SEMILLAS

Manejo de semillas

- Mxima madurez fisiolgica

- Cosecha en momento oportuno (mximo vigor, alto poder germinativo, mxima

acumulacin de materia seca)

- Secar las semillas hasta que tengan 10-15% de humedad; mayor de 14 % de

humedad y mayor de 27C desarrolla hongos y bacterias - Adecuada limpieza -
Optima conservacin4-8 % humedad en las semillas

Anlisis de semillas forestales

Es un proceso por el cual se trata de determinar si la semilla cumple con ciertas

caractersticas como, pureza fsica, porcentaje de germinacin, ausencia de
enfermedades y otros. Estos anlisis de semillas da una idea de lo pura o limpia
que esta la semilla y, por otro lado, indica cul es su porcentaje de germinacin
y su vitalidad (DUARTE, 1981).

Las semillas se prueban por dos razones principales: - Identifica la capacidad de

germinacin de un lote para el usuario (usualmente se expresa como el peso
de1000 semillas por kg, pureza y porcentaje de germinacin). - Evaluar las
posibilidades de almacenamiento y la longevidad.

a) Toma de muestras (muestreo)

Consiste en obtener una muestra respectiva del lote de semillas que se quiere
analizar, para ello el manual de reglas internacionales para el ensayo de semillas
establece: Segn el nmero de sacos o bolsas existentes en el lote, cada
cuantos deben ser muestreados y en cada caso, cuantas muestras y de que
parte del saco o bolsa se debe sacar la muestra, sobre todo considerando que
por ejemplo impurezas ms pesadas tienden a sentarse en el fondo del saco o
bolsa y las ms livianas que las semillas, tienden a irse a la parte superior.

La muestra del ensayo debe ser representativa del lote de semilla que se quiere
analizar.

b) Caractersticas del muestreo de semillas

El muestro de semillas es de fundamental importancia. Se denomina lote a una

cantidad especfica de semillas, identificables fsicamente. Es necesario que la
muestra enviada al laboratorio sea representativa del lote completo. La toma
correcta de muestras se basa en la extraccin de muestras elementales, cuyo
nmero depender del tamao y peso del lote). Las muestras elementales
debern ser mezcladas para conformar una muestra global, de un peso mnimo,
la que deber ser enviada al laboratorio bien identificado. El tamao de la
muestra obtenida deber ser de por lo menos 1.000gr. Para poroto, soja, maz y
otras especies con semillas de tamao similar; de 500gr. en el caso de trigo,
avena y otras semillas de tamao similar y entre 150 a 250gr. para semillas ms
chicas.

Anlisis de pureza

Es una de las pruebas para determinar la calidad de las semillas, se realiza

especficamente para determinar la cantidad de impurezas que puede contener
las semillas (ZAMUDIO, 1997).

Las muestras de semillas de rboles pueden contener impurezas como alas,

semillas de malas hierbas, semillas de otras especies arbreas, estructuras
seminales separadas, partculas de hojas y otros materiales. - El anlisis de
pureza tiene por finalidad determinar la composicin en peso, de la muestra que
es objeto del ensayo (CRDOVA y GAGO, 1995, DUARTE, 1981).
Con la expresin semilla pura se hace referencia a la semilla de la especie de
que se trate, y adems de las semillas maduras y sin daos se incluyen las
semillas de tamao inferior al normal, consumidas, inmaduras y germinadas,
siempre que pueda identificarse claramente como pertenecientes a la especie
de que se trate, y los trozos de semillas rotas cuyo tamao es superior a la mitad
del original (ICA, 1961).

En muchas especies es difcil detectar la contaminacin de las semillas con otra,

es decir, la pureza varietal; por lo que, es necesario sembrar y esperar hasta ver
las caractersticas de las plantas que provengan de esta siembra. Cuando esto
se puede hacer a simple vista de la semilla se acorta el proceso, pero
generalmente esto es difcil. Por ello, normalmente se determina solo la pureza
fsica.

Prueba de viabilidad

Es la determinacin del porcentaje de semillas que es potencialmente apto para

germinar, o sea cuantas semillas estn vivas.

Existen dos tipos de pruebas de viabilidad:

a) Para semillas que tienen problemas de germinacin, y b) que sta es muy

lenta. En este caso se usa la Prueba de Tetrazolio o la Prueba de los Embriones
Aislados. El otro tipo de prueba, es para aquellas semillas que germinan en un
tiempo relativamente corto y en las cuales se puede hacer, en ciertos casos, la
Prueba de germinacin.

- Viabilidad se define como la capacidad que tiene la semilla de manifestarse

como un organismo viviente, en otras palabras que la semilla o embrin este
vivo, as mismo se manifiesta que la viabilidad se puede determinar fsica,
fisiolgicamente o ms confiablemente por medio de la elaboracin directa de
pruebas de germinacin. Existen dos tipos de prueba de viabilidad. Uno es para
semillas que tienen problemas de germinacin o en que este es muy lenta. En
este caso se usa la prueba de tetrazolio o de los embriones aislados. Otro tipo
de prueba, es para aquellos que germinan y consiste en poner las semillas a
germinar (VARGAS 1998). - Los ensayos de germinacin que se efectan en
laboratorio tienen por finalidad principal estimar el nmero mximo de semillas
que pueden germinar en las condiciones ptimas (ZAMUDIO, 1997). - El
resultado del ensayo de germinacin representa el porcentaje de estructuras de
semillas que han producido cuando menos una plntula normal durante el
periodo de ensayo (ICA, 1961).

Prueba de viabilidad

Para estimar el potencial de germinacin de un lote de semilla, el mtodo ms

indicado en la silvicultura prctica suele ser el que consiste en germinar
efectivamente una muestra de ese lote. Pero se tarda varias semanas en
completar estos ensayos. Los ensayos rpidos de viabilidad persiguen los dos
objetivos siguientes: - Determinar rpidamente la viabilidad de semillas de
especies que normalmente germinan con lentitud o muestran latencia cuando se
le aplican los mtodos de germinacin normales. - Determinar la viabilidad de
muestras que al trmino del ensayo de germinacin presentan un elevado
porcentaje de semillas frescas pero no germinadas o duras. Los mtodos
indirectos:

a) Ensayo (prueba) de corte

El mtodo ms sencillo para determinar la viabilidad es la inspeccin visual

directa de las semillas, previamente abiertas con un cuchillo o escalpelo. Si el
endosperma tiene un color normal y el embrin est bien desarrollado, la semilla
tiene muchas posibilidades de germinar. Este ensayo no es muy fiable.

b) Sal de tetrazolio

ste es uno ms de los varios ejemplos de ensayo bioqumico de semillas que

se han ideado. En este mtodo se tien de rojo las clulas vivas mediante la
reduccin de una sal de tetrazolio, que es incolora. Consiste en poner las
semillas en remojo en agua durante unas 20 horas, despus cortar o perforar la
cubierta seminal para facilitar la entrada de la solucin acuosa de tetrazolio (TZ),
al 1 por ciento, y despus dejar las semillas en ese lquido, enun lugar oscuro,
durante 48 horas.

c) Ensayo de excisin (extirpacin) del embrin

Mtodo que consiste en dejar las semillas en remojo durante 1 4 das y despus
excindir los embriones de las semillas y colocarlas en papel filtro humedecido,
en placas Petri. Se colocan despus a la luz, con una temperatura constante de
20 C. Todos los das se examina el estado de los embriones. Segn la especie
y el lote de que se trate, el ensayo puede concluir en unos pocos das,
prolongarse hasta un mximo de 14 das o mantenerse hasta que es posible
diferenciar claramente los embriones viables de los no viables. Se cuentan las
semillas que, aunque sin crecer normalmente, se han desarrollado algo, se han
mantenido firmes y han conservado su color durante el perodo del ensayo.

d) Mtodos radiogrficos
Hace ms de 70 aos que se utilizaron por primera vez las radiografas para
determinar la calidad de las semillas. Este mtodo permite detectar las semillas
vacas y las estructuras seminales que presentan dao mecnico o un desarrollo
interno anormal, medir el grosor de la cubierta y evaluar la viabilidad de la semilla
cuando se combina con un agente de contraste. Es un mtodo til, y es probable
que desempee un papel cada vez ms importante en el ensayo de semillas.
Los primeros modelos de aparatos de rayos X eran costosos, pero los modelos
recientes, especialmente los japoneses, son mucho ms baratos.
a.5 Flotacin en agua En un envase de liquito remojar las semillas, por varias
horas (desentendiendo del tipo de semilla), las que floran son semillas venas y
las que se sumergen al fondo del vaso son semillas viables.
 III. MATERIALES Y MTODOS

3.1. Materiales

Semillas de especies forestales, estufa, balanza analtica, esptulas,

Cronometro, cuaderno o libreta de apuntes

3.2. Procedimiento (metodologa)

Para pureza varietal (PV)

Los frutos cosechados conteniendo las semillas, llevar al laboratorio de

Certificacin de Semillas Forestales.
Tomar un nmero determinado de frutos, dependiendo de la especie (En este
caso se tomaron 100 frutos de cedro lila).
Extraer las semillas del fruto o legumbre y separar, las impurezas (semillas
vanas, semillas mal formadas y otros cuerpos diferentes) de las semillas
buenas.
Pesar por separado las impurezas (semillas vanas, semillas mal formadas y
otros cuerpos diferentes) de las semillas buenas.
Determinar el nmero total de semillas (buenas y vanas) por fruto y por
Kilogramo
Determinar el nmero de semillas buenas por fruto y tambin semillas vanas
por fruto
Con la formula determinar el porcentaje de pureza varietal (PV)

Peso de la muestra peso de impurezas

PV = x100
Peso de la muestra
 El peso de la muestra viene a ser el peso de las semillas buenas ms las
impurezas

Para el contenido de Humedad (CH)

En estufa:

Seleccionar 2 muestras de 5 gramos cada una incluyendo impurezas

Colocar en la estufa a 103 2 C por un periodo de 17 horas 1 hora
Al trmino de este periodo colocar las semillas en una desecadora para que
se enfre durante 30 40 minutos, y despus volver a pesar.
Luego determinar el CH con la formula siguiente.

Peso inicial peso final

CH = x100
Peso inicial

Cabe indicar que el peso inicial es el peso fresco, y el peso final es el peso
obtenido despus de secado en estufa.

Para el coeficiente de variacin (desviacin tpica)

Pesar 8 muestras, cada una de 100 semillas o 100 gramos dependiendo del
tamao de las semillas
Aplicando la formula determinar la desviacin tpica

n( X 2 ) ( X ) 2
DT =
n(n 1)

Luego determinar el coeficiente de variacin: este resultado debe ser menor que
Desviacin Tpica
4: CV = x100
Media de los pesos

Determinar el peso de 1000 semillas: = media de los pesos x 10

Determinar el N de semillas por gramo de semilla pura

 1000
N S/g =
peso de 1000 semillas

Determinar el N de semillas por Kg de semilla pura

1000 x1000
N S/Kg =
peso de 1000 semillas

IV. RESULTADOS

a) Calculo de la Pureza Varietal (PV)

Peso de la muestra peso de impurezas

PV = x100
Peso de la muestra

55.0434 g 4.2071g
PV = x100
55.0434 g

PV = 92.36 %

b) Calculo de contenido de Humedad (CH)

Peso inicial peso final

CH = x100
Peso inicial

10 g 7.03 g
CH = x100
10 g

CH = 29.7 %
Cuadro 1: peso de semillas de cedro lila con 8 repeticiones.

REPETICIONES R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 R8 Suma Promedio

N de Semillas 100 100 100 100 100 100 100 100 800
Peso (g) 1,83 1,82 1,8 1,84 1,76 1,75 1,80 1,83 14,52 1,8

Desviacin tpica.

n( X 2 ) ( X ) 2
DT = = 0.0334 g
n(n 1)

Coeficiente de variacin.

0.0334
CV = x100 = 1.85 %
1.80

Peso de 1000 semillas = 1.80 x 10 = 18 g

Numero de semillas por gramo de semilla pura

1000
N S/g = = 55.56 g
18

Nmero de semillas por kg de semilla pura

1000 x1000
N S/kg = = 55555.56 g
18